21

3. LIGANTES (6-AMINOPURINAS)

3.1. Consideraes Gerais

A escolha das 6-aminopurinas como ligantes na reao de

complexao com a cisplatina, no foi por acaso, visto que no captulo 1, foi citado a grande importncia, desses compostos como meio de sobrevivncia para o parasita da leishmaniose. Logo a formao dos complexos entre as 6aminopurinas e a cisplatina poder agir nesse protozorio como uma armadilha,
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e possivelmente apresentar uma toxicidade menor do que os frmacos usados contra a leishmaniose atualmente. O captulo 3 tem a finalidade descrever algumas metodologias de sntese e propriedades biolgicas da 6-aminopurinas.

3.2. Anel Purnico

A purina (3) um composto (Figura 1) formado pela unio de dois sistemas heterocclicos aromticos, o anel pirimidnico (1) e o anel imidazlico (2), onde o sistema de numerao segue as regras da IUPAC3.0.

N N (1)

N N H (2)

N
2

N
8

N
3

N 9 H

(3)

Figura 1 Estrutura dos anis heterocclicos O cido rico (4), isolado de pedras de bexiga, no sculo XVIII, foi o primeiro derivado purnico encontrado na natureza. Sua frmula estrutural (Figura 2) foi elucidada por Emilm Fischerm em 1899, iniciando um trabalho intenso no estudo de derivados purnicos3.1 .

22

OH N HO N N OH N H
Figura 2 Estrutura do cido rico. A purina s no encontrada na natureza. Contudo, seus derivados so muito abundantes. Dada a importncia da atividade biolgica3.1 dos compostos purnicos, milhares dessas substncias tm sido sintetizadas. Para um melhor entendimento da estrutura purnica e de seus derivados, tm sido feitos estudos por mtodos tericos e estruturais tais como difrao de raio X, momento dipolar e outros3.2; 3.3. Atravs dessas tcnicas, foi
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observado que a purina e muitos derivados purnicos, tais como as aminopurinas, as hidroxipurinas, e as mercaptopurinas, existem em equilbrio tautomrico (Figura 3) as formas predominantes so aminopurinas (5a), oxipurinas (6b) e tioxopurinas (7b), respectivamente3.4; 3.5.

23

NH2 N N (5.a) N HN N H

NH N N (5.b) N H

OH N N (6.a) N HN N H
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O N N (6.b) N H

SH S N N (7.a) (7.b)
Figura 3 Equilbrio tautomrico de algumas derivados purincos. O conhecimento das formas tautomricas de vrios derivados purincos de especial importncia, por estarem presentes em compostos que apresentam envolvimento atividade destas biolgica3.6;3.7. substncias no Um exemplo interessante, de o de

N HN N H N

N N H

mecanismo

transferncia

informaes genticas durante a replicao do DNA e a transcrio do RNA para sntese de protenas. Esta transferncia depende da interao do par de bases do cido nuclico, onde uma das bases pode ser formada por um sistema purnico. Um pareamento imperfeito de base tautomrica pode conduzir a uma mutao gentica, como pode ser observado melhor na Figura 4. Se a guanina estiver na forma de hidroxipurina, esta pode erroneamente ligar-se com timina, formando o par de bases anormal Timina-Guanina (T-G)

24

(8), ao invs de formar o par de bases correto Citosina Guanina (C-G) (9)
3.8;3.9

.
H N H---O N---H N O---H (8) N N N N N R R N O---H N (9) CH3 H N H---O N---H N N N N R

Figura 4 Estruturas das base anormal e base correta da Guanina. As estruturas da purina (1) e de seus derivados tm sido desenhadas com o hidrognio ligado posio 9 do anel, mas no se deve assumir que esta seja, necessariamente,
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posio

especfica

deste

tomo

em

todas

as

circunstncias. O hidrognio deve, de fato, ocupar diferentes posies no sistema, de acordo com o estado fsico da molcula e o ambiente em que se encontra. A literatura cita como um exemplo a purina no substituda3.10. Esta, na forma cristalina, apresenta-se na forma tautomrica H-7 j em soluo, h equilbrio entre forma H-7 e H-9 e no estado gasoso h predominncia da forma H-9. Estudos sobre anis purnicos demonstraram que estes so capazes de sofrer tanto reaes eletroflicas quanto nucleoflicas, sendo produto

geralmente dependente do estado de polarizao da molcula e do controle cintico ou termodinmico das reaes. Por exemplo, a forma aninica da

purina prontamente atacada por eletrfilos, tais como agentes alquilantes ou glicosilantes, para produzir normalmente os derivados N-9 substitudos. Na forma neutra, o produto pode variar. Se houver apenas um controle cintico, tal como na vinilao da purina, pode haver formao de mistura de produtos N-7 e N-9, mas havendo um controle termodinmico, normalmente obtido o produto N-93.11. Nos casos de Oxo-, tioxo- e aminopurinas, as formas tautomricas livres aumentam a possibilidade de ataque eletroflico em diferentes tomos de nitrognio. Entre vrios exemplos, pode-se citar a alquilao da adenina (10) com brometo de alquila em dimetilacetamida. Esta reao (Figura 5) fornece como produto os derivados 3-alquil (55-66%) (11); 9-alquil (10-14%) (12); e 1alquil (7-13%) (13)3.12.

25

NH2 N N (10) N N H R-Br N

DIMETIL ACETAMIDA

NH N N R Onde R = grupo alquil (11) N H N

NH2 N N (12) N R R N

NH N N N H (13)

Figura 5 Produo de subprodutos decorrentes das formas tautomricas3.12.

No entanto, em soluo aquosa alcalina ou em meio aprtico na presena de uma base como alcxido de sdio, a alquilao (Figura 6) da adenina (10)
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fornece como produto principal a 9- alquilpurina (14) 3.13.

NH2 N N (10) onde R = grupo alquil N N H

R-Y
sol alcalina ou

NH2 N N N (14) N R

meio aprtico com base

Figura 6 Reao seletiva da adenina3.13.

26

Tabela 1 - Atividades biologicas de algumas 6-aminopurinas3.14. Compostos Frmula estrutural Atividades biologicas

6-benzilaminopurina
N

Hormnio vegetal.
N N N N H

ou 6-BAP

6-furfurilaminopurina ou kinet

H N N N O N N H

Hormnio vegetal.

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6-dibutolaminapurina
N

N N N N H

Doenas alrgicas.

A maioria das purinas substitudas, apresentam atividades biolgica, assim, o estudo de rotas sintticas para obteno destes composto muito importante. A seguir sero citadas as rotas mais importantes publicadas na literatura.

3.3. Rotas sintticas para obteno de 6-aminopurinas

A hipoxantina (15) foi utilizada como material de partida por Elion e colaboradores, e a fizeram reagir com pentassulfeto de fsforo em tetralina por 12 horas, a 190 200C (Figura 7), formando a 6-mercaptopurina (16), finalmente convertida em 6-metilmercaptopurina (17) por reao com iodeto de metila em hidrxido de sdio e gua, aps 2 horas a temperatura ambiente. A partir da, a 6- metilmercaptopurina foi aquecida com 3 mols da amina correspodente, a uma temperatura acima de 130C, variando-se o tempo de

27

reao de 12 a 24 horas obtendo a 6-aminopurina correspondente. Este mtodo apresentou bons rendimentos, porm longos tempos de reao3.15;3.16.
OH N N (15) N N H (16)
3 mols de amina P4S10 tetralina/12h 190 - 200C

SH N N N N H
MeI/NaOH H2O/2h/ temp.amb

SMe N N (17) N N H

R N N
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N N H

Figura Colaboradores

7-

Sntese .

de

6-aminopurina

desenvolvida

por

Elion

3.15;3.16

Hishinuma e colaboradores em 1975 desenvolveram um mtodo similar ao citado acima, em que foi usada como matria prima, a 6-

metilmercaptopurina (17) que reagiu com apenas 2 mols de furfurilamina, por 18 horas, a uma temperatura de 140-150C, produzindo a 6-furfurilaminapurina (18) com 93,7% de rendimento (Figura 8). Embora seja uma reao de timo rendimento, apresenta um tempo de reao longo.

SMe

Cl N
Cl2 MeOH/20 min/5C

N N (17)

N N (18)

N N H

N H

Figura 8 - Sntese de 6-furfurilaminopurina desenvolvida por Hishinuma e Colaboradores3.17.

28

O mtodo de Hull ( Figura 9) utilizou como material de partida a 4amino-6-cloro-5-nitropirimidina (19), que reagiu com furfurilamina (18) em dioxano, por 30 minutos, dando a 4-amino-6-furfurilamino-5-nitropiridina (20), aps adio de gua. Este produto foi ento dissolvido em metanol e hidrognio em Raney/nquel, temperatura de refluxo e presso. Aps remoo do catalisador por filtrao, o solvente foi evaporado e a 4,5 diamino6-furfurilaminopirimidina (21), cristalizada em gua. Em seguida, 4,5 diamino-6furfurilaminopirimidina foi aquecida com ortoformiato de etila em anidro actico, temperatura de o poduto, 6-furfurilaminopurina (22), que foi ento recristalizado em lcool, com rendimento de 87,9% (Figura 9) 3.18;3.19.

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Cl N N (19) NO2 + NH2 O (18) NH2

dioxano 30

H N N N (20)

O NO2

NH2

Raney/Ni MeOH/ Refluxo

H N N N (22) N N H

H N N

O NH2

(CH3CO)2O refluxo/ 1h30

N (21)

NH2

Figura 9 - Sntese de furfurilaminopurina desenvolvida por Hull e Colaboradores3.18;3.19. Dois mtodos importantes descritos na literatura3.20, foram

desenvolvidos por Nishimata e colaboradores (Figura 10). Neste dois mtodos foi usado o cido rico (4) como material de partida. No primeiro mtodo, reagiu-se esta matria prima com formamida, formiato de amnio e cloreto de magnsio, obtendo a hipoxantina (15) 5.37. Esta foi clorada e formou-se, ento, a

29

6-cloropurina (23), que por aminolise com benzilamina a 130C durante 23 minutos, produziu a 6BAP (24) com rendimento de 94,6%.

OH N HO N (4) N OH N H
HCONH2 HCO2-NH4 + MgCl2

OH N N (15)
POCl3

N N H

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H N

N N N (24) N H
C6H5CH2NH2

Cl N N (13) N N H

130C/23 min

Figura 10 - Sntese de furfurilaminopurina desenvolvida por nishimata3.20. No segundo mtodo (Figura 11) 3.21, clorou-se diretamente o cido rico (4) na presena de oxicloreto de fsforo, N-N-dimetilanilina e xido de magnsio, obtendo-se o hidrocloreto 2,6,8-tricloropurina (25). Este foi, ento, aminado com benzilamina, dando 2,8-dicloro-6-benzilaminopurina (26), que sofreu hidrogenao para formar a 6-BAP (24), com um rendimento de 69,6%.

30

OH N HO N (4) N OH N H
POCl3 MgO N, N- dimetilanilina

Cl N Cl N (25) N Cl N H

C6H5CH2NH2

hidrogenao

H
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H N N N N H Cl N

N N Cl N (26) N H

(24)

Figura 11 - Sntese de 6-BAP desenvolvida por Nishimata e Colaboradores3.21. Outros dois mtodos foram desenvolvidos por Bullock e colaboradores (Figura 12)3.22. No primeiro mtodo, foi utilizada a 6-cloropurina (23) como matria prima, para reagir com 3 mols da amina correspondente, temperatura de refluxo do metilCellosolve, por um tempo de 1 hora e meia 2 horas, dando um rendimento em torno de 85%.

Cl N N (23) N N H
amina cellosolve

R N N N N H

Figura 12 - Sntese de 6-aminopurina desenvolvida por Bullock e Colaboradores3.22.

31

Para a obteno de 6-cloropurina (23) poderia ser usado o mtodo de Bendich e Coloboradores (Figura 13) consiste em reagir hipoxantina (15) e reagiu esta com oxicloreto de fsforo temperatura de refluxo do solvente N,Ndimetilanilina, por 4 horas e 50 minutos. Ou ainda o mtodo de Noell, que clorou a 6-metilmercaptopurina (17) atravs de cloro gasoso, por 20 minutos, a uma temperatura abaixo de 5C, usando metanol como solvente 3.23.

OH N N (15)
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Cl N N H (17)
POCl3 N,N dimetilanilina 4 h50min

N N

N N H

Figura 13 - Sntese de 6-cloropurina desenvolvida por Bendich e Colaboradores3.23. No segundo mtodo de Bullock e colaboradores3.23 (Figura 14), foi utilizada como matria prima a adenina (10), que reagiu com cloreto de benzola (27) em piridina seca, temperatura de refluxo por 2 horas, para obteno da 6-benzoilaminopurina (28) . Esta , ento, dissolvida em piridina, e ao meio reacional adicionada, sob agitao, uma suspenso de hidreto de ltio alumnio em N-metilmorfolina. Aps 1 hora de refluxo, o solvente destilado presso reduzida, e o slido obtido triturado com uma soluo de hidrxido de sdio 0,1 N e filtrado. A neutralizao do slido forneceu uma mistura de material inicial e produto. A mistura , ento, neutralizada com cido clordrico e filtrada. O material de partida fica no filtrado e o produto na gua me. A gua-me neutralizada e o produto precipitado, obtendo-se a 6BAP (24) com rendimento 31,5%. Com este mtodo obteve-se a 6-

furfurilaminopurina, utilizando o cloreto de furola para reagir com adenina, fornecendo rendimento final de 21,8%. Pode-se ento, observar que este mtodo no vantajoso, pois produzem baixos rendimentos3.25,.

32

Cl NH2 N N (10) N N H
+

O
piridina 2h/ refluxo

H N

O N N N (28) N H

(27)

LiAlH4 a) 1h/ temp. amb b) 2h/refluxo

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H N

N N N (24) N H

Figura 14 Sntese de 6-BAP desenvolvida Colaboradores3.23.

por Bullock e

Seng e colaboradores3.25 ( Figura 15) tambm utilizaram a adenina (10) como material de partida, reagindo-a com benzilamina (29) por 2 horas, temperatura de refluxo, obtendo a 6-BAP (24) .

NH2 N N (10) N N H
+

CH2NH3+ClH
2h/ refluxo

N N N (24) N H

(29)

Figura 15 colaboradores3.25.

Sntese

de

6-BAP

desenvolvida

por

Seng

33

Posteriormente, Misktais3.26 desenvolveu um mtodo (Figura 16) fazendo reagir adenina (10) com lcool benzlico (30) na presena de um catalisador alcalino, tal como benzoato de sdio, a 200-210C, produzindo a 6-BAP (24).

NH2 N N (10) N N H
+

CH2OH H
C6H5CH2ONa 200-210C

N N N (24) N H

(30)

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Figura 16 Sntese de 6-BAP desenvolvida por Misktais3.26. No mtodo de Tatsugi e colaboratores3.27 (Figura 17) partiu-se da adenina (10), e reagiu-se esta com hidrocloreto de benzilamina (30) em benzilamina. Este mtodo tem a desvantagem de obter uma mistura de 6-benzilaminopurina (24) e 6,9-dibenzilaminopurina (32), em diferentes propores dependendo das condies reacionais. Monobenzilaminopurina obtida se a reao ocorrer a 170C, por 8 horas, em atmosfera de nitrognio, com rendimento de 73%.

34

H N

N N N N H (24)

NH2 N N (10) N N H
+

CH2NH2.HCl
C6H5CH2NH2

170C/8 h

180C/48 h

(31) H N

N N N (32) N

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Figura 17 - Sntese de 6-BAP e derivados desenvolvida por Tatsugi e colaboradores3.27. Um mtodo (Figura 18) similar ao de Mikstais foi desenvolvido por Wang e colaboradores3.28, o qual tambm fez reagir a adenina (10) com lcool benzlico (33), porm a reao ocorreu na presena de sdio e polietilenoglicol (PEG600), por 4 horas, temperatura de refluxo, fornecendo a 6-BAP(24) com rendimento de 89,1%

35

NH2 N N (10) N N H
+

CH2OH
Na PEG -60O refluxo/ 4h

H N

N N N (24) N H

(33)

Figura 18- Sntese de 6-BAP desenvolvida por Wang e Colaboratores3.28 . Koeszegi Schriffert e colaboradores
3.29

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partiram da reao de adenina (10)

com lcool benzlico (33), utilizando gua como solvente e uma base como o hidrxido de sdio como catalisador, a temperatura de 228-230C, por 4 a 5 horas, obtendo a 6-BAP (24), com rendimento de 97,6% (Figura 19).

NH2 N N (10) N N H
+

CH2OH
NaOH/H2O 228-230C/4-5h

H N

N N N (24) N H

(33)

Figura 19- Sntese de 6-BAP desenvolvida colaboradores3.2

por Koeszegi Schriffert e