CROMATOGRAFIA

Histrico
M. TSWEET (1903): Separao de misturas de pigmentos vegetais em colunas recheadas com adsorventes slidos e solventes variados.
t de er petl r eo m i t a de s ur pi ent gm os

CaCO 3

pi ent gm os s epar ados

Cromatografia = kroma [cor] + graph [escrever] (grego)

Adaptado do original: Prof. Fbio Augusto - Unicamp QFL2242 Marina F. M. Tavares

CROMATOGRAFIA
Princpio Bsico
Separao de misturas por interao diferencial dos seus componentes entre uma FASE ESTACIONRIA (lquido ou slido) e uma FASE MVEL (lquido ou gs).

Modalidades e Classificao
Cromatografia Lquida Cromatografia Gasosa (CG)

CROMATOGRAFIA

FM = Lquido

FM = Gs

Slida Em CG a FE pode ser: Lquida

Cromatografia Gs-Slido (CGS)

Cromatografia Gs-Lquido (CGL)

CROMATOGRAFIA GASOSA
Histrico
1940

CGS rudimentar CGL proposta (Martin e Synge) Separao de cidos orgnicos por CGL: primeiro cromatgrafo (Martin e James)

1950

Primeiro equipamento comercial (Griffin & George) Detector por Densidade de Gs (Martin e James) Detector por Ionizao em Chama (McWillian e Dewar) Detector por Captura de Eletrons (Lovelock e Lipsky)

1960

Colunas Capilares (Golay)

Presentemente: Vendas de equipamentos e acessrios para CG nos EUA estimadas em mais de US$ 750.000.000 (1995).

CROMATOGRAFIA GASOSA
Aplicabilidade
Quais misturas podem ser separadas por CG ?

(para uma substncia qualquer poder ser arrastada por um fluxo de um gs ela deve ser dissolver - pelo menos parcialmente nesse gs)

Misturas cujos constituintes sejam

VOLTEIS (=evaporveis)
DE FORMA GERAL: CG aplicvel para separao e anlise de misturas cujos constituintes tenham PONTOS DE EBULIO de at 300oC e que termicamente estveis.

O Cromatgrafo a Gs
1 2 6

5 3
1 - Reservatrio de Gs e Controles de Vazo / Presso. 2 - Injetor (Vaporizador) de Amostra. 3 - Coluna Cromatogrfica e Forno da Coluna. 4 - Detector. 5 - Eletrnica de Tratamento (Amplificao) de Sinal. 6 - Registro de Sinal (Registrador ou Computador). Observao: em vermelho: temperatura controlada

INSTRUMENTAO
Gs de Arraste
Fase Mvel em CG: NO interage com a amostra - apenas a carrega atravs da coluna. Assim usualmente referida como GS DE ARRASTE

Requisitos:
INERTE No deve reagir com a amostra, fase estacionria ou superfcies do instrumento.

PURO Deve ser isento de impurezas que possam degradar a fase estacionria.
Impurezas tpicas em gases e seus efeitos:

H2O, O2 hidrocarbonetos

oxida / hidroliza algumas FE incompatveis com DCE rudo no sinal de DIC

INSTRUMENTAO
Gs de Arraste

Requisitos:
CUSTO Gases de altssima pureza podem ser muito caros.
CUSTO

C A B

A = 99,995 % (4.5) B = 99,999 % (5.0) C = 99,9999 % (6.0)

PUREZA

COMPATVEL COM DETECTOR Cada detector demanda um gs de arraste especfico para melhor funcionamento.
Seleo de Gases de Arraste em Funo do Detector:

DCT DIC DCE

He , H2 N 2 , H2 N2 (SS), Ar + 5% CH4

Alimentao de Gs de Arraste
Componentes necessrios linha de gs:
controladores de vazo / presso de gs dispositivos para purificao de gs (traps) 3 4 2 1 5 1 - Cilindro de Gs 2 - Regulador de Presso Primrio 3 - Traps para eliminar impurezas do gs 4 - Regulador de Presso Secundrio 5 - Regulador de Vazo (Controlador Diferencial de Fluxo) 6 - Medidor de Vazo (Rotmetro) Nota: Tubos e Conexes: Ao Inox ou Cobre 6

INSTRUMENTAO

Dispositivos de Injeo de Amostra

Os dispositivos para injeo (INJETORES ou VAPORIZADORES) devem prover meios de introduo INSTANTNEA da amostra na coluna cromatogrfica
Injeo instantnea: t=0

INSTRUMENTAO

t=x Injeo lenta: t=0

t=x

Injetor on-column Convencional

1 2 3 4

INSTRUMENTAO

1 - Septo (silicone) 2 - Alimentao de gs de arraste) 3 - Bloco metlico aquecido 4 - Ponta da coluna cromatogrfica

Injeo on-column de lquidos

INSTRUMENTAO

1 - Ponta da agulha da microseringa introduzida no incio da coluna. 2 - Amostra injetada e vaporizada instantneamente no incio da coluna. 3 - Plug de vapor de amostra forado pelo gs de arraste a fluir pela coluna.

INSTRUMENTAO
Parmetros de Injeo
TEMPERATURA DO INJETOR Deve ser suficientemente elevada para que a amostra vaporize-se imediatamente, mas sem decomposio Regra Geral: Tinj = 50oC acima da temperatura de ebulio do componente menos voltil VOLUME INJETADO Depende do tipo de coluna e do estado fsico da amostra
COLUNA
empacotada = 3,2 mm (1/4) capilar = 0,25 mm Amostras Lquidas
0,2 L ... 20 L 0,01 L ... 3 L

Amostras Gasosas
0,1 ml ... 50 mL 0,001 ml ... 0,1 mL

Slidos: convencionalmente se dissolve em um solvente adequado e injeta-se a soluo

Microsseringas para Injeo

LQUIDOS Capacidades tpicas: 1 L, 5 L e 10 L
Microseringa de 10 L:
mbolo agulha (inox 316)

INSTRUMENTAO

corpo (pirex)

Microseringa de 1 L (seo ampliada):

corpo agulha

guia mbolo (fio de ao soldado ao guia)

Colunas: Definies Bsicas

INSTRUMENTAO

EMPACOTADA = 3 a 6 mm L = 0,5 m a 5 m
Recheada com slido pulverizado (FE slida ou FE lquida depositada sobre as partculas do recheio)

CAPILAR = 0,1 a 0,5 mm L = 5 m a 100 m

Paredes internas recobertas com um filme fino (frao de m) de FE lquida ou slida

INSTRUMENTAO
Temperatura da Coluna
Alm da interao com a FE, o tempo que um analito demora para percorrer a coluna depende de sua PRESSO DE VAPOR (p0). Estrutura qumica do analito Temperatura da coluna

p0 = f

Temperatura da coluna

Presso de vapor

Velocidade de migrao

ANALITO ELUI MAIS RAPIDAMENTE (MENOR RETENO)

INSTRUMENTAO
Temperatura da Coluna

CONTROLE CONFIVEL DA TEMPERATURA DA COLUNA ESSENCIAL PARA OBTER BOA SEPARAO EM CG

TEMPERATURA DA COLUNA

INSTRUMENTAO
Forno da Coluna
Caractersticas Desejveis de um Forno: AMPLA FAIXA DE TEMPERATURA DE USO Pelo menos de Tambiente at 400oC. Sistemas criognicos (T < Tambiente) podem ser necessrios em casos especiais. TEMPERATURA INDEPENDENTE DOS DEMAIS MDULOS No deve ser afetado pela temperatura do injetor e detector. TEMPERATURA UNIFORME EM SEU INTERIOR Sistemas de ventilao interna muito eficientes para manter a temperatura homognea em todo forno.

INSTRUMENTAO
Forno da Coluna
Caractersticas Desejveis de um Forno: FCIL ACESSO COLUNA A operao de troca de coluna pode ser frequente. AQUECIMENTO E ESFRIAMENTO RPIDO Importante tanto em anlises de rotina e durante o desenvolvimento de metodologias analticas novas.

TEMPERATURA ESTVEL E REPRODUTVEL

A temperatura deve ser mantida com exatido e preciso de 0,1C. Em cromatgrafos modernos (depois de 1980), o controle de temperatura do forno totalmente operado por microprocessadores.

Programao Linear de Temperatura

Misturas complexas (constituintes com volatilidades muito diferentes) separadas ISOTERMICAMENTE: TCOL BAIXA:
- Componentes mais volteis so separados - Componentes menos volteis demoram a eluir, saindo como picos mal definidos

INSTRUMENTAO

TCOL ALTA:
- Componentes mais volteis no so separados - Componentes menos volteis eluem mais rapidamente

Programao Linear de Temperatura

A temperatura do forno pode ser variada linearmente durante a separao: Consegue-se boa separao dos componentes da amostra em menor tempo

INSTRUMENTAO

Parmetros de uma programao de temperatura: TEMPERATURA

TINI Temperatura Inicial TFIM Temperatura Final tINI Tempo Isotrmico Inicial tFIM Tempo Final do Programa R Velocidade de Aquecimento

TFIM R TINI tINI TEMPO tFIM

Programao Linear de Temperatura

Possveis problemas associados PLT:
VARIAES DE VAZO DO GS DE ARRASTE

INSTRUMENTAO

A viscosidade de um gs aumenta com a temperatura. viscosidade vazo

Devido ao aumento de volatilizao de FE lquida

DERIVA (DRIFT) NA LINHA DE BASE

INSTRUMENTAO
Detectores
Dispositivos que examinam continuamente o material eluido, gerando sinal quando da passagem de substncias que no o gs de arraste

Grfico Sinal x Tempo = CROMATOGRAMA Idealmente: cada substncia separada aparece como um PICO no cromatograma.

INSTRUMENTAO
Detectores
Mais Importantes:
DETECTOR POR CONDUTIVIDADE TRMICA (DCT OU

TCD) Variao da condutividade trmica do gs de arraste.

DETECTOR POR IONIZAO EM CHAMA (DIC

FID) ons gerados durante a queima dos eluatos em uma chama de H2 + ar.
OU DETECTOR POR CAPTURA DE ELTRONS

ECD) Supresso de corrente causada pela absoro de eltrons por eluatos altamente eletroflicos. REGISTRO DE SINAL
Registradores XY

(DCE OU

ANALGICO

Integradores Computadores

DIGITAL

Tempo de Reteno Ajustado, tR O parmetro diretamente mensurvel de reteno de um analito o TEMPO DE RETENO AJUSTADO, tR: tR tR = tR - tM
SINAL

TEORIA BSICA

tM
TEMPO tR = Tempo de Reteno (tempo decorrido entre a injeo e o pice do pico cromatogrfico) tM = Tempo de Reteno do Composto No-Retido (tempo mnimo para um composto que no interaja com a FE atravesse a coluna) tR = Tempo de Reteno Ajustado (tempo mdio que as molculas do analito passam sorvidas na FE)

Volume de Reteno Ajustado, VR Embora no diretamente mensurvel, o parmetro fundamental de reteno o VOLUME DE RETENO AJUSTADO, VR:
vazo do gs de arraste

TEORIA BSICA

tR

tR

tM

Constante de Distribuio, KC
Coluna cromatogrfica: srie de estgios independentes onde acontece o equilbrio entre o analito dissolvido na fase estacionria e no gs de arraste:

TEORIA BSICA

Ocorre um quase-equilbrio entre o analito sorvido na FE e dissolvido no gs de arraste.

AS

TEORIA BSICA
Fator de Reteno, k
Exprimindo o equilbrio em termos da MASSA do analito em cada fase, ao invs da concentrao:

FATOR DE RETENO, k: razo entre as massas de analito contidas na FE (Ws) e gs de arraste (WM) RAZO DE FASES, : razo entre volumes de FE e gs de arraste na coluna

WS WM VM VS

O fator de reteno k depende da constante termodinmica de distribuio KC e da razo de fases da coluna

TEORIA BSICA Razo de Fases,

Depende das DIMENSES da coluna:
rC = raio da coluna L = comprimento da coluna

df = espessura do filme de FE

TEORIA BSICA
Relaes entre VR, KC e

VR pode ser definido em funo de KC e :

VR depende diretamente da constante de distribuio do soluto entre a FE e o gs de arraste e das dimenses da coluna. Outra combinao possvel:

possvel estimar tanto o fator de reteno quanto a constante de distribuio a partir do cromatograma

TEORIA BSICA
Eficincia de Sistemas Cromatogrficos
A migrao um analito pela coluna provoca inevitavelmente o alargamento da sua banda:

TEMPO

Efeitos do alargamento excessivo de picos: Picos mais largos e Separao deficiente de analitos com retenes menos intensos = menor detectabilidade prximas.

EFICINCIA Capacidade de eluio com o mnimo de disperso do analito.

TEORIA BSICA
Quantificao da Eficincia
Supondo a coluna cromatogrfica como uma srie de estgios separados onde ocorre o equilbrio entre o analito, a FE e o gs de arraste:

Cada estgio de equilbrio chamado de PRATO TERICO

O nmero de pratos tericos de uma coluna (N) pode ser calculado por:

tR wb

Coluna mais eficiente

TEORIA BSICA
Quantificao da Eficincia
ALTURA EQUIVALENTE A UM PRATO TERICO (H) Tamanho de cada estgio de equilbrio
(L = comprimento da coluna)

Valores tpicos de H e N:
dC 0.10 0.25 0.32 0.32 0.32 0.32 0.53 0.53 2.16 2.16 df 0.25 0.25 0.32 0.50 1.00 5.00 1.00 5.00 10% 5% H 0.081 0.156 0.200 0.228 0.294 0.435 0.426 0.683 0.549 0.500 N 370370 192308 150000 131579 102041 68966 70423 43924 3643 4000

Capilares, L = 30 m

Empacotadas, L = 2 m

Valores de H para colunas capilares e empacotadas so prximos, mas como L para capilares MUITO maior tipicamente elas so mais eficientes

TEORIA BSICA
Otimizao da Eficincia
A altura equivalente a um prato torico funo da velocidade linear mdia do gs de arraste u:
O valor de H pode ser minimizado otimizandose a vazo de gs de arraste

H
HMIN uMAX

Relaes algbricas entre H e u:

- Colunas Empacotadas: Equao de van Deemter

(A, B, C = constantes)
- Colunas Capilares: Equao de Golay

(B, CM, CS = constantes)

FASES ESTACIONRIAS
Conceitos Gerais
LQUIDOS Depositados sobre a superfcie de: slidos porosos inertes (colunas empacotadas) ou de tubos finos de materiais inertes (colunas capilares)
FE lquida SUPORTE Slido inerte poroso Tubo capilar de material inerte

Para minimizar a perda de FE lquida por volatilizao, normalmente ela :

Entrecruzada: as cadeias polimricas so quimicamente ligadas entre si

Quimicamente ligadas: as cadeias polimricas so presas ao suporte por ligaes qumicas

SLIDOS Colunas recheadas com material

finamente granulado (empacotadas) ou depositado sobre a superfcie interna do tubo (capilar)

FASES ESTACIONRIAS
Caractersticas de uma FE ideal
SELETIVA Deve interagir diferencialmente
com os componentes da amostra.

FE Seletiva: separao adequada dos constituintes da amostra

FE pouco Seletiva: m resoluo mesmo com coluna de boa eficincia

Regra geral: a FE deve ter caractersticas tanto quanto possvel prximas das dos solutos a serem separados (polar, apolar, aromtico ...)

FASES ESTACIONRIAS
Caractersticas de uma FE ideal
AMPLA FAIXA DE TEMPERATURAS DE USO Maior flexibilidade na otimizao
da separao.

BOA ESTABILIDADE QUMICA E TRMICA Maior durabilidade da coluna,

no reage com componentes da amostra

POUCO VISCOSA Colunas mais

eficientes (menor resistncia transferncia do analito entre fases)

DISPONVEL EM ELEVADO GRAU DE PUREZA Colunas reprodutveis; ausncia

de picos fantasma nos cromatogramas.

FASES ESTACIONRIAS
FE Slidas: Adsoro
O fenmemo fsico-qumico responsvel pela interao analito + FE slida a ADSORO

A adsoro ocorre na interface entre o gs de arraste e a FE slida Slidos com grandes reas superficiais (partculas finas, poros) ADSORO Solutos polares Slidos com grande nmero de stios ativos (hidroxilas, pares de eletrons...)

FASES ESTACIONRIAS
FE Slidas
Caractersticas Gerais:
- Slidos finamente granulados (dimetros de partculas tpicos de 105 m a 420 m). - Grandes reas superficiais (at 102 m2/g).

Mais usados:
Polmeros Porosos Porapak (copolmero estireno-divinilbenzeno), Tenax (polixido de difenileno) Slidos Inorgnicos Carboplot, Carboxen (carves ativos grafitizados), Alumina, Peneira Molecular (argila microporosa)
- Separao de gases fixos - Compostos leves - Sries homlogas

Principais Aplicaes:

GASES DE REFINARIA Coluna:Carboxen-1000 60-80 mesh; 15 x 1/8 TCOL: 35oC a 225oC / 20oC. min-1 Gs de Arraste: He @ 30 ml.min-1 Detector: TCD

FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
POLIGLICIS Muito polares; sensveis a
umidade e oxidao; ainda muito importantes. Principal: Polietilenoglicol (nomes comerciais: Carbowax, DB-Wax, Supelcowax, HP-Wax, etc.) Estrutura Qumica: H

O CH2 CH2

OH n

AMINAS ALIFTICAS Coluna:4 % Carbowax 20M s/ Carbopack B + 0,8% KOH Gs de Arraste: N2 @ 20 mL.min-1 TCOL: 200oC (isotrmico) Detector: FID Amostra: 0,01 L da mistura de aminas

FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
Maior parte das aplicaes em CG moderna Quatro grandes grupos estruturais:

PARAFINAS Apolares; alta inrcia qumica;

praticamente abandonadas. Principais: esqualano (C30H62), Apiezon (graxas para vcuo).

POLISTERES steres de dilcoois com dicidos. Polares; altamente sensveis a umidade e oxidao; uso em declnio. Principais: DEGS, EGA, EGS.

STERES METLICOS DE CIDOS GRAXOS Coluna:5%DEGS-PS s/ Supelcoport 100/120 mesh; 6 x 1/8 TCOL: 200oC (isotrmico) Gs de Arraste: N2 @ 20 ml.min-1 Detector: FID Amostra: 0,5 L de soluo em clorofrmio contendo 0,5 g de cada ster

FASES ESTACIONRIAS
FE Lquidas: Absoro
O fenmemo fsico-qumico responsvel pela interao analito + FE lquida a ABSORO

A absoro ocorre no interior do filme de FE lquida (fenmeno INTRAfacial) Filmes espessos de FE lquida Grande superfcie lquida exposta ao gs de arraste Interao forte entre a FE lquida e o analito (grande solubilidade)

ABSORO

FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
SILICONES (polisiloxanas) As FE mais empregadas em CG. Cobrem ampla faixa de polaridades e propriedades qumicas diversas.
CH3 H3C Si CH3 R1 O Si R2 CH3 O Si CH3 n CH3

R1, R2 = qualquer radical orgnico

- Ligao Si-O extremamente estvel = elevada estabilidade trmica e qumica das FE.

- Silicones so fabricados em larga escala para diversas aplicaes = minimizao de custo do produto + tecnologia de produo e purificao largamente estudada e conhecida.

- Praticamente qualquer radical orgnico ou inorgnico pode ser ligado cadeia polimrica = FE ajustveis a separaes especficas + facilidade de imobilizao por entrecruzamento e ligao qumica a suportes

FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
FE derivadas de polidimetilsiloxano (PDMS) por substituio de -CH3 por radicais orgnicos, em ordem crescente aproximada de polaridade:
Substituintes
carborano ? fenil 5 % cianopropil 7% fenil 50 % trifluoropropil 50% cianopropil 50% cianopropil 100% fenil 7% fenil 50% -

Nomes Comerciais
SE-30 OV-1 OV-101 SP-2100 Dexsil 300GC SE-52 SE-54 OV-3 OV-5 OV-73 OV-1701 SPB-7 CP-Sil 19CB OV-17 SP-2250 HP-50+ SPB-50 OV-210 QF-1 OV-225 SP-2300 CP-Sil 43CB SP-2340 SP-2330 Silar-9 CP

Observaes
mais apolares da srie pouco seletivas similar a PDMS estvel at > 400oC pouco polar moderadamente polar moderadamente polar retm aromticos moderadamente polar retm compostos carbonlicos polar retem doadores de eltrons altamente polar

Diferenas entre FE de composio similar provenientes de fornecedores diferentes: pureza, viscosidade.

FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
Separao de pesticidas - FE = 100 % PDMS
1 - TCNB 2 - Dichloram 3 - Lindano 4 - PCNB 5 - Pentacloroanilina 6 - Ronilano 7 - Antor 8 - pp-DDE 9 - Rovral 10 - Cypermetrin 11 - Decametrin

17 min

Coluna: CP-Sil 5 (25 m x 0,32 mm x 0,12 m) TCOL:195oC (6,5 min) / 195oC a 275oC (10oC.min-1) Gs de Arraste: He @ 35 cm.min-1 Detector: FID Amostra: 2L de soluo dos pesticidas on-column

FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
Separao de piridinas - FE = 100 % CNpropilsilicone
1 - piridina 2 - 2-metilpiridina 3 - 2,6-dimetilpiridina 4 - 2-etilpiridina 5 - 3-metilpiridina 6 - 4-metilpiridina

Coluna: CP-Sil 43CB (10 m x 0,10 mm x 0,2 m) TCOL:110oC (isotrmico) Gs de Arraste: N2 @ 16 cm.min-1 Detector: FID Amostra: 0,1L de soluo 1-2% das piridinas em 3-metilpiridina

3 min

FASES ESTACIONRIAS
Famlias de FE Lquidas
Separao de fenis - FE = fenilmetilsilicones

50% Ph 50% Me

5% Ph 95% Me

FASES ESTACIONRIAS
FE Quirais
Separao de ismeros ticos: PRODUTOS BIOLGICOS Distino entre produtos de origem sinttica e natural (natural = normalmente substncias oticamente puras; sinttico = muitas vezes so misturas racmicas).

FRMACOS Em muitos frmacos apenas um dos

ismeros ticos tm atividade farmacolgica. Propriedades fsico-qumicas de ismeros ticos so MUITO SIMILARES

FE convencionais no interagem diferencialmente com ismeros ticos

Separao de misturas de ismeros ticos s possvel com FE oticamente ativas =

FE Quirais

FASES ESTACIONRIAS
FE Quirais
FE oticamente ativas mais importantes:
CH3 O Si CH3 CH3 O CH3 Si CH2

Derivados de aminocidos: Misturas de compostos formadores de pontes de hidrognio.

n
C

CH3 NH C CH3 H CH3

CH O C O N H

C*

CH CH3 CH3

Chiralsil-Val

CH3 O Si CH3 O

CH3 Si CH2 CH2 O Ni O C3F7

Organometlicos: Separao de enantimeros formadores de complexos.

/2

Chiralsil-Metal

FASES ESTACIONRIAS
FE Quirais
Derivados de ciclodextrinas alquiladas:
-ciclodextrina:
oligosacardeo cclico quiral

Chiralsil-Dex

- Introduzidas em 1983 - Quando ligadas a cadeias de polisiloxano: uso extremamente favorvel como FE lquida (viscosidade baixa, estabilidade ...) - Podem ser quimicamente imobilizadas nas colunas - Colunas disponveis comercialmente

FASES ESTACIONRIAS
FE Quirais: Aplicaes
leo essencial artificial de limo: separao de terpenos primrios

1 - (+/-) -pineno 2 - sabineno 3 - (+/-) -pineno 4 - (+/-) limoneno

Coluna: Rt-DEXsm (30 m x 0.32 mm x 0.25 m) TCOL: 1 min a 40C / 2C min-1 / 3 min a 200C Gs de Arraste: H2 @ 80 cm.min-1 Detector: FID

FASES ESTACIONRIAS
FE Quirais: Aplicaes
Aroma de bergamota: distino entre aroma natural e artificial

leo essencial natural

Essncia artificial

Coluna: Rt-DEXse (30 m x 0.32 mm x 0.25 m) TCOL: 1 min a 40C / 4C min-1 / 200C Gs de Arraste: He @ 80 cm.min-1 Detector: MS

FASES ESTACIONRIAS
FE Quirais: Aplicaes
Anfetaminas: resoluo dos ismeros

Coluna: Rt-DEXcst (30 m x 0.25 mm x 0.25 m) TCOL: 1 min a 120C / 1,5C min-1 / 3 min A 175C Gs de Arraste: He @ 25 cm.min-1 Detector: MS

COLUNAS EMPACOTADAS
Definies Bsicas
Tubo de material inerte recheado com FE slida granulada ou FE lquida depositada sobre suporte slido.
ao inox vidro pirex nquel TEFLON MESH dp 177 - 250 m 149 - 177 m 125 - 149 m

MATERIAL DO TUBO

= 3 mm a 6 mm L = 0,5 m a 5 m

Granulometria do recheio

60 - 80 mesh 80 - 100 mesh 100 - 120 mesh

Eficincia maximizada com: - Diminuio de dC - Diminuio de dp - Recheio regular

Limitados pela resistncia passagem de gs de arraste

COLUNAS EMPACOTADAS
FE Lquidas: Suporte
A FE lquida deve ser disposta sobre um SUPORTE slido
rea superficial entre 0,5 e 10 m2.g-1 microporos regulares (~ 1 m) NO interagir com a amostra boa resistncia mecnica

Uso quase universal: TERRA

DIATOMCEA

secagem calcinao

Esqueletos fsseis (SiO2 + xidos metlicos) de algas microscpicas

fuso com soda lavagem com cido silanizao

Chromosorb Anachrom Supelcoport ...

COLUNAS EMPACOTADAS
FE Lquidas: Suporte
Chromosorb - caractersticas gerais Chromosorb P Rseo, muito ativo. Chromosorb W Branco, mais inerte que o P. Chromosorb G Similar ao W, maior resistncia mecnica
Ordem crescente de inrcia
Densidade Aparente Tamanho de Poro rea Superficial

NOME
Chromosorb P Chromosorb W Chromosorb G

m 2 .g -1

g.ml

-1

4,0 1,0 0,5

0,47 0,24 0,58

0,4 - 2 8-9 -

Tratamentos especiais: AW Lavado com cido, para remoo de metais NAW Sem lavagem com cido HP ou DMCS ou HDMS Silanizados (menor adsoro)

% Mx. de FE

30 15 5

COLUNAS EMPACOTADAS
FE Lquidas: Carga de FE
df = f (% FE no recheio)
Maior eficincia ( d f = N) Menor sangria da FE com temperatura programada Separaes rpidas e em temperaturas menores

% FE
Maiores volumes de amostra Melhor blindagem dos stios adsortivos do suporte Melhor reprodutibilidade no preparo do recheio

TIPICAMENTE % FE = 1 % a 30 % do recheio

COLUNAS CAPILARES
Definies Bsicas
Tubo fino de material inerte com FE lquida ou slida depositada sobre as paredes internas. MATERIAL DO TUBO
slica fundida vidro pirex ao inox Nylon Silcosteel

= 0,1 mm a 0,5 mm L=5m a 100 m

Colunas de slica so revestidas externamente com camada de polmero (poliimida) para aumentar resistncia mecnica e qumica

Colunas Capilares x Empacotadas:

CAPILARES L= N Colunas mais eficientes FC = 1 ... 10 mL.min-1 Controle de vazo mais difcil Vi Dispositivos especiais de injeo

Famlias de Colunas Capilares :

WCOT (Wall coated open tube) FE liquida deposida (ligada //

entrecruzada) sobre as paredes internas.

PLOT (Porous layer open tube) Camada de FE slida presa s

paredes internas

SCOT (Support coated open tube) Predes internas revestidas

com material de recheio similar ao das colunas empacotadas

COLUNAS CAPILARES
Dimetro Interno dC
=

Eficincia

Valores comuns: 0,10 mm 0,25 mm 0,32 mm 0,53 mm

1
1

Colunas de altssima eficincia (amostras complexas, Fast GC); capacidade volumtrica limitada de processamento de amostra Dimetros mais comuns; capacidade volumtrica limitada de amostra requer dispositivos especiais de injeo Colunas megabore: menor eficincia, mas maior capacidade de processamento permite uso de injetores convencionais

COLUNAS CAPILARES
Fast GC: Colunas Capilares Finas
Alm de colunas finas: necessrio controle acurado de vazo (controle eletrnico de presso) e altas velocidades de aquecimento da coluna. Destilao simulada de leo diesel:

Coluna: HP-1 (1 m x 0.10 mm x 0.40 m) TCOL: 35C / 40C min-1 / 0,75 min A 310C Gs de Arraste: He @ 90 ml.min-1 Detector: FID

COLUNAS CAPILARES
Colunas Capilares: Injeo
Baixa capacidade de processamento de amostra (sub-microlitro)

Injeo direta com microseringa muito difcil !!!

Injetores com diviso (splitters) Sistema

pneumtico despreza frao da amostra injetada

1 2 3 5 4
1 - Septo; 2 - Entrada de gs de arraste; 3 - Liner (misturador); 4 - Coluna Capilar 5 - Purga de gs de arraste; 6 - Vlvula de controle de purga.

6
- Menor sensibilidade (boa parte da amostra desprezada) - Diviso da amostra raramente uniforme (frao purgada dos constituintes menos volteis sempre menor) - Ajuste da razo de diviso mais uma fonte de erros