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UNIVERSIDAD INTERNACIONAL DE LAS AMERICAS FACULTAD DE FARMACIA LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA PROF: DR.

HONORIO PEREZ ALUMNO: MARIANGEL *** GILBERTO REID S. FECHA: 14 DE OCTUBRE, 2011 Practica N1:

MEDIOS DE CULTIVO
OBJETIVO GENERAL Aprender el uso y el manejo de los medios de cultivo en microbiologa y su aplicacin en el rea de la salud. OBJETIVOS ESPECIFICOS Conocer los diferentes tipos de medios de cultivo. Conocer la clasificacin de los medios de cultivo y que microorganismos pueden crecer en cada uno. Conocer sus cuidados, usos, manipulacin etc

INTRODUCCION

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante. La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes. El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las

bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l. La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan su licuacin. En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes. Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-positivas). La evolucin de los medios de cultivo Podemos decir que la microbiologa empieza su verdadero desarrollo como ciencia en el momento en que se descubre el microscopio y comienza la observacin de los primeros microorganismos, pero es indudable que la puesta a punto de los medios de cultivo y la utilizacin del agar como solidificante, marcan dos importantes puntos de inflexin en su evolucin. La primera noticia de la utilizacin de medios de cultivo nos llega del miclogo Brefeld, que consigui aislar y cultivar esporas de hongos en medios slidos realizados a base de gelatina. Sin embargo este sistema no era adecuado para las bacterias (por su menor tamao) y no fue hasta el ao 1878 cuando Lister populariz un mtodo enfocado al cultivo puro basado en diluciones seriadas en un medio lquido. Koch realiz sus investigaciones utilizando en un primer momento rodajas de patata como soporte nutritivo slido, pero no tard en recurrir al caldo de carne lquido, diseado por Loeffler, al que, en 1881, aadi gelatina, logrando un medio slido transparente ideal para la observacin de la morfologa macroscpica de las colonias microbianas. En el ao 1882 tiene lugar uno de los grandes avances de la microbiologa en relacin con los medios de cultivo: el mdico alemn Walter Hesse introduce el agar-agar (polisacrido extrado de algas rojas) como solidificante. En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas de cristal planas, que se llaman desde entonces placas de Petri, para sustituir a las clsicas bandejas de vidrio cubiertas con campanas que se usaban hasta entonces. MATERIALES Y EQUIPO Laminas de Petri Aplicadores para tomar muestras Incubadora a 37 C *** (el palito para arrastrar) *** (y el otro)

PROCEDIMIENTO 1. DISCUSIN, IDENTIFICAR LOS TIPOS Y CLASIFICACIONES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO. 2. PRACTICA:
A. SE TOMA UNA MUESTRA CON UN APLICADOR ESTERIL B. SE SELECCIONA EL TIPO DE LAMINA DE PETRI A UTILIZAR DEPENDIENDO DEL TIPO DE MICROORGANISMO QUE SE DESEA ESTUDIAR EN EL CULTIVO C. SE ARRASTRA EL APLICADOR EN UN TERCIO DE LA LAMINA D. S E. SE RETULA LA LAMINA Y SE GUARDA EN LA INCUBADORA POR UN TIEMPO APROXIMADO DE 7 DIAS

3. PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS. De las muestras tomadas: a. Muestra tomada del piso del bao del laboratorio.

Observaciones: b. Muestra tomada de los pies.

Observaciones:

c. Muestra tomada de un zapato.

Observaciones: d. Muestra tomada de las manos sin lavar.

Observaciones:

CONCLUSION En esta prctica aprendimos los usos, cuidados, partes y manejo de los medios de cultivo, +++++++

BIBLIOGRAFIA

http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm http://www.danival.org/notasmicro/medioscult/_madre_medios.html

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