PROVA DE BIOQUMICA

DATA 07/ 07/ 2011.

- AMP: dois fosfatos so adicionados ao AMP para formar o ATP. - Adenilato-ciclase converte ATP em AMPc. Ou seja, uma reao exergnica. - Como ocorre a absoro dos cidos graxos - Colocar lipoprotenas pelo tamanho Quilomicron > Vldl > LDL > HDL

- Saber sobre a fase de pagamento e investimento, qtos ATPs so gerados; 2 ATPs na fase de investimento e 4 ATPs na fase de pagamento; Obs.: Lactose= glicose + galactose - Galactosemia: Defeito em uma das enzimas (aldohexose) responsveis na converso da galactose em glicose. - Quantos ATPs so formados na quebra de molcula de cido graxo? - Em nveis baixos de AcetilCoA, como fica a questo da energia?

GLICONEOGNESE - Importante no jejum prolongado e consume insuficiente de CHO - Ocorre principalmente no fgado e em menor extenso nos rins, a sntese de glicose a partir do piruvato. - A gliconeogenese ocorre a partir de precursores no-glicdicos como lactato, piruvato, glicerol e aminocidos; - Ciclo de Cori: consiste na converso da glicose em lactato, produzido em tecidos musculares durante um perodo de privao de oxignio, seguida da converso do lactato em glicose no fgado; - O oxaloacetato o material de partida para a gliconeogenese, todos os precursores devem ser convertidos em oxaloacetato; - Em baixos nveis de acetil-CoA, a piruvato carboxilase na preferencialmente oxidado no ciclo do cido ctrico; maior parte inativa, e o piruvato

- O oxaloacetato, sintetizado na mitocndria, deve ir at o citosol, onde outras enzimas da gliconeognese esto localizadas; - BIOTINA: A deficincia de biotina rara, porque ela abundante nos alimentos e bactrias no intestino grosso tambm a sintetizam. A clara do ovo contm avidina, uma protena que se liga biotina, dificultando sua absoro. Piruvato carboxilase requer biotina como cofator enzimtico. No stio ativo da Piruvato carboxilase: o CO2 ativado transferido da biotina para o piruvato.

GLICLISE - Na gliclise (6 tomos de carbono) uma molcula de glicose degradada a duas molculas de piruvato contendo 3 carbonos cada. - Fermentao o termo universal da degradao de glicose atravs da gliclise anaerbica; - Na fase preparatria a energia do ATP investida para iniciar ou ativar a molcula de glicose para sua ativao em duas molculas de trs de carbono; - Destinos do piruvato podem ser por trs rotas catablicas: 1. oxidao resultando CO2 e AcetilCoA pelo ciclo do cido ctrico, 2. Fermentao do cido lctico, onde o piruvato reduzido a lactato 3. Fermentao alcolica; 5- Qual converso metablica considerada ser o maior ponto de controle da gliclise? A fosfofrutoquinase o principal stio de controle da gliclise. Hexoquinase (HK), Fosfofrutoquinase (PFK) e Piruvato quinase (PK) so pontos de controle da via. - Fase preparatria: Fosforilao ( adio do grupo fosfato) ex.: ADP ATP A um consumo de 2 ATPs

- Fase de pagamento: Duas molculas de GAP so convertidas em 2 molculas de piruvato e posteriormente convertidas em 4 molculas de ATPs, ou seja com saldo liquido de 2 ATPs Glicose + 2 NAD+ + 2 ADP + 2 Pi 2 piruvato + 2 NADH + 2 ATP + 2 H2O + 4 H+

REGULAO COORDENADA - Msculo: fornecer ATP para a contrao; - Fgado: manter o nvel de glicose constante no sangue; - Cooperao entre gliclise e gliconeognese coordenada; - Uma via est relativamente inativa ao passo que a outra esteja em alta atividade;

Balanceamento Gliclise Glicose + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+ Gliconeognese 2 Piruvato + 4 ATP + 2 GTP + 2 NADH + 4 H2O Glicose + 4 ADP + 2 GDP + 6 Pi + 2 NAD + 2 H+

2 Piruvato + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+ + 2 H2O

CICLO DE KREBS - O piruvato descarboxilado oxidativamente pelo complexo da piruvato desidrogenase, produzindo AcetilCoA, principal combustvel para o ciclo do cido ctrico. Esse complexo enzimtico requer cinco enzimas: tiamina pirofosfato (B1), cido lipico, FAD(B2), NAD +(B3) e coenzima A (B6). O citrato sintetizado a partir do oxaloacetato e acetil-CoA, pela citrato-sintase. Essa enzima alostericamente ativada por ADP e inibida por ATP, NADH, succinil-CoA e derivados do AcilCoaA graxo. O citrato isomerizado a isocitrato pela aconitase. O isocitrato oxidado e descarboxilado pela isocitratodesidrogenase, produzindo -cetoglutarato, alm do CO2 e NADH. A enzima muito semelhante piruvato-desidrogenase e utiliza as mesmas coenzimas. O complexo da -cetoglutarato-desidrogenase ativvado por Clcio e inibido por ATP, GTP, NADH e succinil-CoA. A succinil-CoA clivada pela succinatotiocinase (tambm conhecida succinil-CoA-sintetase), produzindo succinato e GTP. Este um exemplo de fosforilao a nvel do substrato. O succinato oxidado a fumarato pela succinato-desidrogenase, produzindo FADH2. Essa enzima inibida pelo oxaloacetato. O fumarato hidratado a malato pela fumarase e o malato oxidado a oxaloacetato pela malato-desidrogenase produzindo NADH. Trs NADHs, um FADH2 E um GTP (cujo fosfato terminal pode ser transferido ao ADP pela nucleosdeodifosfato-cinase, produzindo ATP) so produzidos por uma volta do ciclo do cido ctrico. A oxidao dos NADHs e do FADH2 pela cadeia transportadora de eltrons produz cerca de 11 ATPs, levando a 12 o nmero total de ATPs produzidos. - o estgio final da oxidao dos combustveis metablicos; - Enzimas do ciclo do Cetoglutaratodesidrogenase, Malatodesidrogenase; cido ctrico: Citratosintase, Aconitase, Isocitrato-desidrogenase, Succinil-CoAsintetase, Succinatodesidrogenase, Fumarase e

- O piruvato derivado da glicose ser convertido em uma molcula de 2 carbonos, o acetil-CoA, mais CO2. - O ciclo do cido ctrico uma rota central para a recuperao de energia a partir de vrios combustveis metablicos, incluindo carboidratos, cidos graxos e aminocidos, que so convertidos a acetil-CoA para a oxidao; - O ciclo uma srie de oito reaes que oxida os grupos acetil do acetil-CoA, formando duas molculas de CO2, de maneira que a energia livre liberada conservada nos compostos reduzidos, NADH e FADH2; - Sntese de Acetil-CoA: Sob condies aerbicas, o piruvato entra na mitocndria juntamente com H+, atravs de uma protena de transporte simporte( uma subst sai e a outra sai), para ser adicionalmente oxidado - O piruvato convertido a acetil-CoA pela piruvato desidrogenase ( um complexo multienzimtico) na presena de NAD+; Complexo Piruvato desidrogenase 3 enzimas com mltiplas cpias: piruvato desidrogenase (E1) dihidrolipoil transacetilase (E2) Centro do complexo dihidrolipoil desidrogenase (E3) 5 coenzimas: TPP tiamina pirofosfato (Tiamina B1)

NAD nicotinamida adenina dinucleotdio (Niacina B3) FAD (Riboflavina B2) coenzima A (cido pantotnico B6) Lipoato - Na sntese da Acetil-coenzima-A cinco coenzimas so necessrias: o pirofosfato de tiamina (TPP), a lipoamida, a coenzima A, o FAD e o NAD+.

- Regulao do ciclo da cido ctrico: Os reguladores mais importantes: Acetil-CoA, Oxaloacetato e NADH.

INTRODUO AO METABOLISMO - Definio: Conjunto de reaes qumicas organizadas, seqenciais e controladas, responsvel por todas as transformaes qumicas em uma determinada clula. - Obj. do metabolismo: - Produzir energia na forma de ATP (adenosina trifosfato) e NADH (nicotinamida adenina dinucleotdeo); - Sintetizar compostos no disponveis atravs da digesto.

BETA-OXIDAO DOS C GRAXOS - 10% dos lipdeos da dieta correspondem ao colesterol, steres de colesterol, fosfolipdeos e cidos graxos livres Fontes de cidos graxos Alimentao Reserva Sntese Digesto Micelas com sais biliares Ao de lipases em triacilgliceris Ressntese de TAGs e formao de quilomcrons ao de lipases de lipoprotenas absoro dos cidos graxos oxidao ou ressntese

 Conservao de energia
Palmitoil-CoA+7CoA+7FAD+7NAD+7H2O 8 Acetil-CoA + 7FADH2 + 7NADH + 7H+

106 ATP Mobilizao de lipdeos A mobilizao da gordura inicia-se pela hidrlise de triacilglicerol dos adipcitos, formando cidos graxos e glicerol: - Primeiro a lipase sensvel a hormnio promove a remoo dos cidos graxos; - Lipases adicionais removem cidos graxos formando glicerol e cidos graxos livres; - Os cidos graxos livres movem-se atravs da membrana celular do adipcito e ligam-se albumina no plasma, que os transportam aos tecidos, onde os cidos graxos se difundem para as clulas e so oxidados para obteno de energia; - O crebro e outros tecidos nervosos, eritrcitos e medula adrenal no utilizam cidos graxos plasmticos para obter energia; - O glicerol transportado at o fgado, onde fosforilado e utilizado novamente; Oxidao de cidos graxos - Aps ter sido capturado pela clula, o cido graxo convertido no derivado CoA tioquinase no citosol, formando a acil CoA graxa H a necessidade de ATP; - Uma vez que a b-oxidao ocorre na matriz mitocondrial, o cido graxo deve ser transportado atravs da MMI por um transportador especfico denominado carnitina; - O cido graxo (acil CoA graxa) transportado por um processo denominado lanadeira da carnitina a CoA no atravessa a membrana; - A b-oxidao compreende o catabolismo de cidos graxos saturados, na qual fragmentos de dois carbonos so sucessivamente removidos da extremidade carboxila da acil CoA graxa, produzindo acetil CoA; - Portanto, a b-oxidao consiste em uma sequncia de 4 reaes que resultam no encurtamento da cadeia de cidos graxos em cada 2 carbonos; - As etapas incluem uma oxidao que produz FADH2 , uma hidratao, uma segunda oxidao que produz NADH e uma clivagem tioltica que libera uma molcula de acetil CoA; - A ltima reao irreversvel; As enzimas da B-oxidao - Acil-CoA desidrogenase - Enoil-CoA hidratase - b-hidroxiacil-CoA desidrogenase - Acil-CoA aciltransferase (tiolase)

 Produo de energia pela oxidao de cidos graxos - Considerando que duas ligaes de alta energia so quebradas devido a reao da tioquinase, a energia total de 129 ATP Sntese de colesterol - Ocorre no citoplasma com enzimas do citoplasma e do retculo endoplasmtico; - Quantidades excessivas de carboidratos e protenas obtidas pela dieta podem ser convertidas em cidos graxos, e armazenados como triacilgliceris; - A sntese de cidos graxos ocorre principalmente no fgado e glndulas mamrias, e em menor grau, no tecido adiposo e no rim; - A primeira etapa na sntese a transferncia de unidades de acetato da acetil CoA mitocondrial, a qual produzida por oxidao do piruvato, ou degradao de cidos graxos, corpos cetnicos ou aminocidos at o citosol, formando acetil CoA citoslico; - O aumento de citrato e ATP favorece a sntese de cidos graxos, desde que esta via necessita de ambos - Esta reao a etapa regulada na sntese de cidos graxos: ela inativada pelos produtos, malonil CoA e palmitoil CoA, e ativada pelo citrato; - Outro mecanismo de regulao a fosforilao reversvel da enzima, que a torna inativa, devido a presena de adrenalina/glucagon; - Sntese de cidos graxos, todos os carbonos vieram do malonil CoA com exceo dos 2 carbonos doados pelo acetil CoA no incio da sntese. RESPOSTAS LIVRO PMELA CHAMPE Fosforilao oxidativa: Treze dos aproximadamente 100 polipeptdeos necessrios para a fosforilao oxidativa so codificadas pelo DNA mitocondrial, incluindo-se que a produo de citocromo c e de coenzima Q, componentes do transporte de eltrons. O oxignio oxida diretamente o FAD. O cianeto inibe o fluxo de eltrons, o bombeamento de prtons e a sntese de ATP; Introduo aos carboidratos O paciente ao se queixar de distenso abdominal e diarria, tambm apresentava sinais de desidratao, temperatura baixa e ingesto de bastante leite. Este quadro clnico mais provavelmente devido a deficincia da enzima lactase, pois os sintomas fsicos sugerem a deficincia em uma enzima responsvel pela degradao dos carboidratos. Os sintomas observados aps a ingesto de derivados do leite sugerem que o paciente deficiente em lactase.

Gliclise As reaes limitantes de velocidade tambm so as reaes irreversveis. As reaes da hexoquinase, da fosfofrutoquinase e da piruvato-cinase so todas irreversveis e so os passos reguladores da gliclise. A converso de glicose em lactato produz dois ATPs, mas no h produo lquida de NADH. A reao catalisada pela fosfofrutocinase a reguladora da via glicoltica, a enzima marca-passo da via gliclise. A reao ativada por frutose-2,6-bifosfato. O msculo em contrao vigorosa mostra um aumento na produo de lactato e uma taxa aumentada. Paciente apresenta sintomas de fraqueza, fadiga, falta de ar e tonturas. Seus nveis de hemoglobina normais, eritrcitos mostravam produo anormalmente baixa. A causa da anemia est mais relacionada com a enzima piruvato-cinase, pois a diminuio na produo de lactato no eritrcito indica um defeito na gliclise.