RECUENTO DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS

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INTRODUCCION Ms del 50 % de las personas son portadoras de Staphylococcus Aureus en las fosas nasales, garganta, fornculos, manos o pelo. Su presencia en determinados niveles de los alimentos es un signo evidente de la falta de higiene en la manipulacin. Estas cepas de Staphylococcus Aureus son patgenas para el hombre porque producen enterotoxina, que da lugar a la intoxicacin estafiloccica. La dosis infectiva es alta ya que es necesario un nmero de al menos 106 UFC/g para producir cambios en consumidor. Puede ocurrir que no se detecte Staphylococcus Aureus en un alimento, que el nmero detectado sea pequeo y que, sin embargo, exista una cantidad detectable, suficiente de enterotoxina estafiloccica. En este caso, los microorganismos que originaron la toxina han ido descendiendo en nmero e, incluso, desapareciendo, mientras que la toxina, por su mayor resistencia, permanece en el interior del alimento contaminado. la salud del

Esta informacin, abastece a la redaccin de este informe, que permitir al alumno conocer en ms forma detallada la forma en la cual es utilizado el recuento de Staphylococcus Aureus cuando se sospecha que el alimento contiene ms de 100 Staphylococcus Aureus por gramo.

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RECUENTO DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS EN ALIMENTOS

I. OBJETIVOS: Relacionar las principales fuentes de contaminacin de los alimentos por Staphylococcus Aureus. Aprender a realizar el procedimiento de anlisis para determinar si existe la probabilidad de contaminacin por Staphylococcus Aureus. Reconocer e interpretar con habilidad el crecimiento de Staphylococcus Aureus en los medios empleados. II. FUNDAMENTO TEORICO: Es una bacteria que se encuentra en la piel y fosas nasales de las personas sanas, que causa gran variedad de infecciones, desde infecciones menores de la piel (fornculos, ampollas, vejigas) y abscesos cutneos hasta

enfermedades que pueden poner en peligro la vida como neumona, meningitis, endocarditis, sndrome del shock toxico (SST) y sepsis. Una de las intoxicaciones alimentarias que se presentan con mayor frecuencia es la originada por la ingestin de la enterotoxina que se forma en los alimentos cuando los mismos se multiplican en ciertas cepas de

Staphylococcus Aureus. La toxina recibe la denominacin de enterotoxina porque produce

gastroenteritis o inflamacin de la mucosa que reviste el tracto gastrointestinal. Es una especie bacteriana integrada por formas cocaceas que se agrupan irregularmente en racimos. Son inmviles y carecen de esporas. Son Gram positivos, aerobios y facultativos.es una especie muy sensible al calor y desinfectantes, pero es halotolerante. Produce una toxina que puede causar intoxicacin cuando se ingiere con los alimentos. En general, la presencia de un nmero elevado de Staphylococcus Aureus en un alimento refleja higiene defectuosa por la mala manipulacin. Si adems, los Staphylococcus Aureus aislados, son enterotoxignico, suponen un riesgo para la salud. La accin patgena debida a la enterotoxina produce los siguientes sntomas: nauseas, vomito, diarreas, que aparecen pocas horas despus de la ingestin del alimento contaminado.

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III.

MATERIALES Y EQUIPOS: Balanza analtica Cajas de Petri estriles

Contador de colonias

Incubadora a 37C

Muestra alimenticia (queso)

Tubos Durhman

Pipetas estriles de 1 ml y de 0.1 ml

Asas de Hockey

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IV.

Medios de cultivo y reactivos: Agar Baird Parker con yema de huevo

V.

PROCEDIMIENTO: Preparacin de la muestra homogenizada:

Muestra alimenticia a analizar (queso)

Se pes 10.0884g de la muestra alimenticia (queso)

Preparacin de la dilucin: Se prepar la muestra y se comenz a diluir la muestra homogenizada. Se transfiri 0.1 ml de la dilucin de 10-1 sobre la superficie de las cajas de Petri estriles, previamente marcados, que contienen el medio de cultivo de Baird Parker. Se comenz a espaciar el inculo con ayuda del asa de hockey sobre el medio de cultivo. Se dejo secar la muestra sobre una superficie completamente plana.

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1 ml

1 ml

1 ml

9 ml de

0.1 ml 10-1

0.1 ml 10-2

0.1 ml 10-3

0.1 ml 10-4

Se comenz hacer control de esterilidad del medio de cultivo, incubando una caja que contenga agar de Baird Parker, sin adicin de muestra, llevando a incubacin de 37C.

Se invierten las cajas y se incuban a 37C por 24 a 48 horas.

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VI.

CALCULOS Y RESULTADOS: Resultados:

10-1 A 10-2 A

10-1 B

10-3A

10-2 B

10-4 A 10-4 B

10-3 B

Su forma es convexa, de bordes lisos, hmedas, amarillo brillantes y con un borde blanco fino

Clculos: Para el reporte de resultados se tiene en cuenta la siguiente forma: Ejemplo: Recuento de 10 2: 35 colonias es igual a 35000. Nmero de colonias obtenidas en cada placa: DILUCIONES 10-1 10-2 10-3 10-4 PLACA 1 50 60 20 12 PLACA 2 30 40 15 7 N MICROORGANISMOS VIABLES 40000 50000 17500 9500

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VII.

CUESTIONARIO: 1. Elabore una lista de recomendaciones esenciales que se deben tener en cuenta para evitar la contaminacin de los alimentos por los microorganismos analizados: La limpieza y una buena higiene personal son la mejor forma de protegerse de las infecciones por estafilococos y de otro tipo, incluyendo el SARM. Puedes prevenir las infecciones cutneas provocadas por estafilococos lavndote las manos con frecuencia y duchndote o bandote todos los das. Mantn las reas de la piel donde tengas heridas (como los cortes, los rasguos, los araazos, el eczema y las erupciones provocadas por reacciones alrgicas o por la hiedra venenosa) limpias y cubiertas. Utiliza una pomada antibitica u otros tratamientos que te haya recetado el mdico. Si un miembro de tu familia tiene una infeccin por estafilococos, no compartas con l toallas, sbanas o ropa de vestir hasta que la infeccin reciba el tratamiento adecuado y completo. Si contraes una infeccin por estafilococos, puedes prevenir su propagacin a otras partes del cuerpo evitando tocarte la piel infectada, mantenindola cubierta siempre que sea posible y utilizando una toalla solo una vez para limpiarte el rea afectada (lava despus la toalla con agua caliente o utiliza toallitas desechables). El tiempo que tarda en curarse una infeccin cutnea por estafilococos depende del tipo de infeccin y de si la persona recibe o no tratamiento. Por ejemplo, un furnculo puede tardar de 10 a 20 das en curarse sin tratamiento, pero el tratamiento puede acelerar este proceso. Por otro lado, la mayora de los orzuelos se curan solos en cuestin de das. Para aliviar el dolor de la infeccin cutnea y favorecer la expulsin de pus, intenta sumergir el rea afectada en agua tibia o bien aplcale paitos de algodones hmedos y tibios. Utiliza un paito diferente cada vez y lava los paitos utilizados en agua caliente y jabn, secndolos despus completamente con una secadora de ropa. Tambin puedes aplicarte una almohadilla trmica o una botella de agua caliente sobre la piel durante unos 20 minutos, tres o cuatro veces al da. Los orzuelos se pueden tratar aplicando compresas tibias sobre el ojo cerrado de tres a cuatro veces al da. Asegrate de utilizar un pao de algodn limpio cada vez. Ocasionalmente, los orzuelos requieren antibiticos por va tpica. Visita a tu mdico si el orzuelo no desaparece al cabo de pocos das.

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2. Qu tipo de enfermedades se pueden presentar si los alimentos estn contaminados con los microorganismos analizados: Las enfermedades que puede desarrollar el gnero estafilococo estn mediadas por la produccin de toxinas, entre las cuales estn: Enterotoxinas: Diarreas Vmito Nuseas.

Dao en la piel y tejidos blandos: Separando el estrato granuloso del crneo dando el signo de piel escaldada. Sndrome del shock toxico. Foliculitis Fornculosis Gastroenteritis

Enfermedades comunes: Fornculos Imptigo ampolloso Tejido subcutneo: o o o o o o Carbunco (ntrax) estafiloccico Imptigo Hidradenitis supurada Mastitis Infeccin de herida operatoria Piodermas localizados

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La ms grave para el humano, el Staphylococcus Aureus debido a una endocarditis bacteriana, siendo la endocarditis en humanos la ms frecuente subsecuente a la infeccin por Staphylococcus Aureus.

Infecciones localizadas de rganos: o o o o o o o o o o o o o Meningitis Pericarditis Infecciones pulmonares Neumona por inhalacin Neumonas hematgenas Empiema pleural Osteomielitis Artritis sptica Bursitis sptica Piomiositis En el aparato digestivo: abscesos del hgado, peritonitis y enteritis. Intoxicacin alimentaria estafiloccica En el genitourinario: abscesos intrarrenales y perirrenales, pielonefritis, cistitis, prostatitis (en la mujer endometritis). Septicemia y endocarditis Vasculitis sptica 3. Cul es la fuente potencial de transmisin de Staphylococcus Aureus en los alimentos, porqu? El hbito de tocarse con las manos la cara, es uno de las fuentes ms importantes en la transmisin del microorganismo, mientras se elaboran los productos alimenticios, incrementa el riesgo de contaminacin con el microorganismo. En todos los brotes se ha comprobado que los manipuladores de alimentos tenan lesiones en la piel y fue aislada la misma cepa enterotoxignica de Staphylococcus Aureus de la nariz de stos y de los alimentos involucrados. El equipo contaminado tambin se ha relacionado como fuente del

microorganismo, pues en varios brotes donde se involucr al jamn, la mquina rebanadora tena la misma cepa enterotoxignica que la presento en el alimento que caus la intoxicacin. Otra fuente ms importante en la transmisin de los alimentos es a partir de la leche proveniente de vacas con mastitis, sobre todo

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cuando los derivados lcteos son elaborados en forma artesanal con leche sin pasteurizar. La mayora de las carnes crudas se contaminan en los rastros, ya que stas son ampliamente manipuladas. Se ha visto que los estafilococos presentes en la carne antes de ser procesada raramente se involucran en brotes, por lo que la contaminacin de productos crnicos ocurre postproceso. VIII. DISCUSIN: Lo analizado anteriormente define que la bacteria anaerobia Staphylococcus Aureus, est reconocido como uno de los patgenos humanos ms importantes, responsable de gran nmero de infecciones, y es una de las bacterias ms frecuente en las Unidades de Cuidados Intensivos, responsable entre otras sepsis de la neumona asociada a la Ventilacin Mecnica (VM) y las Bacteriemias. La identificacin de estas bacterias comprueba que mayormente las enfermedades son causados por una intoxicacin alimentaria, correspondiente a su anlisis y la cuenta del nmero de colonias se hizo de la siguiente forma: Placa 10-1 : 10 -1 A = 50 10 -1 B = 30 Placa 10-2 : 10 -2 A = 60 10 -2 B = 40 Placa 10-3 : 10 -3 A = 20 10 -3 B = 15 Placa 10-4 : 10 -4 A = 12 10 -4 B = 7

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IX.

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES: Conclusiones: Cantidad de colonias halladas: DILUCIONES 10-1 10-2 10-3 10-4 PLACA 1 50(+) 60(+) 20(+) 12(+) PLACA 2 30(+) 40(+) 15(+) 7(+)

Cantidad de nmero de microorganismos viables: DILUCIONES 10-1 10-2 10-3 10-4 PLACA 1 50 60 20 12 PLACA 2 30 40 15 7 N MICROORGANISMOS VIABLES 40000 50000 17500 9500

Recomendaciones: En el laboratorio hacer uso obligatorio del guardapolvo. Tener los instrumentos esterilizados, desinfectar las mesas y las manos. Realizar todo el procedimiento mencionado en la gua, con el fin de evitar accidentes en el laboratorio. Contar con los caldos, y reactivos respectivos para la realizacin del anlisis previo. A la preparacin de los medios de cultivo tener sumo cuidado, para evitar su posterior contaminacin. Tener encendido siempre el mechero, y trabajar cerca de l.

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X.

BIBLIOGRAFIA: CHANS R., G. (2002). Estafilococos. Obtenido el 22 de febrero de 2008 en http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2017.pdf BECQUER L., A. y otros (1996). Deteccin de la desoxirribonucleasa termoestable (termonucleasa) directamente del alimento. Obtenido el 22 de febrero de 2008 en http: //bvs.sld.cu /revista

/ali/vol10_2_96/ali05296.htm FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS (1989). Medios de Cultivo en Microbiologa: Manual de Laboratorio. Editora Tricelm S.A. 3 Edit. Lima. L. ORTIZ, M. (2003) Material didctico de Microbiologa de Alimentos: Investigacin y Recuento de Staphylococcus Aureus. Obtenido el 01 de febrero de 2008 en:

http://www2.uah.es/farmacia/programas/microbiologia/material_didact ico_de_m icrolimentos.htm. THATCHER, F. S. y D. S., CLARK (1993) Anlisis Microbiolgico de los Alimentos. Edit. Acribia. Zaragoza. Bert F. Risk factors and treatment of methicillin-resistant

Staphylococcus Aureus infections. Presse med 2002; 31(3): 1792-6. Brachman PS, Dan B, Haley RW, Hooten TM,Gamer JS, Allen JR. Infecciones quirrgicas nosocomiales,frecuencia y costo. Surg clin north am 1990; 11(2): 13-24. Jones RN, Deshpande LM, Mutnick AH, Biedenbach DJ. In vitro evaluation of BAL9141, a novel parenteral cephalosporin active against oxacillin-resistant staphylococci. J antimicrob chemother 2002; 50(4): 915-32.

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