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Linfertilit dans lespce bovine / 1

Linfertilit dans lespce bovine: un syndrome Prof. Ch. Hanzen


Anne 2010-2011
Universit de Lige Facult de Mdecine Vtrinaire Service de Thriogenologie des animaux de production Courriel : Christian.hanzen@ulg.ac.be Site : http://www.therioruminant.ulg.ac.be/index.html Publications : http://orbi.ulg.ac.be/ Table des matires
1. Objectifs .........................................................................................................................................2 1.1. Objectif gnral......................................................................................................................2 1.2. Objectifs spcifiques ..............................................................................................................2 1.2.1. Objectifs de connaissance 2 1.2.2. Objectifs de comprhension 2 1.2.3. Objectifs dapplication 2 Introduction gnrale ....................................................................................................................2 Etiologie .........................................................................................................................................3 3.1. Facteurs gnraux ..................................................................................................................3 3.2. L'absence de fcondation.......................................................................................................4 3.2.1. La conduite d'levage 4 3.2.2. Les pathologies gnitales femelles 5 3.3. La mortalit embryonnaire ....................................................................................................6 3.3.1. Aspects cliniques de la mortalit embryonnaire 6 3.1.3.1. Mthodes de quantification 6 3.1.3.2. Manifestations cliniques 7 3.3.2. Facteurs tiologiques 8 3.2.3.1. Facteurs propres lembryon 8 3.2.3.2. Facteurs parentaux 10 3.2.3.3. Linsmination artificielle 12 3.2.3.4. Les biotechnologies de la reproduction : la fcondation in vitro 12 3.2.3.5. Les facteurs biologiques 14 3.2.3.6. Facteurs environnementaux 16 3.3.3. Pathognie de la mortalit embryonnaire 19 Diagnostic.................................................................................................................................... 21 4.1. Le diagnostic de troupeau................................................................................................... 21 4.2. Le diagnostic individuel ....................................................................................................... 22 4.2.1. L'examen vaginal 22 4.2.2. L'examen transrectal 22 4.2.3. Les examens complmentaires 22 Traitements................................................................................................................................. 23 5.1. Moyens de lutte au niveau du troupeau............................................................................. 23 5.2. Moyens de lutte individuels ................................................................................................ 23 5.2.1. Les traitements non-hormonaux 23 5.2.2. Les traitements hormonaux 23 5.2.2.1. Les progestagnes 23 5.2.2.2. La gonadolibrine 25

2. 3.

4.

5.

Linfertilit dans lespce bovine / 2 6. 7. Pour en savoir plus...................................................................................................................... 33 Tableaux ...................................................................................................................................... 35

1. Objectifs
1.1. Objectif gnral

Ce chapitre revt une importance extrme car linfertilit constitue dune part un problme de plus en plus frquemment rencontr en levage bovin et traduit dautre part les consquences des pathologies du post-partum ou pubertaire prcdemment dcrites. Il passe en revue les tiologies spcifiques ou non dune absence de fcondation et/ou de mortalit embryonnaire en mettant laccent sur les aspects individuels ou de troupeau. Les traitements spcifiques ou non du syndrome infertilit sont passs en revue en mettant laccent sur les justifications et modalits dutilisation de la gonadolibrine. 1.2.
1.2.1.

Objectifs spcifiques Objectifs de connaissance

1. Citer le critre qui en pratique permet de dfinir une vache infertile 2. Citer les deux origines de l'infertilit d'une vache chaleurs rgulires 3. Citez trois facteurs responsables potentiels de non fcondation et/ou de mortalit embryonnaire 4. Citer 5 facteurs responsables spcifiquement d'une absence de fcondation 5. Dfinir la mortalit embryonnaire prcoce et tardive 6. Enoncer cinq causes de mortalit embryonnaire. 7. Illustrer au moyen d'exemples les 7 grands groupes de cause de mortalit embryonnaire 8. Enoncer les symptmes chographiques de la mortalit embryonnaire 9. Enoncer l'hormone responsable spcifique du maintien de la gestation 10. Faire un schma du mcanisme hormonal du maintien de la gestation 11. Enoncer les mthodes individuelles et de troupeau du diagnostic de la mortalit embryonnaire tardive. 12. Enoncer les protocoles hormonaux applicables au traitement individuel de linfertilit
1.2.2.

Objectifs de comprhension

1. 2. 3. 4. 5. 6.

Expliquer brivement l'effet des facteurs responsables d'une non fcondation Expliquer les donnes ncessaires la quantification de la mortalit embryonnaire tardive. Expliquer brivement l'effet de cinq facteurs responsables de mortalit embryonnaire. Expliquer les critres de diagnostic clinique d'une non fcondation. Expliquer les critres de diagnostic clinique d'une mortalit embryonnaire Expliquer une conduite diagnostique hierarchise conduisant l'identification des causes de l'infertilit individuelle. 7. Justifier les protocoles hormonaux applicables au traitement individuel de linfertilit 8. Commenter les mesures zootechniques applicables au traitement de l'infertilit. Objectifs dapplication

1.2.3.

1. Choisir sur base d'une anamnse et d'un examen clinique la stratgie thrapeutique adapte la situation physiopathologique d'une vache infertile

2. Introduction gnrale
La fertilit se dfinit notamment comme la possibilit dobtenir une gestation avec une voire deux insminations, on parlera dinfertilit dans le cas contraire. Son amlioration demeure un des objectifs

Linfertilit dans lespce bovine / 3 prioritaires pour optimiser le potentiel de reproduction et donc de production de llevage bovin. On peut en effet raisonnablement estimer que sur 100 vaches ou gnisses insmines, 50 dentre elles seulement donneront naissance 9 mois plus tard un veau vivant. Cest dire limportance des pertes rencontres qui schmatiquement relvent de 4 grands syndromes : labsence de fcondation, la mortalit embryonnaire, lavortement ou et laccouchement prmatur. Diverses tudes ayant eu recours labattage des animaux 2 3 jours aprs linsmination ont dmontr que le taux de fcondation est compris entre 71 et 100 %. Chez les animaux repeat-breeders par contre, ce pourcentage est compris entre 60 et 72 %. Lors de superovulation, cette absence de fcondation est galement plus frquente chez les repeat-breeders que chez les animaux normaux. Diverses publications ont galement t consacres au problme des avortements et/ou accouchements prmaturs. Ces travaux ont fait tat de leur frquence ainsi que de leur tiologie. En ne considrant que les cas diagnostiqus par lleveur ou le vtrinaire, la frquence des avortements serait en moyenne de 1,9 % (0,4 5,5 %). Elle serait en moyenne de 6,9 % (3,6 10,6 %) si sont pris en compte non seulement les cas cliniques davortement mais galement les pertes non cliniquement diagnostiques, situation habituelle au cours des 150 premiers jours de gestation. Les synthses consacres la mortalit embryonnaire sont demeures ce jour, relativement peu nombreuses. Il est vrai que lanalyse de cet important problme aux consquences conomiques redoutables nest pas chose aise. La priode embryonnaire classiquement dfinie comme la priode comprise entre la fcondation et la fin de lorganogense soit le 42me jour de gestation environ implique pour son droulement un synchronisme optimal entre les divers aspects morphologiques, physiologiques, endocrinologiques, biochimiques, immunologiques et gntiques quelle implique. Par ailleurs, son tude in vivo nest pas chose aise. Cependant, limportant dveloppement des recherches dans les domaines de la biotechnologie de lembryon a permis de lever une partie du voile sur les facteurs potentiellement responsables. L'infertilit se traduit par l'augmentation de l'index de fertilit au-del de sa valeur moyenne de troupeau gnralement admise soit 1,5 2. Elle entrane pour l'leveur un manque gagner certain puisqu'elle contribue augmenter le dlai ncessaire l'obtention d'une gestation. Le repeat-breeding en est une des manifestations cliniques frquemment rencontre. Sera qualifie d'infertile ou de repeat-breeder toute vache non gestante aprs deux voire trois insminations artificielles ou naturelles, qui a une activit cyclique rgulire et qui ne prsente aucune cause majeure cliniquement dcelable susceptible d'tre responsable de son infertilit. La frquence du repeat-breeding dans les exploitations bovines est comprise selon les auteurs entre 10 et 24 %. La dtermination de la frquence normale repose sur un simple calcul de probabilit. Ainsi, si P reprsente la probabilit d'une gestation en 1re, 2me, 3me... insmination alors la probabilit de non gestation (I: infertile) lors d'un numro d'insmination donn est gal In = (1-P)n.. Si la probabilit de gestation en premire insmination est de 0.6; valeur habituellement considre comme un objectif, alors la probabilit de non-gestation aprs deux insminations est gal 0.16 c'est dire que 16 % des animaux ne seront pas gestants aprs avoir t insmins deux fois. Aussi, l'valuation de la frquence normale d'animaux repeat-breeders dans une exploitation devrait idalement tenir compte du pourcentage de gestation en premire insmination qui y est constat. Les paramtres de quantification de la fertilit sont dcrits de manire plus exhaustive dans le chapitre consacr la gestion de la reproduction bovine.

3. Etiologie
Certains qualifis de gnraux peuvent traduire leurs effets aussi bien par de la non fcondation que par une mortalit embryonnaire prcoce. D'autres sont plus spcifiques et concernent davantage l'un ou l'autre mcanisme pathognique. 3.1. Facteurs gnraux

Les lsions inflammatoires de l'utrus peuvent s'opposer la fcondation en dtruisant les

Linfertilit dans lespce bovine / 4 spermatozodes ou au dveloppement embryonnaire prcoce. De nombreuses tudes ont confirm le fait que le diagnostic et donc le traitement tardif des mtrites augmente la frquence des animaux repeat-breeders. Les lsions induites par les mtrites telle que la fibrose priglandulaire surtout si elle concerne une grande partie de l'endomtre, ont galement t reconnues comme cause de repeatbreeding. Des anomalies du recrutement folliculaire vers le 12me jour du cycle prcdant l'insmination peuvent tre l'origine de modifications de la squence ovulatoire, de dfauts de la maturation ovocytaire voire du dveloppement embryonnaire et par consquent d'infertilit. D'autres auteurs ont galement identifis 2 51 jours aprs l'strus, chez les repeat-breeders un nombre plus faible de follicules de taille comprise entre 1 et 3 mm que chez les animaux tmoins. L'altration du processus de la croissance folliculaire pourrait donc s'exercer galement long terme. Un effet de la race sur la frquence des non fcondations et des mortalits embryonnaires prcoces a t rapport. Il concerne aussi bien les mles que les femelles. Diverses tudes ont galement tabli une corrlation entre la fcondit des mles et celles de leurs descendants aussi bien mles que femelles. D'une manire gnrale, il est bien dmontr qu'une augmentation de la temprature externe se traduise par une augmentation de l'infertilit. Les relations entre fertilit et alimentation ne sont pas aises tudier. D'abord parce que les facteurs alimentaires impliqus sont multiples et que d'autre part ils peuvent exercer leurs effets moyen voire long terme. Il n'est donc possible que de mettre l'accent sur les relations les plus caractristiques. Le repeat-breeding serait davantage imputable une perte de poids par l'animal qu' son tat maigre. La fertilit ne serait donc perturbe que pendant la priode de dficit nergtique. La carence ou l'excs de protines sont nuisibles la fertilit. Mais plus que les valeurs absolues des apports, il faut tenir compte des apports relatifs par rapport l'nergie et par rapport la production laitire voire par rapport aux dysfonctionnements hpatiques ventuellement prsents tels que la statose ou la distomatose qui rduisent les capacits de dtoxification de cet organe. L'augmentation de l'ure et de l'ammoniac est prjudiciable l'obtention d'une fertilit normale. Les effets des minraux sont difficilement identifiables. Des carences en Ca, P, Mn, Co, Cu, Zn peuvent se traduire par de l'infertilit. Il a t clairement tabli que les apports en vitamine E-Se ne modifient pas la fertilit des bovins. Le rle de la vitamine 1A et ou du beta carotne est controvers. Des carences en vitamine C ont galement t suspectes. 3.2.
3.2.1.

L'absence de fcondation La conduite d'levage L'insuffisance de la dtection des chaleurs

a.

Selon les tudes, on peut estimer que 5 30 % des vaches prsentent le jour de l'insmination des concentrations leves en progestrone (Senger et al. J.Anim.Sci. 1988, 66, 1010-1016). Ce pourcentage peut dans certains levages problmes tre encore plus levs. Ce fait explique sans doute en partie pourquoi le taux de repeat-breeders semble tre directement proportionnel avec la taille des troupeaux. En effet, dans les grands levages, la dtection des chaleurs est souvent moins bonne. De la mme manire, les conditions d'levage c'est--dire la nature ou la conception des locaux en favorisant ou non l'expression ou non des chaleurs peuvent modifier indirectement la frquence du repeatbreeding. Diverses tudes ont confirm que le risque de repeat-breeding est en relation directe avec la prsence dune concentration trop leve de la progestrone dans la matire grasse au moment de loestrus (Waldmann et al. 2001 : Anim.Reprod.Sci. 2001,65,33-41 ; Gustafsson et al. Anim.Reprod.Sci., 1986,10,261-273 ; Bage et al. Theriogenology, 1997,47,141-142). La cause peut en tre trouve dans

Linfertilit dans lespce bovine / 5 une mauvaise identification des signes de chaleurs. Il est possible galement que laugmentation de la progestrone au moment des chaleurs se traduise par une rduction des signes comportementaux (Schopper et Claus Zuchthygiene, 1986,21,237-240), la progestrone inhibant les effets comportementaux des oestrognes. Une balance hormonale dsquilibre peut se traduire par une modification des signes comportementaux tant sur le plan qualitatif (extriorisation plus intense chez les repeat-breeders : Bage 1998 in Waldmann et al. 2001) que quantitatif (oestrus prolong ches les repeat-breeders : Gustafsson et al. Anim.Reprod.Sci., 1986,10,261-273). b. Choix du moment de l'insmination:

Classiquement, on prconise dinsminer l'aprs-midi une vache vue en chaleurs le matin et d'insminer le lendemain matin une vache vue en chaleurs l'aprs-midi. En effet, les meilleurs taux de gestation sont obtenus lorsque les animaux sont insmins au cours des 6 dernires heures de l'strus, des rsultats tant encore satisfaisants dans les 6 heures qui suivent la fin des chaleurs. Par contre, les taux de gestation obtenus avec des insminations plus prcoces ou plus tardives sont insuffisants. Peut donc se poser le problme du choix du moment optimal de l'insmination pour les 25 % de vaches dont les chaleurs sont courtes c'est--dire infrieures 6 heures. L'absence de rle de garde des insminateurs soulve galement un autre problme pratique si les animaux viennent en chaleurs le dimanche. Rappelons que la dure de vie des spermatozodes est de 24 heures et celle de l'ovocyte de 5 heures. c. Endroit anatomique de linsmination:

Une rduction de 22% de gestation a t rapporte si le dpt de la semence se faisait dans le canal cervical au ou niveau de l'exocol. Il existe une grande diffrence d'habilet entre les insminateurs ou les leveurs surtout s'ils sont en priode de formation.
3.2.2.

Les pathologies gnitales femelles

L'absence de fcondation peut rsulter de troubles au cours de la priode priovulatoire. L'existence de certains d'entre eux a t bien dmontre, d'autres sont plus hypothtiques. a. L'absence d'ovulation

Certaines tudes faites aprs abattage des animaux ont dmontr que dans 8 10 % des cas de repeatbreeding l'ovulation n'avait pas eu lieu. Il semble nanmoins peu probable que cette pathologie puisse s'accompagner d'une cyclicit normale. Cependant, il n'est pas impossible de penser que l'absence d'ovulation puisse s'accompagner d'une lutinisation prcoce du follicule (LUF syndrome: Luteinized Unruptured follicle syndrome), phnomne qui a t observ chez la femme et plus particulirement chez la femme infertile. Ce phnomne a t observ chez la jument particulirement en fin de priode de reproduction. D'autres troubles de l'ovulation ont t suspects comme l'existence de follicules ovulant alors qu'ils ne renferment pas d'ovocytes (follicules "vides"). b. L'ovulation asynchrone

Un asynchronisme dans la squence oestrus-ovulation a galement t invoqu pour expliquer l'absence de fcondation. Selon certains auteurs, ce phnomne serait observ chez 18 % des animaux infertiles. D'autres auteurs ont cependant tendance minimiser l'importance de cette tiologie. c. Les pathologies de l'oviducte

Les rcoltes d'embryons raliss 6 11 jours aprs l'strus, montrent des taux de rcupration d'embryons ou d'ovocytes beaucoup plus faibles chez les animaux repeat-breeders que chez les animaux normaux. Ce fait tendrait prouver que les vaches problmes prsentent soit une dgnrescence rapide et totale des ovocytes et/ou des embryons soit, plus vraisemblablement une absence d'ovocytes dans le tractus gnital. Outre l'absence d'ovulation, il convient donc de prendre galement en compte la possibilit d'une mauvaise captation de l'ovocyte par le pavillon tubaire soit une obstruction des oviductes. Les lsions histo-anatomiques de l'oviducte peuvent tre congnitales (ovaires encapsuls, aplasie des oviductes...) ou acquises (adhrences, obstructions, hydrosalpinx...suite des csariennes, nuclations de corps jaunes, endomtrites, instillations utrines...).; Selon les tudes

Linfertilit dans lespce bovine / 6 4 19 % des animaux infertiles seraient concerns par ces problmes. d. Limmunisation antispermatique

Certains auteurs ont avancs la possibilit d'une production locale dans les voies gnitales femelles d'anticorps antispermatiques. L'hypofertilit observe en mdecine humaine serait due une rduction par phagocytose ou par immobilisation du nombre de spermatozodes atteignant l'endroit de fcondation ou un blocage de l'interaction ovocyte-spermatozoide. En mdecine vtrinaire, divers travaux dmontrent l'existence possible d'anticorps spermo-agglutinants. Ce phnomne d'immunisation expliquerait certais cas ou des vaches insmines ou saillies sans succs avec le sperme d'un mme taureau, sont gestantes ds la premire tentative avec le sperme d'un autre taureau. 3.3. La mortalit embryonnaire

La chronologie des premires tapes du dveloppement embryonnaire a t dveloppe dans le chapitre 25 relatif la production dembryons in vivo. De mme le chapitre 6 relatif au diagnostic de gestation a rappel les principales modifications hormonales relatives la gestation chez la vache. Nous nous limiterons ds lors signaler que morphologiquement, la priode embryonnaire prsente chez les ruminants et la truie plusieurs caractristiques quil nest pas inutile de rappeler pour mieux comprendre la pathognie de la mortalit embryonnaire. Ces trois espces se caractrisent par un allongement extrmement important du blastocyste, rsultat dune intense prolifration trophoblastique, une fois ce dernier sorti de sa pellucide. Elles se distinguent galement par une dure de vie libre relativement longue qui rend lembryon beaucoup plus dpendant du milieu utrin. Par ailleurs et la diffrence des rongeurs et des primates qui ont un placenta de type hmochorial (raction dciduale), limplantation de lembryon est, chez les ruminants et la truie, beaucoup plus superficielle, le placenta tant de type syndesmo-chorial (ruminants) ou pithlio-chorial (truie, jument). Elle ressemble de ce fait davantage une fixation qu une nidation. Le moment de cette fixation est variable selon les espces. Elle sobserverait au plus tt vers le 13me jour de gestation chez la truie, le 15me jour chez la brebis, le 30me jour chez la vache et le 37me jour chez la jument Cest galement au cours de cette priode que les embryons vont dans les espces plus frquemment polytociques se distribuer (plus que migrer au sens strict) dans les cornes utrines de manire passive. Chez la vache, la migration de lembryon demeure exceptionnelle. Elle est plus frquente chez la brebis. Chez la jument, elle est particulirement importante entre le 10me et le 19me jour de gestation. Elle a t implique dans le mcanisme du maintien de la gestation.
3.3.1. 3.1.3.1.

Aspects cliniques de la mortalit embryonnaire Mthodes de quantification

La quantification de la mortalit embryonnaire dans lespce bovine nest pas chose aise. Il faut y voir le manque dharmonisation de sa dfinition et donc de la priode considre mais galement lemploi de mthodes aussi diffrentes que labattage des animaux, la rcolte dembryons, les dosages hormonaux, la palpation rectale ou lchographie. La quantification de la mortalit embryonnaire tardive procde en fait le plus souvent de lassociation de mthodes prcoces de diagnostic de nature hormonale (progestrone, PAG/PSPB), chographique ou manuelle et de mthodes tardives faisant habituellement appel la palpation manuelle ou la simple notation du retour en chaleurs de lanimal ou de sa rinsmination (Tableau 1). On comprend aisment que ces mthodes de quantification sont de nature survaluer ou sous-valuer selon les circonstances la frquence de la mortalit embryonnaire. Divers biais de quantification sont en effet possibles. Ils rsultent de diffrences voire de variations en fonction du stade de gestation de la sensibilit des mthodes utilises dautant que le statut de gestation ou de non-gestation sont rarement connus en pratique dans un troupeau avant la mise en place de lune ou lautre mthode de diagnostic. Ils peuvent galement relever du fait que certaines mthodes telle la palpation manuelle peuvent dans certaines circonstances tre responsables dune mortalit embryonnaire. Enfin le degr dexactitude du diagnostic peut galement dpendre de la qualit de la dtection des chaleurs. Ainsi la confirmation progestronique dune gestation peut tre

Linfertilit dans lespce bovine / 7 errone si lanimal insmin 21 jours plus tt ntait pas en chaleurs. De mme, la manifestation dune chaleur par un animal auparavant confirm gestant ne constitue pas ncessairement la preuve dune interruption de gestation. Pour interprter la frquence de la mortalit embryonnaire tardive, il nous semble donc important de considrer non seulement le stade de gestation auquel le diagnostic prcoce a t pos mais galement la mthode et le dlai utiliss pour en tablir le diagnostic tardif. Dtermines par abattage des animaux au cours des 35 premiers jours de la gestation, les pertes imputables la mortalit embryonnaire sont comprises entre 10 et 36 % chez les animaux normaux (Bearden et al. 1956, Kidder et al. 1954, Boyd et al. 1969, Ayalon 1978) et entre 24 et 72 % chez les animaux repeat-breeders (Tanabe et Almquist 1953, Tanabe et Casida 1949, Hawk et al. 1955, OFarrell et al. 1983). Les rcoltes dembryons ralises vers le 7me jour de gestation estiment entre 7 et 16 % le nombre dembryons dgnrs (Diskin et Sreenan 1980, Roche et al. 1981, Maurer et Chenault 1983, Ayalon 1981). Le degr dexactitude dun diagnostic prcoce (J21 J24) de gestation par dosage de la progestrone est compris entre 75 et 85 % (Booth et Holdsworth 1976, Dobson et Fitzpatrick 1976, Gowan et Etches 1979, Heap et al. 1976, Hoffman et al. 1976, Pennington et al. 1976, Pope et al. 1976, Shemesh et al. 1978). Des suivis journaliers ou bi voire trihebdomadaires de la progestronmie au cours des premires semaines de la gestation sont venus par ailleurs confirm que la frquence de la mortalit embryonnaire au cours des 40 50 premiers jours de la gestation tait comprise entre 12 et 23 % (Franco et al. 1987, Bulman et Lamming 1979, Gowan 1982). Evalues sur base dun diagnostic prcoce de gestation par chographie, la frquence de la mortalit embryonnaire serait selon les tudes comprises entre le 1er et le 3me mois de gestation entre 2 et 30 % (Humblot et Thibier 1984, Kastelic et al. 1989, Badtram et al. 1991, Pieterse et al. 1990, Chaffaux et al. 1986, Taverne et al. 1985, Hanzen et Delsaux 1987, Willemse et Taverne 1989, Hanzen et Laurent 1991). De mme entre le 2me et le 5me mois de gestation, la frquence dinterruption de la gestation value par lassociation dun diagnostic manuel prcoce et tardif de la gestation est comprise entre 1 et 31 % (Thurmond et Picanso 1993b, Abbitt et al. 1978, Alexander et al. 1995, White et al. 1989, Paisley et al. 1978, Warnick et al. 1995, Lopez-Gatius et al. 1996, Franco et al. 1987, Vaillancourt et al. 1979).
3.1.3.2.

Manifestations cliniques

Les manifestations cliniques de la mortalit embryonnaire et par consquent la possibilit den faire le diagnostic dpendent troitement du moment de son apparition. Cliniquement il semble logique de distinguer la mortalit embryonnaire prcoce de la mortalit embryonnaire tardive. La premire ferait rfrence la priode pour laquelle on ne dispose daucun moyen de diagnostic de gestation soit environ les 20 premiers jours suivant linsmination. La seconde concernerait la priode pendant laquelle peuvent tre mises en place des mthodes de confirmation de gestation, quelles soient hormonales (progestrone, PAG, PSPB), chographique ou manuelles. Il semble donc opportun denvisager sparment le devenir clinique dune mortalit embryonnaire prcoce et tardive. Les consquences cliniques dune mortalit embryonnaire prcoce sont non seulement frustres mais troitement dpendantes du moment de son apparition et plus prcisment de la possibilit pour lembryon davoir ou non eu le temps de synthtiser le signal inhibiteur de la lutolyse. Ainsi une mortalit embryonnaire observe avant le 14me-16me jour de gestation ne modifie pas la longueur du cycle. A linverse, observe naturellement ou induite par lablation chirurgicale de lembryon aprs le 14me-16me jour suivant linsmination elle se traduit par un allongement de 5 10 jours du cycle voire par une absence de retour en chaleurs de lanimal (Humblot et Dalla-Porta 1984, Betteridge et al.1980, Martal et al.1979, Laing 1949, Wiltbank et al. 1956). Cette seconde possibilit est davantage rencontre chez des gnisses normales que chez des gnisses repeat-breeders dont les embryons prsentent plus frquemment un retard de dveloppement et des altrations morphologiques du bouton embryonnaire (Albihn et al. 1991). Cette observation est importante puisque la capacit de production de la trophoblastine dpend de la taille de lembryon, celle-ci devant tre acquise un moment bien

Linfertilit dans lespce bovine / 8 particulier et peut tre influence par diffrents facteurs dont en particulier le stress thermique (Biggers et al. 1987). Ainsi, seuls les embryons ayant une taille suprieure 15 mm entre le 15me et le 17me jour de gestation sont chez la vache capable de synthtiser la trophoblastine de type 1 (Geisert et al. 1988). Lchographie et les suivis hormonaux ont permis de prciser le devenir de lembryon et des liquides embryonnaires lors dune mortalit embryonnaire tardive observe naturellement ou induite manuellement ou pharmacologiquement. L'absence de battements cardiaques constitue le signe le plus vident d'une mortalit embryonnaire (Kahn et Leidl 1989, Pierson et Ginther 1984b, Curran et al. 1986b). Celle-ci est habituellement prcde d'une diminution de la frquence cardiaque. Le devenir de lembryon et de ses annexes va dpendre du fait que la mortalit embryonnaire prcde ou non la rgression lutale. La mort naturelle de l'embryon ou induite par une injection intra-utrine de colchicine ou par un crasement manuel de la vsicule embryonnaire saccompagne dune rgression lutale dont la dure moyenne est de 3 jours mais peut tre de 42 jours (Kastelic et al. 1991). Il sen suit la possibilit dune rtention prolonge de lembryon et de ses enveloppes qui dans ce cas prennent un aspect dgnr (mortalit embryonnaire primaire) (Dawson 1974 phc 1551, Ball et Carroll 1963, Parmigiani 1978, Kassam et al. 1987). A linverse, linjection dune prostaglandine 24 jours (Kastelic et Ginther 1989), 40 jours (Kosugyama et al. 1978 ), 29 52 jours (Millar 1974) ou 35 70 jours (Lindell et al. 1980/1981) aprs linsmination ou une mortalit embryonnaire spontane faisant suite une rgression lutale (Kastelic et al. 1991) se traduit habituellement par lexpulsion dans les quelques jours suivants dun embryon non dgnr et de ses enveloppes (mortalit embryonnaire secondaire). Dans les deux cas cependant, l'embryon et ses enveloppes sont plus frquemment expulss au travers du col utrin que rsorbs (Kastelic et Ginther 1989). Il semblerait donc que le phnomne de rsorption souvent voqu soit erron. Sur le plan hormonal, linjection dune prostaglandine ou linduction artificielle dune infection utrine au moyen d Actinomyces pyogenes saccompagne dune diminution de la concentration plasmatique de la PSPB. La progestronmie diminue brutalement aprs linjection dune prostaglandine mais se maintient un niveau lev pendant une vingtaine de jours aprs ladministration dActinomyces pyogenes (Semambo et al. 1992). Lors de mortalit embryonnaire tardive spontane, la progestronmie diminue 3 42 jours plus tard (Kastelic et al. 1991, Kassam et al. 1987). Cette diminution saccompagne dans 60 % des cas de celle de la PSPB. Labsence de corrlation entre ces deux hormones implique donc la dtermination simultane de leurs concentrations pour contrler une mortalit embryonnaire (Humblot et al. 1988). La mortalit embryonnaire ne saccompagne daucune libration importante de prostaglandine F2alpha (Kassam et al. 1987).
3.3.2.

Facteurs tiologiques

Ils sont prsents de manire synthtique dans le tableau 7.


3.2.3.1.

Facteurs propres lembryon

a.

Les anomalies chromosomiques

Les anomalies chromosomiques (dltion, duplication) peuvent tre hrites ou acquises au cours de la gamtognse, de la fcondation (polyspermie, absence dexpulsion du globule polaire) ou de lembryogense (formation dun nombre excessif suprieur 25 % de cellules polyplodiques) (King 1985, Hare et al. 1980). Ainsi, les traitements de superovulation augmentent le risque de polyspermie, celle-ci apparaissant plus frquemment aprs injection de PMSG que de FSH (King 1985). La frquence des anomalies caryotypiques (translocations, mutations) dembryons produits in vivo et analyss avant le 18me jour de gestation serait en moyenne de 10 % (7 36 %) (King et al. 1990, King et al. 1995). Elles concernent le plus souvent les embryons gs de moins de 7 jours. Cette frquence diminue avec lge de lembryon, preuve indirecte de leur implication dans la mortalit embryonnaire, celle-ci pouvant tre considre comme un lment rgulateur essentiel des embryons anormaux (King et al. 1990, Iwasaki et al. 1992). Elles reprsenteraient une des causes majeures de mortalit

Linfertilit dans lespce bovine / 9 embryonnaire et ftale. Les translocations 1/29 et 7/21 sont les principales dcrites dans lespce bovine (King 1991, Hanada et al. 1981, Gustavsson et Rockborn 1964, Gustavsson 1979). La translocation 1/29 est hritable (Langhammer et Schwerin 1985) et commune de nombreuses races de bovins mais plus particulirement aux races Pie Rouge sudoise, Charolaise et Simmenthal (Gustavson 1979). Comme la translocation 7/21 (Hanada et al. 1995), elle entrane une rduction de 3 8 % de la fertilit (Langhammer et Schwerin 1985, Maurer et Vogt 1988) mais se traduit davantage encore par une mortalit embryonnaire que par une absence de fcondation (Schmutz et al. 1991). Rsultant dune sgrgation anormale des chromosomes au cours de la miose, elle entranerait la formation dun chromosome submtacentrique suite la fusion de deux chromosomes non homologues acrocentriques (1 et 29) (King et al. 1991). Les bovins homozygotes ou htrozygotes pour cette translocation aurait respectivement 58 ou 59 chromosomes. Rcemment, une tude caryotypique plus spcifique dembryons au jour 5, obtenus par fcondation in vitro a identifi un taux de dveloppement plus lent des embryons haplodes ou polyplodes que des embryons mixoplodes (embryons avec des blastomres de plodies diffrentes) ou diplodes (Kawarsky et al. 1996). Diverses mutations au niveau des gnes de contrle du dveloppement peuvent galement tre responsables de la mortalit de lembryon (Viuff et al. 1994). Dans ce contexte, lorigine du pre exercerait une influence certaine (Coleman et al. 1987, Ley 1985). Semblable influence a galement t observe chez la brebis lencontre de la synthse de trophoblastine (Vallet et Bazer 1988). Plus spcifiquement, il a t dmontr quune dficience en uridine-monophosphate-synthtase, lment rgulateur de la synthse des acides nucliques, gntiquement dtermine par un gne autosomal rcessif pouvait tre responsable de mortalit embryonnaire concernant le plus souvent des embryons homozygotes avant le 40me jour de gestation (Shanks et al. 1992, Shanks et Robinson 1989). Deux pourcents des vaches Holsteins seraient htrozygotes (Robinson et al. 1984, Shanks et al. 1987). Il nest pas exclu de penser que les manipulations engendres par la fcondation in vitro puissent galement tre responsable dune augmentation des anomalies chromosomiques (King 1985, Iwasaki et al. 1992). b. Le sexe de lembryon

Le sexe du foetus est dtermin au moment de la fcondation, son expression napparaissant que beaucoup plus tard. Une capacit de dveloppement dpendante du sexe a t dmontre chez les embryons bovins produits in vivo et in vitro. Les embryons de sexe mle se dvelopperaient plus rapidement que ceux de sexe femelle tout au moins jusquau stade de blastocyste (Avery 1989, Avery et al. 1989, Xu et al. 1992, Yadav et al. 1993). En effet, 95 % des embryons sexs au 7me jour de gestation se rvlent tre des mles (Avery et al. 1991). De mme, les embryons de sexe femelle seraient plus sensibles une biopsie ralise en vue de la dtermination du sexe (Gutierrez et al. 1995). Labsence de diffrences significatives du sex-ratio habituellement rapporte lencontre des veaux nouveau-ns laisse supposer que les embryons de sexe mle seraient davantage exposs une mortalit embryonnaire ou ftale (Berg et al. 1992). c. Le nombre dembryons

Dans l'espce bovine, la double ovulation s'observe dans 75 % des cas sur le mme ovaire (Hanranhan 1983). Elle s'accompagne ou non, en cas de gestation (Sreenan et Diskin 1989), d'un plus grand risque de mortalit embryonnaire (Gordon et al. 1962, Rowson et al. 1971, Erb et Morrison 1959, Day et al. 1995). Celle-ci est plus frquente si les deux gestations se dveloppent dans la mme corne utrine (Day et al. 1995) et davantage encore si la corne droite est concerne (Echterkamp et al. 1990). Chez la brebis, la mortalit embryonnaire est plus frquente chez les femelles qui prsentent deux ou plus de deux ovulations surtout si celles-ci concernent le mme ovaire (Willingham et al. 1986, White et al. 1981, Casida et al. 1966). Dautres auteurs ont fait cependant des observations inverses (Doney et al. 1973). Il est intressant dobserver que dans lespce ovine la migration utrine dun embryon est beaucoup plus frquente lorsque les deux ovulations sont observes sur le mme ovaire que sur des ovaires diffrents (Scanlon 1972). Par ailleurs, il nest pas exclu que les changements de prsentation du ou des foetus en cours de gestation puissent galement tre lorigine de pertes embryonnaires et ou ftales (Reimers et al. 1973).

Linfertilit dans lespce bovine / 10

Le transfert dembryons offre une mthode alternative intressante laugmentation du nombre de veaux produits par un mme animal donneur. Il est couramment admis que le transfert chirurgical ou non de deux embryons entrane un taux de gestation suprieur celui obtenu par le transfert dun seul embryon (36 67 % vs 60 91 %) (Renard et al. 1977, Brand et al. 1977, Heyman et al. 1977, Renard et al. 1978, Heyman 1985). Semblable observation a t faite aprs transfert de trois embryons (Izaike et al. 1991). Cependant, le nombre dembryons perdus est proportionnel au nombre dembryons transfrs. Ainsi, trois mois aprs le transfert de deux ou de trois embryons des receveuses, le pourcentage dembryons encore prsents tait respectivement de 37% et de 30%. La perte de tous les embryons transfrs est plus frquemment observ aprs le transfert de trois (23 % des cas) que de deux embryons (29 % des cas) (Izaike et al. 1991). De mme, le taux de survie des embryons transfrs dans la corne contralatrale au corps jaune est habituellement infrieur (31 39 %) celui observ lencontre des embryons transfrs dans la corne ipsilatrale (46 69 %) (Heyman et al. 1977, Tervit et al. 1977, Kastelic et al. 1991, Christie et al. 1979, Del Campo et al. 1983). Ce fait a t imput au mcanisme local de leffet antilutolytique de lembryon (Christie et al. 1979). Tant chez la souris et la lapine que la truie on a observ une rduction de la taille de la porte avec lge de lanimal (Talbert et Krohn 1966, Adams 1970, Gosden 1979, Hill et Webb 1982). Chez la souris, cette observation a t impute une modification de la vascularisation et du contenu en collagne de lendomtre. Chez la truie, espce polytocique, la taille de la porte dpend bien sr du nombre dovulations mais galement de lespace utrin dvolu chaque embryon ou foetus (Wu et al. 1987), leffet rducteur sur le nombre dembryons se manifestant surtout aprs le 35me jour de gestation. Ainsi, jusque 14 embryons, la taille de la porte dpend surtout du nombre dovulations. Au del de ce nombre, elle est davantage fonction de la longueur de lutrus (Wu et al. 1989). Il est galement intressant de noter que dans cette espce, la position de lembryon dans la corne utrine peut hypothquer son devenir. Ainsi, les embryons localiss lextrmit des cornes ont davantage despace que ceux localiss leur base. Ceci explique sans doute pourquoi lincidence des momifications ftales est plus grande dans le tiers infrieur que suprieur de la corne (Dziuk et Hentzel 1977). Chez la brebis, il existe une relation entre le nombre et le poids des cotyldons et le poids de lagneau (Alexander 1964) , les agneaux simples sont plus lourds que les jumeaux et ceux-ci le sont davantage que les tripls (Bradford et al. 1986).
3.2.3.2.

Facteurs parentaux

a.

Facteurs paternels

Diverses publications ont fait tat de leffet ngatif exerc par un sperme de mauvaise qualit sur le risque de mortalit embryonnaire prcoce (Courot et Colas 1986, Dejarnette et al.1992, Setchell et al. 1988). De mme linfluence du taureau sur le dveloppement embryonnaire a t observ dans diverses expriences de fcondation in vivo (Coleman et al. 1987, Miller et al. 1982) et in vitro (Eyestone et First 1989b, Hillery et al. 1990, Shi et al. 1990). Le rle des spermatozodes accessoires a t dmontr (Saacke et al. 1991). Le taureau serait sans effet sur la frquence de la mortalit embryonnaire tardive value par le taux de non-retour entre 25 et 35 jours (Humblot et Denis 1986, Mares et al. 1961, Bar Anan et al. 1979) ou par un suivi progestronique (Ball 1978). D'autres auteurs ont fait des observations inverses (Wijeratne 1973, Bulman 1979). b. Facteurs maternels L'environnement de l'oviducte

L'oviducte et plus particulirement la jonction utro-tubaire est le sige de la fcondation et des premires tapes du dveloppement embryonnaire jusqu'au stade 8 16 cellules, atteint vers le 2me3me jour de gestation. Son rle a particulirement t identifi dans le cadre de la fcondation in vitro,

Linfertilit dans lespce bovine / 11 la leve du blocage au stade 8-16 cellules ne pouvant tre obtenu que par une coculture avec les cellules de loviducte (Eyestone et First 1989a). Il exerce galement un rle essentiel dans le cadre de la migration des embryons. En effet, lors de superovulation, l'augmentation du nombre d'embryons dgnrs rcolts a t impute leur passage trop rapide dans l'utrus suite une acclration de leur transport dans l'oviducte sous l'effet de l'augmentation trop prcoce de la progestrone synthtise par des follicules prmaturment lutiniss (El Banna et Hafez 1970). Plusieurs dizaines de protines et facteurs de croissance ont t identifis dans le liquide tubaire, mlange de transsudat sanguin et de scrtions des cellules pithliales (Malayer et al. 1988, Gerena et Killian 1990). Leur rle mitotique sur les premiers stades du dveloppement embryonnaire a t suggr (Gandolfi et al. 1989, Gandolfi et al. 1992, Gandolfi 1994). Par ailleurs, on a identifi dans loviducte des concentrations en ions, vitamines et acides amins (taurine, glycine) fort diffrentes des concentrations plasmatiqueLeese 1988. Cependant, ce jour laddition dans le milieu de culture de facteurs de croissance na pas eu les rsultats esprs (Flood et al. 1993). Ces dcouvertes jointes celles relatives au mtabolisme nergtique de lembryon (Rieger 1992) offrent des perspectives intressantes dans la comprhension du dveloppement in vitro des embryons.

L'environnement utrin

Ralisant des transferts croiss dembryons entre donneuses et receveuses repeat-breeders et normales Tanabe conclut limportance plus grande du milieu utrin que de lorigine de lembryon. (Tanabe et al. 1985). Les recherches relatives aux relations existantes entre l'environnement utrin et l'embryon ont essentiellement concern les protines d'origine endomtriale et embryonnaires. Cependant, de nombreuses inconnues subsistent encore et seul le rle de quelques unes d'entre elles a t approch. Ainsi, la phosphatase alcaline a t implique dans les interactions endomtre-trophoblaste observes entre le 22me et le 24me jour de gestation (Leiser et Wille 1975). Plus rcemment, on a observ une augmentation de la concentration endomtriale d'une synthtase entre le 15me et le 18me jour de gestation (Schmitt et al. 1993). De mme, une protine de liaison dont la synthse est stimule par la progestrone a t rendue responsable du transfert l'embryon du rtinol (Thomas et al. 1992). Des facteurs de croissance tels que l'IGF I et II (Insulin Growth Factors) ont t isols dans le liquide de lavage utrin d'animaux gestants et non-gestants (Geisert et al. 1991). Les protines d'origine embryonnaire ont fait l'objet de davantage d'tudes en particulier celles impliques dans le mcanisme de reconnaissance de la gestation telles la trophoblastine (Thatcher et al. 1989) et les interfrons (Roberts et al. 1992). Etudiant la composition du milieu utrin au 7me jour de la gestation, Wiebold rapporte une augmentation significative du glucose, des protines totales, du calcium, du magnsium et du potassium lorsquun embryon dgnr tait rcolt. De mme, il observe une tendance laugmentation du zinc et du phosphore (Wiebold 1988 phc 8141). Ayalon rapporte galement une augmentation du calcium, du phosphore, du potassium et du zinc en cas dembryons dgnrs mais nobserve pas de modifications de la concentration en protines (Ayalon 1978). Chez les animaux repeat-breeders, on a observ des concentrations utrines plus faibles en protines, sodium, phosphore et glucose mais plus leves en calcium, potassium et magnsium que chez les animaux normaux (Lamothe et Guay 1970).

La race et lge de lanimal

Plusieurs tudes ont confirm il y a de nombreuses annes dj l'absence de relations entre la race et la frquence de la mortalit embryonnaire (Casida 1950, Kidder et al. 1954, Boyd 1965). Cependant plusieurs auteurs ont confirm l'effet ngatif exerc par l'inbreeding sur la frquence de la mortalit embryonnaire (Mares et al. 1961, Conneally et al. 1963). Leffet de lge de lanimal sur les pertes embryonnaires et ftales a rarement t dcrit. Il est vrai que ce genre dtude comporte un biais important, savoir le faible pourcentage, parmi les vaches ges, des animaux qui ont dj prsent un avortement. En effet , le plus souvent cette pathologie saccompagne de la rforme de lanimal (Thurmond et al. 1990, Thurmond et Picanso 1993a). Selon les tudes, la mortalit embryonnaire est plus frquente chez les primipares (Erb et Holtz 1958) ou chez les vaches avec plus de 5 lactations (Boyd et Reed 1961, Ball 1978) que les vaches entre la

Linfertilit dans lespce bovine / 12 deuxime et la quatrime lactation. Dautres tudes confirment la plus grande frquence davortements chez les vaches ges de 3 et 4 ans (Mitchell 1960, Withers 1957). Semblable corrlation avec lge na pas t observe par dautres auteurs (Erickson et al. 1976).
3.2.3.3.

Linsmination artificielle

La frquence de la mortalit embryonnaire est 4 fois plus leve chez les animaux insmins plus de trois fois que chez les autres (20.3 % vs 5.2 %) (Vaillancourt et al. 1979). Wijeratne observe galement une augmentation de la mortalit embryonnaire avec le numro dinsmination, que les animaux aient t insmins avec du sperme frais ou congel (Wijeratne 1973). De mme, le pourcentage dembryons dgnrs ou anormaux est significativement plus lev chez des gnisses repeat-breeders que chez des gnisses normales (Linares 1981/1982, Gustafsson 1985). De mme, le moment de linsmination par rapport lovulation revt une certaine importance et remet ce faisant en exergue limportance de la qualit de la dtection des chaleurs. En effet, ralisant un suivi chographique journalier du moment de lovulation (JO), Kastelic observe une frquence plus leve de mortalit embryonnaire entre le 29me et le 32me jour de gestation parmi les animaux insmins deux jours avant lovulation (3/40) que le jour prcdant lovulation (0/96) (Kastelic et al. 1991).
3.2.3.4.

Les biotechnologies de la reproduction : la fcondation in vitro

a.

La fcondation in vitro : interprtation des rsultats et consquences

A ce jour, les taux de gestation observs aprs transfert dembryons frais ou congels obtenus aprs fcondation in vitro dovocytes prlevs sur des ovaires danimaux abattus ou par ponction choguide (Greve et Madison 1991, Brackett et Zuelke 1993, Hanzen et Goffin 1998) sont comparables voire lgrement infrieurs ceux rencontrs aprs transfert dembryons rcolts in vivo (Takada et al. 1991, Reichenbach, 1992a, 1992b, Xu et al. 1987, Looney et al. 1994). Une publication rcente a fait le point sur les rsultats de la fcondation in vitro. Selon les conditions exprimentales, la fertilisation d'ovocytes obtenus par ponction d'ovaires prlevs aprs abattage des animaux, s'observe dans 41 76 % des cas et le stade morula ou blastocyste est atteint dans 12 20 % des cas (Brackett et Zuelke 1993). Ces rsultats sont comparables ceux obtenus aprs prlvement des ovocytes par ponction choguide des follicules puisqu'en moyenne 15 % (3 41 %) des ovocytes mis en maturation atteignent le stade de morula ou de blastocyste (Hanzen et Goffin 1998). Force est cependant de constater que les tudes comparatives conduites dans des environnements contrls sont rares. Des diffrences existent et leurs raisons en sont multiples. Tout dabord, les embryons obtenus in vivo et in vitro prsentent des caractristiques morphologiques et physiologiques fort diffrentes (Pollard et Leibo 1994, Brackett et Zuelke 1993, Hackett et al. 1993, Wright et Ellington 1995). Par exemple, la densit moindre des embryons produits in vitro les rend plus sensibles la conglation (Pollard et Leibo 1994). Ces diffrences peuvent galement rsulter de la qualit fort variable des gamtes mles et femelles utiliss mais galement de la difficult de dfinir un milieu optimal de maturation des ovocytes et de dveloppement des premiers stades embryonnaires (Hackett et al. 1993). De mme, linterruption de la gestation pendant la priode embryonnaire ou ftale est plus frquente aprs le transfert dembryons obtenus in vitro ou par clonage (20 %) quin vivo (5 %) (Betteridge et Loskutoff 1993, Kruip et Den Haas 1997) et surtout si les embryons obtenus in vitro ont t congels (Ishimori et al. 1993, Massip et al. 1983, Zhang et al. 1993). Il importe galement que soient davantage prciss voire harmoniss les critres d'valuation de la qualit des ovocytes et des embryons, condition pralable l'interprtation et la comparaison des rsultats obtenus. Classiquement, la qualit des ovocytes est dtermine par examen microscopique en se rfrant des critres morphologiques tels que le degr de compacit des cellules du cumulus ou encore lhomognit et l'opacit du cytoplasme de l'ovocyte (De Loos et al. 1989, Hazeleger et al. 1995). Celle des embryons peut tre value par coloration (Purcell et al. 1985), par la mesure de son activit enzymatique (OFallon et Wright 1986), ou de sa capacit absorber le glucose (Brinster 1968) ou encore par des critres ultrastructurels tel laspect du rticulum endoplasmique (Hyttel et Nieman

Linfertilit dans lespce bovine / 13 1990). Cependant, pour des raisons pratiques videntes, cette valuation fait appel des critres morphologiques (Lindner et Wright 1983, Shea 1981) tels que la forme de lembryon, la couleur du cytoplasme, le nombre et le degr de compaction des cellules, la taille de lespace perivitellin, le nombre de cellules dgnres, la frquence et la taille des vsicules cytoplasmiques. Ces critres permettent de vrifier en fait que lembryon a atteint un degr de dveloppement correspondant au stade de gestation. En effet, chez les bovins, un asynchronisme de 3 jours ou plus se traduit par une rduction du pourcentage de gestation aprs transfert (Elsden etal. 1978). Initialement 4 catgories de qualit dembryon ont t distingues. Lembryon excellent est sphrique avec des cellules de taille, de couleur et daspect comparables , Lembryon dit de bonne qualit est fort semblable et ne prsente que quelques blastomres de forme irrgulire et trs peu de vsicules cytoplasmiques. Lembryon de qualit moyenne ne prsente que peu de problmes si ce nest la prsence de vsicules dans des cellules dgnres. Lembryon de mauvaise qualit se caractrise par un nombre important de blastomres dgnrs, des cellules de taille variable et un grand nombre de vsicules. Transfrs des animaux receveurs, le taux de gestation est respectivement de 45, 44, 27 et 20 % (Lindner et Wright 1983). En labsence de diffrence significative entre les embryons de classe 1 et 2, un systme de classification en trois classes a t propos , bon, moyen et mauvais (Farin et Farin 1995). Ces systmes dvaluation, bien quen partie subjectifs, sont nanmoins troitement corrls avec le taux de gestation (Hasler et al. 1987, Lindner et Wright 1983 inn10870). Ainsi, aprs le 42me jour de gestation, le pourcentage davortements est plus lev aprs le transfert dun embryon de mauvaise (7,7 %) que de bonne (4 %) qualit (Callesen et al. 1992). Les consquences de lobtention dun embryon obtenu in vitro sur son dveloppement ultrieur jusquau stade ftal voire nonatal commencent tre tudies (Walker et al. 1996). Dans lespce ovine, cette mthode de reproduction se traduit par un allongement significatif de la dure de la gestation et du poids de lagneau (Walker et al. 1992, Holm et al. 1994). Dans lespce bovine, les embryons de classe 1 obtenus in vitro prsentent plus frquemment de la mortalit embryonnaire que les embryons morphologiquement de mme qualit, produits in vivo. Par ailleurs, leur dure de gestation est plus longue. De mme, 7 mois leur poids est 17 % plus lev et leurs mensurations squelettiques sont disproportionnes par rapport leur poids corporel. Enfin, bien que comparables en couleur et aspect, le nombre des cotyldons est moindre compar au poids corporel des foetus (Farin et Farin 1995). Cette observation nest pas sans relation avec leffet multiplicateur sur le bouton embryonnaire rapport lencontre dembryons bovins (Iwazaki et al. 1990) ou porcins (Papaionnaou et Ebert 1988) transfrs dans des oviductes de rongeurs. b. Facteurs propres lovocyte

Lembryon acquiert avant la fcondation sa capacit se dvelopper. Les techniques de prlvement in vivo dovocytes en vue de leur maturation et fcondation in vitro ultrieures ont mis en exergue limportance de divers facteurs susceptibles dinfluencer la qualit des follicules ponctionns et ds lors celle de lovocyte quils renferment mais surtout sa capacit tre fcond et produire un embryon de qualit normale. On sait par exemple que la maturation nuclaire est plus rapide in vitro quin vivo (King et al. 1986). Au nombre de ces facteurs, il est important de mentionner de manire prioritaire le stade du cycle auquel le prlvement est ralis, ltat corporel et lge des animaux prlevs. Ainsi, ltat de sous-nutrition des animaux prlevs, rduit la qualit du dveloppement ovocytaire et embryonnaire (Lopez Ruiz et al. 1996, Dominguez 1995). Aucun effet de lge ne semble ce jour avoir t dmontr (Katska et Smorag 1984, Revel et al. 1995) pour autant que les animaux soient gs de plus de 6 8 mois (Duby et al. 1996). Le stade du cycle a davantage dimportance. La capacit de dveloppement jusquau stade de blastocyste est plus grande pour des ovocytes prlevs en milieu quen fin ou en dbut de cycle (Machatkova et al. 1995). De mme, la prsence dun corps jaune sur lovaire ponctionn influencerait favorablement la qualit du dveloppement embryonnaire (Thonon et al. 1993) mais serait sans influence sur celle de la maturation ovocytaire (Fukui et Sakuma 1980). Plus spcifiquement, le potentiel de dveloppement des ovocytes prlevs dans des follicules de diamtre gal ou suprieur 6 mm est plus grand que sils ont t prlevs au sein de follicules de taille infrieure (Mc Caffrey et al. 1992). Cette observation est complmentaire du fait qu la diffrence des

Linfertilit dans lespce bovine / 14 ovocytes maturs in vivo dans le follicule, les ovocytes prlevs au sein de follicules immatures ne peuvent tre fertiliss que si leur maturation est ralise en prsence de cellules folliculaires et dhormones appropries (Leibfreid-Rutledge et al. 1989). Limportance de lenvironnement hormonal pralable se trouve confort par le fait que les traitements de superovulation sont susceptibles de le modifier et ds lors dinfluencer ngativement la qualit des ovocytes et des embryons obtenus (voir infra) (Greve et al. 1989). De mme, certains cas de repeat-breeding chez les gnisses sexpliqueraient indirectement par lallongement de lintervalle entre le dbut de loestrus et le pic de lhormone LH et par la libration insuffisante de cette hormone (Gustafsson et al. 1986, Erb et al. 1976, Maurer et Echterkamp 1982). Le clonage constitue une mthode intressante pour multiplier le potentiel gntique dun animal. Il suppose le recours des ovocytes receveurs obtenus in vivo ou in vitro. La mthode dobtention de lovocyte est sans influence sur le pourcentage de dveloppement aprs inoculation dun noyau embryonnaire (Barnes et al. 1993, Yang et al. 1993). Cependant, le taux de reprise du dveloppement apparat tre moindre si lembryon a t obtenu in vitro plutt quin vitro (Heyman et al. 1994, Yang et al. 1993).
3.2.3.5.

Les facteurs biologiques

a.

Donnes cliniques

De nombreuses tudes ont t consacres aux germes spcifiques et non-spcifiques du tractus gnital au cours du post-partum, chez les repeat-breeders, lors dendomtrites ou davortements (Bartlett et al. 1986, Chaffaux et al. 1991, Cohen et al. 1995, Dohoo et al. 1984, Eaglesome et al. 1992a,1992b, Griffin et al. 1974a, 1974b, Hussain et al. 1990, Hartigan 1977, Olson et al. 1984, Vallet et al. 1987). Quelques publications ont fait tat dune relation entre la manifestation par lanimal dune pathologie utrine et la possibilit dune interruption de la gestation. Ainsi, parmi les 15 cas dinterruptions de gestation observs au cours des 100 premiers jours suivant la fcondation, 73 %des animaux avaient t traits pour endomtrites, cervicites, repeat-breeding ou avaient prsent un cycle allong (Paisley et al. 1978). Une tude plus rcente observe galement une multiplication par 2,6 et 1,8 du risque dinterruption de gestation entre le 42me et le 150me jour respectivement chez les animaux qui ont prsent un pyomtre ou une rtention placentaire, la manifestation par lanimal dun kyste ovarien ou de repeat-breeding tant sans effet (Lopez-Gatius et al. 1996). Limplication directe des germes spcifiques et surtout non-spcifiques na fait lobjet que de quelques publications au demeurant fort contradictoires. Ainsi, une mortalit embryonnaire est-elle observe dans les 6 jours suivant linjection exprimentale d Actinomyces pyogenes entre le 27me et le 41me jour de gestation (Semambo et al. 1991). De mme, linoculation dHaemophilus somnus des gnisses superovules entrane une diminution du nombre dembryons rcolts et une rduction de leur capacit se dvelopper en culture (Kaneene et al. 1986,1987). Linjection intraveineuse de ce germe est susceptible dinduire une mortalit embryonnaire ou un avortement (Widders et al. 1986). Par contre, aucune Brucella abortus nest retrouve dans le liquide de rcolte de vaches, brucelliques ou inocules, superovules (Stringfellow et al. 1982, Voelkel et al. 1983). Ladministration intra-utrine de Leptospira interrogans hardjo ninduit aucun signe dinfection utrine (Vahdat et al. 1983), ni ne diminue le taux de gestation (Whitmore 1985). Les tudes cliniques ou exprimentales relatives Mycoplasma ont apport des conclusions opposes (Hirth et al. 1970, Erno et Philipses 1969). Lexposition in vitro dembryons Ureaplasma diversum nen induit aucune altration visible (Britton et al. 1988). Linjection exprimentale par voie intraveineuse du virus BHV-1 des gnisses srongatives 7 14 jours aprs linsmination induit une mortalit embryonnaire (Miller et Van der Maaten 1986,1987), consquence possible dune atteinte endomtriale, embryonnaire (Bowen et al. 1985) ou lutale (Miller et Van der Maaten 1985). Ladministration intra-utrine au moment de linsmination (Grahn et al.1984) ou en dbut de gestation (Archbald et al. 1979) du virus de la maladie des muqueuses (BVD) induit une diminution du pourcentage de fcondation et augmente celui dembryons dgnrs, consquence rsultant davantage dune atteinte endomtriale quembryonnaire (Donis 1988).

Linfertilit dans lespce bovine / 15

b.

Transmission par la fcondation in vitro

Le recours de plus en plus frquent au transfert d'embryons et la fcondation in vitro pose le problme du rle potentiel de ces mthodes dans la transmission d'infections virales ou bactriennes et donc dans la mortalit embryonnaire. Le risque semble nanmoins limit eu gard aux rsultats des recherches entreprises en ce domaine (Guerin et al. 1997, Singh 1988). Contamination de lovocyte

A ce jour, seule la contamination intracellulaire de l'ovocyte par le parvovirus (Bane et al. 1990) ou par le Campylobacter fetus (Bielanski 1994) a t dmontre. La contamination intrafolliculaire de l'ovocyte par Leptospira hardjo a galement t observe aprs une induction exprimentale de l infection (Bielanski et Surujballi 1996). On ne peut nanmoins exclure la possibilit pour certains virus tels le BVD (Bielanski et Dubuc 1994b) ou le BHV-1 (Miller et Van Der Maaten 1984, Miller et Van Der Maaten 1985, Miller et Van Der Maaten 1986, Miller et Van Der Maaten 1987 in 6433, Bielanski et Dubuc 1994a, , Guerin et al. 1989, Singh et al. 1982, Booth et al. 1995, Booth et al. 1992) dans l'espce bovine, le virus de la scrapie chez les ovins (Foster et al. 1992) et le parvovirus (Bane et al. 1990) ou le virus responsable du PRRS syndrome (Done SH In Pig Reproduction. Problems, practices and principles. Cambac Associates Publication 1999) chez les porcins de pntrer dans l'ovocyte au moment de la fcondation, leur prsence ayant t dmontre dans le liquide folliculaire, les cellules de la granuleuse ainsi que dans l'ovaire, l'oviducte ou lutrus. Contamination de lembryon dans le tractus gnital

Lembryon transfr ou non peut tre contamin lors de son transit dans loviducte ou la corne utrine par des germes connus pour leur tropisme gnital et leur capacit de liaison la membrane pellucide tels Brucella, Campylobacter, Leptospira, Vibrio, lInfectious Pustular Vaginitis virus, Haemophilus somnus, Chlamydia, Mycoplasma bovis, Mycoplasma bovigenitalium, Ureaplasma diversum (Britton et al. 1988, Kaneene et al. 1986, Kapoor et al. 1989, Rohde et al. 1990, Otoi et al. 1992). En ce qui concerne le prion responsable de la BSE, aucun tropisme gnital n'a t dmontr son encontre (Barlow et al. 1990). Contamination du matriel animal utilis pour la FIV

Le matriel animal (ovaires, cellules d'oviductes, sperme, srum) utilis pour la fcondation in vitro (FIV) peut galement constituer une source de contamination des embryons par un virus (Bielanski et al. 1993, Guerin et al. 1988, Guerin et al. 1989, Booth et al. 1992, Avery et al. 1993, Bielanski et Dubuc 1994a, Bielanski et Dubuc 1994b, Rossi et al. 1990). De mme, on ne peut exclure la possibilit que certains virus tels les virus herps bovins et porcins ou le virus de la stomatite vsiculeuse ou que certaines bactries comme Brucella ovis, E.Coli, M.paratuberculosis, Streptococcus spp. ou Mycoplasma spp. puissent rester adhrents et contaminer lembryon une fois celui-ci sorti de sa membrane pellucide. De mme, on sait que certains virus tels le BVD ou le BHV-1 peuvent se fixer aux spermatozodes et constituer ce faisant une source d'infection lors de la fcondation in vivo ou in vitro (Bielanski et al. 1993, Guerin et al. 1990). Il est communment admis que la membrane pellucide dembryons obtenus in vivo constitue une barrire de protection efficace quelle que soit la taille de lagent causal suspect et la dure dexposition. Nanmoins, il n'est pas impossible de penser que la diffrence de structure et de contenu protique entre des membranes pellucides obtenues in vivo et in vitro (Riddell et al. 1993) puisse tre responsable d'une modification de leur rsistance l'infection (Stringfellow et Wrathall 1995) et que la fcondation in vitro constitue un facteur de risque supplmentaire d'infection et donc de mortalit embryonnaire. Ces ventualits semblent nanmoins avoir des effets limits. En effet, l'heure actuelle, l'effet dltre sur la qualit et le nombre d'embryons obtenus n'a t observ que dans des conditions d'infection exprimentale (Bielanski et al. 1993 phc 10914, Wentinck et al. 1991 in 10914) ou aprs utilisation de sperme provenant dun taureau infect de manire persistante par le virus du BVD (Guerin et al. 1992). Le risque est limit par le recours des procds (gradients de percoll, procdures de swim-up...) visant rduire, voire liminer, les bactries prsentes dans le sperme utilis pour la fcondation in vitro

Linfertilit dans lespce bovine / 16 (Bielanski et al. 1992), par laddition dantibiotiques aux milieux de culture (Otoi et al. 1992), par le lavage des embryons au moyen de trypsine, mthode connue pour liminer les particules virales (Stringfellow et al. 1990, Singh et al. 1982, Gillespie et al. 1990) ou encore par l'utilisation de srums dcontamins par irradiation (Rossi et al. 1990) ou de substituts de srum (Seidel et al. 1990, Palasz et al. 1993, Palasz et al. 1995). Semblables prcautions peuvent se rvler nanmoins insuffisantes notamment lencontre des mycoplasmes et uraplasmes (Thompson et al. 1988), du parvovirus porcin (Gradil et al. 1994) ou du virus de la stomatite vsiculeuse (Stringfellow et al. 1989), voire du BVD (Bielanski et al. 1992). Par ailleurs, ce jour, aucun risque de transmission par transfert d'embryon n'a t dmontr l'encontre de la maladies des muqueuses (Mc Vicar et al. 1986, Mebus et al. 1991, Singh et al. 1986), de la leucose enzootique (Bouillant et al. 1981, Eaglesome et al. 1994), de la blue-tongue (Bowen et al. 1983,Thomas et al. 1983), de la brucellose (Barrios et al.1988, Del Campo et al. 1987, Stringfellow et al. 1988) et du BHV-1 (Thibier et Nibart 1987).
3.2.3.6.

Facteurs environnementaux

a.

Lalimentation

Il est depuis longtemps connu que les vaches ou gnisses qui gagnent du poids pendant la priode de reproduction ont un taux de gestation suprieur celles qui en perdent (Wiltbank et al. 1962). Il a t suggr quune balance nergtique ngative se traduirait par une concentration en progestrone plus faible. La quantit et la qualit des apports protiques ne sont pas sans consquences. Ainsi, laugmentation de protines dgradables dans le rumen constituerait un risque daugmentation de la concentration en ammoniaque (Jordan et al.1983) et donc de lure plasmatique et urinaire (Elrod et Butler 1993). Plusieurs tudes ont confirm la relation inverse existante entre la fertilit et lurmie (Kaim et al. 1983, Ferguson et al. 1991, Canfield et al. 1990, Elrod et Butler 1993). Chez les petits ruminants par contre ces relations ont davantage t tudies (Ashworth 1995). Les embryons provenant de brebis sous-alimentes sont de moins bonne qualit (Mc Kelvey et al. 1988). Semblable observation a t faite lencontre de chvres receveuses (Mani et al. 1994). A linverse, il est bien connu quune suralimentation des brebis au dbut de gestation est habituellement associe une augmentation de la mortalit embryonnaire (Williams et Cumming 1982). Un excs alimentaire serait responsable dune augmentation de lafflux sanguin au niveau du tractus digestif et de lovaire (Parr 1992). Ce processus acclrerait le catabolisme de la progestrone. La diminution de la progestronmie entranerait une diminution et une modification des polypeptides et autres enzymes synthtiss par lendomtre et responsables du transport de nutriments au travers du placenta (Ashworth et al. 1989b). Lexemple le plus tudi est la retinol-binding-protein implique dans le transport de la vitamine A et scrte la fois par lembryon (Trout et al. 1991) et lendomtre (Harney et al. 1993) sous linfluence de la progestrone (Thomas et al. 1992). Un autre exemple frquemment voqu est celui des facteurs de croissance et en particulier de linsuline growth factor (IGF) et de ses protines de liaisons (Ko et al. 1991). Les mycotoxines et la zaralnone en particulier ont t une occasion rendus responsables davortements dans lespce bovine (Kallela et Ettala 1984). Le gossypol, un compos phnolique trouv dans les graines de coton et la gossypolone, un de ses principaux mtabolites, sont connus pour inhiber le dveloppement embryonnaire in vitro (Zirkle et al. 1988) ainsi que la synthse de progestrone par les cellules lutales (Gu et al. 1990, Gu et al. 1991). b. La temprature, la saison

Les variations saisonnires des performances de reproduction doivent tre interprtes la lumire des influences rciproques, au demeurant difficilement quantifiables et donc le plus souvent confondues, exerces par les changements rencontrs au cours de l'anne dans la gestion du troupeau, l'alimentation, la temprature, l'humidit et la photopriode. Dans les rgions tropicales et

Linfertilit dans lespce bovine / 17 subtropicales, divers auteurs ont enregistr une diminution de la fertilit au cours des mois d't concidant habituellement avec des priodes prolonges de temprature leve (Thatcher 1974, Badinga et al. 1985, Coleman et al. 1985). L'effet de la temprature sur les performances de reproduction se traduirait par une diminution des signes de chaleurs (Stott et Williams 1962, Vincent 1972), par la diminution de la progestronmie significativement plus basse selon certains auteurs en t qu'en hiver (Rosenberg et al. 1977) ou par une rduction du taux basal ainsi que de la libration provulatoire du taux de LH (Madan et Johnson 1973). Chez la vache, Vaillancourt nobserve aucune variation de la frquence de la mortalit embryonnaire avec la saison. Dans lespce ovine, certains auteurs ont constat une augmentation de la frquence de la mortalit embryonnaire chez les animaux insmins en fin de priode de reproduction (Asworth et al. 1989a). De mme, les brebis exposes des tempratures ambiantes leves donnent naissance des agneaux de poids plus faible et prsentant un plus grand risque de mortalit (Shelton 1964). La cause pourrait rsider dans le fait que sous ces conditions, le sang se trouverait davantage dirig vers la priphrie du corps que vers lutrus chez la brebis (Reynolds et al. 1985) ou que lhyperthermie serait responsable dune diminution de lapptit des mres (Wetteman et al. 1984). La temprature peut galement exercer un effet dltre sur la fcondation et la survie de lembryon. Comparant la qualit des embryons obtenus chez des vaches de race Holstein dans deux environnements thermiques diffrents (12 25C vs 26 39C), certains auteurs observent une augmentation significative dovocytes non fconds et dembryons dgnrs lorsque les tempratures extrieures augmentent (Monty et Racowsky 1987). De mme, linsmination de gnisses donneuses dembryons soumises pendant loestrus un stress thermique de 42C et un taux dhumidit de 75 %, rduit de 10 % le taux de fcondation et augmente de 56 % le nombre dembryons dgnrs (Putney et al. 1989a, 1988d). A linverse, lanalyse de la viabilit dembryons obtenus par superovulation et du pourcentage de gestation obtenu aprs transfert nidentifie aucun effet de tempratures extrieures comprises entre 0 et 43C (Putney et al. 1988a). Comparant les rsultats de rcoltes dembryons aprs insminations ralises dans deux environnements thermiques diffrents (15 20C vs 44 53C), Ryan nobserve pas deffet ngatif de la temprature sur le pourcentage de fcondation mais constate une augmentation de la frquence de la mortalit embryonnaire au cours de la premire semaine de gestation pendant la saison froide et au cours de la deuxime semaine pendant la saison chaude (Ryan et al. 1993 phc 10843) confirmant ce faisant les observations ralises dans des rgions tempres par dautres auteurs (Diskin et Sreenan 1980, Roche et al. 1981, Geisert et al. 1988). Leffet de la temprature semble dpendre de sa dure et du stade de gestation auquel elle sexerce. In vitro, il a t dmontr que lapplication aigu dun choc thermique (43C pendant 20 minutes) avant la mise en culture dembryons rcolts in vivo en augmentait le pourcentage de dveloppement. A linverse, une coculture de 48 60 heures une temprature de 40C contribue accrotre le pourcentage dembryons dgnrs (Ryan et al. 1992). Lembryon serait davantage sensible une augmentation de la temprature au cours des 24 premires heures chez la vache (Ealy et al. 1993) et au cours des 48 premires heures chez la brebis et la truie (Dutt 1961, Omtvedt et al. 1967 in phc 10852). Plusieurs expriences en ont prcis le mcanisme. Ainsi, un stress thermique rduirait de 72 % la synthse de trophoblastine par lembryon et augmenterait celle de prostaglandines par lendomtre et lembryon (Putney et al. 1988b,1988c). De mme, lapplication dun stress thermique (37C, avec un taux dhumidit relative comprise entre 27 et 38%) pendant la deuxime et troisime semaine de gestation saccompagne dune rduction du poids de lembryon et de la concentration progestronique (Biggers et al. 1987). A linverse, il a t dmontr que dans diverses espces animales, lembryon peut acqurir une thermorsistance ds les premiers stades de son dveloppement (Ealy et Hansen 1994, Ealy et al. 1993) avant mme lactivation de son gnome (Edwards et al. 1997) au stade 8 16 cellules (King et al. 1986). En effet, il est capable dans lespce bovine mais pas dans lespce porcine (Kojima et al. 1996) de synthtiser des substances protectrices contre une hyperthermie (HSP , Heat Shock Proteins) (Lindquist 1986, Burel et al. 1992 in 10852) ds le stade 2 8 cellules (Edwards et Hansen 1997) mais aussi au 17me jour de gestation (Putney et al. 1988d). Les implications pratiques de telles observations sont videntes surtout dans les rgions du monde

Linfertilit dans lespce bovine / 18 confrontes des ts chauds. Des recommandations pratiques ont t formules. Elles consistent rafrachir les animaux au cours de la priode prioestrale voire leur administrer avant le 3me jour de gestation du gluthation, agent connu pour avoir un effet protecteur contre lhyperthermie (Hansen et al. 1992). c. La palpation rectale

La palpation manuelle est classiquement utilise pour effectuer un diagnostic de gestation. Habituellement cependant, ni le foetus ni les cotyldons ne peuvent tre palps jusquau 60me voire 75me jour de gestation (Roberts 1971). Avant cette priode, le diagnostic se basera sur lidentification dune distension de la corne par les liquides, ou sur le glissement des membranes ftales ou la palpation de la vsicule amniotique (Roberts 1971, Wisnicky et Casida 1948, Zemjanis). Divers facteurs lis la palpation manuelle du tractus gnital sont de nature influencer la frquence de la mortalit embryonnaire. Il existe des diffrences entre troupeaux. De mme, lexprience du clinicien est-elle souligner. Ainsi, la frquence de mortalit embryonnaire plus leve habituellement observe dans les troupeaux suivis par des tablissements universitaires pourrait rsulter dune manipulation plus intense voire plus rpte des animaux par des personnes moins exprimentes (Ball et Carroll 1963, White et al. 1989, Abbitt et al. 1978, Thompson et al. 1994). Plus importants sont cependant la mthode de diagnostic et le stade de gestation. La mthode de diagnostic utilise peut influencer la frquence de la mortalit embryonnaire ou davortement. Ainsi, le diagnostic de gestation bas sur le glissement des membranes ftales, mthode plus facile dapplication aprs quavant le 40me jour de gestation (Roberts 1986), a t considr comme un facteur de risque par certains auteurs (Abbitt et al. 1978, Hawk et al. 1955) mais pas par dautres (Alexander et al. 1995, Vaillancourt et al. 1979). En effet, Alexander, utilisant simultanment le dosage dune protine spcifique de la gestation (PSPB , Pregnancy Specific Protein de type B) exclut un effet significatif dun diagnostic manuel bas sur le glissement des membranes ftales sur le risque de mortalit embryonnaire entre le 30me et le 45me jour de gestation (Alexander et al. 1995). De mme, le risque de mortalit embryonnaire semblerait galement plus important si la gestation est identifie par palpation de la vsicule amniotique (Abbitt et al. 1978, Ball et Carroll 1963, Rowson et Dott 1963, Bellows et al. 1975, Dawson 1974) et fortiori lorsque cette mthode est utilise pour induire lavortement avant le 70me jour de gestation (Parmigiani et al. 1978). Linterprtation des diffrences observes doit prendre en compte le stade gestation auquel le diagnostic est pos. Le stade de gestation exerce en effet une influence certaine. Indpendamment de la mthode utilise, la plupart des auteurs confirment un plus grand risque de rforme ou de pertes embryonnaires voire ftales chez les animaux examins par palpation manuelle avant le 37me (Warnick et al. 1995), 45me (Paisley et al. 1978), (White et al. 1989), 48me (Lemire et al. 1993) ou le 50me jour de gestation (Vaillancourt et al. 1979). On a galement observ un intervalle de vlage significativement plus court chez les animaux examins 51 56 jours aprs linsmination par rapport ceux examins avant ou aprs ce stade (White et al. 1989, Mohammed et al. 1991). A linverse, une tude concernant 19411 vaches laitires constate une frquence moins leve de la mortalit embryonnaire entre le 28me et le 35me jour de gestation (8,3 %) quentre le 35me et le 42me jour de gestation (11,7 %) (Thurmond et Picanso 1993b). Il existe peu de raisons cette observation mis part une sensibilit moins leve de lembryon et de ses annexes un stade o ils sont encore relativement mobiles et peu attachs la paroi utrine. Une analyse plus circonstancie de leffet de la mthode de diagnostic utilise en fonction du stade de gestation conclut quun diagnostic bas sur le glissement des membranes ftales engendre davantage de pertes que la palpation de la vsicule amniotique entre le 45me et le 70me jour de gestation (6,3 vs 4,3 %) tandis que cette seconde mthode induit plus de pertes entre le 30me et le 44me jour de gestation (5,1 vs 4,8 %) (Callahan 1969). De mme, Vaillancourt observe galement une frquence de mortalit embryonnaire plus leve lorsque le diagnostic de gestation est pos par lidentification du glissement des membranes ftales avant quaprs le 50me jour de gestation (Vaillancourt et al. 1979). Comparant trois mthodes manuelles de diagnostic de gestation, Abbitt observe galement une diminution de la frquence de la mortalit embryonnaire avec le stade de gestation lorsque le

Linfertilit dans lespce bovine / 19 diagnostic est bas sur lidentification de la prsence de liquides associe la palpation de la vsicule amniotique ou du glissement des membranes ftales. A linverse un diagnostic bas uniquement sur lidentification de la prsence de liquides ne saccompagne daucune variation de la frquence de la mortalit embryonnaire (Abbitt et al. 1978). La frquence de la mortalit embryonnaire dpend davantage de la palpation conjointe des liquides, de la vsicule amniotique et du glissement des membranes ftales entre le 42me et le 46me jour de gestation que de lexprience du clinicien (Franco et al. 1987). d. Les traitements hormonaux Les traitements de superovulation

Diverses expriences ont dmontr que les traitements de superovulation raliss au moyen deCG, de FSH taient responsables dune absence de fcondation et dune augmentation de la frquence dembryons dgnrs rcolts (Moor et al. 1984). Il faut y voir leffet des traitements hormonaux non seulement sur le transport du sperme dans les voies gnitales (Saacke et al. 1994) mais aussi sur linduction dun profil hormonal anormal se caractrisant par une concentration plasmatique trop leve en progestrone pendant loestrus induit et par une insuffisance de la libration provulatoire dhormone LH voire par lovulation prmature dun follicule dominant ventuellement prsent lors de la mise en place du traitement de superovulation (Jensen et al. 1982, Goff et al. 1986), ces modifications hormonales modifiant la maturation nuclaire et cytoplasmique de lovocyte (Hyttel et al. 1991). On a par ailleurs observ que lintervalle entre linjection dune prostaglandine et la lutolyse tait rduit de 20 heures chez les animaux superovuls (40h vs 60h) (Jensen et al. 1982). Malheureusement les traitements palliatifs proposs tels la ponction choguide du follicule dominant, linjection doestrognes, dhCG, de GnRH ou de progestrone nont dans lensemble pas amlior les rsultats potentiels (Armstrong 1993, Madill et al. 1994).

Les prostaglandines

Administres par erreur des animaux gestants, elles induisent une mortalit embryonnaire prcoce ou tardive voire un avortement entre le 10me et le 150me jour de gestation. Au 15me jour de gestation, leur effet lutolytique et donc inducteur dune mortalit embryonnaire peut tre partiellement inhib par ladministration de 9 mg de norgestomet 24 heures aprs leur injection (Lulai et al. 1994).

Le zranol

Lobtention dune pubert prcoce constitue un objectif de rentabilit conomique bien dmontr (Leismester et al. 1973). Cest notamment dans ce but qua t prconis aux Etats-Unis notamment lutilisation de promoteurs de croissance tels que le zranol (King et al. 1992). Diverses tudes ont confirm son effet ngatif sur les performances de reproduction en gnral (Cohen et al. 1987, Kirkwood et al. 1991) et la mortalit embryonnaire entre le 25me et le 53me jour de gestation (King et al. 1994, King et al. 1995). Le mcanisme de cet effet a t peu investigu. Nanmoins, il nest pas impossible de penser que la rduction du diamtre des cornes utrines induite par le zranol (King et al. 1995) puisse contribuer diminuer la surface de contact entre lutrus et lembryon et ainsi limiter labsorption par ce dernier de substances nutritives (Izaike et al. 1991).
3.3.3.

Pathognie de la mortalit embryonnaire Observations cliniques et exprimentales

a.

L'implication de l'asynchronisme embryo-maternel dans la mortalit embryonnaire relve de deux types d'observations ralises chez les animaux repeat-breeders d'une part et lors de transfert d'embryons d'autre part. Plusieurs tudes ont identifi une frquence plus grande de retard du dveloppement embryonnaire chez les repeat-breeders que chez les animaux normaux (Albihn et al. 1989, Albihn et al. 1991c). Le manque de synchronisation strale et donc utrine entre la donneuse et la receveuse contribue augmenter le risque de mortalit embryonnaire. Ainsi, quil soit ralis par voie chirurgicale (Nelson et

Linfertilit dans lespce bovine / 20 al. 1975, Newcomb et Rowson 1975, Betteridge et al. 1980) ou non-chirurgicale (Rowson et al. 1969, Brand et al. 1978, Lawson et al. 1975, Hahn et Hahn 1976, Jillella et Baker 1978), le transfert dun embryon saccompagne dun taux de gestation plus faible sil est ralis au 3me ou 4me jour ou entre le 10me et le 16me jour quentre le 6me et le 9me jour du cycle de la receveuse. Tout cart de synchronisation suprieur un jour entre la donneuse et la receveuse s'accompagne d'une diminution du pourcentage de gestation aprs le transfert de l'embryon (Rowson et al. 1969). Ce fait a t observ non seulement chez la vache (Pope 1988, Albihn et al. 1991b) mais galement chez la brebis (Moore et Shelton 1964, Rowson et Moor 1966, Wilmut et Sales 1981) et la truie (Webel et al. 1970, Pope et al 1982), cette dernire espce tant plus sensible que dautres (Wilmut et al. 1980). L'absence d'inhibition de la lutolyse par l'embryon constitue la principale consquence du manque de synchronisme entre l'embryon et lutrus (Geisert et al. 1988). Cependant son mcanisme est encore loin d'tre lucid. Il impliquerait une insuffisance primaire du dveloppement de l'embryon ou secondaire imputable des facteurs extrieurs tels un stress thermique connu pour rduire le dveloppement embryonnaire quand il est appliqu entre le 8me et le 16me jour de gestation (Biggers et al. 1987, Putney et al. 1988) ou des facteurs propres l'environnement de l'oviducte et de l'utrus, celui-ci tant par ailleurs troitement dpendant de l'activit lutale. Laction de ces facteurs, concernerait davantage le bouton embryonnaire que la partie trophoblastique du conceptus (Albihn et al. 1991a). b. Mcanisme Linterfron

Divers faits d'observation tendent dmontrer que l'interfron tau constitue un lment essentiel de la pathognie de la mortalit embryonnaire. In vitro sa synthse est rduite par l'application d'un stress thermique l'embryon (Putney et al. 1988). Linjection intra-utrine au 7me jour de gestation de trophoblastes provenant dembryons gs de 13 jours augmente le pourcentage danimaux gestants 6 semaines aprs linsmination (Heyman et al. 1987). Des brebis traites du 11me au 15me jour suivant la fcondation au moyen dinterfron tau prsentent un taux de gestation et de prolificit significativement suprieure celui des brebis non traites (Nephew et al. 1990). Chez les bovins, les effets secondaires observs tels l'hyperthermie nen permettent cependant pas lutilisation (Newton et al., Plante et al. 1991).

Linsuffisance lutale

Comme dans d'autres espces domestiques, la progestrone est, chez la vache, essentielle au maintien de la gestation, une augmentation de la progestronmie tant favorable au dveloppement de l'embryon (Winterberger-Torres 1967, Garrett et al. 1988, Albihn et al. 1991b, Geisert et al. 1992b). Classiquement, l'insuffisance lutale peut se traduire par une rduction de la dure de vie du corps jaune (SLP: Short Luteal Phase) (Odde et al. 1980, Hunter 1991) ou par une rduction de la synthse de progestrone par le corps jaune (Pratt et al. 1982), ces deux manifestations pouvant rsulter d'une croissance folliculaire inadquate, d'une stimulation lutotrophique insuffisante ou d'une libration prmature de prostaglandines (Gaverick et al. 1992). Diverses tudes exprimentales et essais thrapeutiques sont venus confirmer la relation entre la progestronmie et le risque d'une mortalit embryonnaire. Une association significative entre une faible concentration en progestrone au cours de la phase priovulatoire et le taux de survie embryonnaire a t observe chez la brebis (Ashworth et al. 1984) et la vache (Lee et Ax 1984). De mme, il a t dmontr quil existe une relation positive entre la rduction de lintervalle entre le dbut des chaleurs et le pic de LH et limportance de ce pic et le dveloppement normal de lembryon (Maurer et Echtekamp 1982). Chez les repeat-breeders, les concentrations en progestrone seraient infrieures (Erb et al. 1976) ou fort variables d'un individu l'autre (Bulman et Lamming 1978). De mme, l'augmentation de la progestronmie apparat plus tardivement et plus lentement chez les animaux subfertiles que chez les animaux normaux (Shelton et al. 1990). Pour certains auteurs, la concentration en progestrone est plus leve chez les animaux qui deviennent gestants que chez les autres (Erb et al. 1976, Henricks et al. 1971, Linares et al. 1982, ,

Linfertilit dans lespce bovine / 21 Lukazewska et Hansel 1980, Thompson et al. 1980, Hansel 1981, Fonseca et al. 1983, Lee et al. 1985, Lamming et al. 1989, Maurer et Echterkamp 1982, Lee et Ax 1984). Cette relation na pas t constate par dautres auteurs (Shemesh et al. 1968, Pope et al. 1969, Robertson et Sarda 1971, Diskin et Sreenan 1980, Roche et al. 1981, Hasler et al. 1980). La concentration en progestrone 21 24 jours aprs linsmination est infrieure chez les animaux qui prsentent ultrieurement une mortalit embryonnaire que chez les animaux gestants (Franco et al. 1987). L'implication possible de l'insuffisance lutale dans la mortalit embryonnaire a conduit plusieurs auteurs valuer l'effet d'un apport exogne direct de progestrone (CIDR, PRID) ou endogne indirect via l'administration d'une hormone gonadotrope (HCG) ou d'une gonadolibrine (GnRH). L'administration de progestrone par voie vaginale sous forme de PRID (Robinson et al. 1989) ou de CIDR (Mac Millan et al. 1991) contribue chez les vaches augmenter le pourcentage de gestation. Chez les gnisses par contre, un tel traitement administr entre le 7me et le 13me jour suivant l'insmination serait sans effet (Van Cleef et al. 1989). Aucune diffrence na t obtenue chez les animaux traits au moyen de progestagnes avant la priode de rgression lutale soit 15 16 jours aprs linsmination (Lulai et al. 1994, Stevenson et Mee 1991, Van Cleef et al. 1991, Mac Millan et al. 1991). Il ne semble pas que ladministration d' HCG constitue une mthode alternative intressante (Diskin et Sreenan 1986). La majorit des tudes relatives l'utilisation de la GnRH 4 14 jours aprs l'insmination ou une chaleur non accompagne d'insmination concernent des animaux insmins pour la 1re ou 2me fois (Humblot et Thibier 1981, Leslie et al. 1986, Mac Millan et al. 1986, Jubb et al. 1990, Ryan et al. 1991, Lajili et al. 1991, Rettmer et al. 1992a, Rettmer et al. 1992b). La divergence des rsultats obtenus en rend difficile leur interprtation : ainsi, on observe une augmentation de fertilit de 5 16 % d'aprs certaines tudes et une rduction non significative de 2 7 % selon dautres. Ce traitement a beaucoup moins souvent t valu chez des repeat-breeders (Bentele et al. 1987). La relation entre l'insuffisance progestronique et la mortalit embryonnaire est encore incompltement lucide. Quelques pistes peuvent nanmoins tre proposes eu gard aux dcouvertes rcentes en ce domaine. On sait que la progestrone a entre autres effets celui de rduire le nombre de rcepteurs l'ocytocine (Lamming et Mann 1995). Il est donc logique de penser qu'une diminution de la concentration en progestrone est de nature favoriser l'apparition plus prcoce de rcepteurs l'ocytocine et par consquent de favoriser la mise en place du processus lutolytique. Une insuffisance lutale peut galement s'accompagner d'une libration plus importante d'hormone LH, responsable d'une synthse plus importante d'stradiol (Robertson et al. 1989). Celui-ci en retour va favoriser le dveloppement de rcepteurs l'ocytocine et la synthse de prostaglandines (Beard et Lamming 1994, Mann et Lamming Br.Vet.J In press). Les rsultats d'essais thrapeutiques base de progestagnes ou de gonadolibrine apparaissent fort variables. Aucun d'entre eux n'a valu la progestronmie des animaux traits au cours de la priode critique c'est--dire entre le 10me et le 17me jour suivant l'insmination. A l'inverse, on ne peut ngliger la possibilit d'un effet iatrogne induit par de tels traitements. En effet un apport trop important en progestrone est de nature rduire la libration en hormone LH et par consquent le support lutotrophique indispensable au maintien du corps jaune (Diskin et Sreenan 1986). Une fois arrte ladministration de progestrone, celui peut tre incapable de scrter suffisamment de progestrone pour maintenir la gestation.

4. Diagnostic
Etant donn la diversit des facteurs tiologiques, le diagnostic prcis du repeat-breeding sera toujours difficile tablir. La premire tape sera de quantifier le problme au niveau du troupeau, la seconde de procder des examens complmentaires plus spcifiques au niveau individuel. 4.1. Le diagnostic de troupeau

La collecte et l'analyse des documents d'levage sur une priode pralablement dfinie (en gnral 1 an) sont indispensables pour quantifier le problme par la dtermination notamment du pourcentage de gestation en premire insmination et du pourcentage de repeat-breeders c'est--dire d'animaux

Linfertilit dans lespce bovine / 22 insmins plus de deux fois. L'valuation de ces deux paramtres prendra galement en compte les animaux insmins mais rforms non-gestants. La prise en compte des seuls animaux gestants est en effet de nature sous-valuer limportance du problme. Ces paramtres peuvent dans un premier temps tre valus en fonction de l'ge de l'animal (gnisses, primipares, pluripares) ou en fonction du temps (Cu Sum : voir chapite relatif la gestion de la reproduction bovine). L'interprtation du problme suppose l'analyse des paramtres de dtection des chaleurs, de la politique de premire insmination (intervalle entre le vlage et la premire insmination), du niveau de production laitire, de la ration, de l'tat corporel, de la situation sanitaire (vaccinations, traitements antiparasitaires). 4.2. Le diagnostic individuel

Un examen plus spcifique pourra tre rserv aux repeat-breeders pour identifier la prsence ventuelle de lsions ou d'anomalies gnitales.
4.2.1.

L'examen vaginal

L'examen vaginal permet d'identifier une cause majeure d'infertilit savoir l'endomtrite. Il sera prfrentiellement ralis pendant les chaleurs puisque c'est ce moment que les endomtrites dites du premier degr se manifestent sous la forme de glaires troubles renfermant quelques flocons de pus. Cet examen peut identifier galement des lsions vaginales telles que le pneumo ou l'uro-vagin.
4.2.2.

L'examen transrectal

Chez les gnisses, cet examen clinique peut identifier les cas d'aplasie, d'hypoplasie d'une ou de deux cornes utrines signes potentiels de free-martinisme ou maladie des gnisses blanches. La palpation des ovaires des repeat-breeders n'offre en gnral que peu d'informations. Les animaux prsentant de l'aplasie ou de l'hypoplasie ovarienne ne sont en gnral pas cycls. S'ils sont examins en phase dioestrale ils prsentent la plupart du temps un corps jaune puisque normalement cycls et un follicule cavitaire dont la prsence est normale ce stade du cycle tant donn la dynamique folliculaire. Seuls des examens rpts toutes les 6 heures ds la fin des chaleurs permettrait d'identifier les cas de retard d'ovulation. Une telle dmarche est peu applicable en pratique. La palpation transrectale permet nanmoins d'identifier les lsions des oviductes et des bourses ovariques telles que les salpingites qui encapsulent l'ovaire dans la bourse ovarique et en rendent l'identification plus difficile voire impossible. Certains cas d'paississement de l'oviducte, de kystes ou d'hydrosalpinx sont galement identifiables.
4.2.3.

Les examens complmentaires

Les tests de permabilit tubaire ont dj t prsents dans le chapitre relatif la propdeutique de lappareil reproducteur des ruminants. L'examen chographique autorise un diagnostic plus prcis que la palpation manuelle des structures ovariennes prsentes et de leur volution au cours du temps. Elle constitue ainsi un moyen d'identification des cas d'ovulation retarde ou de lutinisation de follicule anovulatoire. Le dosage de la LH savrerait intressant pour identifier une insuffisance du pic provulatoire. Cependant tant donn la libration pulsatile de cette hormone ainsi que sa demi-vie courte des prlvements toutes les 4 heures s'avrent indispensables et les rendent donc peu applicables en pratique. Le dosage de la progestrone peut tre intressante pour confirmer indirectement l'tat stral de l'animal et vrifier ce faisant la qualit de la dtection des chaleurs par l'leveur. L'valuation de certains paramtres biochimiques peut permettre d'identifier des erreurs alimentaires. Ainsi une glycmie infrieure 0,4 - 0,5 gr/litre est en gnral le reflet d'un dficit nergtique que le

Linfertilit dans lespce bovine / 23 praticien pouvait suspecter par l'valuation de l'tat corporel ou par l'identification d'un faible taux protique dans le lait. De mme un taux lev d'ure dans le sang (> 0,4 g/litre) confirmera un excs d'apport protique. La biopsie utrine peut permettre d'valuer les lsions de l'endomtre. Le prlvement sera ralis 5 cm environ en avant de la bifurcation des cornes et fix dans du Bouin ou du formol 10 %. Il semble cependant que seules les lsions histologiques graves (mtrites du 2me et 3me degr) assombrissent le pronostic de fertilit.

5. Traitements
5.1. Moyens de lutte au niveau du troupeau

Ils concernent l'intensification de la qualit de la dtection des chaleurs, le respect de normes alimentaires adaptes au niveau et au statut de production des animaux, l'application de plans de prvention sanitaire et antiparasitaire adapts la situation et au statut de l'exploitation, voire le changement d'insminateur. Ces principes gnraux de base seront idalement intgrs un programme de gestion d'levage. Bas sur des examens rguliers et prcoces des animaux, il offre la possibilit au praticien de dtecter et donc de traiter rapidement les animaux problmes et de renforcer l'observation des animaux par l'leveur. 5.2.
5.2.1.

Moyens de lutte individuels Les traitements non-hormonaux

Les endomtrites ventuellement manifestes par les repeat-breeders seront traites par une injection intra-utrine d'antibiotiques au dbut de la phase strale ou mieux le lendemain de la saillie ou de l'insmination. Cette seconde mthode offre l'avantage de pouvoir confirmer l'ovulation des animaux. Une association de 1 million d'units de pnicilline et d'un g de streptomycine a t recommande. Certains cas d'obstruction tubaire partielle peuvent tre traits par des injections rptes de PSP. Les cas les plus graves seront rforms.
5.2.2.

Les traitements hormonaux

L'implication possible de l'insuffisance lutale dans la mortalit embryonnaire a conduit plusieurs auteurs valuer l'effet d'un apport exogne direct de progestrone (CIDR, PRID) ou endogne indirect via l'administration d'une hormone gonadotrope (HCG) ou d'une gonadolibrine (GnRH).
5.2.2.1.

Les progestagnes

Divers essais thrapeutiques ont confirm la possibilit de maintenir la gestation en l'absence de corps jaunes endognes. Ainsi, deux implants de 15 mg de norgestomet placs au 10me jour de gestation, en assure le maintien aprs ovariectomie de l'animal. Le mme effet est obtenu aprs l'administration de 1 mg de MGA par jour. Semblable effet est obtenu par l'administration journalire de 200 mg de progestrone aprs nuclation du corps jaune au 60me jour de gestation (Butcher R.L. Maintenance of pregnancy in postpartum beef cows that have short-leaved corpora lutea. J. Anim. Sci. 1992 : 70 :38313837). L'administration de progestrone par voie vaginale sous forme de PRID ou de CIDR contribue chez les vaches augmenter le pourcentage de gestation. Chez les gnisses par contre, un tel traitement administr entre le 7me et le 13me jour suivant l'insmination serait sans effet. Aucune diffrence na t obtenue chez les animaux traits au moyen de progestagnes avant la priode de rgression lutale soit 15 16 jours aprs linsmination. Le traitement des vaches infertiles au moyen de protocoles hormonaux recourant de la progestrone administre sous forme de PRID ou de CIDR a fait lobjet de plusieurs publications.

Linfertilit dans lespce bovine / 24 Une premire tude (Kim UH, Suh GH, Hur TY, Kang SJ, Kang HG, Park SB, Kim HS, Kim IH comparison of two types of
CIDR-based timed artificial insemination protocols for repeat-breeder dairy cows. J. Reprod.Dev. 2007, 53,3, 639-645)

compare deux protocoles thrapeutiques chez 55 vaches infertiles de race Holstein insmines 7 fois et se trouvant 761 jours post-partum en moyenne. Le premier protocole consiste en la mise en place dune spirale vaginale (1,9 g de progestrone). Ce traitement tait associ lors de la mise en place dune injection de 1 mg de benzoate doestradiol et de 50 mg de progestrone et dune injection de prostaglandine F2alpha lors du retrait de la spirale. Au 8me jour du traitement, une injection de 1mg de benzoate doestradiol tait effectu et une insmination systmatique ralise 30 heures plus tard. Dans le second protocole, linjection de benzoate et de progestrone tait remplace par celle de 250 mcg de GnRH lors de la mise en place de la spirale, une seconde injection tant effectue 48 heures aprs le retrait , une insmination systmatique tant effectue 17 heures plus tard. Aucune diffrence du taux de gestation nest apparue entre les deux protocoles (27,6 vs 34,7 %, moyenne : 31,3 %). Ces valeurs sont nettement infrieures celles observes chez des vaches normales (65 %) traites au moyen dun protocole semblable (Kim et al. 2005). La cause pourrait en tre la prsence dune concentration suprabasale de progestrone durant la phase oestrale. En effet, le moment dapparition dune nouvelle vague de croissance folliculaire apparat comparable lors des deux types de protocoles (4,4 et 2,6 jours respectivement), le diamtre du follicule dominant au 7me jour du traitement cest-dire au moment de linjection de la prostaglandine F2alpha tant semblable. De mme le moment de lovulation est apparu semblable (53 et 40h respectivement). Une seconde tude (Alnimer MA, Husein MQ The effect of progesterone and oestradiol benzoate on fertility of artificially inseminated repeat-breeder dairy cows during summer. Reprod. Dom.Anim., 2007, 42, 363-369) a t conduite sur 100 vaches de race Holstein insmines plus de 3 6 fois. Le premier protocole thrapeutique consiste en la mise en place dun CIDR (1,38 g de progesterone) durant 7 jours. Lors de la mise en place une injection de 2 mg de benzoate doestradiol est pratique. Une seconde injection de benzoate doestradiol est pratique 24 heures aprs le retrait du CIDR. Une PGF2a est injecte au moment du retrait. Une insmination artificielle est selon les cas systmatiquement pratique 24 30 heures aprs la seconde injection de benzoate doestradiol (groupe 1) ou est ralise sur chaleurs observes (groupe 2). Le troisime groupe est trait de la mme faon que les deux premiers groupes mais une injection de GnRH est effectue 48 heures aprs le retrait du CIDR cest-dire au moment de linsmination. Le dernier groupe sert de contrle et ne reoit pas de CIDR. Une injection de benzoate (2 mg) est ralise au jour 0, celle de PGF2a au jour 7, une nouvelle injection de benzoate est effectue au jour 8 et les animaux sont insmins sur chaleurs dtectes. Les concentrations journalires en progestrone et en oestradiol ont t dtermines pour chaque vache de chaque groupe. Les concentrations maximales en progestrone et oestradiol sont observes, respectivement aprs 24 et 48 heures au sein de chaque groupe trait. Les taux de gestation constats 28 et 45 jours aprs les insminations se sont avrs tre suprieurs, quoique de manire non significative dans les groupes traits au moyen du CIDR par rapport aux groupes tmoins (52, 56 et 60 et 40 % au 28me jour de gestation et 32, 44, 36 et 28 % au 45me jour de gestation). Une troisime tude (Villarroel et al. 2004 : Villaroel A, Martino A, BonDurant RH, Deletang F, Sischo WM. Effect of post-insemination supplementation with PRID on pregnancy in repeat-bredder Holstein Cows. Theriogenology , 2004, 61, 1513-1520) compare l'effet d'une administration de progestrone (Spirale vaginale PRID renfermant 1,55 g de progestrone sans capsule de benzoate d'oestradiol) des vaches primipares et multipares (143 vaches traites et 148 vaches tmoins) durant 14 jours soit entre le 5me et le 19me jour suivant la 3me voire le 6me insmination. Le traitement n'induit une augmentation du pourcentage de gestation (RR 3,26) que chez les vaches en 1re et 2me lactation se trouvant plus de 180 jours du post-partum. Il ne semble pas que ladministration d' HCG constitue une mthode alternative intressante. La relation entre l'insuffisance progestronique et la mortalit embryonnaire est encore incompltement lucide. Quelques pistes peuvent nanmoins tre proposes eu gard aux dcouvertes rcentes en ce domaine. On sait que la progestrone a entre autres effets celui de rduire le nombre de rcepteurs l'ocytocine. Il est donc logique de penser qu'une diminution de la

Linfertilit dans lespce bovine / 25 concentration en progestrone est de nature favoriser l'apparition plus prcoce de rcepteurs l'ocytocine et par consquent de favoriser la mise en place du processus lutolytique. Une insuffisance lutale peut galement s'accompagner d'une libration plus importante d'hormone LH, responsable d'une synthse plus importante d'stradiol. Celui-ci en retour va favoriser le dveloppement de rcepteurs l'ocytocine et la synthse de prostaglandines. Les rsultats d'essais thrapeutiques base de progestagnes ou de gonadolibrine apparaissent fort variables. Aucun d'entre eux n'a valu la progestronmie des animaux traits au cours de la priode critique c'est--dire entre le 10me et le 17me jour suivant l'insmination. A l'inverse, on ne peut ngliger la possibilit d'un effet iatrogne induit par de tels traitements. En effet un apport trop important en progestrone est de nature rduire la libration en hormone LH et par consquent le support lutotrophique indispensable au maintien du corps jaune. Une fois arrte ladministration de progestrone, celui peut tre incapable de scrter suffisamment de progestrone pour maintenir la gestation.
5.2.2.2.

La gonadolibrine

a.

Rappels physiologiques relatifs la gonadolibrine

La gonadolibrine encore appele gonadorline ou GnRH est une neuro-hormone peptidique synthtise au niveau de la zone antrieure de l'hypothalamus . Libre de manire pulsatile, sa demivie est de quelques minutes. Son limination est trs rapide. En effet, une concentration srique maximale est atteinte respectivement 5 et 15 30 minutes aprs une injection intraveineuse et intramusculaire tandis que le retour une concentration basale est acquis aprs 2 heures et 4 8 heures. Comportant 10 acides amins, sa structure est commune toutes les espces de mammifres tudis. La relative simplicit de cette structure en a rendu facile non seulement la synthse mais galement la mise au point de plusieurs dizaines d'analogues agonistes ou antagonistes dont les applications cliniques se multiplient de jour en jour tant que mdecine humaine qu'en mdecine vtrinaire. Ces agonistes sont dous d'une plus grande activit biologique et d'une plus grande affinit pour leurs rcepteurs. Ils sont actifs par voie intraveineuse, sous-cutane, intramusculaire, orale, intravaginale, intrarectale et intranasale. Plusieurs d'entre eux sont actuellement utiliss en mdecine vtrinaire (Tableau 2). Leur pouvoir biologique mesur aprs leur injection en phase dioestrale sur l'importance de la libration de l'hormone LH indpendante du stade de la phase lutale est nettement suprieur celui de la gonadolibrine. Ainsi, la busrline a une activit 10 20 fois suprieure l'actate de fertirline, molcule elle-mme 4 10 fois plus puissante que la gonadolibrine. Ce pouvoir suprieur des agonistes de la GnRH est imputable leur moins grande sensibilit aux endopeptidases hypophysaires. La gonadolibrine agit par l'intermdiaire de rcepteurs prsents au niveau de l'hypophyse et du testicule. Leur nombre dpend de la GnRH elle-mme (phnomne d'autorgulation) mais galement des strodes sexuels tels la progestrone et l'stradiol. La GnRH agit surtout au niveau hypophysaire. Cette action dpend de la pulsatilit de la synthse de la GnRH: une frquence faible stimule davantage la libration de la FSH tandis qu'une frquence leve stimule plus celle de la LH. Cette pulsatilit varie au cours du cycle. Au cours de la phase lutale, la libration de la GnRH se manifeste sous la forme de pics de faible frquence, attribuables l'effet inhibiteur de la progestrone (effet feed-back ngatif). Au cours des heures suivant la lutolyse c'est dire au dbut de la phase de croissance folliculaire et en rponse l'augmentation de l'stradiol (effet feed-back positif) la frquence de la libration pulsatile de la GnRH augmente passant d'un pic toutes les 4 heures un pic toutes les 45 minutes. La libration de la GnRH augmente ensuite brutalement et s'accompagne d'une libration massive de l'hormone lutotrope (LH). b. Justifications physiologiques de lapplication de la GnRH lamlioration de la fertilit

L'amlioration de la fertilit constitue un des objectifs prioritaires de l'optimisation du potentiel de reproduction bovine. De nombreuses tudes prliminaires ont permis de mieux comprendre le rle potentiel de la GnRH dans la pathognie et le traitement de deux causes essentielles responsables d'infertilit savoir l'absence de fcondation d'une part et la mortalit embryonnaire prcoce d'autre

Linfertilit dans lespce bovine / 26 part. Sur le plan clinique, ces deux causes d'infertilit se traduisent par ce que les auteurs anglo-saxons ont qualifis de repeat-breeding c'est dire l'absence de gestation aprs au moins deux insminations ralises chez des animaux prsentant des chaleurs rgulires sans lsions congnitales ou acquises cliniquement dcelables du tractus gnital. Ce syndrome concerne 15 25 % des animaux (Hewett 1968, Graden et al. 1968, Bartlett et al. 1986). Les facteurs responsables en sont encore mal dfinis. Ils sont habituellement regroups en cinq grands groupes tiologiques comprenant les troubles gntiques ou acquis de l'ovocyte et du sperme, les phnomnes inflammatoires ou infectieux de l'utrus, les dsordres endocriniens lors de l'ovulation ou du maintien de la gestation, les anomalies qualitatives ou quantitatives de la ration et les effets de la saison ainsi que les problmes lis la dtection des chaleurs et l'insmination (Ayalon et al. 1978, Sreenan et Diskin 1983, Ley 1985, Wilmut et al. 1986, Lafi et Kaneene 1988, King 1991, Bruyas et al. 1993). Des pourcentages de fcondation compris entre 81 et 100 % ont t rapports l'encontre de la femelle bovine (Diskin et Sreenan 1980, Roche et al. 1981, Linares 1981, Ayalon 1981, Maurer et Chenault 1983). Ils sont compris entre 60 et 70 % chez les animaux repeat-breeders (Ayalon 1984, Gustaffson et Larsson 1983, O'Farrell et al. 1983, Tanabe et al. 1985). Cette absence de fcondation est galement plus frquente chez les repeat-breeders superovuls que chez les animaux normaux (Greve 1980). La mortalit embryonnaire prcoce dtecte 8 18 jours aprs l'insmination concerne 20 30 % des animaux et reprsente 75 80 % des pertes embryonnaires et ftales (Diskin et Sreenan 1980, Roche et al. 1981). Chez les repeat-breeders, elle apparat dans 51 65 % des cas au cours des 34 premiers jours de la gestation (Tanabe et Casida 1949, Tanabe et Almquist 1953, Hawk et al. 1955). Avant de rappeler les applications cliniques de la GnRH en reproduction bovine (Hanzen et al. 1995), il nous a sembl opportun d'en prciser les mcanismes physiologiques justifiant son utilisation. c. Implication de la GnRH dans l'absence de fcondation

Au cours de la phase pro strale, la GnRH stimule la libration de l'hormone FSH et par son intermdiaire influence la croissance folliculaire mais galement la formation de rcepteurs l'hormone LH au niveau des cellules de la granuleuse (Richards et al. 1976), prrequis indispensable la formation ultrieure du corps jaune et la synthse de progestrone. La GnRH est implique directement dans le processus de l'ovulation puisqu'elle est responsable du pic provulatoire de l'hormone LH (Karsh et al. 1992). La GnRH a galement une action indirecte sur l'ovulation. Elle favorise en effet la libration de l'acide arachidonique (Minegishi et Leung 1985), prcurseur des prostaglandines dont l'implication dans le processus de l'ovulation serait du l'activation des fibroblastes assurant la transformation de la procollagnase en collagnase (Espey 1980). L'absence de fcondation a t impute une squence hormonale anormale au cours de l'oestrus. Elle se traduirait par un allongement de la priode strale (Gustafsson et al. 1986, Albihn 1991, Albihn et al. 1991a) et plus particulirement de l'intervalle entre le dbut des chaleurs et l'ovulation (Lee et al. 1983, Mac Millan et al. 1986, Rosenberg et al. 1991), effet cependant non unanimement rapport (Hansel et al. 1960, De Kruif 1976). Il en rsulterait une absence d'ovulation (Graden et al. 1968) ou une ovulation plus tardive (Leidl et al. 1979) voire la lutinisation prcoce du follicule (LUF syndrome: Luteinized unruptured follicle syndrome), phnomne dcrit chez la femme (Donnez 1990) et la jument (Ginther 1992). Ce processus peut s'accompagner d'un trouble de la maturation ovocytaire (Tanabe et Casida 1949, Petr et al. 1991) bien que cette dernire hypothse n'ait point t confirme (Linares et al. 1980, Maurer et Echterkamp 1985). Enfin, moyen terme il en rsulterait un manque de synchronisme entre l'embryon et le milieu utrin, condition essentielle au maintien de la gestation (Albihn et al. 1991b) et par consquent un retard du dveloppement embryonnaire (Gustafsson et Ploen 1986), phnomne plus frquemment rencontr chez les repeat-breeders (Albihn et al. 1991c). L'absence d'identification de rcepteurs la GnRH au niveau ovarien (Brown et Reeves 1983), donne penser que son action est essentiellement due l'hormone LH. Le nombre de rcepteurs de cette hormone au niveau des cellules de la granuleuse demeure relativement constant jusqu'au dbut de sa libration. Leur nombre augmente ensuite de manire trs importante jusqu'au moment de sa libration maximale (Ireland et Roche 1982). Au cours de cette priode, l'androstnedione est convertie par une aromatase en stradiol dans le follicule provulatoire. Le pic de LH inhibe la synthse

Linfertilit dans lespce bovine / 27 d'stradiol en bloquant l'activit de l'aromatase. Il s'ensuit une synthse accrue de progestrone (Dieleman et Blankenstein 1984, Hansen et al. 1988). La libration de la GnRH est soumise l'influence de diffrents facteurs environnementaux ou alimentaires. Ainsi, elle peut tre attnue par les beta-endorphines (Brooks et al. 1986, Nett 1987) libres en rponse divers stress tels qu'une hyperthermie environnementale, la prsence d'un veau au pis ou un niveau de production laitire lev chez un animal en croissance. L'insuline a galement t implique dans la libration de la FSH par la GnRH (Britt 1988). Son administration chez la truie contribue en augmenter le taux d'ovulation (Cox et al. 1987). Les vaches hautes productrices (9000 litres) prsentent habituellement 40 59 jours post-partum un dficit nergtique s'accompagnant d'une hypo-insulinmie (Smith et al. 1976, Butler et Smith 1989). Il est donc possible de croire que l'administration de GnRH des animaux traversant une priode risque sur le plan de sa synthse ou de sa libration puisse s'accompagner d'une augmentation du pourcentage de gestation. Injecte en dbut ou en fin de phase strale la dose de 100 g, la GnRH induit dans les deux heures suivantes une augmentation de 43 et 153 % des concentrations de l'hormone LH (Mee et al. 1990). Cette injection peut donc contribuer mieux synchroniser le moment de l'ovulation par rapport au dbut des chaleurs (Lee et al. 1985) et prvenir l'absence d'ovulation (Fernandez-Limia et al. 1977, Coulson et al. 1980, Nakao et al. 1983) conditions pathologiques plus frquemment rencontres chez les repeat-breeders (De Kruif 1978). En effet, les animaux repeat-breeders ont un intervalle entre le dbut des chaleurs et le pic provulatoire de LH plus long et un pic de moindre importance que les gnisses normales (Gustafsson et al. 1986). Cependant, une double insmination pratique 12 heures d'intervalle ne modifie pas de manire significative le pourcentage de gestation (Stevenson et al. 1990). L'hypothse de l'induction avant ou aprs le pic provulatoire de l'hormone LH observ au dbut de la phase strale d'un second pic de LH n'est pas exclure (Stevenson et al. 1984) mme si cette seconde libration est habituellement plus faible (Lucy et Stevenson 1986, Rosenberg et al. 1991). La raison de cette libration importante doit tre cherche dans la diminution de la production de 17bta stradiol habituellement constate aprs le pic provulatoire de LH (Dieleman et al. 1983, Ireland et al. 1984) ou dans un tat rfractaire de l'hypophyse (Kesner et al. 1981). L'importance du moment de l'injection de la GnRH par rapport au dbut des chaleurs ne peut tre nglige. En effet, plusieurs auteurs ont observ une meilleure efficacit d'une injection en dbut d'oestrus associe une insmination en fin d'oestrus (Mee et al. 1990, Rosenberg et al. 1991) surtout si elle concerne les animaux insmins pour la seconde ou troisime fois (Stevenson et al. 1984). L'hypothse d'un effet ngatif d'une injection de GnRH ralise en fin de priode strale simultanment l'insmination a t avance mais est encore peu explique (Mee et al. 1990). Ces auteurs constatent une augmentation de l'hormone lutotrope moins importante dans les deux heures suivant l'injection tardive de la GnRH et une progestronmie 8 14 jours aprs l'oestrus plus faible chez les animaux traits et insmins en fin d'oestrus que chez les animaux traits en dbut d'oestrus et insmins en fin d'oestrus. Un effet secondaire de la GnRH injecte en fin d'oestrus sur la rduction du nombre de rcepteurs lutaux la LH (Rodger et Stormshak 1986) et par consquent de la synthse de progestrone a t rapporte (Lucy et Stevenson 1986). Elle a t impute une dpltion des stocks hypophysaires en hormone LH. Cette action inhibitrice directe sur les cellules de la granuleuse (dsensibilisation) est possible (Lee et al. 1985) mais peu recevable tant donn l'absence de rcepteurs spcifiques (Brown et Reeves 1983) et l'incapacit de la GnRH inhiber in vitro la synthse de progestrone (Milvae et al. 1984). Enfin, une action sur l'ovocyte voire le follicule ne peut tre exclue (Mee et al. 1990). Il apparat donc que le choix du moment optimal de l'insmination par rapport l'injection de GnRH ncessite des investigations complmentaires mais aussi le cas chant, une intensification de la frquence des priodes de dtection des chaleurs de la part de l'leveur. d. Implications de la GnRH dans la prvention de la mortalit embryonnaire prcoce

Le maintien de la gestation rsulte d'un double mcanisme: lutotrope d'une part et antilutolytique d'autre part (Thatcher et al. 1989, Humblot 1991). L'identification des causes et consquences potentielles d'une mortalit embryonnaire prcoce rsulte d'tudes hormonales de la gestation d'une

Linfertilit dans lespce bovine / 28 part et morphologiques de l'embryon d'autre part. La prsence d'une progestronmie plus leve chez les animaux gestants que chez les animaux nongestants au cours des premiers jours suivant l'insmination (Henricks et al. 1971, Erb et al. 1976, Lukaszewska et Hansel 1980, Linares et al. 1982, Maurer et Echterkamp 1982, Fonseca et al. 1983, Lee et al. 1985, Lamming et al. 1989) plaide en faveur d'un effet lutotrope de l'embryon mme si cette observation n'a pas t unanimement constate (Bulman et Lamming 1978, Diskin et Sreenan 1980, Roche et al. 1985). Une augmentation de la progestronmie est favorable au dveloppement de l'embryon (Winterberger-Torres 1967, Garrett et al. 1988, Albihn et al. 1991b). Plus rcemment (Starbuck GR, Darwash AO, Mann GE, Lamming GE. The detection and treatment of postinsemination progesterone insuffiency in dairy cows. In Fertilituy in the High Producing Dairy Cows. British society of animal Science Occasional publication 2001, 26,447-450), le controle journalier de la progestrone au cours des 5 premiers jours suivant l'insmination a confirm l'impact de la progestronemie sur les taux de gestion. Les vaches prsentant une progestronmie > 3 ng/ml au 5me jour de gestation avaient un taux de gestation compris entre 50 et 55 % . A l'inverse celles dont la progestrone tait < 1 ng/ml avaient un taux de gestaion infrier 10 . Une fois encore, il est difficile de distinguer la cause de l'effet. Chez les repeat-breeders, l'volution de la progestronmie est fort variable d'un animal l'autre (Bulman et Lamming 1978) et les concentrations en progestrone seraient infrieures chez les repeatbreeders (Erb et al. 1976). L'augmentation de la progestronmie apparat plus tardivement et plus lentement chez les animaux subfertiles que chez les animaux normaux (Kimura et al. 1987, Shelton et al. 1990a). L'effet lutotrope de l'embryon serait mdi par la prostaglandine E2 (PGE2) (Shelton et al. 1990b) ou par le platelet activating factor (PAF) (Hansel et al. 1989). L'activit antilutolytique exerce par le conceptus (embryon et ses enveloppes) a depuis longtemps t dmontre (Rowson et Moor 1967) et impute une trophoblastine (bTP1: bovine trophoblast protein type 1) (Helmer et al. 1987), synthtise vers le 15me jour de gestation environ (Geisert et al. 1988) et dont l'effet ne se manifeste chez la vache qu'entre le 16me et le 20me jour de gestation (Humblot et Dalla Porta 1984). Plusieurs tudes ont identifi une frquence plus grande de retard du dveloppement embryonnaire chez les repeat-breeders que chez les animaux normaux (Albihn et al. 1989, Albihn et al. 1991c). Ce retard du dveloppement morphologique ne s'accompagne habituellement pas d'un allongement du cycle. Ce fait laisse supposer une absence d'mission du signal embryonnaire ou l'impossibilit pour la mre de le recevoir. Cette diminution primaire de la taille du conceptus, ou secondaire l'effet de facteurs extrieurs tels un stress thermique (Biggers et al. 1987, Putney et al. 1988) voire celle du nombre de cellules trophoblastiques rduirait la synthse de la bTP1 et donc l'inhibition de la lutolyse par l'embryon (Thatcher et al. 1984, Geisert et al. 1988). Cette relation entre trophoblaste et synthse du signal embryonnaire pourrait cependant ne pas tre exclusivement quantitative (Albihn et al. 1991c). On ne peut ignorer la participation possible du bouton embryonnaire mme si l'injection de vsicules trophoblastiques est capable d'allonger l'intervalle entre chaleurs (Heyman et al. 1984). En effet, les modifications morphologiques enregistres chez les repeat-breeders concernent davantage le bouton embryonnaire que la partie trophoblastique du conceptus (Albihn et al. 1991c). Divers mcanismes ont t avancs pour expliquer l'effet potentiel de la GnRH sur le maintien de la gestation. Le premier mcanisme serait un effet lutotrophique. Induisant en phase dioestrale au cours des 15 minutes et pendant 4 heures environ une libration accrue des hormones LH et FSH (Rettmer et al. 1992), l'injection de GnRH entrane une stimulation de la synthse de progestrone (Hansel et Seifart 1967, Kittok et al. 1973, Zolman et al. 1974, Foster et al. 1980, Thompson et al. 1980, Mac Millan et al. 1985a, Lee et al. 1985, Rettmer et al. 1992). Ce type de rponse est dpendant de la dose injecte (Chenault et al. 1990). Elle est rapide puisque l'augmentation de la progestronmie est observe au cours des 15 minutes suivant l'injection de GnRH. Elle est galement de courte dure puisqu'elle ne se maintient que pendant 6 heures pour retrouver une concentration gale celle enregistre avant l'injection 24 heures environ aprs celle-ci (Rettmer et al. 1992, Bostedt et Okyere 1988). Une augmentation plus prolonge de progestrone a galement t observe aprs l'administration d'agonistes de la GnRH (Milvae et al. 1984, Mac Millan et al. 1985a). La rponse court terme serait

Linfertilit dans lespce bovine / 29 imputable la stimulation des petites cellules lutales (SLC: Small Luteal cell) renfermant la majorit des rcepteurs l'hormone LH (Niswender et al. 1985, Farin et al. 1988, Farin et al. 1989). La rponse long terme s'expliquerait par la transformation sous l'effet de la LH des petites cellules lutales en grandes cellules lutales dont le niveau de scrtion est plus lev (Niswender et al. 1985, Farin et al. 1988). Il est galement possible que l'augmentation de la progestronmie puisse rsulter de la lutinisation de follicules prsents sur l'ovaire ainsi qu'en tmoignent les changements histologiques (Schwartz et al. 1984) ou d'chognicit observs (Rettmer et al. 1992, Thatcher et al. 1989, MacMillan et Thatcher 1991). Par ailleurs, aucun changement de taille du corps jaune n'a t observ aprs injection de GnRH (Rettmer et al. 1992). Pareille hypothse n'est cependant pas retenue par Mac Millan tant donn la nature de la rponse progestronique. Celle-ci est en effet trop rapide que pour tre impute la formation d'un corps jaune secondaire (Mac Millan et al. 1985a). Cet effet lutotrope pourrait galement se manifester moyen terme aprs l'injection de la GnRH en phase strale. Plusieurs tudes ont dmontr que l'injection en phase strale de la GnRH ne modifie pas (Coleman et al. 1988) ou augmente la progestronmie chez les repeat-breeders gestants et nongestants (Mee et al. 1993). Cet effet a t imput l'augmentation induite par l'injection de la GnRH de l'hormone LH qui orienterait davantage la formation de grandes que de petites cellules lutales, les premires tant moins sensibles l'effet lutolytique de la prostaglandine F2 que les secondes (Howard et Britt 1990). Le second mcanisme serait un effet lutoprotecteur qui rendrait le corps jaune insensible l'action des facteurs lutolytiques. On a en effet observ que l'injection de GnRH 1 heure environ avant celle d'une prostaglandine retarde la chute de la progestrone, la rgression du corps jaune et augmente le dlai ncessaire la rapparition d'un oestrus (Mac Millan et al. 1985b). Le troisime mcanisme impliquerait un effet antilutolytique mdi par une action sur la dynamique de la croissance folliculaire (Thatcher et al. 1989, Rettmer et al. 1992). Des tudes histologiques ont en effet dmontr qu'entre le 17me et le 34me jour, la gestation s'accompagne d'un recrutement plus important de follicules de taille comprise entre 0.16 et 0.67 mm vers des follicules de taille comprise entre 0.68 et 3.67 mm tout en limitant leur dveloppement ultrieur (Guilbaut et al. 1986). De mme, des tudes chographiques ont constat vers le 22me jour de gestation la prsence en plus grand nombre sur l'ovaire ipsilatral que contralatral la corne gestante de follicules de taille comprise entre 7 et 13 mm ou suprieur 13 mm (Pierson et Ginther 1987). Chez l'animal non-gestant et donc sans doute gestant, les follicules non-ovulatoires prsents au cours de la phase dioestrale sont impliqus dans le mcanisme de la lutolyse. En effet, la cautrisation des follicules entre le 9me et le 15me jour du cycle en augmente la dure en retardant le moment de la lutolyse (Villa-godoy et al. 1985, Hughes et al. 1987). Par ailleurs, cette manipulation entrane une rduction de la concentration de l'stradiol dans la veine utro-ovarienne (Fogwell et al. 1985). L'action des follicules non-ovulatoires est mdie par l'stradiol qu'ils secrtent. Cette hormone participe indirectement via la synthse de rcepteurs endomtriaux l'ocytocine, la formation de prostaglandines (Mc Cracken et al. 1984) dont la synthse est stimule par l'ocytocine d'origine lutale (Wathes et al. 1983). Une rduction de la synthse d'stradiol par l'ovaire au cours des 8 12 jours suivant l'injection de GnRH a t rcemment dmontre (Rettmer et al. 1992). Elle serait imputable la lutinisation des follicules (Ireland et Roche 1982, Schwarz et al. 1984, MacMillan et al. 1991) ou l'induction d'une ovulation (Berchtold et al. 1978, Thatcher et al. 1989, MacMillan et Thatcher 1991). Il semble bien que l'effet lutotrope doive tre prfr l'effet ovulatoire puisque l'injection de GnRH en phase dioestrale n'est suivie d'aucune modification de nombre ou de taille des follicules prsents (Rettmer et al. 1992). e. Applications de la GnRH au traitement de linfertilit Traitement des vaches lors de la premire insmination du post-partum

L'utilisation de la GnRH lors de la premire insmination au cours du post-partum, contribue dans la majorit des essais cliniques effectus augmenter de manire significative de 6 34 % (Goldbeck 1976, Schels et Mostafawi 1978, Grunert et al. 1978, Leidl et al. 1979, Moller et Fielden 1981, Lee et al. 1983,

Linfertilit dans lespce bovine / 30 Fielden et Moller 1983, Nakao et al. 1983, Ryan et al. 1991), ou de manire non significative de 1 14 % (Gunzler et al. 1974, Gunzler et al. 1976, Mori et Takahashi 1978, Von Holtenmoller 1979, Stevenson et al. 1984, Anderson et Malmo 1985) le pourcentage de gestation. Certains auteurs ont par ailleurs rapport une rduction de la fertilit mais cet effet tait non significatif (Vahdat et Whitmore 1980, Lewis et al. 1990, Chenault 1990, Rosenberg et al. 1991) (Tableau 3). La disparit des rsultats observs peut tre le reflet de conditions exprimentales diffrentes ou traduire l'effet plus ou moins spcifique de l'un ou l'autre facteur. Il ne semble pas que le type de GnRH utilise (naturelle ou de synthse) soit de nature modifier les rsultats. La GnRH naturelle injecte en phase lutale a un pouvoir biologique moindre que ses analogues de synthse (Chenault et al. 1980). Semblable comparaison n'a cependant pas t effectue en phase strale. Comparant l'actate de fertirline (25 100 g) et la busereline (10 g), une tude ne rapporte aucune diffrence du pourcentage de gestation aprs traitement des animaux lors de la premire ou deuxime insmination (Chenault 1990). L'augmentation de la dose d'actate de fertirline de 25 100 g rduit mais non significativement le taux de gestation (43,6 % vs 39,4 %) (Chenault 1990). L'effet de l'ge est controvers. Une amlioration significative du pourcentage de gestation aprs traitement unique ou rpt 12 jours d'intervalle au moyen de la GnRH a t observ chez les primipares mais pas chez les pluripares (Ryan et al. 1991). Cet effet de l'ge n'a pas t observ par d'autres tudes (Rosenberg et al. 1991, Lajili et al. 1991, Archbald et al. 1992) ou semble limit aux primipares et aux vaches en troisime lactation (Nakao et al. 1983). Selon certains auteurs (Archbald et al. 1992: Bondurant et al. 1991), il existe une interaction entre la saison et le traitement. L'effet est suprieur lorsque le traitement est ralis au cours des mois de janvier mars par rapport aux autres mois de l'anne. Il est possible d'y voir le reflet des diffrences d'activit folliculaire observe entre les saisons (Mc Natty et al. 1984). L'effet du stade du post-partum est controvers. Sans effet pour certains (Moller et Fielden 1981, Anderson et Malmo 1985, Chenault 1990, Rosenberg et al. 1991, Archbald et al. 1992), il influencerait favorablement et de manire significative les rsultats obtenus aprs l'injection unique ou rpte 12 jours d'intervalle de la GnRH des animaux insmins pour la premire fois 40 59 jours ou 80 99 jours aprs le vlage (Ryan et al. 1991) ou au-del du 100me jour du post-partum (Nakao et al. 1983). Il dpend du niveau de production laitire de l'animal lors de l'insmination, un effet favorable significatif de la GnRH ayant t observ chez les animaux produisant 26 30 kg de lait (Nakao et al. 1983). Cet effet de la production laitire n'est pas partag par d'autres auteurs (Archbald et al. 1992) qui ne constatent par ailleurs aucun effet de l'tat de l'enbompoint de l'animal lors du traitement (Archbald et al. 1992) ou de pathologies antrieures telles la mtrite ou l'anoestrus prsentes par l'animal sur les rsultats de gestation obtenus aprs administration de la GnRH (Lajili et al. 1991). L'effet d'une injection de GnRH peut dpendre galement de la fertilit du troupeau. Ainsi si le taux de gestation en premire insmination est infrieur 40 %, on observe une augmentation significative du pourcentage de gestation aprs traitement tant chez les primipares (+ 34 %) que chez les pluripares (+ 23 %) (Rosenberg et al. 1991). Cette observation rejoint celle d'autres auteurs qui ne recommandent l'utilisation systmatique de la GnRH en premire insmination que dans les troupeaux faible fertilit (Nakao et al. 1983, Coleman et al. 1988, Weaver et al. 1988, Chenault 1990). Le rle potentiel du moment de l'injection de la GnRH par rapport au moment de l'insmination ou de dtection des chaleurs a fait l'objet d'tudes plus spcifiques (Stevenson et al. 1984, Pennington et al. 1985, Stevenson et al. 1989, Mee et al. 1990). Comparant l'effet d'une injection prcoce (1 heure aprs la dtection) ou tardive (12 16 heures aprs la dtection) de GnRH au cours de l'oestrus induit par une prostaglandine, Mee n'observe aucune diffrence du taux de gestation en premire insmination (Mee

Linfertilit dans lespce bovine / 31 et al. 1990). D'autres tudes antrieures effectues sur chaleurs naturelles (Stevenson et al. 1984, Pennington et al. 1985, Stevenson et al. 1989) semblent quant elles insister davantage sur l'importance du moment du traitement tout au moins pour la premire insmination ralise au cours du post-partum. En effet, les animaux insmins et traits en dbut d'oestrus ou insmins et traits en fin d'oestrus ont des taux de gestation infrieurs aux animaux tmoins. Une fertilit comparable est par contre obtenue si le traitement est ralis en dbut d'oestrus et l'insmination 12 16 heures plus tard (Stevenson et al. 1989). Une amlioration de 6 % du pourcentage de gestation est galement obtenue si l'insmination est ralise plus de 6 heures aprs le traitement. A l'inverse, une rduction de 7 % du pourcentage de gestation est observe si l'insmination est effectue moins dans les 6 heures prcdant l'insmination (Pennington et al. 1985). Les rsultats relatifs l'utilisation combine d'une prostaglandine et d'une GnRH injecte 72 80 heures plus tard sont variables (Tableau 4). Des amliorations significatives de 19 % et non significatives de 6 11 % du taux de gestation ont t obtenues. L'insmination sur chaleurs observes aprs induction par une prostaglandine (24 % de gestation) doit tre prfre celle ralise de manire systmatique 72 80 heures aprs l'injection d'une prostaglandine (18 % de gestation) moins que l'insmination ne s'accompagne d'une injection de gonadolibrine (26 % de gestation). Les diffrences entre le second groupe et les deux autres se sont avres tre significatives (Archbald et al. 1992).

Traitement des repeat-breeders

Chez les repeat-breeders, l'injection lors de l'oestrus d'une gonadolibrine ou d'un de ses analogues augmente de manire significative de 5 25 % le taux de gestation (Lee et al. 1983, Phatak et al. 1986, Stevenson et al. 1988, Roussel et al. 1988, Stevenson et al. 1990). D'autres tudes rapportent des amliorations non significatives de 4 15 % (Stevenson et al. 1984, Pennington et al. 1985, Stevenson et al. 1988, Bondurant et al. 1991). Enfin, une rduction non significative de 10 15 % a galement t observe (Anderson et Malmo 1985, Young et Swanson 1988, Swanson et Young 1990, Lewis et al. 1990) (Tableau 5). Divers facteurs d'influence potentiels ont t valus. L'amlioration observe est indpendante du taureau utilis ou du technicien (Phatak et al. 1986). L'effet favorable de la rduction (<120 jours vs > 120 jours) de l'intervalle entre le vlage et le traitement lors de la troisime insmination n'a t constat que chez les pluripares (Bondurant et al. 1991). Lors du traitement spcifique des animaux insmins pour la 3me ou 4me fois, on observe une augmentation respectivement de 4 (Bondurant et al. 1991) et 9 % (Phatak et al. 1986) du % de gestation. Pas plus que le traitement la GnRH, une double insmination pratique 12 heures d'intervalle n'amliore le pourcentage de gestation (Wilcox et Pfau 1958, Graden et al. 1968, Foote et al. 1979, Stevenson et al. 1990). Le taux de gestation est galement indpendant du moment de l'injection de la GnRH par rapport l'insmination (Stevenson et al. 1984). D'autres auteurs semblent nanmoins insister sur l'importance de ce facteur (Rosenberg et al. 1991). Il semble que chez les repeat-breeders, l'allongement de l'intervalle entre l'injection de GnRH et l'insmination contribue augmenter le pourcentage de gestation (Pennington et al. 1985). L'effet de la saison ne doit pas tre nglig. En effet, le traitement la GnRH des animaux insmins pour la troisime fois au cours des mois diffrents de ceux de l't entrane une augmentation de 7 % du pourcentage de gestation (48,1 vs 41 % : P<0,1). A l'inverse, le traitement des mmes animaux au cours des mois d't s'accompagne d'une rduction de la fertilit (34,8 vs 36 %) (Bondurant et al. 1991). A notre connaissance, de tels effets de la saison sur la rponse un traitement de GnRH n'a pas t rapporte l'encontre d'animaux levs dans des conditions tempres. Cette possibilit mriterait d'tre investigue. Des diffrences d'effet entre exploitations ont t enregistres. Elles traduisent peut-tre une amlioration indirecte de certains facteurs de gestion lors de l'essai clinique (Bondurant et al. 1991).

Linfertilit dans lespce bovine / 32 Pas plus que chez les animaux insmins pour la 1re ou 2me fois (Mee et al. 1990, Archbald et al. 1992), l'injection de GnRH combine celle d'une prostaglandine 72 80 heures plus tt n'amliore le pourcentage de gestation des repeat-breeders insmins systmatiquement c'est--dire sans dtection des chaleurs (Lucy et al. 1986, Stevenson et al. 1988). Il semble donc qu'une fertilit normale ne puisse tre obtenue que si l'animal manifeste des chaleurs aprs l'injection d'une prostaglandine et que le cas chant elles soient dtectes par l'leveur. Une solution alternative consisterait traiter les animaux infertiles au moyen d'un protocole de synchronisation des ovulations de type Ovsynch ou de type Heatsynch (Kasimanickam et al. 2005). Le protocole Ovsynch consiste en l'injection successive de GnRH (J0) de PGF2a (J8) et de GnRH (J9). Dans le protocole de type Heatsynch, la seconde injection de GnRH est remplace par une injection de 0,5 mg de cypionate d'oestradiol, 24 heures aprs la prostaglandine. Les animaux sont le plus souvent insmins systmatiquement (IAS) ou sur chaleurs dtectes (IAD). D'un essai clinique impliquant 535 vaches insmines pour la premire fois et 186 vaches infertiles insmines au moins 3 fois, il apparat qu'une politique d'insmination sur chaleurs dtectes s'accompagne d'une augmentation significative du pourcentage de gestation par rapport une politique d'insmination systmatique (34 vs 21 %). Quelque soit le protocole ou la politique d'insmination, les animaux infertiles ont un taux de gestation comparable celui des animaux fertiles (25,8 vs 26,4 %). Indpendamment du numro d'insmination, l'insmination sur chaleurs observes se traduit par une augmentation significative du taux de gestation quand les vaches ont t insmines sur chaleurs observes aprs avoir t traites au moyen du protocole Heatsynch (35 vs 17 %). Semblable diffrence n'est pas constate aprs traitement des vaches au moyen du protocole Ovsynch (25 vs 24 %). Chez les animaux infertiles, l'insmination sur chaleurs observes aprs traitement au moyen du protocole Heatsynch se traduit par une augmentation du taux de gestation (33 vs 21 %). A l'inverse, semblable politique s'accompagne d'une diminution du taux de gestation aprs traitement des vaches au moyen du protocole Ovsynch (9 vs 24 %). A la diffrence du protocole Ovsynch, le protocole de type Heatsynch s'accompagne d'une augmentation trs nette du pourcentage de vaches dtectes en chaleurs (59 vs 13 %). Double peut en tre la raison. Le protocole Ovsynch pourrait s'accompagner d'un dveloppement insuffisant du follicule dominant. Il en rsulterait une synthse moindre d'oestrognes (Brantmeier et al. J.Dairy Sci. 1987). A l'inverse, le protocole de type Heatsynch comporte l'injection de cypionate d'oestradiol qui est de nature stimuler les manifestations oestrales (Pancarci et al. J.Dairy Sci. 2002,85,122-131) mais aussi la tonicit utrine, la scrtion de mucus et donc indirectement la fertilit. Compte tenu des rsultats observs, ces auteurs recommandent de pratiquer une insmination des vaches dtectes en chaleurs et le cas non chant d'insminer systmatiquement les animaux infertiles ou non traites au moyen du protocole Ovsynch ou Heatsynch.

Traitement en phase dioestrale

La majorit des tudes relatives l'utilisation de la GnRH 4 14 jours aprs l'insmination ou une chaleur non accompagne d'insmination concernent des animaux insmins pour la 1re ou 2me fois (Humblot et Thibier 1981, Leslie et al. 1986, Mac Millan et al. 1986, Bostedt et Okyere 1988, Jubb et al. 1990, Ryan et al. 1991, Lajili et al. 1991, Rettmer et al. 1992a, Rettmer et al. 1992b). On observe une augmentation de fertilit de 5 16 % d'aprs certaines tudes et une rduction non significative de 2 7 % d'aprs d'autres tudes (Tableau 6). Ce traitement a beaucoup moins souvent t valu chez des repeat-breeders (Bhosrekar et al. 1986, Bentele et al. 1987). Divers facteurs d'interprtation des rsultats doivent tre pris en considration. Le stade du cycle exerce une certaine influence, une augmentation du pourcentage de gestation n'tant habituellement observe que si le traitement est effectu entre le 11me et le 13me jour du cycle. Une tude plus spcifique de l'influence de ce facteur (Mac Millan et al. 1986) a mme dmontr que l'injection de 5 g de busereline ralise 1 6 jours aprs la dernire insmination rduisait le pourcentage de gestation de 10,1 %. L'effet positif de la busereline est plus important lorsqu'elle fait suite une insmination ralise

Linfertilit dans lespce bovine / 33 pendant l'oestrus induit au moyen d'une prostaglandine (Lajili et al. 1991). La dose exerce galement un effet pour un stade du cycle dtermin. Entre le 11me et le 13me jour du cycle, l'injection de 5 g de Busereline exerce un effet ngatif alors qu'une dose de 10 g amliore significativement le taux de gestation de 11,5 % (Mac Millan et al. 1986). A l'inverse, aucune diffrence significative du pourcentage de gestation n'a t observ aprs injection de 100 ou 200 g d'actate de fertirline des gnisses et des vaches de races viandeuses. Cet effet de la dose semble dpendre de l'exploitation (Rettmer et al. 1992a). L'ge de l'animal pourrait exercer galement une influence. En effet, une amlioration significative du pourcentage de gestation a t observe chez des primipares mais pas chez des pluripares (Ryan et al. 1991). L'influence de l'intervalle entre le vlage et la premire insmination a galement t tudie (Ryan et al. 1991). Il apparat que le double traitement des animaux lors de l'insmination et 12 jours plus tard n'amliore significativement le pourcentage de gestation que si les animaux ont t insmins 40 59 jours (50,3 vs 36,5) ou 80 99 jours (55,4 vs 40,6) aprs le vlage. Une telle influence n'est cependant pas unanimement rapporte (Leslie et al. 1986). Enfin, la prsence de diffrences entre exploitations laisse supposer l'intervention d'autres facteurs encore inconnus voire non matriss (Rettmer et al. 1992a). Plusieurs publications ont galement fait tat d'une amlioration du pourcentage de gestation lors de l'insmination ralise au cours de l'oestrus suivant le traitement (Humblot et Thibier 1981, Thibier et al. 1985, Bhosrekar et al. 1986, Mac Millan et al. 1986). L'importance de cet effet semblerait dpendre de la dose de GnRH et du stade du cycle auquel le traitement a t ralis. Il est mettre en rapport avec la relation positive tablie entre une progestronmie leve au cours de la phase dioestrale prcdant l'insmination et le taux de gestation obtenu (Folman et al. 1973, Fonseca et al. 1983). Une augmentation de 1 6 jours de la dure du cycle suite l'injection de la GnRH en phase interoestrale a t rapporte par certains auteurs (Rettmer et al. 1992a, Milvae et al. 1984, Mac Millan et al. 1985, Mac Millan et al. 1986, Bostedt et Okyere 1988) mais non par d'autres (Seguin et al. 1977, Thibier et al. 1985). Cet allongement ne concernerait que les injections ralises aprs le 7me (Mac Millan et al. 1986) ou le 10me jour du cycle (Mac Millan et al. 1985). Les rsultats opposs rapports dans la littrature remettent en question le bien fond de l'utilisation de la GnRH dans le traitement curatif ou prventif de l'infertilit (Lewis et al. 1990). Cependant, certains auteurs estiment qu'une augmentation de 2 et 5 % d'un taux de gestation respectivement infrieur ou gal 45 % et suprieur ou gal 60 % est suffisante pour amortir le cot du traitement et autorise dans le premier cas traiter systmatiquement les animaux lors de la premire ou deuxime insmination et dans le second cas rserver le traitement la deuxime insmination ou aux insminations ultrieures (Weaver et al. 1988).

6. Pour en savoir plus


- Hanzen Ch., Drion PV, Lourtie O., Depierreux C., Christians E. La mortalit embryonnaire. 1. Aspects cliniques et facteurs tiologiques dans lespce bovine. Ann.Md.Vt., 1999, 143, 91-118. - Hanzen Ch., Lourtie O., Drion PV, Depierreux C., Christians E. La mortalit embryonnaire. 2. Implications hormonales. Ann.Md.Vt., 1999, 143, 179-189. - Hanzen Ch, Houtain JY, Laurent Y. Mise au point relative l'utilisation de la gonadolibrine en reproduction bovine. 1. Justifications physiologiques de son application au traitement de l'infertilit. Le Mdecin Vtrinaire du Qubec. 1996, 26, 7-10. Hanzen Ch, Houtain JY, Laurent Y. Mise au point relative l'utilisation de la gonadolibrine en reproduction bovine. 2. Domaines d'applications cliniques. Le Mdecin Vtrinaire du Qubec. 1996, 26,

Linfertilit dans lespce bovine / 34 47-54. Sur l'impact des radicaux libres sur les performances de reproduction : http://www.inra.fr/productionsanimales/an2002/num221/aurouss/ba221.htm Sur les protines du stress : http://www.inra.fr/productionsanimales/an2001/num211/david/jd211.htm

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7. Tableaux
Tableau 1 : Frquence de la mortalit embryonnaire tardive dtermine par chographie et par palpation manuelle. N 309 34 200 148 100 201 304 85 1766 19411 679 1393 802 138 139 144 802 482 341 3022 85 85 445 802 7500 Diagnostic/symptmes Echographie Echographie Echographie Echographie Echographie Echographie Echographie Echographie Echographie Echographie Palpation manuelle GMF GMF PVA PFL PFL+PVA PFL+GMF GMF ou PVA ou PFL GMF ou PVA ou PFL PFL+CJ GMF+PVA+PFL GMF+PVA+PFL GMF ou PVA ou PFL Stade (J) NP 10-24 16-31 21-33 21-60 21-70 24-81 26-33 26-70 28 - 77 30 - 45 30 - 68 <35 J 35 - 42 35 - 42 35 - 42 35-45 J 35-51 37 - 43 42- 150 42 - 46 42 - 46 44 - 50 > 45 J <50 J > 50 J 51 - 57 52-70 58 - 64 65 - 71 > 72 % 16 12 30 16 5 2 6 10 9 8.4 6.5 17 5.8 5.8 6.5 9.0 6 8.5 7.3 9.6 9.5 11.8 4.7 0.9 7.2 5.6 3.1 3.7 3.7 2.7 1.8 Rfrences Humblot et Thibier 1984 Kastelic et al. 1989 Badtram et al. 1991 Pieterse et al. 1990 Chaffaux et al. 1986 Taverne et al. 1985 Hanzen et Delsaux 1987 Willemse et Taverne 1989 Hanzen et Laurent 1991 Thurmond et Picanso 1993b Alexander et al. 1995 White et al. 1989 Paisley et al. 1978 Abbitt et al. 1978 Abbitt et al. 1978 Abbitt et al. 1978 Paisley et al. 1978 Abbitt et al. 1978 Warnick et al. 1995 Lopez-Gatius et al. 1996 Franco et al. 1987 Franco et al. 1987 Warnick et al. 1995 Paisley et al. 1978 Vaillancourt et al. 1979 Vaillancourt et al. 1979 Warnick et al. 1995 Abbitt et al. 1978 Warnick et al. 1995 Warnick et al. 1995 Warnick et al. 1995

GMF GMF 385 GMF ou PVA ou PFL 410 GMF ou PVA ou PFL 326 GMF ou PVA ou PFL 180 GMF ou PVA ou PFL 277 GMF ou PVA ou PFL GMF , glissement des membranes ftales PVA , palpation de la vsicule amniotique PFL , palpation dune fluctuation liquidienne CJ : corps jaune

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Tableau 2 : Types de gonadorline et d'agonistes utiliss en mdecine vtrinaire ND Firme Nom Fertagyl Intervet Gonadorline Cystorelin Ceva Gonadorline diacetate Factrel Ayerst Gonadorline hydrochloride Receptal Hoechst Buserline Ovalyse Upjohn Fertirline actate Fertireline Takeda Fertirline actate Gonadolibrine:GnRHnaturelle, Buserline, Fertirline: GnRH de synthse Tableau 3 : Effet de la GnRH sur le pourcentage de gestation en premire insmination ralise sur chaleurs naturelles Dose %G %G Diff Rfrences (g) (5) (6) 1302 B 10 57 63 +6 S Fielden et Moller 1983 1194 F 100 50 57 +7 S Nakao et al. 1983 1533 B 10 42 49 +7 S Ryan et al. 1991 (1) 218 G 125 50 59 +9 S Schels et Mostafawi 1978 576 B 10 49 58 +9 S Moller et Fielden 1981 397 B 10 56 67 + 11 S Leidl et al. 1979 278 G 1000 68 81 + 13 S Grunert et al. 1978 214 G 1000 68 81 + 13 S Goldbeck 1976 133 G 100 32 48 + 16 S Lee et al. 1983 143 (3) B 10 30-33 56-64 + 23-34 S Rosenberg et al. 1991 G 100-250 546 G 100 52 52 0 NS Pennington et al. 1985 200 G 1000 55 56 +1 NS Gunzler et al. 1974 328 G 100 46 47 +1 NS Stevenson et al. 1984 3502 F 250 54 59 +5 NS Anderson et Malmo 1985 119 B 10 42 52 + 10 NS Von Holtenmoller 1979 400 G 400 60 71 + 11 NS Gunzler et al. 1976 187 (4) B 10 63-67 52-68 + 1-11 NS Rosenberg et al. 1991 G 100-250 59 F 100 61 75 + 14 NS Mori et Takahashi 1978 96 G 100 56 54 -2 NS Vahdat et Whitmore 1980 258 G 100 47 44 -3 NS Lewis et al. 1990 1500 B 10 48 41 -7 NS Chenault 1990 (2) F 25-100 G: Gonadolibrine (GnRH naturelle) F: Fertireline acetate (agoniste de la GnRH) B: Busereline (agoniste de la GnRH) (1) Double traitement: lors de l'insmination et 12 jours plus tard (2) Injection directement aprs l'insmination (3) Groupe d'animaux faible fertilit traits avec la Busrline ou avec la Gonadolibrine (4) Groupe d'animaux bonne fertilit traits avec la Busrline ou avec la Gonadolibrine (5) % de gestation des animaux tmoins (6) % de gestation des animaux traits N GnRH

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Tableau 4 : Effet de la GnRH (G: Gonadolibrine, F: fertirline) sur le pourcentage de gestation (% G) en premire insmination ralise aprs injection de prostaglandine N 86 86 2352 325 GnRH G F G G Dose (g) % G (5) 100 23 50 71 100 28 100 38 %G (6) 42 77 26 36 DifF + 19 +6 -2 -2 S NS NS NS Rfrences Lucy et Stevenson 1986 (1) Coleman et al. 1988 (2) Archbald et al. 1992 (3) Mee et al. 1990 (4)

(1) Injection de la GnRH 72 h. aprs la prostaglandine (6 h. avant l'insmination) (2) Injection de GnRH lors de l'insmination ralise aprs dtection de l'oestrus (3) Traitement au moyen de la GnRH lors de l'insmination effectue 72 80 h aprs injection d'une prostaglandine sans observation d'oestrus (4) Oestrus induit par PGF mais insmination et traitement 1 h ou 12 16 h. aprs l'oestrus observ (5) % de gestation des animaux tmoins (6) % de gestation des animaux traits Tableau 5 : Comparaison de l'effet de l'administration de la GnRH le % de gestation (% G) chez des animaux repeat-breeders. Diff Rfrences Dose (g))% G % G (3) (4) 1482 3 ou 4me G 100 33 40 +7 S Stevenson et al. 1990 (1) 961 4me G 100 38 47 +9 S Phatak et al. 1986 513 3 et 4me G 100 31 44 + 13 S Stevenson et al. 1988 283 4me G 100 40 56 + 16 S Roussel et al. 1988 346 >3 G 100 48 73 + 25 S Lee et al. 1983 963 3me G 100 39 43 +4 NS Bondurant et al. 1991 92 G 100 46 55 +9 NS Pennington et al. 1985 (2) 117 3me G 100 51 66 + 15 NS Stevenson et al. 1984 164 >2 G 100 54 44 - 10 NS Swanson et Young 1990 61 3me G 100 45 34 - 11 NS Lewis et al. 1990 361 3me F 250 53 44 - 11 NS Anderson et Malmo 1985 127 >2 G 100 55 40 - 15 NS Young et Swanson 1988 G: gonadolibrine, F: Fertirline (1) Simple ou double insmination ralise de 12 16 heures d'intervalle (2) Traitement des animaux 0 12 heures avant l'insmination (3) % de gestation des animaux tmoins (4) % de gestation des animaux traits N N IA GnRH

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Tableau 6 : Comparaison de l'effet d'une injection de gonadolibrine en phase dioestrale sur le pourcentage de gestation lors de l'insmination prcdant ou suivant le traitement N 38 1135 153 601 1533 60 GV VL VL GV VL VL N IA 1 1 2 1 1 2 J11-J13 J7-J13 J12 J11-J14 J0+J12 J12 GnRH F B B F B B g 200 10 20 100-200 10 20 %G (8) 58 63 54 43 42 41 %G (9) 58 68 59 50 50 53 Diff +0 +5 +5 +7 +9 + 12 Rfrences Rettmer et al. 1992b (1) Mac Millan et al., 1986 Bostedt et Okyere 1988 Rettmer et al. 1992a (2) Ryan et al. 1991 (3) Humblot et Thibier 1981 (4)

S S S S S

G 1000 81 VL 3 J13 B 20 34 48 + 14 S Bhosrekar, et al. 1986 (4) 210 VL 1,>1 J11-J14 B 10 44 60 + 16 S Lajili et al. 1991 (5) 149 VL 3 J9-J13 B 20 39 43 +4 NS Bentele et al. 1987 185 VL 1 J4 G 250 56 54 -2 NS Leslie et al. 1986 145 VV 1 J13-J14 F 100-200 71 68 -3 NS Rettmer et al. 1992a (7) 2001 VL 1 J1- J13 B 5 66 62 -4 NS MacMillan et al. 1986 148 2 J9-J12 B 20 57 50 -7 NS Bentele et al. 1987 F: Actate de Fertireline, B: Busereline, G: Gonadoreline VV: Vaches viandeuses, VL, Vaches laitires, GV: Gnisses viandeuses (1) Synchronisation au moyen de deux injections de prostaglandines 10 jours d'intervalle. (2) Synchronisation au moyen d'actate de mlengestrol (14 jours) et d'une prostaglandine au 17me jour suivant la fin du traitement. (3) Traitement des animaux lors de l'insmination ou lors de l'insmination et 12 jours plus tard. (4) Pourcentage de gestation obtenu lors de l'insmination suivant le traitement ralis 12 13 jours aprs la chaleur prcdante. (5) Insmination sur chaleurs naturelles ou induites par une injection de prostaglandine. (6) Synchronisation au moyen d'un implant de norgestomet. (7) Synchronisation au moyen d'une injection de prostaglandine. (8) % de gestation des animaux tmoins (9) % de gestation des animaux traits

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Tableau 7 : Effets de divers facteurs sur le risque de non-fcondation (NF) de mortalit embryonnaire prcoce (Mep) ou tardive (Met) (Adapt de Hanzen et al. Ann.Md.Vt., 1999a, 143, 91-118).

1. Facteurs propres lembryon anomalies chromosomiques sexe de lembryon nombre dembryons 2. Facteurs parentaux Facteurs paternels Environnement de l'oviducte Environnement utrin Race de la mre Age de la mre Nombre dinsminations Timing de linsmination 3. La fcondation (F) in vitro Transfert dembryons in vitro Conglation, clonage, sexage de lembryon Qualit de lovocyte 4. Les facteurs biologiques Endomtrites, salpingites Contamination de lovocyte Contamination de lembryon Contamination du matriel de la FIV 5. Facteurs environnementaux Alimentation

NF altrations du caryotype chromosomique sexe mle gemellit simple ou multiple transfert de plusieurs embryons ou

Mep Met + + +

+ + + + + + + ? + + + + +

qualit du sperme, FIV facteurs de croissance, motilit protines, glucose, hormones, minraux inbreeding repeat-breeding IA par rapport lovulation

+ + ? + + + + +

statut physiologique et diamtre du + follicule, moment du prlvement, + +

+ + +

+ + +

BHV1, BVD germes tropisme gnital ovaires, oviductes, sperme, srum balance nergtique ngative ure balance nergtique positive (brebis) mycotoxines, sralnone gossypol rgions tropicales glissement des membranes foetales avant le 50me jour

+ +

Temprature Palpation rectale : mthode Palpation : stade de gestation Traitements de superovulation Prostaglandines Zranol

+ + + + + +

+ + + + + +

+ +

+ +