Vous êtes sur la page 1sur 180

Cary WinUV

Manual de software

85 101625 28 Mayo de 1999

Cary WinUV

Oficinas de Varian Varian tiene oficinas en la mayora de los pases. Las principales oficinas de productos de espectroscopa ptica aparecen descritas a continuacin: Varian Australia Pty Ltd (Fbrica) 679 Springvale Road Mulgrave, Victoria 3170 (Australia) Telfono para llamadas internacionales: + 61 3 9560 7133 Fax para llamadas internacionales: + 61 3 9560 7950 Varian Instruments 2700 Mitchell Dr Walnut Creek, CA 94598 (Estados Unidos) Telfono: 1 800 926 3000 Telfono para llamadas internacionales: +1.925.939.2400 Fax para llamadas internacionales: +1.925.945.2102 Varian BV Boerhaaveplein 7, 4624 VT Bergen op Zoom Postbus 250, 4600 AG Bergen op Zoom (Pases Bajos) Telfono para llamadas internacionales: +31 0164 282800 Fax para llamadas internacionales: +31 0164 282828 Espaa: VARIAN IBRICA, Avda. Pedro Dez, 25 28019 MADRID Madrid: Tlf: 91 4727612 Fax:91 4725001 Barcelona: Tlf: 93 4737733 Fax: 93 4731006 Sevilla: Tlf: 95 5600962 Fax: 95 4181591 Internet La pgina web de Varian en Internet se encuentra en la direccin: http://www.varianinc.com Varian Australia Pty Ltd es la propietaria de los derechos de propiedad intelectual del presente documento y de cualquier software asociado al mismo. De acuerdo con la legislacin vigente, debe obtenerse la autorizacin de Varian Australia Pty Ltd, concedida por escrito, antes de copiar, reproducir, traducir o convertir a formato electrnico o a cualquier otro formato legible por mquina tanto la documentacin como el software, ya sea de forma total o parcial. Publicado por primera vez en octubre de 1997 en Australia. Modificado en enero de 1999 y mayo de 1999. Los comentarios relativos al presente manual deben remitirse al Director de Comunicaciones de Marketing (Marketing Communications Manager) de Varian Australia, a la direccin indicada ms arriba o enviarse por correo electrnico a la direccin: uv@osi.varian.com. Varian Australia est en posesin del certificado ISO9001. 1997 Varian Australia Pty Ltd (A.C.N. 004 559 540). Todos los derechos reservados. Windows 95, 98 y NT son marcas registradas de Microsoft Corp.

(ii)

Cary WinUV

ndice

1.

Introduccin............................................................................... 1-1 1-2

1.1 Documentacin del sistema Cary 2.

Instalacin del software............................................................ 2-1 2-1 2-1 2-2 2-3 2-4 2-5 2-6 2-7 2-7 2-8

2.1 Requisitos del PC 2.1.1 Requisitos mnimos del ordenador 2.1.2 Por qu necesito el Internet Explorer 4? 2.2 Actualizaciones de la versin 1 2.3 Instalacin del software 2.3.1 Instalacin del software Cary WinUV: 2.3.2 Noticias de ltima hora 2.3.3 Cambio de la resolucin del monitor 2.4 Inicio del software Cary 2.5 Utilizacin de la Ayuda en lnea

2.5.1 Utilizacin de Netscape Navigator en lugar de Internet Explorer 2-8 3. Visin de conjunto del software .............................................. 3-1 3-1 3-2 3-2 3-2 3-3 3-3 3-4 3-4

3.1 Aplicaciones Cary 3.1.1 ADL Shell 3.1.2 Advanced Reads 3.1.3 Align 3.1.4 Concentration 3.1.5 Dissolution (no disponible con el Cary 400/500) 3.1.6 Enzyme Kinetics 3.1.7 Fabric Protection

(iii)

Cary WinUV

3.1.8 GLP Administration 3.1.9 Kinetics 3.1.10 RNA/DNA 3.1.11 Scan 3.1.12 Scanning Kinetics 3.1.13 Simple Reads 3.1.14 Sunglasses 3.1.15 System Information 3.1.16 Thermal (no disponible con el Cary 50) 3.1.17 Validate 3.2 Utilizacin del software Cary WinUV 3.2.1 Lnea de mens 3.2.2 Barra de herramientas 3.2.3 Botones de comando 3.2.4 Ventanas de dilogo 3.2.5 Controles/ajustes 3.2.6 Textos de sugerencia 3.2.7 Lnea de estado 3.2.8 Extensiones de los archivos 3.3 Ayuda en lnea 3.3.1 Forma de manejar la ayuda 3.3.2 Navegacin por la ayuda 3.3.3 Bsquedas en la Ayuda 3.3.4 Bsqueda de palabras clave dentro de un tema de ayuda 3.3.5 Temas de ayuda favoritos 3.3.6 Impresin de la ayuda 3.4 Advanced Reads 3.4.1 Cmo leer manualmente las muestras 3.5 Concentration (iv)

3-5 3-5 3-6 3-6 3-7 3-7 3-8 3-8 3-8 3-9 3-9 3-10 3-10 3-11 3-11 3-12 3-14 3-14 3-14 3-16 3-16 3-16 3-18 3-19 3-20 3-20 3-22 3-22 3-27

Cary WinUV

3.5.1 Cmo realizar una calibracin y medir concentraciones de forma manual 3.6 Dissolution 3.6.1 Cmo utilizar la aplicacin Dissolution (con el Cary 100/300) 3.6.2 Cmo utilizar la aplicacin Dissolution (con el Cary 50) 3.7 Enzyme Kinetics

3-27 3-33 3-34 3-42 3-49

3.7.1 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100500) 3-50 3.7.2 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada (con el Cary 50) 3.8 Fabric Protection 3.8.1 Cmo realizar un barrido utilizando el Cary 100/300/400/500 (normas australianas/ neozelandesas) 3.9 Kinetics 3-58 3-64

3-64 3-65

3.9.1 Cmo realizar un anlisis de velocidad nica, a mltiples longitudes de onda, con una nica cubeta, utilizando la aplicacin Kinetics (con el Cary 100500) 3-65 3.9.2 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando la aplicacin Kinetics y el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100500) 3-71 3.9.3 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando la aplicacin Kinetics (con el Cary 50) 3-78 3.10 RNA/DNA 3.10.1 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100-500) 3.10.2 Cmo realizar un anlisis utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 50) 3.11 Scan 3-96 3.11.1 Cmo realizar un barrido con correccin de lnea base (con el Cary 100500) 3-97 3-84

3-84 3-91

(v)

Cary WinUV

3.11.2 Cmo realizar un barrido en el modo seal/ruido (con el Cary 100-500)

3-103

3.11.3 Cmo realizar un barrido en el modo independiente (con el Cary 500) 3-109 3.11.4 Cmo realizar un barrido con correccin de lnea base (con el Cary 50) 3.12 Scanning Kinetics 3-115 3-120

3.12.1 Cmo obtener datos utilizando el soporte para mltiples cubetas con control de temperatura (con el Cary 100500) 3-120 3.12.2 Cmo obtener datos (con el Cary 50) 3.13 Simple Reads 3.13.1 Cmo realizar una medicin a una longitud de onda nica 3.14 Sunglasses 3.14.1 Cmo realizar un barrido 3.15 Thermal 3.15.1 Cmo realizar un anlisis y determinar Tm utilizando clculos de derivadas 3.15.2 Cmo realizar un anlisis y determinar Tm utilizando clculos de hipercromicidad 4. 3-128 3-134 3-134 3-135 3-135 3-137 3-137 3-145

Solucin de problemas.............................................................. 4-1 4-2 4-2 4-3 4-3 4-4 4-4

4.1 Instrumento fuera de lnea 4.2 Botn de conexin en lugar del de inicio 4.3 No hay suficiente memoria 4.4 Visualizacin deficiente de vdeos y fotografas 4.5 En el registro de GLP no aparecen algunos cambios de privilegios 4.6 El encabezado y pie de pgina de los informes no se actualizan

(vi)

Cary WinUV

1.

Introduccin

Los instrumentos Cary 50/100/300/400/500 funcionan con el software Cary WinUV de Varian, de fcil utilizacin. Dependiendo del sistema que haya adquirido, el software consistir en algunas o en la totalidad de las aplicaciones siguientes: ADL Shell Advanced Reads Align Concentration Dissolution Una plantilla predefinida para la escritura de programas en ADL. Utilizada para la obtencin de lecturas de absorbancia con mltiples muestras. Utilizada para la alineacin de diferentes lmparas y accesorios en el instrumento. Utilizada para anlisis cuantitativos. Utilizada para la realizacin de mediciones de disolucin de tabletas (slo con el Cary 50/100/300). Utilizada para la determinacin de diferentes parmetros de actividad enzimtica. Utilizada para la comprobacin de la transmisin de la radiacin solar a travs de telas secas no estiradas. Utilizada para limitar el acceso de los usuarios, protegiendo mediante contraseas el acceso a cada aplicacin. Utilizada para la realizacin de determinaciones cinticas. Utilizada para la obtencin de lecturas de absorbancia de cidos nucleicos. Utilizada para procesar y ver conjuntos de datos.

Enzyme Kinetics Fabric Protection

GLP Administration

Kinetics RNA/DNA Scan

1-1

Cary WinUV

Scanning Kinetics

Utilizada para la realizacin de determinaciones cinticas dentro de un intervalo de longitudes de onda. Utilizada para la obtencin de lecturas de absorbancia con una longitud de onda nica. Utilizada para la determinacin de la transmisin de la radiacin solar UV a travs de gafas de sol y filtros solares. Utilizada para la introduccin de informacin sobre el sistema, tal como los detalles de la compaa y el instrumento. Utilizada para la realizacin de anlisis trmicos de ADN (slo con el Cary 100/300/400/500). Utilizada para la verificacin del rendimiento del sistema.

Simple Reads Sunglasses

System Information

Thermal

Validate

Las citadas aplicaciones se comentan de forma ms detallada en el captulo 3.




El software Cary WinUV funciona con los sistemas operativos Windows 95, Windows 98 o Windows NT de Microsoft.

1.1

Documentacin del sistema Cary


Para ayudarle a configurar y utilizar su sistema Cary, deben haberle proporcionado la siguiente documentacin:


Manual de hardware de Cary, con informacin sobre riesgos y normas prcticas de seguridad, instrucciones para la instalacin y el mantenimiento de diferentes componentes del hardware e informacin para la solucin de problemas relacionados con el hardware. El presente manual de software, con instrucciones para la instalacin del software Cary WinUV, una visin de conjunto del software e informacin para la solucin de problemas relacionados con el software.

1-2

Cary WinUV


Ayuda en lnea (suministrada con el software Cary WinUV), con ayuda sensible al contexto, instrucciones detalladas paso a paso para los anlisis realizados de forma ms frecuente e instrucciones para la utilizacin de los diferentes accesorios. Para los detalles relativos a la utilizacin de la Ayuda en lnea, vase la seccin 3.3.

Convenciones En el presente manual se utilizan las siguientes convenciones:




Las cursivas se utilizan para hacer referencia a mens, opciones de mens y nombres de campos (por ejemplo Seleccionar Copy (copiar) en el men Edit (edicin)). Los comandos de teclado y de ratn se especifican en negritas (por ejemplo, pulsar la tecla F1). Las comillas (" ") se utilizan para hacer referencia a botones que aparecen en las pantallas de software (por ejemplo, seleccionar "OK" (aceptar)). Un texto TODO EN MAYSCULAS hace referencia a un texto que usted deber introducir por medio del teclado (por ejemplo, teclee SETUP cuando el ordenador solicite una respuesta).

 

1-3

Cary WinUV

Esta pgina se ha dejado en blanco de forma intencionada

1-4

Cary WinUV

2.

Instalacin del software

En el presente captulo se da por supuesto que ya ha configurado usted el instrumento y el PC, ha instalado la tarjeta de interfaz del instrumento en el PC (si va a utilizar usted un PC propio) y ha conectado el instrumento y el PC a la fuente de suministro elctrico, segn lo indicado en la documentacin apropiada correspondiente al hardware de Cary.

2.1 2.1.1

Requisitos del PC Requisitos mnimos del ordenador


La configuracin mnima representa el mnimo absoluto que necesitar usted para poder ejecutar el software. La citada configuracin mnima del PC es posible que ya no se fabrique, pero quizs desee usted utilizar un PC propio, comprado hace ya tiempo. La configuracin recomendada es la que deber tener usted en cuenta si opta por comprar un PC nuevo. Mnima Compatible con IBM Procesador Intel Pentium 16 MB de RAM 150 MB de espacio libre en el disco duro Tarjeta de vdeo con una resolucin de 800 x 600, en modo de color de alta densidad (16 bits) Pantalla Super VGA Unidad de CDROM 4 x Tarjeta de sonido de 16 bits Teclado Windows de 101 teclas Recomendada Compatible con IBM Procesador Intel Pentium II 64 MB de RAM 500 MB de espacio libre en el disco duro Tarjeta de vdeo con una resolucin de 800 x 600, en modo de color de alta densidad (16 bits) Pantalla Super VGA Unidad de CDROM 10 x Tarjeta de sonido de 16 bits Teclado Windows de 101 teclas

2-1

Cary WinUV

Ratn Microsoft o compatible Una ranura de expansin PCI bus libre Windows 95, Windows 98 o Windows NT de Microsoft (incluido el paquete de servicio 4 o posterior) Internet Explorer*4 de Microsoft o posterior, si se va a utilizar Windows 95 o NT Slo Cary 50 1 conector libre en la fuente de alimentacin del PC Fuente de alimentacin a 220 vatios. 1 ranura libre para el conector del cable del accesorio

Ratn Microsoft o compatible Una ranura de expansin PCI bus libre Windows 95, Windows 98 o Windows NT de Microsoft (incluido el paquete de servicio 4 o posterior) Internet Explorer*4 de Microsoft o posterior, si se va a utilizar Windows 95 o NT Slo Cary 50 1 conector libre en la fuente de alimentacin del PC Fuente de alimentacin a 220 vatios. 1 ranura libre para el conector del cable del accesorio

*El software Cary WinUV utiliza la funcionalidad proporcionada por el Internet Explorer 4.0 (IE4) de Microsoft. No obstante, no es indispensable utilizar el IE4 como explorador de la web. Si las normas de su compaa le impiden la instalacin del IE4, podr usted utilizar otro explorador, aunque perdiendo algo de funcionalidad. (Vase la seccin 2.5.).

2.1.2 Por qu necesito el Internet Explorer 4?


Para poder utilizar todas las caractersticas de la Ayuda en lnea, es necesario tener instalado en el PC el programa Internet Explorer 4.0 de Microsoft. Entre las caractersticas exclusivas de la citada ayuda figuran:
    

una jerarqua expansible de todos los contenidos de ayuda; un sistema de bsqueda que permite mostrar listas de temas en los que aparecen palabras clave especficas; la posibilidad de encontrar palabras dentro de un tema mostrado en pantalla; una ventana editable de 'pginas favoritas', para listar las pginas de ayuda que se consultan con cierta frecuencia; vdeos de formacin para demostrar de forma visual determinados procedimientos seleccionados.

2-2

Cary WinUV

No obstante, no es indispensable estar conectado a Internet, ni utilizar el IE4 como explorador de la web. El software para instrumentos Cary WinUV tambin utiliza parte de la funcionalidad proporcionada por el IE4. Puede descargar una copia gratuita del IE4 desde el sitio web de Microsoft (www.microsoft.com). Si lo hace, asegrese de que descarga la versin correspondiente al lenguaje apropiado para su versin de Windows. Si no est conectado a Internet, puede adquirir el IE4 en CDROM en su proveedor local de software. Para ms informacin sobre la utilizacin de las caractersticas especiales de la Ayuda en lnea, vase la seccin 3.3.

2.2

Actualizaciones de la versin 1
Si ha recibido un paquete de actualizacin, siga las instrucciones proporcionadas en la seccin 2.3 para instalar el software. Tenga en cuenta los siguientes puntos:


Instale la versin 2 del software WinUV en el mismo directorio en que se encuentre instalada la versin 1, para reemplazar la versin 1 del software por la 2. Sus archivos de datos no sufrirn ninguna modificacin y podrn seguir siendo utilizados con la versin 2. Los paquetes de actualizacin incluyen 3 CD de ayuda, con vdeos. Seleccione el apropiado para su instrumento. Puede desechar los otros dos, si as lo desea.

2-3

Cary WinUV

2.3

Instalacin del software


Utilice la siguiente lista de comprobacin para instalar la versin 2 del software Cary WinUV. Hay instalado un sistema operativo Windows y todos los dispositivos, por ej., la tarjeta de sonido, el CDROM, etc., funcionan. Se ha instalado Internet Explorer 4 o alguna versin posterior. Ha configurado usted el rea de la pantalla de su PC con una resolucin mnima de 800 x 600 y ha activado la paleta de color de alta densidad, como mnimo. Ha instalado la tarjeta de interfaz del instrumento en el PC y conectado el PC al instrumento Cary Se ha registrado como Administrador si va a utilizar Windows NT. Ha instalado el software Cary y la ayuda (2 CD). Ha reiniciado el PC. Consulte la documentacin suministrada con Windows.

Consulte la documentacin suministrada con Internet Explorer. Vase la seccin 2.3.3

Consulte el manual de hardware suministrado con el instrumento. Consulte la documentacin suministrada con Windows NT. Vase 2.3.1 Consulte su documentacin de Windows.

Nota

El software Cary WinUV leer los archivos de datos Cary OS/2 y DOS, si tiene usted alguno.

2-4

Cary WinUV

2.3.1


Instalacin del software Cary WinUV:


1. Nota Encienda su PC.

Si est utilizando Windows NT, regstrese como Administrador o como usuario con privilegios de Administrador. 2. 3. Inserte el CD Cary WinUV CD en la unidad de CD-ROM. Seleccione el botn "Install Cary Software" (instalar el software Cary) en la ventana que aparezca a continuacin. Siga las instrucciones que vayan apareciendo en pantalla. Durante la instalacin, se le pedir que especifique, entre otras cosas, la unidad en que desea que se instale el software.

4.

Nota

Si est instalando el paquete Solascreen, se le preguntar si desea copiar los vdeos correspondientes a los asistentes de las aplicaciones Fabric y Sunglasses en el disco duro. Si desea usted utilizar cualquiera de los citados programas del modo ms sencillo la mayor parte del tiempo, seleccione 'Yes' (s). Tambin se le preguntar qu tipo de interfaz y que normas desea instalar para las aplicaciones Fabric y Sunglasses. Si no sabe lo que debe seleccionar en este punto, elija la interfaz avanzada ("Advanced Interface") y todas las normas ("All Standards"). Podr modificar dicha seleccin posteriormente, consultando la ayuda en lnea (busque fpchoice.exe, si est utilizando la aplicacin Fabric Protection, o sgchoice.exe, si est utilizando la aplicacin Sunglasses). Cuando termine la instalacin, en el escritorio de Windows aparecer un grupo de programas Cary, con una serie de iconos. La instalacin crea adems una carpeta Cary WinUV en el men de inicio/Programas.

Nota

Si est utilizando Windows NT y no dispone de los privilegios de un Administrador, la instalacin fallar. Para poder finalizar la instalacin con xito, vuelva a registrarse como Administrador e inicie el proceso de instalacin de nuevo. 5. Saque el CD Cary WinUV de la unidad de CD-ROM e introduzca el CD Cary Help and Videos (ayuda y vdeos de Cary), cuando el ordenador lo solicite.

2-5

Cary WinUV

Nota

Necesitar introducir el CD Cary Help and Videos en la unidad de CDROM cada vez que desee ver los vdeos incluidos en la ayuda. 6. Siga las instrucciones que vayan apareciendo en pantalla. El ordenador le solicitar que introduzca el CDROM Patches (correcciones) despus de la instalacin de la Ayuda. Necesitar reiniciar Windows una vez finalizada la instalacin. Puede dejar el CD Help & Videos en la unidad, si as lo desea.

Nota

Los "Patches" (correcciones) son archivos diseados para solucionar problemas detectados en el software. Cuando introduzca el CDROM Patches, ste se iniciar de forma automtica y podr usted seguir las instrucciones que irn apareciendo en pantalla para instalar las correcciones. Si es la primera vez que se ejecuta la aplicacin, cuando Windows se reinicie aparecer maximizada en pantalla la aplicacin de System Information, solicitndole que introduzca la informacin, del tipo de los datos de su compaa, que usted desea que aparezca en los informes, y hacindole sugerencias sobre las propiedades del texto. En caso contrario, la citada aplicacin aparecer minimizada en la barra de tareas de Windows.

Nota

2.3.2

Noticias de ltima hora


Antes de seguir adelante, lea los documentos de "noticias de ltima hora" ("Late breaking news") suministrados con el software. Los citados documentos contienen la informacin ms reciente y notas importantes.

2-6

Cary WinUV

2.3.3 Cambio de la resolucin del monitor


Para una visualizacin ptima, la resolucin de su monitor debe establecerse en 800 x 600 pxeles (o en un valor ms alto) y la paleta de color, en color de alta densidad (16 bits) (o ms). Para establecer la resolucin del monitor: 1. 2. Haga clic en el botn de "Inicio" de Windows. Lleve el cursor hasta Configuracin y seleccione Panel de Control en el men en cascada. Haga doble clic en el icono de la Pantalla. En la ventana de dilogo de Propiedades de Pantalla, seleccione la ventana de Configuracin. En la seccin del rea de la pantalla, arrastre la barra deslizante hasta la posicin correspondiente a "800 x 600 pxeles". En la seccin de Colores seleccione color de alta densidad (16 bits). Seleccione "Aceptar". Cuando el ordenador le informe de que la configuracin va a ser ajustada, seleccione "Aceptar" de nuevo. Cuando le pregunte si desea conservar la nueva configuracin, seleccione "S". A continuacin puede salir del Panel de Control.

3. 4.

5.

6.

7.

8.

2.4

Inicio del software Cary


Para iniciar el software Cary WinUV: 1. 2. Haga clic en el botn de "Inicio" de Windows. Lleve el cursor hasta Programas y seleccione Cary WinUV en el men en cascada. Seleccione la aplicacin deseada en el segundo men en cascada.

3.

Tras la pantalla inicial de Cary, se abrir la aplicacin seleccionada (para ms informacin sobre las aplicaciones disponibles, vase el captulo 3).

2-7

Cary WinUV

2.5

Utilizacin de la Ayuda en lnea


El software Cary dispone de un completo sistema de ayuda en lnea. La citada ayuda incluye explicaciones de cada aplicacin, incluidas una serie de instrucciones detalladas paso a paso sobre la forma de utilizar el software. La ayuda incluye adems una serie de secciones de 'Tips and Tricks' (consejos y trucos), 'Troubleshooting' (solucin de problemas) y 'Contacts' (contactos) para el caso de que se le plantee alguna dificultad utilizando el software. Puede acceder a la ayuda de diferentes maneras. Usted podr:


Seleccionar el primer elemento del men Help (ayuda) de una aplicacin, para obtener informacin sobre la utilizacin de esa aplicacin en concreto. Seleccionar temas de ayuda (Help Topics) en el men de ayuda de una aplicacin para ir a la pgina de inicio (Home Page) de la ayuda. Pulsar la tecla F1 para obtener informacin sobre un dilogo. Seleccionar Inicio, Programas, Cary WinUV, Cary Help (ayuda de Cary) para ir a la pgina de inicio de la ayuda en lnea.

 

2.5.1 Explorer

Utilizacin de Netscape Navigator en lugar de Internet


Si, por alguna razn, no puede cargar Internet Explorer, podr utilizar Netscape Navigator como solucin alternativa. La limitacin que plantea dicha solucin radica en el hecho de que Netscape no permite utilizar las caractersticas exclusivas de la ayuda en lnea descritas en la seccin 2.1.2. En lugar de ello, slo podr ver los archivos HTML incluidos en el CD Cary Help and Videos, con unas capacidades de navegacin muy escasas. Si instala Internet Explorer para poder utilizar la Ayuda, pero le gustara utilizar Netscape como explorador por defecto, seleccione la opcin Default Browser On (explorador por defecto activado), cuando el ordenador lo solicite. En las versiones ms recientes de Communicator, no se le solicitar que seleccione Netscape como explorador por defecto; deber usted rehabilitar la comprobacin correspondiente. Para hacerlo as, deber consultar en el directorio: C:\Archivos de programa\Netscape\Usuarios\XXX el archivo prefs.js.

2-8

Cary WinUV

La configuracin apropiada es: user_pref("browser.wfe.ignore_def_check", VALUE); Los valores (VALUE) vlidos son: True (verdadero) (no comprobar nunca) y False (falso) (comprobar siempre). La configuracin para determinar si Internet Explorer debe comprobar si debe ser el explorador establecido por defecto se encuentra en el Registro: \HKEY_CURRENT_USER\SOFTWARE\Microsoft\Internet Explorer\Main\Check Associations Los valores vlidos son "NO" (no comprobar nunca) y "Yes" (s) (comprobar siempre).

2-9

Cary WinUV

Esta pgina se ha dejado en blanco de forma intencionada

2-10

Cary WinUV

3.

Visin de conjunto del software

El presente captulo incluye una breve introduccin al software Cary WinUV, para ayudarle a familiarizarse con su utilizacin. Para una informacin ms detallada, consulte la ayuda en lnea (para las instrucciones sobre la forma de utilizar la ayuda, vase la seccin 3.3).

3.1

Aplicaciones Cary
El software Cary WinUV consta de varias aplicaciones diferentes, dependiendo del paquete Cary que usted haya adquirido: Paquete Scan Aplicaciones ADL Shell, Align, Simple Reads, GLP Administration, Validate, System Information, Scan con Maths y Advanced Reads ADL Shell, Align, Simple Reads, GLP Administration, Validate, System Information, Scan con Maths ms Concentration y Advanced Reads ADL Shell, Align, Simple Reads, GLP Administration, Validate, System Information, Scan con Maths, Concentration, Thermal*, Kinetics, Scanning Kinetics, Enzyme Kinetics, RNA/DNA y Advanced Reads ADL Shell, Align, Simple Reads, GLP Administration, Validate, System Information, Scan con Maths, Concentration ms Dissolution y Advanced Reads ADL Shell, Align, Simple Reads, GLP Administration, Validate, System Information, Scan, Maths, Advanced Reads, Fabric Protection y Sunglasses

Conc

Bio

Tablet#

Solascreen#

No disponible para el Cary 400 500

* No disponible para el Cary 50

3-1

Cary WinUV

3.1.1

ADL Shell
El Lenguaje para Desarrollo de Aplicaciones (ADL, del ingls Applications Development Language) es un lenguaje incorporado de espectroscopa que se suministra con el software WinUV. La aplicacin ADL Shell pone a su disposicin una plantilla predefinida para la escritura de programas en ADL. En lugar de tener que recurrir a escribir los cdigos de funciones bsicas, tales como las de trazado de grficos o archivado, ADL Shell dispone de una serie de tales comandos ya definidos. En otras palabras, no necesitar usted disear su propia interfaz, podr limitarse a utilizar ADL Shell para utilizar la funcionalidad bsica del sistema, trabajando a partir de ese punto. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin ADL Shell, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.2

Advanced Reads
La aplicacin Advanced Reads puede utilizarse para leer mltiples muestras en una nica sesin. Podr usted utilizar varios accesorios para tomar mltiples lecturas de alcuotas y soluciones de muestras, en los modos de absorbancia, porcentaje de transmitancia, Abs*F o porcentaje de reflectancia, y obtener la media. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Advanced Reads, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.3

Align
La aplicacin Align se utiliza para alinear la(s) lmpara(s) del instrumento y varios accesorios pticos, tales como el acoplador de fibra ptica. Le permitir ajustar parmetros del instrumento tales como el modo del haz y la longitud de onda. Le permitir adems realizar un seguimiento de las horas de funcionamiento por tipo de lmpara. Al iniciarse la aplicacin Align aparece en pantalla la ventana de lmparas (Lamps) de la ventana de alineacin (Alignment), con una barra de la seal actual (Current Signal), que representa la energa de la(s) lmpara(s). Para modificar los parmetros del instrumento, seleccione la ventana de Cary. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Align, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3-2

Cary WinUV

3.1.4

Concentration
La aplicacin Concentration se utiliza para calibrar el sistema para la realizacin de anlisis cuantitativos. Podr usted elegir entre varios tipos de ajuste para su calibracin: lineal, lineal directo y cuadrtico. Basndose en el tipo de ajuste seleccionado, la aplicacin Concentration calcular los coeficientes de la ecuacin de ajuste y el correspondiente coeficiente de correlacin. De forma alternativa, podr usted definir su propia ecuacin para la calibracin. Al iniciarse la aplicacin aparece en pantalla la ventana de concentracin (Concentration). Para ajustar los parmetros del instrumento, definir los estndares que vayan a utilizarse y configurar los accesorios del muestreador, seleccione la opcin Setup (configuracin) en el men. Aparecer entonces en pantalla la ventana de configuracin. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Concentration, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.5

Dissolution (no disponible con el Cary 400/500)


La aplicacin Dissolution se utiliza para supervisar la disolucin de tabletas, utilizando hasta 2 baos de disolucin. La aplicacin le permitir obtener datos durante un perodo de hasta 10.000 minutos (8 das), a intervalos de tiempo definidos. Los datos pueden mostrarse en forma de absorbancia, porcentaje disuelto frente a tiempo o miligramos disueltos frente a tiempo. A continuacin, podr calcular el tiempo necesario para alcanzar una serie de valores designados de porcentaje disuelto y/o calcular el porcentaje de disolucin de las tabletas a determinados tiempos. Al iniciarse la aplicacin, aparece en pantalla la ventana de disolucin (Dissolution). Para ajustar el instrumento y los parmetros del bao, los estndares y los lmites de prueba, haga clic en el botn de configuracin (Setup) o seleccione la opcin Setup en el men. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Dissolution, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3-3

Cary WinUV

3.1.6

Enzyme Kinetics
La aplicacin Enzyme Kinetics utiliza los principios de MichaelisMenten para calcular la velocidad mxima (Vmax) y la concentracin de sustrato que permite obtener la mitad de la velocidad mxima (Km) de las reacciones catalizadas enzimticamente. Para obtener unos valores suficientemente exactos de Vmax y Km, deber usted ejecutar la aplicacin Enzyme Kinetics numerosas veces, a diferentes concentraciones de sustrato o de inhibidor, con objeto de crear una serie de curvas de absorbancia frente a tiempo. El software determinar la velocidad inicial (V0) de cada curva y, a continuacin, podr usted introducir las concentraciones de sustrato y de inhibidor para cada cubeta. El software utiliza la V0 y los valores de [S] y [I] para trazar unas curvas de absorbancia frente a tiempo con una [S] o una [I] comunes. A partir de dichos grficos, el software determina los valores de Vmax y Km. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Enzyme Kinetics, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.7

Fabric Protection
El sistema Fabric Protection Measurement de Cary est diseado para comprobar la transmisin de la radiacin solar entre los 280 y los 400 nm (radiacin UV) a travs de telas secas no estiradas. Los resultados obtenidos dan una indicacin del nivel de proteccin proporcionado por las telas cuando se utilizan en la inmediata proximidad de la piel. Las telas que no se utilizan en la inmediata proximidad de la piel pueden proporcionar una proteccin menor contra la radiacin UV de la indicada por la prueba, como consecuencia de la retrodispersin de la radiacin UV. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Fabric Protection, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3-4

Cary WinUV

3.1.8

GLP Administration
La aplicacin GLP Administration se utiliza para proteger al sistema contra usos no autorizados, permitiendo al administrador del sistema la activacin o desactivacin de privilegios especficos para cada aplicacin. Si se utiliza dicha aplicacin, sus usuarios debern registrarse y disponer de un nombre de usuario y una contrasea vlidos para poder acceder a los diferentes privilegios. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin GLP Administration, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.9

Kinetics
La aplicacin Kinetics se utiliza para obtener datos de absorbancia frente a tiempo, con objeto de permitirle a usted determinar la velocidad de la reaccin. La aplicacin Kinetics permite: u El clculo de las velocidades de reaccin de orden cero, primer orden y segundo orden, a partir de los datos de absorbancia frente a tiempo. La introduccin de factores de actividad para mltiples cubetas. La superposicin de la lnea de ajuste ptimo a los datos no elaborados. El clculo automtico o manual del ajuste de Marquardt de primer y segundo orden.

u u

Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Kinetics, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3-5

Cary WinUV

3.1.10

RNA/DNA
La aplicacin RNA-DNA se utiliza para calcular los siguientes parmetros, utilizados en la determinacin de la cantidad, el tipo y la pureza de las muestras de cidos nucleicos: u u u u u u La absorbancia de las muestras a longitudes de onda seleccionadas. Las relaciones Abs(260)/Abs(280) con o sin correccin de fondo a 320 nm. Las relaciones de absorbancia a las longitudes de onda designadas por usted mismo, con o sin correccin de fondo. Los valores medios de las relaciones para muestras replicadas. Las concentraciones de protenas y cidos nucleicos, utilizando los coeficientes de Warbug y Christian. Y la A(260) * F.

Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin RNA/DNA, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.11

Scan
La aplicacin Scan le permite configurar y ejecutar barridos de longitudes de onda, visualizando los espectros realizados en la ventana de barrido (Scan). Para configurar el instrumento y los accesorios, el modo de medicin, los ajustes de los informes y las opciones de almacenamiento, haga clic en el botn de configuracin ("Setup) o seleccione la opcin de Setup en el men. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Scan, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3-6

Cary WinUV

3.1.12

Scanning Kinetics
La aplicacin Scanning Kinetics le permite realizar barridos cclicos a lo largo de un intervalo de longitudes de onda o nmeros de ondas. A partir de los datos resultantes de absorbancia frente a longitud de onda, puede obtenerse una curva (cintica) de absorbancia frente a tiempo para cualquier longitud de onda del intervalo. Las curvas cinticas pueden utilizarse a continuacin para calcular las velocidades de reaccin de orden cero, primer y segundo orden. Puede elegirse entre un clculo automtico o manual del ajuste de Marquardt de primer o segundo orden. La presente aplicacin le permite adems corregir las muestras en funcin de una lnea base durante el barrido. Podr usted elegir una lnea base de tipo 100%T, o podr elegir entre otras opciones de lnea base, tales como una correccin de lnea base cero, que aplicar tanto una correccin de lnea base 100%T como 0%T a sus barridos de muestras. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Scanning Kinetics, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.13

Simple Reads
La aplicacin Simple Reads se utiliza para realizar lecturas rpidas de absorbancia en muestras, a longitudes de onda nicas. Para establecer la configuracin de la lectura de la absorbancia, haga clic en el botn de configuracin (Setup) o seleccione la opcin Configuracin en la lnea de mens. A continuacin, todo lo que tendr que hacer es seleccionar el botn Zero (cero) para poner a cero el instrumento, y seleccionar a continuacin Read (leer) para realizar una lectura. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Simple Reads, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3-7

Cary WinUV

3.1.14

Sunglasses
El sistema Solascreen de Cary est diseado para probar y determinar la penetracin de la radiacin solar ultravioleta, en el intervalo de los 280 a los 400 nm (radiacin UV), a travs de gafas de sol y filtros solares. Sirve para probar las lentes de uso general no graduadas, que no estn diseadas para atenuar la radiacin solar, conforme a lo dispuesto en las normas australianas o neozelandesas, britnicas o estadounidenses. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Sunglasses, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.15

System Information
La aplicacin System Information le permitir introducir informacin sobre su compaa y el instrumento, y especificar los encabezados, pies de pgina y archivos de iconos o mapas de bits que desee utilizar en los informes (por ejemplo, el logotipo de su compaa). La aplicacin le permitir especificar la configuracin por defecto para los textos de sugerencias (Hint Texts), tales como la pausa para la aparicin de las sugerencias (Hint Pause) (el tiempo que debe transcurrir antes de que aparezca la sugerencia correspondiente cuando el cursor se sita sobre un control) y la pausa para la ocultacin de las sugerencias (Hint Hide Pause) (el tiempo que deben permanecer visibles las sugerencias, antes de desaparecer, en el caso de que el cursor no se mueva del control). Dicha configuracin ser utilizada por las otras aplicaciones de Cary WinUV. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin System Information, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.1.16

Thermal (no disponible con el Cary 50)


La aplicacin Thermal se utiliza para realizar anlisis trmicos de ADN, permitindole calcular el valor de Tm, utilizando para ello los diferentes accesorios termoelctricos de Cary. Una vez obtenidos los datos, usted podr elegir entre calcular el valor de Tm por el mtodo de las derivadas o por el de la hipercromicidad. Para una descripcin de la configuracin de la aplicacin Thermal, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3-8

Cary WinUV

3.1.17

Validate
La aplicacin Validate le permitir llevar a cabo una serie de pruebas de rendimiento para verificar si el sistema est funcionando de acuerdo con las especificaciones. Para ms informacin, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3). Varian pone tambin a su disposicin un paquete opcional de la aplicacin Validation, que proporciona informacin detallada sobre las especificaciones funcionales y el proceso de desarrollo del sistema Cary. El paquete contiene adems informacin DQ/IQ/OQ detallada para ayudarle en sus actividades de validacin iniciales y en curso.

3.2

Utilizacin del software Cary WinUV


En la presente seccin se describen los diferentes componentes del software y la forma de utilizarlos. La pantalla tpica del citado software es de la forma siguiente:

lnea de mens botn de comando

barra de herramientas

lnea de estado

3-9

Cary WinUV

3.2.1

Lnea de mens
Cada aplicacin contiene una lnea de mens directamente debajo de la barra del ttulo de la ventana. Dicha lnea contiene una serie de comandos, como, por ej., File (archivo), Edit (edicin), View (ver) y Help (ayuda). A los citados comandos puede accederse haciendo clic sobre el elemento deseado con el ratn o pulsando la tecla Alt y la letra activa correspondiente (que aparece subrayada en el nombre del men) (por ej., Alt+E para acceder al men de edicin (Edit)). De dicha forma se desplegar una lista de opciones, a las que podr accederse de la misma forma. Para una descripcin de los diferentes elementos y opciones de los mens, vase la ayuda en lnea.

Nota

Cuando algn elemento u opcin de un men aparezca de color gris, ello querr decir que no se encuentran disponibles en ese momento para su seleccin.

3.2.2

Barra de herramientas
En algunas aplicaciones, tales como Concentration y Scan, aparece una barra de herramientas situada directamente debajo de la lnea de mens, con una serie de botones que proporcionan atajos para el acceso a diferentes funciones del software. Para seleccionar un botn de la barra de herramientas, haga clic en l con el ratn.

Nota

Es posible que la barra de herramientas no aparezca en pantalla. Para hacerla aparecer, seleccione Toolbar (barra de herramientas) en el men View (ver). A la inversa, si lo que desea es maximizar el rea disponible en pantalla, puede ocultar la barra de herramientas seleccionando Toolbar en el men View. (Las opciones de la barra de herramientas se encuentran tambin disponibles en los mens.) Para averiguar qu puede hacerse con un botn determinado, site el cursor sobre l durante un momento. Tras un breve perodo de espera, aparecer una sugerencia en la que se indica para qu se utiliza el botn.

3-10

Cary WinUV

3.2.3

Botones de comando
Los botones de comando se utilizan para ejecutar la accin especificada correspondiente o para acceder a un dilogo relacionado con tal accin. En algunas aplicaciones, tales como Concentration y Scan, aparece un grupo de botones en el lado izquierdo de la ventana de la aplicacin. Dichos botones proporcionan atajos a varias funciones, tales como la configuracin del instrumento y la impresin.

Nota

Es posible que los botones de comando no aparezcan en pantalla. Para que aparezcan, seleccione Buttons (botones) en el men View (ver). A la inversa, si lo que desea es maximizar el rea disponible en pantalla, puede ocultar los botones seleccionando Buttons en el men View. (Las opciones de los botones de comando tambin se encuentran disponibles en los mens). Para seleccionar un botn de comando, haga clic en l con el ratn o pulse la tecla del Tabulador para activar el botn y pulse la tecla Intro.

3.2.4

Ventanas de dilogo
En algunos casos, al seleccionar una opcin de un men o al pulsar un botn de comando se activa una ventana de dilogo. Se trata de una ventana que contiene una serie de campos de entrada diferentes, relacionados con la accin que se desea ejecutar. Puede usted desplazarse de un campo a otro dentro de la ventana de dilogo haciendo clic sobre cada elemento con el ratn o pulsando la tecla del Tabulador y las teclas de las Flechas para mover el cursor de un campo a otro. Tras introducir o cambiar cualquier valor en una ventana de dilogo, pulse OK (aceptar) para cerrar el dilogo y guardar los cambios introducidos.

3-11

Cary WinUV

3.2.5

Controles/ajustes
Existe una serie de tipos de campos diferentes que se utilizan en el software WinUV. En la presente seccin se describen los campos que se utilizan y la forma de introducir valores en dichos campos.

Nota

Los campos que no se encuentran disponibles para su seleccin en un momento determinado se dice que estn inhabilitados y aparecen de color gris. Campos de introduccin de datos

Los campos de introduccin de datos aceptan entradas numricas o de texto. Para introducir un dato en un campo, actvelo, teclee el valor que desee y active cualquier otro punto de la pantalla para aceptar el dato recin introducido. El valor incluido en los campos numricos puede ser modificado pulsando las teclas de flecha hacia arriba o flecha hacia abajo que aparecen en pantalla a la derecha del campo, para incrementar o disminuir el valor en cuestin en una cantidad predefinida. Botones radiales

Los botones radiales son pequeos botones redondos que se utilizan para realizar una seleccin entre una serie de elementos mutuamente excluyentes. Puede seleccionar un botn radial con el ratn, haciendo clic sobre l o sobre el texto que aparece a su derecha. De forma alternativa, puede activar la zona correspondiente al grupo de botones y seleccionar a continuacin la opcin deseada utilizando las teclas de las flechas. La seleccin de una opcin desactivar las restantes opciones del grupo, ya que no es posible seleccionar varias opciones a la vez.

3-12

Cary WinUV

Casillas de verificacin

Las casillas de verificacin son pequeos cuadrados que se utilizan para seleccionar o anular la seleccin de una opcin. El elemento correspondiente a cada casilla de verificacin estar seleccionado cuando aparezca una V grfica () en la casilla. Dentro de cada grupo, puede seleccionarse cualquier nmero de casillas. Para seleccionar o anular una seleccin, haga clic simplemente con el ratn en la casilla correspondiente o sobre el texto que aparece junto a ella. De forma alternativa, puede activar el grupo de casillas de verificacin, utilizar las teclas de las flechas para activar la opcin deseada y pulsar la barra espaciadora para seleccionar o anular la seleccin correspondiente. Listas emergentes

Una lista emergente es un campo de seleccin con un icono de una flecha situado a su derecha. Al hacer clic con el ratn en el icono de la flecha o al pulsar la tecla F2 cuando el campo est activado, se visualiza una lista de las opciones disponibles para si seleccin. Para seleccionar un elemento de la lista, haga clic en l una vez o utilice las teclas de las flechas para desplazar la barra de sombreado hasta la opcin deseada y pulse de nuevo la tecla F2 para aceptar la seleccin. Controles en forma de tabla

Los controles en forma de tabla (o controles multicolumna) tienen el aspecto de una tabla u hoja de clculo. Contienen una serie de celdas que actan como campos de introduccin de datos, distinguibles de las restantes celdas por su fondo blanco. Para editar el contenido de una celda, haga doble clic en la celda o active el campo correspondiente y pulse la tecla F2.

3-13

Cary WinUV

3.2.6

Textos de sugerencia
Puede obtener el texto de sugerencia (Hint Text) correspondiente a un control o a un campo determinados colocando el cursor sobre el control o sobre el nombre del campo durante un breve lapso de tiempo. Tras una breve espera, aparecer una sugerencia, indicando para qu se utiliza el control o el campo correspondiente. Si mantiene el cursor sobre un campo de introduccin de datos, aparecer el intervalo de variacin vlido para el dato que debe introducirse en ese campo. Si no aparecen las citadas sugerencias, seleccione Hints (sugerencias) en el men View (ver) para habilitarlas. A la inversa, si la aparicin de textos de sugerencia est activada y desea desactivarla, seleccione Hints en el men View.

Nota

Es posible modificar las propiedades de las sugerencias, tales como el tiempo de espera antes de que aparezcan, en la ventana de sugerencias (Hints) de la aplicacin System Information.

3.2.7

Lnea de estado
En la lnea de estado se muestra el estado en que se encuentra el instrumento en cada momento. Para ms informacin, consulte la ayuda en lnea (vase la seccin 3.3).

3.2.8

Extensiones de los archivos


Los diferentes archivos, tales como los de mtodos, los de informes o los de archivos grficos, se guardan con una extensin de tres letras que indica el tipo de archivo y la aplicacin con la que se ha creado. Se utilizan las siguientes extensiones para los diferentes tipos de archivos: Tipo de archivo Mtodos Datos Informes Plantillas grficas Secuencia Extensin .M** .D** .R** .G** .B**

3-14

Cary WinUV

Y las siguientes extensiones para representar las diferentes aplicaciones: Aplicacin Advanced Reads Concentration Dissolution# Enzyme Kinetics Fabric Protection Kinetics RNA/DNA Scan Scanning Kinetics Simple Reads Sunglasses Thermal Validate
#

Extensin .*AB .*CN .*TD .*EK .*FP .*KN .*DN .*SW .*SK .*SR .*SG .*TM .*VO

No disponible con el Cary 400/500 No disponible con el Cary 50

Por ejemplo, un archivo de mtodo guardado con la aplicacin Concentration tendr la extensin .MCN.

Nota

Para permitirle identificar los diferentes tipos de archivos en el Explorador de Windows, deber usted inhabilitar la opcin de Windows que permite ocultar las extensiones de los nombres de los archivos. Para hacerlo, seleccione Opciones de carpeta en el men Ver del Explorador de Windows y anule la seleccin de la opcin Ocultar extensiones para los tipos de archivos conocidos en la ventana Ver.

3-15

Cary WinUV

3.3

Ayuda en lnea
El software Cary WinUV incluye una completa ayuda en lnea, que puede utilizar como fuente primaria de informacin sobre la forma de utilizar su sistema Cary. La citada ayuda contiene descripciones de las diferentes ventanas, dilogos y campos que forman parte del software, as como una serie de instrucciones detalladas paso a paso para ayudarle a llevar a cabo diferentes tareas.

3.3.1

Forma de manejar la ayuda


Dado que el sistema de ayuda es muy extenso, es aconsejable familiarizarse con el contenido de la ayuda en lnea visualizando la pgina de inicio de Cary. Para hacerlo, seleccione Help Topics (temas de ayuda) en el men Help (ayuda) de cualquier aplicacin. En el explorador de la web aparecer la pgina de inicio (Home Page) de Cary. Para acceder a la ayuda en lnea de una aplicacin determinada, inicie la aplicacin y seleccione la ayuda de la aplicacin (por ej., Scan Help (ayuda de Scan)) en el men de ayuda (Help) (o pulse la tecla F1). Se abrir la ayuda especfica de la aplicacin seleccionada en el explorador de la web.

3.3.2

Navegacin por la ayuda


Podr usted moverse por la ayuda utilizando la ventana de contenido (Contents) (representada a continuacin).

3-16

Cary WinUV

Nota

Para visualizar la ventana de contenido, pulse el botn Show (mostrar) en el men del explorador. La lista de contenido se maneja haciendo clic en los iconos y en el texto asociado a los mismos: u Para expandir o contraer una seccin de la lista de contenido, haga doble clic en el icono con forma de libro' o de carpeta' que aparece junto a la seccin, o haga clic en el signo +/situado junto al icono.

3-17

Cary WinUV

Para ver un tema, haga clic en el texto asociado a ese tema.

Los temas de la ayuda contienen a menudo referencias a otros temas relacionados. Dichas referencias aparecen en forma de textos subrayados con un trazo continuo (de color azul por defecto). Para saltar al tema relacionado, haga clic con el ratn en el texto subrayado. Para volver al tema anterior, haga clic en el botn Back (atrs) de la barra de herramientas del explorador.

3.3.3

Bsquedas en la Ayuda
Pueden realizarse bsquedas rpidas de informacin especfica en el sistema de ayuda utilizando para ello palabras clave. Para buscar informacin sobre un asunto determinado: 1. 2. Seleccione la ventana Search (bsqueda). Teclee la palabra o palabras que desee buscar y pulse el botn List Topics (listar temas) o pulse la tecla Intro del teclado para obtener una lista de todos los documentos que contienen la palabra buscada. El sistema le indicar el nmero de temas encontrados. Podr usted optar por verlos por orden alfabtico, haciendo clic en Title (ttulo), en la parte superior de la lista, o por el orden en que aparezcan en la ayuda, haciendo clic en Rank (categora). Seleccione el tema deseado en la lista haciendo clic en l con el ratn y pulsando a continuacin el botn Display (mostrar). De forma alternativa, puede hacer doble clic en el tema. Todas las veces que aparezca la palabra clave en el texto, sta aparecer destacada. Si no consigue la informacin que necesita, introduzca una palabra ms especfica o palabras adicionales en el campo de palabras clave y vuelva a intentarlo. Puede utilizar las palabras AND (Y), OR (O), NEAR (PARECIDA) y NOT (NO) intercaladas entre sus palabras clave. A dichas palabras puede accederse haciendo clic en el botn , situado a la derecha del campo de palabras clave. Otra forma de delimitar la bsqueda consiste en utilizar las casillas de verificacin situadas en la parte inferior de la pgina de bsqueda. Por ejemplo, si se selecciona Search titles only (buscar slo en los ttulos), slo se listarn los temas de ayuda que contengan la palabra clave en el ttulo.

3.

4.

3-18

Cary WinUV

3.3.4

Bsqueda de palabras clave dentro de un tema de ayuda


Puede saltar a una seccin de inters en la pgina de ayuda buscando una palabra clave. Para encontrar una palabra clave dentro de un tema de ayuda: 1. 2. Haga clic en cualquier punto de la pgina de ayuda. En el teclado, mantenga pulsada la tecla Ctrl y pulse la tecla F. Aparecer el dilogo Find (encontrar). Introduzca la palabra que desea encontrar en el campo Find what: (encontrar qu:). Si lo desea, limite la bsqueda utilizando las casillas de verificacin. Por ej., seleccione Match case (coincidir maysculas y minsculas) para hacer caso omiso de las palabras clave escritas con maysculas o minsculas diferentes de las introducidas. Seleccione la direccin de la bsqueda. Seleccione Up (hacia arriba) para buscar la palabra clave desde la parte inferior de la pgina hacia arriba, o Down (hacia abajo) para iniciar la bsqueda desde la parte superior. Pulse el botn Find Next (buscar siguiente) o pulse la tecla Intro para comenzar la bsqueda. Aparecer destacada la palabra designada, la primera vez que aparezca en el texto. Pulse el botn Find Next o la tecla Intro de forma repetida para ir saltando a las siguientes veces que aparezca la palabra clave en el texto. Cuando ya se haya encontrado la palabra todas las veces que aparece en el texto, aparecer el mensaje Finished searching the document (terminada la bsqueda en el documento).

3.

4.

5.

6.

7.

3-19

Cary WinUV

3.3.5

Temas de ayuda favoritos


Puede confeccionarse una lista de temas de ayuda tiles, utilizando para ello la opcin Favoritos. Si encuentra un tema que es posible que desee consultar ms adelante, siga los siguientes pasos: 1. 2. Seleccione la ventana Favorites (favoritos). El ttulo de la pgina abierta en ese momento aparecer en el campo Current topic: (tema actual:), situado en la parte inferior de la ventana. Pulse el botn Add (aadir) para incluir dicho tema en la lista de favoritos.

3.

Si ms tarde desea ver dicha pgina, podr seleccionar simplemente la ventana de favoritos, seleccionar el tema de inters, haciendo clic en l, y hacer clic a continuacin en el botn Display (mostrar). (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el tema). Si ya no necesita que un tema siga apareciendo en la lista de favoritos, seleccinelo y pulse a continuacin el botn Remove (eliminar).

3.3.6

Impresin de la ayuda
Puede imprimir el tema de ayuda abierto en ese momento en una aplicacin determinada. Para obtener una copia impresa del tema de ayuda al que haya accedido a travs del sistema de bsqueda o de la lista de favoritos: 1. Pulse el botn Print (imprimir) situado en la parte superior de la ventana de ayuda o haga clic en cualquier punto de la ventana de ayuda y, manteniendo pulsada la tecla Ctrl en el teclado, pulse la tecla P. Se abrir el dilogo de impresin. Pulse el botn "OK" (aceptar).

2.

El tema se imprimir en la impresora predeterminada.

3-20

Cary WinUV

Si ha accedido al tema que desea imprimir haciendo clic en l en la lista de contenido, podr tambin acceder al dilogo de impresin haciendo clic en cualquier punto de la ventana de ayuda y, manteniendo pulsada la tecla Ctrl en el teclado, pulsando a continuacin la tecla P. No obstante, si pulsa el botn Print (imprimir) aparecer el dilogo Print Topics (imprimir temas). Dicho dilogo le permitir imprimir el tema seleccionado solamente o el ttulo seleccionado y todos los subtemas. Una vez que haya elegido lo que prefiere, aparecer el dilogo de impresin. Pulse "OK" (aceptar) en dicho dilogo, para imprimir lo que haya seleccionado en la impresora predeterminada. Para cambiar la impresora predeterminada: 1. Seleccione la impresora apropiada en la lista emergente de nombres del grupo de impresoras en el dilogo de impresin. Haga clic en Properties (propiedades) para visualizar el dilogo de propiedades de la impresora. Cambie la configuracin, si es necesario, y haga clic a continuacin en "OK" (aceptar), para salir del dilogo de propiedades. Haga clic en "OK" (aceptar) para cerrar el dilogo de impresin. Para ms informacin sobre la forma de cambiar las opciones de la impresora, mantenga el cursor sobre el rea que le interese, dentro del dilogo de impresin, y pulse la tecla F1. En el presente captulo se proporcionan instrucciones detalladas paso a paso sobre la forma de llevar a cabo diferentes procedimientos con su instrumento Cary y las diferentes aplicaciones de software. Para una informacin ms detallada sobre las aplicaciones de software o sobre su instrumento Cary, consulte la ayuda en lnea (para las instrucciones sobre la forma de utilizar la ayuda, vase la seccin 3.3).

2.

3. 4.

5.

3-21

Cary WinUV

En el presente captulo se incluyen las instrucciones detalladas paso a paso para la realizacin de las mediciones ms comunes con las siguientes aplicaciones de software de Cary: u u u u u u Advanced Reads Concentration Dissolution Enzyme Kinetics Fabric Protection Kinetics u u u u u u RNA/DNA Scan Scanning Kinetics Simple Reads Sunglasses Thermal

3.4 3.4.1

Advanced Reads Cmo leer manualmente las muestras


En la presente seccin se indica cmo leer muestras sin utilizar ningn accesorio. Inicie la aplicacin Advanced Reads 1. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Advanced Reads en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento si es necesario y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Advanced Reads. (De forma alternativa, puede seleccionar el icono de la aplicacin Advanced Reads situado en la carpeta de Cary WinUV situada en el escritorio de Windows).

2.

3. 4.

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Advanced Reads.

3-22

Cary WinUV

Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn Setup (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar el dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el SBW, el modo de las Y, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary a. b. En el campo Wavelength (longitud de onda), introduzca la longitud de onda que desea utilizar. En el campo Ave Time (tiempo de integracin), introduzca el valor requerido. Un buen punto de partida es un valor de 0,1 segundos. Si no est utilizando un Cary 50, introduzca el ancho de banda espectral requerido en el campo SBW (del ingls "spectral bandwidth). Utilice el valor mximo, a menos que su mtodo especifique otro valor.

c.

Nota

Si est utilizando una microcubeta, deber seleccionar un ancho de banda menor. d. Seleccione Replicates (rplicas) o Sample Averaging (integracin de muestras). Para las rplicas, introduzca el nmero de rplicas de cada muestra que desea que se lean. Para la integracin de muestras, introduzca un 2 para alcuotas duplicadas de la misma solucin o un 3 para alcuotas triplicadas. Seleccione el modo de ordenadas que necesite en la lista emergente del campo Y Mode (modo de las Y). Introduzca un valor del factor, si ha seleccionado Abs*F.

e.

3-23

Cary WinUV

Configure las opciones de las lmparas 7. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones Si est utilizando un Cary 50, salte al paso 0. a. b. Seleccione la ventana de opciones (Options). Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de las lecturas. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til cuando se realizan lecturas por la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. Haga clic en el botn radial UV/Vis si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante la lectura de las muestras. Introduzca la longitud de onda a la que desea que la lmpara fuente pase de ser la lmpara UV a ser la lmpara Vis/NIR. El punto de cambio recomendado se sita en los 350 nm para lmparas con corte UV. Si est utilizando un Cary 500, introduzca as mismo la longitud de onda de cambio del detector. En el grupo Beam Mode (modo de haz), seleccione el modo de haz que desee. En la mayor parte de los casos ser el Double Beam (doble haz) y el Normal.

c.

d.

e.

Configure los accesorios 8. Dilogo de configuracin | Ventanas de accesorios Seleccione las ventanas de Accesorios (Accesories) 1 y 2, y asegrese de que no est seleccionado ningn accesorio. Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 9. Dilogo de configuracin | Ventana de informes a. b. c. Seleccione la ventana de informes (Reports) y especifique los requisitos de los informes para este mtodo. Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). Introduzca un comentario sobre su experimento en el campo Comment (comentario).

3-24

Cary WinUV

d.

Configure su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin AutoPrint (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe. e. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure los nombres de sus muestras y los incrementos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de muestras a. Seleccione la ventana de muestras (Samples). La ventana de dilogo correspondiente le permitir introducir una lista de los nombres de las muestras que sern utilizados durante el anlisis. Introduzca el nmero de muestras que va a utilizar en el campo Number of Samples (nmero de muestras). La tabla situada debajo del citado campo se expandir o contraer a la medida de su eleccin. En la tabla de muestras (dentro del grupo Sample Names (nombres de las muestras)), introduzca el nombre de cada muestra. Puede utilizar hasta un mximo de 20 caracteres para cada nombre. Si las muestras tienen un mismo nombre con diferentes extensiones numricas, introduzca el nombre en la posicin correspondiente a la primera muestra y pulse a continuacin el botn Increment (incremento).

b.

c.

d.

3-25

Cary WinUV

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 11. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico a. b. Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (AutoStore). Seleccione Storage off (almacenamiento desactivado). El mtodo, los datos obtenidos y el informe no se guardarn de forma automtica. No obstante, podr usted guardarlos manualmente al final del proceso.

Configure la monitorizacin visual del sistema 12. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 13. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar), para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Ponga a cero el instrumento 14. Para poner a cero el instrumento: a. Haga clic en el botn Zero (cero). De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos) para realizar una puesta a cero. Aparecer la ventana de dilogo de puesta a cero (Zero). Ponga una muestra en blanco en el compartimento para muestras y pulse "OK" (aceptar).

b.

Lea las muestras 15. Para leer las muestras: a. b. c. Haga clic en el botn "Start" (inicio). Aparecer la ventana de dilogo de seleccin de muestras (Sample Selection). Seleccione las muestras que desee leer y, a continuacin, haga clic en "OK" (aceptar). La ventana de dilogo de presentacin de la muestra (Present Sample) le pedir que coloque la muestra apropiada en el compartimento para muestras. Pulse "OK" (aceptar) para leer

3-26

Cary WinUV

la muestra. (Si previamente seleccion la obtencin de rplicas de cada muestra, el sistema le informar del resultado despus de leer la ltima rplica de la muestra). d. Repita el proceso para las restantes muestras.

Guarde sus datos 16. Para guardar los datos: a. b. Haga clic en el men File (archivo) y seleccione Save Data As (guardar los datos como...). Introduzca el nombre del archivo para los datos de las lecturas que acaba de realizar en el campo File name (nombre del archivo). Haga clic en Save (guardar). Los datos sern almacenados en forma de un archivo de secuencia.

c.

3.5

Concentration

3.5.1 Cmo realizar una calibracin y medir concentraciones de forma manual


En la presente seccin se indica cmo realizar una calibracin multiestndar y cmo medir las concentraciones de las muestras sin utilizar ningn accesorio. Inicie la aplicacin Concentration 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Concentration en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento si es necesario y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Concentration. (De forma alternativa, puede seleccionar el icono de la aplicacin Concentration situado en la carpeta de Cary WinUV situada en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Concentration.

3-27

Cary WinUV

Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar el dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el ancho de banda espectral, las unidades del eje Y, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) En el campo Wavelength (longitud de onda), introduzca la longitud de onda que desea utilizar. (b) En el campo Ave Time (tiempo de integracin), introduzca el valor requerido. Un buen punto de partida es un valor de 0,1 segundos. (c) A menos que est utilizando un Cary 50, introduzca el ancha de banda espectral requerido en el campo SBW. Utilice el valor mximo, a menos que su mtodo especifique otro valor.

Nota

Si est utilizando una microcubeta, deber seleccionar un ancho de banda menor. (d) Seleccione Replicates (rplicas) (si las desea) e introduzca el valor correspondiente al nmero de rplicas que desee utilizar. A menos que est utilizando un Cary 50, seleccione el modo del eje Y que desee. Haga clic en Abs para especificar el modo de absorbancia o en Emission (emisin) si va a medir fluorescencias. Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de los valores, visualizado a lo largo del eje de ordenadas. Tenga en cuenta que los citados valores son slo unos valores de partida. El software WinUV modificar automticamente la escala del grfico de calibracin a medida que vayan midindose los estndares.

(e)

(f)

3-28

Cary WinUV

Configure la calibracin 7. Dilogo de configuracin | Ventana de estndares (a) Seleccione la ventana de estndares (Standards) para configurar los estndares y sus parmetros asociados a la obtencin de datos. (b) Seleccione Calibrate During Run (calibrar durante el proceso) para realizar una calibracin cuando se pulse el botn "Start" (inicio). (c) Establezca las unidades (Units) apropiadas para sus estndares a efectos de elaboracin de los informes.

Nota

Si est realizando una calibracin para su uso con la aplicacin Dissolution, las unidades especificadas debern ser mg/ml o g/l. (d) Especifique en el campo Standards (estndares) el nmero de estndares que va a utilizar en la calibracin. La tabla situada debajo del citado campo se expandir o contraer a la medida de su eleccin. En la tabla de estndares, introduzca la concentracin de cada estndar en la columna Conc. Seleccione el tipo de ajuste de curva requerido para la calibracin en el grupo Fit Type (tipo de ajuste). Introduzca el valor de R2 o coeficiente de correlacin en el campo Min R2. Cuanto ms prximo sea dicho valor a 1,000, tanto mejor ser el ajuste. Tpicamente, se utiliza un valor de 0,95.

(e) (f) (g)

Configure las opciones de las lmparas 8. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones Si est utilizando un Cary 50, salte al paso 9. (a) (b) Seleccione la ventana de opciones (Options). Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de las lecturas. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til cuando est ejecutndose la aplicacin Concentration durante la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. Haga clic en el botn UV/Vis si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso.

(c)

3-29

Cary WinUV

(d)

(e)

Introduzca la longitud de onda a la que desea que la lmpara fuente pase de ser la lmpara UV a ser la lmpara Vis/NIR. El punto de cambio recomendado se sita en los 350 nm para lmparas con corte UV. Si est utilizando un Cary 500, introduzca as mismo la longitud de onda de cambio del detector. En el grupo Beam Mode (modo de haz), seleccione el modo de haz que desee. En la mayor parte de los casos ser el Double Beam (doble haz) y el Normal.

Configure los accesorios 9. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios Seleccione la ventana de accesorios y asegrese de que no hay ningn accesorio seleccionado.

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 10. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports) y especifique los requisitos de los informes para este mtodo. (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla AutoPrint (Impresin Automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico de calibracin en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma

3-30

Cary WinUV

de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento. Configure los nombres de las muestras y los incrementos 11. Dilogo de configuracin | Ventana de muestras (a) Seleccione la ventana de Muestras (Samples). Dicha ventana de dilogo le permitir introducir una lista de los nombres de las muestras que sern utilizados durante el anlisis. (b) Introduzca el nmero de muestras que vaya a utilizar en el campo Number of Samples (nmero de muestras). La tabla situada debajo del citado campo se expandir o contraer a la medida de su eleccin. (c) En la tabla de muestras, introduzca el nombre de cada muestra. Puede utilizar un mximo de 20 caracteres para cada nombre. (d) Si las muestras tienen un mismo nombre con diferentes extensiones numricas, introduzca el nombre en la posicin correspondiente a la primera muestra y pulse a continuacin el botn Increment (incremento). Configure sus muestras para la correccin de peso y volumen 12. Dilogo de configuracin | Ventana de muestras (a) Seleccione Corrections (correcciones) en el grupo de correcciones de peso/volumen (Weight/Volume Corrections), para activar el sistema de correccin. (b) Introduzca el peso terico de la muestra en el campo Method Weight (peso del mtodo). Se trata del peso de la muestra especificado en su mtodo. (c) Introduzca las unidades de peso en el campo Units (unidades). (d) Introduzca el volumen terico de la muestra en el campo Method Volume (volumen del mtodo). Se trata del volumen de la muestra que especifica el mtodo. (e) Introduzca las unidades de volumen en el campo Units (unidades). (f) En la tabla de muestras (Samples), introduzca el peso y volumen reales de cada muestra.

3-31

Cary WinUV

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 13. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store). (b) Seleccione Storage off (almacenamiento desactivado). El mtodo (con calibracin), los datos obtenidos y el informe no se guardarn de forma automtica. No obstante, podr usted guardarlos manualmente al final del proceso. Configure la monitorizacin visual del sistema 14. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 15. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Ponga a cero el instrumento 16. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). (b) Coloque una muestra en blanco en el compartimento para muestras y pulse "OK" (aceptar). Lleve a cabo la calibracin 17. Para llevar a cabo la calibracin: (a) Pulse el botn de inicio ("Start") de la aplicacin o seleccione Start en el men Commands (comandos). Aparecer la ventana de dilogo de seleccin de estndares/muestras (Standard/Sample Selection). (b) Seleccione los estndares y muestras que vaya a utilizar en el anlisis. Por defecto, estn seleccionados todos los estndares y muestras. (c) Haga clic en "OK" (aceptar) para salir de la ventana de dilogo de seleccin de estndares/muestras. (d) La ventana de dilogo de presentacin del estndar (Present Standard) le solicitar que coloque el estndar apropiado en

3-32

Cary WinUV

(e)

el compartimento para muestras. Pulse "OK" (aceptar) para medir el estndar. Repita el proceso hasta que haya medido todos los estndares. El sistema Cary calcular la calibracin y el coeficiente de correlacin.

Nota

Si el coeficiente de correlacin calculado es inferior al valor del citado parmetro (R2) previamente establecido, el sistema emitir el mensaje Min R2 test failed (prueba del R2 mnimo fallida). Cuando usted pulse "OK" (aceptar), el sistema le indicar There is no valid calibration. Proceed in Abs (or Emission)? (No existe una calibracin vlida. Continuar en Absorbancia (o Emisin)?). Si entonces hace clic en Cancel (cancelar), finalizar la ejecucin de la aplicacin Concentration. Si hace clic en Yes (s), el instrumento medir la absorbancia o la emisin de cualesquiera muestras que se le presenten, pero no generar ninguna concentracin. Mida la muestra 18. Para medir la concentracin de la muestra: (a) Una vez ledos todos los estndares, la ventana de dilogo de presentacin de la muestra (Present Sample) le solicitar que ponga la muestra apropiada en el compartimento para muestras. Pulse "OK" (aceptar) para medir la muestra y calcular su concentracin. (Si se ha establecido que se tomen rplicas, la concentracin ser calculada despus de haberse ledo la ltima rplica de la muestra). (b) Repita el proceso para las restantes muestras. Guarde los datos 19. Para guardar los datos: (a) Haga clic en el men File (archivo) y seleccione Save Data As (guardar los datos como...). (b) Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin Concentration en el campo File name (nombre del archivo).

3.6

Dissolution
En la presente seccin son describen los procedimientos siguientes: u Cmo utilizar la aplicacin Dissolution (con el Cary 100/300) u Cmo utilizar la aplicacin Dissolution (con el Cary 50)

3-33

Cary WinUV

3.6.1 100/300)

Cmo utilizar la aplicacin Dissolution (con el Cary


Abra la aplicacin Dissolution 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Dissolution en el men de Cary WinUV para abrir la aplicacin Dissolution. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Dissolution. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Dissolution situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP es posible que el ordenador le solicite que introduzca una contrasea para poder acceder a la aplicacin Dissolution. Configure los parmetros del mtodo 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros de control del instrumento y de los tiempos de obtencin de datos 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary En la ventana de Cary, especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis de la forma siguiente: (a) Introduzca la longitud de onda (Wavelength), el tiempo de integracin (Ave Time) y el ancho de banda espectral (SBW) que necesite en los correspondientes campos. Seleccione el modo de ordenadas que desee (Abs (absorbancia), %Dissolved (% disuelto) o mg Dissolved (mg disueltos)).

(b)

3-34

Cary WinUV

7.

Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y Min e Y Max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. Especifique los parmetros de los tiempos de obtencin de datos (Collect Timing): (a) Seleccione las unidades para la obtencin de datos. Haga clic en Hours (horas), para especificar el tiempo en horas, o en Minutes (minutos), para especificar el tiempo en minutos. (b) Introduzca el nmero de etapas que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo.

(c)

Nota

La utilizacin de ms de una etapa le permitir recoger datos de forma ms frecuente durante las etapas con una elevada velocidad de disolucin de la tableta, y recogerlos de forma menos frecuente durante las etapas en que usted sepa que la velocidad de disolucin va ser ms lenta. (c) Introduzca la duracin del ciclo (Cycle) y el tiempo del final (End) de cada etapa.

Configure los controles del bao, incluidos los correspondientes a la temperatura, agitacin y tiempos de bombeo 8. Dilogo de configuracin | Ventana del bao (a) Seleccione la ventana del bao (Bath) para especificar los controles y la configuracin del bao para su anlisis. (b) Seleccione el tipo de mtodo del aparato (Apparatus), el nmero de baos que deban utilizarse y los recipientes (Vessels) que deban analizarse. (c) Si debe utilizarse una longitud de paso doble, seleccione la casilla de verificacin Use Dual Pathlength (utilizar longitud de paso doble) y especifique si desea que los datos se obtengan a partir de las cubetas traseras o de las delanteras.

Nota

La opcin de longitud de paso doble no es vlida para un sistema de dos baos o cuando se analizan recipientes de tipo muestras + estndar + blanco en un sistema de un bao. (d) Introduzca la temperatura del bao VanKel (VanKel Bath), la temperatura del mtodo (Method Temperature) y la tolerancia de temperatura (Temperature Tolerance).

3-35

Cary WinUV

Nota

Seleccione la casilla de verificacin de calentamiento del bao si desea que el bao se caliente en un tiempo preestablecido. Haga clic en la ventana del bao para especificar la fecha y hora en que debe comenzar el calentamiento del bao. (e) (f) (g) Introduzca los diferentes tiempos de bombeo en los campos correspondientes. Introduzca la velocidad de agitacin (Stir Rate) en revoluciones por minuto. Seleccione la casilla de verificacin Infinity Stir Time (tiempo de agitacin infinito) si desea realizar una medicin infinita al final del ltimo ciclo de obtencin de datos. Seleccione la casilla de verificacin Initial Fast Stir (agitacin inicial rpida) si desea realizar una agitacin rpida despus de aadir la solucin del medio en los recipientes, con objeto de eliminar las posibles burbujas de aire que puedan quedar atrapadas alrededor de las paletas/cestos.

(h)

Configure la informacin de las muestras para la informacin de la tableta y la correccin de potencia 9. Dilogo de configuracin | Ventana de muestras (a) Seleccione la ventana de muestras (Samples) e introduzca la informacin de las muestras para su anlisis. (b) Introduzca la potencia de la tableta (Tablet Potency), el volumen del recipiente (Vessel Volume) y el tipo de medio de muestra (Sample Medium) utilizados. (c) Marque la casilla de verificacin Weight Correct (correccin de peso) para aplicar las correcciones de peso. (d) Introduzca el peso del mtodo (Method Weight) para cada unidad de bao. (e) Introduzca los pesos reales de la tableta para cada recipiente.

3-36

Cary WinUV

Configure las opciones de los estndares para la obtencin de datos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de estndares (a) Seleccione la ventana de estndares (Stds) para especificar los valores de los estndares (Standards Values). (b) Introduzca el 100% de absorbancia del estndar (100% Std Abs), el peso del estndar (Standard Weight) y el volumen del estndar (Standard Volume) en los campos correspondientes.

Nota

El campo 100% Std Abs estar inhabilitado si los recipientes (Vessels) especificados son de tipo muestra + estndar (Sample + Std) o muestra + estndar + blanco (Sample + Std + Blank); o si est marcada la casilla de verificacin Use Multi-Std Calibration (utilizar calibracin multiestndar). (c) Especifique el material de referencia estndar (Std Reference) y el medio estndar (Std Medium) utilizados para el anlisis. Si es necesario, marque la casilla de verificacin Use MultiStd Calibration (utilizar calibracin multiestndar) para activar el sistema de calibracin multiestndar.

(d)

Nota

El sistema de calibracin multiestndar requiere que se seleccione una calibracin almacenada, haciendo clic en ella. Dicha calibracin debe realizarse y generarse utilizando para ello la aplicacin Concentration, con los mismos parmetros del mtodo utilizados en el mtodo de disolucin. (e) Si est midiendo un estndar en lnea, marque la casilla de verificacin Use Limits (utilizar lmites), para aplicar los lmites de control del estndar (Standard Control Limits) durante el anlisis. Introduzca los valor lmites del estndar (Standard Limits) cuando vaya a utilizar el sistema de lmites de control del estndar. Especifique la accin If Outside Limits (En el caso de estar fuera de los lmites) cuando vaya a utilizar los lmites del control del estndar.

(f)

(g)

3-37

Cary WinUV

Configure los lmites de obtencin de datos para asegurarse de que las muestras cumplen las especificaciones del laboratorio 11. Dilogo de configuracin | Ventana de lmites (a) Seleccione la ventana de lmites (Limits) para especificar los lmites de control de la muestra. (b) Marque la casilla de verificacin Use Limits (utilizar lmites), si desea aplicar los lmites de control de la muestra al anlisis. (c) Introduzca el nmero de lmites que requiera en el campo Number of Limits (nmero de lmites). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. (d) Introduzca la informacin sobre los lmites (Limit Information) que desee que se aplique al anlisis de las muestras.

Nota

Los puntos de tiempo introducidos se aproximarn por defecto a los puntos de tiempo ms cercanos en los que se haya realizado la medicin. No est permitida ninguna extrapolacin de los datos. (e) Especifique la accin If Outside Limits (en el caso de estar fuera de los lmites) cuando vaya a utilizar los lmites de control del estndar.

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 12. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports) para especificar los requisitos de los informes para este mtodo. (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Configure su estilo de informe seleccionando los botones radiales apropiados en el grupo de opciones (Options). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin AutoPrint (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

3-38

Cary WinUV

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Especifique qu puntos de tiempo deben utilizarse en el informe. Por ejemplo, seleccione todos los puntos de tiempo (All time points), los puntos de tiempo correspondientes al lmite de control de la muestra (Sample Control Limit) o los puntos de tiempo definidos por el usuario (User defined), segn lo que desee que aparezca en el informe. Introduzca los puntos de tiempo del % disuelto (% Dissolved) que desee que aparezcan en el informe.

(f)

Nota

Para editar las tablas de tiempo y % disuelto, haga clic con el botn derecho del ratn sobre las respectivas tablas de las opciones del men. (g) Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure la monitorizacin visual del sistema 13. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 14. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin.

3-39

Cary WinUV

Compruebe la colocacin de las cubetas de flujo para disolucin 15. Haga clic en el botn Loading Guide (gua de carga) para comprobar que las cubetas de flujo para disolucin estn colocadas correctamente en el accesorio de soporte para mltiples cubetas (8 x 6). De dicha forma se identifican las posiciones correctas de las cubetas de flujo para disolucin de acuerdo con la configuracin del tipo de mtodo especificada para la sesin de trabajo; por ej., cubetas traseras de doble paso de muestras + estndar, etc.

Nota

Asegrese de que ha colocado las cubetas de flujo en el soporte para mltiples cubetas con la flecha que indica la direccin del flujo orientada en la direccin correcta. Una vez que quede satisfecho con la colocacin de las cubetas de flujo haga clic en "OK" (aceptar) para salir de la gua de carga de las cubetas. 16. Asegrese de que los tubos procedentes del bao o baos y de la bomba estn firmemente conectados a las cubetas de flujo para disolucin.

Nota

En cada cubeta de flujo para disolucin la flecha que indica la entrada de flujo deber estar orientada hacia abajo. Cuando se manipulen las cubetas de flujo para disolucin deben adoptarse las precauciones necesarias para asegurarse de que las ventanas de las cubetas no resulten araadas, picadas ni manchadas con huellas dactilares. Los tubos de entrada y salida de las cubetas, la bomba y el bao deben ser inspeccionados, comprobando que no tengan fugas, para garantizar la integridad de los resultados analticos. Compruebe la comunicacin del sistema y asegrese de que sus respuestas mecnicas son las correctas 17. Para comprobar la comunicacin y las respuestas mecnicas: (a) Haga clic en el botn Diagnostics (diagnsticos) o seleccione Diagnostics en el men Commands (comandos), para comprobar la comunicacin del bao y el soporte para mltiples cubetas. (b) Seleccione las cubetas en el grupo Cary Apparatus (aparato de Cary) y compruebe si se produce el movimiento correcto hasta cada cubeta. (c) Seleccione el bao que desee probar.

3-40

Cary WinUV

(d) (e)

Seleccione el botn Communication Setup (configuracin de la comunicacin) e introduzca la configuracin correcta. Haga clic en el botn Bath Communication Tests (pruebas de comunicacin del bao) para iniciar la secuencia de prueba. Siga las instrucciones que vayan apareciendo en pantalla.

Ponga a cero el instrumento 18. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn "Zero" (cero) para visualizar el dilogo de puesta a cero de todas las cubetas (Zero All Cells). (b) Haga clic en "OK" (aceptar) para poner a cero todas las cubetas. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Dissolution 19. Para iniciar la sesin: (a) Pulse el botn "Start" (inicio) para iniciar la obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). (b) Aparecer el dilogo de identificacin de la muestra (Sample ID). Introduzca el nombre de la muestra en l y pulse "OK" (aceptar). (c) Aparecer a continuacin la ventana de dilogo Save As (guardar como...), solicitndole que guarde el mtodo y los datos obtenidos en un archivo de secuencia generado por la aplicacin Dissolution (*.BTD). (d) Seleccione la carpeta en la que desee guardar el archivo. (e) Introduzca el nombre del archivo en el campo File name (nombre del archivo) y haga clic a continuacin en Save (guardar). El mtodo, los datos obtenidos y el informe generado se guardarn en la carpeta seleccionada. 20. Durante el anlisis irn apareciendo una serie de mensajes. Lalos cuidadosamente y seleccione la respuesta apropiada. El tipo de mensajes que irn apareciendo depender de los parmetros del mtodo utilizado para la obtencin de datos.

Nota

Durante el proceso, el software le preguntar si desea utilizar la deteccin automtica de temperatura en todos los recipientes. Si est utilizando un bao 7000, elija "No y el software utilizar la(s) sonda(s) de temperatura existente(s) en el(los) bao(s) como temperatura de control.

3-41

Cary WinUV

3.6.2

Cmo utilizar la aplicacin Dissolution (con el Cary 50)


Abra la aplicacin Dissolution 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Dissolution en el men de Cary WinUV para abrir la aplicacin Dissolution. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Dissolution. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Dissolution situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP es posible que el ordenador le solicite que introduzca una contrasea para poder acceder a la aplicacin Dissolution. Configure los parmetros del mtodo 5. Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior:

Configure los parmetros de control del instrumento y de tiempos de obtencin de datos 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary En la Ventana de Cary, especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis de la forma siguiente: (a) Introduzca la longitud de onda (Wavelength) y el tiempo de integracin (Ave time) que desee en los campos correspondientes. Seleccione el modo de ordenadas que desee (Abs (absorbancia), %Dissolved (% disuelto) o mg Dissolved (mg disueltos)). Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y Min e Y Max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas.

(b)

(c)

3-42

Cary WinUV

7.

Especifique los parmetros de los tiempos de obtencin de datos: (a) Elija las unidades. Seleccione Hours (horas) para especificar el tiempo en horas o Minutes (minutos) para especificar el tiempo en minutos. (b) Introduzca el nmero de etapas que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo.

Nota

La utilizacin de ms de una etapa le permitir recoger datos de forma ms frecuente durante las etapas con una velocidad de disolucin de la tableta rpida y recogerlos de forma menos frecuente durante las etapas en que usted sepa que la velocidad de disolucin ser ms lenta. (c) Introduzca la duracin del ciclo (Cycle) y el tiempo del final (End) de cada etapa.

Configure los controles del bao, incluidos los correspondientes a la temperatura, agitacin y tiempos de bombeo 8. Dilogo de configuracin | Ventana del bao (a) Seleccione la ventana del bao (Bath) para especificar los controles y la configuracin del bao para su anlisis. (b) Seleccione el tipo de mtodo del aparato (Apparatus), el nmero de baos que deban utilizarse y los recipientes (Vessels) que deban analizarse. (c) Si debe utilizarse una longitud de paso doble, seleccione la casilla de verificacin Use Dual Pathlength (utilizar longitud de paso doble) y especifique si desea que los datos se recojan en las cubetas traseras o en las delanteras.

Nota

La opcin de longitud de paso doble no es vlida para un sistema de dos baos. (d) Introduzca la temperatura del bao VanKel (VanKel Bath), la temperatura del mtodo (Method Temperature) y la tolerancia de temperatura (Temperature Tolerance).

Nota

Seleccione la casilla de verificacin de calentamiento del bao si desea que el bao se caliente en un tiempo preestablecido. Haga clic en la ventana del bao para especificar la fecha y hora en que debe comenzar el calentamiento del bao. (e) Introduzca los diferentes tiempos de bombeo en los campos correspondientes. 3-43

Cary WinUV

(f) (g)

(h)

Introduzca la velocidad de agitacin (Stir Rate) en revoluciones por minuto. Seleccione la casilla de verificacin Infinity Stir Time (tiempo de agitacin infinito) si desea realizar una medicin infinita al final del ltimo ciclo de obtencin de datos. Seleccione la casilla de verificacin Initial Fast Stir (agitacin inicial rpida) si desea realizar una agitacin rpida despus de aadir la solucin del medio en los recipientes, con objeto de eliminar las posibles burbujas de aire que puedan quedar atrapadas alrededor de las paletas/cestos.

Configure la informacin de las muestras para la informacin de la tableta y la correccin de potencia 9. Dilogo de configuracin | Ventana de muestras (a) Seleccione la ventana de muestras (Samples) e introduzca la informacin de las muestras para su anlisis. (b) Introduzca la potencia de la tableta (Tablet Potency), el volumen del recipiente (Vessel Volume) y el tipo de medio de muestra (Sample Medium) utilizados. (c) Marque la casilla de verificacin Weight Correct (correccin de peso) para aplicar las correcciones de peso. (d) Introduzca el peso del mtodo (Method Weight) para cada unidad de bao. (e) Introduzca los pesos reales de la tableta para cada recipiente.

Configure las opciones de los estndares para la obtencin de datos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de estndares (a) Seleccione la ventana de estndares (Stds) para especificar los valores de los estndares (Standards Values). (b) Introduzca el 100% de absorbancia del estndar (100% Std Abs), el peso del estndar (Standard Weight) y el volumen del estndar (Standard Volume) en los campos correspondientes.

Nota

El campo 100% Std Abs estar inhabilitado si los recipientes (Vessels) especificados son de tipo muestra + estndar (Sample + Std) o muestra + estndar + blanco (Sample + Std + Blank); o si est marcada la casilla de verificacin Use Multi-Std Calibration (utilizar calibracin multiestndar).

3-44

Cary WinUV

(c)

(d)

Especique el material de referencia estndar (Std Reference) y el medio estndar (Std Medium) utilizados para el anlisis. Si es necesario, marque la casilla de verificacin Use MultiStd Calibration (utilizar calibracin multiestndar) para activar el sistema de calibracin multiestndar.

Nota

El sistema de calibracin multiestndar requiere que se seleccione una calibracin almacenada, haciendo clic en ella. Dicha calibracin debe realizarse y generarse utilizando para ello la aplicacin Concentration, con los mismos parmetros del mtodo utilizados en el mtodo de disolucin. (e) Si est midiendo un estndar en lnea, marque la casilla de verificacin Use Limits (utilizar lmites) para aplicar los lmites de control del estndar (Standard Control Limits) durante el anlisis. Introduzca los valores lmites del estndar (Standard Limits) cuando vaya a utilizar el sistema de lmites de control del estndar. Especifique la accin If Outside Limits (en el caso de estar fuera de los lmites) cuando vaya a utilizar los lmites de control del estndar.

(f)

(g)

Configure los lmites de obtencin de datos para asegurarse de que las muestras cumplen las especificaciones del laboratorio 11. Dilogo de configuracin | Ventana de lmites (a) Seleccione la ventana de lmites (Limits) para especificar los lmites de control de la muestra. (b) Marque la casilla de verificacin Use Limits (utilizar lmites) si desea aplicar los lmites de control de la muestra al anlisis. (c) Introduzca el nmero de lmites que requiera en el campo Number of Limits (nmero de lmites). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. (d) Introduzca la informacin sobre los lmites (Limit Information) que desee que se aplique al anlisis de las muestras.

Nota

Los puntos de tiempo introducidos se aproximarn por defecto a los puntos de tiempo ms cercanos en los que se haya realizado la medicin. No est permitida ninguna extrapolacin de los datos.

3-45

Cary WinUV

(e)

Especifique la accin If Outside Limits (en el caso de estar fuera de los lmites) cuando vaya a utilizar los lmites del control del estndar.

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 12. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports) para especificar los requisitos de los informes para este mtodo. (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Configure su estilo de informe seleccionando los botones radiales apropiados en el grupo de opciones (Options). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin AutoPrint (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Especifique qu puntos de tiempo deben utilizarse en el informe. Por ejemplo, seleccione todos los puntos de tiempo (All time points), los puntos de tiempo correspondientes al lmite de control de la muestra (Sample Control Limit) o los puntos de tiempo definidos por el usuario (User defined), segn lo que desee que aparezca en el informe. Introduzca los puntos de tiempo del % disuelto (% Dissolved) que desee que aparezcan en el informe.

(f)

Nota

Para editar las tablas de tiempo y % disuelto, haga clic con el botn derecho del ratn sobre las respectivas tablas de las opciones del men.

3-46

Cary WinUV

(g)

Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure la monitorizacin visual del sistema 13. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 14. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Compruebe la colocacin de las cubetas de flujo para disolucin 15. Haga clic en el botn Loading Guide (gua de carga) o seleccione la opcin Loading Guide en el men Commands (comandos) para comprobar que las cubetas de flujo para disolucin estn colocadas correctamente en el accesorio de soporte para 18 posiciones. De dicha forma se identifican las posiciones correctas de las cubetas de flujo para disolucin, de acuerdo con la configuracin del tipo de mtodo especificada para la sesin de trabajo; por ej., cubetas traseras de doble paso de muestras + estndar, etc.

Nota

Asegrese de que ha colocado las cubetas de flujo en el soporte de mltiples posiciones con la flecha que indica la direccin del flujo orientada en la direccin correcta. Una vez que quede satisfecho con la colocacin de las cubetas de flujo haga clic en "OK" (aceptar) para salir de la gua de carga. 16. Asegrese de que los tubos procedentes del bao o baos y de la bomba estn firmemente conectados a las cubetas de flujo para disolucin.

3-47

Cary WinUV

Nota

En cada cubeta de flujo para disolucin la flecha que indica la entrada de flujo deber estar orientada hacia abajo. Cuando se manipulen las cubetas de flujo para disolucin deben adoptarse las precauciones necesarias para asegurarse de que las ventanas de las cubetas no resulten araadas, picadas ni manchadas con huellas dactilares. Los tubos de entrada y salidas de las cubetas, la bomba y el bao deben ser inspeccionados, comprobando que no tengan fugas, para garantizar la integridad de los resultados analticos. Compruebe la comunicacin del sistema y asegrese de que sus respuestas mecnicas son las correctas 17. Para comprobar la comunicacin y las respuestas mecnicas: (a) Haga clic en el botn Diagnostics (diagnsticos) o seleccione Diagnostics en el men Commands (comandos), para comprobar la comunicacin del bao y el soporte para mltiples cubetas. (b) Seleccione las cubetas en el grupo Cary Apparatus (aparato de Cary) y compruebe si se produce el movimiento correcto hasta cada cubeta. (c) Seleccione el bao que desee probar. (d) Seleccione el botn Communication Setup (configuracin de la comunicacin) e introduzca la configuracin correcta. (e) Haga clic en el botn Bath Communication Tests (pruebas de comunicacin del bao) para iniciar la secuencia de prueba. Siga las instrucciones que vayan apareciendo en pantalla. Ponga a cero el instrumento 18. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn "Zero" (cero) para visualizar el dilogo de puesta a cero de todas las cubetas (Zero All Cells). (b) Haga clic en "OK" (aceptar) para poner a cero todas las cubetas. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Dissolution 19. Para iniciar la sesin: (a) Pulse el botn "Start" (inicio) para iniciar la obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos).

3-48

Cary WinUV

(b)

(c)

(d) (e)

Aparecer el dilogo de identificacin de la muestra (Sample ID). Introduzca el nombre de la muestra en l y pulse "OK" (aceptar). Aparecer a continuacin la ventana de dilogo Save As (guardar como...), solicitndole que guarde el mtodo y los datos obtenidos en un archivo de secuencia generado por la aplicacin Dissolution (*.BTD). Seleccione la carpeta en la que desee guardar el archivo. Introduzca el nombre del archivo en el campo File name (nombre del archivo) y haga clic a continuacin en Save (guardar). El mtodo, los datos obtenidos y el informe generado se guardarn en la carpeta seleccionada.

20. Durante el anlisis irn apareciendo una serie de mensajes. Lalos cuidadosamente y seleccione la respuesta apropiada. El tipo de mensajes que irn apareciendo depender de los parmetros del mtodo utilizado para la obtencin de datos.

Nota

Durante el proceso, el software le preguntar si desea utilizar la deteccin automtica de temperatura en todos los recipientes. Si est utilizando un bao 7000, elija "No y el software utilizar la(s) sonda(s) de temperatura existente(s) en el(los) bao(s) como temperatura de control.

3.7

Enzyme Kinetics
En la presente seccin se describen los siguientes procedimientos de la aplicacin Enzyme Kinetics: u Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100500) u Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada (con el Cary 50)

3-49

Cary WinUV

3.7.1 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100500)
En la presente seccin se indica cmo realizar un anlisis multivelocidad multicubeta con la aplicacin Enzyme Kinetics, a 37 C, utilizando el accesorio controlador de temperatura y el accesorio de soporte para mltiples cubetas (con los instrumentos Cary 100, 300, 400 y 500). Inicie la aplicacin Enzyme Kinetics 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Enzyme Kinetics en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Enzyme Kinetics. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Enzyme Kinetics situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Enzyme Kinetics. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior:

Configure el accesorio de soporte para mltiples cubetas con correccin multicero, sin blanco 6. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios Dado que algunas opciones no son utilizables si antes no se han seleccionado los accesorios apropiados, deber comenzar por seleccionar stos ltimos. (a) Seleccione la ventana de accesorios (Accesories).

3-50

Cary WinUV

(b)

(c)

(d) (e)

Seleccione casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar el cambiador de cubetas) para habilitar el accesorio en cuestin. En el caso de los instrumentos Cary 100/300, elija el tipo de soporte para mltiples cubetas que vaya a utilizar (6 x 6 u 8 x 6). Asegrese de que el citado accesorio est instalado antes de comenzar el anlisis. Elija el botn radial Select Cells (seleccionar cubetas) y seleccione las cubetas que necesite entre las disponibles en el grupo Use Cells (utilizar cubetas).

Nota

Para los anlisis de haz frontal, seleccione las casillas de verificacin Cell1Cell6 (Cubeta 1Cubeta 6) (para el soporte 6 x 6) o Cell1Cell8 (Cubeta 1Cubeta 8) (para el soporte 8 x 6). As se asegurar de que todas las posiciones correspondientes a las cubetas frontales del soporte para mltiples cubetas sean medidas durante el anlisis de cintica enzimtica. (f) (g) Marque la casilla de verificacin Multi Zero (multicero) para activar el sistema de correccin multicero. Asegrese de que la casilla de verificacin Blank Correction (correccin del blanco) no est marcada.

Configure los accesorios para el control de la temperatura de la reaccin y la visualizacin de la temperatura 7. Para configurar los accesorios: (a) Si no va a utilizar un accesorio controlado Peltier (por ej., el accesorio 8 x 6 termostatizado con agua), asegrese de que est instalado el accesorio controlador de temperatura antes de comenzar el anlisis y, a continuacin: (i) Marque el ajuste automtico de la temperatura (Automatic Temperature Setting) y seleccione el controlador de temperatura (Temperature Controller), para habilitar el accesorio. (ii) Establezca la temperatura de monitorizacin, fijando la temperatura del bloque (Block Temperature) en 37 C. (El dispositivo de monitorizacin se selecciona en el paso 8 (d)).

3-51

Cary WinUV

(b)

En el grupo Temperature Display (visualizacin de la temperatura), seleccione el bloque (Block) y la sonda (Probe) 1 para visualizar la temperatura del bloque del soporte para mltiples cubetas y una sonda de temperatura en la ventana de visualizacin del estado (Status Display).

Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el SBW, el modo de las Y, etc. 8. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary Seleccione la ventana de Cary y especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis. (a) Introduzca la longitud de onda (Wavelength), el ancho de banda espectral (SBW) y el tiempo de integracin (Ave Time) que desee en los campos correspondientes. Seleccione el modo de ordenadas que desee. Haga clic en Abs para especificar el modo de absorbancia o en %T para especificar el modo de porcentaje de transmitancia.

(b)

Nota

El modo de %T se utiliza para realizar mediciones cinticas de fluorescencia utilizando el accesorio de fluorescencia total o la sonda de fluorescencia de fibra ptica. (c) Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. Elija el dispositivo de monitorizacin de la temperatura deseado en el campo Monitor. El botn "Start" (inicio) no se habilitar hasta que la temperatura del monitor seleccionado difiera en menos de 0,5 C de la temperatura del bloque establecida en la ventana de accesorios (paso 7 (a) (ii)).

(d)

Configure los parmetros de velocidad de la reaccin tales como el nmero de velocidades de reaccin diferentes, la velocidad y la duracin de la obtencin de datos 9. Seleccione el botn radial Advanced Collect (obtencin avanzada de datos) en el grupo Collect Timing (tiempos de obtencin de datos). Ello le permitir establecer diferentes procedimientos de obtencin de datos para las mltiples velocidades de su reaccin.

3-52

Cary WinUV

Nota

El sistema de obtencin avanzada de datos le permitir obtener datos de forma mucho ms frecuente durante las etapas cruciales de su reaccin y obtenerlos de forma menos frecuente durante las etapas en que usted sepa que no va a haber mucha actividad. (a) Introduzca el nmero de velocidades de reaccin diferentes que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. Modifique el nmero de puntos de datos obtenidos por cubeta y sesin ajustando el tiempo de permanencia (Dwell Time) para cada etapa de velocidad. Especifique el tiempo que deber esperar el instrumento Cary despus de leer cada cubeta antes de comenzar un nuevo ciclo de lectura, ajustando para ello la duracin del ciclo (Cycle Time) para cada etapa de velocidad. Especifique la duracin del tiempo de medicin, ajustando el tiempo de parada (Stop) de cada etapa de velocidad.

(b)

(c)

(d)

Configure las opciones de las lmparas y los grficos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options). (b) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de la obtencin de datos. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til cuando estn obtenindose datos por la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. (c) Haga clic en el botn radial UV/Vis si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso. (d) Introduzca las longitudes de onda de cambio de la fuente (Source Changeover) y del detector (Detector Changeover) que desee en los campos correspondientes (slo en el caso del Cary 500). (e) Establezca la altura de la rendija de salida del monocromador como altura completa o reducida (slo en los casos del Cary 400 y 500). (f) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial Individual Data (datos individuales) para visualizar los

3-53

Cary WinUV

datos obtenidos a partir de cada muestra en un recuadro grfico individual. Elija el botn radial Overlay Data (datos superpuestos) para visualizar los datos obtenidos a partir de todas las muestras, durante la ejecucin de la aplicacin Enzyme Kinetics, en un nico recuadro grfico. Configure el clculo de V0 11. Dilogo de configuracin | Ventana analizar (a) Seleccione la ventana analizar (Analyze). (b) Configure los tiempos de inicio (Start) y parada (Stop) del clculo de V0. (c) Introduzca la absortividad del producto correcta para su reaccin. (d) Introduzca la longitud de paso correcta de la cubeta para su reaccin. Configure los clculos para la velocidad mxima (Vmax) y la concentracin de sustrato que proporcionan la mitad de la velocidad mxima (Km) 12. Para configurar los clculos de Vmax y Km: (a) Seleccione el mtodo de clculo que deber aplicarse a los datos obtenidos de acuerdo con la seleccin que haya realizado en el grupo Plot/Fit (representacin grfica/ajuste). Elija entre el ajuste lineal por el mtodo de mnimos cuadrados (Linear Least Square) o el ajuste de Marquardt, seleccionando el botn radial apropiado. (b) Elija el modelo de inhibidor para su anlisis. Seleccione el botn radial Non Competitive (no competitivo), Competitive (competitivo) o Uncompetitive (incompetitivo). (c) Marque las casillas situadas junto a los tipos de representacin grfica/ajuste (Plot/Fit) que debern ser utilizados para determinar los valores de Vmax y Km. (d) Seleccione casilla de verificacin Auto Calculate (calcular automticamente) para realizar de forma automtica los clculos de cintica enzimtica con los datos obtenidos al final de cada ejecucin de la aplicacin Enzyme Kinetics. Los citados resultados se visualizarn en el rea del informe (Report).

3-54

Cary WinUV

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 13. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione the casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 14. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)), para hacer que el sistema Cary le solicite la introduccin de un nombre de archivo al inicio de la reaccin.

3-55

Cary WinUV

Configure la monitorizacin visual del sistema 15. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 16. Haga clic en "OK" (aceptar) para guardar los cambios que haya introducido y cerrar el dilogo de configuracin (Setup). Dependiendo de las cubetas que haya seleccionado en el soporte para mltiples cubetas, el sistema Cary es posible que le informe entonces de que va a realizar una calibracin de haz nico doble. Pulse "OK" (aceptar). Ponga a cero el instrumento 17. Para poner a cero el instrumento (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). En pantalla aparecer la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (b) Si lo desea, modifique los nombres de las muestras en blanco. (c) Coloque la solucin o soluciones en blanco en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento con las soluciones en blanco.

Nota

Si ha elegido no utilizar el sistema de correccin multicero en el paso 6, el sistema Cary le solicitar que coloque la solucin en blanco en el instrumento. Deber usted asegurarse de colocar la citada solucin en la posicin del soporte que se encuentre en ese momento en el paso de la luz. Una vez que pulse "OK" (aceptar), el sistema llevar a cabo una puesta a cero con la cubeta situada en el paso de la luz (el sistema no repondr el soporte para mltiples cubetas en la posicin 1). Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Enzyme Kinetics 18. Para iniciar la sesin de ejecucin: (a) Pulse el botn "Start" (inicio) para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). No aada su reactivo activo en este momento. El sistema visualizar en

3-56

Cary WinUV

(b) (c)

(d)

(e)

pantalla la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). Si lo desea, modifique los nombres de las muestras. Coloque las soluciones de las muestras en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema configurar el rea de grficos (Graphics) y visualizar a continuacin la ventana de dilogo Save File (guardar archivo). Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin en el campo File name (nombre del archivo) y pulse Save (guardar). Aparecer en pantalla la ventana de dilogo de sincronizacin del inicio (Sync Start). Reponga el soporte para mltiples cubetas en la posicin correspondiente a la cubeta 1, utilizando el botn Reset Slide (poner la platina en la posicin de partida). Aada su reactivo activo justo antes de que la cuenta atrs (Count Down) llegue a 0:00, o inicie el proceso de obtencin de datos pulsando el botn "OK" (aceptar).

Introduzca las concentraciones del sustrato y del inhibidor 19. Una vez iniciada la ejecucin del proceso, introduzca las concentraciones del sustrato y del inhibidor.

Nota

Si durante la obtencin de datos no se ha introducido ninguna informacin en el formulario de datos del usuario (User Data Form), no se llevar a cabo ningn clculo. (a) Abra el formulario de datos del usuario (User Data Form), haciendo clic con el botn derecho del ratn en un recuadro grfico y seleccionando la opcin User Data Form en la lista correspondiente, o seleccionando la citada opcin en el men Graph (grfico). En la tabla que aparecer habr nombres de datos (Data Names) y es posible que haya valores de V0 en las dos primeras columnas. Introduzca sus valores de [S] y [I] en moles/l en la tercera y la cuarta columna. Pulse "OK" (aceptar). Sus valores de [S] y [I] estarn ya listos para poder ser utilizados en los clculos, y el sistema Cary realizar stos ltimos al final del proceso.

(b)

(c)

3-57

Cary WinUV

3.7.2 Cary 50)

Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada (con el


En la presente seccin se indica cmo realizar un anlisis multivelocidad de cubeta nica con la aplicacin Enzyme Kinetics, a 37 C, utilizando el accesorio Peltier de cubeta nica (con el instrumento Cary 50). Inicie la aplicacin Enzyme Kinetics 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Enzyme Kinetics en el men Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Enzyme Kinetics. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Enzyme Kinetics situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Enzyme Kinetics. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Asegrese de que el accesorio de soporte para mltiples cubetas no est seleccionado 6. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios Dado que algunas opciones no son utilizables hasta que no hayan sido seleccionados los accesorios apropiados, deber empezar por seleccionar tales accesorios. (a) (b) Seleccione la ventana de accesorios (Accesories). Asegrese de que la casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar el cambiador de cubetas) no est seleccionada.

3-58

Cary WinUV

Configure los accesorios para el control de la temperatura de la reaccin y la visualizacin de la temperatura 7. Para configurar los accesorios: (a) En el grupo Temperature (temperatura), marque la opcin Automatic Temperature Setting (ajuste automtico de la temperatura) para habilitar el accesorio Peltier de cubeta nica. (b) Establezca la temperatura de monitorizacin introduciendo un valor de 37 C como temperatura del bloque (Block). (c) En el grupo Temperature Display (visualizacin de la temperatura), seleccione las sondas (Probes) 1 y 2 para visualizar las lecturas de las dos sondas de temperatura en la ventana la visualizacin del estado (Status Display).

Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el modo de las Y, etc. 8. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary Seleccione la ventana de Cary y especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis. (a) Introduzca la longitud de onda (Wavelength) y el tiempo de integracin (Ave Time) que desee en los campos correspondientes. Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas.

(b)

Configure los parmetros de velocidad de la reaccin tales como el nmero de velocidades de reaccin diferentes, la velocidad y la duracin del proceso de obtencin de datos 9. Para establecer diferentes procedimientos de obtencin de datos para las mltiples velocidades de su reaccin: (a) Seleccione el botn radial Advanced Collect (obtencin avanzada de datos) en el grupo Collect Timing (tiempos de obtencin de datos).

Nota

El sistema de obtencin avanzada de datos le permitir obtener datos de forma mucho ms frecuente durante las etapas cruciales de su reaccin, y obtenerlos de forma menos frecuente durante las etapas en que usted sepa que no va a haber mucha actividad.

3-59

Cary WinUV

(b)

(c)

(d)

Introduzca el nmero de velocidades de reaccin diferentes que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. Especifique el tiempo que deber esperar el instrumento Cary despus de leer cada cubeta antes de comenzar un nuevo ciclo de lectura, ajustando para ello la duracin del ciclo (Cycle Time) para cada etapa de velocidad. Especifique la duracin del proceso de medicin estableciendo para ello el tiempo de parada (Stop) de cada etapa de velocidad.

Configure las opciones de visualizacin del proceso de obtencin de datos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones: (a) Seleccione la ventana de opciones (Options) para elegir la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que vayan siendo obtenidos. (b) Elija el botn radial Individual Data (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en un recuadro grfico individual. Elija el botn radial Overlay Data (datos superpuestos) para visualizar los datos obtenidos a partir de todas las muestras en un nico recuadro grfico. Configure el clculo de V0 11. Dilogo de configuracin | Ventana analizar (a) Seleccione la ventana analizar (Analyze). (b) Configure los tiempos de inicio (Start) y parada (Stop) del clculo de V0. (c) Introduzca la absorcividad del producto correcta para su reaccin. (d) Introduzca la longitud de paso correcta de la cubeta para su reaccin.

3-60

Cary WinUV

Configure los clculos de la velocidad mxima (Vmax) y la concentracin de sustrato que proporcionan la mitad de la velocidad mxima (Km) 12. Para configurar los clculos de Vmax y Km: (a) Seleccione el mtodo de clculo que deber aplicarse a los datos obtenidos de acuerdo con la seleccin que haya realizado en el grupo Plot/Fit (representacin grfica/ajuste). Elija entre el ajuste lineal por el mtodo de mnimos cuadrados (Linear Least Square) o el ajuste de Marquardt, seleccionando el botn radial apropiado. (b) Elija el modelo de inhibidor para su anlisis. Seleccione el botn radial Non Competitive (no competitivo), Competitive (competitivo) o Uncompetitive (incompetitivo). (c) Marque las casillas situadas junto a los tipos de representacin grfica/ajuste (Plot/Fit) que debern ser utilizados para determinar los valores de Vmax y Km. (d) Seleccione la casilla de verificacin Auto Calculate (calcular automticamente) para realizar de forma automtica los clculos de cintica enzimtica a partir de los datos obtenidos al final de cada proceso. Los citados resultados se visualizarn en el rea del informe (Report). Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 13. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione the casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo

3-61

Cary WinUV

ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 14. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)), para hacer que el sistema Cary le solicite la introduccin de un nombre de archivo al inicio de una reaccin de cintica enzimtica. Configure la monitorizacin visual del sistema 15. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 16. Haga clic en "OK" (aceptar) para guardar los cambios que haya introducido y cerrar el dilogo de configuracin (Setup). Ponga a cero el instrumento 17. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). En pantalla aparecer la ventana de dilogo Loading Guide (gua de carga). (b) Si lo desea, modifique el nombre de la muestra en blanco. (c) Coloque la solucin Blanco en la posicin correcta y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento con la solucin Blanco.

3-62

Cary WinUV

Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Enzyme Kinetics 18. Para iniciar la sesin de ejecucin: (a) Pulse el botn "Start" (inicio) para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). No aada su reactivo activo en este momento. El sistema visualizar la ventana de dilogo Loading Guide (gua de carga). (b) Si lo desea, modifique el nombre de la muestra. (c) Coloque la solucin de la muestra en la posicin correcta y haga clic en OK (aceptar). El sistema configurar el rea de grficos (Graphics) y visualizar a continuacin la ventana de dilogo Save As (guardar como...). (d) Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin en el campo File name (nombre del archivo) y pulse Save (guardar). Aparecer en pantalla la ventana de dilogo de sincronizacin del inicio (Sync Start). (e) Aada su reactivo activo justo antes de que la cuenta atrs (Count Down) llegue a 0:00, o inicie el proceso de obtencin de datos pulsando el botn "OK" (aceptar). Introduzca las concentraciones del sustrato y del inhibidor 19. Una vez iniciada la ejecucin del proceso, introduzca las concentraciones del sustrato y del inhibidor.

Nota

Si durante el proceso de obtencin de datos no se ha introducido ninguna informacin en el formulario de datos del usuario (User Data Form), no se llevar a cabo ningn clculo. (a) Abra el formulario de datos del usuario (User Data Form) haciendo clic con el botn derecho del ratn en un recuadro grfico y seleccionando la opcin User Data Form en la lista correspondiente, o seleccionando la citada opcin en el men Graph (grfico). En la tabla que aparecer habr nombres de datos (Data Names) y es posible que haya valores de V0 en las dos primeras columnas. Introduzca sus valores de [S] y [I], en moles/l, en la tercera y cuarta columnas. Pulse "OK" (aceptar). Sus valores de [S] y [I] estarn ya listos para poder ser utilizados en los clculos, y el sistema Cary realizar stos ltimos al final del proceso.

(b)

(c)

3-63

Cary WinUV

3.8

Fabric Protection
En la presente seccin se describe el siguiente procedimiento: u Cmo realizar un barrido utilizando el Cary 100/300/400/500 (normas australianas/neozelandesas)

3.8.1 Cmo realizar un barrido utilizando el Cary 100/300/400/500 (normas australianas/neozelandesas)


1. 2. En el men de opciones (Options), seleccione Australian (normas australianas) y el nmero de muestras que vayan a probarse. Haga clic en el botn Sample Info. (informacin sobre la muestra). Introduzca toda la informacin pertinente en el dilogo de informacin sobre la muestra y haga clic en OK (aceptar). Seleccione el men de configuracin (Setup) para visualizar el dilogo de configuracin. Seleccione la opcin 'Report Graph' (grfico en el informe) si desea que aparezcan grficos en el informe. Seleccione la opcin 'Report XY Table' (tabla XY en el informe) para que aparezca los pares de datos XY en el informe. Seleccione 'Storage on (prompt at start)' (almacenamiento activado (solicitar al inicio)) para guardar los datos. Haga clic en el botn "Baseline" (lnea base) y siga las instrucciones proporcionadas por el ordenador para obtener barridos de lnea base 100%T y 0%T. Primera medicin (posicin 1, 0): (a) Haga clic en el botn Scan (barrer). El sistema le solicitar que seleccione las opciones de guardado de los datos. (b) Seleccione un nombre y un tipo de archivo y haga clic en Save (guardar). En pantalla aparecer un dilogo indicando la Norma Internacional as como el nmero de muestra y medicin. El sistema le solicitar que coloque la muestra a 0 (en la posicin 1). Tendr usted adems la posibilidad de modificar el nombre del barrido. (c) Para probar la muestra de tela, deslice el portamuestras fuera del accesorio y coloque la muestra en l.

3.

4.

Barrido de la muestra 1 5.

3-64

Cary WinUV

6.

7.

Vuelva a deslizar el portamuestras hasta su posicin original, coloque de nuevo las tapas en su sitio y haga clic en OK (aceptar) para realizar la prueba. Segunda medicin (posicin 2, 90): (a) En pantalla aparecer un dilogo como el anterior, indicando el nuevo nmero de medicin para la muestra 1. El sistema le solicitar que coloque su muestra a 90 (en la posicin 2). Tendr usted adems la posibilidad de modificar el nombre del barrido. (b) Para probar la muestra en la posicin 2, deslice el portamuestras fuera del accesorio y gire la muestra 90 con respecto a la posicin original de medicin. (c) Vuelva a deslizar el portamuestras hasta su posicin original, coloque de nuevo las tapas en su sitio y haga clic en OK (aceptar) para realizar la prueba. El proceso continuar hasta que se haya barrido el nmero de muestras seleccionado en el men de opciones (Options), en el paso 1.

(d)

3.9

Kinetics
En la presente seccin se describen los siguientes procedimientos: u Cmo realizar un anlisis de velocidad nica, a mltiples longitudes de onda, con una nica cubeta, utilizando la aplicacin Kinetics (con el Cary 100500). Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando la aplicacin Kinetics y el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100500). Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando la aplicacin Kinetics (con el Cary 50).

3.9.1 Cmo realizar un anlisis de velocidad nica, a mltiples longitudes de onda, con una nica cubeta, utilizando la aplicacin Kinetics (con el Cary 100500)
En la presente seccin se indica cmo realizar un anlisis de velocidad nica, a mltiples longitudes de onda, con una nica cubeta, utilizando la aplicacin Kinetics a temperatura ambiente (con el Cary 100, 300, 400 y 500).

3-65

Cary WinUV

Inicie la aplicacin Kinetics 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Kinetics en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Kinetics. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Kinetics situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Kinetics. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el ancho de banda espectral, el modo de las Y, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) Seleccione la ventana de Cary. (b) En el campo Wavelength (longitud de onda), introduzca las longitudes de onda que desee monitorizar. (c) En el campo SBW (ancho de banda espectral), introduzca el ancho de banda espectral requerido. (d) En el campo Ave Time (tiempo de integracin), introduzca el valor requerido. (e) Seleccione el modo de ordenadas que desee. Haga clic en Abs para especificar el modo de absorbancia o en "%T" para especificar el modo de porcentaje de transmitancia. (f) Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas.

3-66

Cary WinUV

(g)

Seleccione el modo de abscisas (X) que desee. Haga clic en Min para especificar el tiempo en minutos o en "Sec" para especificarlo en segundos.

Configure los parmetros tales como el nmero de velocidades de reaccin diferentes, la velocidad y la duracin del proceso de obtencin de datos 7. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) Seleccione el botn radial Simple Collect (obtencin simple) en el grupo Collect Timing (tiempos de obtencin de datos). De dicha forma establecer un velocidad nica para su reaccin. (b) Especifique el tiempo que deber esperar el instrumento Cary despus de leer cada cubeta antes de comenzar un nuevo ciclo de lectura, estableciendo la duracin del ciclo (Cycle time). (c) Especifique la duracin de la sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics estableciendo el tiempo de parada (Stop time). Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options). (b) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de un proceso de obtencin de datos. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til cuando est ejecutndose la aplicacin Kinetics por la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. (c) Haga clic en el botn radial UV/Vis si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso. (d) Introduzca las longitudes de onda que desee para el cambio de la fuente (Source Changeover) y el del detector (Detector Changeover) en los campos correspondientes (slo en el caso del Cary 500). (e) Establezca la altura de la rendija de salida del monocromador como altura completa o reducida (slo en los casos del Cary 400 y 500). (f) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial 3-67

Configure las opciones de las lmparas y los grficos 8.

Cary WinUV

'Individual Data' (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en recuadros grficos individuales. Elija el botn radial 'Overlay Data' (datos superpuestos) para visualizar los datos obtenidos a partir de todas las muestras, superpuestos en un nico recuadro grfico. Configure los accesorios 9. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios Seleccione la ventana de accesorios (Accesories) y asegrese de que no hay seleccionado ningn accesorio.

Configure el clculo y orden de la velocidad y otros parmetros relacionados con la misma 10. Dilogo de configuracin | Ventana analizar (a) Seleccione la ventana analizar (Analyze). (b) Seleccione la casilla de verificacin Auto Calculate (calcular automticamente) para realizar de forma automtica un clculo de la velocidad de la reaccin a partir de los datos obtenidos, al final de cada sesin de ejecucin de la aplicacin. (c) Seleccione Simple Calculate (clculo simple) para especificar un solo clculo de la velocidad de la reaccin para toda la sesin de ejecucin de la aplicacin. (d) Especifique los tiempos de inicio (Start) y parada (Stop) de la reaccin de la reaccin y seleccione el orden de la reaccin. (e) Si selecciona un clculo simple de la velocidad de la reaccin de 'primer orden' o de 'segundo orden', podr utilizar el grupo Manual Guess (suposicin manual) para introducir los parmetros: A0, AInf y k. Se supone que tendr usted una idea razonable de los valores de los citados parmetros de ajuste, ya que dichos valores sern utilizados como un primer punto de partida para el anlisis de regresin no lineal de Marquardt.

Nota

Si no elige la suposicin manual, el sistema Cary calcular automticamente los valores de A0, AInf y k cuando pulse el botn "Start" (inicio). (f) Introduzca un valor en el campo Factor para calcular la actividad enzimtica. El citado factor numrico de multiplicacin ser aplicado a la absorbancia.

3-68

Cary WinUV

(g)

(h)

Si est llevando a cabo una reaccin de segundo orden, introduzca la concentracin inicial del sustrato antes de la reaccin. Seleccione 'Display Fit' (visualizar el ajuste) para superponer de forma automtica las lneas de ajuste ptimo calculadas a los datos representados grficamente.

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 11. Dilogo de configuracin | Ventana de informes Seleccione la ventana de informes (Reports) y especifique los requisitos de los informes para este mtodo. (a) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (b) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (c) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener de forma automtica una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters' (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph' (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (d) Marque 'Include X-Y Pairs Table' (incluir la tabla de pares de valores X-Y) para visualizar una lista de los valores de las abscisas y sus correspondientes valores de ordenadas. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

(e)

3-69

Cary WinUV

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 12. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana Auto Store (almacenamiento automtico) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione 'Storage Off' (almacenamiento desactivado). El mtodo, los datos obtenidos y el informe no sern guardados. Configure la monitorizacin visual del sistema 13. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 14. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Ponga a cero el instrumento 15. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). En pantalla aparecer la ventana de dilogo Loading Guide (gua de carga). (b) Si lo desea, modifique el nombre de la muestra en blanco. (c) Coloque la solucin en blanco en el compartimento para muestras y haga clic en OK (aceptar). El sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento con las soluciones en blanco. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics 16. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics: (a) Pulse el botn de inicio ("Start") de la aplicacin para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). No aada su reactivo activo en este momento. El sistema visualizar la ventana de dilogo Loading Guide (gua de carga). (b) Si lo desea, modifique el nombre de la muestra.

3-70

Cary WinUV

(c)

(d)

Coloque la solucin de la muestra en el soporte delantero para cubetas y haga clic en OK (aceptar). El sistema configurar el rea de grficos (Graphics) y, a continuacin, visualizar la ventana de dilogo de sincronizacin del inicio (Sync Start). Aada su reactivo activo justo antes de que la cuenta atrs (Count Down) llegue a 0:00, o inicie el proceso de obtencin de datos pulsando el botn "OK" (aceptar). El sistema Cary comenzar el proceso de obtencin de datos.

Guarde sus datos 17. Para guardar sus datos: (a) Haga clic en el men File (archivo) y seleccione Save Data As (guardar los datos como...). (b) Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics en el campo File name (nombre del archivo). (c) Pulse Save (guardar). Los datos se guardarn en forma de un archivo de secuencia.

3.9.2 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando la aplicacin Kinetics y el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100500)
En la presente seccin se indica cmo realizar un anlisis multivelocidad, multicubeta, con la aplicacin Kinetics, a 37 C, utilizando el accesorio controlador de temperatura y el accesorio de soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100, 300, 400 y 500). Inicie la aplicacin Kinetics 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Kinetics en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Kinetics.

3-71

Cary WinUV

(De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Kinetics situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Kinetics. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure el accesorio de soporte para mltiples cubetas con correccin multicero 6. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios Dado que algunas opciones no son utilizables hasta que no hayan sido seleccionados los accesorios apropiados, deber empezar por seleccionar tales accesorios. (a) (b) Seleccione la ventana de accesorios (Accesories). Seleccione la casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar cambiador de cubetas) para habilitar el citado accesorio. En el caso de los instrumentos Cary 100/300, elija el tipo de soporte para mltiples cubetas que vaya a utilizar (6 x 6 u 8 x 6). Asegrese de que el accesorio est instalado antes de comenzar la sesin. Elija el botn radial 'Select Cells' (seleccionar cubetas) y seleccione las cubetas que desee entre las disponibles en el grupo Use Cells (utilizar cubetas). Para los anlisis de haz frontal, seleccione las casillas de verificacin Cubeta (Cell) 1 a Cubeta 6 (6 x 6) o Cubeta 1 a Cubeta 8 (8 x 6). As podr asegurarse de que todas las posiciones correspondientes a las cubetas frontales en el soporte para mltiples cubetas sern medidas durante el anlisis.

(c)

(d) (e)

3-72

Cary WinUV

(f) (g)

Marque la casilla de verificacin 'Multi Zero' (multicero) para activar el sistema de correccin multicero. Asegrese de que la casilla de verificacin Blank Correction (correccin del blanco) no est marcada.

Configure los accesorios para el control de la temperatura de la reaccin y la visualizacin de la temperatura 7. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios (a) Si no va a utilizar un accesorio controlado Peltier (por ej., el accesorio 8 x 6 termostatizado con agua), asegrese de que est instalado el accesorio controlador de temperatura antes de comenzar el anlisis, y: (i) Seleccione Automatic Temperature Setting (ajuste automtico de la temperatura) y el controlador de temperatura para habilitar el accesorio. (ii) Establezca la temperatura de monitorizacin introduciendo un valor de 36 C como temperatura del bloque (Block). (El dispositivo de monitorizacin se selecciona en el paso 8 (e)). (b) En el grupo Temperature Display (visualizacin de la temperatura), seleccione 'Block' (bloque) y 'Probe 1' (sonda 1) para activar la monitorizacin del bloque del soporte para mltiples cubetas y una sonda de temperatura.

Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el ancho de banda espectral, el modo de las Y, etc. 8. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary Seleccione la ventana de Cary y especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis. (a) Introduzca la longitud de onda (Wavelength), el ancho de banda espectral (SBW) y el tiempo de integracin (Ave Time) que desee en los campos correspondientes. Seleccione el modo de ordenadas que desee. Haga clic en Abs para especificar el modo de absorbancia o en %T para especificar el modo de porcentaje de transmitancia. Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. Seleccione el modo de abscisas (X) que desee. Haga clic en Min para especificar el tiempo en minutos o en "Sec" para especificarlo en segundos.

(b)

(c)

(d)

3-73

Cary WinUV

(e)

Elija el dispositivo de monitorizacin de la temperatura deseado en el campo Monitor. El botn "Start" (inicio) no se habilitar hasta que la temperatura del monitor seleccionado difiera en menos de 0,5 C de la temperatura del bloque establecida en la ventana de accesorios (Paso 7 (a) (ii)).

Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el ancho de banda espectral, el modo de las Y, etc. 9. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary Seleccione el botn radial Advanced Collect (obtencin avanzada de datos) en el grupo Collect Timing (tiempos de obtencin de datos). Ello le permitir establecer diferentes procedimientos de obtencin de datos para las mltiples velocidades de su reaccin.

Nota

El sistema de obtencin avanzada de datos le permitir obtener los datos de forma ms frecuente durante las etapas cruciales de su reaccin y obtenerlos de forma menos frecuente durante las etapas en que usted sepa que no va a haber mucha actividad. (a) Introduzca el nmero de velocidades de reaccin diferentes que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo del citado campo. Modifique el nmero de puntos de datos obtenidos por cubeta y sesin, estableciendo el tiempo de permanencia (Dwell time) para cada etapa de velocidad. Especifique el tiempo que deber esperar el instrumento Cary despus de leer cada cubeta antes de comenzar un nuevo ciclo de lectura, ajustando para ello la duracin del ciclo (Cycle Time) para cada etapa de velocidad. Especifique la duracin de la sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics estableciendo el tiempo de parada (Stop time) para cada etapa de velocidad.

(b)

(c)

(d)

Configure las opciones de las lmparas y los grficos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options). (b) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de las lecturas. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas.

3-74

Cary WinUV

(c) (d)

(e)

(f)

Resulta especialmente til cuando est ejecutndose la aplicacin Kinetics por la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. Haga clic en el botn radial UV/Vis si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso. Introduzca las longitudes de onda que desee para el cambio de la fuente (Source Changeover) y el del detector (Detector Changeover) en los campos correspondientes (slo en el caso del Cary 500). Establezca la altura de la rendija de salida del monocromador como altura completa o reducida (slo en los casos del Cary 400 y 500). En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial 'Individual Data' (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en recuadros grficos individuales. Elija el botn radial 'Overlay Data' (datos superpuestos) para visualizar los datos obtenidos a partir de todas las muestras, superpuestos en un nico recuadro grfico.

Configure el clculo y orden de la velocidad y otros parmetros relacionados con la misma 11. Dilogo de configuracin | Ventana analizar (a) Seleccione la ventana analizar (Analyze). (b) Seleccione la casilla de verificacin Auto Calculate (calcular automticamente) para realizar de forma automtica un clculo de la velocidad de la reaccin a partir de los datos obtenidos, al final de cada sesin de ejecucin de la aplicacin. (c) Seleccione Advanced Calculate (clculo avanzado) para establecer mltiples clculos de la velocidad durante la sesin. (d) Introduzca el nmero de clculos diferentes de la velocidad que necesite en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. (e) Establezca los tiempos de inicio (Stage Start) y parada (Stop) de cada etapa y seleccione el orden de reaccin para cada una de las citadas etapas de la reaccin.

3-75

Cary WinUV

Nota

Si selecciona un clculo simple de la velocidad de 'primer orden' o 'segundo orden', podr utilizar el grupo Manual Guess (suposicin manual) para introducir los parmetros: A0, Ainf y k. Se supone que tendr usted una idea razonable de los valores de los citados parmetros de ajuste, ya que dichos valores sern utilizados como punto de partida para el anlisis de regresin no lineal de Marquardt. (f) Introduzca un valor en el campo Factor para calcular la actividad enzimtica. El citado factor numrico de multiplicacin ser aplicado a la absorbancia. Si est llevando a cabo una reaccin de segundo orden, introduzca la concentracin inicial del sustrato antes de la reaccin. Seleccione 'Display Fit' (visualizar el ajuste) para superponer de forma automtica las lneas de ajuste ptimo calculadas sobre los datos representados grficamente.

(g)

(h)

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 12. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener de forma automtica una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters' (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph' (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Marque 'Include X-Y Pairs Table' (incluir la tabla de pares de valores X-Y) para visualizar una lista de los valores de las abscisas y sus correspondientes valores de ordenadas.

3-76

Cary WinUV

(f)

Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 13. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)) para hacer que el sistema Cary le solicite un nombre de archivo antes del inicio de la reaccin. Configure la monitorizacin visual del sistema 14. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 15. Haga clic en "OK" (aceptar) para guardar los cambios que haya introducido y cerrar el dilogo de configuracin (Setup). Ponga a cero el instrumento 16. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). En pantalla aparecer la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (b) Si lo desea, modifique los nombres de las muestras en blanco. (c) Coloque la solucin o soluciones en blanco en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento con las soluciones en blanco.

3-77

Cary WinUV

Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics 17. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics: (a) Pulse el botn de inicio ("Start") de la aplicacin para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). No aada su reactivo activo en este momento. El sistema visualizar la ventana de dilogo Save As (guardar como...). (b) Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics en el campo File name (nombre del archivo) y pulse Save (guardar). El sistema visualizar la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (c) Si lo desea, modifique los nombres de las muestras. (d) Coloque las soluciones de las muestras en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema configurar el rea de grficos (Graphics) y, a continuacin, aparecer la ventana de dilogo de sincronizacin del inicio (Sync Start). (e) Reponga el soporte para mltiples cubetas en la posicin correspondiente a la posicin 1, utilizando el botn Reset Slide (poner la platina en la posicin de partida). (f) Aada su reactivo activo justo antes de que la cuenta atrs (Count Down) llegue a 0:00, o inicie el proceso de obtencin de datos pulsando el botn "OK" (aceptar).

3.9.3 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada, utilizando la aplicacin Kinetics (con el Cary 50)
En la presente seccin se indica cmo realizar un anlisis multivelocidad con una nica cubeta, a 37 C, utilizando la aplicacin Kinetics y el accesorio Peltier de cubeta nica (con el Cary 50). Inicie la aplicacin Kinetics 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Kinetics en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Kinetics.

3-78

Cary WinUV

(De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Kinetics situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Kinetics. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Asegrese de que el accesorio de soporte para mltiples cubetas no est seleccionado 6. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios Dado que algunas opciones no son utilizables hasta que no hayan sido seleccionados los accesorios apropiados, deber empezar por seleccionar tales accesorios. (a) (b) Seleccione la ventana de accesorios (Accesories). Asegrese de que la casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar el cambiador de cubetas) no est seleccionada.

Configure los accesorios para el control de la temperatura de la reaccin y la visualizacin de la temperatura 7. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios (a) En el grupo Temperature (temperatura), marque el ajuste automtico de temperatura (Automatic Temperature Setting) para habilitar el accesorio Peltier de cubeta nica. (b) Establezca la temperatura de monitorizacin introduciendo un valor de 37 C como temperatura del bloque (Block). (c) En el grupo Temperature Display (visualizacin de la temperatura), seleccione Probe 1 (sonda 1) para visualizar las lecturas de una sonda de temperatura en la ventana de visualizacin del estado.

Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el tiempo de integracin, el modo de las X, etc. 8. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary

3-79

Cary WinUV

(a) (b) (c)

(d)

Seleccione la ventana de Cary En el campo Wavelength (longitud de onda), introduzca las longitudes de onda que desee monitorizar. Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. Seleccione el modo de abscisas (X) que desee. Haga clic en Min para especificar el tiempo en minutos o en "Sec" para especificarlo en segundos.

Configure los parmetros tales como el nmero de velocidades de reaccin diferentes, la velocidad y la duracin del proceso de obtencin de datos 9. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) Seleccione el botn radial Advanced Collect (obtencin avanzada de datos) en el grupo Collect Timing (tiempos de obtencin de datos). Ello le permitir establecer diferentes procedimientos de obtencin de datos para las mltiples velocidades de su reaccin.

Nota

El sistema de obtencin avanzada de datos le permitir obtener los datos de forma ms frecuente durante las etapas cruciales de su reaccin y obtenerlos de forma menos frecuente durante las etapas en que usted sepa que no va a haber mucha actividad. (b) Introduzca el nmero de velocidades de reaccin diferentes que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. Especifique el tiempo que deber esperar el instrumento Cary despus de leer cada cubeta antes de comenzar un nuevo ciclo de lectura, ajustando para ello la duracin del ciclo (Cycle Time) para cada etapa de velocidad. Especifique la duracin del proceso de medicin estableciendo para ello el tiempo de parada (Stop) de cada etapa de velocidad.

(c)

(d)

Configure las opciones de visualizacin del proceso de obtencin de datos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options).

3-80

Cary WinUV

(b)

Seleccione el botn radial Individual Data (datos individuales) para visualizar un grfico separado para cada cubeta, o el botn Overlay Data (datos superpuestos) para visualizar todos los resultados en un solo grfico.

Configure el clculo y orden de la velocidad y otros parmetros relacionados con la misma 11. Dilogo de configuracin | Ventana analizar (a) Seleccione la ventana analizar (Analyze). (b) Seleccione la casilla de verificacin Auto Calculate (calcular automticamente) para realizar de forma automtica un clculo de la velocidad de la reaccin a partir de los datos obtenidos, al final de cada sesin de ejecucin de la aplicacin. (c) Seleccione Advanced Calculate (clculo avanzado) para establecer mltiples clculos de la velocidad de la reaccin durante la sesin de ejecucin de Kinetics. (d) Introduzca el nmero de clculos diferentes de la velocidad que necesite en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. (e) Establezca los tiempos de inicio (Stage Start) y parada (Stop) de cada etapa y seleccione el orden de reaccin para cada una de las etapas de la reaccin.

Nota

Si selecciona un clculo simple de la velocidad de 'primer orden' o 'segundo orden', podr utilizar el grupo Manual Guess (suposicin manual) para introducir los parmetros: A0, Ainf y k. Se supone que tendr usted una idea razonable de los valores de los citados parmetros de ajuste, ya que dichos valores sern utilizados como punto de partida para el anlisis de regresin no lineal de Marquardt. Si no elige la suposicin manual, el sistema Cary calcular automticamente los valores de A0, AInf y k cuando se pulse el botn "Start" (inicio). (f) Introduzca un valor en el campo Factor para calcular la actividad enzimtica. El citado factor numrico de multiplicacin ser aplicado a la absorbancia. Si est llevando a cabo una reaccin de segundo orden, introduzca la concentracin inicial del sustrato antes de la reaccin.

(g)

3-81

Cary WinUV

(h)

Seleccione 'Display Fit' (visualizar el ajuste) para superponer de forma automtica las lneas de ajuste ptimo calculadas sobre los datos representados grficamente.

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 12. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener de forma automtica una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters' (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph' (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Marque 'Include X-Y Pairs Table' (incluir la tabla de pares de valores X-Y) para visualizar una lista de los valores de las abscisas y sus correspondientes valores de ordenadas. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

(f)

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 13. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben

3-82

Cary WinUV

(b)

guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitar al inicio)) para hacer que el sistema Cary le solicite la introduccin de un nombre de archivo antes de comenzar la ejecucin de la sesin de la aplicacin Kinetics.

Configure la monitorizacin visual del sistema 14. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 15. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Ponga a cero el instrumento 16. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). En pantalla aparecer la ventana de dilogo Loading Guide (gua de carga). (b) Si lo desea, modifique el nombre de la muestra en blanco. (c) Coloque la solucin en blanco en el compartimento para muestras y haga clic en OK. El sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento con la solucin en blanco. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics 17. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics: (a) Pulse el botn de inicio ("Start") de la aplicacin para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). No aada su reactivo activo en este momento. El sistema visualizar la ventana de dilogo Save As (guardar como...). (b) Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin Kinetics en el campo File name (nombre del archivo) y pulse Save (guardar). El sistema visualizar la ventana de dilogo Loading Guide (gua de carga).

3-83

Cary WinUV

(c) (d)

(e)

Si lo desea, modifique el nombre de la muestra. Coloque la solucin de la muestra en la posicin correcta y haga clic en OK (aceptar). El sistema configurar el rea de grficos (Graphics) y, a continuacin, visualizar la ventana de dilogo de sincronizacin del inicio (Sync Start). Aada su reactivo activo justo antes de que la cuenta atrs (Count Down) llegue a 0:00, o inicie el proceso de obtencin de datos pulsando el botn "OK" (aceptar).

3.10

RNA/DNA
En la presente seccin se describen los siguientes procedimientos: u u Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100-500) Cmo realizar un anlisis utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 50)

3.10.1 Cmo realizar un anlisis a temperatura controlada utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100-500)
En la presente seccin se indica cmo realizar un anlisis multicubeta de ARN-ADN con correccin multicero y correccin mltiple de lnea base, a 37 C, utilizando el accesorio controlador de temperatura y el accesorio de soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100, 300, 400 y 500). Inicie la aplicacin RNA-DNA 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione RNA - DNA en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin RNA-DNA. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin RNA-DNA situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin RNA-

3-84

Cary WinUV

DNA. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure el accesorio de soporte para mltiples cubetas con correccin multicero 6. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 1 Dado que algunas opciones no son utilizables hasta que no hayan sido seleccionados los accesorios apropiados, deber empezar por seleccionar tales accesorios. (a) (b) Seleccione la ventana de accesorios 1 (Accesories 1). Seleccione la casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar el cambiador de cubetas) para habilitar el accesorio en cuestin. En el caso de los instrumentos Cary 100/300, elija el tipo de soporte para mltiples cubetas que vaya a utilizar (6 x 6 u 8 x 6). Asegrese de que el accesorio est instalado antes de comenzar la sesin. Elija el botn radial Select Cells (seleccionar cubetas) y seleccione las cubetas que desee entre las disponibles en el grupo Use Cells (utilizar cubetas). Para los anlisis de haz doble, seleccione las casillas de verificacin Cubeta (Cell) 1 a Cubeta 6 (6 x 6) o Cubeta 1 a 8 (8 x 6). Marque la casilla de verificacin Multi Zero (multicero) para activar el sistema de correccin multicero. El sistema de correccin mltiple de lnea base no ser accesible hasta que no haya dado el paso 8.

(c)

(d) (e)

(f)

3-85

Cary WinUV

Configure los accesorios para el control de la temperatura de la reaccin y la visualizacin de la temperatura 7. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 1 (a) Si no va a utilizar un accesorio controlado Peltier (por ej., el accesorio 8 x 6 termostatizado con agua), asegrese de que est instalado el accesorio controlador de temperatura antes de comenzar el anlisis, y: (i) Marque el ajuste automtico de la temperatura (Automatic Temperature Setting) y seleccione el controlador de temperatura (Temperature Controller), para habilitar el accesorio. (ii) Establezca la temperatura de monitorizacin, fijando la temperatura del bloque en 37 C. (El dispositivo de monitorizacin se selecciona en el paso 8 (d)). (b) En el grupo Temperature Display (visualizacin de la temperatura), seleccione Block (bloque) y Probe 1 (sonda 1) para ver la temperatura del bloque del soporte para mltiples cubetas y una sonda de temperatura en la ventana de visualizacin del estado.

Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, etc. 8. Dilogo de configuracin | Ventanas de Cary y de la lnea base (a) Seleccione la ventana de Cary. (b) Introduzca la primera y la segunda longitud de onda a la que desea medir su(s) muestra(s). (c) Si necesita la correccin de fondo, seleccione la casilla de verificacin de correccin de fondo (Background Correction) e introduzca una longitud de onda de fondo en el campo correspondiente. (d) Elija el dispositivo de monitorizacin de la temperatura deseado en el campo Monitor. El botn "Start" (inicio) no ser utilizable hasta que la temperatura del monitor seleccionado no se encuentre a menos de 0,5 C de la temperatura del bloque establecida en la ventana de accesorios 1 (paso 7, parte (a) (ii)). (e) Para realizar un barrido de longitudes de onda, marque Scan Samples' (barrer muestras). Aparecer la ventana de la lnea base (Baseline). Haga sus selecciones de barrido de

3-86

Cary WinUV

(f)

longitudes de onda en la ventana de Cary y, a continuacin seleccione la ventana de la lnea base. Seleccione Baseline correction (correccin de lnea base). Para utilizar una lnea base previamente almacenada (*.CDN), haga clic en el botn "Baseline..." (lnea base...) y busque el archivo apropiado. En caso alternativo, puede realizar la correccin de lnea base al principio de la sesin. Para realizar una correccin mltiple de lnea base, puede volver a la ventana de accesorios 1 (Accesories 1) y marcar la casilla de verificacin Multi Baseline (mltiples lneas base), que estar ya activada.

Configure las opciones de fuente, ancho de banda espectral y visualizacin 9. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options). (b) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de la obtencin de datos. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til cuando estn obtenindose datos por la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. (c) Haga clic en el botn radial UV/Vis si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso. (d) Introduzca las longitudes de onda que desee para el cambio de la fuente (Source Changeover) y el cambio de detector (Detector Changeover) en los campos correspondientes (slo en el caso del Cary 500). (e) Introduzca el ancho de banda espectral de su instrumento en el campo SBW. (f) Establezca la altura de rendija (Slit Height) apropiada (slo en el caso del Cary 400/500). (g) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial Individual Data (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en un recuadro grfico individual. Elija el botn radial Overlay Data (datos superpuestos) para visualizar los datos obtenidos a partir de todas las muestras en un nico recuadro grfico.

3-87

Cary WinUV

Configure los nombres de las muestras y los incrementos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de muestras (a) Seleccione la ventana de muestras (Samples). La citada ventana le permitir introducir una lista de nombres de muestras, que ser utilizada durante el anlisis. (b) Introduzca el nmero de muestras que vaya a utilizar en el campo Number of Samples (nmero de muestras). La lista de nombres de muestras que aparece debajo se expandir o contraer a la medida de su eleccin. (c) En la lista de nombres de muestras, introduzca el nombre de cada muestra. Puede utilizar hasta 20 caracteres para cada nombre. (d) Anule la seleccin de las muestras que no desee analizar haciendo clic junto a la muestra deseada en la primera columna, con objeto de eliminar la marca roja. (e) Si las muestras tienen el mismo nombre con una extensin numrica diferente, introduzca el nombre de la primera muestra y, a continuacin, pulse el botn "Increment" (incremento). (f) Si desea obtener mltiples lecturas de la misma alcuota, seleccione la casilla de verificacin Replicates (rplicas) e introduzca el nmero de rplicas que desee en el campo de introduccin de datos que aparecer a continuacin. Configure los parmetros del anlisis 11. Dilogo de configuracin | Ventana analizar Seleccione la ventana analizar (Analyze). Si desea que se calculen los parmetros de Warburg Christian o el Factor 260 nm, haga sus selecciones en dicha ventana. Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 12. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione the casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe.

3-88

Cary WinUV

Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Si ha seleccionado Scan Samples (barrer muestras) en la ventana de Cary, seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 13. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)), para hacer que el sistema Cary la solicite un nombre de archivo antes del inicio de la sesin de ejecucin de la aplicacin RNA-DNA. Configure la monitorizacin visual del sistema 14. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 15. Haga clic en "OK" (aceptar) para guardar los cambios que haya introducido y cerrar el dilogo de configuracin (Setup).

3-89

Cary WinUV

Ponga a cero el instrumento 16. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). En pantalla aparecer la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (b) Coloque la solucin o soluciones en blanco en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento con las soluciones en blanco.

Nota

Si ha elegido no utilizar el sistema de correccin multicero en el paso 7 (e), el sistema le solicitar que introduzca una solucin en blanco en el instrumento. En tal caso, es importante que se asegure de que coloca la citada solucin en la posicin que se encuentra en ese momento en el paso de la luz. Al pulsar "OK" (aceptar), el sistema realizar una puesta a cero del instrumento basndose en la solucin situada en el paso de la luz, sin volver a situar el soporte para mltiples cubetas en la posicin 1. Realice una correccin de lnea base (si no est utilizando una lnea base previamente almacenada en memoria) 17. Si ha seleccionado realizar una correccin de lnea base (paso 8 (f)) y no est utilizando una lnea base previamente almacenada en memoria, tome ahora una lectura de la lnea base dando los pasos que se indican a continuacin. En caso contrario, salte al paso 18. (a) Haga clic en el botn "Baseline" (lnea base). Aparecer la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (b) Cargue la o las soluciones en blanco segn lo indicado. (c) Haga clic en OK(aceptar). El sistema obtendr una lnea base para cada cubeta en uso y aparecer la palabra 'Baseline' (lnea base) sobre la lectura del estado de las ordenadas del instrumento. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin RNA-DNA 18. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin:

3-90

Cary WinUV

(a)

(b)

(c)

Pulse el botn "Start" (inicio) para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). El sistema visualizar la ventana de dilogo Save As (guardar como...). Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin RNA-DNA en el campo File name (nombre del archivo) y pulse Save (guardar). El sistema visualizar en pantalla la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). Coloque las soluciones de las muestras en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema empezar entonces a leer las muestras e imprimir los resultados en el rea del informe (Report).

3.10.2 Cmo realizar un anlisis utilizando el soporte para mltiples cubetas (con el Cary 50)
En la presente seccin se describe cmo realizar un barrido multicubeta de longitud de onda, con correccin de lnea base, correccin multicero y correccin mltiple de lnea base (con el Cary 50). Inicie la aplicacin RNA-DNA 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione RNA - DNA en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin RNA-DNA. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin RNA-DNA situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin RNADNA. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo

3-91

Cary WinUV

de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventanas de Cary y de la lnea base (a) Seleccione la ventana de Cary. (b) Introduzca la primera y segunda longitud de onda a las que desea medir su muestra. (c) Si necesita la correccin de fondo, seleccione la casilla de verificacin de correccin de fondo (Background Correction) e introduzca una longitud de onda de fondo en el campo correspondiente. (d) Si est realizando un barrido de longitudes de onda, marque 'Scan Samples' (barrer muestras). Se activar el grupo Display Options (opciones de visualizacin) y aparecer la ventana de la lnea base (Baseline). (e) Introduzca un valor de longitud de onda de inicio (Start) y parada (Stop) y seleccione una velocidad de barrido (Scan Rate). (f) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial Individual Data (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en un recuadro grfico individual. Elija el botn radial Overlay Data (datos superpuestos) para visualizar los datos obtenidos a partir de todas las muestras en un nico recuadro grfico. (g) (h) Seleccione la ventana de la lnea base (Baseline) y marque 'Baseline correction" (correccin de lnea base). Para utilizar una lnea base previamente almacenada en memoria (*.CDN), haga clic en el botn "Baseline..." (lnea base...) y busque el archivo apropiado. En caso alternativo, puede realizar la correccin de lnea base al principio de la sesin.

3-92

Cary WinUV

Configure el accesorio de soporte para mltiples cubetas con correccin multicero 7. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 1 (a) Seleccione la ventana de accesorios 1 (Accesories 1). (b) Seleccione la casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar el cambiador de cubetas) para habilitar el accesorio en cuestin. (c) Asegrese de que el accesorio est instalado antes de comenzar la sesin. (d) Elija el botn radial Select Cells (seleccionar cubetas) y seleccione las cubetas que desee entre las disponibles en el grupo Use Cells (utilizar cubetas). (e) Marque la casilla de verificacin Multi Zero (multicero) para activar el sistema de correccin multicero. (f) Marque la opcin Multi Baseline para activar el sistema de correccin mltiple de lnea base. Dilogo de configuracin | Ventana de muestras (a) Seleccione la ventana de muestras. La citada ventana le permitir introducir una lista de nombres de muestras, que ser utilizada durante el anlisis. (b) Introduzca el nmero de muestras que vaya a utilizar en el campo Number of Samples (nmero de muestras). La lista de nombres de muestras que aparece debajo se expandir o contraer a la medida de su eleccin. (c) En la lista de nombres de muestras, introduzca el nombre de cada muestra. Puede utilizar hasta 20 caracteres para cada nombre. (d) Anule la seleccin de las muestras que no desee analizar haciendo clic junto a la muestra deseada en la primera columna, con objeto de eliminar la marca roja. (e) Si las muestras tienen el mismo nombre con una extensin numrica diferente, introduzca el nombre de la primera muestra y, a continuacin, pulse el botn "Increment" (incremento). (f) Si desea obtener mltiples lecturas de la misma alcuota, seleccione la casilla de verificacin Replicates (rplicas) e introduzca el nmero de rplicas que desee en el campo de introduccin de datos que aparecer a continuacin.

Configure los nombres de las muestras y los incrementos 8.

Configure los parmetros del anlisis

3-93

Cary WinUV

9.

Dilogo de configuracin | Ventana analizar Seleccione la ventana analizar (Analyze). Si desea que se calculen los parmetros Warburg Christian o Factor 260 nm, haga sus selecciones en dicha ventana.

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 10. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione the casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Si ha seleccionado Scan Samples (barrer muestras) en la ventana de Cary, seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 11. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben

3-94

Cary WinUV

(b)

guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)), para hacer que el sistema Cary le solicite un nombre de archivo antes del inicio de la sesin de ejecucin de la aplicacin RNA-DNA.

Configure la monitorizacin visual del sistema 12. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 13. Haga clic en "OK" (aceptar) para guardar los cambios que haya introducido y cerrar el dilogo de configuracin (Setup). Ponga a cero el instrumento 14. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). En pantalla aparecer la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (b) Coloque la solucin o soluciones en blanco en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento con las soluciones en blanco.

Nota

Si ha elegido no utilizar el sistema de correccin multicero en el paso 7 (e), el sistema le solicitar que introduzca una solucin en blanco en el instrumento. En tal caso, es importante que se asegure de que coloca la citada solucin en la posicin que se encuentra en ese momento en el paso de la luz. Al pulsar "OK" (aceptar), el sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento utilizando la cubeta situada en el paso de la luz, sin volver a situar el soporte para mltiples cubetas en la posicin 1.

3-95

Cary WinUV

Obtenga las lneas base (si no est utilizando una lnea base previamente almacenada en memoria) 15. Si ha seleccionado realizar una correccin de lnea base (paso 6 (g)) y no est utilizando una lnea base previamente almacenada en memoria, tome ahora una lectura de las lneas base dando los pasos que se indican a continuacin. En caso contrario, salte al paso 16. (a) Pulse el botn "Baseline" (lnea base) para obtener una lnea base para cada cubeta. Aparecer la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (b) Cargue la o las soluciones en blanco segn lo indicado. (c) Haga clic en OK (aceptar). Al terminar la obtencin de las lneas base, aparecer la palabra 'baseline' (lnea base) en color rojo sobre la lectura del estado de las ordenadas del instrumento. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin RNA-DNA 16. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin: (a) Pulse el botn "Start" (inicio) para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). El sistema visualizar la ventana de dilogo Save As (guardar como...). (b) Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin RNA-DNA en el campo File name (nombre del archivo) y pulse Save (guardar). El sistema visualizar en pantalla la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (c) Coloque las soluciones de las muestras en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). El sistema empezar entonces a leer las muestras e imprimir los resultados en el rea del informe (Report).

3.11

Scan
En la presente seccin se describen los procedimientos siguientes. u u Cmo realizar un barrido con correccin de lnea base (con el Cary 100500) Cmo realizar un barrido en el modo seal/ruido (con el Cary 100-500)

3-96

Cary WinUV

u u

Cmo realizar un barrido en el modo independiente (con el Cary 500) Cmo realizar un barrido con correccin de lnea base (con el Cary 50)

3.11.1 Cmo realizar un barrido con correccin de lnea base (con el Cary 100500)
En la presente seccin se indica cmo realizar un barrido de longitudes de onda desde los 500 hasta los 400 nm, con correccin de lnea base (utilizando el Cary 100, 300, 400, 500). Inicie la aplicacin Scan 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Scan en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Scan. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Scan situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP es posible que el ordenador le solicite que introduzca una contrasea para poder acceder a la aplicacin Scan. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como el modo de las X, el modo de las Y, el intervalo de variacin de la longitud de onda, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary

3-97

Cary WinUV

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

Establezca el modo de abscisas apropiado para el barrido en el campo X Mode (modo de las X), por ejemplo 'nanometers' (nanmetros). Establezca el intervalo de variacin de la longitud de onda para el barrido, introduciendo los valores que desee en los campos Start/Stop (inicio/parada), por ejemplo '500/400'. En el campo Y Mode (modo de las Y), seleccione el modo de las ordenadas en que desea que se visualicen los datos obtenidos, por ejemplo 'Abs' (absorbancia). Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. Establezca la velocidad del proceso de obtencin de datos. Con los instrumentos Cary, lo anterior se consigue estableciendo el tiempo de integracin (Ave Time) y el intervalo de los datos (Data Interval). Introduzca el valor requerido en el campo Ave Time. Un valor de 0,1 segundos representa un buen punto de partida. En el campo Data Interval, introduzca el incremento de longitud de onda que desee entre cada dos puntos de datos. Un valor de 0,5 representa un buen punto de partida. El sistema Cary actualizar automticamente el campo Scan Rate (velocidad de barrido) cuando seleccione dicho campo. Asegrese de que no est seleccionado el modo de ciclo (Cycle Mode).

Configure las opciones de ancho de banda espectral, lmparas y grficos 7. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options). (b) Establezca el ancho de banda espectral (SBW) para la sesin. Si est utilizando un Cary 400, seleccione Fixed SBW (ancho de banda espectral fijo). (c) Establezca el modo de haz (Beam Mode) para la sesin. Normalmente se establece el modo de haz doble ('Double'). (d) En el caso del Cary 500, no establezca el nivel de energa (Energy). El sistema utilizar un ancho de banda espectral fijo y modificar automticamente el nivel de energa con objeto de mantener un nivel de seal constante. (e) En el caso del Cary 400/500, establezca una altura de rendija (Slit Height) completa ('Full').

3-98

Cary WinUV

(f)

8.

Haga clic en el botn "UV/Vis" si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante la sesin. (g) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de las lecturas. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til para realizar barridos durante la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. (h) No seleccione la casilla de verificacin Signal-to-Noise Mode (modo seal/ruido). (i) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial 'Individual Data' (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en recuadros grficos individuales. Elija el botn radial 'Overlay Data' (datos superpuestos) para representar superpuestos los datos obtenidos a partir de todas las muestras en un nico recuadro grfico. Dilogo de configuracin | Ventana del modo independiente Si est utilizando un Cary 500, no modifique ninguna de las opciones de la citada ventana.

Configure la correccin de lnea base 9. Dilogo de configuracin | Ventana de la lnea base (a) Seleccione la ventana de la lnea base (Baseline). (b) Seleccione Baseline Correction (correccin de lnea base). De dicha forma forzar al sistema Cary a realizar una correccin de lnea base aplicada a los datos de la muestra. La correccin se llevar a cabo para cada punto, antes de visualizarlo.

Nota

En esta etapa puede utilizar una lnea base previamente almacenada en memoria. Para hacerlo, pulse el botn "Baseline" (lnea base) y abra el fichero de lnea base CSW previamente guardado que desee. Asegrese de que no hay ningn accesorio seleccionado 10. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 1 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. 11. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 2

3-99

Cary WinUV

Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. 12. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 3 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 13. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes y especifique los requisitos de los informes para este mtodo. (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su muestra en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin AutoPrint (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters' (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph' (grfico) para incluir un grfico en el informe impreso.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando Report (informe) en el men View (ver). (e) Configure la informacin de la tabla de picos. (i) Seleccione Peak Labels (etiquetas de los picos). (ii) Pulse el botn Peak Information (informacin sobre los picos), elija el tipo de etiquetas de los picos (Peak Labels) y su estilo (Peak Style), y establezca el umbral correspondiente (Peak Threshold). Pulse "OK" (aceptar). (iii) Seleccione Maximum Peak (pico mximo) para que el sistema informe sobre el pico con el umbral ms alto que supere el valor del umbral de los picos previamente establecido. (iv) Seleccione All Peaks (todos los picos) para que el

3-100

Cary WinUV

sistema informe sobre todos los picos que cumplan los criterios del estilo de picos elegido y superen el valor del umbral establecido. (f) Configure la informacin sobre los pares de valores X-Y si es necesario. Para ello puede utilizar el intervalo de datos real, utilizado para la obtencin de los datos, o hacer que el sistema Cary interpole los puntos de acuerdo con un nuevo intervalo. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

(g)

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 14. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)). Configure la monitorizacin visual del sistema 15. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 16. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin.

3-101

Cary WinUV

Ponga a cero el instrumento 17. Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). Mida una lnea base 18. Para medir una lnea base: (a) Haga clic en el botn "Baseline" (lnea base), para establecer un sistema de obtencin de la lnea base. De forma alternativa, puede seleccionar Baseline en el men Commands (comandos). (b) Cuando el ordenador se lo solicite, introduzca la muestra en blanco en el compartimento para muestras del haz frontal y pulse "OK" (aceptar). El sistema Cary obtendr el barrido de la lnea base. A continuacin, aparecer la palabra 'baseline' (lnea base) en la ventana de estado de las ordenadas, indicando que el instrumento se encuentra en el modo de correccin de lnea base y que dispone de un archivo de lnea base vlido para la correccin.

Nota

Si la palabra 'baseline' aparece en cursivas y de color gris, el archivo de lnea base sigue siendo vlido. El citado color gris y las cursivas indican que el sistema se encuentra en ese momento fuera del intervalo de variacin de las abscisas especificado en el archivo de lnea base. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Scan 19. Haga clic en el botn de inicio (Start) de la aplicacin para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa, seleccione Start en el men Commands (comandos). Configure el nombre del archivo para los datos y el nombre de la muestra 20. Para establecer un nombre de archivo: (a) Una vez pulsado el botn "Start" (inicio), aparecer el dilogo de Windows "Save As" (guardar como...). Introduzca el nombre apropiado del archivo para los datos y pulse Save (guardar) (b) A continuacin aparecer el dilogo del nombre de la muestra. Introduzca el nombre apropiado para su muestra y pulse "OK" (aceptar). Ese ser el nombre con que se visualizar e imprimir el grfico.

3-102

Cary WinUV

Comenzar la sesin de ejecucin de la aplicacin Scan y en el rea de grficos (Graphics) aparecer el grfico corregido. Al final de la sesin, el sistema Cary crear el informe correspondiente y lo imprimir, si se la seleccionado la opcin 'AutoPrint' (impresin automtica) en la ventana de informes del dilogo de configuracin.

3.11.2 Cmo realizar un barrido en el modo seal/ruido (con el Cary 100-500)


En la presente seccin se indica cmo realizar un barrido de longitudes de onda de 500 a 400 nm, en el modo seal/ruido (con el Cary 100, 300, 400, 500). Inicie la aplicacin Scan 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Scan en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Scan. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Scan situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP es posible que el ordenador le solicite que introduzca una contrasea para poder acceder a la aplicacin Scan. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup (Configuracin) en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como el modo de las X, el modo de las Y, el intervalo de variacin de la longitud de onda, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary

3-103

Cary WinUV

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(g)

Establezca el modo de abscisas apropiado para el barrido en el campo X Mode (modo de las X), por ejemplo 'nanometers' (nanmetros). Establezca el intervalo de variacin de la longitud de onda para el barrido, introduciendo los valores que desee en los campos Start/Stop (inicio/parada), por ejemplo '500/400'. En el campo Y Mode (modo de las Y), seleccione el modo de ordenadas en que desee que se visualicen los datos obtenidos, por ejemplo Abs (absorbancia). Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. Si los datos se salen de la zona visualizada, podr utilizar el botn Autoscale (escala automtica) durante el proceso de obtencin de datos, para escalar automticamente la visualizacin. A continuacin necesitar establecer la velocidad del proceso de obtencin de datos. Con los instrumentos Cary, lo anterior se consigue estableciendo el tiempo de integracin (Ave Time) y el intervalo de los datos (Data Interval). En el campo Ave Time introduzca el valor requerido. Un valor de 0,1 segundos representa un buen punto de partida. En el campo Data Interval, introduzca el incremento de longitud de onda que desee entre cada dos puntos de datos. Un valor de 0,5 representa un buen punto de partida. El sistema Cary actualizar automticamente el campo Scan Rate (velocidad de barrido) cuando seleccione dicho campo. Asegrese de que no est seleccionado el modo de ciclo (Cycle Mode).

Configure las opciones de ancho de banda espectral, lmparas y grficos 7. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options). (b) Si est utilizando un Cary 400, seleccione Fixed SBW (ancho de banda espectral fijo). (c) Si est utilizando un Cary 100, 300 500, establezca el ancho de banda espectral (SBW) para la sesin. Si su mtodo no especifica ningn ancho de banda espectral determinado, 2 nm es un buen punto de partida.

3-104

Cary WinUV

8.

Establezca el modo de haz (Beam Mode) para la sesin. Normalmente se establece el modo de haz doble ('Double'). (e) Si est utilizando un Cary 500, no establezca ningn nivel de energa (Energy). El sistema Cary utilizar un ancho de banda espectral fijo y modificar automticamente el nivel de energa para mantener un nivel de seal constante. (f) Si est utilizando un Cary 400/500, establezca la altura de rendija (Slit Height) completa ('Full'). (g) Haga clic en el botn "UV/Vis" si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso. (h) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de las lecturas. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til para realizar barridos durante la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. (i) Marque la casilla de verificacin Signal-to-Noise Mode (modo de seal/ruido), y establezca los valores requeridos de Acceptable S/N (relacin seal/ruido aceptable) y S/N Timeout (intervalo de espera de la relacin seal ruido), por ejemplo: 1.000 y 1 segundo. (j) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial 'Individual Data' (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en recuadros grficos individuales. Elija el botn radial 'Overlay Data' (datos superpuestos) para representar superpuestos los datos obtenidos a partir de todas las muestras en un nico recuadro grfico. Dilogo de configuracin | Ventana del modo independiente (a) Asegrese de que no est marcada la opcin de control independiente (Independent Control). (b) Establezca el modo de medicin (Measurement Mode) automtico (Auto). Dilogo de configuracin | Ventana de la lnea base (a) Seleccione la ventana de la lnea base (Baseline). (b) Seleccione Baseline Correction (correccin de lnea base). De dicha forma forzar al sistema Cary a realizar una

(d)

Configure la correccin de lnea base 9.

3-105

Cary WinUV

correccin de lnea base aplicada a los datos de la muestra. La correccin se llevar a cabo para cada punto, antes de visualizarlo.

Nota

En esta etapa puede utilizarse una lnea base previamente almacenada en memoria. Para hacerlo, pulse el botn "Baseline" (lnea base) y abra el fichero de lnea base CSW previamente guardado que desee. Asegrese de que no hay ningn accesorio seleccionado 10. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 1 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. 11. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 2 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. 12. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 3 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 13. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports) y especifique los requisitos de los informes para este mtodo. (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin AutoPrint (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters' (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph' (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo

3-106

Cary WinUV

ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Configure la informacin de la tabla de picos. (i) Seleccione Peak Labels (etiquetas de los picos). (ii) Pulse el botn Peak Information (informacin sobre los picos), elija el tipo de etiquetas de los picos (Peak Labels) y su estilo (Peak Style), y establezca el umbral correspondiente (Peak Threshold). Pulse "OK" (aceptar). (iii) Seleccione Maximum Peak (pico mximo) para que el sistema informe sobre el pico con el umbral ms alto que supere el valor del umbral de los picos previamente establecido. (iv) Seleccione All Peaks (todos los picos) para que el sistema informe sobre todos los picos que cumplan los criterios del estilo de picos elegido y superen el valor del umbral establecido. Configure la informacin sobre los pares de valores X-Y si es necesario. Para ello puede utilizar el intervalo de datos real, utilizado para la obtencin de los datos, o hacer que el sistema Cary interpole los puntos de acuerdo con un nuevo intervalo. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

(f)

(g)

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 14. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at End) (almacenamiento activado (solicitud al final)).

3-107

Cary WinUV

Configure la monitorizacin visual del sistema 15. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 16. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Ponga a cero el instrumento 17. Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). Mida una lnea base 18. Para medir una lnea base: (a) Haga clic en el botn "Baseline" (lnea base), para establecer un sistema de obtencin de la lnea base. De forma alternativa, puede seleccionar Baseline en el men Commands (comandos). (b) Cuando el ordenador se lo solicite, introduzca la muestra en blanco en el compartimento para muestras del haz frontal y pulse "OK" (aceptar). El sistema Cary obtendr el barrido de la lnea base. A continuacin, aparecer la palabra 'baseline' (lnea base) en la ventana de estado de las ordenadas, indicando que el instrumento se encuentra en el modo de correccin de lnea base y que dispone de un archivo de lnea base vlido para la correccin.

Nota

Si la palabra 'baseline' aparece en cursivas y de color gris, el archivo de lnea base sigue siendo vlido. El citado color gris y las cursivas indican que el sistema se encuentra en ese momento fuera del intervalo de variacin de las abscisas especificado en el archivo de lnea base. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Scan 19. Haga clic en el botn de inicio (Start) de la aplicacin para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos).

3-108

Cary WinUV

Configure el nombre de la muestra 20. Una vez haya pulsado el botn "Start", aparecer el dilogo del nombre de la muestra (Sample Name). Introduzca el nombre apropiado para su muestra y pulse "OK" (aceptar). Comenzar la sesin de ejecucin de la aplicacin Scan y en el rea de grficos (Graphics) aparecer el grfico corregido. Si para un punto determinado no es posible conseguir la relacin seal/ruido aceptable en el intervalo de espera establecido, el sistema Cary obtendr dicho punto como un punto normal (utilizando el intervalo de espera como tiempo de integracin) y visualizar el mensaje "SNR Timeout" (intervalo de espera de la relacin seal/ruido) en el rea de estado del hardware. Guarde los datos obtenidos 21. Cuando el sistema haya medido la muestra, aparecer la ventana de dilogo Save As (guardar como...). Introduzca el nombre apropiado para su muestra y pulse Save (guardar). El sistema generar a continuacin el informe correspondiente y lo imprimir, si se ha seleccionado la opcin de impresin automtica ('AutoPrint') en la ventana de informes del dilogo de configuracin.

3.11.3 Cary 500)

Cmo realizar un barrido en el modo independiente (con el


En la presente seccin se indica cmo realizar un barrido de longitudes de onda de 2.200 a 400 nm en el modo independiente (slo en el caso del Cary 500). Inicie la aplicacin Scan 1. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. 2. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. 3. Seleccione Scan en el men de Cary WinUV. 4. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Scan. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Scan situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP es posible que el ordenador le solicite que introduzca una contrasea para poder acceder a la aplicacin Scan. 3-109

Cary WinUV

Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Haga clic en el botn Setup (configuracin) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior:

Configure los parmetros del instrumento tales como el modo de las X, el modo de las Y, el intervalo de variacin de la longitud de onda, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) Establezca el modo de abscisas apropiado para el barrido en el campo X Mode (modo de las X), por ejemplo 'nanometers' (nanmetros). (b) Establezca el intervalo de variacin de la longitud de onda para el barrido, introduciendo los valores que desee en los campos Start/Stop (inicio/parada), por ejemplo 2.200/400. (c) En el campo Y Mode (modo de las Y), seleccione el modo de ordenadas en que desee que se visualicen los datos obtenidos, por ejemplo Abs (absorbancia). (d) Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. Si los datos se salen del intervalo de variacin representado en la visualizacin, durante el proceso de obtencin de los mismos, podr utilizar el botn "Autoscale" (escala automtica) para escalarlos de forma automtica. (e) No establezca ningn valor para los controles del barrido, tal como el tiempo de integracin (Ave Time) o el intervalo de los datos (Data Interval), dado que la configuracin en el modo independiente no los tendr en cuenta. (f) Asegrese de que no est seleccionado el modo de ciclo (Cycle Mode).

Configure las opciones de ancho de banda espectral, lmparas y grficos 7. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options). (b) No establezca ningn ancho de banda espectral (SBW) ni ningn nivel de energa (Energy), dado que la configuracin en el modo independiente no los tendr en cuenta.

3-110

Cary WinUV

(c) (d) (e) (f)

(g)

Establezca el modo de haz (Beam Mode) para la sesin. Normalmente se establece el modo de haz doble ('Double'). Establezca la altura de rendija (Slit Height) completa ('Full'). Haga clic en el botn "UV/Vis" si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso. Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de las lecturas. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til para realizar barridos durante la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial 'Individual Data' (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en recuadros grficos individuales. Elija el botn radial 'Overlay Data' (datos superpuestos) para representar superpuestos los datos obtenidos a partir de todas las muestras en un nico recuadro grfico.

Configure los controles del nivel de la seal (ancho de banda espectral, energa) para el barrido 8. Dilogo de configuracin | Ventana del modo independiente (a) Seleccione la ventana del modo independiente (Independent Mode). (b) Marque la casilla de verificacin 'Independent Control (control independiente). (c) Seleccione el modo de medicin (Measurement Mode) automtico (Auto). De dicha forma, el sistema Cary utilizar un ancho de banda espectral fijo en la regin del UV-Vis y un nivel de energa fijo en la regin del IR prximo. (d) En el grupo UV-Vis, establezca los parmetros que necesite en la regin del UV-Vis. Unos buenos puntos de partida son los siguientes: tiempo de integracin (Ave Time) = 0,1, intervalo de los datos (Data Interval) = 1, velocidad de barrido (Scan Rate) = 600, ancho de banda espectral (SBW) = 2. (e) En el grupo del infrarrojo prximo (NIR), establezca los parmetros que necesite en la regin del IR prximo. Unos buenos puntos de partida son los siguientes: tiempo de 3-111

Cary WinUV

integracin (Ave Time) = 0,1, intervalo de los datos (Data Interval) = 4, velocidad de barrido (Scan Rate) = 2.400, energa (Energy) = 1. Configure la correccin de lnea base 9. Dilogo de configuracin | Ventana de la lnea base (a) Seleccione la ventana de la lnea base (Baseline). (b) Seleccione Baseline Correction (correccin de lnea base). De dicha forma forzar al sistema Cary a realizar una correccin de lnea base aplicada a los datos de la muestra. La correccin se llevar a cabo para cada punto, antes de visualizarlo.

Nota

En esta etapa puede utilizar una lnea base previamente almacenada en memoria. Para hacerlo, pulse el botn "Baseline" (lnea base) y abra el fichero de lnea base CSW previamente guardado que desee. Asegrese de que no hay ningn accesorio seleccionado 10. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 1 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. 11. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 2 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. 12. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 3 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 13. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports) y especifique los requisitos de los informes para este mtodo. (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin AutoPrint (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de

3-112

Cary WinUV

verificacin Parameters' (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph' (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Configure la informacin de la tabla de picos. (i) Seleccione Peak Labels (etiquetas de los picos). (ii) Pulse el botn Peak Information (informacin sobre los picos), elija el tipo de etiquetas de los picos (Peak Labels) y su estilo (Peak Style), y establezca el umbral correspondiente (Peak Threshold). Pulse "OK" (aceptar). (iii) Seleccione Maximum Peak (pico mximo) para que el sistema informe sobre el pico con el umbral ms alto que supere el valor del umbral de los picos previamente establecido. (iv) Seleccione All Peaks (todos los picos) para que el sistema informe sobre todos los picos que cumplan los criterios del estilo de picos elegido y superen el valor del umbral establecido. Configure la informacin sobre los pares de valores X-Y si es necesario. Para ello puede utilizar el intervalo de datos real, utilizado para la obtencin de los datos, o hacer que el sistema Cary interpole los puntos de acuerdo con un nuevo intervalo. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

(f)

(g)

3-113

Cary WinUV

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 14. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at End) (almacenamiento activado (solicitud al final)). Configure la monitorizacin visual del sistema 15. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 16. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Ponga a cero el instrumento 17. Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). Mida una lnea base 18. Para medir una lnea base: (a) Haga clic en el botn "Baseline" (lnea base) para establecer la obtencin de la lnea base. De forma alternativa, puede seleccionar Baseline en el men Commands (comandos). (b) Cuando el ordenador se lo solicite, introduzca la muestra en blanco en el compartimento para muestras del haz frontal y pulse "OK" (aceptar). El sistema Cary obtendr el barrido de la lnea base. A continuacin, aparecer la palabra 'baseline' (lnea base) en la ventana de estado de las ordenadas, indicando que el instrumento se encuentra en el modo de correccin de lnea base y que dispone de un archivo de lnea base vlido para la correccin.

Nota

Si la palabra 'baseline' aparece en cursivas y de color gris, el archivo de lnea base sigue siendo vlido. El citado color gris y las cursivas indican que el sistema se encuentra en ese momento fuera del

3-114

Cary WinUV

intervalo de variacin de las abscisas especificado en el archivo de lnea base. Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Scan 19. Haga clic en el botn de inicio (Start) de la aplicacin para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). Configure el nombre de la muestra 20. Una vez haya pulsado el botn "Start", aparecer el dilogo del nombre de la muestra (Sample Name). Introduzca el nombre apropiado para su muestra y pulse "OK" (aceptar). Comenzar la sesin de ejecucin de la aplicacin Scan y en el rea de grficos (Graphics) aparecer el grfico corregido. Guarde los datos obtenidos 21. Cuando el sistema haya medido la muestra, aparecer la ventana de dilogo Save As (guardar como...). Introduzca el nombre apropiado para su muestra y pulse Save (guardar). El sistema generar a continuacin el informe correspondiente y lo imprimir, si se ha seleccionado la opcin de impresin automtica ('AutoPrint') en la ventana de informes del dilogo de configuracin.

3.11.4 Cmo realizar un barrido con correccin de lnea base (con el Cary 50)
En la presente seccin se indica cmo realizar un barrido de longitudes de onda de 500 a 400 nm con correccin de lnea base (utilizando el Cary 50). Inicie la aplicacin Scan 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Scan en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Scan. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Scan situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

3-115

Cary WinUV

Nota

Si est utilizando un sistema GLP es posible que el ordenador le solicite que introduzca una contrasea para poder acceder a la aplicacin Scan. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como el intervalo de variacin de la longitud de onda, el modo de las Y, la velocidad de barrido, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) Establezca el intervalo de variacin de la longitud de onda para el barrido, introduciendo los valores que desee en los campos Start/Stop (inicio/parada), por ejemplo '500/400'. (b) En el campo Y Mode (modo de las Y), seleccione el modo de ordenadas en que desee que se visualicen los datos obtenidos, por ejemplo Abs (absorbancia). (c) Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. (d) Asegrese de que no est seleccionado el modo de ciclo (Cycle Mode). (e) Establezca el modo de haz (Beam Mode) para la sesin. El modo en cuestin deber ser el de haz doble ('Dual Beam'). (f) En el grupo Scan Controls (controles del barrido), seleccione Simple (controles simples) y haga clic en uno de los botones de velocidad de barrido. De forma alternativa, puede seleccionar Advanced (controles avanzados) e introducir un tiempo de integracin (Ave Time) y un intervalo de los datos (Data Interval) (el sistema Cary seleccionar a continuacin la velocidad de barrido (Scan Speed)). (g) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial 'Individual Data' (datos individuales) para visualizar los

3-116

Cary WinUV

datos obtenidos a partir de cada muestra en recuadros grficos individuales. Elija el botn radial 'Overlay Data' (datos superpuestos) para representar superpuestos los datos obtenidos a partir de todas las muestras en un nico recuadro grfico. Configure la correccin de lnea base 7. Dilogo de configuracin | Ventana de la lnea base (a) Seleccione la ventana de la lnea base (Baseline). (b) Seleccione Baseline Correction (correccin de lnea base). De dicha forma forzar al sistema Cary a realizar una correccin de lnea base aplicada a los datos de la muestra. La correccin se llevar a cabo para cada punto, antes de visualizarlo.

Nota

En esta etapa puede utilizar una lnea base previamente almacenada en memoria. Para hacerlo, pulse el botn "Baseline" (lnea base) y abra el fichero de lnea base CSW previamente guardado que desee. Asegrese de que no hay ningn accesorio seleccionado 8. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 1 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios 2 Asegrese de que no est seleccionada ninguna opcin de la citada ventana y de que no est instalado ningn accesorio.

9.

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 10. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports) y especifique los requisitos de los informes para este mtodo. (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin AutoPrint (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin 'Parameters' (parmetros) para incluir los parmetros de su mtodo en el informe. Seleccione la

3-117

Cary WinUV

casilla de verificacin Graph' (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando Report (informe) en el men View (ver). (e) Configure la informacin de la tabla de picos. (i) Seleccione Peak Labels (etiquetas de los picos). (ii) Pulse el botn Peak Information (informacin sobre los picos), elija el tipo de etiquetas de los picos (Peak Labels) y su estilo (Peak Style), y establezca el umbral correspondiente (Peak Threshold). Pulse "OK" (aceptar). (iii) Seleccione Maximum Peak (pico mximo) para que el sistema informe sobre el pico con el umbral ms alto que supere el valor del umbral de los picos previamente establecido. (iv) Seleccione All Peaks (todos los picos) para que el sistema informe sobre todos los picos que cumplan los criterios del estilo de picos elegido y superen el valor del umbral establecido. Configure la informacin sobre los pares de valores X-Y si es necesario. Para ello puede utilizar el intervalo de datos real, utilizado para la obtencin de los datos, o hacer que el sistema Cary interpole los puntos de acuerdo con un nuevo intervalo. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

(f)

(g)

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 11. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben

3-118

Cary WinUV

(b)

guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)).

Configure la monitorizacin visual del sistema 12. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 13. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Ponga a cero el instrumento 14. Haga clic en el botn "Zero" (cero) para poner a cero el sistema. Mida una lnea base 15. Para medir una lnea base: (a) Haga clic en el botn "Baseline" (lnea base), para establecer un sistema de obtencin de la lnea base. De forma alternativa, puede seleccionar Baseline en el men Commands (comandos). (b) Cuando el ordenador se lo solicite, introduzca la muestra en blanco en el compartimento para muestras del haz frontal y pulse "OK" (aceptar). El sistema Cary obtendr el barrido de la lnea base. A continuacin, aparecer la palabra 'baseline' (lnea base) en la ventana de estado de las ordenadas, indicando que el instrumento se encuentra en el modo de correccin de lnea base y que dispone de un archivo de lnea base vlido para la correccin.

Nota

Si la palabra 'baseline' aparece en cursivas y de color gris, el archivo de lnea base sigue siendo vlido. El citado color gris y las cursivas indican que el sistema se encuentra en ese momento fuera del intervalo de variacin de las abscisas especificado en el archivo de lnea base.

3-119

Cary WinUV

Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Scan 16. Haga clic en el botn de inicio (Start) de la aplicacin para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). Configure el nombre del archivo para los datos y los nombres de las muestras 17. Para establecer un nombre de archivo: (a) Una vez pulsado el botn "Start" (inicio), aparecer el dilogo de Windows "Save As" (guardar como...). Introduzca el nombre apropiado para la sesin de ejecucin de aplicacin Scan y pulse Save (guardar). (b) A continuacin aparecer el dilogo del nombre de la muestra. Introduzca el nombre apropiado para su muestra y pulse "OK" (aceptar). Comenzar la sesin de ejecucin de la aplicacin Scan y en el rea de grficos (Graphics) aparecer el grfico corregido. Al final de la sesin, el sistema Cary crear el informe correspondiente y lo imprimir, si se ha seleccionado la opcin de impresin automtica ('AutoPrint') en la ventana de informes del dilogo de configuracin.

3.12

Scanning Kinetics
En la presente seccin se describen los siguientes procedimientos de la aplicacin Scanning Kinetics: u Cmo obtener datos utilizando el soporte para mltiples cubetas con control de temperatura (con el Cary 100500)

u Cmo obtener datos (con el Cary 50)

3.12.1 Cmo obtener datos utilizando el soporte para mltiples cubetas con control de temperatura (con el Cary 100500)
En la presente seccin se indica cmo realizar un barrido de longitud de onda multicubeta, multietapa, con correccin de lnea base, entre los 600 y los 500 nanmetros, a 37 C, utilizando el accesorio controlador de temperatura y el accesorio de soporte para mltiples cubetas (con el Cary 100, 300, 400 y 500). Podr usted utilizar los datos obtenidos con el citado procedimiento para crear espectros continuos de cintica, con los que calcular las velocidades de reaccin.

3-120

Cary WinUV

Inicie la aplicacin Scanning Kinetics 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Start para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Scanning Kinetics en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Scanning Kinetics. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Scanning Kinetics situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Scanning Kinetics. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Seleccione el tipo de correccin de lnea base 6. Dilogo de configuracin | Ventana de la lnea base (a) Seleccione la ventana de la lnea base (Baseline). (b) Seleccione el botn radial Baseline correction (correccin de lnea base). De dicha forma forzar al sistema Cary a utilizar un barrido de lnea base para realizar una correccin de lnea base aplicada a los datos de la muestra. La correccin se llevar a cabo para cada punto, antes de visualizarlo.

Nota

En esta etapa puede utilizar una lnea base previamente almacenada en memoria. Para ello, pulse el botn Retrieve Baseline file (recuperar un archivo de lnea base) y abra el archivo *.CSK guardado que desee.

3-121

Cary WinUV

Configure el accesorio de soporte para mltiples cubetas con correccin multicero 7. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios (a) Seleccione la ventana de accesorios (Accesories). (b) Asegrese de que estn instalados los accesorios apropiados antes de comenzar la sesin. (c) Seleccione la casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar el cambiador de cubetas) para habilitar el accesorio de soporte para mltiples cubetas. (d) Si se encuentra disponible la opcin correspondiente, elija el tipo de soporte para mltiples cubetas que vaya a utilizar (6 x 6 u 8 x 6). (e) Elija el botn radial Select Cells (seleccionar cubetas) y seleccione las cubetas que desee entre las disponibles en el grupo Use Cells (utilizar cubetas). Para los anlisis de haz frontal, seleccione las casillas de verificacin Cubeta (Cell) 1Cubeta 6 (6 x 6) o Cubeta 1 Cubeta 8 (8 x 6). De dicha forma se asegurar de que todas las cubetas situadas en las posiciones frontales del soporte para mltiples cubetas sean medidas durante el anlisis realizado con la aplicacin Scanning Kinetics. (f) Marque la casilla de verificacin Multi Zero (multicero) para activar el sistema de correccin multicero.

Configure los accesorios para el control de la temperatura de la reaccin y la visualizacin de la temperatura 8. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios (a) Si no va a utilizar un accesorio controlado Peltier (por ej., el accesorio 8 x 6 termostatizado con agua), asegrese de que est instalado el accesorio controlador de temperatura antes de comenzar la sesin. (b) Marque el ajuste automtico de la temperatura (Automatic Temperature Setting) y seleccione el controlador de temperatura (Temperature Controller), para habilitar el accesorio. (c) Establezca la temperatura de monitorizacin, fijando la temperatura del bloque en 37 C. (El dispositivo de monitorizacin se selecciona en el paso 10 (j)). (d) En el grupo Temperature Display (visualizacin de la temperatura), seleccione Block (bloque) y Probe 1 (sonda 1)

3-122

Cary WinUV

para ver la temperatura del bloque del soporte para mltiples cubetas y una sonda de temperatura en la ventana de visualizacin del estado. Configure los parmetros del instrumento tales como el modo de las X, el modo de las Y, el intervalo de variacin de la longitud de onda, etc. 9. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary Seleccione la ventana de Cary y especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis. (a) (b) Establezca el modo de abscisas apropiado para el barrido en el campo X Mode, por ejemplo: nanmetros (nanometers). Establezca el intervalo de variacin de la longitud de onda para el barrido, introduciendo los valores que desee en los campos Start/Stop (inicio/parada), por ejemplo 500/400. En el campo Y Mode, seleccione el modo de ordenadas que desee. Haga clic en Abs para especificar el modo de absorbancia o en %T para especificar el modo de porcentaje de transmitancia. Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. A continuacin necesitar establecer la velocidad del proceso de obtencin de datos. Con los instrumentos Cary, lo anterior se consigue estableciendo el tiempo de integracin (Ave Time) y el intervalo de los datos (Data Interval). En el campo Ave Time introduzca el valor requerido. Un valor de 0,1 segundos representa un buen punto de partida. En el campo Data Interval, introduzca el incremento de longitud de onda que desee entre cada dos puntos de datos. Un valor de 0,5 nm representa un buen punto de partida. El sistema Cary actualizar automticamente el campo Scan Rate (velocidad de barrido) cuando seleccione dicho campo.

(c)

(d)

(e)

(f)

Configure los parmetros de velocidad de la reaccin tales como el nmero de velocidades de reaccin diferentes, la velocidad y la duracin del proceso de obtencin de datos 10. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary Seleccione el botn radial Advanced Collect (obtencin avanzada de datos) en el grupo Collect Timing (tiempos de obtencin de datos). Ello le permitir establecer diferentes procedimientos de obtencin de datos para las mltiples velocidades de su reaccin.

3-123

Cary WinUV

Nota

El sistema de obtencin avanzada de datos le permitir obtener los datos de forma ms frecuente durante las etapas cruciales de su reaccin de cintica de barrido, y obtenerlos de forma menos frecuente durante las etapas en que usted sepa que no va a haber mucha actividad. (g) Introduzca el nmero de velocidades de reaccin diferentes que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. Especifique el tiempo que deber esperar el instrumento Cary despus de leer cada cubeta antes de comenzar un nuevo ciclo de lectura, ajustando para ello la duracin del ciclo (Cycle Time) para cada etapa de velocidad. Especifique la duracin de la sesin de ejecucin de la aplicacin Scanning Kinetics estableciendo el tiempo de parada (Stop time) para cada etapa de velocidad. Elija el dispositivo de monitorizacin de la temperatura deseado en el campo Monitor. El botn "Start" (inicio) no ser utilizable hasta que la temperatura del monitor seleccionado no se encuentre a menos de 0,5 C de la temperatura del bloque (Block) establecida en la ventana de accesorios (paso 8 (c)).

(h)

(i)

(j)

Configure las opciones de ancho de banda espectral o energa y de las lmparas 11. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options). (b) Establezca el ancho de banda espectral (SBW) para la sesin. (c) Establezca una altura de rendija (Slit Height) completa (Full). (d) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final de la obtencin de datos. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til cuando estn obtenindose datos por la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. (e) Haga clic en el botn "UV/Vis" si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso.

3-124

Cary WinUV

(f)

Introduzca las longitudes de onda que desee para el cambio de la fuente (Source Changeover) y el del detector (Detector Changeover) en los campos correspondientes (slo en el caso del Cary 500).

Configure los parmetros del anlisis 12. Dilogo de configuracin | Ventana analizar La citada ventana se utiliza para el anlisis realizado de forma posterior a la sesin. Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 13. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione the casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Marque 'Include X-Y Pairs Table' (incluir la tabla de pares de valores X-Y) para visualizar una lista de los valores de las abscisas y sus correspondientes valores de ordenadas. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

(f) (g)

3-125

Cary WinUV

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 14. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)), para hacer que el sistema Cary le solicite un nombre de archivo antes del inicio de la sesin de ejecucin de la aplicacin Scanning Kinetics.

Configure la monitorizacin visual del sistema 15. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 16. Haga clic en "OK" (aceptar) para guardar los cambios que haya introducido y cerrar el dilogo de configuracin (Setup). Dependiendo de las cubetas que haya seleccionado en el soporte para mltiples cubetas, el sistema Cary es posible que le informe entonces de que va a realizar una calibracin de haz nico doble . Pulse "OK" (aceptar). Mida una lnea base 17. Para medir una lnea base: (a) Si no dispone de un archivo de lnea base vlido, el sistema Cary le solicitar que haga clic en el botn "Baseline" (lnea base). Haga clic en el botn "Baseline" para establecer la obtencin de la lnea base. (b) El sistema visualizar en pantalla la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). Si lo desea, modifique el nombre de la muestra en blanco. (c) Introduzca las muestras en blanco en el cambiador de cubetas para obtener los barridos de lnea base 0Abs/100%T y haga clic en OK (aceptar). El sistema Cary configurar el rea de grficos y obtendr el barrido de la lnea base. A continuacin, aparecer la palabra 'baseline' (lnea base) en la ventana de estado de las ordenadas, indicando que el instrumento se encuentra

3-126

Cary WinUV

en el modo de correccin de lnea base y que dispone de un archivo de lnea base vlido para la correccin. Si desea utilizar la misma lnea base de nuevo con otras muestras, guarde el mtodo utilizando los comandos File (archivo) | Save Method As (guardar el mtodo como...). En tal caso, cuando vuelva a abrir el mtodo, se abrir adems la lnea base, quedando lista para ser utilizada. Es preferible guardar la lnea base con el mtodo, en lugar de guardarla en un archivo de lnea base, dado que, de dicha forma, podr asegurarse de que todos los parmetros de obtencin de datos sean exactamente los mismos para las nuevas sesiones de la aplicacin Scanning Kinetics. No obstante, las Buenas Prcticas de Laboratorio recomiendan obtener una lnea base nueva para cada sesin de anlisis. Ponga a cero el instrumento 18. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). (b) Si lo desea, modifique el nombre de la(s) muestra(s) en blanco. (c) Introduzca las muestras en blanco en las posiciones apropiadas del soporte para mltiples cubetas y haga clic en OK (aceptar). Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Scanning Kinetics 19. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin: (a) Haga clic en el botn "Start" (inicio) para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). No aada su reactivo activo en este momento.

Nota

En este punto, el sistema visualizar la ventana de dilogo Save File (guardar archivo), si ha seleccionado previamente la opcin Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)) en la ventana de almacenamiento automtico del dilogo de configuracin. Si es as, introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin Scanning Kinetics en el campo File name (nombre del archivo) y pulse Save (guardar). (b) El sistema visualizar en pantalla la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). Si lo desea, modifique los nombres de las muestras. 3-127

Cary WinUV

(c)

(d)

Coloque las soluciones de las muestras en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). Aparecer en pantalla la ventana de dilogo de sincronizacin del inicio (Sync Start). Aada su reactivo activo justo antes de que la cuenta atrs (Count Down) llegue a 0:00, o inicie el proceso de obtencin de datos pulsando el botn "OK" (aceptar). Al final de la sesin, determine el tiempo de parada (Stop Time) real, fijndose en el ltimo valor que aparezca en la columna de tiempo (Time) del formulario de datos del usuario (User Data Form).

3.12.2

Cmo obtener datos (con el Cary 50)


En la presente seccin se indica cmo realizar un barrido de longitud de onda multicubeta, multietapa, con correccin de lnea base, de 600 a 500 nanmetros, a temperatura ambiente (utilizando el Cary 50). Podr usted utilizar los datos obtenidos con el citado procedimiento para crear espectros continuos de cintica, con los que calcular las velocidades de reaccin. Inicie la aplicacin Scanning Kinetics 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows, haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Scanning Kinetics en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Scanning Kinetics. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Scanning Kinetics situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Scanning Kinetics.

3-128

Cary WinUV

Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar la ventana de dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como el intervalo de variacin de la longitud de onda, Y Min/Max, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary Seleccione la ventana de Cary y especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis. (a) Establezca el intervalo de variacin de la longitud de onda para el barrido, introduciendo los valores que desee en los campos Start/Stop (inicio/parada), por ejemplo 500/400. Introduzca un lmite inferior y un lmite superior en los campos Y min e Y max para especificar el intervalo de variacin de las ordenadas. A continuacin necesitar establecer la velocidad del proceso de obtencin de datos. Con los instrumentos Cary, lo anterior se consigue estableciendo el tiempo de integracin (Ave Time) y el intervalo de los datos (Data Interval). En el campo Ave Time introduzca el valor requerido. Un valor de 0,1 segundos representa un buen punto de partida. En el campo Data Interval, introduzca el incremento de longitud de onda que desee entre cada dos puntos de datos. Un valor de 0,5 nm representa un buen punto de partida. El sistema Cary actualizar automticamente el campo Scan Rate (velocidad de barrido) cuando seleccione dicho campo.

(b)

(c)

(d)

Configure los parmetros de velocidad de la reaccin tales como el nmero de velocidades de reaccin diferentes, la velocidad y la duracin de la obtencin de datos 7. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) Seleccione el botn radial Advanced Collect (obtencin avanzada de datos) en el grupo Collect Timing (tiempos de obtencin de datos). Ello le permitir establecer diferentes procedimientos de obtencin de datos para las mltiples velocidades de su reaccin.

3-129

Cary WinUV

Nota

El sistema de obtencin avanzada de datos le permitir obtener los datos de forma ms frecuente durante las etapas cruciales de su reaccin de cintica de barrido, y obtenerlos de forma menos frecuente durante las etapas en que usted sepa que no va a haber mucha actividad. (b) Introduzca el nmero de velocidades de reaccin diferentes que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas). El nmero que introduzca en dicho campo quedar reflejado en la tabla que aparece debajo. Especifique el tiempo que deber esperar el instrumento Cary despus de leer cada cubeta antes de comenzar un nuevo ciclo de lectura, ajustando para ello la duracin del ciclo (Cycle Time) para cada etapa de velocidad. Especifique la duracin de la sesin de ejecucin de la aplicacin Scanning Kinetics estableciendo el tiempo de parada (Stop time) para cada etapa de velocidad.

(c)

(d)

Seleccione el tipo de correccin de lnea base 8. Dilogo de configuracin | Ventana de la lnea base (a) Seleccione la ventana de la lnea base (Baseline). (b) Seleccione el botn radial Baseline correction (correccin de lnea base). De dicha forma forzar al sistema Cary a utilizar un barrido de lnea base para realizar una correccin de lnea base aplicada a los datos de la muestra. La correccin se llevar a cabo para cada punto, antes de visualizarlo.

Nota

En esta etapa puede utilizar una lnea base previamente almacenada en memoria. Para ello, pulse el botn Retrieve Baseline file (recuperar un archivo de lnea base) y abra el archivo *.CSK guardado que desee. Configure el accesorio de soporte para mltiples cubetas con correccin multicero 9. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios (a) Seleccione la ventana de accesorios (Accesories). (b) Asegrese de que estn instalados los accesorios apropiados antes de comenzar la sesin. (c) Seleccione la casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar el cambiador de cubetas) para habilitar el accesorio de soporte para mltiples cubetas.

3-130

Cary WinUV

(d)

(e)

Elija el botn radial Select Cells (seleccionar cubetas) y seleccione las cubetas que desee entre las disponibles en el grupo Use Cells (utilizar cubetas). Marque la casilla de verificacin Multi Zero (multicero) para activar el sistema de correccin multicero.

Configure los parmetros del anlisis 10. Dilogo de configuracin | Ventana analizar La citada ventana se utiliza para el anlisis realizado de forma posterior a la sesin. Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 11. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Establezca su estilo de informe seleccionando las casillas de verificacin apropiadas en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione the casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener automticamente una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin Parameters (parmetros) para incluir sus parmetros experimentales en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir un grfico en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Marque 'Include X-Y Pairs Table' (incluir la tabla de pares de valores X-Y) para visualizar una lista de los valores de las abscisas y sus correspondientes valores de ordenadas. Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

(f)

3-131

Cary WinUV

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 12. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)), para hacer que el sistema Cary le solicite un nombre de archivo antes del inicio de la sesin de ejecucin de la aplicacin Scanning Kinetics. Configure la monitorizacin visual del sistema 13. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) en cualquiera de las ventanas, para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 14. Haga clic en "OK" (aceptar) para guardar los cambios que haya introducido y cerrar el dilogo de configuracin (Setup). Mida una lnea base 15. Si no dispone de un archivo de lnea base vlido, el sistema Cary le solicitar que haga clic en el botn "Baseline" (lnea base). (a) Haga clic en el botn "Baseline" (lnea base) para establecer la obtencin de la lnea base. (b) Si lo desea, modifique el nombre de la muestra en blanco. (c) Introduzca las muestras en blanco en el cambiador de cubetas para obtener los barridos de lnea base 0Abs/100%T y haga clic en OK (aceptar). El sistema Cary configurar el rea de grficos y obtendr el barrido de la lnea base. A continuacin, aparecer la palabra 'baseline' (lnea base) en la ventana de estado de las ordenadas, indicando que el instrumento se encuentra en el modo de correccin de lnea base y que dispone de un archivo de lnea base vlido para la correccin.

3-132

Cary WinUV

Ponga a cero el instrumento 16. Para poner a cero el instrumento: (a) Haga clic en el botn Zero (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). (b) Si lo desea, modifique el nombre de la(s) muestra(s) en blanco. (c) Introduzca las muestras en blanco en las posiciones apropiadas del soporte para mltiples cubetas y haga clic en OK (aceptar). Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Scanning Kinetics 17. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin: (a) Haga clic en el botn "Start" (inicio) para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). No aada su reactivo activo en este momento.

Nota

En este punto, el sistema visualizar la ventana de dilogo Save File (guardar archivo), si ha seleccionado previamente la opcin Storage On (Prompt at Start) (almacenamiento activado (solicitud al inicio)) en la ventana de almacenamiento automtico del dilogo de configuracin. Si es as, introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin Scanning Kinetics en el campo File name (nombre del archivo) y pulse Save (guardar) (b) El sistema visualizar en pantalla la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). Si lo desea, modifique los nombres de las muestras. Coloque las soluciones de las muestras en las posiciones correctas y haga clic en "OK" (aceptar). Aparecer en pantalla la ventana de dilogo de sincronizacin del inicio (Sync Start). Aada su reactivo activo justo antes de que la cuenta atrs (Count Down) llegue a 0:00, o inicie el proceso de obtencin de datos pulsando el botn "OK" (aceptar). Al final de la sesin, podr determinar el tiempo de parada (Stop Time) real, fijndose en el ltimo valor que aparezca en la columna de tiempo (Time) del formulario de datos del usuario (User Data Form).

(c)

(d)

3-133

Cary WinUV

3.13

Simple Reads
En la presente seccin se describe como realizar el siguiente procedimiento con la aplicacin Simple Reads: u Cmo realizar una medicin a una longitud de onda nica

3.13.1

Cmo realizar una medicin a una longitud de onda nica


Inicie la aplicacin 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Simple Reads en el men de Cary WinUV para abrir la aplicacin Simple Reads. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Simple Reads. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Simple Reads situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP es posible que el ordenador le solicite que introduzca una contrasea para poder acceder a la aplicacin Simple Reads. Configure los parmetros del instrumento (longitud de onda, modo de las Y) 5. Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens para visualizar la ventana del dilogo de configuracin. Aparecer en pantalla la ventana de Cary, en la que podr especificar los parmetros para una nueva lectura. Seleccione Read at Wavelenght' (leer a la longitud de onda) e introduzca la longitud de onda a la que desea realizar la lectura. En el grupo Y Mode (modo de las Y), seleccione el botn correspondiente al modo de ordenadas que desee. El modo de ordenadas determina la forma en la que se medir y visualizar el valor fotomtrico en su informe. Haga clic en el botn "OK" (aceptar). El instrumento cambiar a la nueva longitud de onda.

6. 7.

8.

3-134

Cary WinUV

Ponga a cero el instrumento 9. Asegrese de que el compartimento para muestras est vaco (o de que se encuentre en posicin una muestra en blanco) y ponga a cero el instrumento pulsando el botn "Zero" (cero). (Espere a que la lectura de las ordenadas llegue a '0').

Lea la muestra 10. Introduzca la muestra en el compartimento para muestras. 11. Espere mientras el instrumento cambia a la longitud de onda especificada. La longitud de onda utilizada en cada momento puede observarse en la visualizacin del estado de las abscisas, en la parte superior derecha de la ventana de la aplicacin. 12. Haga clic en el botn Read (leer) para realizar una medicin fotomtrica de la muestra a la longitud de onda especificada. El resultado de la lectura de la muestra aparecer en el rea del informe (Report) e incluir la lectura en ordenadas obtenida y la longitud de onda a la que se haya tomado la lectura. Imprima los resultados 13. Puede imprimir el contenido del rea del informe (Report) pulsando el botn Print (imprimir).

3.14

Sunglasses
En la presente seccin se describe el siguiente procedimiento con la aplicacin Sunglasses: u Cmo realizar un barrido

Nota

Para el ejemplo siguiente se da por supuesto que est usted utilizando la interfaz simple o avanzada para la aplicacin Sunglasses. Si est utilizando el Asistente ("Wizard") (pantalla negra con una foto del sol), necesitar pasar a otra interfaz para utilizar el ejemplo. Para cambiar la interfaz, consulte la ayuda en lnea haciendo clic en el botn de Inicio de Windows, seleccionando Programas, Cary WinUV, Cary Help, Software help, Sunglasses, haciendo clic en la carpeta de informacin General y seleccionando el vnculo How to change the Sunglass application interface (cmo cambiar la interfaz de la aplicacin Sunglass).

3.14.1

Cmo realizar un barrido


1. En el men de opciones (Options), seleccione la(s) Norma(s) Internacional(es) deseada(s).

3-135

Cary WinUV

2. 3. 4.

Haga clic en el botn "Sample Info. (informacin sobre la muestra). Introduzca toda la informacin pertinente en el dilogo de informacin sobre la muestra y haga clic en OK. Seleccione el men de configuracin (Setup) para visualizar el dilogo de configuracin. Seleccione 'Report Graph' (grfico en el informe) si desea visualizar el o los grficos. Seleccione 'Report XY Table' (tabla XY en el informe) para los datos de los pares de valores XY. Seleccione 'Storage on (prompt at start)' (almacenamiento activado (solicitud al inicio)) para almacenar los datos.

Obtenga una lnea base 5. Haga clic en el botn "Baseline" (lnea base) para obtener la lnea base. El sistema le solicitar que introduzca una muestra en blanco en el compartimento para muestras y que haga clic en OK (aceptar) para obtener la lnea base. Una vez obtenida sta, aparecer la palabra 'Baseline' en la lnea de estado de la ventana principal de la aplicacin.

Nota

El botn "Baseline se transforma en un botn de parada (Stop) mientras el sistema obtiene la lnea base. Podr usted detener el proceso de obtencin de la lnea base haciendo clic en dicho botn. Coloque las gafas de sol 6. Las gafas de sol deben colocarse en la posicin correcta para que los resultados obtenidos sean exactos. Para hacer lo anterior: (a) Sujete las gafas de sol de tal forma que la lente quede centrada en la almohadilla existente en la pared del compartimento para muestras. (b) Sujetando las gafas de sol con una mano, deslice el cilindro hacia las gafas hasta que la almohadilla del cilindro presione firmemente la lente. Aplique suficiente presin como para que, cuando suelte las gafas de sol, la lente quede firmemente sujeta entre la almohadilla de la pared y la del cilindro. Apriete el tornillo del cilindro para sujetar las gafas de sol en posicin. Si se mueven de la posicin en las que las ha colocado, o caen al fondo del compartimento para muestras, separe el cilindro de las gafas y vuelva a intentarlo.

3-136

Cary WinUV

Realice un barrido 7. Cuando las gafas de sol queden firmemente sujetas en su sitio, haga clic en el botn "Scan (barrer) para realizar la prueba. Una vez termine la prueba, los resultados se visualizarn conforme a lo previamente especificado en el dilogo de configuracin, en el paso 4. Haga clic en el botn Print (imprimir) si desea imprimir los resultados.

Obtenga los resultados 8.

Imprima los resultados 9.

3.15

Thermal
En la presente seccin se describe cmo realizar los siguientes procedimientos con la aplicacin Thermal: u u Cmo realizar un anlisis y determinar Tm utilizando clculos de derivadas Cmo realizar un anlisis y determinar Tm utilizando clculos de hipercromicidad

3.15.1 Cmo realizar un anlisis y determinar Tm utilizando clculos de derivadas


En la presente seccin se indica cmo realizar una sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal utilizando una nica tasa de variacin de la temperatura y cmo calcular Tm automticamente a partir de la primera derivada. Inicie la aplicacin Thermal 1. 2. 3. 4. En la barra de tareas de Windows haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. Seleccione Thermal en el men de Cary WinUV. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Thermal. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Thermal situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

3-137

Cary WinUV

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Thermal. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Seleccione el botn Setup (configuracin) o seleccione Setup en el men, para visualizar el dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el ancho de banda espectral, etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) Seleccione la ventana de Cary y especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis. (b) En el campo Wavelenght (longitud de onda), introduzca la longitud de onda que desea utilizar. (c) En el campo SBW (ancho de banda espectral), introduzca el ancho de banda espectral requerido. (d) En el campo Ave Time (tiempo de integracin), introduzca el valor requerido.

Nota

Para variaciones lentas de la temperatura (es decir, para pendientes bajas), se recomienda utiliza un tiempo de integracin prolongado (por ejemplo, de 2-3 segundos). (e) Introduzca los valores mnimo y mximo de las ordenadas para el grfico en los campos Y Min e Y Max respectivamente.

Configure los parmetros tales como el nmero de velocidades diferentes de la reaccin, y la velocidad y la duracin del proceso de obtencin de datos 7. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) En la ventana de Cary, especifique los parmetros correspondientes a las temperaturas de obtencin de datos (Collect Temperatures): (b) En el campo Start C (C de inicio), introduzca la temperatura a la que desee que comience la obtencin de datos.

3-138

Cary WinUV

Nota

Cuando pulse "OK" (aceptar) para hacer desaparecer el dilogo de configuracin, el sistema Cary har que la temperatura llegue hasta la temperatura de inicio especificada. (c) En el campo Return C (Temperatura C de retorno), introduzca la temperatura hasta la que desea que el controlador de temperatura lleve al sistema al final del proceso de obtencin de datos. Seleccione la monitorizacin de temperatura que deber utilizar el sistema Cary para registrar la temperatura correspondiente a cada punto de datos durante la sesin. Seleccione Simple Collect (obtencin sencilla) para establecer una nica tasa de variacin de la temperatura durante toda la sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal. Introduzca el intervalo de los datos (Data Interval), la tasa de variacin de la temperatura (Rate), la temperatura final (End) y el tiempo de espera (Hold) que desee en la celda correspondiente de la tabla de una sola fila. Seleccione las etapas en las que desea obtener datos en la columna Collect Data (obtencin de datos).

(d)

(e)

(f)

Configure las opciones de funcionamiento de las lmparas y de visualizacin de los datos 8. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones y especifique las condiciones de funcionamiento de las lmparas y las opciones de visualizacin de los datos para su anlisis. (b) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final del proceso de obtencin de datos. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til cuando est ejecutndose la aplicacin Thermal por la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. (c) Haga clic en el botn radial UV/Vis si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso. (d) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial 'Individual Data' (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en recuadros

3-139

Cary WinUV

grficos individuales. Elija el botn radial 'Overlay Data' (datos superpuestos) para representar superpuestos los datos obtenidos a partir de todas las muestras, durante la sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal, en un nico recuadro grfico. Configure los accesorios 9. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios Seleccione la ventana de accesorios y asegrese de que no hay ningn accesorio seleccionado.

Configure el anlisis para reducir las interferencias en la medicin 10. Dilogo de configuracin | Ventana analizar (a) Seleccione la ventana analizar (Analyze). (b) Seleccione Smoothing (suavizado) y designe el intervalo de suavizado(Smoothing Interval) y el tamao del filtro (Filter Size) para controlar el nmero de puntos de medicin que deban promediarse. Configure el mtodo de derivadas del anlisis 11. Dilogo de configuracin | Ventana analizar (a) Marque la opcin Derivative (derivadas) para elegir el mtodo de derivadas para el clculo de la temperatura a la cual el 50 % de las cadenas de ADN se separan (Tm). (b) Seleccione la casilla de verificacin Autocalculate (calcular automticamente), para realizar de forma automtica un clculo de derivadas con los datos obtenidos, al final de cada sesin.

Nota

Puede realizar el citado clculo de forma manual, una vez haya terminado la sesin. Configure a continuacin los parmetros necesarios para definir el intervalo que deber utilizarse para calcular y representar grficamente la primera derivada del barrido seleccionado. Para hacer lo anterior: (c) Introduzca el intervalo con el que debern obtenerse los datos para realizar un clculo de derivadas. Un clculo del citado tipo implica la obtencin de una serie de puntos a partir de una representacin grfica. La seleccin de tales puntos depende del intervalo de datos escogido. Los puntos correspondientes a tales datos son utilizados a continuacin para generar un grfico separado, a partir del cual se

3-140

Cary WinUV

(d)

realiza el clculo. La seleccin del intervalo de derivadas depende de la velocidad de obtencin de datos. Si los datos se obtienen cada 0,1 C, un intervalo de derivadas de 0,1 C ser el que proporcione los resultados ms exactos. Introduzca el tamao del filtro que desee para el clculo de derivadas. El mtodo utiliza la tcnica de Savitzky Golay, de acuerdo con la cual se promedian una serie de puntos situados alrededor de cada punto individual para obtener un nuevo punto suavizado. Por ejemplo, una derivacin de cinco puntos utiliza los dos puntos de datos situados antes y los dos puntos situados despus de cada punto de datos.

Nota

Cuanto mayor es el tamao del filtro, tantos ms puntos de datos son incluidos en el filtro para la suavizado. (e) En el campo Low Calculation Limit (lmite inferior del clculo), introduzca la temperatura a la que desea iniciar el clculo de la derivada para la representacin grfica. En el campo High Calculation Limit (lmite superior del clculo), introduzca la temperatura a la que desea finalizar el clculo de la derivada para la representacin grafica.

(f)

Configure otros reclculos y la normalizacin 12. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana Calculations (clculos) para introducir los parmetros correspondientes a los clculos. (b) Marque Calculation (clculo) e introduzca o seleccione una ecuacin en el citado campo para realizar un clculo. (c) Marque Correction (correccin) e introduzca la temperatura de correccin (Correction Temperature) para realizar una correccin de expansin trmica. (d) Marque Normalize (normalizar) e introduzca la temperatura a la que desea que se normalicen los datos en el campo correspondiente. Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 13. Dilogo de configuracin | Ventana de informes (a) Seleccione la ventana de informes (Reports). (b) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (c) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (d) Configure el estilo de su informe seleccionando los botones radiales apropiados en el grupo Options (opciones).

3-141

Cary WinUV

Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener de forma automtica una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin 'Parameters' (parmetros) para incluir los parmetros de su mtodo en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir grficos en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (e) Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 14. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store). (b) Seleccione Storage Off (almacenamiento desactivado). Configure la monitorizacin visual del sistema 15. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 16. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para confirmar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. El sistema Cary comenzar a modificar la temperatura hasta alcanzar la temperatura de inicio.

3-142

Cary WinUV

Ponga a cero el instrumento 17. Para poner a cero el instrumento: (a) Pulse el botn "Zero" (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). En pantalla aparecer la ventana de dilogo Loading Guide (gua de carga). (b) Coloque una solucin de blanco en la cubeta que se encuentre en el haz de luz, en el compartimento para muestras, y haga clic en OK (aceptar). El sistema llevar a cabo una puesta a cero del instrumento con la solucin en blanco. Equilibre la muestra 18. Asegrese de que el sistema ha alcanzado la temperatura de inicio y se encuentra a dicha temperatura desde hace al menos 2-3 minutos. Si ha introducido un tiempo de espera en el campo Stage 1 Hold (espera en la etapa 1), el sistema esperar y se equilibrar a dicha temperatura durante el tiempo establecido, antes de comenzar la elevacin de la temperatura. No es necesario esperar para pulsar el botn "Start" (inicio). Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal 19. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal: (a) Pulse el botn de inicio (Start) de la aplicacin para iniciar el proceso de obtencin de datos. De forma alternativa, puede seleccionar Start en el men Commands (comandos). El sistema visualizar la ventana de dilogo Loading Guide (gua de carga). (b) Cargue su muestra en el soporte delantero para cubetas. (c) Introduzca el nombre de su muestra en el campo de introduccin de texto y, a continuacin, pulse "OK" (aceptar). El sistema Cary esperar durante el tiempo de espera especificado y ejecutar a continuacin la sesin de la aplicacin Thermal. Acciones de Cary despus del proceso de obtencin de datos 20. Al final del proceso de obtencin de datos, y segn lo que se haya establecido en los pasos anteriores, puede aparecer el formulario de datos del usuario (User Data Form). Si ese es el caso, introduzca los valores apropiados en las columnas correspondientes y pulse "OK" (aceptar). La ecuacin utilizada para el clculo aparecer en el informe. Por otra parte, dado que previamente se ha seleccionado la opcin Autocalculate (clculo automtico) (dentro del grupo

3-143

Cary WinUV

Derivative (derivadas)), en la ventana analizar del dilogo de configuracin, se realizar un clculo de derivadas al finalizar la obtencin de los datos. La muestra que se est analizando, con sus correspondientes valores de Tm, aparecer en el rea del informe (Report), as como los parmetros utilizados para generar el archivo de datos seleccionado, el perfil de temperaturas y el mtodo utilizado para obtener el valor de Tm. En el rea de grficos (Graphics) aparecer una representacin grfica de los datos originales de temperatura, as como la representacin grfica de la primera derivada del barrido seleccionado. El punto en el que la representacin grfica de la derivada alcance el valor mximo (correspondiente a la pendiente mxima o mnima de la representacin grfica original) ser indicado como el valor de Tm, sealndose con una flecha el citado punto en la representacin grfica original. Para visualizar una representacin grfica de los datos obtenidos, seleccione la opcin Graph (grfico) en el men View (ver). Guarde sus datos 21. Para guardar sus datos: (a) Haga clic en el men File (archivo) y seleccione Save Data As (guardar datos como...). (b) Haga clic en el campo Files of Type (archivos de tipo) y seleccione Batch (secuencia). (c) Introduzca el nombre del archivo para esta sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal en el campo File name (nombre del archivo). (d) Haga clic en Save (guardar). Los datos se guardarn en forma de un archivo de secuencia.

3-144

Cary WinUV

3.15.2 Cmo realizar un anlisis y determinar Tm utilizando clculos de hipercromicidad


En la presente seccin se indica cmo realizar una sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal con mltiples pendientes de temperatura y cmo determinar Tm utilizando un clculo de hipercromicidad. Inicie la aplicacin Thermal aplicacin 1. En la barra de tareas de Windows haga clic en Inicio para visualizar el men de inicio. 2. Mueva el cursor hasta Programas para visualizar el men de Programas. 3. Seleccione Thermal en el men de Cary WinUV. 4. Seleccione su tipo de instrumento (si es necesario) y pulse "OK" (aceptar) para abrir la aplicacin Thermal. (De forma alternativa, puede hacer doble clic en el icono de la aplicacin Thermal situado en la carpeta de Cary WinUV existente en el escritorio de Windows).

Nota

Si est utilizando un sistema GLP, el ordenador le solicitar que introduzca una palabra clave para poder acceder a la aplicacin Thermal. Configure los parmetros de obtencin de datos 5. Dilogo de configuracin Haga clic en el botn "Setup..." (configuracin...) o seleccione Setup en la lnea de mens, para visualizar el dilogo de configuracin, y especifique los parmetros del mtodo para un nuevo mtodo. Para hacer lo anterior: Configure los parmetros del instrumento tales como la longitud de onda, el ancho de banda espectral etc. 6. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) Seleccione la ventana de Cary y especifique los parmetros del instrumento (Instrument) para su anlisis. (b) En el campo Wavelength (longitud de onda), introduzca la longitud de onda que desea utilizar. (c) En el campo SBW (ancho de banda espectral), introduzca el ancho de banda espectral requerido. (d) En el campo Ave Time (tiempo de integracin), introduzca el valor requerido. 3-145

Cary WinUV

Nota

Para variaciones lentas de la temperatura (es decir, para pendientes bajas), se recomienda utiliza un tiempo de integracin prolongado (por ejemplo, de 2-3 segundos). (e) Introduzca los valores mnimo y mximo de las ordenadas para el grfico en los campos Y Min e Y Max respectivamente.

Configure los parmetros correspondientes a la temperatura de obtencin de datos 7. Dilogo de configuracin | Ventana de Cary (a) En el campo Start C (C de inicio), introduzca la temperatura a la que desee que comience la obtencin de datos.

Nota

Cuando pulse "OK" (aceptar) para hacer desaparecer el dilogo de configuracin, el sistema Cary har que la temperatura llegue hasta la temperatura de inicio especificada. (b) En el campo Return C (Temperatura de retorno), introduzca la temperatura hasta la que desea que el controlador de temperatura lleve al sistema al final del proceso de obtencin de datos. Seleccione el sensor que deber utilizar el sistema Cary para registrar la temperatura correspondiente a cada punto de datos durante la sesin. Seleccione el botn radial Advanced Collect (obtencin avanzada de datos). Introduzca el nmero de cambios de la tasa de variacin de la temperatura que desee en el campo Number of Stages (nmero de etapas).

(c)

(d) (e)

Nota

Cada aumento o disminucin de la temperatura deber ser una etapa separada. (f) Introduzca el intervalo de los datos (Data Interval), la tasa de variacin de la temperatura (Rate), la temperatura final (End) y el tiempo de espera (Hold) que desee para cada etapa en la tabla correspondiente. Seleccione las etapas en las que desea obtener datos en la columna Collect Data (obtencin de datos).

3-146

Cary WinUV

Configure las opciones de funcionamiento de las lmparas y visualizacin de los datos 8. Dilogo de configuracin | Ventana de opciones (a) Seleccione la ventana de opciones (Options) para especificar las condiciones de funcionamiento de las lmparas y las opciones de visualizacin de los datos para su anlisis. (b) Marque la casilla de verificacin Auto Lamps Off (apagado automtico de las lmparas) si desea que las lmparas se apaguen automticamente al final del proceso de obtencin de datos. Dicha opcin le permitir prolongar la vida til de las lmparas. Resulta especialmente til cuando est ejecutndose la aplicacin Thermal por la noche o sin prestarle atencin al instrumento durante perodos de tiempo prolongados. (c) Haga clic en el botn radial UV/Vis si desea que ambas lmparas permanezcan encendidas durante el proceso. (d) En el grupo de opciones de visualizacin (Display Options), seleccione la forma en que desea que se visualicen los datos a medida que van obtenindose. Elija el botn radial 'Individual Data' (datos individuales) para visualizar los datos obtenidos a partir de cada muestra en recuadros grficos individuales. Elija el botn radial 'Overlay Data' (datos superpuestos) para representar superpuestos los datos obtenidos a partir de todas las muestras, durante la sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal, en un nico recuadro grfico. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios (a) Seleccione la ventana de accesorios (Accesories). (b) Asegrese de que est instalado el accesorio termostatizable de soporte para mltiples cubetas de tipo 6 x 6, antes de comenzar la sesin. (c) Seleccione la casilla de verificacin Use Cell Changer (utilizar cambiador de cubetas) para habilitar el citado accesorio. (d) Elija el botn radial 'Select Cells' (seleccionar cubetas) y seleccione las cubetas que desee entre las disponibles en el grupo Use Cells (utilizar cubetas). (e) Marque la casilla de verificacin 'Multi Zero' (multicero) para activar el sistema de correccin multicero.

Configure el accesorio de soporte para mltiples cubetas 9.

3-147

Cary WinUV

(f)

En el presente ejemplo, anule la seleccin de la opcin Blank Correction (correccin de blanco).

Configure la visualizacin de la temperatura 10. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios En el grupo Temperature Display (visualizacin de la temperatura), seleccione 'Block' (bloque) y 'Probe 1' (sonda 1) para activar la monitorizacin del bloque del soporte para mltiples cubetas y una sonda de temperatura en la ventana de visualizacin del estado. Configure el accesorio RBA 11. Dilogo de configuracin | Ventana de accesorios (a) En el grupo RBA, marque la casilla de verificacin Use RBA (utilizar RBA). (b) Seleccione Attenuation (atenuacin) e introduzca el valor de la absorbancia (Abs) o seleccione Position (posicin) e introduzca la posicin del ngulo. Configure el anlisis para reducir las interferencias en la medicin 12. Dilogo de configuracin | Ventana analizar Seleccione la ventana analizar (Analyze) y seleccione Smoothing (suavizacin). Designe el intervalo de suavizado(Smoothing Interval) y el tamao del filtro (Filter Size) para controlar el nmero de puntos de medicin que deban promediarse. Configure su mtodo de anlisis 13. Dilogo de configuracin | Ventana analizar (a) Seleccione la ventana analizar (Analyze). (b) Marque la opcin Hyperchromicity (hipercromicidad) para calcular la temperatura a la que el 50 % de las cadenas de ADN se separan (Tm).

Nota

El clculo de hipercromicidad se realiza una vez ha terminado el proceso de obtencin de datos. (a) Marque la opcin Van't Hoff Calculation (clculo de Van't Hoff) para calcular una curva de Van't Hoff (Ln(K(T)) frente a 1000/T(K)) y activar el grupo de hipercromicidad. Seleccione el botn radial Self Complementary (autocomplementaria) si la molculas de ADN que va a analizar est constituida por cadenas idnticas. En caso

(b)

3-148

Cary WinUV

(c) (d)

(e)

(f)

(g)

contrario, seleccione el botn Non Self Complementary (no autocomplementaria). Introduzca la concentracin en el campo Total Conc of Strands (concentracin total de cadenas). Introduzca la molecularidad (Molecularity) (es decir, el nmero de cadenas) de la molcula hbrida. Por ejemplo, introduzca el valor '2' en dicho campo, si la molcula de ADN que va a analizar consta de dos cadenas. Marque la casilla de verificacin Delta G para realizar los clculos de delta G (la energa libre) y K (la constante de equilibrio). En el campo Number of Temperatures (nmero de temperaturas), al que ya podr accederse en este momento, especifique el nmero de temperaturas a las que le gustara realizar los clculos de delta G y K. El valor introducido en dicho campo quedar reflejado en la tabla de temperatura que aparece debajo del campo. Introduzca la temperatura requerida en cada celda de la tabla de temperaturas.

Configure otros reclculos y las normalizaciones 14. Dilogo de configuracin | Ventana de clculos (a) Seleccione la ventana de clculos (Calculations). (b) Marque Calculation (clculo) e introduzca o seleccione una ecuacin en el citado campo para realizar un clculo. (c) Marque Correction (correccin) e introduzca la temperatura de correccin requerida para realizar una correccin de expansin trmica. (d) Marque Normalize (normalizar) e introduzca la temperatura a la que desea que se normalicen los datos en el campo correspondiente.

3-149

Cary WinUV

Configure los requisitos de elaboracin de informes e impresin 15. Seleccione la ventana de informes (Reports) y especifique sus requisitos para la elaboracin de informes. (a) Introduzca su nombre en el campo Name (nombre). (b) Introduzca un comentario relativo a su experimento en el campo Comment (comentario). (c) Configure el estilo de su informe seleccionando los botones radiales apropiados en el grupo Options (opciones). Por ejemplo, seleccione la casilla de verificacin Auto Print (impresin automtica) para obtener de forma automtica una copia impresa de su informe. Seleccione la casilla de verificacin 'Parameters' (parmetros) para incluir los parmetros de su mtodo en el informe. Seleccione la casilla de verificacin Graph (grfico) para incluir grficos en el informe generado.

Nota

Si est seleccionada la casilla AutoPrint, el sistema enviar la informacin a la impresora especificada, as como al rea del informe. No obstante, si la citada casilla no est seleccionada, el informe slo ser enviado al rea del informe y podr ser visualizado seleccionando la opcin Report (informe) en el men View (ver). (d) Seleccione la opcin de conversin automtica (Autoconvert) que desee. Si selecciona ASCII (csv) o ASCII (csv) with Log (ASCII (csv) con registro), al final de la toma de datos el sistema generar automticamente un informe y guardar los datos tanto en el formato Cary como en el formato ASCII de pares de valores XY en la carpeta abierta en ese momento.

Configure el almacenamiento de los datos obtenidos 16. Dilogo de configuracin | Ventana de almacenamiento automtico (a) Seleccione la ventana de almacenamiento automtico (Auto Store) para establecer si los datos obtenidos deben guardarse y, en caso afirmativo, cundo debe almacenar el sistema Cary la informacin. (b) Seleccione Storage On (Prompt at End) (almacenamiento activado (solicitud al final)).

3-150

Cary WinUV

Configure la monitorizacin visual del sistema 17. Seleccione la casilla de verificacin Show Status Display (mostrar la ventana de visualizacin del estado) para visualizar diferentes campos de informacin sobre su reaccin actual. Finalice la configuracin 18. Una vez configurado el mtodo de forma satisfactoria para usted, haga clic en "OK" (aceptar) para guardar los cambios introducidos y cerrar el dilogo de configuracin. Ponga a cero el instrumento 19. Para poner a cero el instrumento: (a) Pulse el botn "Zero" (cero) para poner a cero el sistema. De forma alternativa, puede seleccionar Zero en el men Commands (comandos). El sistema visualizar en pantalla la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (b) Coloque las soluciones en blanco en las posiciones correctas, en el soporte para cubetas, y, a continuacin, pulse el botn OK (aceptar) para poner a cero el instrumento con las cubetas especificadas. Equilibre la muestras 20. Asegrese de que el sistema ha alcanzado la temperatura de inicio y se encuentra a dicha temperatura desde hace al menos 2-3 minutos. Si ha introducido un tiempo de espera en el campo Stage 1 Hold (espera en la etapa 1), el sistema esperar y se equilibrar a dicha temperatura durante el tiempo establecido, antes de comenzar la elevacin de la temperatura; no es necesario esperar para pulsar el botn "Start" (inicio). Inicie la sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal 21. Para iniciar la sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal, haga clic en el botn "Start" (inicio) o seleccione Start en el men Commands (comandos). Aparecer el dilogo Save As (guardar como...).

3-151

Cary WinUV

Configure el nombre del archivo y los de las muestras para los datos 22. Para configurar los nombres del archivo y de las muestras: (a) Introduzca el nombre apropiado para la sesin de ejecucin de la aplicacin Thermal y haga clic en Save (guardar). El sistema visualizar a continuacin la ventana de dilogo Cell Loading Guide (gua de carga de las cubetas). (b) Coloque las soluciones en las posiciones correctas del soporte. (c) Introduzca el nombre de cada muestra en el correspondiente campo de texto y haga clic en OK (aceptar). El sistema Cary esperar durante el tiempo de espera especificado y ejecutar a continuacin la sesin de la aplicacin Thermal. Acciones de Cary despus del proceso de obtencin de datos 23. Al final del proceso de obtencin de datos, y segn lo que se haya establecido en los pasos anteriores, puede aparecer el formulario de datos del usuario (User Data Form). Si ese es el caso, introduzca los valores apropiados en las columnas correspondientes y pulse "OK" (aceptar). La ecuacin utilizada para el clculo aparecer en el informe. Clculos de hipercromicidad 24. El sistema Cary le solicitar a continuacin que utilice la regla de la aplicacin Thermal para definir varios lmites de los clculos de hipercromicidad. (a) En primer lugar le solicitar que seleccione los lmites del ADN no disociado (Associated DNA Limits), utilizando la regla. Pulse el botn OK (aceptar). El cursor pasar al modo de regla. (b) Coloque el cursor con el ratn sobre la curva, en un extremo de la regin lineal de la parte de la curva correspondiente al ADN no disociado (antes de la transicin). Pulse el botn izquierdo del ratn y, mantenindolo pulsado, arrastre el cursor a lo largo de la curva, hasta el otro extremo de la regin lineal. Suelte el botn izquierdo del ratn.

3-152

Cary WinUV

El software calcular automticamente una lnea de ajuste lineal por el mtodo de mnimos cuadrados entre los puntos seleccionados, extrapolndola hasta ambos extremos de la curva de fusin. (c) Aparecer el dilogo de los lmites del ADN no disociado, en el que aparecern indicados los lmites superior e inferior que haya seleccionado con la regla. Pulse el botn OK (aceptar) para aceptar la lnea calculada. A continuacin, el sistema le solicitar que seleccione los lmites del ADN disociado (Deassociated DNA Limits), utilizando la regla. Pulse el botn OK (aceptar). El cursor pasar de nuevo al modo de regla. Coloque el cursor con el ratn sobre la curva, en un extremo de la regin lineal de la parte de la curva correspondiente al ADN disociado (despus de la transicin). Pulse el botn izquierdo del ratn y, mantenindolo pulsado, arrastre el cursor a lo largo de la curva, hasta el otro extremo de la regin lineal. Suelte el botn izquierdo del ratn. El software calcular automticamente una lnea de ajuste lineal por el mtodo de mnimos cuadrados entre los puntos seleccionados, extrapolndola hasta ambos extremos de la curva de fusin. Aparecer el dilogo de los lmites del ADN disociado, en el que se indicarn los lmites superior e inferior que haya seleccionado con la regla. Pulse el botn OK (aceptar) para aceptar la lnea calculada.

(d)

(e)

(f)

Nota

Los cuadros de dilogo de los lmites del ADN disociado y no disociado permiten volver a seleccionar los lmites, en el caso de que no quede usted satisfecho con las lneas de ajuste por el mtodo de mnimos cuadrados que aparecen representadas en el recuadro grfico. Para hacer lo anterior, haga clic en el botn Retry (reintentar), en cualquiera de los dilogos, y seleccione otra regin. Si desea salir del modo de clculo, haga clic en Cancel (cancelar). La regla desaparecer del grfico. Los puntos de correccin de las regiones lineales del ADN disociado y no disociado se visualizan en el rea del informe (Report).

3-153

Cary WinUV

Nota

Si las dos lneas extrapoladas se cruzan en cualquier punto, en pantalla aparecer un aviso. Haga clic en Cancel (cancelar), repita los pasos (a) a (f) anteriores y vuelva a seleccionar las regiones lineales. Haga clic en Ignore (hacer caso omiso) para que el sistema realice el clculo utilizando las regiones que haya seleccionado. Utilizando las lneas calculadas en los pasos anteriores, el software crear automticamente un segundo recuadro grfico y mostrar en pantalla la curva alfa calculada. (g) El sistema le solicitar que seleccione el intervalo de la curva alfa que desee que se utilice para el clculo de Tm. Pulse el botn OK (aceptar) para realizar la seleccin. Coloque el cursor con el ratn sobre la curva alfa, en un extremo de la regin lineal. Pulse el botn izquierdo del ratn y, mantenindolo pulsado, arrastre el cursor a lo largo de la curva, hasta el otro extremo de la regin lineal. Suelte el botn izquierdo del ratn. Aparecer la ventana de dilogo Alpha Tm Limits (lmites de Tm en la curva alfa), en la que se visualizarn los lmites seleccionados. Haga clic en el botn Retry (reintentar) para volver a seleccionar los lmites, en caso necesario. Pulse el botn OK (aceptar) para aceptar los intervalos seleccionados. El sistema trazar una lnea de ajuste lineal por el mtodo de mnimos cuadrados entre los puntos seleccionados y calcular el valor de la temperatura en el que = 0,5, para obtener el valor de Tm. (El citado valor de Tm se da de forma automticamente en C y K). Si ha elegido el mtodo de clculo de Van't Hoff para calcular delta G y K: (a) Utilizando los datos calculados en el paso (i) anterior, se crear automticamente un tercer recuadro grfico en el que se mostrar una curva de Van't Hoff. El sistema le solicitar que seleccione el intervalo que desee de la curva de Van't Hoff para calcular delta G y K. Pulse el botn OK (aceptar) en el citado dilogo. Coloque el cursor con el ratn sobre la curva de Van't Hoff, en un extremo de la regin lineal. Pulse el botn izquierdo del ratn y, mantenindolo pulsado, arrastre el cursor a lo largo de la curva, hasta el otro extremo de la regin lineal. Suelte el botn izquierdo del ratn.

(h)

(i)

(b)

3-154

Cary WinUV

(c)

Tambin aparecer un cuadro de dilogo de los lmites de Van't Hoff, en la que se indicarn los lmites superior e inferior que haya seleccionado con la regla. Pulse el botn OK (aceptar) para aceptar la lnea calculada. De forma alternativa, puede seleccionar el botn Retry (reintentar) para volver a seleccionar los citados lmites, utilizando la regla.

Nota

Si se produce algn error en el clculo de Van't Hoff, el sistema le solicitar que vuelva a seleccionar la regin lineal. El sistema calcular una lnea de ajuste lineal por el mtodo de mnimos cuadrados entre los citados puntos, extrapolndola hasta ambos extremos de la curva de Van't Hoff. La pendiente y la ordenada en el origen de la lnea calculada representan la entalpa y la entropa de la formacin hbrida (delta H y delta S, respectivamente). El software enviar automticamente los resultados obtenidos utilizando la curva alfa calculada al rea del informe (Report), incluidos: u K(Tm)experimental u K(Tm)desde los primeros principios u K(Tm)experimental/K(Tm)desde los primeros principios

25. El paso 24 se repetir para cada representacin grfica de la muestra medida.

3-155

Cary WinUV

Esta pgina se ha dejado en blanco de forma intencionada

3-156

Cary WinUV

4.

Solucin de problemas

Si tiene problemas con su sistema Cary, lea la informacin que se suministra a continuacin para ver si existe alguna solucin: Problemas de instalacin y puesta en marcha 1. Consulte la seccin sobre solucin de problemas del manual de hardware suministrado con el instrumento. 2. Consulte la informacin suministrada a continuacin. Problemas de software 1. 2. En primer lugar, consulte la informacin suministrada a continuacin. Consulte la informacin sobre solucin de problemas suministrada en la ayuda en lnea. Para hacer lo anterior, seleccione el botn de "Inicio" de Windows y, a continuacin, Programas, Cary WinUV y Cary Help (ayuda de Cary). Seleccione Troubleshooting (solucin de problemas) y haga clic en los vnculos apropiados. Consulte las hojas de noticias de ltima hora (Late Breaking News) suministradas con los CDROM de Cary WinUV. Si sigue sin encontrar la solucin de su problema, puede consultar su problema por correo electrnico, remitiendo su consulta a la siguiente direccin: uv@osi.varian.com. De forma alternativa, puede ponerse en contacto con su representante u oficinal local de Varian.

3. 4.

4-1

Cary WinUV

4.1

Instrumento fuera de lnea


Problema Cuando inicio el software Cary WinUV, la aplicacin indica que el instrumento est fuera de lnea (Offline). Solucin Compruebe la conexin del cable principal que conecta el PC al instrumento. Asegrese de que el instrumento ha terminado de realizar sus pruebas de inicializacin antes de iniciar el software de Cary. Para ms informacin, consulte el captulo 4 del manual de hardware suministrado con el instrumento.

4.2

Botn de conexin en lugar del de inicio


Problema Cuando inicio la aplicacin de WinUV que deseo utilizar, el botn de inicio ha sido sustituido por un botn de conexin, por qu? Solucin Cuando se inicia por primera vez el software de WinUV, la aplicacin System Information controla el instrumento mientras ste se inicializa. Hasta que no termina el citado proceso de inicializacin, cualquier otra aplicacin que usted inicie no podr controlar el instrumento; de ah que aparezca el botn de conexin (Connect). Simplemente espere a que el botn de conexin se convierta en el botn de inicio. Si no ocurre lo anterior, compruebe que no est ejecutndose alguna otra aplicacin de Cary. Si la citada aplicacin no est en ese momento en pleno proceso de obtencin de datos, pulse el botn de conexin para que la nueva aplicacin asuma el control del instrumento.

4-2

Cary WinUV

4.3

No hay suficiente memoria


Problema Tras instalar la versin 2 del software Cary WinUV, aparece un mensaje de error indicando que no hay suficiente memoria y no puede ejecutarse el software. Respuesta Compruebe que la versin del Internet Explorer de Microsoft que tiene instalada sea la 4.0 o una versin posterior. (Para saber qu versin tiene instalada, inicie Internet Explorer y seleccione la opcin Acerca de Internet Explorer en el men de Ayuda. En pantalla aparecer el nmero de la versin).

4.4

Visualizacin deficiente de vdeos y fotografas


Problema Los grficos y vdeos visualizados aparecen borrosos, granulados o con colores extraos. Solucin Modifique la configuracin de la pantalla seleccionando una resolucin ms alta. Para ello: 1. 2. Seleccione Inicio, Configuracin, Panel de Control, Pantalla. Seleccione la ventana de configuracin y ajuste los colores a una resolucin de pantalla ms alta (color de 16 bits o 32 bits), siempre y cuando su monitor y adaptador de pantalla lo permitan. Pulse "OK" (aceptar).

3.

Nota

Es posible que tenga que reiniciar el PC para que la nueva configuracin surta efecto.

4-3

Cary WinUV

4.5 En el registro de GLP no aparecen algunos cambios de privilegios


Problema He cambiado mltiples privilegios utilizando la aplicacin GLP, pero no aparecen todos en el archivo de registro que crea la aplicacin, qu ha ocurrido? Respuesta Es necesario pulsar el botn Apply changes now (aplicar los cambios ahora) en la ventana de privilegios (Privileges), cada vez que se modifica un privilegio aplicable a un usuario o aplicacin. No pueden introducirse mltiples cambios y pulsar a continuacin el botn Apply Changes now: los cambios sern tenidos en cuenta, pero no aparecern en el registro.

4.6 El encabezado y pie de pgina de los informes no se actualizan


Problema He modificado la informacin correspondiente al encabezado y el pie de pgina de los informes en la aplicacin System Information, pero los cambios introducidos no se reflejan en los informes generados, por qu? Respuesta Si est utilizando Windows NT deber registrarse como Administrador para poder realizar cambios con la aplicacin System Information.

4-4

Vous aimerez peut-être aussi