Anatoma Patolgica General 3.

Curso 2003-2004

Tema 3.- PATOLOGA CELULAR: MECANISMOS DE LESIN CELULAR. Isquemia e hipoxia. Dao en la membrana. Radicales libres. El Calcio y la Membrana. PATOLOGA SUBCELULAR: alteraciones de los orgnulos celulares.

IV.- MECANISMOS DE LESIN CELULAR 1.- Lesin isqumica o hipxica 2.- Lesin por radicales libres 3.- Lesin qumica 4.- Lesin por agente infeccioso A. Sistemas celulares ms vulnerables a lesiones que inducen necrosis: 1. Membranas celulares 2. Respiracin aerbica 3. Aparato sinttico (protenas y enzimas) 4. Aparato gentico B. Cuatro mecanismo comunes asociados con lesiones que inducen necrosis 1.- Hipoxia/isquemia inhibe la respiracin aerbica: DEPLECIN ATP 2.- Generacin de especies oxgeno reducidas: RADICALES LIBRES 3.- Defectos en la permeabilidad de membrana: DAO DE MEMBRANA 4.- Disrupcin de la homeostasis del Calcio: INFLUJO CALCICO C. Isquemia y lesin hipxica
1. Falta de oxgeno disminuye la respiracin aerbica mitocondrial y la generacin de ATP se ralentiza o se para totalemente. 2. Falta de ATP induce el fallo de la bomba de NA:K en la membrana celular resultando el influjo de Na, agua, y calcio y prdida de potasio TUMEFACCIN CELULAR AGUDA 3. Iniciacin de la glicolisis anaerbica debido a la estimulacin de la fosfofructoquinasa por incremento del AMP y descenso del ATP. El resultado es el acmulo de cido lctico y fosfato inorgnico en la clula. Descenso del pH celular que induce la condensacin de la cromatina. 4. Degranulacin de ribosomas: resultado disminucin dela sntesis proteica. Descenso de la sntesis proteica induce el acmulo lipdico en clulas como los hepatocitos. 5. Alteracin en la homeostasis del Ca tiene lugar secundariamente a las alteraciones de la membrana y prdida del trasnporte del Ca y la funcin de barrrera. 1) Ca++ del citosol es mantenido a una concentracin a menos de 0,1 uM comparado con los niveles extracelulares de 1,3 uM, La mayora del Ca++ intracelular se halla secuestrado en la mitocondria y RE. El mantenimiento del gradiente de Ca depende de CA++/Mg++ATPasas. 2) Hipoxia y otras lesiones de membrana incrementan el calcio del citosol y provocan la activacin de: a. b. c. d. Tema 3.- Patologa celular Fosfolipasadisminuye fosfolpidos de membrana y lisis de membrana ATPasa--- disminuye el ATP Proteasa--- disrupcin de la membrana y proteinas del citoesqueleto Endonucleasadao de la cromatina del ncleo 1

Anatoma Patolgica General 3. Curso 2003-2004

2. LESIN CELULAR CAUSADA POR DAO EN LA MEMBRANA El dao directo de las membranas celulares, tanto de la plasmtica como de los orgnulos, es la segunda va en importancia de lesin celular. De hecho, las situaciones anxicas terminan lesionando las membranas celulares. Por lo que se arguye que existe un trayecto comn final de la lesin celular independientemente de sus causas. Por lo tanto, no es sorprendente que independientemente de sus causas las clulas lesionadas muestran alteraciones funcionales y morfolgicas similares. A pesar de las similitudes, sin embargo existen algunas diferencias entre la lesin celular causada por la hipoxia o aqul causado por el dao a la membrana plasmtica. A. CAUSAS DE DAO DE MEMBRANA Existen una gran variedad de agentes capaces de daar las membranas celulares. Entre los ms importantes destacamos: a) activacin de proteasas endgenas b) toxinas fosfolipasas exgenas en bacterias, venenos de serpientes c) toxinas formadoras de poros d) complemento (la secuencia de ataque del complemento, C5-C9) e) infecciones virales que activan proteasas endgenas o fosfolipasas f) entrada de Ca++ por cualquier causa a) el dao sobre las ATPasas de membrana conduce a la tumefaccin. Se trata de la deplecin del ATP celular por el bloqueo de la fosforilacin oxidativa tal y como ocurre en la anoxia. - digitalis acta sobre las ATPasas del msculo cardiaco. - en el cerebro la toxina triethyl tin inhibe las ATPasas de los procesos podales de los astrocitos, ocasionando la tumefaccin de los mismos. b) se encuentran en venenos, toxinas bacteriana y toxinas biolgicas que hidrolizan los fosfolpidos de membrana en lugares especficos. - en la miositis clostridial de las ovejas y vacas se produce una necrosis muscular esqueltica extensiva por la secrecin de potentes fosfolipasas por la bacteria del gnero Clostridium que degrada las membranas de los miocitos, provocando la lisis de stos de eriitrocitos y vasos sanguneos - en la rhabdomiolisis exercional de los perros de raza de carreras greyhounds , aparecen en los primeros estados de la enfermedad enzimas solubles liberados por los miocitos daados. El flujo de protenas tambin va del plasma y fluido intersticial a la clula. c) algunas protenas exgenas se insertan directamente en la membrana para formar complejos proteicos, que dejan unos canales, denominados porinas. Estos son los mecanismos ms importantes de virulencia en enfermedades de protozooa y bacterias, e incluyen la lehisporin de la leishmaniasis, la alfa-toxina de las infecciones estafiloccicas, la
Tema 3.- Patologa celular 2

Anatoma Patolgica General 3. Curso 2003-2004

perfringolisina de la miositis clostridial y la alfa-hemolisina y enterohemolisina de las infecciones ocasionadas por la E. coli. d) los componentes del complemento son un sistema de protenas circulantes. La cascada de ataque del complemento que activa el C9, necesita del C5-C8, que se inserta en la membrana creando poros de 100nm de dimetro que causa la lisis celular por permitir la entrada de calcio y sodio, al desequilibrarse el agua celular.

- MECANISMO DEL DAO A LA MEMBRANA Los agentes txicos ocasionan alteraciones en la membrana de varias formas: a) normalmente por interaccin directa con la membrana b) formacin de radicales libres, que causan la peroxidacin de los lpidos de membrana. Lesin por Radicales Libres Independientemente del mecanismo implicado el resultado es un incremento de la permeabilidad y prdida de las funciones especializadas de la membrana. 1.- Los radicales libres son sustancias que poseen un nmero impar de electrones en el orbital ms externo. Ejemplos: Radicales superxidos: O2Perxido de hidrgeno: H2O2 In hidroxilo: OH2. Son por lo tanto generalmente altamente reactivos con lpidos, protenas y cidos nucleicos. Por este motivo, la mayora de ellos existen solamente un corto periodo de tiempo 3. Fuentes de radicales libres en las clulas y los tejidos: a. Absorcin de energa radiante (rayos ultravioleta) b. Reacciones Reduccin-oxidacin durante los procesos fisiolgicos normales i. enzimas de la cadena respiratoria y oxgeno ii. Xantina oxidasa iii. Actividad del citocromo p450 monooxigenasa iv. NADPH oxidasa v. Reaccin de Fenton:Fe+2 + H2O2Fe+3+OH- +OHc. Exposicin a toxinas tales como oxgeno, tetracloruro de carbono y muchas drogas

Tema 3.- Patologa celular

Anatoma Patolgica General 3. Curso 2003-2004

4.- Una vez las formas radicales libres reaccionan con los lpidos de membrana, protenas y cidos nuclicos para iniciar se inician reacciones autocatalticas (radicales libres generan ms radicales libres) 5.- Dao inducido por los radicales libres a. Peroxidacin lipdica de membrana 1) Prdida de la funcin de membrana e incremento de la permeabilidad 2) Generacin de reaccin lipdica de autoperoxidacin. b. Dao en el DNA que conduce a la mutacin y muerte c, Oxidacin y desnaturalizacin de proteinas 6.- Terminacin del dao por radicales a. decaimiento espontneo b. inactivacin cataltica c. interaccin con scavengers antioxidantes

Las radiaciones Las radiaciones letales ionizantes induce la formacin de radicales libres bien por la ionizacin directa o bien por la accin de productos radiolticos. Las toxinas que bloquean el DNA, RNA y va pptidos Algunas toxinas pueden producir dao selectivo a cualquier segmento de la sntesis de las proteica, transcripcin de genes a travs de la traslacin del RNAm en el ribosoma para la secrecin de las protenas de la clula. -PEROXIDACIN LIPDICA Y DAO CELULAR La generacin de radicales libres es quizs el mecanismo ms comn de dao celular y muchos txicos y drogas qumicas actan por esta va. -CONSECUENCIAS MORFOLGICAS Y FUNCIONALES DEL DAO SOBRE LA MEMBRANA CELULAR La desagregacin y degranulacin del RER, causada presumiblemente por la peroxidacin lipdica, puede interferir directamente con la interaccin de los ribosomas y el RNAm. A continuacin se producen todos los cambios descritos anteriormente, y actuacin del Ca sobre las mitocondrias y exacerbacin de los efectos sobre la clula. Seguidamente se
Tema 3.- Patologa celular 4

Anatoma Patolgica General 3. Curso 2003-2004

produce una reduccin en la sntesis de protenas. Concretamente de la apolipoprotena, sintetizada en los hepatocitos. Esta protena utilizada en la sntesis en la exportacin de los triglicridos conduce a un acmulo de lpidos en el interior del hepatocito, conduciendo a una lipidosis. De hecho, el acmulo de lpidos es una de las causas comunes de muchas formas de dao celular. Los rasgos descritos son anteriormente por la intoxicacin de CCl4 son probablemente el resultado de una peroxidacin lipdica, con la consecuente disfuncin de la membrana. Los rasgos que diferencian sean probablemente la implicacin inicial del RER. PATOLOGIA SUBCELULAR Cronologa patolgica subcelular 0-15 minutos: primeros cambios en las mitocondrias 15-30 minutos: distorsin de la membrana plasmtica, continua la condensacin de la matriz mitocondrial, aparente dilatacin del retculo endoplsmico 30-1 hora: degranulacin de los polirribososmas del RER, distensin del compartimento interno mitocondrial, depsitos amorfos densos. 2-4 horas: tumefaccin mitocondrial exagerada gran incremento de volumen, tumefaccin del RER y fragmentacin, rotura de la membrana plasmtica, condensacin de la cromatina y manifiesta Cariolisis > 4 horas: fragmentacin de todas las organelas, figuras de mielina de la membrana, rotura de lisosomas al citosol e inicio de la autolisis. Mitocondrias Los cambios en la estructura mitocondrial y en sus funciones son los primeros indicadores de la lesin celular hipxica. Inicialmente la mitocondria sufre una condensacin de la matriz, y a continuacin una tumefaccin mitocondrial, con disminucin de la altura de las crestas mitocondriales. .Hasta este momento la lesin celular es de tipo reversible. Si progresa la tumefaccin, los grnulos de la matriz desaparecen y esta conserva una apariencia aclarada. Se forman unas condensaciones densas de depsitos amorfos correspondientes a lipoprotenas y protenas desnaturalizadas. Asimismo, la entrada del in Ca++ provoca depsitos de sales insolubles. Se forman megamitocondrias, mitocondrias de menor tamano.
Tema 3.- Patologa celular 5

Anatoma Patolgica General 3. Curso 2003-2004

La Membrana Plasmatica Es tambin uno de los primeros orgnulos que sufre los cambios hipxicos celulares. Se manifiesta morfolgicamente por hinchamiento y prdida de las estructuras especializadas. Estas distorsiones se acompaan de cambios en el citoesqueleto, ya que son especialmente sensibles a las concentraciones de iones y especialmente al calcio. Sus funciones: - mantenimiento de la concentracin de iones y agua conservando el volumen celular y la permeabilidad celular - receptora de estmulos - proteccin fsica .

El fracaso de la bomba de Na/K, sistema energtico dependiente, El dao directo de las membranas celulares, tanto de la plasmtica como la de las organelas, es la segunda va en importancia de lesin celular. De hecho, las situaciones anxicas terminan lesionando las membranas celulares. Sin embargo, existen diferencias funcionales y morfolgicas dependiendo del tipo que ocurra. El Ca++ plasmtica y la membrana

Tras el fallo de la bomba de Na/K se produce una redistribucin de los iones en el interior de la clulas. El Retculo Endoplsmico y otros compartimentos liberan iones Ca++ que provocan la activacin de numerosas enzimas que daan directamente la membrana plasmtica provocando un crculo vicioso, adems de disminuir el ATP.

El Retculo Endoplsmico Rugoso

Tema 3.- Patologa celular

Anatoma Patolgica General 3. Curso 2003-2004

En los primeros estadios sufre una dilatacin y fragmentacin. Producida por el acmulo de agua e iones de sodio en su interior, al atravesar la membrana hacia la luz cisternal, a continuacin se produce una degranulacin y desagregacin de los polirribososmas. Ms tarde aparecen consecuencias sobre las protenas ribosomiales y los cidos nucleicos.

Lisosomas Contienen potentes enzimas hidrolticos capaces de digerir todos los componentes del citoplasma. La evacuacin enzimtica provoca con toda seguridad la muerte celular y por supuesto supone una exacerbacin de la lesin. Sin ninguna duda la tumefaccin lisosomial es el primer cambio debido al flujo de iones yagua antes de que la lesin celular sea irreversible. La evacuacin de los enzimas al citosol celular antes de que se vuelva irreversible la lesin es dificil demostrar. Esto contrasta con lo que ocurre con los neutrfilos y macrfagos, en los que se secretan en la clula viva. Otras organelas (El Complejo de Golgi) Interviene en la atrofia e material en el tambin sufre sntesis proteica y puede sufrir una hipertrofia de los sculos y acmulos de interior. Al igual que las anteriores una tumefaccin

Tema 3.- Patologa celular

Anatoma Patolgica General 3. Curso 2003-2004

ALTERACIONES DEL NCLEO - Alteraciones del tamao (anisocariosis) - Alteraciones de la forma (anisomorfia) - Alteraciones de la localizacin - Marginacin del ncleo - Centralizacin del ncleo Alteraciones del nmero (cel. multinucleadas) - Alteraciones de la divisin (anisodiresis) - Alteraciones de la estructura Alteraciones de la cromatina - Hipercromatosis parietonuclear - Picnosis - Cromatorrexis / Cromatolisis - Cariorrexis Cariolisis Alteraciones de los cromosomas - Alteraciones del nucleolo - Marginacin nucleolar - Segregacin nucleolar Alteraciones de la membrana nuclear ALTERACIONES DE LAS MITOCONDRIAS Alteraciones del tamao - Mitocondrias tumefactas o degeneradas - Megamitocondrias - Mitocondrias de menor tamao Alteraciones del numero -Aumento/Disminucin Alteraciones en la Localizacin: Presencia de inclusiones en la Matriz. ALTERACIONES DEL RER Y RIBOSOMAS - Aumento/disminucion de RER y ribosomas - Degranulacion del RER - Condensacion y acumulacion. de protei'nas en el interior de cisternas. - Fragmentacin o rotura de cisternas de RER ALTERACIONES DEL REL - Aumento del numero de cisternas - Dilatacin y vesiculacion difusa de cisternas - Fragmentacin o rotura de cisternas - Inactivacin de enzimas detoxicantes
Tema 3.- Patologa celular 8

Anatoma Patolgica General 3. Curso 2003-2004

ALTERACIONES DEL COMPLEJO DE GOLGI.-. - Hipertrofia del complejo del Golgi - Atrofia del complejo de Golgi - Acumulo de material ALTERACIONES DE LOS LISOSOMAS - Grandes lisosomas con material acumulado - Figuras de mielina - Grnulos de lipofuscina ALTERACIONES DE LA M. PLASMTICA -Lesiones mecnicas -Lesiones enzimticas/txicas -Lesiones inmunes INCLUSIONES CELULARES # CITOPLASMATICAS - Grnulos de secrecin. - Sustancias almacenadas. *Glucgeno: Diabetes y Glucogenosis. * Lpidos: Degeneracin Grasa. * Protenas: Hialina en rin en TCP - Pigmentos endgenos: Hb, Hs, biliares,etc - Cristaloides: Uratos, Oxalatos, Fosfatos. - Vacuolas. - Vricas: * Estomatitis vesiculosa, Rabia * Viruela entodas las especies - Parsitos: Coccidios, Toxoplasmas # NUCLEARES - Organelas Citoplasmicas: Mitocondrias, C.G, RE. - Inclusiones Paraplsmicas: Glucgeno, lpidos. - Cuerpos filamentosos. - Cuerpos proticos de aspecto paracristalino. - Viricas: # Hepatitis Virica Canina, Moquillo Parvovirus * - Metales pesados: Plomo, Bismuto.

# Rinotraqueitis infecciosa,

Tema 3.- Patologa celular