PREGUNTAS 1. Por que no se le puede tomar un espectro de absorcin a la albmina sola?

R// esto se debe a las especificaciones del instrumento a usar, ya que se utilizan espectrofotmetros UV- visible. La parte UV puede funcionar con la albmina sola ya que como sabemos la luz UV hace resonar los dobles en laces y como sabemos todas las enzimas y protenas tienen al menos 2 aminocidos aromticos, sin embargo, se utiliza el mas visible (el que determina el color) para que al hacer un promedio de ambas absorbancias esta sea la ms correcta. El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptdicos de la albmina formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentracin de protenas, lo que facilita y da lecturas mas precisas de concentracin. 2. Por que razn se eligi una sola longitud de onda para hacer todas las mediciones en la curva de absorcin? R// dentro del estudio de la ley de Beer-Lambert, hay un intervalo donde estos valores son los mximos, validos y hay menor probabilidad de error relativo de ah la eleccin de una sola longitud de onda para realizar la curva de absorcin. la longitud de onda se utiliza siempre la misma porque en esa es en la que mayor espectro de absorcin tiene y da lecturas mas precisas 3. Qu significado tiene la pendiente de la grafica? R// es para determinar un rango lineal dentro del cual tu vas a poder mirar a que concentracin optima puedes medir tu muestra, adems te sirve como un kit interpolando las absorbacias de tus muestras, despejando tu ecuacin de linealidad y multiplicndolo por tu factor de dilucin. De acuerdo a la ley de Beer-Lambert . la absorbancia es igual al producto de elcoeficiente de absortividad molar, la longitud de paso optico y la concentracin. o lo que es iguala , es la absorbancia, que puede calcularse tambin como: es la longitud atravesada por la luz en el medio, es la concentracin del absorbente en el medio.

es el coeficiente de absorcin: es la longitud de onda de la luz absorbida. es el coeficiente de extincin.