PATOGENICIDAD DE AISLAMIENTOS MONOSPORICOS DE Isaria fumosorosea NATIVOS DE YUCATAN SOBRE Bemisia tabaci

Mc. Wilberth Chan Cupul

Dr. Esa Ruiz Snchez

I. INTRODUCCIN
La produccin de chiles (Capsicum spp.) en el estado de Yucatn se encuentra alrededor de 900 hectreas anuales y representa el 20% de la superficie total

cultivada con hortalizas.

Principalmente en plantas hortcolas y ornamentales. Es una especie cosmopolita

Altamente resistente a una amplia variedad de productos Qumicos

Posee un ciclo de vida corto, lo que lo hace prolfico

Bemisia tabaci Genn., 1889 (Hemiptera: Aleyrodidae)

Extremadamente polfaga

Es vector de numerosas enfermedades fitopatgenas de etiologa viral. Sobe las hojas secretan mielecilla que produce fumagina el cual inhibe la fotosntesis

Posee una plasticidad gentica por la presencia Los adultos y ninfas se alimentan de la de biotipos (Q-B) succin de sabia
(Mathew, et al., 2011; Zanic et al., 2010)

Alternativa de control
INSECTICIDAS BIOLGICOS O BIOINSECTICIDAS

Hongos entomopatgenos (HE)

VENTAJAS DE USO
Son agentes de control natural de diversos insectos. Requieren condiciones ambientales adecuadas para la infeccin de la plaga y estas pueden ser reguladas en condiciones de invernadero. No promueven la resistencia en los insectos plagas. Es compatible con el uso de otros enemigos naturales. No son contaminantes ambientales y no daan los insectos no blancos por su especificidad.

DESVENTAJAS DE USO
Control menos rpido. Requisitos de aplicacin muchas veces engorrosos para el productor ordinario. Sensibilidad a la baja humedad relativa. Las altas temperaturas y la radiacin UV limitan la accin del bioplaguicidas (microbiano).

No son txicos para los aplicadores

Hongos entomopatgenos para el biocontrol de B. tabaci.

Ms de 20 especies diferentes de hongos ha sido reportados como entomopatgenos de moscas blancas.
Lecanicillium lecanii (Zimmerm.) Zare & W. Gams. L. muscarium (Petch) Zare & W. Gams. L. longisporum (Petch) Zare & W. Gams. Isaria fumosorosea Wize. I. javanica (Frieder. & Bally) Samson & Hywel-Jones. I. farinosa (Holmsk.) Fr. Aschersonia aleyrodis Webber. A. andropogonis P. Henn. Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin. Conidiobolus spp., Entomophthora sp., Zoophthora radicans (Brefeld) Batko.

Se ha considerado uno de los ms especficos para B. tabaci.

ES DE SUMA IMPORTANCIA EN EL MIP El aislamiento adaptadas a ambientales. de cepas nativas las condiciones

Aislar y evaluar aislamientos monospricos a partir de cepas Metarhizium anisopliae (Metchnikoff) Sorokin. polisprico para encontrar cepa ms patognicas con menor variabilidad gentica. (Scorsetti et al., 2008, Chan et al., 2010)

II. OBJETIVO.
Evaluar la patogenicidad de aislamientos monospricos de 4 cepas nativas de Isaria fumosorosea y una

comercial (Pae-sin) en huevos y ninfas de B. tabaci

bajo condiciones de laboratorio.

III. MATERIALES Y MTODOS

Los aislamientos fueron proporcionados por el comit estatal de sanidad vegetal del estado de Yucatn (CESVY).

Nomenclatura de los aislamientos

CEPAS POLISPORICAS If-Tim If-Tiz If-Hal If-Rg Pae-sin HONGO Isaria fumosorosea Isaria fumosorosea Isaria fumosorosea Isaria fumosorosea Isaria fumosorosea HOSPEDANTE Bemisia tabaci Bemisia tabaci Bemisia tabaci Bemisia tabaci ORIGEN Timucuy Tizimin Halcho Zacapa Sinaloa ESTADO-PAS Yucatn-Mxico Yucatn-Mxico Yucatn-Mxico Guatemala Sinaloa-Mxico

Fueron aislados de insectos micosados colectados en campo. Se cultivaron Sabouraud Dextrosa Agar incubados a 27+3 C y 14:10 horas L:O

3.1. Obtencin de los aislamientos monospricos

(Ayala et al., 2005)

B D

A. Medio Sabouraud Dextrosa Agar (SDA), B. Esterilizacin del SDA, C. Solucin de 1x105 esporas mL-1 del aislamiento polisprico, D. Caja de Petri con SDA en capa fina y cuadriculado de 0.5 cm2 al reverso, E. Seleccin y aislamiento del cuadrante con una espora germinada, F. Cultivo monosprico.

3.2. Obtencin de la suspensin de esporas de los monospricos

A A
Aislamiento monosprica

B
10 ml de agua + Tween 80 (0.05%)

Filtrado

E
Diluciones Conteo de esporas

Concentraciones a evaluar 1x104 esporas mL-1 a 1x107 esporas mL-1

3.3. Establecimiento de la colonia de cra de B. tabaci

Bemisia tabaci

Plantas hospederas

Jaula de cra

Colonia libre sin presin de aplicacin de insecticidas

3.4. Obtencin de inmaduros de B. tabaci para los bioensayos dosis-respuesta.

A
Jaula Clip (Muiz y Nombela, 2001)

+
B
Planta hospedera

C
Adultos confinados (24h)

E
Unidad experimental 30 Huevecillos o ninfas Eliminacin de adultos

3.5. Bioensayo dosis-respuesta.

Se evaluaron cuatro Suspensiondes 1x104 esporas mL-1 1x105 esporas mL-1 1x106 esporas mL-1 1x107 esporas mL-1

A
Unidad experimental

C
Ninfas y/o huevecillos (25-30)

Suspensin de esporas

E
D
Aplicacin por Inmersin de hoja Incubacin 27+3 C, 75+8% HR, 16:8 L:O

F
Evaluacin (7 y 12 das en N. y H.)

(Serra et al., 1996; Gindin et al. 2000 )

Diseo experimental

Variables

Completo al azar con cinco Porcentaje (%) de mortalidad tratamientos y cinco replicas c/u, la Concentracin letal media (CL50) unidad experimental consisti en una Tiempo letal medio (TL50) hoja con 30 huevos o 30 ninfas.

Parmetros de Patogenicidad
Deshidratacin Dao cuticular Deformacin Interna

Cambios de coloracin

Micosis

IV. RESULTADOS Y DISCUSIN

Mortalidad en huevos de B. tabaci a 7 dda de 1x107 E mL-1

(28.6-59.1 %)
Lacey y colaboradores (1999) encontr mortalidad < 20% con 1x10 3 E. cm2 Skrobek (2001) report mortalidades entre 33-45% en huevos con M. anisopliae (1x107 E mL-1) B. bassiana caus 8.0% de mortalidad en huevos de B. tabaci con 6x106 E ml-1 (Al-Dhegairi, 2008)

Mortalidad en ninfas del 1er instar de B. tabaci a 12 dda de 1x107 E mL-1

(56.7-81.0%)
Skrobek encontr resultados similares con 80% de mortalidad con una cepa de P. fumosoroseus. Scorsetti y col. (2008) reportaron 76.6% de mortalidad en B. tabaci por efecto de una suspensin de esporas de 1x105 ml-1. La patogenicidad depende de la cepa y especie, p.e. Saito y Sugiyama (2005) encontraron una cepa nativa de P. fumosoroseus de Japn con 98% de mortalidad en B. tabaci aplicando 6x107 E. ml-1.

Concentracin letal media en ninfas de los monospricos evaluados.

Aislamiento Pae-sin M1 If-Tiz M1 Pae-sin M2 If-Hal M1 If-Tiz M2 If-Hal M2 CL50 (E. mL-1) 1.4x105 a 3.2x105 b 4.0x105 b 5.7x105 b 1.3X106 c 1.8x106 c IC al 95% (E. ml-1) 9.4x104-2.1x105 2.3x105-4.3x105 2.9x105-5.4x105 3.9x105-8.3x105 8.7x105-2.4x106 1.1x106-3.0x106 Pendiente 0.36 0.48 0.48 0.41 0.33 0.37 Pr>r <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001

If-Tim M1
If-Tim M2 If-Rg M2 If-Rg M1

2.0x106 c
2.8x106 c 3.3x106 c 7.2x106 c

1.1x106-4.1x106
1.9x106-4.4x106 2.1x106-5.5x106 3.7x106-1.7x106

0.28
0.47 0.42 0.30

<0.0001
<0.0001 <0.0001 <0.0001

Dos santos y Pozo (2003), Reportan una CL50 de 1.3x104 E. mL-1. Saito y Sugiyama (2005) report una CL50 de 1.1x104 E. mL-1 Castellanos y col. (2007) encontraron una CL50 entre 1.1x103-2.5x104 E.mL-1 Con aislamientos colombianos de P. fumosoroseus CATIE (2006) reporta una CL50 ms alta con 2.4x105 E. mL-1.

Tiempo letal medio en ninfas de los monospricos evaluados.

Aislamiento Pa-esin M2 Pa-esin M1 If-Hal M1 If-Tiz M1 TL50 4.69 a 4.94 a 5.08 a 5.39 ab IC al 95% (das) 4.44-4.97 4.65-5.28 4.63-5.66 5.03-5.84 Pendiente 4.02 4.57 3.26 4.00 Pr>r <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001

If-Tiz M2
If-Tim M2 If-Rg M1 If-Hal M2 If-Tim M1 If-Rg M2

5.50 ab
5.53 ab 6.01 ab 6.13 ab 6.08 bc 6.71 bc

5.23-5.97
5.25-5.87 5.54-6.66 5.58-6.90 5.67-6.64 5.54-6.66

3.91
3.78 5.86 2.89 4.46 3.86

<0.0001
<0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001

En otros estudios respecto al TL50 Saito y Sugiyama (2005) 3.8 das

Dos Santos y Pozo

3.04 das

Las condiciones son variables a pesar de ser experimentos en laboratorio. La patogenicidad depende de la cepa de cada especie.

V. CONCLUSIONES
Los monospricos If-Hal M1 e If-Tiz M1 fueron los ms patognicos en huevos y ninfas respectivamente, sin embargo, no difirieron de los monospricos de la cepa comercial Pae-sin. La CL50 en ninfas confirma la patogenicidad del monosprico If-Tiz M1 por presentar uno de los valores ms bajos y similar al CL50 de la cepa Pae-sin. Los TL50 fueron ms altos que en otros estudios, posiblemente se deba a las condiciones de evaluacin. Los aislamientos monospricos nativos If-Hal M1 e If-Tiz M1 de Isaria fumosorosea son promisorios para su empleo en programas de control biolgico de Bemisia tabaci en el estado de Yucatn.

Instituto Tecnolgico de Conkal, Yucatn

Esa Ruiz, Jos Ma. Tun, Agatha Rosado, Basilio Uch, Alfonso Perz.

Comit Estatal de Sanidad Vegetal del Estado de Yucatn

Ricardo Mungua Rosales.

Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa

Por brindar la beca de estudios de Maestra.