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BIO 141c

Unidad 2
CLASE 6

Replicación del
DNA
Modelo Semiconservativo

Watson y Crick propusieron: las


dos hebras de la molécula
parental se separan, y cada una
funciona como molde para la
síntesis de una nueva hebra
complementaria
La replicación del DNA es semiconservativa
Horquilla de Replicación

Molécula de DNA parental


3’ 5’
5’ 3’
3’

5’
Hebra líder
DNApol

DNApol

DNApol
Dirección de 3’ 5’
movimiento
5’
DNApol 3’
3’
5’
DNApol
3’ Hebra retardada

5’
Adición de nucleótidos por la DNA polimerasa
3’
5’ O

Hebra recién O
O- P O Hebra molde
sintetizada O
O
CH2
2HC
T A O
O
O- P O
O
O
O
O- P O
O O
CH2
2HC O G C
Enlace
O
O- P O

fosfodiéster 3’ O
O
OH
O O O-
O- P O O P O O P O
O- O- O O
CH2
2HC
C G O
O O O
O- P O
H 20 + O- P O O P O
O- O-
O
O
OH

3’ O
CH2
A
O

5’
La energía de hidrólisis del ATP activa al
desoxinucleótido entrante
La DNA polimerasa (DNA pol) interactúa con la
hebra molde
El Origen de replicación
Donde se forma la Horquilla de replicación:
Origen de replicación : abertura local de la hélice de DNA

Burbuja de replicación:

3’ 5’

5’ 3’

Bacteria : UNA burbuja de replicación

Eucariontes: Cientos de burbujas de replicación


La burbuja de replicación
Separación de las hebras:
3’
Hebra líder
5’
Proteínas de unión
a hebra simple

Helicasa

3’ 5’
Dirección de movimiento
Topoisomerasa
5’
3’ 3’
5’

3’

5’ Hebra retardada
La Helicasa
• Separación de las hebras:
1. Helicasa: enzima que cataliza el desenrrollamiento
y la separación de la doble hebra de DNA. (Cortando
puentes de hidrógeno)

2. Single-Strand Binding Proteins (SSB): Son


proteínas que se unen a simple hebra de DNA y ayudan
a mantener las hebras separadas.
Efecto de desenrollamiento
en una cuerda fija por un extremo

Las enzimas

*Girasa
(Procariontes)

*Topoisomerasa
(Eucariontes)

liberan la tensión)

Enzima que relaja la molécula de DNA permitiendo


una libre rotación de la simple hebra.
Replicación del DNA
• Iniciación:
1. partidores de RNA : antes de la
síntesis de la hebra de DNA se debe
sintetizar un pequeño RNA partidor, al
cual la DNA Polimerasa adiciona los
nuevos nucleótidos
2. Primasa: enzima que polimeriza
(sintetiza) el RNA Partidor.
RNA partidor
3’
Hebra líder
5’
Primasa Proteínas de unión
a hebra simple
DNApol
3’OH Helicasa
DNApol
DNApol 5’

Topoisomerasa
5’
3’ 3’
5’

3’

5’ Hebra retardada
Síntesis de las nuevas hebras de DNA
Una vez sintetizado el RNA partidor, DNA Polimerasa cataliza la
síntesis de la nueva hebra de DNA en dirección 5’ a 3’.

3’
Hebra líder
5’
Proteínas de unión
5’ a hebra simple

DNApol Helicasa

DNApol
3’
Topoisomerasa

Hebra retardada
5’
La DNA POLIMERASA
¿Como se replica la hebra retardada?

Hebra retardada: también se sintetiza en


dirección 5’ a 3’ pero en forma discontínua
en contra de la dirección de la hebra líder

Fragmento de DNA
Okazaki Polimerasa
RNA
Partidor
5’ 3’

3’ 5’
Hebra retardada
¿Como se replica la hebra retardada?

Fragmentos
3’ de Okazaki : serie de fragmentos de DNA
5’
cortos en la hebra retardada

Hebra líder

Fragmentos de Okazaki 5’
Topoisomerasa

3’ Primasa
5’ DNApol

3’ Primasa
DNApol Hebra retardada

5’
La unión de dos fragmentos de Okazaki
DNA ligasa:
Enzima que cataliza la unión covalente de los
extremos 3’ y 5’ de dos hebras de DNA.
corta

y reparación de ADN
RESUMEN
Revisión y corrección

El apareamiento inicial de las bases es normalmente


corregido por la DNA polimerasa.
Probabilidad de error por la DNA polimerasa
1 / 10.000 nt

Y si se equivoca !!!.......

Reparación por escisión :


1. El segmento de DNA dañado es escindido por una
enzima reparadora (existen alrededor de 50 enzimas
reparadoras).

2.La DNA polimerasa reemplaza los nucleótidos


retirados y la DNA ligasa une los extremos 5’ y 3’.
Reparación del ADN durante la
Replicación
Mal apareamiento
de bases Corte de la hebra
MUTACIONES
¿Qué ocurre en eucariontes en los
extremos de los cromosomas?

RNA PARTIDOR
ESPACIO DEJADO
POR LA DEGRADACION
DEL PARTIDOR
Solución: LA TELOMERASA
otra DNA polimerasa

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