Apostila Espermograma

ESPERMOGRAMA - ANLISE DO SMEN A anlise do smen indicada em casos de infertilidade conjugal, avaliao e controle do paciente ps-vasectomizado e avaliao de doenas testiculares e penianas sobre a espermatognese. O smen normal uma mistura de espermatozides e secrees provenientes dos testculos e epiddimos, os quais so misturados durante a ejaculao com secrees oriundas da prstata, vesculas seminais e glndulas bulbouretrais. A composio final um lquido viscoso que forma o ejaculado. Coleta do Material e Preparao do Paciente A amostra deve ser coletada aps um perodo de abstinncia sexual de 2 a 5 dias. O paciente deve ser instrudo para evitar perda de material, principalmente o 1 jato, que contm a maior concentrao de espermatozides. Se a abstinncia sexual for superior a 5 dias, aumenta o nmero de formas imaturas, o nmero de espermatozides mortos e o volume do smen; se a abstinncia sexual for inferior a 2 dias, diminui o volume do smen e o nmero de espermatozides. A amostra deve ser obtida por masturbao e ejaculada dentro de um recipiente de boca larga de vidro ou plstico. Se for de plstico, deve-se analisar os possveis efeitos txicos sobre os espermatozides. Deve-se evitar temperaturas extremas (-20C ou +40C ). O frasco contendo a amostra deve ser identificado, contendo o nome do paciente, o perodo de abstinncia sexual, data e hora da coleta, o nome do medicamento em uso. Duas amostras devem ser coletadas num perodo de 7 dias 90 dias. Se o resultado dessas duas anlises for discrepante, anlises adicionais devero ser realizadas. O ideal coletar o material no laboratrio, porm, se isso no for possvel, a amostra deve ser enviada ao laboratrio dentro de no mximo 1 hora aps a coleta. Preservativos no devem ser usados na coleta, pois podem interferir com a viabilidade dos espermatozides. No caso da realizao de uma avaliao microbiolgica, o paciente deve primeiro urinar e depois fazer assepsia das mos e pnis antes de ejacular num frasco esterilizado. Quando houver dosagem de frutose no smen, o paciente deve fazer um jejum alimentar de 12 horas. Exames macroscpicos: Viscosidade, pH. Liquefao ou coagulao, Volume, Aspecto, Cor,

Tempo de durao da coagulao ou tempo de liquefao TDC Imediatamente aps a ejaculao, o esperma transforma-se em gel (coagulao) para facilitar a disperso dos espermatozides e proteg-los do contato com o pH vaginal cido, isso se deve s protenas coagulantes presentes na secreo das vesculas seminais. Em temperatura corprea, a amostra seminal normal se liquefaz em at 60 minutos devido ao das espermolisinas contidas na secreo prosttica. A liquefao do esperma importante para a motilidade dos espermatozides.

Procedimento: colocar a amostra em uma estufa a 37C e verificar de 5 em 5 minutos quando se inicia a liquefao, cronometrando, assim, o tempo que leva para uma amostra se liquefazer totalmente. A OMS estabelece que o tempo de liquefao de uma amostra normal seja de at 60 minutos aps a coleta do smen. Ocasionalmente, a amostra pode no se liquefazer e, nesse caso, um tratamento adicional necessrio para tornar a amostra analisvel, devese, portanto, agitar a amostra em um vortx at a sua liquefao. A amostra de smen pode apresentar alteraes no TDC: Ausncia de coagulao: ausncia de fatores de coagulao: agenesia ou obstruo dos ductos das vesculas seminais; Ausncia de liquefao: ausncia de fatores de liquefao: agenesia ou afeces da prstata; Liquefao parcial: deficincia de fatores de liquefao (prstata).

Volume O volume seminal final diretamente proporcional quantidade de secreo da prstata e das vesculas seminais, j que o volume proveniente dos testculos e epiddimo reduzido. Procedimento: medir o volume com proveta ou pipeta graduada; Valor Normal: 2,0 a 5,0 ml; - Hipoespermia: vol. < 2,0 ml Insuficincia ou ausncia de abstinncia sexual; Insuficincia vesicular (Clamydia ou Mycoplasma); Baixos nveis sricos de testosterona; - Hiperespermia: vol. > 5,0 ml Abstinncia sexual prolongada; Tumores benignos ou malignos prstato-vesiculares; - Aspermia: ausncia de ejaculado Agenesias; Alteraes no controle neurolgico da ejaculao. Aspecto Procedimento: o aspecto deve ser analisado aps liquefao por simples inspeo temperatura ambiente. Amostra normal: aparncia homognea e opaca Amostra anormal: aspecto heterogneo por agregados proticos de consistncia firme e incolor: perodos prolongados de abstinncia sexual, diminuio dos nveis de testosterona, alteraes nas concentraes de espermolisinas, processos inflamatrios genitais, medicamentos.

 Cor Normalmente o smen branco-opaco. A presena de leuccitos em grande quantidade confere ao esperma uma cor amarelada, enquanto que a presena de hemcias confere uma cor avermelhada. Outras tonalidades (esverdeado) pode se dar devido ao uso de medicamentos. Viscosidade ou Consistncia Procedimento: pode ser estimada atravs de uma pipeta de 5 ml, deixando o smen sair da pipeta pela ao da gravidade e observando como isso se d. Viscosidade Diminuda: a amostra se desprende da pipeta em gotas; Viscosidade Normal: a amostra se alongar em filetes com menos de 2 cm; Viscosidade Aumentada: a amostra se alongar em filetes com mais de 2 cm de comprimento. pH Procedimento: medir o pH do smen atravs de fita de pH. Valor Normal: 7,2 a 8,0 pH acima de 8,0: deficincia da glndula prosttica pH abaixo de 7,2 : deficincia das vesculas seminais Exames Microscpicos: motilidade; vitalidade; contagem dos espermatozides; contagem de leuccitos e hemcias, morfologia dos espermatozides; morfologia das clulas germinativas imaturas. Motilidade ou Motilidade de 1 Hora: Procedimento: homogeneizar a amostra em temperatura ambiente, colocar 10mL de smen em uma lmina de vidro limpa e cobrir com uma lamnula. Fazer 2 lminas (fazer a mdia entre as lminas). Se o nmero de espermatozides por campo variar consideravelmente, isto indica que a amostra no est homogeneizada. Se o nmero de espermatozides for muito pequeno, deve-se centrifugar novamente a amostra. A avaliao da motilidade deve ser realizada at 60 minutos aps a coleta, observando os espermatozides em objetiva de menor aumento, rastreando 4 a 6 campos para avaliar 100 espermatozides, obtendo a porcentagem das categorias classificadas abaixo: A espermatozides com motilidade rpida e progressiva (para frente); B - espermatozides com motilidade lenta e progressiva; C - espermatozides com motilidade no progressiva; D - espermatozides imveis. VALOR NORMAL: Acima de 50% de espermatozides em A + B Acima de 25% de espermatozides em A Astenospermia: abaixo de 50% das categorias A + B Astenospermia extrnseca: devido a aumento da viscosidade; Astenospermia intrnseca: nvel baixo ou ausente de frutose.

 VITALIDADE A vitalidade dos espermatozides se reflete na proporo de espermatozides que esto vivos, determinados pela excluso do corante. Baseia-se no princpio de que a membrana plasmtica danificada de uma clula morta permite a passagem de certos corantes, o que no ocorre nas clulas vivas. Procedimento: em um tubo de hemlise, misturar 20ml de smen e 1 gota de eosina, esperar 30 segundos, colocar 2 gotas de nigrosina, homogeneizar e confeccionar um esfregao tipo sanguneo, secar rapidamente (secador). Fazer a leitura em imerso, contando 100 espermatozides, os espermatozides vivos no se coram (brancos), enquanto os mortos coram-se em rsea. O resultado expresso em % de espermatozides vivos. Valor Normal: acima de 50% de espermatozides vivos Necrospermia: acima de 50% de espermatozides mortos. Ocorre na deficincia de frutose. CONTAGEM DOS ESPERMATOZIDES So contados apenas os espermatozides maduros, com cauda. Procedimento: fazer duas diluies em um tubo de hemlise, homogeneizar e preencher a Cmara de Newbauer, contando nos 4 quadrantes laterais da cmara. 1:20 - 20 ml de smen + 0,4 ml do lquido diluidor Resultado da contagem multiplica por 50.000 1:200 - 20 ml de smen + 4,0 ml do lquido diluidor Resultado da contagem multiplica por 500.000 Resultado final: mdia aritmtica entre as duas contagens. Valor Normal: acima de 20.000.000/ml Oligozoospermia: quando o nmero de espermatozides menor que 20.000.000/ml A oligozoospermia pode ser permanente (concomitante necrospermia e astenospermia) e peridica (confirmado atravs de espermogramas seriados, com intervalo de 2 semanas, durante o perodo de 3 meses) Causas: infeco do trato genital, anomalias cromossmicas, alteraes hormonais e pouca abstinncia sexual. Azoospermia: ausncia de espermatozides no smen. Causas: so as mesmas que causam oligozoospermia, alm de agenesias gonodais. CONTAGEM GLOBAL DE LEUCCITOS E HEMCIAS A contagem de leuccitos e hemcias realizada nos 4 quadrantes laterais da Cmara de Newbauer, na ocasio da contagem de espermatozides. Procedimento: o procedimento o mesmo para contar leuccitos/hemcias em Hematologia. Na diluio 1:20, multiplica-se o resultado por 50. O valor expresso em mm. Valor Normal de Leuccitos: at 1.000/mm

Valor Normal de Hemcias: at 1.000/mm Leucospermia: valor de leuccitos acima de 1.000/mm Eosinofilia de at 25%: processos auto-imunes; Neutrofilia: prostato-vesiculites agudas; Linfcitos e Moncitos: processos crnicos; Eritrospermia (sem alterao da cor do smen) e Espermorragia (smen cor hemorrgica): processo infeccioso em atividade, neoplasias ou sinal precoce de hipertenso arterial sistmica. MORFOLOGIA DOS ESPERMATOZIDES MADUROS Espermatozide normal: cabea oval (o acrossoma ocupa uma rea entre 40% - 70% da regio ceflica), pea intermediria e flagelo normais. Espermatozides anormais: com defeitos na forma e tamanho da cabea, defeitos na pea intermediria e com defeitos da cauda. Procedimento: confeccionar um esfregao fino (tipo hemograma), secar a temperatura ambiente e corar pela tcnica de Leishmann ou de Papanicolaou. Observar em imerso, e contar 200 espermatozides, sendo o resultado relatado em % de espermatozides normais e espermatozides anormais. A anlise multiparamtrica, cada defeito mesmo que presente em um mesmo espermatozide deve ser computada separadamente. Valor Normal: acima de 50% de espermatozides normais. Teratospermia: acima de 50% de formas anormais. Causas: alteraes na temperatura escrotal devido a varicocele e hidrocele. MORFOLOGIA DAS CLULAS GERMINATIVAS IMATURAS Procedimento: no esfregao do smen corado pela tcnica de Leishmann, observar as clulas da espermatognese e relatar o resultado em porcentagem. Valor Normal: Espermatcitos at 1% Espermtides at 3% As clulas germinativas imaturas se desprendem dos tubos seminferos por processos patolgicos como: varicocele, processos traumticos, hidrocele, tuberculose, seminoma, processos infecciosos agudos e crnicos. EXAME DO SMEN DE PACIENTE VASECTOMIZADO: Nas amostras colhidas ps-vasectomia, importante verificar a presena de espermatozides. um procedimento menos complicado que o da infertilidade, pois a nica avaliao a presena ou ausncia de espermatozides. O tempo necessrio para a ocorrncia da esterilidade completa pode variar de um paciente para outro, por isso no raro encontrar espermatozides viveis em pacientes vasectomizados. Normalmente, as amostras so examinadas em intervalos mensais que comeam aos 2 meses aps a vasectomia e continuam at que 2 amostras mensais consecutivas dos espermatozides no smen indiquem a eficcia do mtodo (vasectomia).

REFERNCIA BIBLIOGRFICA: - OMS. Manual de Laboratrio para o Exame do Smen Humano e Interao Esperma-Muco Cervical; 3 ed. Santos, 1994. - PIVA, S. Espermograma, Anlise e Tcnicas. 6 ed. Santos, So Paulo, 1985. - STRASINGER, SK. Uroanlise e Fluidos Biolgicos. Ed. Panamericana, So Paulo, 1991.