Los radicales libres son tomos o grupos de tomos que tienen un electrn(e-) desapareado en capacidad de aparearse, por lo que

son muy reactivos. Estos radicales recorren nuestro organismo intentando robar un electrn de las molculas estables, con el fin de alcanzar su estabilidad electroqumica. Una vez que el radical libre ha conseguido robar el electrn que necesita para aparear su electrn libre, la molcula estable que se lo cede se convierte a su vez en un radical libre, por quedar con un electrn desapareado, inicindose as una verdadera reaccin en cadena que destruye nuestras clulas. La vida biolgica media del radical libre es de microsegundos; pero tiene la capacidad de reaccionar con todo lo que est a su alrededor provocando un gran dao a las molculas y a las membranas celulares. Los radicales libres no son intrnsecamente malos. De hecho, nuestro propio cuerpo los fabrica en cantidades moderadas para luchar contra bacterias y virus. Los radicales libres producidos por el cuerpo para llevar a cabo determinadas funciones son neutralizados fcilmente por nuestro propio sistema. Con este fin, nuestro cuerpo produce unas enzimas (como la catalasa o la dismutasa) que son las encargadas de neutralizarlos. Estas enzimas tienen la capacidad de desarmar los radicales libres sin desestabilizar su propio estado. Las reacciones qumicas de los radicales libres se dan constantemente en las clulas de nuestro cuerpo y son necesarias para la salud. Pero, el proceso debe ser controlado con una adecuada proteccin antioxidante. Un antioxidante es una sustancia capaz de neutralizar la accin oxidante de los radicales libres, liberando electrones en nuestra sangre que son captados por los radicales libres convirtindose en molculas inestables. Las especies reactivas del oxgeno que se producen en las clulas incluyen el perxido de hidrgeno (H2O2), el cido hipocloroso (HClO), y radicales libres tales como el radical oxhidrilo (OH) y el radical superxido (O2).33. El radical del oxhidrilo es particularmente inestable y reacciona rpidamente y de forma no especfica con la mayora de las molculas biolgicas. Esta especie se produce del perxido de hidrgeno en reacciones redox catalizadas por metales como la reaccin de Fenton.34. Estos oxidantes pueden daar las clulas comenzando reacciones qumicas en cadena tales como la peroxidacin de lpidos u oxidando el ADN o protenas.35. Los daos al ADN pueden causar mutaciones y posiblemente cncer si no son revertidos por los mecanismos de reparacin del ADN,36 37 mientras que los daos a las protenas causan la inhibicin de enzimas, la desnaturalizacin y la degradacin de protenas. El estrs oxidativo es causado por un desequilibrio entre la produccin de especies reactivas del oxgeno y la capacidad de un sistema biolgico de detoxificar rpidamente los reactivos intermedios o reparar el dao resultante. 6. Todas las formas de vida mantienen un entorno reductor dentro de sus clulas. Este entorno reductor es preservado por las enzimas que mantienen el estado reducido a travs de un constante aporte de energa metablica. Desbalances en este estado normal redox pueden causar efectos txicos a travs

de la produccin de perxidos y radicales libres que daan a todos los componentes de la clula, incluyendo las protenas, los lpidos y el ADN. El EO se presenta en dos tipos de situaciones: a) Agudas (inflamacin aguda, sepsis, shock sptico), caracterizadas por una activacin intensa de clulas sanguneas, especialmente fagocitos, caso en el que el EO es sistmico y frecuentemente su duracin es limitada. b) Crnicas, asociadas a una continua activacin celular donde el EO suele ser local pero de larga duracin. El estrs oxidativo ha sido asociado a la patognesis de muchas enfermedades humanas, es por ello que el uso de antioxidantes en farmacologa es estudiado de forma intensiva, particularmente como tratamiento para accidentes cerebrovasculares y enfermedades neurodegenerativas. Sin embargo, se desconoce si el estrs oxidativo es la causa o la consecuencia de tales enfermedades. Los antioxidantes son ampliamente utilizados como ingredientes en suplementos dietticos con la esperanza de mantener la salud y de prevenir enfermedades tales como el cncer y la cardiopata isqumica. Un antioxidante es una molcula capaz de retardar o prevenir la oxidacin de otras molculas. La oxidacin es una reaccin qumica de transferencia de electrones de una sustancia a un agente oxidante. Las reacciones de oxidacin pueden producir radicales libres que comienzan reacciones en cadena que daan las clulas. Los antioxidantes terminan estas reacciones quitando intermedios del radical libre e inhiben otras reacciones de oxidacin oxidndose ellos mismos. Debido a esto es que los antioxidantes son a menudo agentes reductores tales como tioles o polifenoles. Dao o estrs oxidativo De manera habitual, el oxgeno se encuentra en su forma ms estable (O2), con los electrones que forman el enlace (p), antienlazante con el mismo espn, es decir, en lo que se conoce como estado triplete, as el oxgeno es poco reactivo con una velocidad de reaccin a temperatura fisiolgica baja; sin embargo por reacciones puramente qumicas, por acciones enzimticas o por efecto de las radiaciones ionizantes, se pueden producir una serie de especies qumicas o sustancias prooxidantes (molculas o radicales libres altamente reactivos) que son capaces de dar lugar a mltiples reacciones con otros compuestos presentes en el organismo, que llegan a producir dao celular. Por lo anteriormente expuesto se comprende que, si bien el oxgeno es imprescindible para el metabolismo y las funciones del organismo, no se deben olvidar los muchos efectos txicos que posee.5-7 El dao o estrs oxidativo se ha definido como la exposicin de la materia viva a diversas fuentes que producen una ruptura del equilibrio que debe existir entre las sustancias o factores prooxidantes y los mecanismos antioxidantes encargados de

eliminar dichas especies qumicas, ya sea por un dficit de estas defensas o por un incremento exagerado de la produccin de especies reactivas del oxgeno. Todo esto trae como consecuencia alteraciones de la relacin estructura-funcin en cualquier rgano, sistema o grupo celular especializado; por lo tanto se reconoce como mecanismo general de dao celular, asociado con la fisiopatologa primaria o la evolucin de un nmero creciente de entidades y sndromes de inters mdico-social, involucrado en la gnesis y en las consecuencias de dichos eventos.8 Radicales libres Desde el punto de vista qumico, los radicales libres son todas aquellas especies qumicas, cargadas o no, que en su estructura atmica presentan un electrn desapareado o impar en el orbital externo que les da una configuracin espacial generadora gran inestabilidad, sealizado por el punto situado a la derecha del smbolo. Poseen una estructura birradiclica, son muy reactivos, tienen una vida media corta, por lo que actan cercano al sitio en que se forman y son difciles de dosificar.9-11 Desde el punto de vista molecular son pequeas molculas ubicuitarias y difusibles que se producen por diferentes mecanismos entre los que se encuentran la cadena respiratoria mitocondrial, la cadena de transporte de electrones a nivel microsomal y en los cloroplastos, y las reacciones de oxidacin, por lo que producen dao celular (oxidativo) al interactuar con las principales biomolculas del organismo. No obstante lo expresado anteriormente, los radicales libres del oxgeno tienen una funcin fisiolgica en el organismo como la de participar en la fagocitosis, favorecen la sntesis de colgeno, y la sntesis de prostaglandinas, activan enzimas de la membrana celular, disminuyen la sntesis de catecolaminas por las glndulas suprarrenales, modifican la biomembrana y favorecen la quimiotaxis. Existe un trmino que incluye a los radicales libres y a otras especies no radiclicas, pero que pueden participar en reacciones que llevan a la elevacin de los agentes prooxidantes y son las especies reactivas del oxgeno (EROS). Las principales especies reactivas del oxgeno o sustancias prooxidantes son:

Radical hidroxilo (HO)+ Perxido de hidrgeno (H2O2) Anin superxido (O2) Oxgeno singlete (1O2) Oxgeno ntrico (NO) Perxido (ROO) Semiquinona (Q) Ozono

Los radicales libres del oxgeno se clasifican de la forma siguiente:

1. Radicales libres inorgnicos o primarios. Se originan por transferencia de electrones sobre el tomo de oxgeno, representan por tanto distintos estados en la reduccin de este y se caracterizan por tener una vida media muy corta; estos son el anin superxido, el radical hidrxilo y el xido ntrico. 2. Radicales libres orgnicos o secundarios. Se pueden originar por la transferencia de un electrn de un radical primario a un tomo de una molcula orgnica o por la reaccin de 2 radicales primarios entre s, poseen una vida media un tanto ms larga que los primarios; los principales tomos de las biomolculas son: carbono, nitrgeno, oxgeno y azufre. 3. Intermediarios estables relacionados con los radicales libres del oxgeno. Aqu se incluye un grupo de especies qumicas que sin ser radicales libres, son generadoras de estas sustancias o resultan de la reduccin o metabolismo de ellas, entre las que estn el oxgeno singlete, el perxido de hidrgeno, el cido hipocloroso, el peroxinitrito, el hidroperxidos orgnicos. Los radicales libres se generan a nivel intracelular y extracelular. Entre las clulas relacionadas con la produccin de radicales libres del oxgeno tenemos los neutrfilos, monocitos, macrfagos, eosinfilos y las clulas endoteliales. Las enzimas oxidantes involucradas son la xantin-oxidasa, la indolamindioxigenasa, la triptofano-dioxigenasa, la mieloperoxidasa, la galactosa oxidasa, la ciclooxigenasa, la lipoxigenasa, la monoamino-oxidasa y la NADPH oxidasa.15,16 Y entre las sustancias y agentes es conocida ampliamente la relacin de los productos cclicos de naturaleza redox como son el paraquat, diquat, alloxano, estreptozozina y doxorubicina, con los radicales libres. Tambin se producen radicales libres por la administracin de paracetamol, tetracloruro de carbono y furosemida; por ltimo no se puede olvidar agentes como el humo de cigarrillos, las radiaciones ionizantes, la luz solar, el shock trmico y las sustancias que oxidan el glutatin (GSH) como fuentes de radicales libres.17-19 Existen algunas circunstancias en que tambin se producen radicales libres como son:

Dieta hipercalrica. Dieta insuficiente en antioxidantes. Procesos inflamatorios y traumatismos. Fenmenos de isquemia y reperfusin. Ejercicio extenuante.

Efecto nocivo de los radicales libres El dao celular producido por las especies reactivas del oxgeno ocurre sobre diferentes macromolculas:

1. Lpidos. Es aqu donde se produce el dao mayor en un proceso que se conoce como peroxidacin lipdica, afecta a las estructuras ricas en cidos grasos poliinsaturados, ya que se altera la permeabilidad de la membrana celular y se produce edema y muerte celular. La peroxidacin lipdica o enranciamiento oxidativo representa una forma de dao hstico que puede ser desencadenado por el oxgeno, el oxgeno singlete, el perxido de hidrgeno y el radical hidroxilo. Los cidos grasos insaturados son componentes esenciales de las membranas celulares, por lo que se cree son importantes para su funcionamiento normal; sin embargo, son vulnerables al ataque oxidativo iniciado por los radicales libres del oxgeno.20-22 Los factores que influyen en la magnitud de la peroxidacin lipdica son: a) La naturaleza cualitativa y cuantitativa del agente inicializador. b) Los contenidos de la membrana en cidos grasos poliinsaturados y su accesibilidad. c) La tensin de oxgeno. d) La presencia de hierro. e) El contenido celular de antioxidantes (betacarotenos, alfatocoferoles, glutatin). f) La activacin de enzimas que pueden hacer terminar la cadena de reaccin como es el caso de la glutatin peroxidasa (GSH-Prx). Una vez que se inicia, el proceso toma forma de cascada, con produccin de radicales libres que lleva a la formacin de perxidos orgnicos y otros productos, a partir de los cidos grasos insaturados; y una vez formados, estos radicales libres son los responsables de los efectos citotxicos.23 2. Protenas. Hay oxidacin de un grupo de aminocidos como fenilalanina, tirosina, histidina y metionina; adems se forman entrecruzamientos de cadenas peptdicas, y por ltimo hay formacin de grupos carbonilos. 3. cido desoxirribonucleico (ADN). Ocurren fenmenos de mutaciones y carcinognesis, hay prdida de expresin o sntesis de una protena por dao a un gen especfico, modificaciones oxidativas de las bases, delecciones, fragmentaciones, interacciones estables ADN-protenas, reordenamientos cromosmicos y desmetilacin de citosinas del ADN que activan genes. El dao se puede realizar por la alteracin (inactivacin/prdida de algunos genes supresores de tumores que pueden conducir a la iniciacin, progresin, o ambas de la carcinognesis). Los genes supresores de tumores pueden ser modificados por un simple cambio en una base crtica de la secuencia del ADN.24-28

Sistemas de defensa antioxidante El sistema de defensa antioxidante est constituido por un grupo de sustancias que al estar presente en concentraciones bajas con respecto al sustrato oxidable,

retrasan o previenen significativamente la oxidacin de este. Como sustrato oxidable se pueden considerar casi todas las molculas orgnicas o inorgnicas que se encuentran en las clulas vivas, como protenas, lpidos, hidratos de carbono y las molculas de ADN.29 Los antioxidantes impiden que otras molculas se unan al oxgeno, al reaccionar-interactuar ms rpido con los radicales libres del oxgeno y las especies reactivas del oxgeno que con el resto de las molculas presentes, en un determinado microambiente -membrana plasmtica, citosol, ncleo o lquido extracelular (tabla 1). La accin del antioxidante es de sacrificio de su propia integridad molecular para evitar alteraciones de molculas -lpidos, protenas, ADN, etc.- funcionalmente vitales o ms importantes.30 Su accin la realizan tanto en medios hidroflicos como hidrofbicos.31 Actan como eliminadoras (Scavengers), con el objetivo de mantener el equilibrio prooxidante/antioxidante a favor de estos ltimos (tabla 2). Los antioxidantes exgenos actan como molculas suicidas, ya que se oxidan al neutralizar al radical libre, por lo que la reposicin de ellos debe ser continua, mediante la ingestin de los nutrientes que los contienen. Tabla 1. Clasificacin de los antioxidantes segn el sitio donde ejercen su accin Intracelular Superxido dismutasa Catalasa Peroxidasa DT-deafarasa GSH Protenas que ligan metales Sistemas proteolticos Vitamina C Membrana Vitamina E Betacarotenos Ubiquinol-10 Extracelular Ceruloplasmina Transferinas Lactoferinas Albminas Haptoglobinas Vitamina C cido rico Vitamina E

Tabla 2. Clasificacin de los antioxidantes, segn origen Origen 1. Exgenos Vitamina E - Neutraliza el oxgeno singlete - Captura radicales libres hidroxilo - Captura O2 - Neutraliza perxidos Vitamina C - Neutraliza el oxgeno singlete - Captura radicales libres de hidroxilo - Captura O2 Accin

- Regenera la forma oxidada de la vitamina E Betacarotenos Flavonoides, Licopenos 2. Endgenos Enzimticos Superxido dismutasa (SOD) Catalasa (CAT) Glutatin peroxidasa (GPx) 3. No enzimticos Glutatin Coenzima Q cido Tioctico Transportadores de metales (transferrina y ceruloplasmina) Barreras fisiolgicas que enfrenta el oxgeno a su paso desde el aire hasta las clulas Cofactor Cobre, sodio, manganeso Hierro Selenio Neutraliza el oxgeno singlete

Caractersticas de las enzimas antioxidantes 1. Catalasa (CAT). Tiene una amplia distribucin en el organismo humano, alta concentracin en hgado y rin, baja concentracin en tejido conectivo y epitelios, prcticamente nula en tejido nervioso y se localiza a nivel celular: mitocondrias, peroxisomas, citosol (eritrocitos); presenta 2 funciones fundamentales: cataltica y peroxidativa y forma parte del sistema antioxidante CAT/SOD que acta en presencia de altas concentraciones de perxido de hidrgeno. 2. Glutatin peroxidasa (GPx). Es una enzima selenio-dependiente, cataliza la reduccin de perxido de hidrgeno a lipoperxido (L-OOH), usa como agente reductor el glutatin reducido (GSH) y se localiza en: citosol (eritrocitos), lisosomas (neutrfilos, macrfagos y otras clulas del sistema inmune). Existen 3 formas de GPx: GPx-c o forma celular, tiene mayor afinidad por el perxido de hidrgeno que por el lipoperxido; GPx p o forma extracelular, presenta afinidad semejante para ambos sutratos; GPxPH, tiene afinidad especfica para los lipoperxidos. Las formas GPx-c y GPx-p no son capaces de utilizar los lipoperxidos. 3. Superxido dismutasa. Su distribucin es amplia en el organismo, est formada por un grupo de enzimas metaloides: Cu-SOD y Zn-SOD que contienen cobre y cinc en su sitio activo y se encuentran en el citosol y en el espacio inter-membranoso mitocondrial; Mn-SOD que contiene manganeso y se localiza en la matriz mitocondrial; Fe-SOD que contiene hierro y se

localiza en el espacio periplasmtico de la E. Coli. Estas enzimas dismutan el oxgeno para formar perxido de hidrgeno y su principal funcin es la proteccin contra el anin superxido.

Indicaciones de los antioxidantes

Antecedentes hereditarios de enfermedad aterosclertica o tumoral. Tabaquismo. Hipertensin arterial. Prevencin primaria de dislipidemia, diabetes, obesidad, sedentarismo, estrs y menopausia. Prevencin secundaria de angina de pecho, afeccin vascular perifrica, enfermedad cerebrovascular, antecedentes de infarto, tcnicas de revascularizacin previas (bypass, angioplastia, terapias trombolticas), cataratas incipientes, displasias mamarias, trasplante de rganos, cncer, infertilidad masculina y enfermedades neurodegenerativas.33

Existen algunas recomendaciones que mejoran la capacidad antioxidante como son:34

Ejercicio regular no extenuante. Supresin del mal hbito de fumar. Evitar dietas hiperproteicas e hipercalricas. Priorizar la ingestin de vegetales en las comidas. Evitar el estrs. Suplementacin con antioxidantes y oligoelementos.35,36 o Vitamina E: 100-400 mg. o Vitamina C: 200-2 000 mg. o Betacarotenos: 2-10 mg. o Selenio: 50-100 mg. o Manganeso: 1,5 mg. o Cobre: 1 mg.