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Escola Superior de Sade do Vale do Sousa

Objectivos:
Nesta actividade experimental so esperados atingir dois objectivos: 1 -Dosear o colesterol total (livre e esterificado) presente numa amostra de plasma utilizando um mtodo que se baseia em trs reaces em cadeia, catalizadas por trs enzimas (esterase, colesterol oxidase e peroxidase), sendo esperado como produto final a quinonoimina (quanto mais intensa for a cor vermelha, maior a concentrao de colesterol). 2 - Determinar a concentrao de triglicridos presentes numa amostra de plasma, utilizando um mtodo que compreende quatro reaces em cadeia catalizadas por quatro enzimas (lipoprotena lipase (LPL), glicerol-3-P cinase (GK), glicerol oxidase e peroxidase (POD)), sendo esperado como produto final a quinonoimina (cor vermelha proporcional concentrao de triglicridos)

Resultados: Valores de densidade ptica:


Para saber a densidade ptica do colesterol e dos triglicridos utilizou-se um espectrofotmetro.

Tabela 1: Densidade ptica (D.O.) dos tubos dos quais se pretende calcular a concentrao de colesterol.

Tubos 1 (tubo branco, gua destilada) 2 (amostra de plasma) 3 (padro de colesterol)

Absorvncia (510 nm) 0 0.188 0.246

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Escola Superior de Sade do Vale do Sousa Tabela 2: Densidade ptica (D.O.) dos tubos aos quais se pretende calcular a concentrao de triglicridos.

Tubos 1 (tubo branco, gua destilada) 2 (amostra de plasma) 3 (padro)

Absorvncia (540 nm) 0 0.108 0.393

Clculos:
Concentrao de colesterol na amostra de plasma:
mg de colesterol/dl de amostra

mg/dl

Concentrao de triglicridos na amostra de plasma:

mg de TG/dl de amostra

mg/dl

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|| - Deteco de corpos cetnicos na urina Objectivo:


Determinar a existncia de corpos cetnicos numa amostra de urina, tendo por base um mtodo que reage o nitoprussiato em soluo alcalina com o cido acetoactico (caso o resultado seja positivo, aparece um composto de cor prpura).

Resultados:

Fig 1: Urina, cor obtida no tubo 1

Fig. 2: Urina, cor obtida no tubo 2

Tabela 1: Deteco e concentrao de corpos cetnicos na urina. Urina 1 Cor observada (intensidade) Corpos cetnicos cido acetoactico Amarel o Urina 2 Prpura (+++) Present es 80 mg

Ausent es ____

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Concluso/Comentrios:
o 1. Trabalho prtico: A concentrao de colesterol de 152.85 mg/dl na amostra de plasma, o que significa que se encontra dentro dos valores normais, na medida em que estes oscilam entre 140 210 mg/dl. Relativamente aos triglicridos, a concentrao destes de 54.96 mg/dl, o que revela que se encontra tambm dentro dos valores normais que oscilam entre 40 165 mg/dl. O colesterol tem um papel importante na regulao da fluidez das membranas citoplasmticas, destina-se formao de cidos biliares e precursor de hormonas esterides. Quando existem nveis altos de gordura, principalmente o colesterol, podem levar a graves problemas no organismo. Com o aumento do nvel plasmtico de colesterol h um maior risco no desenvolvimento da arterosclerose, a principal causa de morbilidade e mortalidade nos pases ocidentais e por isso que a colesterolemia constitui um dos testes bioqumicos mais requisitados na clnica. Relativamente aos triglicridos, ainda desconhecido se, com o aumento destes no sangue poder existir alguma possibilidade de haver riscos a nvel de problemas no corao e de derrames. o 2. Trabalho prtico: Neste trabalho verifica-se a existncia de um composto de cor prpura intensa no tubo 2, enquanto que no tubo 1 observa-se precisamente o contrrio, ou seja, no h qualquer alterao da cor. A observao da existncia de cor intensa prpura, permite-nos avaliar a ocorrncia de corpos cetnicos presentes na amostra de urina. A ausncia de modificao da cor no tubo 1, corresponde falta de corpos cetnicos na amostra de urina, enquanto que a cor intensa prpura obtida no tubo 2, diz-nos que h uma elevada
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concentrao de corpos cetnicos na amostra de urina (80 mg de acetocido/100 ml de urina). Nveis elevados de corpos cetnicos do origem a uma situao de acetoacidose, formao de corpos cetnicos, devido a um jejum prolongado e diabetes.

Bibliografia:

Caderno de trabalhos prticos da cadeira de Bioqumica Geral 1. semestre, 1 ano, 2008/2009; data da consulta: 17/12/2008. http://pt.wikipedia.org/wiki/cetose; data da consulta: 17/12/2008. http://www.lincx.com.br/lincx/saude_a_z/prevencao/triglicerid eos.asp; data da consulta: 19/12/2008.

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