I.

INTRODUO A fermentao um processo anaerbio (ocorre em ausncia de oxignio) que compreende uma srie de reaes enzimticas em que uma molcula orgnica degradada, resultando em compostos mais simples e liberao de energia. Os processos fermentativos so provenientes da atividade de microorganismos, como leveduras e bactrias, sendo a glicose uma das substncias mais utilizadas como ponto de partida. Existem diversos tipos de fermentao, sendo a maioria dos processos fermentativos empregados na indstria alimentcia na fabricao de bebidas alcolicas, pes, iogurtes, queijos, etc.. A fermentao alcolica largamente utilizada para a produo de bebidas, tendo como produtos o etanol (lcool etlico) e o gs carbnico (CO 2). Neste tipo de fermentao, em que so fermentados acares, podem ser utilizados diversos microorganismos, dentre os quais a levedura Saccharomyces cerevisiae que mais se destaca. Na fermentao alcolica, uma molcula de glicose decomposta em duas molculas de cido pirvico, que em seguida so convertidas, cada uma, em uma molcula de etanol e uma de CO2, alm da gerao de ATP.

A estequiometria do processo pode ser simplificada em: C6H12O6 2 C2H5OH + 2 CO2

Mais recentemente a Saccharomyces cerevisiae, assim como outros microorganismos, tem sido utilizada na produo industrial de lcool combustvel.

II. OBJETIVO Acompanhar um processo fermentativo alcolico utilizando clulas de Saccharomyces cerevisiae, em meio de composio bsica, atravs da produo (liberao) de CO2.

III.MATERIAIS E MTODOS Meio de Cultivo: - Sacarose 100g/L - KH2PO4 1g/L - MgSO4.7H2O 0,7 g/L - NaCl 1g/L - Extrato de levedura 1g/L - Antiespumante 1gota/L - pH = 4,5 (com H2SO4 conc.) Vidrarias e Equipamentos: - Balana: Mark 1300 / Classe III / BEL Engenering - Shaker: Controlled Environment Incubator Shaker / New Brunswick Scientific CO. / INC. Edison, N.J. USA / Patente N / USA: 3.430.926/3.002.895 - Cabine de Fluxo Laminar Vertical: VECO Bioprotector plus-12 - 2 Erlenmeyers de 500 mL - 2 Fermentmetros - Esptula Inculo: - Fermento Biolgico Fresco: Fleischmann Royal (Saccharomyces cerevisiae) IV. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 1) Inoculou-se a cultura microbiana nos vasos reacionais contendo cada um 200mL de meio estril sob condies asspticas. 2) Os erlenmeyers foram vedados cada um com um fermentmetro contendo gua no selo. 3) Colocaram-se os sistemas em agitao em shaker a 150 rpm e a temperatura de aproximadamente 27 a 30C. 4) Cada erlenmeyer foi pesado nos tempo 0, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160, 180 e 200 minutos. Agitaram-se cada erlenmeyer antes de cada pesagem. V. RESULTADOS E DISCUSSO A) Construiu-se uma tabela com os valores medidos e calculados das seguintes variveis: peso do erlenmeyer(g), massa de CO2(g), massa de etanol produzido(g), concentrao de etanol produzido(g/L) e concentrao de glicose consumida(g/L). Como o experimento foi realizado em duplicata, utilizou-se o valor mdio dos pesos dos erlenmeyers.

Os valores da tabela foram encontrados atravs dos seguintes clculos: Para o intervalo de tempo de 0 a 20 minutos: 1- A diferena dos pesos do erlenmeyer (469,08g 468,81g) nos fornece o valor da massa de CO2, logo esta 0,27g 2- Pela estequiometria da reao: 1 mol CO2 44g 0,27 1 mol Etanol 46 g x

x = 0,28g (Massa de etanol produzido) 3- Pela estequiometria da reao: 1 mol glicose 2 mol CO2 88g 0,27g

180g x

x = 0,55g (Massa de glicose consumida) 4- Concentrao de etanol produzido (g/L): Como foram utilizados 200 mL de meio de cultura: 200 mL = 0,2 L C = massa de etanol produzido / 0,2 L = 0,28 / 0,2 = 1,40 g/L

5- Concentrao de glicose consumida (g/L): Como foram utilizados 200 mL de meio de cultura: 200 mL = 0,2 L C = massa de glicose consumida / 0,2 L = 0,55 / 0,2 = 2,75 g/L Para calcular os valores nos outros intervalos de tempo, utilizou-se o mesmo padro de clculo. B) Grfico da concentrao de substrato (glicose) e produto (etanol) em (g/L) versus tempo (min) feito atravs dos valores do experimento/tabela.

VI.CONCLUSO

VII. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS - http://www.sobiologia.com.br/conteudos/bioquimica/bioquimica3.php (ltimo acesso em 05/11/11, s 20:17h)