Acta 1>01. 1,,"lIS.

J O( J) : J 996
MICROSPOROGNESE E ETAPAS DA ONTOGENIA DO
GAMETFITO MASCULINO DE TABEBUIA OCHRACEA
(CHAM.) STANDLEY (BIGNONIACEAE)l
9
Nelson S. Bittencourt Jr.
2
Recebido em 10.01.95. Aceito em 10.08.95.
RESUMO: (Microsporognese e etapas da ontogenia do gametfito masculino de Tabebuia ochra-
cea (Cham.) Standley (Bignoniaceae)). Foram analisadas as etapas da ontogenia do gametfito
masculino e da parede da antera de TlIbebuia ochracell. O mtodo de formao da parede do
microsporngio do tipo Oicotiledneo. O tecido esporognico, em cada microsporngio, visto
em seco transversal , organiza-se em uma fileira cel ular em forma de ferradura. O tapete do tipo
secretor e possui odgem dual. O tapete interno diferencia-se precocemente em relao ao tapete
externo. As duas camadas tapetais so estruturalmente dimrficas, mas no fim do estgio pr-
meitico elas se tormam idnticas e com caracterstico vacuoma bipolar. O endotcio desenvolve
espessamentos helicoidais em suas paredes celulares. O desenvolvimento do plen segue o modo
usual em angiospermas. O expressivo crescimento do nuclolo e o aparecimento de vacolos nu-
cleolares na clula vegetativa sugerem sua alta atividade biossintetizante.
Palavras-chaves: Bignoniaceae, Tabebuill , ontogenia, tapete, placentide, micrsporos, gametfi-
to masculino, plen, vacolos nucleolares.
ABSTRACT: (Microsporogenesis and the early male gametophyte development ofTabebuill ochra-
celle (Cham.) Standley (Bignoniaceae)). Oevelopment of the pollen and anther wall of Tabebuia
ocilracea was studied. The microsporangial wall follows the Dicotyledoneous type of ontogeny.
The sporogenous tissue in each microsporangium, in transverse section, is organized in a celular
strip, with a horseshoe outline. The tapetum is secretory and shows a distinct dual odgin. The
inner tapetal layer differentiates earlier than the outher layer. The two tapetal layers exibit a dis-
tinct structural dimorphism, but before the meiotic divisions of the MMCs the tapetal layers beco-
me identical. Vacuolation in each tape tal cell, at this stage, is characteristically bipolar. The
1 Trabalho realizado no Depaltamento de Botnica da Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antnio
Carlos, 6627 - Cepo 31270-901 - Caixa Postal: 2486 - Pampulha - Belo Horizonte/MG - Brasil. Pane de
uma monografia desenvolvida no perodo de agosto de 1988 a abril de 1992, sob orientao da Profa. Ora.
M. M. Nogueira Braga e subsidiada com bolsa de Iniciao Cientfica do CNPq. Apresentado no XLV
Congresso Nacional de Botnica.
, Universidade do Vale do Rio dos Sinos - Depaltamento de Biologia - Centro de Cincias da Sade, Av.
Uni sinos 950, Caixa Postal 275, CEPo 93.022-000 So Leopoldo - Rio Grande do Sul - Brasil.
10
BittencourtJr.
endothecium shows fibrous thi ckenings ofthe spiral lype. The pollen grain development conforms
with the usual way in angiospenns. The conspicuous growing of the nucleolus and nucleolar va-
cuolation into lhe generative cell sugests a high biosynthetic acti vity.
Key words: Bignoniaceae, Tabebuia, ontogeny, tapetum, placenloid, microspores, male gameto-
phyte, pollen, nucleolar vacuoles.
Introduo
A literatura inicial sobre a embriologia da famlia Bignoniaceae foi revista por
Schnarf (1931) e Davis (1966). A microsporognese, o desenvolvimento do plen e
da parede do microsporngio, especificamente, foram investigados em Bignonia ve-
nusta (Duggar 1899), em Oroxylum indicum (Ghatak 1956), em Pyrostegia ignea
(sin. P venusta) e Tecoma stans, com nfase sobre a ontogenia e a natureza do tapete
(Gupta & Nanda 1978 a, b e c), e em Tabebuia rosea, Millingtonia hortensis, Do/i-
chandrone fal cata, Heterophragma adenophyllum e Stereospermum cheloniodes
(Mehra & Kulkrani 1985). Informaes fragmentrias foram ainda fornecidas por
Raghavan & Venkatasubban (1940) e Venkatasubban (1944, 1945) durante os estudos
citolgicos emSpatodea campanulata, Crescentia cujete, Dolichandrone reedii e Par-
mentiera serratifolia; por Gupta & Nanda (1971), sobre o endotcio de Pyrostegia
venusta a histoqumica da membrana tapetal de P venusta e Tecoma stans (1972) e a
estrutura do tapete de Bignonia, Jacaranda e Tecomaria (1978 c); e por Bhandari
(1984) sobre o tapete de Pyrostegia e Tecoma. Johri (1992) organizou sistematica-
mente a literatura existente, embora tenha negligenciado alguns trabalhos de maior
relevncia para o grupo.
O presente trabalho procura caracterizar a ontogenia do gametfito masculino
(at o estgio de pr-antese), do tapete e das camadas parietais do microsporngio de
Tabebuia ochracea (Cham.) Standley (Bignoniaceae), rvore tpica dos cerrados bra-
sileiros e um dos ips mais freqentes no estado de Minas Gerais.
Material e mtodos
O material utilizado no presente trabalho foi coletado de trs rvores nativas
(BHCB: 19821,19857 e 19858) encontradas no Campus da Universidade Federal de
Minas Gerais. Botes florais em diferentes estgios de desenvolvimento e flores fo-
ram fixados em FAA 50% (Johansen 1940) por 24 horas e estocados em etanol 70%.
Receberam o tratamento usual em srie etanol-xilol (Johansen 1940) para desidrata-
o e incluso em parafina. Cortes transversais e longitudinais seriados, de 4 a 20 11m,
dependendo do estgio de desenvolvimento, foram feitos em micrtomo rotativo e
corados com fucsina bsica e azul-de-astra. Alguns testes histoqumicos usuais foram
feitos em cortes mo livre. Clulas do endotcio foram dissociadas em soluo de
Jeffrey (Johansen 1940) para exames dos espessamentos de paredes.
Microsporog nese e etapas da ontogenia de Tl/hebuil/ ochracea
11
Resultados
A flor de Tabebuia ochracea zigomorfa, com 5-7 cm de comprimento. Sua
corola tubular-infundibiliforme, 5-lobada, com fauce achatada antero-posteriormente
e exuberante colorao amarelo-ouro.
O androceu, incluso, didnamo com estamindio. Os quatro estames fl1eis,
dois antero-laterais e dois postero-Iaterais, possuem anteras do mesmo tamanho e
estruturalmente idnticas. O estamindio, posterior, muito reduzido e destitudo de
antera.
A antera diteca e apicefixa. No boto floral a antera apresenta tecas contguas
que se separam amplamente na antese, como usual em anteras divaricadas. A deis-
cncia longitudinal.
A antera tetrasporangiada. Entretanto, prximo antese o septo interesporan-
gial se desintegra, formando, em cada teca, uma cavidade nica dentro da qual se
encontram os gros polnicos, conferindo assim uma falsa impresso de antera bies-
porangiada.
Numa antera madura, em cada teca, o lculo (loc) posiciona-se no lado ventral
(Figura I). Os tecidos que formam sua parede interna se encontram desorganizados e,
na face voltada para o conectivo, distinguem-se duas massas conspcuas de clulas
desorganizadas que correspondem aos restos do tecido placentide (tp) de cada mi-
crosporngio. Flanqueando o lculo de ambos os lados encontra-se um endotcio
fibroso multiestratificado (en). O conectivo (co) o tecido mais profundo e contm,
em seu lado dorsal , um feixe vascular colateral (fv). Externamente a antera revestida
por epiderme uniestratificada (e).
Estmatos (es) so numerosos na poro proximal (pice) da antera (Figura 2).
Usualmente ocorrem apenas sobre o endotcio e/ou o conectivo - lado dorsal da
antera. Abaixo da poro proximal da antera os estmatos so escassos ou totalmente
ausentes. Pequenos tricomas glandulares capitados e subssseis (tg) so tambm en-
contrados na mesma regio onde os estmatos ocorrem (Figura 3).
O gro de plen simples, tricolpado (ocasionalmente tetracolpado e/ou sincol-
pado nos polos) e finamente reticulado (Figura 22 g e h).
Microsporognese e desenvolvimento do gametfito masculino - A antera in-
diferenciada constituda de uma massa homognea de clulas meristemticas, en-
volvidas por protoderme uniestratificada. A diferenciao se inicia bem cedo - quando
o boto floral possui menos de um milmetro de comprimento. As clulas mais inter-
nas, que se diferenciam como tecido fundamental (conectivo - co) comeam a se tor-
nar vacuoladas e com ncleo excntrico, salvo as clulas procambiais, no centro da
antera (fpv - Figura 4). O arquesprio hipodrmico (arq) se organiza nos quatro lobos
da antera como um estrato de clulas ligeiramente altas, apresentando citoplasma den-
so e ncleo proeminente (Figuras 4 e 5). Clulas do conectivo, adjacentes ao lado
interno do arquesprio, apresentam um arranjo irregular idntico ao das clul as subja-
centes, mas permanecem no-vacuoladas e com conspcuo ncleo central (Figura 5 -
seta) .
12 BittencounJr.


cem
en

1
Fig. I. Antera em estgio prximo antese; seco transversal mediana. Fig. 2 e 3. Teca, seco transver-
sal apical. 2. Epiderme com estmatos. 3. Epiderme com tricoma glandular: cem=clulas estomiais,
co=conectivo, e=epiderme, em=estmio, en=endotcio, es=estmato, fi=filete, fv=feixe vascular, gp=gros
de plen, loc=lculo, te=teca, tg=tricoma glandular, tp=tecido placentide (desorganizado).
Mi crosporognese e etapas da ontogenia de Tahehuia ochracea
13
Subseqentemente, as clulas do arquesprio sofrem divises periclinais, dan-
do origem camada parietal primria (cpp), adjacente epiderme, e camada esporo-
gnica (ce) no lado interno (Figura 6). As clulas esporognicas destacam-se das demais
por sua colorao mais intensa e ncleos mais conspcuos. Visto em seco transver-
sal, o tecido esporognico de cada microsporngio geralmente se organiza em uma
fileira, em forma de ferradura, contendo cerca de 8-12 clulas. As clulas esporogni-
cas multiplicam-se copiosamente por divises anticlinais, antes de se diferenciarem
em microsporcitos ou clulas-me dos micrsporos (CMMis).
A medida em que a antera se desenvolve, a concavidade dos microsporngios
se acentua. Aps a diviso do arquesprio, as clulas da camada parietal primria
rapidamente sofrem novas divises periclinais, formando a camada parietal secund-
ria externa (CPSI)' voltada para a epiderme, e a camada parietal sacundria interna
(CPS2)' adjacente ao lado epidrmico do tecido esporognico (Figura 7). No lado in-
terno deste ltimo, o conectivo, cujo desenvolvimento prossegue acompanhando o do
esporngio, caracteriza-se por um tecido parenquimatoso de clulas vacuoladas, sal-
vo nos dois ou trs estratos mais perifricos, cujas clulas apresentam denso citoplas-
ma e ncleo proeminente. Gradualmente as clulas do conectivo que ficam em contato
direto com o tecido esporognico - iniciais do tapete interno (i ti) - comeam a se
expandir, formando assim a camada tapetal interna (tin).
A camada parietal secundria externa divide-se periclinalmente, dando origem
ao endotcio hipodrmico (en), voltado para a epiderme, e camada mdia (cm), no
lado interno (Figura 8). Em uma das extremidades do microsporngio, entretanto,
onde futuramente desenvolver-se- o endotcio fibroso multiestratificado, trs ou quatro
estratos celulares so encontrados. J a camada parietal secundria interna passa dire-
tamente a funcionar como camada tapetal externa (tex).
Nesse estgio cada microsporngio (em seco transversal) possui uma fileira
de aproximadamente 30-50 clulas esporognicas - bastante distintas devido aos
seus densos citoplasmas e ncleos muito proeminentes. Da por diante o nmero de
clulas esporognicas se mantm, havendo ainda o crescimento por expanso celular.
O tapete, em ambos os lados da camada esporognica, tambm se apresenta com
clulas de denso citoplasma e ncleo proeminente, porm no tanto quanto as desta
ltima. No obstante, o tapete interno (tin) distingue-se histologicamente do tapete
externo (tex), pois o primeiro apresenta clulas com citoplasma menos denso, binu-
c1eadas e um pouco mais amplas (Figura 8). Sob o tapete interno, o conectivo torna-se
tal como uma proeminncia introduzindo-se na concavidade do microsporngio -
tecido placentide (tp) - , sendo que as clulas adjacentes ao tapete interno so pe-
quenas e apresentam denso citoplasma, contrastando com as clulas mais amplas e
vacuoladas da regio mais interna.
Posteriormente, as clulas do tapete interno crescem e comeam a tornar-se
vacuoladas (Figura 9). Os vacolos surgem quase sempre no polo voltado para o
tecido esporognico. Algumas das clulas do tapete interno passam a ser tetranuclea-
das. As clulas do conectivo adjacentes ao tapete interno tambm tornam-se vacuola-
das. Uma fileira de 8-16 clulas, as clulas epidrmicas de cada lado do stio de ruptura
14
BittencourtJr.
Fig. 4-9. Seces transversais de anteras em desenvolvimento. 4. Antera com arquesprio hipodrmico
(arq). 5. Teca com arquesprio (arq). Setas: ver explicaes no texto. 6. Microsporngio com camada
esporognica (ce) e camada parietal primria (cpp). A ltima, em alguns locais (setas), j sofreu diviso
periclinal. 7. O mesmo com camada esporognica (ce) em formato de ferradura, camadas parietais secun-
drias externa (cps, ) e interna (cps, ) e iniciais do tapete interno (iti). 8. Microsporngio aps a diviso da
camada patietal secundria externa, que deu origem ao futuro endotcio (en) e camada mdia (cm). 9. O
mesmo com clulas do tapete interno (tin) mais amplas e vacuoladas que as do tapete externo (tex).
arq=arquesplio, ce= camada esporognica, cm=camada mdia, co=conectivo, cpp=camada parietal pri-
mria, cps, e cps,=camadas parietais secundrias externa e interna, respecti vamente, e=epiderme,
en=endotcio, fpv=feixe pr-vascular, iti=iniciais do tapete interno, tex=tapete externo, tin=tapete inter-
no, tp=tecido placentide.
Microsporognese e etapas da ontogenia de TlIheh/lia ochracea 15
Fig. 10-15. Seces transversais de anteras em desenvolvimento. 10. Teca com CMMis prximas matu-
ridade. 11. Um dos microsporngios da figura anterior em maior aumento. 12. Microsporngio pouco
antes da primeira diviso meitica. 13. Extremidade de um microsporngio contendo ttrades telradricas
de micrsporos (tm), envolvidas por parede de calose (pca). 14. Microsporngio com micrsporos livres
uninucleados (mic). 15. Microsporngio aps retrao do tecido placentide (tp) e colapso das ca'madas
parielais (seta). cem=clulas eSlomiais, cm=camada mdia, CMMis=clulas mes dos micrsporos,
co=conectivo, e=epiderme, en=endotcio, fv=feixe vascular gp=gros de plen, mic=micrsporos,
pca=parede de calose, sie=septo interesporangial , tex=tapete externo, tin=tapete interno, lm=tlrades de.
micrsporos, tp=tecido placenlide,
16 BittencourtJr.
do estmio - clulas estomiais (Figura 10) - comeam a se alongar anticlinalmente
e, abaixo delas, as clulas do endotcio ou as da camada mdia sofrem divises peri-
clinais resultando em dois ou trs estratos. Na outra extremidade do microsporngio o
endotcio continua a se desenvolver, sendo que suas clulas tornam-se mais amplas e
vacuoladas, praticamente iguais as do conectivo.
Em seguida as clulas do tapete externo tambm aumentam em volume, passam
a apresentar-se bi ou tetranucleadas e iniciam vacuolao (Figura li); contudo perma-
necem ainda distintas das clulas do tapete interno, pois as ltimas so maiores e mais
vacuoladas. O incremento do formato em ferradura da camada de CMMis (em seco
transversal) alcana seu grau mximo. Em algumas regies, especialmente nas extre-
midades, a camada de CMMis pode encontrar-se biestratificada (Figuras 10 e 11).
Os microsporcitos atingem o seu tamanho mximo, tornam-se esfricos e uma
parede de calose (pac) se forma ao redor de cada um, entre a plasmalema e a parede
celular (Figura 12) - nas presentes preparaes as paredes de calose das CMMis
adquiriram uma colorao violeta. Nesse estgio a camada mdia se desintegra e ape-
nas os seus remanecentes esmagados so observados. Antes das CMMis entrarem em
meiose o tapete atinge o seu grau mximo de crescimento (Figura 12). O tapete exter-
no torna-se praticamente igual ao tapete interno e ambos apresentam agora ampla
vacuolao bipolar. Gros de amido se desenvolvem em todo o conectivo e endotcio,
especialmente na regio entre os dois microsporngios de cada teca e nos tecidos
placentides. As clulas epidrmicas comeam a tornar-se papilosas.
Os meicitos sofrem meiose e a citocinese simultnea resulta na formao de
ttrades tetradricas de micrsporos (Figura 13). Ocorre dissoluo das paredes celu-
lares originais das CMMis e, subseqentemente, das paredes de calose. Numerosos
corpsculos de Ubisch so depositados na superfcie tangencial interna do tapete e no
citoplasma de suas clulas observa-se uma substncia que, nas presentes preparaes,
adquiriu uma colorao parda. Nesse estgio os micrsporos j se encontram isola-
dos, expandiram-se consideravelmente e j apresentam a estrutura tpica da parede do
plen maduro (Figuras 14 e 22 a). O seu ncleo bastante proeminente. Tal como
ocorreu com a camada mdia, o endotcio se degenera, salvo nos flancos da teca e
ocasionalmente em algumas clulas abaixo das clulas estomiais (Figuras 14 e 15). O
estmio j apresenta a sua estrutura tpica, exceto pelo espessamento cuticular das
clulas estomiais, que ainda no se processou.
Normalmente, o tecido placentide, ento, se desorganiza, tornando-se uma
massa compacta de clulas esmagadas, mantendo ainda os gros de amido em seu
interior (Figuras 15 e 16). Entretanto, tal retrao do tecido placentide pode ter in-
cio um pouco antes deste estgio, ou somente em estgio mais avanado (comparar
com a Figura 19). As camadas tapetais comeam a se degenerar. O tapete interno
volta a se apresentar morfologicamente distinto do tapete externo, mas desta vez sim-
plesmente devido ao encolhimento do tecido placentide, fazendo com que as clulas
do tapete interno se tornem comprimidas umas contra as outras, conseqentemente
aparentando serem mais altas do que as do tapete externo (Figuras 14-15). Estas lti-
mas, por sua vez, tendem a se tornar achatadas e seus protoplasmas comeam a se
Mi crosporognese e etapas da onlogeni a de Tabehuia ochrllcea
17
retrair, dando a impresso de que as clulas se separam umas das outras, embora suas
paredes celulares permaneam intactas (Figura 15). Finalmente os restos protoplas-
mticos de ambos os tapetes tornam-se esferoidais (Figuras 17 e 18), deixando apenas
a membrana tapetal (mt) incrustrada de corpsculos de Ubisch (Figura 18) e as pare-
des anticlinais.
Ainda nesse estgio numerosos vacolos esferoidais se desenvolvem no proto-
plasma dos micrsporos, dan do incio diferenciao do gametfito masculino (Fi-
gura 22 b). Ao mesmo tempo o ncleo do plen deslocado para junto da parede e
sofre mitose, originando a clula generativa (cg) e a clula vegetativa. O ncleo da
clula vegetativa (ncv) volta a ocupar mais ou menos a posio central. A clula gene-
rativa, por seu turno, menor e de formato lenticular, permanece adjacente parede do
gro de plen, entre um colpo e outro (Figura 22 c).
O espessamento cuticular se processa nas clulas estomiais e nas clulas epidr-
micas adjacentes ao endotcio multiestratificado. Nos lados da teca as clulas do en-
dotcio comeam a diferenciar os espessamentos helicoidais lignificados em suas
paredes, inicialmente no estrato subepidrmico, continuando nos estratos mais pro-
fundos (Figuras 20 e 21). Ocasionalmente tais espessamentos se desenvolvem tam-
bm nas clulas remanecentes abaixo das clulas estomiais, mas neste caso os
espessamentos so muito tnues. A membrana tapetal adere-se junto aos restos de
tecidos degenerados da parede do microsporngio (Figura 19).
Gradualmente os vacolos do gro de plen desaparecem. A clula generativa
englobada pelo protoplasma da clula vegetativa (Figura 22 d e e) . Nesse estgio,
diminutos vacolos podem ser observados no citoplasma da clula generativa. No
ncleo da clula vegetativa o nuclolo expande-se, consideravelmente, e passa a apre-
sentar internamente uma ou mais regies claras, de formato esferoidal (Figura 22 d -
f) . Tais regies, freqentemente, se tornam bastante conspcuas. Numerosos gros de
amido se desenvolvem no protoplasma da clula vegetativa, ao mesmo tempo em que
a clula generativa se torna fusiforme. De um modo geral esta ltima se posiciona
lateralmente adjacente ao ncleo da clula vegetativa (Figura 22f).
Discusso
A freqncia de estmatos nas anteras est relacionada com o processo de deis-
cncia. Segundo Schmid (1976), a deiscncia essencialmente um processo desseca-
tivo e os estmatos presentes na antera podem ser funcionais - abrir e fechar
periodicamente - ou semifuncionais - permanentemente abertos -, podendo as-
sim acelerar a perda de gua.
Tricomas glandulares semelhantes aos encontrados nas anteras de Tabebuia
ochracea j foram observados tambm no lado dorsal da antera de Pyrostegia ignea
(Gupta & Nanda 1978 a) e de Distictella sp. (Barroso 1986).
O desenvolvimento da parede da antera do tipo Dicotiledneo (Davis 1966).
O tapete possui origem dual, derivando-se parcialmente das camadas parietais e par-
cialmente das clulas do conectivo, confirmando assim os estudos de Periasamy &
18
Bittencourt Jr.
Fig. 16-20. Seces transversais de anteras em desenvolvimento. 16. Tecido placentide (tp) (degenerado)
e septo interesporangial (sie) com corpsculos brilhantes, correspondendo a gros de amido em luz pola-
rizada. 17. Microsporngio apresentando tapete com protoplastos esferoidais (degenerados). Estmio de-
senvolvido. 18. Detalhe da parede da antera mostrando membrana tapetal (mt) incrustrada de corpsculos
de Ubisch. 19. Microsporngio com tapete totalmente degenerado e membrana tape tal (mt) aderindo-se
aos restos esmagados dos tecidos parietais. Tecido placentide ainda intacto. 20. Endotcio diferenciando
espessamentos helicoidais nas paredes celulares (setas). Fig. 21. clulas do endotcio dissociadas com
espessamentos helicoidais de paredes. cem=clulas estomiais, co=conectivo, e=epiderme, en=endotcio,
fv=feixe vascular, gp=gros de plen, mt=membrana tapetal, sie=septo interesporangial, tp=tecido pla-
centide.
rVlicrosporognese e etapas ela ontogenia ele TlIhehuia ochrocea 19
cg
~ I
h.
22
Fig. 22. a ~ r Seces transversais de micrsporos e gametlttos masculinos em sucessivos estgios de
desenvolvimento. a: rnicrsporo. b: estgio pr-mittico. Vacuolao do protoplasma. c: aps a mitose. d
e e: Clula generativa englobada pelo protoplasma da clula vegetativa. Expanso do nuclolo e forma-
o de vacolos nucleolares no ncleo da clula vegetativa. f: O protoplasma da clula vegetativa se torna
rico em gros de amido. A clula generativa se torna fusiforme. g: Aspecto externo de um gro de plen
t1icolpado. h: Aspecto externo de um gro de plen tetracolpado e sincolpado. Todos em vista polar.
cg=clula generativa, ncv=ncleo da clula vegetativa, ga=gros de amido.
20 BittencourtJr.
Swamy (1966) sobre a origem e a natureza do tapete em angiospermas.
Segundo Periasamy & Swamy (1964), freqentemente a poro interna do tape-
te mostra, durante os primeiros estgios de diferenciao, um arranjo irregular de suas
clulas, em contraste com o arranjo bastante regular da poro externa do tapete. Em
Tabebuia ochracea, clulas do conectivo adjacentes ao lado interno do tecido esporo-
gnico, apresentando denso citoplasma e ncleo proeminente, diferenciam-se numa
camada tapetal concomitantemente ou logo aps a diviso periclinal da camada pari-
etal primria; portanto o incio de diferenciao do tapete interno anterior ao do
tapete externo, uma vez que a camada parietal secundria interna diferencia-se direta-
mente em tapete externo. Em Heterophragma adenophylum o tapete interno tambm
o primeiro a se diferenciar (Mehra & Kulkrani 1985). Segundo os mesmos autores,
em Tabebuia rosea, no obstante, o contrrio observado, ou seja, o tapete externo se
diferencia antes do tapete interno, e, no restante das espcies por eles estudadas, am-
bos os tapetes diferenciam-se simultaneamente. Em Pyrostegia ignea e Tecoma stans,
tal como em Tabebuia ochracea, o tapete interno comea a se diferenciar antes do
tapete externo (Gupta & Nanda 1978 a, b e c).
Morfologicamente, a diferena de estgio de desenvolvimento entre os tapetes
interno e externo de Tabebuia ochracea persiste at a maturidade das CMMis, quan-
do, por fim, os dois tapetes tornam-se idnticos. Aparentemente por esta razo, na
maior parte do seu perodo de desenvolvimento os tapetes interno e externo apresen-
tam significante dimorfismo.
Embora a origem dual e a natureza dimrfica do tapete tenham sido observadas
em todas as Bignoniaceae estudadas por Gupta & Nanda (1978 a, b e c) e Mehra &
Kulkrani (1985), tais autores no fazem meno alguma sobre o fato de os tapetes
interno e externo se igualarem no final da fase pr-meitica, o que foi caracteristica-
mente observado em Tabebuia ochracea.
O tapete permanece intacto at a formao dos micrsporos uninucleados -
portanto do tipo secretor e no do tipo amebide, como sugerido por Davis (1966)
- e desenvolve uma distinta membrana incrustrada de corpsculos de Ubisch -
membrana tapetal (Gupta & Nanda 1972).
A vacuolao bipolar das clulas do tapete prximo ao estgio de diviso mei-
tica foi tambm observada em Tabebuia rosea (Mehra & Kulkrani 1985). No obs-
tante, segundo os mesmos autores, ao amadurecer o endotcio de T. rosea no
desenvolve os espessamentos em suas paredes celulares; j em T. ochracea observa-
se a formao de um expressivo endotcio fibroso multiestratificado, embora restrito
a quatro stios em cada antera. Endotcio com este mesmo comportamento foi obser-
vado em Pyrostegia ignea e Tecoma stans (Gupta & Nanda 1978a e b). Ghatak (1956)
descreveu o desenvolvimento de um endotcio fibroso multi estratificado em Oro-
xylum indicum, mas no forneceu nenhuma ilustrao que consubstanciasse sua ex-
posio.
Segundo Schmid (1976, p. 304), "Although it is generalIy acknowledged that
the actual force resulting in dehiscence of anthers is in some manner related to the
endothecium (when present), the exact physical mechanism for dehiscence stilI has
Mi crosporognese e elapas da ontogeni a de Tabebuia ochracea 21
not been adequately clarified." A natureza espiralada dos espessamentos de parede
das clulas do endotcio de Tabebuia ochracea - tambm observada em Pymstegia
ignea e Tecoma stans (Gupta & Nanda 1978 b e c) - descarta a possibilidade do
endotcio de tais espcies atuar na dei scncia da antera por um processo de coeso-
adeso exatamente igual ao usualmente admitido (ver descrio fornecida por Fahn
1990, p. 431). Especula-se se o endotcio de Tabebuia ochracea no estaria tambm
envolvido, por um processo higroscpico, no movimento das tecas, responsvel pelo
seu posicionamento aps a antese. Estudos mais aprofundados da topografia do endo-
tcio e de sua natureza quanto aos espessamentos de parede, com relao a sua funo
na antera como um todo, tornam-se, portanto, necessrios.
Nos micrsporos da espcie presentemente estudada, a seqncia de eventos
at a maturidade do gametfito masculino segue o padro usual em angiospermas,
segundo Maheshwari (1949). Gentry (1973) e Silvestre & Melhem (1989) citam o
plen de Tabebuia ochracea como tricolpado apenas, mas no presente trabalho foram
ocasionalmente observados tambm gros polnicos tetracolpados.
Durante o desenvolvimento do gametfito masculino observou-se um cresci-
mento significativo do nuclolo na clula vegetativa e o aparecimento, em seu inte-
rior, de reas claras arredondadas. O nuclolo o local de sntese e processamento
de rRNA, bem como da reunio de proteinas em partculas pr-ribossmicas (Goes-
sens 1984). Segundo o mesmo autor, o nmero de nuclolos, seu tamanho e sua
forma variam amplamente dependendo do organismo, do tipo de clula, da sua ploi-
dia, ou do seu estado fisiolgico, sendo que o aumento do tamanho do nuclolo de
uma clula freqentemente est relacionado com o incremento de sua atividade sin-
tetizante.
As reas esferoidais claras, observadas no nuclolo da clula vegetativa, so
conhecidas na literatura como vacolos ou interstcios nueleolares (Moreno-Dias de
la Espina et ai. 1980; Goessens 1984). Admite-se tambm que estejam relacionados
com uma elevada atividade biossinttica das clulas que os possuem, desempenhando
um papel no transporte e reserva de precursores pr-ribossmicos (Moreno-Dias de la
Espina et aI. 1980). Portanto, o pronunciado crescimento do nuclolo, bem como o
surgimento de vacolos nucleolares, sugerem uma alta atividade sintetizante da clula
vegetativa, durante a maturao do gametfito masculino. Tal atividade certamente
relaciona-se tambm com a expressiva formao de gros de amido no protoplasma
da clula vegerativa neste perodo.
O encolhimento do tecido placentide pode ser observado em estgios diferen-
tes, mas sempre no final da maturao da antera. As vezes uma mesma antera pode
apresentar um ou mais tecidos placentides desorganizados e outros ainda intactos.
Tais observaes sugerem ser a retrao do tecido placentide uma conseqncia da
dessecao implicada no processo de deiscncia da antera. Da mesma forma, a desor-
ganizao e a ruptura do septo interesporangial pode ocorrer em estgios diferentes,
mas sempre no final do desenvolvimento da antera.
Na maturidade as clulas epidrmicas adjacentes linha de deiscnci a - clu-
las estomiais (expresso utilizada por Woycicki (1924), referindo-se mesma estrutu-
22 BittencollrtJr.
ra em outras espcies) - tornam-se radialmente alongadas e com cutcula espessa, o
que representa, nas palavras de Mehra & Kulkrani (1985, p. 249) "uma peculiaridade
obviamente associada ao mecanismo de deiscncia da antera".
Agradecimentos
Ao Depto. de Botnica - ICB - UFMG e Prof. Dra. Marilene M. Nogueira
Braga, pela oportunidade de realizao deste trabalho. Ao CNPq, pela bolsa de Inici-
ao Cientfica. Ao Lab. de Anatomia Vegetal do Depto. de Botnica - UFRGS, na
pessoa do Prof. Dr. Jorge E. A. Mariath, pelos auxlios na montagem final deste ar1igo.
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