3 DESENVOLVIMENTO 2.

1 Antgenos eritrocitrios

Os antgenos so substncias capazes de induzir uma resposta imune humoral ou celular, os de origem eritrocitria so herdados geneticamente e sofrem uma variabilidade que ocorre nos componentes da membrana celular: protenas, glicoprotenas ou glicolipdeos (OLIVEIRA, 2003). Em diversos sistemas, os antgenos so codificados pelos prprios genes. Outros que so compostos por carboidratos, o gene codifica uma enzima com atividade transferase (ZAGO et al., 2004). Os antgenos eritrocitrios podem ativar a formao de anticorpos, contudo deve-se verificar a conformao qumica (carboidratos ou protenas), nmero e localizao na membrana da hemcia (NETO, 1998). So conhecidos 250 antgenos eritrocitrios distribudos em 29 sistemas de grupos sanguneos, de acordo com a nomenclatura da Sociedade Internacional de Transfuso Sangunea (ISBT) (CASTILHO; JNIOR, 2004). Segundo Bonifcio e Novaretti (2009), os antgenos podem ser classificados de acordo com suas funes biolgicas que so: estruturais, transporte, receptores/molculas de adeso, enzimtica, complemento, protenas regulatrias e outras, o antgeno pode apresentar mais que uma funo. Funo estrutural Sistema de Grupo Sanguneo Gerbich possui uma protena responsvel em manter a estrutura eritrocitria, na manuteno da forma celular e na estabilidade mecnica da membrana. Funo estrutural e transporte Sistema de Grupo Sanguneo Diego dentre as funes de sua protena a banda 3, podemos citar que auxilia na ancoragem para o citoesqueleto da membrana atravs de interaes com as protenas de membrana perifricas anquirina, auxilia na troca de ons, pode modificar a forma dos eritrcitos quando alterada.

Sistema de Grupo Sanguneo Rh as protenas RhD e RhCE atravessam a barreira eritrocitria e tem similaridade com protenas que realizam o transporte de amnia. Sistema de Grupo Sanguneo Kx a protena XK est ligada glicoprotena Kell, formando um complexo que afeta suas expresses reciprocamente. A ausncia desta pode ocasionar um quadro de alteraes neurolgicas levando a arreflexia e movimentos coreiformes. Funo de transporte Sistema de Grupo Sanguneo Kidd a glicoprotena Kidd tem a funo de transportar uria. Sistema de Grupo Sanguneo Colton a protena AQP1 tem a funo de facilitar a reidratao dos eritrcitos. Sistema de Grupo Sanguneo GIL a protena AQP3 realiza o transporte seletivo de uria e glicerol em adio a gua. Funo de receptor/adeso Sistema de Grupo Sanguneo Duffy a funo da glicoprotena Duffy receptora de citoquinas nos eritrcitos. Sistema de Grupo Sanguneo Gerbich a protena glicoforina C receptora do parasita Plasmodium falciparum, faz a ligao nos eritrcitos humanos. Sistema de Grupo Sanguneo MNS as glicoforinas GPA e GPB previnem a aglutinao espontnea dos eritrcitos. Sistema de Grupo Sanguneo Indian a glicoprotena CD44 tem diversas funes, como a adeso de leuccitos s clulas endoteliais, na resposta a estmulos imunolgicos e participam da ativao das clulas T e B. Sistema de Grupo Sanguneo Xg a funo da glicoprotena CD99, est presente na adeso e na diferenciao de clulas hematopoticas, nos eritrcitos sua funo desconhecida. Sistema de Grupo Sanguneo Scianna a protena est associada membrana eritrocitria (ERMAP), como receptora e transdutora de sinais para clulas eritrides.

Sistema de grupo Sanguneo Lutheran as glicoprotenas Lu/B-CAM so receptoras para laminina. Foram feitos estudos onde se observaram que estas juntas com outras protenas receptoras de adeso podem estar envolvidas na metstase tumoral. Sistema de Grupo Sanguneo LW a funo da glicoprotena LW participar na adeso dos eritrcitos durante a hematopoiese e em doenas vasculares. Sistema de Grupo Sanguneo Ok a glicoprotena Ok tem sua funo desconhecida nos eritrcitos, todavia sequncias homlogas conservadas dentro do domnio citoplasmtico sugerem que seja um transdutor de sinais intercelular/intracelular. Sistema de Grupo Sanguneo JMH a glicoprotena semaforina 7A tem participao no crescimento do axnico e na ativao de macrfagos e moncitos, sua funo desconhecida nos eritrcitos. Funo enzimtica Sistema de Grupo Sanguneo Kell a glicoprotena Kellpode estar envolvida na regulao do tono vascular. Sistema de Grupo Sanguneo Yt a protena acetilcolinesterase tem sua funo desconhecida nos eritrcitos, porm nas junes neuromusculares sua funo de regulao de acetilcolina tem sido bem explorada. Sistema de Grupo Sanguneo Dombrock a glicoprotena dombrock no demonstra atividade enzimtica nos eritrcitos. Elementos do Complemento Sistema de Grupo Sanguneo Chido/Rodgers a C4B possui maior interao na ligao com os eritrcitos, causando hemlise Sistema de Grupo Sanguneo Cromer a funo da glicoprotena DAF auxiliar na proteo dos eritrcitos de lise por complemento. Sistema de Grupo Sanguneo Knops os eritrcitos so protegidos pelo receptor do complemento 1 da auto-hemlise por inibio das vias clssicas e alternativas do complemento. Outras

Sistema de Grupo Sanguneo ABO na transfuso importante, porm no tm a fisiologia elucidada. Sistema de Grupo Sanguneo Lewis a interao de duas fucosiltransferases diferentes determina sua expresso. Sistema de Grupo Sanguneo Globosdeo em crianas e adultos normais o eritrovrus infeccioso B19 causa eritema. Sistema de Grupo Sanguneo Raph a glicoprotena CD151 tem a funo limitada no crebro, ouvido interno e possivelmente na eritropoiese.

2.2 Sistema ABO O sistema ABO foi descoberto por Landsteiner em 1900, sendo que a partir da publicao de seus experimentos foi possvel a diviso da populao em grupos sanguneos sendo classificados em trs grupos, nomeados por A, B e O de conformidade com a presena ou ausncia dos antgenos (aglutinognios) A e B nas hemcias e dos anticorpos (aglutininas) naturais anti-A e anti-B no soro, passando a ser aplicado em 1901 (BORGES-OSRIO e ROBINSON, 2007). Neste sentido fundamental citar que os anticorpos naturais (anti-A e anti-B) do sistema ABO so produzidos pelo organismo aps o nascimento, a partir do terceiro ms de idade; sendo encontrado em maior concentrao no sangue do cordo umbilical, o que leva a considerar que este tem origem no sangue materno. Assim aps este perodo o anticorpos do sistema ABO aumenta, atingindo seu mximo na adolescncia. O perodo de desenvolvimento entre o nascimento e a primeira infncia denominado de competncia imunolgica (BORGES-OSRIO e ROBINSON, 2007). Bendicho (2004) menciona que um ano depois, Decastello e Starli estabeleceram a existncia de um quarto grupo, menos comum, que recebeu o nome de AB. A nomenclatura de Landsteiner foi oficialmente reconhecida pela Comisso de Sade da Liga das Naes, em 1928, para os quatro grupos fundamentais, e , atualmente, de uso geral.

Quadro 01. Classificao dos quatro grupos Tipo de sangue A B AB O Aglutinognio (hemcias) A B AeB Aglutinina (plasma) Anti-B Anti-A Anti-A e Anti-B

Neste sentido importante destacar que a presena dos genes que codificam o sistema ABO esto localizados no cromossomo 9q34.1, enquanto que o lcus H est no cromossomo 19q13.3 (MATTOS et al, 2001). Segundo Borges-Osrio e Robinson (2007) complementam que os genes responsveis pela determinao dos antgenos do sistema ABO possuem trs (03) alelos: A, B, O (alelos mltiplos), sendo os genes A e B dominantes e o alelo O recessivo. Desta forma, tem-se o seguinte: Quadro 02. Alelos do Sistema ABO Grupo Sangneo A B AB O Gentipo IAIA IAi IBIB IBi IAIB ii

Fonte: http://www.biomania.com.br/bio/conteudo.asp?cod=1216

Para Yamamoto (2000) Landsteiner criou uma base cientfica para nortear a prtica da transfuso de sangue, quando identificou que a aglutinao das clulas vermelhas pelo soro permitiu o reconhecimento dos grupos sanguneos 2.2.1 Biossntese

A partir da descoberta de Landsteiner dos grupos sanguneos se conseguiu grandes avanos qumicos, onde aumentaram as possibilidades de identificar e

reconhecer as estruturas dos antgenos A, B e H, alm das informaes qumicas combinadas a partir da avaliao sorolgica e gentica. Os dados de grupos sanguneos tm provido inmeros estudos e com isso pode-se entender melhor o papel dos genes nos grupos sanguneos em relao a determinantes sorolgicos. Verificou-se que o material composto de esfingosina, cidos gordurosos e acares fucose, galactose, glucose e N-acetilgalactosamina. Identifica-se que a atividade glicolipdica ocorre a partir da adio da N-acetilgalactosamina. Outra descoberta foi sobre a atividade das substncias derivadas do eritrcito do grupo A, B ou O, que constituem 40% e 50% de carboidratos, e destes, a fucose representa entre 10 e 20% de cada substncia encontrada nesta estrutura (BORGES-OSRIO e ROBINSON, 2007). Outro aspecto importante foi a observao da forma como esses aglutinognios so herdados, o que permitiu que as pessoas possam no possuir nenhum deles em suas clulas, ter apenas um ou at terem ambos de forma simultnea (GUYTON e HALL, 2011). Depreende-se que a formao dos grupos sanguneos a partir dos genes pode ser descrito da seguinte maneira: gene H (HH) homozigose ou (Hh) heterozigose determina a produo da enzima Htransferase que permite a adio de L-fucose D-galactose terminal da glicoprotena, convertendo-a em substncia ou antgeno H (BORGES-OSRIO e ROBINSON, 2007). Segundo Olsson e Chester (2001) as transferases A e B possuem estruturas similares entre si, sendo que sua especificidade determinada pelos aminocidos localizados junto ao stio de ligao da enzima ao seu respectivo acar. importante salientar, ainda, que o antgeno H um carboidrato produzido pela ao da enzima a-2-L-fucosiltransferase sendo codificada no locus FUT1 do cromossomo 19, na posio q13.3, ou seja, se apresenta geneticamente independente do locus ABO (LEE e RELD, 2000). As glicosiltransferases so enzimas que catalisam as reaes de

transglicolizao entre o substrato aceptor e o acar receptor. Esta ao dependem de sua estrutura conformacional, onde ir permitir ou no que ocorra a ligao ao substrato. Deste modo a atividade das glicosiltransferases dos antgenos A e B podem variar entre os diversos subgrupos do sistema ABO. Verifica-se que sua

heterogeneidade se confirma, e suas diferenas podem refletir sobre a composio bioqumica dos antgenos produzidos (BARJAS-CASTRO et al., 2000). Yamamoto (2000) menciona que o grupo sangneo AB apresenta atividade das duas transferases (A e B), enquanto o grupo O no possui as transferases A e B, porm tem o antgeno H em grande quantidade na superfcie das hemcias. O antgeno H surge como sendo uma substncia fundamental para que sejam produzidos os antgenos A e B. O gene A determina a produo de uma enzima Nacetil-D-galactosamil-transferase que a responsvel pela ligao da Nacetilgalactosamina D-galactose. O gene B determina a produo da Dgalactosil-transferase que catalisa a ligao de uma D-galactose D-galactose terminal que se mantm ligada fucose, formando o grupo B. Deste modo a pessoa do grupo AB precisa dos genes H, A e B (BATISSOCO e NOVARETTI, 2003). Bendicho (2004) destaca que os antgenos A, B e H no so confinados membrana das hemcias, desta forma mesmo estando ausente no tecido conjuntivo e nas clulas musculares, esto presentes configurando como sendo componentes da superfcie das clulas epiteliais e virtualmente das clulas endoteliais que tambm so abundantes em muitas secrees, como saliva, suco gstrico, secrees pancreticas, suor, mecnio, mucina do cisto ovariano etc. Assim as pessoas que produzem antgeno em outros tecidos so chamadas de secretoras e esta caracterstica transmitida geneticamente. A presena de A, B, e H em secrees controlada pelos alelos SESE ou Sese, secretores, e no secretor sese. Cerca de 80% das pessoas so secretoras e 20% no secretoras. importante notar que os Indivduos de todos os grupos sanguneos A, B, AB e O, geralmente possuem o antgeno H, sendo o precursor dos antgenos A e B. Porm existem pessoas que possuem deficincia do antgeno H, sendo conhecidas como Bombay. Estes indivduos se dividem em dois grupos, o primeiro composto por pessoas que no expressam o antgeno H, por terem gentipo hh (recessivo), neste caso estes no apresentam os antgenos ABO na membrana eritrocitria, mas se estes forem secretores (gentipo SeSe ou Sese), o fentipo ABO pode ser determinado por meio da identificao das enzimas A e/ou B, responsveis pela produo dos antgenos A e B, que representam o grupo H null ou H nulo. No segundo grupo formado por indivduos que tem o gentipo hh-sese, que no

expressam antgenos ABH nem nos eritrcitos, reconhecidos como sendo Bombay clssicos. Nestes dois grupos podem ter a presena do anticorpo anti-H. Nos indivduos no secretores (sese), este anticorpo surge como aglutininas frias, sem importncia transfusional. J nos indivduos secretores (SeSe ou Sese), o anticorpo ativo a 37C, possui efeito hemolisante que um elemento extremamente perigoso em transfuses (COZAC, 2007). Lorenzi (2006) destaca que a ocorrncia do alelo H se apresenta extremamente elevada na populao, j os indivduos com gentipo hh so muito raros. Depreende-se, ainda, que os indivduos com os fentipos A, B, e AB expressam glicosiltransferases especficas que convertem o antgeno H em A ou B, mas aqueles com o fentipo O so incapazes de modificar a estrutura desse antgeno (MATTOS et al., 2001).

2.2.2 Anticorpos do Sistema ABO

Gambero et al. (2004) evidenciam que os anticorpos do Sistema ABO esto presentes nos soros dos indivduos, se apresentando contra os antgenos A e/ou B que permanecem ausentes nas hemcias Assim afirmam que geralmente os dois tipos de anticorpos no sistema sanguneo ABO: os de ocorrncia natural e os imunes. importante considerar que os anticorpos naturais surgem no soro entre trs a seis meses aps o nascimento, porm sua produo mxima se d entre cinco a dez anos, sendo que aps os 65 anos o ttulo desses anticorpos diminui de forma acentuada (GIRELLO e KHN, 2000). O surgimento desses anticorpos pode ser explicado pela presena de estmulos passivos, em especial os ocorridos na flora bacteriana intestinal, pois est repleto de bactrias saprfitas cujas membranas celulares acares so semelhantes aos acares encontrados nos antgenos A e B (GAMBERO et al, 2004).

Deste modo estas bactrias, assim como outras substncias presentes na natureza (poeira, plen, alimentos, etc), podem estimular a formao dos anticorpos anti-A e/ou anti-B, que passam a ser classificados, portanto, como naturais e regulares (GIRELLO e KHN, 2000). Esses anticorpos naturais so resultantes da mistura com maior quantidade de imunoglobulinas da classe M (IgM) do que imunoglobulinas da classe G (IgG). Os anticorpos ativos a 4C no atravessam a barreira placentria e so hbeis em ativar o sistema complemento (ABBAS et al, 2000). Os indivduos pertencentes aos grupos A ou B normalmente produzem apenas anticorpos da classe IgM, enquanto as pessoas do grupo O produzem IgM e IgG naturais (BATISSOCO e NOVARETTI, 2003). Os anticorpos ABO naturais reagem melhor em baixas temperaturas (4C), enquanto os imunes reagem de 4C a 37C (MELO, 2007). Segundo afirma Lorenzi (2006) os anticorpos ABO podem ser imunes e surgem atravs de estmulos em duas vias: heteroimunizao (substncias de origem animal ou bacteriana) e aloimunizao (gravidez ou transfuso sangunea incompatvel), sendo que tais anticorpos, na sua maioria, so da classe IgG. A maioria das hemolisinas da classe IgG, sendo ativas a 37C, possuindo a capacidade de ativar o sistema complemento e atravessar a placenta, portanto, podem causar a doena hemoltica do recm-nascido (DHRN). Os anticorpos anti-A e anti-B dos indivduos B e A, respectivamente, so em sua maioria de classe IgM e, em pequena quantidade, da classe IgG. Os anticorpos anti-A e anti-B de indivduos de grupo O so da classe IgG e podem estar presentes em altos ttulos. Recmnascidos, filhos de mes O tm, portanto, maior chance de desenvolver DHRN por incompatibilidade pelo sistema ABO (GIRELLO e KHN, 2000). O indivduo de grupo O tem seu soro/plasma anticorpos anti-A, anti-B. Se esse indivduo doar sangue para outro indivduo no-isogrupo, ainda que seja, concentrado de hemcias certa quantidade de plasma sempre se manter presente. Se o ttulo das aglutininas for elevado (superior a 1/100 no chamado doador O perigoso), poder ocorrer reao transfusional. Devido presena regular desses anticorpos naturais hemolticos no sistema ABO, regra bsica no transfundir hemcias portadoras de antgenos que possam ser reconhecidos pelos anticorpos

do receptor. Assim, devem ser realizadas, sempre que possvel, transfuses de isogrupos (doador e receptor de mesmo grupo sangneo) e, quando estas no forem possveis, realizar transfuses de heterogrupos (doador e receptor de grupos sangneos diferentes) respeitando o esquema clssico de compatibilidade e plasma isogrupo do receptor (QUINTAL et al, 2003).