MEMBRANA PLASMATICA Y PROTEINAS DE MEMBRANAS

BOLILLA 5 DE BIOLOGICAS Jonatan M. Vazquez

MEMBRANA PLASMATICA Las membranas estn compuestas por una doble capa lipidica Los lpidos se disuelven en solventes organicos pero no en agua. Estos son molculas ANFIPATICAS, esto quiere decir que presentan una cabeza polar (hidrofilica) y unas colas no polares (hidrofobicas). Las colas son lpidos de distinta longitud. Una de ellas es saturada (no tiene doble enlaces) y la otra insaturada (presenta dobles enlaces cis que pueden variar en numero). El doble enlace genera una leve curvatura de la cola, esto permite obtener distintas longitudes y capacidades de empaquetamiento de las mismas. COLINA FOSFATO GLICEROL CABEZA POLAR

AC GRASO

AC GRASO

COLA NO POLAR

PROPIEDADES DE LAS MEMBRANAS o Auto ensamblaje: cuando entra en contacto con el agua puede formar MICELAS o MEMBRANAS. o Auto sellado o Fluidez o Asimetra con respecto al lado interna y externo Fluidez de bicapa lipdica Depende de: Componentes Temperatura del medio Un trmino muy importante que debemos comprender es el de transicin de fase. Se denomina asi al pasaje de la membrana desde el estado lquido al cristalino rgido. Cuantos ms dobles enlaces tenga o ms corta sea la cadena, ms dificultoso ser lograr la transicin de fase. Clulas como las bacterianas utilizan esta propiedad al momento de encontrarse bajas temperaturas, donde sintetizan ms cidos grasos y comas dobles enlaces para mantener la fluidez. Componentes 1)Colesterol: Este es un componente muy importante de todas las membranas eucariotas animales, no as en las vegetales donde hay ergosterol. Se ubica prximo a la cabeza polar de los fosfolpidos, de esta manera le saca fluidez al extremo proximal de la cabeza polar y da ms fluidez al extremo distal de las colas. En sntesis, del colesterol hace MENOS PERMEABLE a las pequeas molculas solubles, y MAS RIGIDA a la membrana. Esto a

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priori parecera malo pero el colesterol adems INHIBE LAS POSIBLES TRANSICIONES DE FASE. 2)Fosfolpidos: Se encuentran en gran nmero y variedad en las clulas, siendo los ms comunes fosfatidilcolina, fosfatidilserina, fosfatidiletanolamida y esfingomielina. Todos los anteriores a pH fisiolgico tienen carga neutra, menos fosfatidilserina que tiene carga negativa. Otro fosfolpidos importantes son los fosfolpidos de inositol, pero estos no como constituyentes membrana sino como segundos mensajeros. 3)Glucolpidos: Se encuentran exclusivamente en la parte externa de la membrana. Son importantes proveedores de la asimetra Los glucolpidos ms complejos son los ganglisidos. stos estn formados por oligosacridos con uno o ms residuos de acido silico, lo que les proporciona una carga neta negativa. Los ganglisidos son ms abundantes en las clulas nerviosas. Aunque tambin se encuentran en el resto de las clulas. Hasta el momento se conocen ms de 40 tipos diferentes de ganglisidos. An se desconocen las funciones de los glucolpidos. En el caso de los ganglisidos, se supone que por tener carga negativa, tendran propiedades electroqumicas (sobre todo teniendo en cuenta su gran localizacin en las clulas nerviosas). Asimetra Las cabezas polares que presentan como fosfolpidos a la fosfatidilcolina y esfingomielina se encuentran en la mitad exterior de la membrana, mientras que la que tiene fosfatidiletanolamida y fosfatidilserina interna. Esto es muy importante, especialmente la fosfatidilserina, ya qu como dijimos anteriormente a pH fisiolgico tiene carga negativa, generando as una diferencia de carga entre la dos mano capas. (esta asimetra es necesaria entre otras cosas para producir la activacin de la protein quinasa C, que usa la carga negativa de la fosfatidilserina para activarse). La asimetra se produce de la sntesis misma de la membrana plasmtica, siendo la misma en el retculo endo plasmtico.

PROTEINAS DE MEMBRANA TIPOS DE PROTEINAS DE MEMBRANAS 1) Transmembrana: estas pueden presentar dos disposiciones: hlice o lmina . 2) Protena unida covalentemente a un lpido de membrana, o a un grupo prenil de la monocapa citoplasmtica. 3) Protena unida a travs de un oligosacrido a un fosfolpido (como el fosfatidilinositol) en la monocapa no citoplasmtica poco frecuente 4) Proteina unida en forma no covalente a otras protenas unidas a la membrana. Las protenas pueden a su vez dividirse en: Integrales de membrana: son aquellos que estn fuertemente unidas a la membrana por algn lpido interno o que son transmembrana, osea los tipos 1 y2 de la lista anterior.

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Perifricas de membrana: son aquellos que se encuentran levemente unidas a la membrana y pueden ser separadas fcilmente por entre otros mtodos el sometimiento a ph extremos. La unin de la protena a la membrana es muy importante porque entre otras cosas determina su funcin. Por ejemplo, las tras membranas actan como canal o como transmisores de seal, ya que al atravesar la membrana pueden actuar a ambos lado de la misma. PROTEINAS TRANSMEMBRANA Tienen el nico sentido dentro la membrana, osea que no se las puede ubicar de cualquier manera la (el extremo interno v all y no en el exterior) Pas nico o mltiple La parte de la protena que atraviesa la membrana se encuentra compuesta por aminocidos hidrofbicos. Las uniones peptdicas son en s mismas polares. Dentro de la doble capa forman uniones de puente de hidrgeno. Estas se maximizan si la protena adopta la forma de hlice . Tambin la forma de barril tambin es redituable para las protenas tras membrana. Las protenas deben atravesar el completamente la membrana, porque para que se formen la mayor cantidad posible de puentes de hidrgeno debe tener una estructura sin curvatura en el interior de la membrana. La mayora de las protenas tras membranas encuentran glucosiladas. Una protena tras membrana se puede purificar y solubilizar con la utilizacin de detergentes como por ejemplo el SDS (dodecil sulfato sdico). Estos eliminan los lpidos y se unan a las protenas desnaturalizndolas. Algunas protenas luego con la utilizacin de triton x-100 pueden volver a naturalizarse Eritrocitos fantasmas Para la mayora de los experimentos con membranas biolgicas se utiliz la membrana de los eritrocitos, por ser estos carentes de organlas y de ncleo, con lo cual la membrana resultante de los experimentos corresponde en su totalidad a la membrana plasmtica. El proceso que se sigue para utilizar la membrana es someter a los eritrocitos a una solucin hipertnica. En esta se deshidratan hasta producir la rotura de la membrana en un solo punto. Como resultante se obtiene la membrana. sta puede adoptar las formas de vesculas al derecho o al revs, dependiendo de las condiciones inicas utilizadas en el proceso de rotura. De las protenas de membrana de los eritrocitos, tres son las ms importantes: ESPECTRINA, GLUCOFORINA y BANDA 3.

Protena perifrica a membrana. Principal componente del citoesqueleto. Se encuentra del lado citoplasmtica. Es delgada y flexible. Para unirse la membrana depende de la ANQUIRINA (protena intra citoplasmtica) que se une al dominio de espectrina como al de la protena tras membrana BANDA 3. Por lo tanto anquirina sirve de unin a la espectrina.

ESPECTRINA

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Tambin pueden irse a la membrana por medio de la protena BANDA 4.1 y de la ACTINA. Est tambin a su vez a permiten la unin al dominio citoplasmtica de la protena BANDA 3 y de la GLUCOFORINA (ambas son las principales protena transmembrana). El citoesqueleto tambin est presente en la que esas clulas no eritrocticas, slo que es ms complejo. Hay gran cantidad de filamentos lactina, y tambin protenas similares a la espectrina, banda 4.1 y la glucoforina.

GLUCOFORINA

Protena transmembrana de paso nico Su cola amino terminal se encuentran el exterior, y est unida a carbohidratos. El extremo carboxilo excit plasmtico. La parte intra membrana es una hlice Exclusiva de los eritrocitos

BANDA 3
Protena transmembrana de paso mltiple Tiene importancia crucial en el transporte de CO2 por parte de los eritrocitos. Lo hace permitiendo libre pasaje de HCO3 intercambindose con CL. Recordemos que para eliminar el CO2 se le suma agua y se obtiene HCO3 y un protn.

PORINAS
Tambin son protenas transmembrana, pero que en vez de utilizar hlice , usan barril Es una estructura compleja: es un TRIMERO donde cada monmero forma un barril que atraviesa la membrana y tiene un canal en el centro que contiene agua. Cada BARRIL est formado por 16 cadenas anti paralelas de lmina que se curvan lo suficiente como para formar una estructura cilndrica. El interior tiene cadenas polares, y el exterior, en contacto con el agua, cadenas no polares (hidrofbicas). DIFUSION DE LAS PROTEINAS Pueden ser de dos tipos: 1) ROTACIONAL: como la de los lpidos de membrana. Se mueven girando alrededor de un eje, aprox perpendicular al plano de la bicapa. 2) LATERAL: la llevan a cabo algunas protenas. El movimiento es lateral a travs de la membrana. Para medir la velocidad de difusin lateral se puede usar una tcnica llamada FRAP (Fluorescencia despus de foto blanqueamiento). El procedimiento es el siguiente: se marca la protena en cuestin con un anticuerpo marcado fluorescentemente. Luego una parte del ligando (el anticuerpo) se blanquea con el uso de un lser, y se mide el tiempo aproximado en que tardan las protenas marcadas en llegar hasta donde estn las blanqueadas. AGRUPAMIENTO DE PORTEINAS Y LIPIDOS EN DOMINIOS ESPECIFICOS Las protenas y los lpidos no flotan libremente por la membrana.

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Algunas clulas limitan protenas y lpidos en dominios especficos de la membrana. Por ejemplo, las clulas epiteliales de los tbulos de rin y del intestino, permiten la ubicacin de protenas diferentes en la parte apical y basal. La distribucin asimtrica es esencial para la funcin de las protenas. Para el caso de los lpidos solo confinan aquellos pertenecientes a la mono capa externa. La separacin entre los dominios se puede llevar a cabo por: Uniones intracelulares denominadas estrechas o estancas Sin usar uniones intracelulares como en el caso del espermatozoide CUATRO SISTEMAS POR LOS DETERMINADAS PROTEINAS CUALES RESRINGIR LA MOVILIDAD DE

1) Auto ensamblaje de las protenas formando grandes agregados 2) Protena trabada por interacciones, con macromolculas del exterior 3) Protena trabada puede interacciones, con macromolculas del interior 4) Interactuar con protenas de superficie de otras clulas. GLUCOCALIZ Los hidratos de carbono se unen a los lpidos (glucolpidos) y a las protenas (glucoprotena) en la cara externa de la membrana. De hecho la mayora de las protenas y lpidos de la membrana externa presenta una cadena de oligosacridos asociado. Los carbohidratos pueden ser oligosacridos o proteoglucanos integrales de membrana (recordar que los proteoglucanos estn formados por la unin de un oligosacridos a una protena). Los proteoglucanos se encuentran formando parte de la matriz extracelular o tambin anclados a la barrera por protenas transmembrana o mediante un glucosilfosfatidilinositol (GPI). El GLUCOCALIZ es el trmino utilizado para designar la cubierta externa de azcares de la membrana plasmtica. La misma est formada por carbohidratos unidos a las protenas, proteoglucanos unidos o no (matriz extracelular) y los que se encuentran libres en el exterior celular. En definitiva el GLUCOCALIZ puede ser glucoprotenas, glucolpidos o proteoglucanos. Cmo se visualiza de GLUCOCALIZ? Se puede hacer por medio de LECTINAS marcadas fluorescentemente, o por la utilizacin de colorantes como el ROJO DE RUTENIO Para qu sirve el GLUCOCALIZ? Se supona que debido a la gran variedad que presenta los carbohidratos, serviran de reconocimientos celular, aunque hay poca evidencia a un sobre este aspecto. Proteccin contra dao mecnico y qumico Mantener objetos extraos a distancia impidiendo indeseables interacciones protenaprotena. Adhesin clula-clula por medio de lectinas unidas a la membrana plasmtica que reconocen oligosacridos. Por ejemplo: la unin del espermatozoide al ovulo, coagulacin sangunea, recirculacin de linfocitos y respuestas inflamatorias