UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARING

CENTRO DE CINCIAS EXATAS DEPARTAMENTO DE QUMICA

PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM QUMICA

AVALIAO DA UTILIZAO DE DIFERENTES LIGANTES PARA A DETERMINAO DE ALUMNIO POR VOLTAMETRIA ADSORTIVA DE REDISSOLUO CATDICA EM AMOSTRAS DE PLANTAS MEDICINAIS

Dissertao apresentada por Ldia Brizola Santos Soares ao Programa de Ps-Graduao em Qumica do Departamento de Qumica do Centro de Cincias Exatas da Universidade Estadual de Maring como parte dos requisitos para a obteno do ttulo de Mestre em Qumica

MARING, SETEMBRO/2008

FUNDAO UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MARING CENTRO DE CINCIAS EXATAS PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM QUMICA
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Ldia Brizola Santos Soares

Avaliao da utilizao de diferentes ligantes para a determinao de Alumnio por Voltametria Adsortiva de Redissoluo Catdica em amostras de plantas medicinais

Maring Setembro, 2008.

Ldia Brizola Santos Soares

Avaliao da utilizao de diferentes ligantes para a determinao de Alumnio por Voltametria Adsortiva de Redissoluo Catdica em amostras de plantas medicinais

Dissertao apresentada ao programa de Ps-Graduao em Qumica,

Universidade Estadual de Maring, como requisito parcial para a obteno do grau de mestre em Qumica.

Maring Setembro, 2008.

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Dados Internacionais de Catalogao-na-Publicao (CIP) (Biblioteca Central - UEM, Maring PR., Brasil)
S676a Soares, Ldia Brizola Santos Avaliao da utilizao de diferentes ligantes para a determinao de alumnio por voltametria adsortiva de redissoluo catdica em amostras de plantas medicinais / Ldia Brizola Santos Soares. -Maring : [s.n.], 2008. 91 f. : il. color. Orientador : Prof. Dr. Nilson Evelzio de Souza. Dissertao (mestrado) - Universidade Estadual de Maring, Programa de Ps-Graduao em Qumica, 2008. 1. Desenvolvimento de mtodo analtico. 2. Alumnio. 3. Plantas medicinais. 4. Voltametria adsortiva de redissoluo catdica. 5. Alizarina. 6. 8-Hidroxiquinolina. 7. Anlise de traos. I. Universidade Estadual de Maring. Programa de PsGraduao em Qumica. II. Ttulo.

CDD 21.ed. 543.0871

 minha me Divanir, ao meu pai Wanderlei, meu irmo Lucas e ao meu esposo Alexssandro

pelo amor, apoio, carinho e confiana que possibilitaram mais essa vitria. Amo vocs!!!!!

Ofereo

Ao meu filho Danilo, que mesmo to pequenino me proporciona tanta alegria.

Dedico

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AGRADECIMENTOS
A Deus, pela fora e pela coragem, que foram essenciais para que eu pudesse alcanar meus objetivos. Ao professor Dr. Nilson Evelzio de Souza pela compreenso e orientao. Ao professor Dr. Edivaldo Egea Garcia pela co-orientao, apoio, amizade e interesse com que acompanhou o desenvolvimento deste trabalho. Ao Programa de Ps-Graduao em Qumica, aos professores e funcionrios pelas oportunidades e facilidades concedidas realizao deste trabalho. Aos amigos e colegas de trabalho do Laboratrio de guas e Alimentos - UEM, Flavianny, Janana, Viviane, Ariovaldo, Andr, Ayrton, pela agradvel convivncia e pela amizade. Aos meus queridos amigos, Eunice, Maxinia, Aline, Daniel, Fernando, Ronian, Leila, Simone, Paulo, Cntia, Rosimri, Soldomar, Raquel, Marcela, Juliana, ngela, Cristiana, Jacqueline, Shirani, Adriano, pela amizade, oraes e compreenso em todo o momento. A toda minha famlia, em especial aos meus tios Nadabe e Jania, por nos incluir em suas oraes dirias. A todas as pessoas que, de uma forma direta ou indireta, contriburam para a realizao deste trabalho.

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NDICE
Resumo Abstract ndice de Tabelas ndice de Figuras Lista de abreviaturas 1. Introduo 2. Objetivo 3. Reviso Bibliogrfica 3.1. Plantas Medicinais e Fitoterpicos 3.2. Contaminantes 3.2.1. Elementos-trao 3.2.2. Alumnio 3.2.3. Alumnio em plantas 3.2.4. Toxicidade do Alumnio para o homem 3.3. Reagentes orgnicos quelantes 3.4. Mtodos Voltamtricos 3.4.1. Fundamentos 3.4.2 Voltametria de Pulso Diferencial 3.4.3. Voltametria de Redissoluo 3.5. Mtodos Instrumentais 4. Parte experimental 4.1. Materiais e Mtodos 7 8 9 10 11 16 22 23 7 31 15 34 34 38 41 46 46 48 50 54 59 59

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4.2. Reagentes e Materiais 4.3. Otimizao dos parmetros voltamtricos 4.4. Anlise quantitativa de Al nas amostras por ACSV 4.5. Validao do mtodo ACSV 5. Resultados e Discusso 5.1. Voltametria adsortiva de Redissoluo Catdica 5.2. Estudos voltamtricos para os complexos Al-VAS e Al-8-Hidroxiquinolina 5.2.1. Efeito da concentrao do eletrlito suporte 5.2.2. Efeito do pH do eletrlito suporte 5.2.3. Capacidade de adsoro e eletroatividade 5.2.4. Efeito da concentrao do ligante 5.2.5. Efeito do potencial de acumulao 5.2.6. Efeito do tempo de acumulao 5.2.7. Efeito do tempo de equilbrio (repouso) 5.2.8. Efeito da amplitude de pulso 5.2.9. Efeito da velocidade de varredura 5.2.10. Faixa de linearidade da Curva de Calibrao 5.2.11. Estudos de Interferncia 5.3. Aplicao em amostras reais 5.3.1. Preparo da amostra 5.4. Validao dos mtodos 5.4.1. Comparao de Mtodos 6. Concluses 7. Referncias Bibliogrficas -6-

60 61 61 62 63 63 63 63 64 65 66 68 70 71 73 75 76 79 84 84 94 94 96 97

RESUMO

Estabeleceram-se duas metodologias analticas por voltametria adsortiva de redissoluo catdica para a determinao de alumnio em amostras de plantas medicinais. Foi avaliada a utilizao do Vermelho de alizarina S (VAS) e 8-Hidroxiquinolina (8HQ) como agentes quelantes para a determinao de alumnio por voltametria adsortiva de redissoluo catdica. As medidas voltamtricas foram realizadas em pregando o eletrodo de gota pendente de mercrio como eletrodo de trabalho e os de carbono vtreo e Ag/AgCl, KCl sat. como eletrodos auxiliar e de referncia, respectivamente. Para o estudo utilizando VAS como ligante, a prconcentrao do complexo foi realizada em -0,300 V por 40 s. A varredura catdica, empregando a tcnica de pulso diferencial (E = 0,100 V), foi realizada a 25 mV s-1 . Para o estudo utilizando 8HQ como ligante, a pr-concentrao do complexo foi realizada em 0,300 V por 10 s. A varredura catdica, empregando a tcnica de pulso diferencial (E = 0,050 V), foi realizada a 50 mV s-1 . A abertura das amostras (0,5 g) foi realizada por via seca (10 h a 450C). O resduo foi dissolvido em soluo de cido clordrico 5% (v v-1). As amostras analisadas foram Ch Verde (Camellia sinensis), Senne (Senna alexandrina), Carqueja (Baccharis genistelloides), Valeriana (Valeriana officinalis) e Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana). Os mtodos voltamtricos foram validados mediante comparao dos resultados obtidos pelos mesmos com um mtodo de referncia, a espectrometria de absoro atmica em chama. A matria orgnica um importante interferente na determinao e necessita ser devidamente destruda antes da anlise voltamtrica.

Palavras-chaves: alumnio, plantas medicinais, voltametria adsortiva de redissoluo catdica, alizarina, 8-Hidroxiquinolina.

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ABSTRACT

It was established two analytical methodologies for cathodic adsorptive stripping voltammetry for the determination of aluminum in samples of medicinal plants. The use of the Alizarin Red S (ARS) and 8-Hydroxyquinoline (8HQ) as ligants was evaluated for the determination of aluminum by employing cathodic adsorptive stripping voltammetry. The voltammetric measurements were carried out using a hanging mercury dropping electrode (HMDE) as working electrode and glassy carbon and Ag/AgCl (KCl sat.) as auxiliary and reference electrodes, respectively. For the study using ARS as ligant, the pre-concentration of the complex was accomplished at -0,300 V for 40 s. The cathodic scan, using the differential pulse technique (E = 0,100 V), was made with a scan rate of 25 mV s-1. For the study using 8HQ as ligant, the pre-concentration of the complex was accomplished at 0,300 V for 10 s. The cathodic scan, using the differential pulse technique (E = 0,050 V), was made with a scan rate of 50 mV s-1. The sample preparation was performed by dry ashing of 0,5 g of plant sample (10 h at 450C). The obtained residues were dissolved in 5% v v-1 hydrochloric acid. The analyzed samples were Green Tea (Camellia sinensis), Senne (Alexandrina Senna), Carqueja (Baccharis genistelloides), Valerian (Valeriana officinalis) and Sacred Cscara (Rhamnus purshiana). The voltammetric procedures proposed were validated by comparison of the results obtained with a reference method, the Flame Atomic Absorption Spectrometry. Organic matter was an important interferent in the voltammetric determination and needs to be destroyed before analysis.

Key-words: aluminum, medicinal plants, cathodic adsorptive stripping voltammetry, alizarin, 8-Hydroxyquinoline.

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NDICE DE TABELAS
Tabela 1. Constituintes qumicos e uso comum de plantas medicinais de uso popular.......................................................................................................................... Tabela 2. Alguns mtodos de determinao de elementos.......................................... Tabela 3. Caractersticas analticas dos mtodos propostos........................................ Tabela 4. Concentraes das amostras dos elementos determinados por Espectrometria Absoro Atmica em Chama...................................................................................... Tabela 5: Resultados dos estudos de interferncia para os dois procedimentos propostos...................................................................................................................... Tabela 6: Resultados dos estudos de adio e recuperao para as amostras de plantas medicinais.................................................................................................................... Tabela 7. Concentrao de Al nas amostras de plantas medicinais obtidas pelos procedimentos propostos e por absoro atmica em chama...................................... 78 70 68 63 14 41 63

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NDICE DE FIGURAS
Figura 1. Ch verde - Carmellia Sinensis.............................................................................. Figura 2. Carqueja - Baccharis genistelloides....................................................................... Figura 3. Sene - Cassia angustiflia...................................................................................... Figura 4. Valeriana - Valeriana officinalis............................................................................ 9 10 11 13

Figura 5. Cscara Sagrada - Rhamnus purshiana................................................................... 13 Figura 6. Distribuio relativa das espcies de Al em soluo do solo................................. Figura 7. Formas de complexao do Al com a MOS: (a) pontes de gua; (b) atrao eletrosttica; (c) troca de ligantes; e (d) quelao................................................................... Figura 8. Frmulas estruturais de algumas alizarinas............................................................ Figura 9. Estrutura do VAS em funo da variao de pH.................................................... Figura 10. Estrutura proposta para o complexo Al-VAS....................................................... Figura 11. Frmula estrutural da 8-Hidroxiquinolina............................................................ Figura 12. Estrutura proposta para o complexo Al-8HQ....................................................... Figura 13. Sinal de excitao para polarografia de pulso diferencial.................................... Figura 14. Voltamograma de um experimento de polarografia de pulso diferencial............ Figura 15. a) Voltamograma de pulso diferencial. b) Polarograma de corrente contnua..... Figura 16. (a) Sinal de excitao para determinao de Cd2+ e Cu2+ por redissoluo. (b) Voltamograma de redissoluo............................................................................................... Figura 17. Representao esquemtica do procedimento usado na voltametria adsortiva por redissoluo mostrando as etapas para a acumulao e redissoluo na determinao de um metal M em presena de um ligante L....................................................................... Figura 18. Cela votamtrica de trs eletrodos........................................................................
n+

19

20 27 28 28 29 29 33 33 33

35

37 43

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Figura 19. Efeito da concentrao do eletrlito suporte sobre a corrente de pico para o complexo (a): Al-VAS. (b) complexo Al-8-Hidroxiquinolina............................................... Figura 20. Efeito do pH do eletrlito suporte sobre a corrente de pico para (a): complexo Al-VAS. (b) complexo Al-8HQ.............................................................................................. Figura 21. Voltamograma de redissoluo catdica para: (a) tampo NH3/NH4Cl 0,1 mol L-1, pH = 8,30; (b) alizarina 0,496 mg L-1 + (a); (c) Al3+ 0,199 mg L-1 + (b)......................... Figura 22. Voltamograma de redissoluo catdica para: (a) tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1 pH = 6,80; (b) 8-hidroxiquinolina 7,43 mg L-1 + (a); (c) Al3+ 0,198 mg L-1 + (b)............................................................................................................................................. 50 Figura 23. Efeito da concentrao de VAS sobre (a): altura da corrente e (b) perfil voltamtrico de reduo para o complexo Al-VAS................................................................. 51 Figura 24. Efeito da concentrao de 8-HQ sobre (a): a altura da corrente e (b): Perfil voltamtrico de reduo para o complexo Al-8HQ................................................................. 52 Figura 25. Efeito do potencial de acumulao sobre (a): a altura da corrente para o complexo Al-VAS e (b): o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-VAS............. 53 Figura 26. Efeito do potencial de acumulao sobre o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-8HQ................................................................................................................... Figura 27. Efeito do tempo de acumulao sobre (a): a altura da corrente para o complexo e (b): o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-VAS............................................ 54 Figura 28. Efeito do tempo de acumulao sobre (a): a altura da corrente para o complexo e (b): sobre o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-8HQ.................................. Figura 29. Efeito do tempo de equilbrio sobre a corrente de pico para o complexo (a): AlVAS. (b): complexo Al-8HQ.................................................................................................. Figura 30. Perfil voltamtrico de reduo para o complexo Al-8HQ sobre o efeito do - 11 56 55 53 49 49 48

tempo de equilbrio.................................................................................................................. 57 Figura 31. Efeito da amplitude de pulso sobre (a): a intensidade da corrente para o complexo e (b): sobre o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-VAS................. Figura 32. Efeito da amplitude de pulso sobre (a): a intensidade de corrente para o complexo; e (b): sobre o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-8HQ................. 59 Figura 33. Efeito da velocidade de varredura sobre a corrente de pico de reduo para o complexo (a): Al-VAS e (b): Al-8HQ...................................................................................... 59 Figura 34. Curva de calibrao para a determinao de Al3+ utilizando VAS....................... Figura 35. Curva de calibrao para a determinao de Al3+ utilizando 8-HQ...................... Figura 36. Saturao da superfcie do eletrodo de mercrio pelo complexo (a): Al-VAS e (b): Al-8HQ............................................................................................................................. Figura 37. Efeito da concentrao de Mn e Zn na determinao de Al com VAS................ Figura 38. (a). Efeito da concentrao de Cu na determinao de Al com VAS e (b) voltamogramas obtidos............................................................................................................ 65 Figura 39. (a). Efeito da concentrao de Fe na determinao de Al com VAS e (b) voltamogramas obtidos............................................................................................................ 65 Figura 40. Efeito da concentrao de Mn na determinao de Al com 8HQ......................... 66 Figura 41. Efeito da concentrao de Zn na determinao de Al com 8HQ.......................... 67 62 64 60 61 58

Figura 42. Efeito da concentrao de Cu na determinao de Al com 8HQ.......................... 67 Figura 43. Efeito da concentrao de Fe na determinao de Al com 8HQ.......................... Figura 44. Abertura da amostra de Senna alexandrina por (a) oxidao via mida com HNO3/H2O2 e (b) oxidao via seca em mufla e ressuspenso do resduo em HCl................ 69 Figura 45. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Camellia sinensis (ch verde) e (b) voltamogramas obtidos................................................... 71 - 12 68

Figura 46. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Senna alexandrina (senne) e (b) voltamogramas obtidos.................................................................. Figura 47. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Carqueja (Baccharis genistelloides) e (b) voltamogramas obtidos......................................... Figura 48. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana) e (b) voltamogramas obtidos.................................... Figura 49. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Valeriana (Valeriana officinalis) e (b) voltamogramas obtidos.............................................. Figura 50. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Camellia sinensis (ch verde) e (b) voltamogramas obtidos................................................... 74 Figura 51. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Senna alexandrina (senne) e (b) voltamogramas obtidos.................................................................. Figura 52. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Carqueja (Baccharis genistelloides) e (b) voltamogramas obtidos......................................... Figura 53. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana) e (b) voltamogramas obtidos.................................... Figura 54. Efeito da adio da amostra Valeriana officinalis cela voltamtrica................. Figura 55. Concentrao de Al nas amostras de plantas medicinais estudadas..................... 76 77 78 76 75 73 73 72 71

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LISTA DE ABREVIATURAS
AAS: Espectrometria de Absoro Atmica (do ingls Atomic Absorption Spectrometry). ACSV: Voltametria adsortiva de redissoluo catdica (do ingls Cathodic Adsorptive Stripping voltammetry). ASV: Voltametria adsortiva de redissoluo (do ingls Adsorptive Stripping voltammetry). DPASV: Voltametria de redissoluo andica de pulso diferencial (do ingles Differential Pulse Anodic Stripping voltammetry). ETAAS: Espectrometria de Absoro Atmica com Atomizao Eletrotrmica (do ingls Electrothermal Atomic Absorption Spectrometry) FAAS: Espectrometria de Absoro Atmica em Chama (do ingls Flame Atomic Absorption Spectrometry). GFAAS: Espectrometria de absoro atmica com forno de grafite (do ingls Graphite Furnace Atomic Absorption Spectrometry). HPLC: Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (do ingls High Performance Liquid Chromatographic). HPLCHGICP-MS: Cromatografia Lquida de Alta Eficincia acoplada com Gerador de Hidretos, Plasma acoplado indutivamente e Espectrometria de Massas (do ingls HighPerformance Liquid ChromatographyHydride GenerationInductively Coupled Plasma-Mass Spectrometry). ICP-OES: Espectrometria de Emisso ptica com Plasma acoplado indutivamente (do ingls Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometer).

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SWV: Voltametria de onda quadrada de redissoluo andica (do ingls Square Wave Anodic Stripping Voltammetry). UN-ICP-OES: Espectrometria de Emisso tica com Plasma de Argnio Indutivamente acoplado com Nebulizao Ultrassnica (do ingls Ultrasonic Nebulization Inductively Coupled Plasma Atomic Emission Spectrometry) VAS: Vermelho de Alizarina S. Al-VAS: Complexo [Al (VAS)3]6-. 8-HQ: 8-Hidroxiquinolina Al-8HQ: Complexo [Al (8-HQ)].

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1. INTRODUO
Nos ltimos anos, tem crescido o interesse pelo uso de terapias alternativas, principalmente pelos produtos naturais derivados de plantas. Esse interesse em plantas medicinais se deve a vrias razes, entre elas, os efeitos colaterais da medicina tradicional, o uso abusivo de frmacos sintticos, e o poder aquisitivo da populao, que no tem acesso aos tratamentos convencionais e que acredita fielmente no folclore de que os produtos naturais so inofensivos (VARGAS, 2003). Mundialmente tm sido pesquisadas as propriedades das plantas para fins alimentcios, medicinais e cosmticos. Apesar de o Brasil apresentar reconhecida biodiversidade e, alm da sua herana indgena quanto utilizao da flora nacional, apenas uma frao diminuta de nossas plantas nativas foi devidamente estudada. Entretanto, desde a dcada passada, vrios grupos de pesquisa tm demonstrado um interesse crescente quanto determinao de minerais em espcies vegetais, haja visto o aumento significativo de trabalhos na literatura nos ltimos anos (ALMEIDA et al., 2002). Ao longo do tempo tm sido registrados diversos procedimentos clnicos tradicionais utilizando plantas medicinais. Apesar da grande evoluo da medicina aloptica a partir da segunda metade do sculo XX, existem obstculos bsicos na sua utilizao pelas populaes carentes, que vo desde o acesso aos centros de atendimento hospitalares realizao de exames e obteno de medicamentos. Estes motivos, associados com a fcil obteno e a grande tradio do uso de plantas medicinais, contribuem para sua utilizao pelas populaes dos pases em desenvolvimento. Atualmente, grande parte da comercializao de plantas medicinais feita em farmcias e lojas de produtos naturais, onde preparaes vegetais so comercializadas na sua forma industrializada. Em geral, essas preparaes no possuem certificado de qualidade e so produzidas a partir de plantas cultivadas em viveiros, o que descaracteriza a medicina tradicional que utiliza, quase sempre, plantas da flora nativa. cada vez mais freqente o uso de plantas das medicinas tradicionais ind e chinesa, completamente desconhecidas dos povos ocidentais. Estas plantas so comercializadas apoiadas em propagandas que prometem benefcios seguros, j que so uma fonte natural. Muitas vezes, entretanto, as supostas propriedades farmacolgicas anunciadas no possuem - 16 -

validade cientfica, por no terem sido investigadas, ou por no terem tido suas aes farmacolgicas comprovadas em testes cientficos pr-clnicos ou clnicos. Nos pases em desenvolvimento, bem como nos mais desenvolvidos, os apelos da mdia para o consumo de produtos base de fontes naturais aumentam a cada dia. Os ervanrios prometem sade e vida longa, com base no argumento de que plantas usadas h milnios so seguras para a populao (VEIGA JNIOR e PINTO, 2005). Nos Estados Unidos e na Europa h mais controle no registro e na comercializao dos produtos obtidos de plantas. Nesses pases, as normas para a certificao e o controle de qualidade de preparaes vegetais so mais rgidos. Pesquisa realizada nos EUA no ano de 1997 mostrou que 42% da populao haviam feito uso de plantas medicinais, pelo menos uma vez no ano de 1996, em tratamentos mdicos alternativos. Esse percentual cerca de 33,8% maior em relao ao ano de 1990, quando a mesma pesquisa foi realizada (VEIGA JNIOR e PINTO, 2005). Na Alemanha, onde se consome metade dos extratos vegetais comercializados em toda a Europa (cerca de US$ 3,5 bilhes do total de US$ 7 bilhes, ou US$ 42,90 per capita, em valores de 1997), plantas medicinais so utilizadas pela populao para tratar resfriados (66%), gripe (38%), doenas do trato digestivo ou intestinal (25%), dores de cabea (25%), insnia (25%), lcera estomacal (36%), nervosismo (21%), bronquite (15%), doenas de pele (15%), fadiga e exausto (12%). Nesse mesmo pas, foi verificado que a auto-medicao com preparaes base de plantas medicinais muito comum. Durante o ano de 1997, 1,5 milhes de pessoas utilizaram ervas medicinais durante o tratamento aloptico. Mais da metade destes pacientes no comunicou esse uso ao mdico. No Brasil, as plantas medicinais da flora nativa so consumidas com pouca ou nenhuma comprovao de suas propriedades farmacolgicas, propagadas por usurios ou comerciantes. Comparada com a dos medicamentos usados nos tratamentos convencionais, a toxicidade de plantas medicinais e fitoterpicos pode parecer trivial. Isso, entretanto, no verdade. A toxicidade de plantas medicinais um problema srio de sade pblica. Os efeitos adversos dos fitomedicamentos, possveis adulteraes e toxicidade, bem como a ao sinrgica (interao com outras drogas) ocorrem comumente. As pesquisas realizadas para avaliao do uso seguro de plantas medicinais e fitoterpicos no Brasil ainda so incipientes, assim como o controle da comercializao em feiras livres, mercados pblicos ou lojas de produtos naturais, pelos rgos oficiais (VEIGA JNIOR e PINTO, 2005). - 17 -

A informao disponvel sobre a presena de metais em plantas medicinais muito escassa, assim como a sua presena nos fitoterpicos produzidos a partir destas. Informaes sobre a qualidade dos produtos so praticamente inexistentes. Cabe destacar que a ingesto de metais pesados atravs de medicamentos, bem como alimentos, pode levar acumulao destes no organismo, causando danos renais e hepticos e levando ao aparecimento de sintomas de toxicidade crnica, entre outros (VARGAS, 2003). A qualidade das formulaes farmacuticas est intimamente ligada qualidade da matria-prima. No caso de fitoterpicos a anlise de insumos vegetais relativamente simples; os extratos e formas farmacuticas derivadas requerem anlises mais sofisticadas, principalmente quando contm misturas de drogas vegetais. Nesses ltimos, a autenticidade do produto dada exclusivamente pela sua composio qumica. Na anlise de matrias-primas os problemas mais freqentes so as adulteraes, a no uniformidade da composio qumica e as contaminaes, decorrentes em grande parte, da atual forma de explorao das plantas medicinais e da falta de controle de qualidade. De um modo geral, so utilizadas plantas silvestres, de acordo com as necessidades dos laboratrios, sem pocas ou locais definidos de coleta. Atravs do cultivo de plantas medicinais, muitos desses problemas poderiam ser contornados, entretanto essa prtica pouco usual (FARIAS et al., 1985). Sabe-se que um grande nmero de elementos minerais so essenciais para a nutrio humana e de outros mamferos, desempenhando funes especficas no organismo. Pode-se mencionar como exemplo, o clcio e o magnsio, que atuam na formao de ossos, dentes e tecidos. O potssio, quando associado ao sdio, regulariza o funcionamento do sistema muscular e os batimentos cardacos. Alguns dos elementos minerais so encontrados em quantidades relativamente baixas no corpo humano e so chamados de oligoelementos, como o caso do zinco, ferro, cobalto, mangans, nquel, flor, entre outros. Zinco e mangans servem como ativadores essenciais em uma srie de reaes metablicas catalisadas por enzimas, sendo, portanto, elementos muito importantes para a reproduo e o crescimento. O ferro um componente das molculas de hemoglobina, mioglobina, citocromo e de alguns sistemas enzimticos, desempenhando um papel essencial no transporte de oxignio e respirao celular. O alumnio tambm um oligoelemento, porm, no essencial para os seres vivos, sendo que a intoxicao por este metal parece estar relacionada com uma variedade de distrbios neurolgicos e comportamentais, como por exemplo, a doena de Alzheimer, demncia pr- 18 -

senil, esclerose amiotrpica lateral e doena de Parkinson. Em grandes quantidades, o alumnio pode interferir na absoro de fosfato, levando ao raquitismo. A maior parte do alumnio absorvido pelo ser humano oriundo dos alimentos e da gua; estima-se que sua dose diria pode variar de 2,5 a 13 mg (ALMEIDA et al., 2002). No homem, a toxicidade do Al est reconhecidamente associada a vrias complicaes clnicas, destacando-se nestas, disfunes neurolgicas como o mal de Alzheimer. O alumnio est ainda envolvido com a mobilizao do fosfato sseo. No homem, a sua concentrao plasmtica usual de aproximadamente 5 mg L-1, sendo a transferrina o seu maior carreador. A presena deste elemento em guas naturais uma preocupao constante para a sade pblica. Alm da sua fitotoxicidade, ele um responsvel pela acidificao de solos. A sua presena, mesmo em quantidades traos, pode ser prejudicial ao tratamento de doenas renais crnicas atravs da hemodilise. Por outro lado, os estudos de especiao qumica do alumnio tornamse fundamentais, pois a sua toxicidade depende da espcie qumica e dos complexos do Al3+, formas monomricas, polimricas, entre outras (QUINTAES, 2000). As atividades biolgicas do alumnio acarretam a necessidade do desenvolvimento de mtodos precisos, simples, rpidos e de baixo custo para a sua determinao, que comumente realizada por espectrofotometria na regio do visvel, espectrometrias de absoro e emisso atmicas, fluorimetria e voltametria. Quase no se observa o emprego de eletrodos onseletivos para a determinao de alumnio (PICCIN, 2004). As tcnicas eletroanalticas so importantes pelo fato de possibilitarem o estabelecimento de relaes diretas entre a concentrao do analito e alguma propriedade eltrica como corrente, potencial, condutividade, resistncia ou carga eltrica. Como as medidas destas propriedades so facilmente acessveis experimentalmente, as tcnicas eletroanalticas so muito difundidas e teis para o desenvolvimento de estudos de especiao qumica nas diferentes reas de estudo (SOUZA, 2003). A voltametria uma tcnica eletroanaltica onde informaes qualitativas e quantitativas de uma espcie qumica so obtidas a partir de voltamogramas. No processo voltamtrico, a espcie de interesse para determinao sofre eletrlise na superfcie de um eletrodo indicador ou de trabalho (um microeletrodo), contido numa cela voltamtrica constituda por mais dois eletrodos, denominados eletrodos auxiliar e de referncia. O eletrodo de trabalho mais empregado em voltametria, ainda o eletrodo de mercrio. Ele pode ser usado tanto no modo gotejante quanto no modo esttico. - 19 -

O desenvolvimento das tcnicas voltamtricas de pulso diferencial e onda quadrada permitiram chegar a determinaes analticas da ordem de 10-7 a 10-8 mol L . Entretanto, na moderna anlise de traos necessrio chegar-se a limites de deteco abaixo de 10-8 mol L , o que no se consegue com as medidas voltamtricas usuais. Uma alternativa para se obter limites de deteco to baixos, a utilizao de processos de pr-concentrao da espcie a ser determinada, de maneira que a corrente faradaica possa aumentar, suplantando a de fundo e chegar-se a limites inferiores a 10-7 10-8 mol L-1. Na anlise voltamtrica a pr-concentrao apresenta a vantagem de poder ser feita no prprio eletrodo de trabalho, sendo, sob este aspecto, a sua utilizao, bastante fcil e conveniente. A determinao voltamtrica direta do alumnio dificultada por interferncias causadas por H+ e ons dos metais alcalinos e alcalino-terrosos, em decorrncia da similaridade de seus potenciais de reduo. Como alternativa, pode ser empregada a determinao indireta por voltametria adsortiva de redissoluo catdica, aps a complexao do alumnio com um agente quelante apropriado.
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2. OBJETIVO
O objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar a eficincia da utilizao de diferentes agentes quelantes para a determinao de alumnio por voltametria adsortiva de redissoluo catdica, aplicando os procedimentos propostos em amostras de plantas medicinais.

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3. REVISO BIBLIOGRFICA
3.1. Plantas Medicinais e Fitoterpicos
Planta medicinal um vegetal que produz em seu metabolismo natural substncias, em quantidade e qualidade necessrias e suficientes, capazes de provocar modificaes nas funes biolgicas. Essas substncias so denominadas princpios ativos, que tem finalidade teraputica. Alguns princpios ativos, no entanto, podem apresentar elevada toxicidade e, portanto, a dosagem deve ser cuidadosamente avaliada. O fitoterpico o produto final obtido a partir da planta medicinal, podendo ou no conter excipientes em adio. (VARGAS, 2003). A fitoterapia provavelmente a mais antiga forma teraputica de que se tem registro na medicina. Comeou a ser praticada h cinco mil anos e veio para o ocidente, combinando os antigos ensinamentos orientais com os remdios populares e as tradies indgenas. A utilizao de plantas com fins medicinais, para tratamento, cura e preveno de doenas, uma das mais antigas formas de prtica medicinal da humanidade. No incio da dcada de 1990, a Organizao Mundial de Sade (OMS) divulgou que 65-80% da populao dos pases em desenvolvimento dependiam das plantas medicinais como nica forma de acesso aos cuidados bsicos de sade. Do conhecimento popular para o conhecimento cientfico foram necessrios anos de pesquisas, que comprovaram o que os mdicos de todas as pocas j sabiam: as plantas medicinais realmente exercem um efeito teraputico e, portanto, podem ser consideradas como uma excelente alternativa medicina tradicional. Entre as plantas medicinais de uso popular no Brasil destacam-se o Ch Verde (Camellia sinensis), Carqueja (Baccharis genistelloides), Senne (Cssia angustiflia), Valeriana (Valeriana officinalis) e Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana) cujos dados sobre os constituintes qumicos e a finalidade teraputica esto resumidamente apresentados na Tabela 1.

Ch verde Na medicina tradicional chinesa, usa-se para aliviar as dores de cabea, alm de ajudar a eliminar as toxinas e ainda prolonga a juventude. Entretanto, as investigaes

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cientficas para documentar o potencial benfico para a sade dessa antiga bebida no tiveram campo at poucas dcadas atrs. Esses estudos mostraram que uma de suas variedades, o ch verde, tem mltiplas virtudes para a sade e, por esse motivo, sua fama e seu consumo vm aumentando em todo o mundo ocidental. Consumido como infuso e tambm em forma de pastilhas, massas dentrficas, suplementos dietticos, bebidas sem lcool e at em sorvetes (MANFREDINI, et al., 2004). Apesar de todas as variedades de ch que se consome serem originadas de uma nica espcie a Carmellia Sinensis (Figura 1), obtm-se trs formas principais de acordo com seu processamento: o ch preto, fermentado, preferido pelos ocidentais; o ch oolong, semi fermentado; e o ch verde, no fermentado, que se consome preferencialmente no extremo Oriente. O consumo do ch verde est em expanso aps a divulgao de investigaes que comprovaram que o mesmo contm altos nveis de polifenis com propriedades antioxidantes, anticancergenas e, tambm, antibiticas. Alm disso, acredita-se que o ch verde pode ajudar a prevenir doenas cardacas e do fgado. Um nmero crescente de estudos clnicos, com homens e animais, sugere que o consumo regular de ch verde pode reduzir a incidncia de uma variedade de cnceres, incluindo o do coln, o do pncreas e o do estmago (MANFREDINI, et al., 2004). O ch verde possui uma srie de compostos chamados flavonides (quercetol, kenferol, miricetol). Estes compostos so essenciais na absoro e metabolismo do cido ascrbico (Vitamina C) e aumentam a resistncia capilar (ao vaso protetora). Estes compostos se perdem durante o processo de elaborao do ch preto. Os polifenis do ch verde so potentes antioxidantes, inclusive mais eficientes para suprimir os radicais livres que as vitaminas C e E. Por outro lado, seu contedo de bases xnticas, especialmente a cafena, faz com que atue como estimulante do sistema nervoso cortical e bulbar (estimula os centros respiratrios e vasomotores que se encontram em nvel de bulbo). Seu contedo em xantinas tambm lhe garante uma ao diurtica e broncodilatadora, e tem ao adstringente devido presena de taninos.

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 hipolipemiante, ou seja, capaz de reduzir os nveis de LDL colesterol ruim e de triglicrides plasmticas, ao mesmo tempo em que eleva os nveis de HDL colesterol bom. Demonstra-se no ch verde certo grau de proteo contra as bactrias que causam as cries dentais. A ao dos bioflavonides produz uma importante diminuio da placa bacteriana. A ingesto moderada de ch verde considerada segura. Os asiticos consumiram esse tipo de ch por milhares de anos sem efeitos colaterais perigosos. Mas, algumas pessoas podem desenvolver reaes alrgicas. Beber grandes quantidades de ch pode causar problemas devido cafena e forte ao ligante dos polifenis, os quais podem reduzir a absoro de certos medicamentos e suplementos minerais. A preocupao mais importante com respeito ao ch verde deve-se ao seu contedo de cafena: o excessivo consumo pode causar nuseas, alteraes do sono e mices freqentes. A cafena um estimulante e pessoas com taquicardia ou ataques de ansiedade deveriam tomar cuidado com ela. Esses efeitos no so exclusivos do ch verde, mas tambm do ch preto ou caf. As mulheres grvidas ou lactantes so aconselhadas a no ingerir grandes quantidades de ch verde, porque a cafena atravessa a placenta e passa atravs do leite materno. No se indica o ch verde em casos de gastrite nem lcera gastroduodenal, uma vez que possuem compostos irritantes da mucosa gstrica como os taninos. Investigaes relacionadas ao consumo ideal do ch verde sugerem que o mesmo pode ter um efeito benfico sobre a sade humana. Entretanto, so necessrias mais pesquisas para elucidar as propriedades e os mecanismos de ao dos compostos fenlicos nesta bebida apreciada no mundo inteiro (MANFREDINI et al., 2004).

Figura 1. Ch verde - Carmellia Sinensis.

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Carqueja A carqueja (Baccharis genistelloides) uma planta medicinal amplamente utilizada no Brasil, que exerce ao benfica sobre o fgado e intestinos, auxiliando no tratamento de doenas digestivas em geral (gastrite e m digesto, distrbios do fgado, vermfuga, antidiarreica, tnica, depurativa e hepatoprotetora); alm disso, a carqueja (Figura 2) exerce ao diurtica, purificando e eliminando toxinas (utilizada em distrbios dos rins e bexiga e no combate gota e ao reumatismo) e hipoglicemiante (muito til em casos de diabetes). Experimentos pr-clnicos em camundongos demonstraram que o carquejol, um dos principios ativos da carqueja, apresenta baixa toxicidade. A continuidade desses estudos realizada com ces tem demonstrado uma reduo da presso sangunea (os flavonides que lhe conferem ao diurtica podem gerar um quadro de hipotenso arterial) e da amplitude do ritmo respiratrio, observando-se inclusive uma reduo de 5 a 10% no colesterol (BUDEL et al., 2004). indicada em casos de: Gastrite, azia, e m digesto; Clculos biliares; Constipao (priso de ventre); Diabetes; Afeces gstricas e intestinais; Afeces hepticas e biliares (ictercea, clculos biliares); Afeces das vias urinrias; Enfermidades do bao; Verminoses e tambm coadjuvante em regimes de emagrecimento (BUDEL et al., 2004).

Figura 2. Carqueja - Baccharis genistelloides.

Sene O Sene conhecido tambm pelo seu nome cientfico de Cassia angustiflia (Figura 3). Pertence famlia Leguminosae. O foldeo a parte utilizada para fins fitoterpicos, eles apresentam odor fraco, entretanto caracterstico e sabor mucilaginoso e amargo. uma planta originria da ndia e Somlia, cuja sua introduo na fitoterapia foi feita por mdicos rabes no sculo IX (ROCHA et al., 2004).

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 um dos frmacos mais conceituados como purgativo, por no provocar inflamaes secundrias muito comuns quando se utilizam purgativos drsticos. uma planta tpica de regies tropicais, que espontaneamente se desenvolve melhor em locais montanhosos e distante de grandes rios. O Sene composto por substncias antraquinnicos livres e combinados: crisofanol, aloe-emodina, antranol, reina, reina-8-glicosdeos, reina diglicosdeo, reina antrona-8glicosdeo (ROCHA et al., 2004). Alm destas substncias citadas acima o sene ainda apresenta mucilagens, resinas, flavonnides como o campferol, gliosdeos naftalnicos, pinitol, acares redutores. O Sene tem ao purgativa, laxativa e catrquica. indicado na constipao por inrcia intestinal. O efeito do Sene obtido algumas horas aps a sua administrao oral, pois ocorre a liberao dos heterosdeos no intestino grosso. Neste local, pela ao enzimtica da flora bacteriana, ocorrer hidrlise, com consequente liberao das aglicanas. Estas que iro atuar sobre a mucosa, aumentando o peristaltismo (ROCHA et al., 2004). A histamina estimula a motilidade intestinal e em estudos recentes tem mostrado que o Sene estimula a sua biossntese. contra-indicado em casos de gravidez, aleitamento, enterite, apendicite, cistite, obstruo intestinal e dores. No recomendado para crianas (ROCHA et al., 2004).

Figura 3. Sene - Cassia angustiflia

Valeriana A Valeriana (Figura 4) uma planta herbcea perene, pertencente famlia Valerianaceae. Encontra-se largamente distribuda por toda a Europa e sia, mas devido a seu uso medicinal, esta hoje difundida por toda a Europa. O perodo de colheita entre o outono e a primavera. Logo aps a colheita, os rizomas e razes devem ser secos a temperatura de 40C para prevenir a degradao dos componentes ativos. - 26 -

Os principais componentes so: leo essencial, hidrocarbonetos mono e sesquiterpnicos, cidos valernicos, steres terpnicos, alcalides, cetonas aldedos e lcoois triterpnicos, valepotriatos e taninos (ROCHA et al., 2004). Era recomendada por mdicos rabes desde a Primeira Guerra Mundial, para tratar neuroses de guerra. Seus efeitos teraputicos so conhecidos desde o tempo do Renascimento. Valeriana (Valeriana officinalis) indicada para distrbios do sono causados por condies, distrbios mentais, problemas de concentrao, excitabilidade, estresse, dores de cabea, neurastenia, epilepsia, histeria, cardiopatia nervosa, estados de agitao inerentes ao perodo menstrual, neuralgia e outros estados de ansiedade. A atividade de Valeriana se d como calmante, sedativa, ansioltica, espasmoltica, relaxante e anti-ulcerognica. O principal efeito reduzir o tempo de induo do sono. Os cidos valernicos (valernico, acetxi-valernico e hidroxivalernico) tm mostrado diminuir a degradao do cido gama aminobutrico (GABA). O aumento da concentrao de GABA na fenda sinptica um fator responsvel pelas propriedades sedativas. Outro mecanismo que pode contribuir para as propriedades sedativas de Valeriana so os altos nveis de glutamina no extrato. Diferentemente do GABA, a glutamina atravessa a barreira hemato-enceflica mais eficazmente, onde pode ser convertida a GABA nos terminais nervosos. Existem ainda outros componentes: os monoterpenos se decompem na presena da enzima oxidase em cido valernico e metilcetona; o primeiro tem ao antiespasmdica e o segundo ligeiramente anestsico. Melhoras na taxa de qualidade do sono foram demonstradas num estudo randomizado, multicntrico, que envolveu 121 pacientes. Estes utilizaram a dose adequada de Valeriana, uma hora antes de deitarem, por 28 dias. A porcentagem de satisfao no tratamento foi de 66%, quando comparado com o grupo controle. Efeitos colaterais: O uso prolongado do produto pode causar diarria e irritao.

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Figura 4. Valeriana - Valeriana officinalis

Cscara Sagrada A Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana), originria da regio americana do oceano Pacfico, era usada pelos nativos antes da colonizao europia como purgante e tnico. Tem efeitos laxantes, o que acelera a velocidade com a qual os alimentos so eliminados, porm tambm diminui a absoro dos nutrientes (ROCHA et al., 2004). A Cscara Sagrada (Figura 5) aumenta os movimentos intestinais e a passagem de lquido para o tubo intestinal, o que facilita a evacuao. Desta forma, tem indicao para casos de constipao intestinal. uma planta com excelentes propriedades medicinais. um arbusto de folhas largas e denteadas. Leva o nome de sagrada pela suas grandes caractersticas curativas. Sua principal funo corrigir os problemas intestinais, com a grande vantagem de no provocar clicas nem diarria. Porm, ela no exerce apenas uma ao laxativa, mas restabelece o tnus natural do clon. Aps a ingesto da cscara sagrada ocorre a liberao de substncias que ajudam a eliminar o material fecal. Em pequenas doses, o frmaco atua como estimulante de apetite e em doses maiores atua como laxante e purgativo suave. Sua atividade laxativa resultante da ao de um conjunto de constituintes.

Figura 5. Cscara Sagrada - Rhamnus purshiana - 28 -

Tabela 1. Constituintes qumicos e uso comum de plantas medicinais de uso popular. Planta medicinal Ch verde (Camellia sinensis) Constituintes qumicos Polifenis, Catequinas, vitamina K, taninos, bioflavonides. Carqueja Flavonides, lactonas, saponinas, terpenos, resinas e pectinas, carquejol, acetato de carquejilo. Senne (Cssia angustiflia) Glicosdeos, flavonides, mucilagens, antracenos, crisofanol, senosidos A e B, heterosidos complexos. Valeriana (Valeriana officinalis) leo essencial, hidrocarbonetos Calmante, sedativa, ansioltica, mono e sesquiterpnicos, cidos espasmoltica, relaxante e valernicos, steres terpnicos, alcalides, cetonas aldedos e lcoois triterpnicos, valepotriatos e taninos. Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana) cidos graxos, glicosdeos, antraquinonas, glicosdeo (shesterina) e o ramnicosideo. Em pequenas doses atua como estimulante de apetite e em doses maiores atua como laxante e purgativo suave. anti-ulcerognica. Laxante e purgante. Uso comum Diurtico, ajuda a prevenir cries, tm ao antiinflamatria e antigripal, ativam o sistema imunolgico e regeneram a pele. Tnico regulador do aparelho digestivo e depurativo e diurtico. (Baccharis genistelloides) polifenis, taninos, esterides,

A complexidade da composio das plantas medicinais e sua variao biolgica fazem com que muitas vezes seja difcil avaliar a sua segurana, eficcia e qualidade. A segurana determinada pelos ensaios que comprovam a ausncia de efeitos txicos, bem como pela existncia de contaminantes nocivos sade, como por exemplo, metais pesados, agrotxicos, microorganismos nocivos e seus produtos metablicos, produtos de degradao, entre outros. A segurana e a eficcia dependem de diversos fatores, como a metodologia de obteno, a - 29 -

formulao e a forma farmacutica, entre outros e, portanto, devem ser definidas para cada produto, estabelecendo-se parmetros de controle da qualidade do produto final. A qualidade adequada das matrias-primas deve ser realizada de acordo com bases cientficas e tcnicas. Nos procedimentos rotineiros de analise de qualidade, geralmente preconizado o emprego de metodologias qumicas, fsicas ou fsico-qumicas e biolgicas, sendo necessria a correlao entre os parmetros analisados e a finalidade a que se destina. (FARIAS et al., 1985).

3.2. Contaminantes
Os contaminantes presentes nas plantas medicinais e fitoterpicos, como os microorganismos e substncias xenobiticas so um importante parmetro no controle de qualidade. Ainda assim, como qualquer outro produto agrcola, as plantas medicinais podem ser contaminadas com substncias orgnicas, inorgnicas, naturais e sintticas, tais como microorganismos, fungos e suas micotoxinas, assim como metais pesados, substncias radioativas, fertilizantes, resduos de pesticidas e outros.

3.2.1. Elementos-trao
Os elementos-trao esto presentes naturalmente em solos e em sistemas aquticos superficiais e subsuperficiais, mesmo que no haja perturbao antrpica do ambiente. O aumento em sua concentrao pode ocorrer tanto em razo de processos naturais quanto por atividades antropognicas. Os processos naturais que contribuem para o aparecimento de elementos-trao nos sistemas aquticos so a decomposio de rochas e a lixiviao no perfil do solo, enquanto as fontes antropognicas esto associadas, principalmente a atividades de minerao (carvo e jazidas minerais) e industriais, alm da gerao de efluentes municipais. Em todas as pocas, o homem tem sido exposto aos metais pesados existentes no meio ambiente. Em reas com altas concentraes desses metais pesados, provvel que a contaminao dos alimentos e da gua por metais tenha provocado os primeiros casos de intoxicaes. Os metais lixiviados dos utenslios de cozinha e mesa tambm tm contribudo para intoxicaes acidentais (QUINTAES, 2000). O advento da era industrial e o grande - 30 -

desenvolvimento da minerao provocaram doenas ocupacionais ocasionadas por diversos metais txicos. Alguns elementos-trao so considerados essenciais do ponto de vista biolgico, enquanto outros no o so. Entretanto, mesmo os essenciais podem, sob condies especficas, causar impactos negativos a ecossistemas terrestres e aquticos, constituindo-se, assim, em contaminantes ou poluentes de solo e da gua. Os metais pesados como o Cd e Pb, que naturalmente no podem ser metabolizados, permanecem no organismo e nele exercem seus efeitos txicos combinando-se com um ou mais grupos reativos essenciais para as funes fisiolgicas normais. Um grande risco para a populao, em geral, so os fitoterpicos importados de pases asiticos, uma vez que as formulaes so bastante diferentes das preparadas pelos ocidentais, contendo metais pesados em concentraes que, muitas vezes, ultrapassam os valores seguros para consumo. Um estudo realizado em Londres no perodo entre 1991 e 1995 mostrou uma srie de efeitos adversos associados medicina tradicional oriental. De doze casos de contaminao por Hg, Pb e As, nove foram associados a ervas medicinais e cosmticos inds (VEIGA JNIOR e PINTO, 2005). Metais pesados fazem parte das preparaes farmacuticas de vrias escolas da medicina oriental, utilizados geralmente em conjunto com extratos de plantas medicinais. Na medicina tradicional indiana, a importncia de metais, como Au, Cu, Pb, Hg, Fe, Ag e Zn, enfatizada para a bioqumica do corpo humano. Na medicina tradicional chinesa, mercrio faz parte de algumas preparaes sob a terminologia cinnabaris (sulfeto de mercrio), calomel (cloreto de mercrio (I)) ou hydrargyri oxydum rubrum (xido de mercrio). Estes produtos so utilizados para indicaes variadas, como tranqilizantes, anti-epilticos, no tratamento de lceras e insnia. Pesquisadores indianos avaliaram recentemente a concentrao de metais pesados em 31 formulaes. Com exceo de uma dessas preparaes, todas excederam os limites legais de metais pesados, sendo que 16 delas ultrapassaram por mais de duas ordens de grandeza os valores mximos permitidos (no caso do mercrio, 1,0 mg L-1). Vrias formas diferentes de mercrio foram encontradas nessas preparaes. Numerosos casos de envenenamento por metais pesados associados ao uso da Medicina Tradicional Chinesa (MTC) tm sido publicados nos ltimos anos. O chumbo um dos principais responsveis por estes envenenamentos. - 31 -

Outros metais pesados, como mercrio, arsnio, cdmio, cobre e tlio tambm tm sido encontrados em fitoterpicos da MCT. Estudos recentes, realizados no Brasil com plantas de origem nacional e outras de diversas origens, mostraram a presena de metais em altas concentraes. Em extratos de Aesculus hippocastanum, obtidos na Frana e Alemanha, chumbo foi detectado na concentrao de 1,480 g g-1 de extrato, 440% acima da dose mxima recomendada (VEIGA JNIOR e PINTO, 2005). Os riscos de contaminao com metais pesados (ou elementos-trao) em formulaes contendo extratos de plantas medicinais orientais tm aumentado significativamente com a possibilidade de aquisio de medicamentos via Internet (VEIGA JNIOR e PINTO, 2005). Entre alguns metais essenciais para os seres vivos ou micronutrientes destacam-se o Fe, Mn, Zn, Cu e Mo. Porm, estes podem ser txicos em altas concentraes. Os metais pesados de maior potencial txico so Pb, Cd, Cr, Tl e Hg. A Alguns desses metais tm sido atribudas propriedades carcinognicas e o aparecimento de problemas cardacos. Metais micronutrientes essenciais como Cu e Zn podem exercer um carter to txico quanto Pb ou Cd, dependendo doas suas concentraes. Na natureza, o Al ubiqitrio, sendo o terceiro elemento mais prevalente da crosta terrestre; todavia, em sistemas biolgicos ele existe como elemento-trao. Como elemento-trao, no essencial, o alumnio est presente em concentraes muito baixas em diversos sistemas biolgicos (OLIVEIRA et al. 2005). A presena de metais pesados em plantas medicinais pode ser decorrente de vrios fatores, tais como poluentes ambientais ou resduos de agrotxicos. A presena do Al em plantas medicinais se deve ao fato de que o Al compreende 7,1% da crosta terrestre, em peso. Ele faz parte de minerais primrios, como feldspatos e micas, e minerais secundrios alumino-silicatados como a caulinita, a haloisita e imogolita, e xidos de Al (ex. gibbsita). A dissoluo desses minerais primrios e secundrios, em solos cidos libera o Al para a soluo do solo e a sua concentrao depende do pH do solo, da quantidade e do tipo de minerais que contm o Al, do equilbrio com as superfcies de troca e das reaes de complexao com a matria orgnica (CAMBRI, 2004).

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3.2.2. Alumnio
Sendo um dos elementos mais abundantes da crosta terrestre, o alumnio est presente em partculas de p, vegetais e utenslios domsticos. Alm disto, utilizado em aditivos alimentcios, medicamentos como anticidos base de hidrxido de alumnio e na purificao da gua, inclusive potvel, pois o sulfato de alumnio utilizado como agente floculante no processo de purificao da gua. O homem tem contato direto com o alumnio diariamente por via oral ou inalao.

3.2.3. Alumnio em plantas

Caractersticas qumicas do Alumnio no solo A acidez dos solos inibe o crescimento das plantas em muitas partes do mundo. A inibio do crescimento resulta da combinao de fatores que incluem a toxidez por alumnio, mangans, fsforo e molibdnio. Porm, em valores de pH menores que 5,0, o Al, normalmente, considerado o principal fator limitante. Cerca de 40% da superfcie agrcola do mundo tem sua produo restringida pelo Al (CAMBRI, 2004). Uma causa importante da acidificao dos solos a hidrlise do alumnio, a qual produz ons H+, de acordo com a reao: Al3+ (aq)+ 3H2O(l) Al(OH)3 (s)+ 3H+(aq) O Al considerado o terceiro elemento qumico mais abundante na crosta terrestre, onde compreende aproximadamente 7,1%. Os minerais de argila primrios e secundrios so, em grande parte, estruturalmente formados por Al2O3, juntamente com SiO2. Devido sua baixa solubilidade, os teores de alumnio no lenol fretico atingem geralmente alguns centsimos ou dcimos de mg/l. Entretanto, com o processo de acidificao dos solos, onde o pH (em H2O) atinge valores inferiores a 5,0, h um aumento na dissoluo de xidos ou hidrxidos de Al. A crescente dissoluo dos componentes contendo Al demanda uma ateno especial para o comportamento qumico do Al(H2O)6 3+, ou simplesmente Al3+. Tal estudo , de certa forma, complicado e, por ser um ction com - 33 -

alta densidade de carga positiva, o Al3+ em solues aquosas exige flor e oxignio como tomos ligantes. Uma reao deste tipo com ligantes entendida como substituta das molculas de gua do complexo aquoso. A dificuldade reside no fato de que, juntamente com o equilbrio de hidrlise, que proporciona a formao de ctions hidrxidos na fase solvel, outros equilbrios devem ser levados em considerao, dependendo do tipo do contra-on. Isto o que normalmente ocorre na soluo do solo, pois, no sentido qumico clssico, no se trata de um sistema simples com um ou dois tipos de ons, mas sim, de um sistema multivariado, no qual a apresentao dos possveis equilbrios entre os componentes inicos e a constituio da soluo do solo resultante, pode ser bastante confusa. Fluoreto, fosfato e sulfato so considerados importantes nions inorgnicos que, dependendo de suas concentraes e dos valores de pH, influenciam decisivamente na solubilidade e deslocamento do Al3+. O Al livre coordenado por seis molculas de gua em uma configurao octaedral (Al(H2O)63+) representado por Al3+. Com o aumento do pH da soluo, as molculas de gua da esfera de hidratao perdem H+, numa reao de hidrlise. A distribuio das espcies de Al em funo do pH, em uma soluo com ausncia de ligantes exceto OH-, demonstra que o Al3+ predomina em valores de pH menores que 4,7 (Figura 6). No pH 5,0 ocorre um equilbrio na magnitude de atividade entre as espcies (Al3+, AlOH2+ e Al(OH)2+). Na presena de outros nions em soluo, essa distribuio modificada dependendo do tipo de nion e de sua constante de equilbrio de ligao com o Al (CAMBRI, 2004).

Figura 6. Distribuio relativa das espcies de Al em soluo do solo (CAMBRI, 2004).

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A matria orgnica do solo (MOS) componente chave de qualquer ecossistema terrestre, e a variao na sua distribuio, contedo e qualidade tm importante efeito nos processos que ocorrem dentro do sistema. A solubilidade e o deslocamento do Al tambm podem ser fortemente influenciados pela presena de complexantes orgnicos naturais do solo como cido ctrico, cido oxlico, cidos hmicos e, principalmente, pelos cidos flvicos, por apresentarem, em relao aos cidos hmicos, maior quantidade de grupos funcionais (por exemplo, COOH) e maiores valores de constante de estabilidade. A habilidade das substncias hmicas em formar complexos estveis com o alumnio est ligada ao contedo de grupos funcionais que contm oxignio, como o carboxlico, fenlico, enlico, alcolico, entre outros e, em menor grau (ligao mais fraca), com grupos que contm nitrognio. A ligao do Al com os ligantes orgnicos pode ocorrer por pontes de gua (Figura 7.a), atrao eletrosttica (Figura 7.b), troca de ligantes com apenas um grupo doador (Figura 7.c) e quelao (Figura 7.d).

Figura 7. Formas de complexao do Al com a MOS: (a) pontes de gua; (b) atrao eletrosttica; (c) troca de ligantes; e (d) quelao. (CAMBRI, 2004).

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Condies para a ocorrncia de toxicidade de Alumnio em plantas De maneira geral, valores de pH (em H2O) do solo abaixo de 5,5 j podem condicionar graves problemas de toxicidade de alumnio para as plantas. Entretanto, dependendo do tipo de ligante inorgnico e orgnico, o alumnio pode ser mais ou menos txico (MACHADO, 1997). MACHADO (1997) relatou que Al(OH)4- no causava toxicidade em plntulas de trigo e trevo vermelho. Neste mesmo estudo, atribuiu-se a toxicidade ao Al+3 portanto o AlSO4+ no era txico para aquelas plntulas anteriormente citadas, ou, no mnimo, dez vezes menos txico que Al3+. As provveis explicaes sugeridas por MACHADO (1997) para este comportamento txico diferenciado das formas de Al seriam: formas policatinicas de Al so txicas para as razes e os ligantes diminuem a toxicidade pela reduo de carga; as diferentes toxicidades das formas de Al simplesmente refletem suas atividades nas superfcies celulares negativamente carregadas. O efeito concentrador de carga negativa, que pode tomar lugar tanto na parede celular como na membrana plasmtica, maior para ctions mais carregados, como o Al3+. importante destacar que o comportamento qumico variado do alumnio sob diferentes formas nos solos e a complexidade de suas reaes na soluo do solo, associados ao fato das espcies de plantas e variedades de plantas dentro das espcies poderem reagir com maior ou menor tolerncia presena do alumnio, tornam difcil o desenvolvimento de um mtodo de anlise capaz de medir o alumnio que efetivamente limita o crescimento das plantas.

Mecanismos da toxicidade de Alumnio em plantas A ao txica do alumnio , por excelncia, um fenmeno que ocorre no sistema radicular, que poderia ser sintetizado da seguinte maneira: as diminuies no elongamento radicular so os primeiros sintomas de toxicidade observveis; a produo de biomassa radicular normalmente mais sensvel toxicidade do Al que a produo de biomassa da parte area; - 36 -

uma correlao entre o suprimento de Al e seu acmulo na parte area no pode ser generalizada para todas as plantas afetadas pelo metal.

As aes fisiolgicas e bioqumicas do alumnio na planta tm sido observadas e os mecanismos pelos quais o alumnio afeta as funes celulares podem ser resumidos da seguinte maneira: alteraes na membrana das clulas da raiz; inibio da sntese de DNA e da diviso celular; inibio do elongamento celular; alteraes na absoro de nutrientes e no balano nutricional; efeito sobre a simbiose rizbio/leguminosa (MACHADO, 1997)

Efeitos benficos do Alumnio para as plantas Embora o alumnio seja normalmente considerado como um elemento txico para as plantas cultivadas, existem vrios trabalhos que demonstram sua essencialidade para algumas plantas. O ch (Camellia sinensis ) absorve alumnio ao longo de seu ciclo e a concentrao de Al nas folhas aumenta com a idade. Quando o alumnio aplicado na soluo nutritiva contendo P, o crescimento do ch foi bastante estimulado pela melhor absoro e utilizao do fsforo pela planta. Num experimento em soluo nutritiva constatou-se que sob baixa concentrao de Al na soluo (5,0 mg L-1) houve estmulo do crescimento das razes de ervas e gramneas, tais como: Deschampsia flexuosa, Alocopercus pratensis, Festuca pratensis e Lolium perenne. (MACHADO, 1997) Sob certas condies e para espcies de plantas com alta tolerncia ao alumnio, baixos nveis deste metal podem causar efeitos benficos ao crescimento de plantas superiores. Entretanto, estes efeitos so considerados como exceo, onde a regra o efeito negativo do alumnio no crescimento de plantas em solos de baixo pH.

3.2.4. Toxicidade do Alumnio para o homem

A evoluo da vida, dentro de uma biosfera rica em alumnio - o terceiro elemento mais abundante da crosta terrestre - no foi bem sucedida no desenvolvimento de uma funo - 37 -

biolgica til deste metal. Uma variedade de efeitos fisiolgicos prejudiciais tm sido relacionados intoxicao por alumnio em pacientes com problema renal crnico. Estudos recentes sugerem que a ingesto diria de gua com excesso de alumnio causa da deposio deste elemento no crebro, levando ao desenvolvimento da doena de Alzheimer, memria alterada, convulses, uremia, mau de Shaver (pulmo), esclerose lateral e, tambm, riscos de cncer (pulmo e pncreas) e leucemia amiotrfica (OLIVEIRA et al., 2005). O alumnio no sistema aqutico, predominantemente, encontra-se como Al3+ ou aquocomplexos, nas formas monomricas, polimricas, coloidais, entre outras (SCHINTU et al., 2000). Os padres internacionais de guas potveis que normatizam a presena do alumnio no so concordantes, com valores altamente variveis quanto ao mximo tolervel em guas potveis. Por outro lado, existem diferenas significativas quanto toxicidade do Al em guas, dependendo da espcie qumica presente (BERTHON, 2002). A toxicidade de alumnio em tecidos neurais bem documentada. Os ossos tambm podem ser afetados pela acumulao de alumnio. A exposio da populao ao Al origina-se principalmente pela ingesto de alimentos, bebidas, e preparaes farmacuticas, mas a baixa absoro intestinal em adultos saudveis minimiza o problema. Os efeitos txicos so preocupantes para as crianas porque a regio gastrointestinal imatura de uma criana pode ser mais permevel ao Al que o de um adulto. Nos ltimos anos houve um interesse pela anlise de alumnio em comidas, particularmente, comida infantil (PLESSI, 1997). As diversas fontes de alumnio para o homem incluem o ar, desodorantes antitranspirantes, cosmticos, aditivos alimentares, chs, a prpria gua consumida, sendo que essa ltima contribuiu, nos ltimos anos, com um acrscimo no contedo de alumnio em decorrncia da chuva cida e a utilizao do sulfato de alumnio nas estaes de tratamento de gua. Entretanto, uma fonte trivial (quando comparada com as demais) na ingesto de alumnio tem recebido pouca ateno: os utenslios culinrios. H mais de 50 anos conhecido que os utenslios de alumnio so vulnerveis degradao, principalmente por alimentos de pH cido. Os estudos indicam que vrios so os fatores que influenciam a migrao do alumnio do utenslio: a qualidade da liga de alumnio utilizada pela indstria, o tempo de uso do utenslio, o tempo da durao da coco dos alimentos, o pH do alimento, a presena de sal ou acar, entre outros. - 38 -

Utenslios de alumnio, utilizados na preparao de molho de tomate, podem contribuir com um acrscimo de 4,0 mg em cada poro servida. O caf, quando preparado em utenslio de alumnio apresentava um considervel acrscimo do metal. Quintaes (2000) refora a ocorrncia da contaminao dos alimentos com alumnio migrante de utenslios culinrios, ao avaliarem o nvel desse metal contido em alimentos cidos preparados em panelas de alumnio. Os resultados obtidos mostraram que os utenslios de alumnio, freqentemente utilizados pela populao, so indubitavelmente fontes desse metal na dieta. Em relao ao tempo de uso da panela, foi observado atravs de testes com gua potvel que, utenslios novos possuem uma migrao maior de alumnio no ponto de ebulio comparada a de utenslios usados. Entretanto, quando o tempo se prolonga para 15 ou 30 minutos de fervura, o comportamento de ambos os utenslios (novos e usados) similar no que diz respeito dissoluo do alumnio. Neste sentido, verificou-se tambm que preparaes cidas como molho de tomate que levam mais que 15 minutos de cozimento, tendem a acumular mais alumnio do que outras preparaes. A quantidade do alumnio adicionado ao alimento durante a coco em utenslios deste material chega a ser de at 0,7mg/100 g de alimento. Praticamente todos os estudos sobre migrao de alumnio dos utenslios para os alimentos deixam claro que estes fornecem uma importante contribuio na quantidade do metal consumida pelo homem, mas a ligao entre esta fonte e os efeitos biolgicos possveis ainda confusa. Em todo caso, recomendvel evitar estes utenslios no preparo, na coco e no armazenamento dos alimentos. A ingesto de alumnio elevada, sendo que a dieta habitual fornece de 5 a 10mg de alumnio por dia, que so quase totalmente eliminados via gastro-intestinal, a pequena frao reabsorvida eliminada pelos rins. Apesar disso, a indstria de alimentos, mediante a utilizao de determinados aditivos alimentares, pode aumentar claramente a quantidade de alumnio nos alimentos processados. Assim sendo, o contedo de alumnio nos alimentos apesar de pequeno, torna-se suscetvel a variaes. Sua concentrao mais elevada encontrada em conservas de picles e de queijos, alm do fermento. Portanto, dependendo dos hbitos alimentares individuais, a ingesto de alumnio pode ser mais elevada do que a mdia estimada. Os efeitos resultantes da ingesto de alumnio dependem obviamente da absoro, esta, por sua vez, depende da forma qumica do metal, sendo vrios os fatores responsveis pela - 39 -

biodisponibilidade do alumnio. Estudos mostram que cerca de 75 a 95% do alumnio ingerido eliminado na urina e nas fezes, e o restante absorvido e depositado em vrios rgos como os ossos e pulmes (QUINTAES, 2000). Medicamentos como anticidos, contendo o hidrxido de alumnio, podem tambm contribuir para um aumento na ingesto de alumnio pelos usurios destas drogas. Por outro lado, pacientes com insuficincia renal crnica esto constantemente expostos a altos nveis de alumnio atravs da gua utilizada na dilise e, muitos destes apresentam efeitos decorrentes dessa exposio, tais como anemia, osteomalcia e encefalopatia. O aumento do nvel de alumnio no organismo foi sugerido como uma possvel causa para o aparecimento de hipertenso arterial (OLIVEIRA et al. 2005).

3.3. Reagentes orgnicos quelantes

Quando um on metlico ou uma substncia qualquer se combina com um grupo doador de um par de eltrons, o composto resultante chamado de complexo ou composto de coordenao. Complexo o produto de uma reao entre um cido de Lewis e uma base de Lewis. A base de Lewis possui um par de eltrons disponvel o qual doado para o cido de Lewis e o par de eltrons, no produto resultante, fica compartilhado por ambas as espcies qumicas. Por exemplo, a formao do on alumnio hidratado quando um sal de alumnio se dissolve em gua uma reao cido-base de Lewis:

Al3+ (aq)+ 6 H2O (l) cido Base

Al(H2O)63+(aq) Complexo

Nos complexos, os ligantes ligam-se ao tomo metlico central por apenas um nico ponto, ou seja, uma nica ligao para cada ligante-tomo central. Quando um ction metlico se liga a uma substncia que possui dois ou mais grupos doadores de pares de eltrons (grupamentos contendo pares isolados de eltrons), de maneira

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que se forma uma ou mais estruturas em anel, o composto resultante chamado de quelato ou quelato do metal e a substncia doadora de eltrons denominada agente quelante. Assim sendo, alguns ligantes podem ser ligados ao tomo metlico central por mais de um ponto de ligao. Os complexos deste tipo so chamados de quelatos e os ligantes agentes quelantes ou ligantes de quelao. Desde o sculo XVIII, os reagentes orgnicos cumprem um importante papel na qumica analtica. Desde ento, as substncias orgnicas so utilizadas no controle da acidez, como solventes, entre outros. Mas foi somente no sculo XIX que ocorreu a consolidao do uso desses reagentes na anlise inorgnica. Os reagentes orgnicos possuem uma ampla aplicao em qumica analtica. No passado, eles basicamente foram usados em determinaes gravimtricas e volumtricas, principalmente sob a forma de indicadores. Mais tarde, eles foram utilizados, direta ou indiretamente, em anlises instrumentais, principalmente na tcnica espectrofotomtrica de absoro molecular. Hoje, constantemente so desenvolvidas novas tcnicas analticas e sintetizados novos reagentes, ao mesmo tempo em que se desenvolvem novas aplicaes para os reagentes j existentes, principalmente para a dosagem de quantidades cada vez menores de metais (DANTAS, 2004), entre eles o alumnio. Dentre os muitos usos dos reagentes orgnicos em qumica analtica, podemos destacar o uso dos mesmos na anlise de metais em concentraes traos. Entre estes metais, destacam-se os metais de transio externa (bloco d), presentes na maioria dos materiais e matrizes analisadas no dia-a-dia dos qumicos analticos. Os metais de transio externa so elementos cujo subnvel de maior energia de seus tomos o subnvel d, variando de um a dez eltrons. Isso confere a esses metais algumas propriedades importantes como a capacidade de formar complexos. Sobre essa capacidade, importante destacar a formao dos quelatos (do grego chele = garra) que um caso particular de complexao. Alguns reagentes orgnicos possuem dois ou mais grupos doadores de eltrons, que podem compartilhar dois ou mais pares de eltrons com um nico on metlico, pela coordenao simultnea desses pares de eltrons com um nico on metlico central. Esses ligantes so geralmente conhecidos como ligantes multidentados, e geralmente classificados em bidentados, tridentados, e assim por diante. Os ligantes multidentados complexam os ons metlicos formando anis heterocclicos conhecidos como quelatos, nos quais o ction

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metlico ocupa a posio central do anel. Os ligantes bidentados aparecem com maior freqncia. Uma das propriedades mais notveis dos quelatos a sua notvel estabilidade. Eles se assemelham aos anis aromticos. A estabilidade do quelato to maior quanto (a) mais elevada a carga, (b) menor o raio e (c) maior afinidade eletrnica do tomo central.

Alizarinas As alizarinas, corantes caracterizados pela presena de substituintes ligados estrutura central de uma antraquinona ou de um azo-composto Figura 8, constituem uma classe de compostos orgnicos que tem despertado um crescente interesse da comunidade cientfica.

Figura 8. Frmulas estruturais de algumas alizarinas. O 1,2-Dihidroxiantraquinona-3-sulfonato de sdio (VAS), tambm denominado de Vermelho de Alizarina S, Carmina Alizarina ou Alizarina S, pertence ao grupo dos corantes hidroxiantraquinonas. facilmente solvel em gua e etanol, mas insolvel em alguns solventes orgnicos, principalmente em ter. Apresenta pKa2 (-OH) = 5,39 e pKa3 (-OH) = 10,72 a 25C. Os corantes hidroxiantraquinnicos possuem um grupo hidroxila nas posies 1 e 2, tm um grupamento atmico similar ao encontrado na forma enlica de 1,3 dicetonas, e, conseqentemente so capazes de formar quelatos com metais e cidos. O grupamento sulfnico no funciona como parte reativa da molcula, mas serve apenas para aumentar a solubilidade do composto. A frmula estrutural do reagente apresentada na Figura 8 (SANTOS JNIOR, 2001).

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De acordo com o pH do meio, o VAS apresenta as formas ionizadas mostradas na Figura 9.

Figura 9. Estrutura do VAS em funo da variao de pH (SANTOS JNIOR, 2001). Dentre os inmeros trabalhos existentes na literatura utilizando as alizarinas, destacam-se as pesquisas nas reas da qumica ambiental, analtica, orgnica e inorgnica. As propriedades complexantes tm sido as responsveis pela larga aplicabilidade destas espcies na determinao de metais associados a diversas tcnicas analticas, tais como, espectrofotometria, polarografia, voltametria e cromatografia. Uma outra grande aplicao das alizarinas como indicador cido-base. A estrutura do complexo de Alumnio com o Vermelho de alizarina S proposta apresentase na Figura 10.

Figura 10. Estrutura proposta para o complexo Al-VAS.

8-Hidroxiquinolina A 8-Hidroxiquinolina ou oxina, 8HQ (Figura 11) e muitos de seus derivados foram extensivamente usados como reagentes de quelantes dentro qumica analtica na qual eles ocupam o segundo lugar depois de EDTA. - 43 -

Figura 11. Frmula estrutural da 8-Hidroxiquinolina. Os dois campos principais de aplicao de 8HQ e seus derivados so extrao de ons metlicos e determinao fluorimtrica de ons de metais. Um das caractersticas distintivas desta famlia sua alta versatilidade graas solubilidade e a seletividade com os substituintes suportados pela estrutura da 8HQ. Os quelatos metlicos com 8HQ so muito pobremente solveis em gua, mas eles podem ser solubilizados em solventes orgnicos tal como clorofrmio. Um substituinte sulfnico permite a solubilizao do ligante e complexos em gua. Assim 8-hidroxiquinolina5-sulfonato de sdio (8HQS) e seus derivados so extensamente usados em meio aquoso. Outra caracterstica da famlia da 8HQ o comportamento fluorognico das combinaes, enquanto permitindo determinao fluoromtrica de ctions metlicos (BARDEZ e DEVOL, 1997). A estrutura proposta para o complexo de Alumnio com a 8-Hidroxiquinolina apresentada na Figura 12.

Figura 12. Estrutura proposta para o complexo Al-8HQ.

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3.4. Mtodos Voltamtricos

3.4.1. Fundamentos
A voltametria compreende um grupo de mtodos eletroanalticos nos quais a informao sobre o analito obtida atravs de medidas de corrente em funo do potencial aplicado em condies de polarizao do eletrodo de trabalho. Geralmente, para aumentar o efeito de polarizao, os eletrodos de trabalho na voltametria so microeletrodos com grandes reas superficiais (SKOOG, 2002). Historicamente, o campo da voltametria se desenvolveu a partir da polarografia, que um tipo particular de voltametria, que foi descoberta pelo qumico tcheco Jaroslav Heyrovsky, no incio da dcada de 20 do sculo passado. A polarografia, que ainda um ramo importante da voltametria difere dos outros tipos de voltametria porque o microeletrodo tem a forma de um eletrodo gotejante de mercrio (do ingls, dropping mercury electrode, DME). A voltametria largamente usada pelos qumicos inorgnicos, fsico-qumicos e bioqumicos para finalidades no analticas, incluindo estudos fundamentais de processos de reduo e oxidao em vrios meios, processos de adsoro em superfcies, mecanismos de transferncia de eltrons em superfcies de eletrodos quimicamente modificados (SKOOG, 2002). Para a obteno das medidas de corrente, utiliza-se um potenciostato para aplicar a diferena de potencial em funo de um eletrodo de referncia. Este permanece com o potencial estvel enquanto a corrente medida flui entre o eletrodo de trabalho e um eletrodo auxiliar. Os eletrodos encontram-se em uma clula voltamtrica imersos em um eletrlito de suporte. O eletrlito de suporte uma soluo condutora inerte na faixa de potencial de trabalho e, geralmente, a concentrao desse eletrlito bem elevada em relao concentrao do analito, para minimizar a corrente de migrao. Com relao aos eletrodos de trabalho, existem diferentes tipos, variando desde o material empregado na sua construo, at sua morfologia e dimenses. Um eletrodo bastante usado em voltametria o eletrodo de mercrio, podendo ser empregado como eletrodo de gota pendente de mercrio (HMDE, do ingls Hanging Mercury Drop Electrode) ou como gota esttica de mercrio (SMDE, do ingls Static Mercury Drop Electrode), na qual a gota permanece imvel na ponta do capilar e o voltamograma registrado nessa nica gota. Ainda - 45 -

pode ser usado na forma de filme de mercrio (MTFE, do ingls Mercury Thin Film Electrode), sendo que, o filme depositado eletroquimicamente em superfcies slidas, como platina e carbono vtreo (BRETT e BRETT, 2000). O emprego do eletrodo de mercrio restrito regio catdica e, dependendo do eletrlito, pode ser empregado entre +0,3 V a -2,3 V vs eletrodo de calomelano saturado (SCE, do ingls Satured Calomelan Electrode). Nessa regio de potencial ocorrem as reaes eletrdicas da maioria dos ons metlicos e de grande nmero de espcies orgnicas, o que vem a justificar o seu amplo emprego como eletrodo de trabalho nas ltimas dcadas em aplicaes diversas (PEREIRA, 2005). Quando se aplica uma diferena de potencial entre o eletrodo de trabalho e o auxiliar, a corrente que aparece registrada em funo desta diferena de potencial. Na presena de uma espcie eletroativa, a corrente aumenta se a diferena de potencial for suficiente para reduzir ou oxidar a espcie. A corrente limite, controlada por difuso (id), proporcional concentrao da espcie eletroativa e pode ser representada pela equao de Ilkovic Eq (1) (HARRIS, 1999). id = 607 n D m2/3 t 1/6 C Onde: n: nmero de eltrons envolvidos; C: concentrao da espcie eletroativa na soluo (mmol/L); D: coeficiente de difuso (m2s-1); m: taxa de escoamento do mercrio (mg s-1); t: tempo de gota (s). Alm da difuso, existem outros dois processos de transferncia de massa entre a soluo e a superfcie do eletrodo. Um desses processos a migrao de partculas carregadas em um campo eltrico. O outro a conveco, um processo mecnico, que ocorre devido movimentao da soluo (usando-se um agitador magntico e uma barra magntica, por exemplo). O processo de migrao em um campo eltrico minimizado pela adio de um eletrlito inerte (eletrlito de suporte) soluo em uma concentrao pelo menos 100 vezes maior do que a substncia eletroativa. O processo de conveco eliminado mantendo-se a soluo em repouso, sem agitao. Assim, apenas o processo de difuso ser responsvel pelo - 46 Eq (1)

transporte de massa, e a corrente medida, id, pode ser efetivamente expressa como corrente de difuso. Um nmero considervel de novas tcnicas voltamtricas foram desenvolvidas para suplementar a polarografia de corrente contnua convencional, como: pulso normal, pulso diferencial, de onda quadrada, tcnicas de voltametria de redissoluo andica/catdica e a voltametria adsortiva por redissoluo.

3.4.2 Voltametria de Pulso Diferencial

O desenvolvimento das tcnicas voltamtricas de pulso diferencial e onda quadrada permitiram chegar a determinaes analticas da ordem de 10-7 a 10-8 mol L-1. Entretanto, na moderna anlise de traos necessrio chegar-se a limites de deteco abaixo de 10-8 mol L-1,o que no se consegue com as medidas voltamtricas usuais. Uma alternativa para se obter limites de deteco to baixos, a utilizao de processos de pr-concentrao da espcie a ser determinada, de maneira que a corrente faradaica possa aumentar, suplantando a de fundo, e chegar-se a limites inferiores a 10-7-10-8 mol L-1. Na anlise voltamtrica a pr-concentrao apresenta a vantagem de poder ser feita no prprio eletrodo de trabalho, sendo, sob este aspecto, bastante fcil e conveniente (DOWNARD et al., 1996). Na voltametria de pulso diferencial, pequenos pulsos so sobrepostos em uma rampa linear de potencial como est mostrado na Figura 13. A altura do pulso chamada de amplitude de modulao. O pulso, com valores de 5 a 100 mV de amplitude, aplicado durante os ltimos 60 ms da vida da gota de mercrio. A gota ento desalojada mecanicamente do capilar. A corrente medida uma vez antes do pulso ser aplicado e novamente nos ltimos 17 ms de durao do pulso. O polargrafo subtrai a segunda corrente da primeira e plota essa diferena versus o potencial aplicado, como mostra a Figura 14 (HARRIS, 1999).

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Figura 13. Sinal de excitao para polarografia de pulso diferencial (SKOOG, 2002).

Figura 14. Voltamograma de um experimento de polarografia de pulso diferencial (SKOOG, 2002). Uma vantagem do polarograma em forma de pico que mximos polarogrficos individuais podes ser observados para substncias com potenciais de meia-onda que o diferem entre si por valores pequenos, como 0,04 a 0,05 V. Ao contrrio, a polarografia clssica e de pulso normal requerem uma diferena de potencial de cerca de 0,2 V para resoluo das ondas. Mais importante, entretanto, que a polarografia de pulso diferencial aumenta a sensibilidade do mtodo polarogrfico, conforme apresentado na Figura 15.

Figura 15. a) Voltamograma de pulso diferencial. b) Polarograma de corrente contnua. - 48 -

A maior sensibilidade da polarografia de pulso diferencial pode ser atribuda a duas fontes. A primeira um aumento da corrente faradaica e a segunda um decrscimo na corrente de carga capacitiva no-faradaica (SKOOG, 2002). Cabe ressaltar que apenas a corrente faradaica proporcional concentrao do analito.

3.4.3. Voltametria de Redissoluo

Nos ltimos anos, houve uma demanda crescente pela deteco e quantificao de componentes traos em matrizes complexas. A conscientizao de efeitos prejudiciais de alguns elementos traos em matrizes como alimentos, guas naturais, efluentes industriais e esgotos domsticos, fez com que surgissem rigorosas legislaes pblicas direcionadas ao monitoramento destes componentes em amostras a nveis de parte por bilho (g L-1). Para isso, mtodos analticos mais sensveis eram necessrios. Uma nova tcnica voltamtrica destinada anlise de traos foi desenvolvida, a voltametria de redissoluo. Os mtodos de redissoluo compreendem uma variedade de procedimentos eletroqumicos que tm em comum uma etapa inicial caracterstica. Em todos esses procedimentos, o analito depositado em um microeletrodo, usualmente a partir de uma soluo sob agitao. Depois de um tempo medido com preciso, a eletrlise interrompida, cessa-se a agitao e o analito depositado determinado atravs de um procedimento voltamtrico. Nos mtodos de redissoluo andicos, o microeletrodo comporta-se como o ctodo durante a etapa de deposio e como nodo durante a etapa de redissoluo, quando o analito oxidado de volta sua forma original. Em um mtodo de redissoluo catdico, o microeletrodo comporta-se como o nodo durante a etapa de deposio e como ctodo durante a redissoluo do analito. A etapa de deposio equivale a uma pr-concentrao eletroqumica do analito, isto , a concentrao do analito na superfcie do microeletrodo muito maior do que no restante da soluo. Devido a essa etapa de pr-concentrao, os mtodos de redissoluo produzem limites de deteco muito mais baixos que os demais procedimentos voltamtricos (SKOOG, 2002).

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Voltametria de Redissoluo Andica Uma das tcnicas que se utiliza de processos de pr-concentrao a voltametria de redissoluo andica (do ingls, Anodic Stripping Voltammetry, ASV), muito utilizada na determinao de metais pesados, uma vez que vrios deles podem ser depositados no eletrodo de mercrio atravs de eletrlise de solues de seus ons (Figura 16). Nesta tcnica a etapa de pr-concentrao consiste de uma eletrodeposio a um potencial constante e controlado da espcie eletroativa sobre um eletrodo estacionrio. Esta etapa seguida por uma etapa de repouso e uma de determinao, sendo que esta ltima consiste na redissoluo de volta soluo da espcie anteriormente eletrodepositada.

Figura 16. (a) Sinal de excitao para determinao de Cd2+ e Cu2+ por redissoluo. (b) Voltamograma de redissoluo. (SKOOG, 2002). Etapa de deposio: A deposio feita eletroliticamente aplicando-se o potencial de deposio (Ed) (Figura 7a) durante um determinado tempo e com agitao da soluo. O tempo de deposio (td) escolhido em funo da espcie eletroativa, ficando geralmente entre 30s e 3 min. Tempos muito longos devem ser evitados, pois podem produzir sinais fora da regio de proporcionalidade entre a corrente e a concentrao. A agitao faz com que o transporte de massa por conveco mantenha a concentrao da espcie eletroativa junto superfcie do eletrodo igual do resto da soluo, permitindo um depsito maior do metal em um dado tempo de deposio do que se o processo de transporte de massa fosse difusional. Essa agitao deve ser feita velocidade constante e controlada com preciso. Nesta etapa, ocorrer ento a reduo do metal e conseqentemente a sua deposio sobre a superfcie do eletrodo. Para o caso de eletrodos de mercrio: - 50 -

Mn+ (aq)+ ne- M(Hg) (s)

Etapa de repouso ou tempo de equilbrio: Aps completar-se a deposio do metal, a agitao cessa e durante alguns segundos deixa-se a soluo em repouso, para que a concentrao do metal depositado homogeinize-se, entrando em equilbrio na superfcie do eletrodo. No eletrodo de gota de mercrio esse equilbrio atingido aps a concentrao do metal uniformizar-se pela sua difuso na gota. O tempo correspondente a esta etapa chamado de tempo de repouso (tr) (Figura 7 a). Etapa de Redissoluo: Nesta etapa faz-se a varredura de potencial na direo andica onde o voltamograma ser registrado, obtendo-se o sinal analtico de acordo com a tcnica voltamtrica escolhida (pulso diferencial ou onda quadrada, por exemplo). O metal ou metais depositados se redissolvero quando os seus potenciais de pico forem atingidos (Figura 5b):

M(Hg) (s) Mn+(aq) + ne- + Hg (l)

Voltametria Adsortiva por Redissoluo Na voltametria adsortiva, a pr-concentrao feita pela adsoro da espcie eletroativa na superfcie do eletrodo. No caso de metais isto feito atravs de seus ons complexos. Adiciona-se soluo contendo o on metlico um complexante adequado e o complexo formado (metal-ligante) que ser acumulado junto superfcie do eletrodo. Dessa maneira a pr-concentrao no depende da solubilidade do metal no mercrio, como no caso da voltametria de redissoluo convencional, e metais pouco solveis (no mercrio) podero ser determinados. Devido a essas caractersticas, a tcnica tambm aplicvel a um nmero ilimitado de substncias orgnicas, bastando que elas apenas tenham propriedades superfcie-ativa, para poderem ser adsorvidas na superfcie do eletrodo de trabalho, e que sejam, evidentemente, eletroativas. O esquema de pr-concentrao (Figura 17) utilizado na voltametria adsortiva por redissoluo (AdSV, do ingls, Adsorptive Stripping Voltammetry) anlogo ao da voltametria de redissoluo convencional (ASV). - 51 -

Etapa de pr-concentrao: Os parmetros usados nesta etapa so basicamente os mesmos para a ASV, sendo apenas diferentes os processos de acumulao e de redissoluo. Na Figura 8 est representado esquematicamente o procedimento usado na voltametria adsortiva por redissoluo, para a determinao de um metal M na presena do ligante L, formando o complexo a ser adsorvido MLn. Pode-se usar um potencial anlogo ao potencial de deposio da ASV, o potencial de acumulao (Eac), para obter-se uma pr-concentrao mais seletiva, embora isso no seja necessrio em muitos casos. Aqui tambm existir um tempo de acumulao (tac), anlogo ao td da ASV, que tambm cronometrado, durante o qual a espcie de interesse ser adsorvida sobre a superfcie do eletrodo. As reaes envolvidas nesta etapa so:

Mn (aq) + nL MLn (aq) MLn (aq) MLn (ads).

Figura 17. Representao esquemtica do procedimento usado na voltametria adsortiva por redissoluo mostrando as etapas para a acumulao e redissoluo na determinao de um metal M em presena de um ligante L. Etapa de redissoluo: Como nesta tcnica o processo envolvido na interface eletrodosoluo a adsoro, no h a necessidade de um tempo de repouso ou de equilbrio, como no caso da ASV, onde ocorre eletrodeposio de metais, e difuso dos mesmos no mercrio. Assim, aps terminar a pr-concentrao, pode-se proceder a redissoluo, fazendo-se a varredura usualmente na direo catdica, usando-se a tcnica voltamtrica adequada. Aqui tambm ser obtido um pico, como no caso da ASV, e a reao eletrdica pode ser representada por: - 52 n+

MLn (ads). + ne- M0 + nL (aq)

Como o metal foi adsorvido, ele ser reduzido a partir do ponto onde o potencial atingir o valor do potencial de decomposio, e o valor de potencial de pico Ep tambm correspondente ao E1/2 da onda polarogrfica. Assim, a varredura de potencial aqui ser catdica, e no andica como no caso da ASV, onde o metal pr-concentrado ser reoxidado. Na voltametria adsortiva por redissoluo tambm h a possibilidade do ligante sofrer reduo ou oxidao no processo de redissoluo do complexo adsorvido, se o ligante usado for uma espcie eletroativa. Assim, o seu sinal tambm poder ser usado para a determinao do metal. Para o caso de substncias orgnicas o processo anlogo.

3.5. Mtodos Instrumentais

Diversas tcnicas analticas instrumentais foram reportados na literatura para a determinao de traos de metais como o alumnio em matrizes diversas, destacando-se entre esses, as espectrometrias de absoro atmica, a espectrofotometria de absoro molecular na regio do ultravioleta e visvel, a cromatografia lquida de alta eficincia e as tcnicas eletroanalticas, em especial a voltametria. Algumas reaes clssicas envolvendo as tcnicas espectroanalticas e eletroanalticas, na determinao de alumnio esto apresentadas a seguir.

Mtodos Espectroanalticos
Espectrofotometria Determinao de alumnio utilizando-se vermelho de alizarina S em meio acidificado com cido clordrico, soluo de cloreto de clcio e acetato de sdio. A absorvncia medida em 485 nm (FIRES, 1971). Determinao de alumnio com o complexante aluminn em meio de cido tiogliclico. A medida da absorvncia realizada em 515 nm (FIRES, 1971). O alumnio reage com Cromoazurol S em meio de soluo de cido ascrbico e tampo acetato. A absorvncia medida em 540 nm (FIRES, 1971; HAWKE, et al., 1995).

- 53 -

Determinao de alumnio com Eriocromocianina em meio de soluo tampo de acetato e cido tiogliclico. A medida da absorvncia realizada em 535 nm (FIRES, 1971; HAWKE, et al., 1995). O alumnio reage com 8-Hidroxiquinolina em meio de soluo tampo de acetato. A absorvncia medida em 410 nm (FIRES, 1971). Determinao de alumnio com o complexante violeta de pirocatecol em meio de tampo hexametilenotetramina, pH aproximadamente 6,0. A absorvncia medida em 580 nm (CLARKE, 1996). Dantas et al. (1999) propuseram um mtodo para determinao de alumnio com 1-(2hidroxi-5-sulfobenzeno)-2-naftol, o Violeta de Alizarina N em meio de tampo amoniacal pH 9,4 (3 mol.L-1), EDTA 5% e Triton-X100 1%. A absorvncia medida em 607nm.

Fluorimetria Est baseado no fato que o vermelho de alizarina S pode emitir fluorescncia 80C por

30 min de forma intensa e estvel, e Al3+ pode catalisar o clorato de potssio que oxida o vermelho de alizarina e formar complexo no-fluorescente (QIN, el al., 2005). Camadas do complexo Al-Hidroxiquinolina foram preparadas por evaporao trmica. A preparao foi realizada presso aproximadamente 2 x 105 Torr e temperatura da fonte de Al-Hidroxiquinolina aproximadamente 430 K. Medidas de transmitncia foram executadas na faixa espectral de 400 nm a 1200 nm (DALASINSKI et al., 2006).

Mtodos Eletroanalticos
Potenciometria Utilizao de um eletrodo on-seletivo para a determinao potenciomtrica de Alumnio em meio de fluoreto (PICCIN e FATIBELLO-FILHO, 2004). Downard et al. (1996) investigaram propriedades potenciomtricas do sistema Al-4nitrocatecol. Resultados revelaram que 4-nitrocatecol um ligante satisfatrio para determinao amperomtrica de Al nas concentraes ambientais.

- 54 -

Voltametria Qiong et al. (2006) estudaram o comportamento eletroqumico do complexo de alumnio-

cupferron, onde o alumnio e o cupferron (N-nitrofenilhidroxiamina de amnio) formaram um complexo em 0,4 mol/L (soluo de NH4)2SO4. O potencial de acumulao de 0.95 V (vs. SCE) foi aplicado. A curva de resposta foi registrada efetuando uma varredura de potencial direo negativa e um pico em -1.18 V (vs. SCE) foi registrado. Este complexo foi adsorvido em eletrodo de gota de mercrio pendente (HMDE) gerando uma corrente de pico. A corrente de pico e a concentrao de alumnio apresentou relao linear na faixa de 4,0 x 10-82,0 x 10-9 g mL-1. Kefala et al. (2005) tambm avaliaram o uso do cupferron na determinao de alumnio. Este trabalho informa o uso da voltametria adsortiva (AdSV) para a determinao de alumnio em um eletrodo disco-rotatrio coberto com um filme de bismuto. ons Al3+ na amostra eram complexados com cupferron e o complexo foi acumulado por adsoro na superfcie do eletrodo modificado. Utilizando o morin (3,5,7,2,4-pentahidroxiflavona), Maali et al.(1997) determinaram alumnio em cimento. O complexo Al-morin formou-se em pH 7,00 em tampo acetato/HEPES, potencial de acumulao -0,4 V. O pico do complexo foi observado em -1,1V (vs. Ag/AgCl). A corrente de pico e concentrao de alumnio obteve relao linear na faixa de 1-15 g L-1. Arancibia e Muoz (2007) propuseram um mtodo sensvel e seletivo para a determinao de alumnio baseado na reao do metal com pirogaliol vermelho (PR) na presena de tetrafluoroborato de tetrabutilamonio (TBATFB) para formar um complexo que adsorvido no eletrodo de mercrio. A complexao de alumnio rpida e nenhum perodo de espera ou aquecimento da amostra requerido. A reduo do complexo acumulado obtido variando-se o potencial na direo de catdica. Os melhores parmetros experimentais foram pH 8,5, (tampo de NH3/NH4Ac), potencial de acumulao -0,60V vs Ag/AgCl. Uma resposta linear observada na faixa de 0,030,0 g L-1, com um limite de deteco de 1,0 gL-1. Opydo (1997) descreveu um mtodo para a determinao voltamtrica de alumnio em amostras de rvores utilizando o complexante vermelho de alizarina S (ou 1,2 dihidroxi antraquinona 3- sulfonato de sdio). O complexo formado em meio de tampo NH3/NH4Cl em pH = 8,2, o potencial de acumulao aplicado -0,7 V e o pico de reduo do complexo observado em -0,9 V. - 55 -

Wang et al. (2001) descreveram um procedimento eletroqumico sensvel para a especiao de alumnio guas naturais usando violeta de solocromo RS (VSRS) como agente analtico. O mtodo est baseado na afinidade diferente do Al por VSRS e matria orgnica presente em guas naturais em dois valores de pH: 5,2 e 8,5. A frao monomrica livre do Al (principalmente Al inorgnico) determinada em pH 5,2, empregando-se um potencial de acumulao de -0,33V, concentrao de VSRS de 1,010-6 mol L-1, concentrao de NH4AcHClO4 0,17 mol L-1, enquanto a frao de Al total monomrico determinada em pH 8,5 empregando-se potencial de acumulao -0,47 V, concentrao de VSRS de 3,010-6 mol L-1 e concentrao de NH4Ac-NH3H2O 0,17 mol L-1. Downard et al. (1996) realizaram um estudo voltamtrico e especiao dos complexos de alumnio com catecol e vermelho de alizarina (VA). Utilizaram eletrodos estticos e rotatrios. Os potenciais de oxidao no dependeram da concentrao dos ons Al3+. Para os sistemas Alcatecol e Al-VA, os complexos observados foram eletroativos. Algumas aplicaes de alguns mtodos instrumentais, na determinao de alumnio, assim como de outros metais em diferentes matrizes, esto apresentadas na Tabela 2. Tabela 2. Alguns mtodos de determinao de elementos. Elementos Pb, Cu, Fe Al Cu, Pb, Cd, Zn, Sb Zn, Cd, Pb , Cu As(III), As(V) Pb Al Pb Cd, Cu, Pb, Zn Al, Mn Cd, Ni, Hg, Pb Cd, Ni, Hg, Pb Al, Zn Matriz Tcnica SWV HPLC DPASV DPASV HPLCHGICP-MS SWV GFAAS DPASV GFAAS ETAAS ICP-OES ICP-OES FAAS FAAS ETAAS UN-ICP-OES ASV ASV AAS - 56 gua Vinho Alimentos Ovo gua de rio Peixe (tilpia) Cerveja Sangue Plantas medicinais Cabelo Frutos do mar gua Alimentos para crianas Mg, Fe, Zn Leite de vaca Cd, Cr, Pb, Ni gua do mar Cu, Fe, Mg, Mn, Zn Leite humano Al Po Al Biscoito Fe, Mn, Zn, Cu, Pb, Peixes Cr, Ni Referncia Paulino et al, 2008. Kelly e Blaise, 2006. Locatelli e Torsi, 2003. Fung et al, 1997. Snchez-Rodas et al, 2005. Paulino et al, 2007. Lopez et al, 1998. Jaenicke et al, 1998. Pasquale et al, 1993. Bermejo-Barrera et al, 1998. Hamilton et al, 2007. Hamilton et al, 2007. Plessi et al, 1996. Pohl e Prusisz, 2006 Komareku e Holy, 1999. Bocca et al, 2000. Qiong et al, 2006. Qiong et al, 2006. Mendil e Uluzl, 2006.

Al, Fe, Mg, Zn Al, Cd, Pb, Fe, V Al Al, Mn Al, Mn Al Cd, Cu, Pb, Zn Pd, Pt, Rh Fe, Mn, Cu, Pb, Zn Au Hg, Cd, Cu, Pb, Fe, Mg, Mn, Zn Cu, Fe, Mn, Zn, Pb Pb, Cu, Cd, Ni Cd, Pb Al

Plantas medicinais Plantas medicinais Solo Fertilizantes Acar Rochas Sedimentos de rio e solo Fumaa de veculos Plantas medicinais gua do mar Carne de frango Crebro humano gua de rio Plantas medicinais Saliva, urina e cabelo

ICP-OES UN-ICP-OES e ETAAS ICP-OES ASV ASV Potenciometria ICP-MS GFAAS, ICP-OES AAS GFAAS AAS ICP-OES e GFAAS FAAS DPASV UN-ICP-OES

Ozcan e Akbulut, 2007. Gmez et al, 2007. Dong, 1996. El-Maali et al, 2000. El-Maali et al, 2000. Saleh et al, 2000. Sastre et al, 2002. Gonalves et al, 2008. Ajasa et al, 2004. Salih et al, 2007. Demirbas, 1999. Andrsi et al, 1999. Xie et al, 2008 Mamani et al, 2005. Pacheco et al, 2007.

- 57 -

4. PARTE EXPERIMENTAL
4.1. Materiais e Mtodos 4.1.1. Equipamentos
- Balana analtica (Logen Scientific); - Cadinhos de porcelana; - Eletrodo de Ag/AgCl; - Eletrodo de carbono vtreo; - Eletrodo de gota pendente de mercrio (HMDE); - Forno mufla (EDG3P-S 7000). - Medidor de pH (Alphalab - PA 200); - Potenciostato/galvanostato Autolab GPES 663 VA Stand; - Espectrmetro de Absoro Atmica em Chama Analytikjena, Nova 300. - Lmpadas de Ctodo Oco Varian dos metais: Al, Cu, Zn, Mn e Fe. - Purificador e desionizador de gua Milli-Q (Millipore, Bedford, MA, EUA).

Voltametria de redissoluo catdica As medidas voltamtricas foram realizadas em um Potenciostato/galvanostato Autolab GPES 663 VA Stand, constitudo por trs eletrodos: eletrodo de gota pendente de mercrio (HMDE) como eletrodo de trabalho; Ag/AgCl, KCl saturado, como eletrodo de referncia e carbono vtreo como eletrodo auxiliar (Figura 18). O polargrafo acoplado a um microcomputador com sistema operacional Windows XP. A tcnica utilizada foi a voltametria de redissoluo catdica de pulso diferencial.

Figura 18. Cela votamtrica de trs eletrodos (VARGAS, 2003).

- 58 -

As medidas de pH das solues utilizadas foram realizadas em um Medidor de pH (Alphalab - PA 200). Para este fim, foi utilizado um eletrodo de vidro combinado com um eletrodo de referncia de Ag/AgCl, KCl saturado. Para as adies de volumes das solues padro e amostras cela polarogrfica utilizouse micropipeta de volume varivel de 1-100L.

4.2. Reagentes e Materiais

Preparo das solues Foram preparadas solues tampo de NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1 (pH 8,30) e de NH4OAc 0,024 mol L-1 (pH 6,80) e, tambm, solues de vermelho de alizarina S (Alizarina) 100 mg L1

, 8-hidroxiquinolina 1000 mg L-1 e Al3+ 100 mg L-1, utilizando-se gua purificada e A soluo tampo NH3/NH4Cl 0,1 mol L-1 foi preparada utilizando-se 5,3000 g (

desionizada pelo sistema Milli-Q (Millipore, Bedford, MA, EUA). 0,0001g) de NH4Cl (Ecibra) e 12,950 mL de NH3( Nuclear). Os dois reagentes foram solubilizados em gua e transferidos a um balo volumtrico de 1L, completando-se o volume com gua desionizada. A soluo de acetato de amnio 0,024 mol L-1 foi preparada pesando-se 0,9240 g deste sal (Vetec), o qual foi solubilizado em gua desionizada e transferido para balo volumtrico de 500 mL. A soluo de alizarina 100 mg L-1 foi preparada pesando-se 0,0100 g de vermelho de alizarina (Merck) que foi solubilizada em 100 mL de gua desionizada. A soluo de 8-hidroxiquinolina 1000 mg L-1 foi preparada pesando-se 0,1000 g de 8hidroxiquinolina (Merck) que foi solubilizada em 20,00 mL de etanol absoluto e transferida para balo volumtrico de 100 mL e o seu volume foi aferido com gua desionizada. A soluo de Al3+ 100 mg L-1 foi preparada diluindo-se 10 mL da soluo estoque (Al3+ 1000 mg L-1 volumtrico. (Titrisol Merck) em 90 mL de gua desionizada, utilizando-se balo

Amostras Amostras de Ch Verde (Camellia sinensis), Senne (Senna alexandrina), Carqueja (Baccharis genistelloides), Valeriana (Valeriana officinalis) e Cscara Sagrada (Rhamnus - 59 -

purshiana) foram adquiridas no comrcio local da cidade de Maring - PR, as quais foram modas e homogeneizadas utilizando-se gral e pistilo de gata. As amostras modas foram decompostas por via seca, utilizando-se cadinhos de porcelana e forno mufla, sendo calcinadas durante 10 horas, empregando-se uma temperatura de 450C. Aps calcinao, as amostras foram recuperadas utilizando-se soluo de cido clordrico 5% (v v-1). A vidraria utilizada foi previamente descontaminada anteriormente ao uso. A descontaminao foi realizada mediante imerso do material em banho de cido ntrico 10 % v v-1, durante 24 horas. Aps este perodo, o material foi abundantemente lavado com gua desionizada.

4.3. Otimizao dos parmetros voltamtricos

Para que os parmetros timos da voltametria adsortiva de redissoluo catdica (ACSV) de pulso diferencial tais como, potencial de acumulao, tempo de acumulao, tempo de equilbrio, velocidade de varredura e amplitude de pulso fossem investigados, foram estudadas previamente, as condies de obteno dos complexos de alumnio com alizarina e 8hidroxiquinolina. Para tanto, foram investigados o eletrlito de suporte e a fora inica mais adequada, testando-se a eletroatividade e a capacidade adsortiva dos complexos. Para o complexo Al-Alizarina, os parmetros da ACSV foram avaliados adicionando-se cela voltamtrica: 20,00 mL de soluo do eletrlito de suporte (tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH 8,30), 100 L da soluo de vermelho de alizarina 100 mg L-1 e 40 L da soluo de Al3+ 10 mg L-1. Para o complexo Al-8-Hidroxiquinolina, os parmetros da ACSV foram avaliados adicionando-se cela voltamtrica: 20,00 mL de soluo do eletrlito de suporte (tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80), 150 L da soluo de 8-Hidroxiquinolina 1000 mg L-1 e 40 L da soluo de Al3+ 10 mg L-1.

4.4. Anlise quantitativa de Al nas amostras por ACSV

A soluo da cela voltamtrica foi desareada com nitrognio por 5 min, antes da realizao das medidas, as quais foram realizadas utilizando-se um eletrodo de gota pendente - 60 -

de mercrio (HMDE) como eletrodo indicador ou de trabalho, e como eletrodos de referncia e auxiliar foram empregados os eletrodos de Ag/AgCl e carbono vtreo, respectivamente. Para a determinao de Al em plantas medicinais, foi empregado o mtodo de adio de analito. Para o complexo Al-VAS, registrou-se um voltamograma no intervalo de -0,2 V a -0,52 V. Para o complexo Al-8-Hidroxiquinolina, registrou-se um voltamograma no intervalo de -0,05 V a -0,50 V. Em seguida, um pequeno volume de soluo padro, de concentrao exatamente conhecida, foi adicionado soluo com a amostra, e um novo voltamograma foi registrado. A adio de padro foi repetida trs vezes. Construiu-se a curva corrente vs concentrao do analito. O valor de interseco da curva obtida sobre o eixo X corresponde, em mdulo, concentrao do analito presente na soluo da amostra na cela voltamtrica. Todas as anlises das amostras de plantas medicinais foram realizadas em triplicata.

4.5. Validao do mtodo ACSV

Para a validao dos mtodos desenvolvidos e otimizados, foram avaliados os seguintes parmetros analticos: faixa linear da curva analtica, seletividade, preciso, sensibilidade, repetibilidade, exatido, efeito de matriz e limite de determinao dos mtodos (LEITE, 1998).

- 61 -

5. RESULTADOS E DISCUSSO
5.1. Voltametria adsortiva de Redissoluo Catdica
A tcnica ACVS permite a determinao do Alumnio com elevada sensibilidade. No entanto, dependendo da complexidade da matriz, interferentes podem comprometer a anlise e, portanto, parmetros como composio do eletrlito suporte, concentrao do eletrlito suporte, pH, a aplicao de potencial na forma de pulso diferencial, potencial de acumulao, tempo de acumulao, tempo de equilbrio, velocidade de varredura e amplitude de pulso necessitam ser avaliados. No menos importante o preparo da amostra que antecede a determinao voltamtrica, principalmente considerando que a matria orgnica um interferente em potencial.

5.2.

Estudos

voltamtricos

para

os

complexos

Al-VAS

Al-8-

Hidroxiquinolina 5.2.1. Efeito da concentrao do eletrlito suporte

Para os dois eletrlitos, tampo NH3/NH4Cl e tampo acetato de amnio foram avaliados a dependncia da intensidade da corrente de pico em funo da concentrao dos mesmos. Para tanto, empregou-se uma concentrao de 0,199 mg L-1do on Al3+ na cela voltamtrica e os resultados obtidos esto apresentados na Figura 19. De acordo com a Figura 19.a, pde-se observar que uma maior intensidade de corrente de pico para o complexo Al-VAS foi obtida empregando-se a concentrao de 0,10 mol L-1 do eletrlito suporte. Portanto, essa foi a concentrao utilizada para dar continuidade ao estudo do complexo Al-VAS. Como se pode observar, a Figura 19.b ilustra o comportamento da intensidade de corrente para o complexo Al-8-Hidroxiquinolina para diversas concentraes do eletrlito suporte NH4OAc, onde, entretanto, a maior intensidade foi obtida empregando-se a concentrao 0,025 mol L-1. Dessa forma, para a continuidade dos estudos voltamtricos do complexo Al-8-HQ foi utilizada a concentrao do eletrlito suporte acima mencionada. - 62 -

18

(a)

8 7 6

16

(b)

14

5 4

i (nA)

12

i (nA)
0.00 0.05 0.10 0.15
-1

3 2

10
1

0 -1

0.20

0.010

0.015

0.020

0.025

0.030
-1

0.035

0.040

Concentrao NH3/NH4Cl ( mol L )

Concentrao NH4OAc (mol L )

Figura 19. Efeito da concentrao do eletrlito suporte sobre a corrente de pico para o complexo (a): Al-VAS. Al3+ 0,199 mg L-1 + alizarina 0,496 mg L-1 + tampo NH3/NH4Cl; amplitude de pulso: 0,100V; velocidade de varredura: 25 mV s-1; potencial de acumulao: 0,300V; e (b) complexo Al-8-Hidroxiquinolina. Al3+ 0,198 mg L-1 + 8-hidroxiquinolina 7,43 mg L-1 + NH4OAc.

5.2.2. Efeito do pH do eletrlito suporte

A dependncia da intensidade de pico em funo de pH dos tampes NH3/NH4Cl e acetato de amnio est apresentada na Figura 20. Verifica-se que a intensidade de corrente de pico, tanto para o complexo Al-VAS como para o complexo Al-8-Hidroxiquinolina, dependente do pH. De acordo com a Figura 20.a, pde-se observar que uma maior intensidade de corrente de pico para o complexo Al-VAS foi obtida empregando-se o valor de pH igual a 8,20. Portanto, esse foi o pH utilizado para dar continuidade ao estudo do complexo Al-VAS. Como se pode observar, a Figura 20.b ilustra o comportamento da intensidade de corrente para o complexo Al-8-Hidroxiquinolina para diversos valores de pH, onde, entretanto, a maior intensidade foi obtida empregando-se o pH igual a 6,80. Dessa forma, para a continuidade dos estudos voltamtricos do complexo Al-8-Hidroxiquinolina foi utilizado o valor do pH acima mencionado.

- 63 -

(a)
20

4.5 4.0 3.5

(b)

15

3.0 2.5

i (nA)

i (nA)
5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 9.5 10.0 10.5

10

2.0 1.5 1.0 0.5

0.0 -0.5 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 9.5

pH

pH

Figura 20. Efeito do pH do eletrlito suporte sobre a corrente de pico para (a): complexo AlVAS. Al3+ 0,199 mg L-1 + alizarina 0,496 mg L-1 + tampo NH3/NH4Cl; amplitude de pulso: 0,100V; velocidade de varredura: 25 mV s-1; potencial de acumulao: -0,300V., (b) complexo Al-8HQ. Al3+ 0,198 mg L-1 + 8-hidroxiquinolina 7,43 mg L-1 + NH4OAc.

5.2.3. Capacidade de adsoro e eletroatividade

Foi investigada a capacidade de adsoro e a eletroatividade dos complexos Al-VAS e Al-8-Hidroxiquinolina. Os potenciais de reduo observados para os complexos Al-VAS e Al8-Hidroxiquinolina foram de -0,470V e -0,151V (vs. Ag/AgCl), conforme pode-se observar pelos perfis voltamtricos apresentados nas Figuras 21 e 22, respectivamente.
-40.0n -35.0n -30.0n -25.0n

eletrolito alizarina complexo

Pico do complexo

i (A)

-20.0n -15.0n -10.0n -5.0n 0.0 -0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

E (V)

Figura 21. Voltamograma de redissoluo catdica para: (a) tampo NH3/NH4Cl 0,1 mol L-1, pH = 8,30; (b) alizarina 0,496 mg L-1 + (a); (c) Al3+ 0,199 mg L-1 + (b); tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1.

- 64 -

-9.0n -8.0n -7.0n -6.0n

Eletrlito Suporte 8-Hidroxiquinolina Complexo Al-8-Hidroxiquinolina

i (nA)

-5.0n -4.0n -3.0n -2.0n

0.0

-0.1

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

E (V)

Figura 22. Voltamograma de redissoluo catdica para: (a) tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1 pH = 6,80; (b) 8-hidroxiquinolina 7,43 mg L-1 + (a); (c) Al3+ 0,198 mg L-1 + (b); tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1.

5.2.4. Efeito da concentrao do ligante

O efeito da concentrao do ligante Vermelho de Alizarina S (VAS) sobre as intensidades das correntes de pico e sobre os potenciais de pico do complexo apresentado na Figura 23. Observando a Figura 23.a, percebe-se que para variadas concentraes de VAS (de 0,4965 a 0,7429 mg L-1) a intensidade da corrente do pico do complexo Al-VAS permanece praticamente constante. Esse valor de intensidade de corrente reduzido drasticamente quando o valor de concentrao de VAS alcana 0,9881 mg L-1. A partir do perfil voltamtrico do complexo Al-VAS apresentado na Figura 23.b pode-se notar um acrscimo na intensidade da corrente do pico a cada medida. No entanto, a razo sinal do analito/sinal de fundo mantm o valor lquido de corrente praticamente constante a partir da concentrao de 0,4965 mg L-1. Percebe-se tambm que na concentrao do ligante em 0,9881 mg L-1, os picos adjacentes ao pico do complexo Al-VAS apresentam maior intensidade, sugerindo assim que h mais ligante livre concorrendo com o complexo superfcie do eletrodo. - 65 -

Dessa forma, optou-se utilizar a concentrao de VAS de 0,4965 mg L-1 para proceder aos demais estudos.
-40.0n
14 13 12 11 10 9

(b)
(a)
-35.0n -30.0n -25.0n

a b c

0.0498 mg L -1 0.4965 mg L -1 0.9881 mg L

-1

i (a)

c
-20.0n

i (nA)

8 7 6 5 4 3 2 1 -0.1 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8
-1

b
-15.0n -10.0n -5.0n

a
0.0 -0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5 -0.6 -0.7 -0.8 -0.9

0.9

1.0

1.1

Concentrao Alizarina (mg L )

E (V)

Figura 23. Efeito da concentrao de VAS sobre (a): altura da corrente e (b) perfil voltamtrico de reduo para o complexo Al-VAS. Al3+ 0,199 mg L-1 + alizarina + tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30. A Figura 24 ilustra o efeito da concentrao do ligante 8-Hidroxiquinolina (8-HQ) sobre as intensidades das correntes de pico e sobre os potenciais de pico do complexo. Atravs da Figura 24.a, pode-se notar que aumentando a concentrao de 8-HQ de 1.949 a 3,481 mg L-1 a intensidade da corrente do pico do complexo Al-8-HQ aumenta tambm. O valor de intensidade de corrente continua crescente, no entanto, com menor intensidade at alcanar o valor de concentrao de 8-HQ em 7,429 mg L-1. A partir do perfil voltamtrico do complexo Al-8-HQ apresentado na Figura 24.b percebe-se um acrscimo na intensidade da corrente do pico a cada medida. Porm, somente quando a concentrao de 8-HQ alcana o valor de 7,429 mg L-1, o perfil voltamtrico mostrase mais simtrico e sem distores. Dessa forma, optou-se utilizar a concentrao de 8-HQ de 7,429 mg L-1 para proceder aos demais estudos.

- 66 -

-10.0n

3.0

(a)
2.8 2.6 2.4 2.2

(b)
-8.0n

i (nA)

2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5
-1

i (A)

-6.0n

1.949 mg L -1 1.992 mg L -1 2.488 mg L -1 2.985 mg L -1 3.481 mg L -1 3.976 mg L -1 4.471 mg L L-1 4.965 mg -1 7.429 mg L

-1

-4.0n

7.0

7.5

8.0

-2.0n -0.05

-0.10

-0.15

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

Concentrao 8-Hidroxiquinolina (mg L )

E (V)

Figura 24. Efeito da concentrao de 8-HQ sobre (a): a altura da corrente e (b): Perfil voltamtrico de reduo para o complexo Al-8-HQ. Al3+ 0,198 mg L-1 + 8-HQ + tampo NH4OAc 0,024 mol L-1, pH = 6,80.

5.2.5. Efeito do potencial de acumulao

Na Figura 25 so apresentados o efeito do potencial de acumulao sobre a intensidade de corrente dos picos de reduo para o complexo Al-VAS e os voltamogramas obtidos para o complexo, respectivamente. Este efeito foi investigado sobre a faixa de potenciais (0,000 a 1,000V) para o complexo Al-VAS, conforme apresentado na Figura 25. De acordo com esta figura, a corrente de pico atingiu seu valor mximo em -0,300V, proporcionando uma maior sensibilidade para a determinao de Al, devido a uma maior acumulao do complexo. Por isso, o referido potencial foi selecionado como valor timo. A Figura 25 mostra ainda um decrscimo no sinal do pico do complexo ao variar o potencial de acumulao para valores mais negativos.

- 67 -

18.0n 16.0n 14.0n 12.0n 10.0n

(a)

-24.0n -22.0n -20.0n -18.0n -16.0n

(b)

0V -0,3 V -0,5 V -0,7 V -1 V

i (A)

8.0n 6.0n 4.0n 2.0n 0.0 0.1 0.0 -0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5 -0.6 -0.7 -0.8 -0.9 -1.0 -1.1

i (A)

-14.0n -12.0n -10.0n -8.0n -6.0n -4.0n -0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5 -0.6 -0.7 -0.8

E (V)

E (V)

Figura 25. Efeito do potencial de acumulao sobre (a): a altura da corrente para o complexo Al-VAS e (b): o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-VAS. Al3+ 0,199 mg L-1 + 0,4965 mg L-1alizarina + tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30. Na Figura 26 so apresentados os voltamogramas obtidos para o complexo Al-8-HQ sob diferentes potenciais de acumulao. De acordo com esta figura, apenas o potencial de 0,300V permitiu a obteno de um pico de reduo melhor resolvido para esse complexo. Foi verificado tambm pela figura, que medida que o potencial de acumulao aplicado torna-se mais negativo, aumenta-se a acumulao do ligante 8-hidroxiquinolina, como pode ser observado pelo aumento da intensidade do pico de reduo mostrado em aproximadamente 0,300V. Portanto, selecionou-se o potencial de acumulao de 0,300V como valor timo.
0.1 V 0.2 V 0.3 V 0.4 V 0.5 V

-25.0n

-20.0n

-15.0n

i (A)
-10.0n -5.0n 0.0 0.0 -0.2 -0.4 -0.6 -0.8 -1.0

E (V)

Figura 26. Efeito do potencial de acumulao sobre o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-8-Hidroxiquinolina: Al3+ 0,198 mg L-1 + 8-HQ 7,43 mg L-1 + tampo NH4OAc 0,024 mol L-1, pH = 6,80.

- 68 -

5.2.6. Efeito do tempo de acumulao

O efeito do tempo de acumulao sobre as correntes de pico de reduo para o complexo Al-VAS apresentado na Figura 27. De acordo com a Figura 27.a, verificado um aumento linear da intensidade de corrente com o tempo de acumulao, para a faixa de tempo de 0s a 40s. Aps o tempo de 40s, a corrente continua aumentando menos intensamente at 80s, provavelmente devido ao processo adsortivo competitivo com a alizarina livre e, aps 80s, a corrente diminuiu indicando que o equilbrio adsortivo foi atingido. Dessa forma, selecionou-se o tempo de acumulao de 40s como tempo timo. Pela Figura 27.b, pode ser observado que para o tempo de acumulao igual a 80s, os picos vizinhos ao do complexo (-0,470V) tornaram-se mais intensos, sugerindo um aumento da adsoro da alizarina na forma livre.
10 9 8 7

(a )

-22.0n -20.0n

Formao de um pico (b) 0s 20 s 40 s 80 s

-18.0n -16.0n -14.0n

i (nA)

i (nA)

5 4 3

-12.0n -10.0n -8.0n -6.0n

-4.0n
1

Pico do complexo
-0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5 -0.6

-2.0n
0 -10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 1 00 1 10

E (V)

t (s)

Figura 27. Efeito do tempo de acumulao sobre (a): a altura da corrente para o complexo e (b): o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-VAS. Al3+ 0,199 mg L-1 + alizarina 0,496 mg L-1 + tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; potencial de acumulao: 0,300V. A Figura 28 ilustra o efeito do tempo de acumulao sobre as correntes de pico de reduo para o complexo Al-8-HQ. O tempo de acumulao de 30s proporcionou a obteno de uma maior corrente de pico de reduo para o complexo e, que, para maiores tempos de acumulao foram observados menores valores de corrente. Esse resultado pode ter sido obtido devido ao fato de maiores tempos gerarem um aumento de sinal de fundo superior ao aumento do sinal de corrente correspondente reduo do complexo, conforme pode ser observado pelos voltamogramas apresentados na Figura 28.b. - 69 -

No entanto, para dar continuidade aos estudos adsortivos do complexo Al-8-HQ, optouse por utilizar o tempo de acumulao de 10s, pois o mesmo apresentou valores de sinal de fundo mais baixo, o que implica em um melhor limite de deteco do mtodo.
-8.0n
3.8

(b)

3.7

(a)

-7.0n

-6.0n
3.6

i (nA)

3.5

i (A)

-5.0n

10 s 20 s 30 s 40 s 50 s 60 s 70 s 80 s 90 s

-4.0n
3.4

3.3

-3.0n

3.2 -10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

-2.0n 0.0 -0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5

Tempo (s)

E (V)

Figura 28. Efeito do tempo de acumulao sobre (a): a altura da corrente para o complexo e (b): sobre o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-8HQ. Al3+ 0,198 mg L-1 + 8-HQ 7,43 mg L-1 + tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH = 6,80; potencial de acumulao: 0,300V.

5.2.7. Efeito do tempo de equilbrio (repouso)

Completada a etapa de acumulao, necessrio submeter a soluo a um tempo de equilbrio ou de repouso, sem agitao antes de se iniciar a etapa de redissoluo, para que apenas a corrente de difuso seja registrada durante a obteno do sinal analtico. Para tanto, aps uma investigao, foi verificado que um tempo de equilbrio de 60s, numa faixa de 0-80s, permitiu a obteno de uma maior sensibilidade para a determinao do alumnio, utilizando-se VAS como agente complexante, conforme apresentado na Figura 29.a. Para continuidade dos estudos voltamtricos para o complexo Al-VAS foi utilizado o tempo de 60s como tempo de equilbrio timo. Para a determinao utilizando 8-HQ como agente complexante, verificou-se que o tempo de equilbrio de 10s foi adequado para a obteno de uma maior sensibilidade para a determinao do alumnio, numa faixa de 0-60s (Figura 29.b). Dessa forma utilizou-se esse tempo de equilbrio para demais estudos voltamtricos do complexo Al-8HQ.

- 70 -

Ainda na Figura 29.b percebe-se que a partir do tempo de repouso de 40s, a intensidade da corrente do pico do complexo Al-8-HQ cai bruscamente at o valor de 0 nA, ou seja, a partir desse tempo, no h mais sinal de corrente para o complexo. Uma possvel explicao seria que em tempos de equilbrio maiores, o complexo se desliga da superfcie do eletrodo de mercrio em funo do potencial de acumulao utilizado ser + 0,300 V, o que implica em uma situao limite no muito estvel, pois o emprego do eletrodo de mercrio restrito regio catdica e, dependendo do eletrlito, pode ser empregado entre + 0,3 V a -2,3 V vs SCE (PEREIRA, 2005).
5.0
3.0

4.5 4.0

(b)

2.8

(a)

3.5 3.0

2.6

i (nA)

2.4

i (nA)

2.5 2.0 1.5

2.2

1.0
2.0

0.5 0.0

1.8 -10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90

-0.5 0 10 20 30 40 50 60

tem po (s)

tempo (s)

Figura 29. Efeito do tempo de equilbrio sobre a corrente de pico para o complexo (a): AlVAS. Al3+ 0,199 mg L-1 + alizarina 0,496 mg L-1 + tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; e (b): complexo Al-8HQ. Al3+ 0,198 mg L-1 + 8-HQ 7,43 mg L-1 + tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH = 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V. Os voltamogramas apresentados na Figura 30 mostram que at o tempo de equilbrio de 30s h a formao do complexo. Ainda na mesma figura observa-se que aumentando o tempo de equilbrio, aumenta tambm o sinal de fundo. Dessa forma opta-se por trabalhar com o tempo de repouso de 10s.

- 71 -

-14.0n

-12.0n

-10.0n

Pico do complexo Al-8-HQ

10s 20s 30s 40s 50s

i (A)

-8.0n

-6.0n

-4.0n

0.0

-0.1

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

E (V)

Figura 30. Perfil voltamtrico de reduo para o complexo Al-8HQ sobre o efeito do tempo de equilbrio. Al3+ 0,198 mg L-1 + 8-HQ + tampo NH4OAc 0,024 mol L-1, pH = 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V.

5.2.8. Efeito da amplitude de pulso

O efeito da amplitude de pulso sobre as intensidades das correntes de pico e sobre o potencial de pico do complexo Al-VAS apresentado na Figura 31. De acordo com a Figura 31.a, a maior intensidade de corrente foi obtida empregando-se um valor de amplitude de pulso igual a 0,100V. De acordo com a Figura 31.b, foi observado que o aumento da amplitude de pulso causou uma variao do potencial de pico para valores menos negativos, bem como tambm foi observado um aumento do sinal de fundo. No entanto, no foram observadas distores de pico para nenhum dos valores de amplitude investigados. Considerando-se apenas o efeito da amplitude de pulso de 0,100V sobre o potencial de pico de -0,470V, apresentado na Figura 31.b, pde ser verificado um aumento de sinal analtico superior ao aumento observado para o sinal da linha base, proporcionando a obteno de uma maior razo sinal do analito/sinal de fundo, quando comparado s outras amplitudes investigadas. Dessa forma o valor de amplitude de pulso de 0,100V foi selecionado para a continuidade dos estudos de voltametria adsortiva de redissoluo catdica para o complexo Al-VAS.

- 72 -

-30.0n

14

-25.0n

(a)
12

(b)
-20.0n

10

-15.0n

i (nA)

0,010 V 0,050 V 0,100 V 0,150 V 0,200 V

i (A)

-10.0n

-5.0n

Pico do complexo
0.0
0.00 0.05 0.10 0.15 0.20

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

Amplitude de pulso (V)

E (V)

Figura 31. Efeito da amplitude de pulso sobre (a): a intensidade da corrente para o complexo e (b): sobre o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-VAS. Al3+ 0,199 mg L-1 + alizarina 0,496 mg L-1 + tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. O efeito da amplitude de pulso sobre as intensidades das correntes de pico e sobre o potencial de pico do complexo Al-8HQ apresentado na Figura 32. Conforme apresentado na Figura 32.a, a maior intensidade de corrente para o pico de reduo do complexo Al-8HQ, foi observada para a amplitude de pulso de 0,150V. Na Figura 32.b, verifica-se que ao mesmo tempo em que se aumenta a amplitude de pulso, tambm se aumenta o sinal de fundo. No entanto, a maior razo sinal do analito/sinal de fundo foi observada para o valor de amplitude igual a 0,150V, em comparao aos outros valores de amplitude investigados. Porm, para amostras contendo uma concentrao muito prxima ao limite de deteco do mtodo esse aumento no sinal de fundo poderia ocasionar perda de sensibilidade e ocasional falta de sinal analtico para o complexo Al-8HQ. Como conseqncia, optou-se por utilizar a amplitude de pulso igual a 0,050V para o desenvolvimento dos estudos voltamtricos adsortivos de redissoluo catdica para o complexo Al-8HQ.

- 73 -

-14.0n
4.5 4.0 3.5 3.0

(b)
(a)
-12.0n

-10.0n

2.5 2.0 1.5 1.0

-8.0n

0,010 V 0,050 V 0,100 V 0,150 V 0,200 V

i (nA)

i (A)
-6.0n

Pico do complexo
-4.0n

0.5 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20

-0.1

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

Amplitude de pulso (V)

E (V)

Figura 32. Efeito da amplitude de pulso sobre (a): a intensidade de corrente para o complexo; e (b): sobre o pico voltamtrico de reduo para o complexo Al-8HQ. Al3+ 0,198 mg L-1 + 8HQ 7,43 mg L-1 + tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH = 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1.

5.2.9. Efeito da velocidade de varredura

Foi avaliado o efeito da velocidade de varredura sobre os sinais de corrente de pico para os complexos Al-VAS e Al-8-HHQ, conforme Figura 33 a seguir. A partir desta figura, podese observar que os maiores sinais de corrente de pico para os complexos Al-VAS e Al-8Hidroxiquinolina, foram obtidos em 25 mV s-1 e 50 mV s-1, respectivamente. Portanto, esses valores de velocidade foram selecionados para a continuidade dos estudos voltamtricos. Foi observado que o valor da corrente de pico diminuiu de 25-100mV s-1 para o complexo de Al com VAS, e aumenta de 10-80 mV s-1 para o complexo de Al com 8-HQ.
14

(a)

5.0

(b)
12
4.5

i (nA)

10

4.0

i (nA)

8
3.5

6
3.0

4
2.5

10

20

30

40

50

60

70

80
-1

90

100

110

10

20

30

40

50

60

70
-1

80

Velocidade de varredura (mV s )

Velocidade de varredura (mV s )

Figura 33. Efeito da velocidade de varredura sobre a corrente de pico de reduo para o complexo (a): Al-VAS e (b): Al-8HQ. - 74 -

5.2.10. Faixa de linearidade da Curva de Calibrao

Sob as condies timas selecionadas para este estudo, a corrente de reduo para o complexo Al-VAS foi diretamente proporcional concentrao de Al3+ para a faixa de 0,117 1,195 nmol L-1 e 1,354 - 2,381 nmol L-1, conforme apresentado na Figura 34. As respectivas equaes da reta que representam essas proporcionalidades nas curvas de calibrao so: i = 0.7338 + 2.3382 C (r = 0,9947) (Figura 34 a) e i = -2.0871 + 5.1028 C (r = 0,9989) (Figura 34 b), onde i (nA) a corrente de reduo para o complexo e C (nmol L-1) a concentrao de Al3+. O desvio padro relativo foi 3,54% (n = 3) para Al3+ 2,381 nmol L-1, 1,35% (n = 3) para Al3+ 1,354 nmol L-1, e 6,18% (n = 3) para Al3+ 1,195 nmol L-1 e 0,99% (n = 3) para Al3+ 0,1171 nmol L-1.
4.0

(b)
10

3.5

(a)
9

3.0

2.5

i (nA)

i (nA)

i = 0.7338 + 2.3382 C 2 R = 0.9947 SD =0.10136 N =7

i = -2.08711 + 5.10276 C 2 R = 0.9989 SD = 0.09491 N=7

2.0

1.5

1.0

0.5 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7

3+

4
0.8 0.9 1.0
-1

1.1

1.2

1.3

1.2

1.4

1.6

1.8
3+

2.0
-1

2.2

2.4

Concentrao Al (n mol L )

Concentrao Al (n mol L )

Figura 34. Curva de calibrao para a determinao de Al3+ utilizando VAS 0,496 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; amplitude de pulso: 0,100V; velocidade de varredura: 25 mV s-1; potencial de acumulao: -0,300V; tempo de acumulao: 40s. A partir dos coeficientes angulares das curvas de calibrao foram avaliadas as sensibilidades para o procedimento para a determinao de alumnio utilizando o reagente VAS. As sensibilidades para as determinaes de alumnio foram iguais a 2,338 nA nmol-1 L e 5,103 nA nmol-1 L. De acordo com a curva de calibrao apresentada na Figura 35, sob as condies timas estabelecidas, a corrente de reduo para o complexo Al-8HQ foi diretamente proporcional concentrao de Al3+ para a faixa de 8,539.10-8 - 2,348.10-7 mol L-1. A equao da reta que representa essa proporcionalidade na curva de calibrao i = -0,3394 + 0,6851 C (r = - 75 -

0,9981), onde i (nA) a corrente de reduo para o complexo e C (10-7 mol L-1) a concentrao de Al3+.

1.2

1.0

0.8

i (nA)

0.6

i = -0.3394 + 0.6851 C 2 R = 0.9981 SD = 0.0174 N = 15

0.4

0.2

0.8

1.0

1.2

1.4
3+

1.6
-7

1.8
-1

2.0

2.2

Concentrao Al

(10 mol L )

Figura 35. Curva de calibrao para a determinao de Al3+ utilizando 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. Foi avaliada a sensibilidade para o procedimento para a determinao de alumnio utilizando o reagente 8-HQ a partir do coeficiente angular da curva de calibrao. A sensibilidade para a determinao de alumnio foi igual a 0,6851nA 10-7mol-1 L. O desvio padro relativo (RSD) foi 4,67% (n = 3) para Al3+ 2,348.10-7 mol L-1, e 1,86% (n = 3) para Al3+ 8,539.10-8 mol L-1. A utilizao do ligante VAS proporcionou a obteno de uma sensibilidade 29,3 vezes superior quela obtida com o ligante 8-HQ. A perda de proporcionalidade entre a corrente do pico de reduo dos complexos e a concentrao de alumnio pode ser explicada pela saturao da superfcie do eletrodo de gota pendente de mercrio, conforme resultados apresentados nas figuras 36.a e 36.b.

- 76 -

10

(a)

(b)
1.2

9
1.0

8
0.8

i (nA)

i (nA)
1.0 1.5 2.0 2.5 3.0
3+

0.6

6
0.4

5
0.2

4 3.5
-1

4.0

4.5

5.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5
3+

3.0
-7

3.5
-1

4.0

4.5

Concentrao Al (n mol L )

Concentrao Al

(10 mol L )

Figura 36. Saturao da superfcie do eletrodo de mercrio pelo complexo (a): Al-VAS e (b): Al-8HQ. Os limites de deteco estimados para os procedimentos de voltametria adsortiva de redissoluo catdica, empregando VAS e 8-HQ como ligantes, foram de 0,117 nmol L-1 (S/N = 2) e 8,539.10-8 mol L-1, (S/N = 2), respectivamente, os quais foram obtidos pelo mtodo da relao sinal/rudo (S/N) (RIBANI et al., 2004). Comparando-se os limites de deteco (LD) obtidos, verifica-se que o LD para o procedimento utilizando VAS at 7,3 vezes superior ao do procedimento onde foi empregado 8-HQ como ligante. VAN DEN BERG et al. (1986), OPYDO (1997), determinaram limites de deteco para alumnio por voltametria adsortiva de redissoluo catdica empregando VAS como ligante, iguais a 1 nmol L-1 (eletrodo de gota pendente de mercrio (HMDE) vs. Ag/AgCl), 1 mol L-1 (HMDE vs. E.C.S.), respectivamente. Vale ressaltar que no h na literatura valores de LD estabelecidos para o procedimento de voltametria adsortiva de redissoluo catdica empregando 8-HQ como ligante, pois at o momento, no havia desenvolvido qualquer trabalho sobre a utilizao desse ligante em determinaes voltamtricas com eletrodo de gota pendente de Hg. Na Tabela 3 encontram-se resumidos as caractersticas analticas dos mtodos propostos.

- 77 -

Tabela 3. Caractersticas analticas dos mtodos propostos. Sensibilidade Coeficiente de correlao Faixa linear Limite de deteco (LD) (S/N = 2) (n=10) Repetibilidade (n=10) Al-VAS 2,338 e 5,103 nA nmol-1 L 0,9947 e 0,9989 0,117 1,195 nmol L-1 e 1,354 - 2,381 nmol L0,117 nmol L-1 2,13 % Al-8HQ 0,6851nA 10-7mol-1 L 0,9981 8,539.10-8 - 2,348.10-7 mol L-1 8,539.10-8 mol L-1 2,76 %

5.2.11. Estudos de Interferncia

Foram realizados estudos de interferncia em ambos os procedimentos descritos, a fim de se avaliar a seletividade de cada mtodo. Inicialmente foram determinadas as concentraes de Mn, Zn, Cu e Fe em cada amostra utilizando-se a tcnica de absoro atmica chama. Os resultados obtidos encontram-se na Tabela 4. Tabela 4. Concentraes das amostras dos elementos determinados por Espectrometria de Absoro Atmica em Chama. Ch Verde Carqueja Cscara Sagrada Sene Valeriana nd*: no detectado Mn (mg g-1) 0,182 0,035 0,134 0,031 0,138 0,032 0,071 0,006 0,167 0,058 Zn (mg g-1) 0,046 0,002 0,070 0,001 0,041 0,000 0,026 0,003 0,089 0,018 Cu (mg g-1) nd* nd nd nd 0,051 0,017 Fe (mg g-1) 0,117 0,105 0,081 0,114 0,159 0,075 0,075 0,081 1,170 0,241

A seletividade depende de quanto o mtodo indiferente presena na amostra de espcies que poderiam interferir na determinao do analito (LEITE, 1998). Conhecendo a concentrao aproximada dos possveis interferentes, cada espcie foi avaliada individualmente. Os estudos de interferncia foram realizados para os metais: Mn, Zn, Cu e Fe.

- 78 -

Complexo Al-VAS. Uma concentrao de at 200 vezes maior de Mn no apresentou interferncia no sinal analtico do complexo Al-VAS (Figura 37.a.). J para o Zn, a partir de uma concentrao 162 vezes maior de Zn em relao ao Al pode-se observar um declnio na intensidade do pico do complexo de Al-VAS, representado na Figura 37.b.

(a)

8 7

(b)

6 5

i (nA)

i (nA)

4 3

2 1 0

5 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8
-1

10

11

12

13

14

10
-1

12

14

Concentrao Mn (mg L )

Concentrao Zn (mg L )

Figura 37. Efeito da concentrao de Mn (a) e Zn (b) na determinao de Al com VAS. [Al3+] 2,286 nmol L-1+ alizarina 0,496 mg L-1 + tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. O estudo do cobre como interferente revelou que a partir da concentrao de aproximadamente 60 vezes maior do que a concentrao de Al na cela de Cu2+ existe uma interferncia do mesmo sobre o complexo Al-VAS. Atravs da Figura 38.a observa-se que o sinal do complexo diminudo medida que a concentrao de Cu2+ aumenta. Os voltamogramas obtidos registrados na Figura 38.b mostram o comportamento eletroqumico do complexo Al-VAS na presena de ons Cu2+.

- 79 -

-100.0n
8 7 6 5

(a)
-80.0n

(b)
sem adio de Cu a 1 adio de Cu a 2 adio de Cu a 3 adio de Cu

-60.0n

i (nA)

4 3 2 1 0 -1 0 1 2 3 4
-1

i (A)
-40.0n -20.0n 0.0 -0.15

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

Concentrao Cu (mg L )

E (V)

Figura 38. (a) Efeito da concentrao de Cu na determinao de Al com VAS e (b) voltamogramas obtidos. [Al3+] 2,286 nmol L-1+ alizarina 0,496 mg L-1 + tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. A partir de concentrao de Fe 20 vezes maior do que de Al existe uma interferncia do mesmo sobre o complexo Al-VAS. Atravs da Figura 39.a observa-se que o sinal do complexo diminudo medida que a concentrao de Fe aumenta. Os voltamogramas obtidos registrados na Figura 39.b ilustram o comportamento eletroqumico do complexo Al-VAS na presena de ons Fe.

-18.0n
4.0 3.5 3.0 2.5

(a)
-16.0n

(b)

-14.0n

-12.0n

Y Axis Title

2.0 1.5

-10.0n

sem adio de Fe a 1 adio de Fe a 2 adio de Cu

i (A)

-8.0n
1.0 0.5 0.0 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4
-1

-6.0n

-4.0n
0.5 0.6

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

Concentrao Fe (mg L )

E (V)

Figura 39. (a). Efeito da concentrao de Fe na determinao de Al com VAS e (b) voltamogramas obtidos. [Al3+] 2,286 nmol L-1+ alizarina 0,496 mg L-1 + tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. - 80 -

Complexo Al-8HQ. Uma concentrao de at 125 vezes maior de Mn no apresentou interferncia no sinal analtico do complexo Al-8HQ (Figura 40.a.). A Figura 40.b mostra alguns voltamogramas obtidos.
(a)
0.30
-3.0n

(b)

-2.5n

-2.0n

sem adio de Mn a 1 adio de Mn a 4 adio de Mn

i (nA)

0.25

i (A)

-1.5n

sinal do complexo
-1.0n

-500.0p

0.20 0 1 2 3
-1

-0.1

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

Concentrao Mn (mg L )

E (V)

Figura 40. Efeito da concentrao de Mn na determinao de Al com 8HQ. [Al3+] 9,24 . 10-8 mol L-1, 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. J para o Zn, a partir de uma concentrao aproximadamente 10 vezes maior de Zn em relao ao Al pode-se observar que o pico da 8HQ livre se desloca para valores menos negativos e a partir desse momento, o pico do complexo Al-8HQ perde seu sinal analtico (Figura 41.a) e o pico do complexante 8HQ perde intensidade de corrente. Os voltamogramas esto representados na Figura 41.b.

- 81 -

(a)
0.40

-3.0n

(b)
-2.5n

0.35

-2.0n

i (nA)

0.30

i (A)

sem adio de Zn a 1 adio de Zn a 3 adio de Zn a 4 adio de Zn sinal do complexo

-1.5n

0.25

-1.0n
0.20

-500.0p
0.15 0.0 0.1 0.2 0.3
-1

0.4

0.5

-0.1

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

Concentrao Zn (mg L )

E (V)

Figura 41. Efeito da concentrao de Zn na determinao de Al com 8HQ. [Al3+] 9,24 . 10-8 mol L-1, 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. O estudo do cobre como interferente (Figura 42) revelou que a partir da concentrao de aproximadamente 10 vezes maior de Cu em relao concentrao de Al na cela existe uma interferncia do mesmo sobre o complexo Al-8HQ. Atravs da Figura 42.a observa-se que em concentraes mais baixas de ons Cu, o sinal do complexo no sofre reduo na sua intensidade de corrente. A partir da concentrao limite (10 vezes maior de Cu em relao concentrao de Al), h uma sobreposio de um grande pico na regio do complexante livre. Os voltamogramas obtidos registrados na Figura 42.b mostram o comportamento eletroqumico do complexo Al-8HQ na presena do excesso de ons Cu2+.
-3.5n

(a)
-3.0n

-120.0n

-100.0n

(b)

-2.5n

-2.0n

sem adio de Cu a 1 adio de Cu a 2 adio de Cu

i (A)

-80.0n

i (A)

-60.0n

1 adio de Cu a 2 adio de Cu a 3 adio de Cu

-1.5n

-40.0n

-1.0n

-20.0n

-500.0p -0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5

0.0 -0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5

E (V)

E (V)

Figura 42. Efeito da concentrao de Cu na determinao de Al com 8HQ. [Al3+] 9,24 . 10-8 mol L-1, 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. - 82 -

O estudo de interferncia com o Fe (Figura 43) mostra que a partir de uma concentrao 10 vezes maior de Fe, observa-se uma sobreposio de um pico largo (Figura 43.b) sobre o pico do complexo Al-8HQ sendo assim impossvel a determinao do analito por esse procedimento nessa condio.
-2.4n -2.2n -2.0n -1.8n -1.6n

(a)
-20.0n

(b)

i (A)

-1.4n -1.2n -1.0n -800.0p -600.0p -400.0p -0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5

i (A)

sem adio de Fe a 2 adio de Fe a 3 adio de Fe

-15.0n

-10.0n

sem adio de Fe a 2 adio de Fe a 3 adio de Fe a 4 adio de Fe

-5.0n

pico do complexo
0.0 -0.1 -0.2 -0.3 -0.4 -0.5

E (V)

E (V)

Figura 43. Efeito da concentrao de Fe na determinao de Al com 8HQ. [Al3+] 9,24 . 10-8 mol L-1, 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. A Tabela 5 resume os resultados obtidos para os estudos de interferncia para os dois procedimentos propostos. Tabela 5: Resultados dos estudos de interferncia para os dois procedimentos propostos.
[Mn] (x maior [Al]) [Zn] (x maior [Al]) [Cu] (x maior [Al]) [Fe] (x maior [Al])

Al-VAS Al-8HQ

200 125

162 10

60 10

20 10

5.3. Aplicao em amostras reais 5.3.1. Preparo da amostra

Estabelecidas as condies timas para quantificao de alumnio, avaliou-se a influncia de matriz. Visto que a matria orgnica um interferente, dois processos de destruio da matria orgnica foram avaliados: (i) digesto via mida com cido ntrico/perxido de hidrognio e (ii) oxidao via seca em forno mufla e posterior solubilizao do resduo em cido clordrico. Para estes estudos foram empregadas todas as amostras, no entanto obteve-se - 83 -

somente para a amostra de sene (Senna alexandrina) sinal do complexo Al-VAS na decomposio via mida. Os voltamogramas obtidos aps o processo de abertura da amostra esto apresentados na Figura 44. A partir dos voltamogramas, verifica-se que aps oxidao via mida, permanecem interferentes que deformam as curvas voltamtricas e impedem a quantificao do alumnio, ou seja, a matria orgnica no foi totalmente destruda. Essa interferncia decorrente da adsoro da matria orgnica sobre a superfcie do eletrodo de mercrio afetando o processo de deposio do complexo de Al-VAS sobre o mesmo. No caso da oxidao por via seca, esse fenmeno no foi observado e, portanto, a abertura da amostra por oxidao por via seca a mais adequada para esse tipo de matriz.
-18.0n

Pico do complexo (b)

-200.0n

(a)
-150.0n

-16.0n -14.0n -12.0n

i (A)

i (A)
-0.6

-100.0n

Pico do complexo

-10.0n -8.0n

-50.0n

-6.0n -4.0n

0.0
-2.0n

0.0

-0.1

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

-0.6

E(V)

E(V)

Figura 44. Abertura da amostra de Senna alexandrina por (a) oxidao via mida com HNO3/H2O2 e (b) oxidao via seca em mufla e ressuspenso do resduo em HCl. Condies experimentais: VAS 0,496 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. Procederam-se estudos de recuperao do mtodo de digesto da amostra por via seca. A amostra foi enriquecida com 5,00 mg L-1 da soluo padro de Al3+ antes do processo de decomposio. Os resultados desse experimento encontram-se na Tabela 6.

- 84 -

Tabela 6: Resultados obtidos por FASS para os estudos de adio e recuperao nas amostras de plantas medicinais. Amostras Valor esperado (mg g-1) 520 191 195 309 2373 Valor encontrado (mg g-1) 504 178 187 275 2420 Recuperao (%) 97 93 96 89 102 Desvio Padro Relativo (%) 17 12 8 15 15

Ch Verde Carqueja Cscara Sagrada Sene Valeriana

O desvio padro relativo foi calculado segundo a equao: DPR = (DP/CMD) x 100 (Eq. 02) Onde, DP o desvio padro e CMD, a concentrao mdia determinada. Depois de realizados os estudos de adio e recuperao, os procedimentos voltamtrico propostos, que utilizaram VAS e 8-HQ como ligantes, foram aplicados para a determinao de alumnio em amostras de plantas e ervas medicinais. Quantificao de Al nas amostras de plantas medicinais atravs do procedimento que utiliza o VAS como ligante. As Figuras 45.a e 45.b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Camellia sinensis e os voltamogramas de adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9839.

- 85 -

14

-35.0n

(a)
-30.0n

(b)
i = 5,0054 + 299,2149 C
-25.0n

12

10

-20.0n

i (A)

amostra a 3+ 1 adio de Al a 3+ 2 adio de Al a 3+ 3 adio de Al

i (nA)

-15.0n

sinal da amostra

-10.0n

4
-5.0n

0.000

0.005

0.010

0.015

0.020
-1

0.025

0.030

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

-0.60

Concentrao Al mg L

E (V)

Figura 45. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Camellia sinensis (ch verde) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de VAS 0,496 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. De acordo com a curva de calibrao obtida a concentrao de alumnio determinada para a amostra de Camellia sinensis foi de 500 21 g g-1 (DPR = 4,2%, n = 3). De semelhante modo, as Figuras 46.a e 46.b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Senna alexandrina e os voltamogramas de adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9967.
-20.0n
5.0

(a)

-18.0n

(b)
-16.0n -14.0n

4.5

4.0

i = 2,0561 + 100,2276 C
3.5

-12.0n

i (nA)

-10.0n -8.0n -6.0n

3.0

amostra a 3+ 1 adio de Al a 3+ 2 adio de Al a 3+ 3 adio de Al

2.5

sinal da amostra
2.0

i (A)

-4.0n -2.0n

0.000

0.005

0.010

0.015

0.020
-1

0.025

0.030

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

-0.6

Concentrao Al mg L

E (V)

Figura 46. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Senna alexandrina (senne) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de VAS 0,496 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1.

- 86 -

A concentrao de alumnio determinada de acordo com a curva de calibrao para a amostra de Senna alexandrina foi de 324 13 g g-1 (DPR = 4,0%, n = 3). As Figuras 47.a e 47.b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Carqueja (Baccharis genistelloides) e os voltamogramas de adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9958.
4.5

(a)
i = 2,2268 + 4,1632 C

-20.00n

(b)

-17.50n

4.0

-15.00n

3.5

i (nA)

-12.50n

i (A)
3.0
-10.00n

2.5

sinal da amostra

-7.50n

-5.00n

amostra a 3+ 1 adio de Al a 3+ 2 adio de Al a 3+ 3 adio de Al

2.0 0.0 1.0x10

-7

2.0x10

-7

3.0x10
3+

-7

4.0x10
-1

-7

5.0x10

-7

6.0x10

-7

-0.15

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

Al

(mol L )

E (V)

Figura 47. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Carqueja (Baccharis genistelloides) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de VAS 0,496 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. A concentrao de alumnio determinada de acordo com a curva de calibrao para a amostra de Baccharis genistelloides foi de 206,32 14 g g-1 (DPR = 6,8%, n = 3). As Figuras 48.a e 48.b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana) e os voltamogramas de adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9981.

- 87 -

-25.0n

(b)
5.5

(a)
5.0 4.5 4.0

-20.0n

i (nA)

i (A)

i = 2,1761 + 107,0639 C

-15.0n

3.5

-10.0n
3.0 2.5 2.0 0.000 0.005 0.010 0.015 0.020
-1

amostra a 3+ 1 adio de Al a 3+ 2 adio de Al a 3+ 3 adio de Al

sinal da amostra

-5.0n

0.025

0.030

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

Concentrao Al mg L

E (V)

Figura 48. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de VAS 0,496 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. A concentrao de alumnio determinada de acordo com a curva de calibrao para a amostra de Rhamnus purshiana foi de 189,264 19 g g-1 (DPR = 10,1%, n = 3). As Figuras 49.a e 49.b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Valeriana (Valeriana officinalis) e os voltamogramas de adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9951.

-20.0n -18.0n

(b)

8.0

(a)
-16.0n -14.0n

7.5

7.0

i = 5,1982 + 91,5685 C

i (A)

-12.0n -10.0n

i (nA)

6.5

6.0

-8.0n
5.5

amostra a 3+ 1 adio de Al a 3+ 2 adio de Al a 3+ 3 adio de Al

-6.0n
5.0

-4.0n
0.000 0.005 0.010 0.015 0.020
-1

0.025

0.030

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

Concentrao Al mg L

E (V)

Figura 49. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Valeriana (Valeriana officinalis) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de VAS 0,496 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo NH3/NH4Cl 0,10 mol L-1, pH = 8,30; tempo de acumulao: 40s; potencial de acumulao: -0,300V; velocidade de varredura: 25 mV s-1. - 88 -

A concentrao de alumnio determinada de acordo com a curva de calibrao para a amostra de Valeriana officinalis foi de 2326,42 170 g g-1 (DPR = 7,3%, n = 3). Quantificao de Al nas amostras de plantas medicinais atravs do procedimento que utiliza o 8-HQ como ligante. As Figuras 50.a e b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Camellia sinensis e os voltamogramas de adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9999.

-3.5n

0.55

-3.0n

(b)
amostra a 1 adio de Al a 2 adio de Al a 3 adio de Al

(a)
-2.5n

0.50

0.45

i (nA)

i = 0,2998 + 9,8389 C

-2.0n

i (nA)

0.40

-1.5n
0.35

0.30

-1.0n

0.25 0.000

sinal da amostra
0.005 0.010 0.015 0.020
-1

0.025

0.030

-500.0p -0.10

-0.15

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

Concentrao Al mg L

E (V)

Figura 50. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Camellia sinensis (ch verde) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. De acordo com a curva de calibrao obtida a concentrao de alumnio determinada para a amostra de Camellia sinensis foi de 502,5 14 g g-1 (DPR = 2,8%, n = 3). De semelhante modo, as Figuras 51.a e b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Senna alexandrina e os voltamogramas de - 89 -

adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9969.
amostra a 1 adio de Al a 2 adio de Al a 3 adio de Al

-3.5n
0.65

(b)

(a)
0.60

-3.0n

0.55

i = 0,379 + 9,2712 C

-2.5n

i (nA)

0.50

i (A)
-2.0n

0.45

0.40

sinal da amostra

-1.5n

0.35

-1.0n
0.000 0.005 0.010 0.015 0.020
-1

0.025

0.030

-0.05

-0.10

-0.15

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

Concentrao Al mg L

E (V)

Figura 51. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Senna alexandrina (senne) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. De acordo com a curva de calibrao obtida a concentrao de alumnio determinada para a amostra de Senna alexandrina (senne) foi de 309 11 g g-1 (DPR = 3,6%, n = 3). As Figuras 52.a e b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Carqueja (Baccharis genistelloides) e os voltamogramas de adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9954.

- 90 -

0.70 0.68 0.66 0.64 0.62

-7.0n

(a)

-6.0n

(b)

-5.0n

i = 0,5219 + 5,6268 C

i (nA)

0.58 0.56 0.54 0.52 0.50 0.000 0.005 0.010 0.015 0.020
-1

i (A)

0.60

-4.0n

amostra a 1 adio de Al a 2 adio de Al a 3 adio de Al

-3.0n

sinal da amostra

-2.0n

-1.0n
0.025 0.030

-0.10

-0.15

-0.20

-0.25

-0.30

-0.35

-0.40

-0.45

-0.50

-0.55

Concentrao Al mg L

E (V)

Figura 52. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Carqueja (Baccharis genistelloides) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. A concentrao de alumnio determinada de acordo com a curva de calibrao para a amostra de Baccharis genistelloides foi de 205,6 16 g g-1 (DPR = 7,8%, n = 3). As Figuras 53.a e b apresentam a curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de padro para a amostra de Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana) e os voltamogramas de adio de padro, respectivamente, a qual apresentou coeficiente de correlao (r) igual a 0,9989.
-9.0n

(b)
amostra a 1 adio de Al a 2 adio de Al a 3 adio de Al

5.0

(a)

-8.0n

-7.0n
4.5

i = 2,7104 + 75,0553 C i (nA)

-6.0n

i (A)

4.0

-5.0n

3.5

-4.0n

3.0

-3.0n

-2.0n
2.5 0.000 0.005 0.010 0.015 0.020
-1

0.025

0.030

0.0

-0.1

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

Concentrao Al mg L

E (V)

Figura 53. (a) Curva analtica de calibrao pelo mtodo da adio de analito para Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana) e (b) voltamogramas obtidos. Adies de 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. - 91 -

A concentrao de alumnio determinada de acordo com a curva de calibrao para a amostra de Rhamnus purshiana foi de 195,6 21 g g-1 (DPR = 10,8%, n = 3). A quantificao de Al na amostra de Valeriana officinalis no foi possvel pelo procedimento proposto que utiliza o complexante 8-HQ. A adio da amostra cela voltamtrica produz um pico muito largo e de alta intensidade de corrente (Figura 54) que no permite a identificao do complexo Al-8HQ mesmo utilizando-se de diluio. Uma causa provvel do aparecimento desse pico de grandes dimenses o fato de a amostra Valeriana officinalis apresentar uma concentrao muito alta de diversos ons, entre eles, Al, Fe, Mn, Zn, entre outros, quando comparada s demais amostras estudadas, o que poderia implicar no aumento da fora inica do meio. Atravs dos resultados j apresentados na Tabela 4, pde-se observar que a seletividade do procedimento que utiliza o ligante VAS muito maior que o do procedimento que utiliza o ligante 8HQ para a determinao de Al por voltametria adsortiva de redissoluo catdica, pois para uma mesma concentrao de analito, as interferncias ocasionadas pela adio dos ctions estudados so maiores para o procedimento que emprega a 8HQ.
-25.0n

-20.0n

Tampo NH4OAC + 8HQ Tampo NH4OAC + 8HQ + amostra

-15.0n

i (A)
-10.0n -5.0n 0.0 -0.1

-0.2

-0.3

-0.4

-0.5

E (V)

Figura 54. Efeito da adio da amostra Valeriana officinalis cela voltamtrica. 8-HQ 7,43 mg L-1; eletrlito de suporte: tampo acetato de amnio 0,024 mol L-1, pH 6,80; tempo de acumulao: 10s; potencial de acumulao: 0,300V; velocidade de varredura: 50 mV s-1; amplitude de pulso: 0,050V. Para fins comparativos entre as amostras de ch verde, carqueja, cscara sagrada, sene e valeriana, os resultados foram compilados na Figura 55. - 92 -

2500

2000

Concentrao Al (ug g )

-1

1500

1000

500

cha verde

carqueja

cascara sagrada

sene

valeriana

Figura 55. Concentrao de Al nas amostras de plantas medicinais estudadas obtida por FAAS.

5.4. Validao dos mtodos

5.4.1. Comparao de Mtodos
Foi avaliado o grau de proximidade entre os resultados obtidos pelos dois procedimentos voltamtricos propostos e um mtodo de referncia, no caso, a espectrometria de absoro atmica em chama. As anlises foram realizadas em triplicata. Os resultados obtidos para a determinao de Al nas amostras encontram-se na Tabela 7. Tabela 7. Concentrao de Al nas amostras de plantas medicinais obtidas pelos procedimentos propostos e por absoro atmica em chama. Amostra/Mtodo Ch Verde Carqueja Cscara Sagrada Sene Valeriana ACSV (Al-VAS) (g g-1) 500,0 21 a 206,3 14 a 189,3 19 a 324,0 13 a 2326,4 130 a ACSV (Al-8HQ) (g g-1) 502,5 14 a 205,6 16 a 195,6 21 a 309,0 11 a FAAS (g g-1) 519,5 25 a 190,9 12 a 195,4 13 a 309,2 17 a 2372,9 112 a

Letras iguais em uma mesma linha representam mdias no significativamente diferentes em um nvel de confiana de 95 % pelo teste t.

Das cinco amostras analisadas, a amostra de valeriana apresentou maior teor de alumnio. Esse fato pode ser explicado em funo da parte da planta utilizada para os fins fitoterpicos. No caso especfico da valeriana, as partes utilizadas da planta para as infuses so rizomas e

- 93 -

razes. As razes apresentam maior concentrao de minerais quando comparadas com caule e folhas. Para as amostras e concentraes de Al3+ presentes, tanto o VAS quanto a 8-HQ demonstram-se adequadas para as determinaes.

- 94 -

6. CONCLUSES
A voltametria adsortiva de redissoluo catdica demonstrou ser uma ferramenta bastante atraente para avaliar a presena de alumnio em plantas medicinais. Para a determinao de alumnio foram desenvolvidos dois procedimentos voltamtricos de anlise. A tcnica empregada foi a voltametria adsortiva de redissoluo catdica de pulso diferencial com eletrodo de gota pendente de mercrio. A partir da etapa de pr-concentrao dos complexos mediante aplicao de potencial, possvel a determinao destes elementos em concentraes em nvel de traos. A matria orgnica um interferente na determinao e necessita ser previamente destruda. A digesto via mida usando HNO3/H2O2 no possibilitou a remoo completa de interferentes. Os melhores resultados para a anlise de plantas medicinais foram obtidos com a oxidao via seca em mufla a 450C por 10 horas e determinao da concentrao dos analitos pelo mtodo de adio de padro. Os mtodos voltamtricos foram validados mediante comparao dos resultados obtidos pelos mesmos com um mtodo de referncia, a espectrometria de absoro atmica com chama. Mediante os resultados obtidos com os procedimentos propostos, pode-se concluir que em meio de tampo amnia/cloreto de amnio, pH 8,30, alumnio e alizarina formam um complexo eletroativo, que produz uma corrente de pico em -0,470V (vs. Ag/AgCl). Em meio de tampo de acetato de amnio, pH 6,80, alumnio e 8-hidroxiquinolina formam um complexo eletroativo que produz uma corrente de pico em -0,151V (vs. Ag/AgCl). Considerando-se a mesma concentrao de alumnio, a concentrao tima de alizarina 15 vezes inferior concentrao tima de 8-hidroxiquinolina, resultando em economia de reagente. A voltametria adsortiva de redissoluo catdica foi aplicada nas amostras de Ch Verde (Camellia sinensis), Senne (Senna alexandrina), Carqueja (Baccharis genistelloides), Valeriana (Valeriana officinalis) e Cscara Sagrada (Rhamnus purshiana). Das amostras analisadas, a concentrao mais elevada de alumnio foi encontrada na amostra de Valeriana. A partir deste trabalho algumas proposies futuras podem ser feitas, tais como a monitorao de um nmero maior de amostras de plantas medicinais encontradas no mercado, a otimizao da tcnica de voltametria adsortiva de redissoluo catdica para outras formas - 95 -

farmacuticas de fitoterpicos como xaropes, cpsulas, extratos, etc. e, assim, ser empregada no controle de qualidade.

- 96 -

7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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