MINISTERIO DE SALUD INSTITUTO NACIONAL DE SALUD CENTRO DE INFORMACIN Y DOCUMENTACIN CIENTFICA

DIATOMEAS DE LA CUENCA DEL RO LOCUMBA COMO POSIBLES BIOINDICADORES DE LA CALIDAD DE AGUA

SERIE INFORMES TCNICOS N5

BLGO. MBLGO. CALIZAYA ANCO, JOSE ALBERTO

2007

DIATOMEAS DE LA CUENCA DEL RO LOCUMBA COMO POSIBLES BIOINDICADORES DE LA CALIDAD DE AGUA

TITULO DE LA INVESTIGACIN
NOMBRES Y APELLIDOS COMPLETOS DE LOS DE LOS INVESTIGADORES - Blgo. Mblgo. Jose Alberto Calizaya Anco. Investigador principal. Mvil: (052) 9297679 (052) 9842438. Email: diatomeasperu@yahoo.es. diatomeasperu@gmail.com - Ing. Miriam Avendao. Co Investigadora principal. Laboratorio de Salud Pblica - Blga. Silvia Sakuray Montalvo. Unidad de diagnstico clnico. Lab. de Salud Pblica - Tc. Irma Sofa Delgado Vargas. Lab. de Salud Pblica INSTITUCIONES QUE PARTICIPARAN EN LA EJECUCIN - Laboratorio de Referencia Regional Tacna

INVESTIGADOR RESPONSABLE DE LA CORRESPONDENCIA Blgo. Mblgo. Jose Alberto Calizaya Anco. Investigador Principal. Mvil (052) 9297679 (052)9842438 Email: diatomeasperu@yahoo.es, diatomeasperu@gmail.com Laboratorio de Salud Pblica

UNIDAD OPERATIVA EN LA CUAL SE VA A TRABAJAR Laboratorio de Salud Pblica

Diatomeas de la Cuenca del Ro Locumba como posibles bioindicadores de la calidad de 2 agua. Fecha: 14 de Junio del 2005

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INDICE

Contenido Resumen Planteamiento del problema Justificacin y uso de resultados Fundamento Terico Objetivos de la investigacin Hiptesis Metodologa Tipo de estudio Seleccin del rea de estudio Sujetos Criterios de inclusin y exclusin Diseo muestral Definiciones operacionales de las variables Descripcin de la intervencin propuesta Procedimientos para recoleccin de la informacin Indicadores para el monitoreo Control de calidad Anlisis de datos Referencias Bibliogrficas Cronograma de actividades Presupuesto detallado Presupuesto mensualizado Anexos

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RESUMEN PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: El Proyecto Especial Tacna (PET) y la Direccin de Ecologa, Proteccin Ambiental y Salud Ocupacional de la Direccin Ejecutiva de Salud Ambiental (DESA TACNA), realizan el monitoreo de la calidad del agua de la Cuenca del Ro Locumba mediante los anlisis fsicos y qumicos. Los resultados de dichos anlisis son slo de cationes. Esta informacin no es til para determinar el grado de contaminacin orgnica. El monitoreo de la materia orgnica existente en la cuenca, requiere buena instrumentacin, por lo que implica un elevado costo. Estas limitantes no permiten un monitoreo continuo de la calidad orgnica del agua, por lo que stos anlisis slo se pueden realizar muy espordicamente. Adems el monitoreo que se realiza en la Cuenca del Ro Locumba se lleva a cabo 2 3 veces al ao, lo que hace an mas relativo los datos obtenidos. Los anlisis fsicos, qumicos y microbiolgicos presentan una gran sensibilidad de detectar trazas de pesticidas, venenos u otras toxinas, sin embargo los reactivos y el personal capacitado aumentaran notablemente los costos para realzar dichos anlisis. En otros pases con mayor tradicin en monitoreos ambientales han identificado a las diatomeas como la alternativa mas adecuada para la solucin a todas estas deficiencias. Visto todo lo anterior planteamos la siguiente pregunta: Son las diatomeas bioindicadores sensibles para determinar la calidad orgnica del agua en la cuenca del ro Locumba? MATERIAL Y MTODOS: Se plantea como objetivo general, establecer si las diatomeas son organismos sensibles para determinar la calidad orgnica del agua en la cuenca del ro Locumba. Es una investigacin Experimental del tipo Longitudinal Prospectivo. El rea de estudio, es la Cuenca del Ro Locumba, que se sita en las provincias de Jorge Basadre Grohmann y la provincia de Candarave. Cada estacin de muestreo esta formado por todo aquel tramo de ro, cercano a una comunidad no menor de 300 personas. RELEVANCIA: Hasta el momento se desconoce la verdadera situacin de la calidad orgnica en la Cuenca del Ro Locumba, debido a factores limitantes ya mencionados anteriormente. Basado en ello es que en el presente proyecto se plantea una herramienta alternativa para la determinacin de la calidad orgnica del agua, como es el uso de las diatomeas que se muestran como los organismos ms apropiados para este tipo de monitoreo ambiental, por brindar una informacin ms rpida , ser una tcnica bastante econmica a comparacin de los anlisis tradicionales y adems porque han demostrado ser muy confiables, ya que es utilizado en otros pases como una herramienta en la gestin de calidad de agua de sus cuencas. MONTO TOTAL SOLICITADO: Asciende a la suma de 49 920 nuevos

soles

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PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: En la actualidad la Cuenca del Ro Locumba est siendo fuertemente alterada debido al impacto negativo que las comunidades aledaas (urbanas y agrcolas) estn ocasionando sobre la calidad de sus aguas. Dicha agresin ambiental hacia sus ros es debido generalmente por la utilizacin de agroqumicos (pesticidas y fertilizantes) que ingresan al ro de manera superficial o por filtracin y a ello se suma, el ingreso de materia orgnica, debido a las aguas residuales (desages) que no tienen tratamiento alguno y que llegan directamente al cuerpo de agua por falta de servicios de saneamiento ambiental y de un sistema de alcantarillado adecuado para la zona. La contaminacin de los ros tributarios que integran la cuenca del Ro Locumba contribuyen sinergticamente al arrastrar los residuos orgnicos e inorgnicos desde una poblacin a otra aguas abajo, incrementando la cantidad de materia orgnica en toda esta cadena de arrastre de contaminantes. Todo esto est cambiando la calidad del agua de la Cuenca del Ro Locumba y as como la salud de la poblacin ubicada ro abajo, debido a los agentes patgenos que son transportados por estas aguas provenientes desde una poblacin altitudinalmente superior. Teniendo conocimiento de stos problemas, el Proyecto Especial Tacna (PET) y la Direccin de Ecologa, Proteccin Ambiental y Salud Ocupacional de la Direccin Ejecutiva de Salud Ambiental (DESA - TACNA), vienen realizando evaluaciones peridicas de la calidad del agua de las Cuencas del Ro Locumba, Sama y Caplina. En caso del PET las evaluaciones de calidad de agua dependen de los estudios que se realizan para proyectos hdricos, y por lo tanto son muy espordicos, adems sus anlisis se limitan a la determinacin de Boro y Arsnico. La Direccin de Ecologa, Proteccin Ambiental y Salud Ocupacional de la Direccin Ejecutiva de Salud Ambiental (DESA - TACNA) enva la mayora de los anlisis fsicos y qumicos a la oficina central de DIGESA en Lima, ocasionando retrasos de 2 hasta 3 meses. Es as que estos datos resultan obsoletos y hasta cierto punto un gasto mal empleado para el momento de tomar decisiones. Los anlisis que actualmente se vienen realizando en el monitoreo de la calidad del agua de la Cuenca del Ro Locumba son de cationes (Cadmio, Cobre, Cromo, Hierro, Manganeso, Mercurio, Plomo y Zinc), cuya informacin no permite determinar el grado de contaminacin orgnica existente en la cuenca, esta falta de datos se debe principalmente a la falta de instrumentacin y de personal capacitado para los anlisis de materia orgnica. A esto hay que aadirle que el monitoreo en la Cuenca del Ro Locumba se realiza 2 3 veces al ao, haciendo esto an mas relativo los datos obtenidos. Adems que los anlisis fsicos, qumicos y microbiolgicos por un lado presentan gran sensibilidad al detectar incluso trazas de pesticidas, venenos u otras toxinas, por otro lado los equipos, reactivos y el personal capacitado son muy limitados (y mucho peor en poblados alejados) lo que aumentara notablemente el costo para poder contar con alguno de stos anlisis. Por ltimo stos resultados indican las condiciones en que ha sido tomada la muestra de agua, es decir slo determina una contaminacin transitoria o resultados puntuales en la dimensin cronolgica. Es as que el presente proyecto se plantea como una alternativa de solucin, el uso de las diatomeas como bioindicadores, que por sus estudios en otros lugares han demostrado ser muy tiles, confiables y econmicos Por lo que nos planteamos la siguiente pregunta: Son las diatomeas bioindicadores sensibles para determinar la calidad orgnica del agua en la cuenca del ro Locumba?
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JUSTIFICACIN Y USO DE LOS RESULTADOS: En la actualidad ninguna de las instituciones arriba nombradas, se encuentran haciendo la evaluacin peridica de la calidad orgnica del agua de la Cuenca del Ro Locumba, puesto que son anlisis muy costosos y requieren de personal calificado. Es decir, hasta el momento se desconoce la verdadera situacin de la calidad orgnica en la Cuenca del Ro Locumba, debido pues a los factores limitantes ya mencionados. Es por ello que en el presente proyecto se utilizarn tecnologas nuevas, que podran solucionar problemas ambientales mediante los datos que se puedan obtener, los mismos a su vez resultan ser mas rpidos, econmicos y muy fiables, como es el uso de las diatomeas en su rol de bioindicadoras de la calidad orgnica del agua, y que actualmente son ampliamente utilizadas en varios pases para resolver todas las limitantes que muestran los anlisis fsicos y/o qumicos. Las diatomeas son los organismos mas adecuados para reflejar el verdadero estado de contaminacin de un cuerpo de agua puesto que muestran un alto grado de sensibilidad frente a cambios de su medio ambiente, adems que muestra ser una tcnica bastante rpida ya que al establecer las diatomeas indicadoras, brindar resultados en cuestin de horas. Viene a ser econmica, puesto que solo se requiere de la mnima instrumentacin de laboratorio. Y quizs la ventaja mas importante con respecto a los anlisis fsicos y qumicos, es el de ser un mtodo fcil para adiestrar a un personal tcnico que pudiera ser de la misma comunidad cercana a su ro, puesto que requiere un mnimo conocimiento de taxonoma y laboratorio. El uso de las diatomeas como indicadoras es un aporte importante para la ciencia y una herramienta de solucin y uso directo en los problemas ambientales as como en la determinacin de polticas de saneamiento y gestin ambiental. Con los resultados obtenidos de la investigacin se espera haber caracterizado el estado actual de la calidad orgnica de la Cuenca del Ro Locumba mediante los anlisis fsicos y qumicos, as como tambin la variacin de la composicin de diatomeas espacialmente y temporalmente. Se realizarn mapas hidrogeogrficos de calidad de agua basados en diatomeas, de tal manera que ser lograr caracterizar zonas especficas y de distribucin de cada uno de los organismos. Identificando zonas de alta, mediana y baja vulnerabilidad ante la presencia de contaminantes. Adems como consecuencia de stos anlisis se crea una verdadera lnea base de la condicin ambiental existente en los ros de la cuenca. Para determinar las condiciones antes, de un probable incremento de la contaminacin por empresas (mineras, lcteas, crnicas, etc) que se puedan instalar cerca de stos cuerpos de agua. Y por ltimo, en un futuro no muy lejano, se espera establecer un ndice Biolgico Diatomeco (IBD) para la cuenca del Ro Locumba, cuyos datos serviran de base en la elaboracin de ndices similares para otros ros de la zona Sur del Pas. De esta manera ser relativamente fcil poder utilizar a las diatomeas como una herramienta til en las poblaciones alejadas para que puedan determinar la calidad del agua de sus Ros, desde el punto de vista orgnico.

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FUNDAMENTO TERICO:
Las diatomeas (Bacillariophyceae) son algas microscpicas unicelulares, predominantemente de vida libre, aunque tambin existen individuos filamentosos o coloniales envueltos por una capa de muclago (WETZEL, R. 1981). Se encuentran en todos los tipos de hbitat, donde la luz, temperatura y las condiciones qumicas son favorables para su crecimiento, y se distribuyen en todas las latitudes y longitudes del mundo por lo que estn presentes en ros, estuarios, lagos, y ambientes marinos, ubicados sobre diversos sustratos, as tambin en zonas hmedas, fras y aguas termales. Actualmente las diatomeas estn representadas por cerca de 250 gneros y 1000 especies que muestran una amplia distribucin geogrfica (cosmopolitas), (LOBO et al., 2002). El registro fsil indica que las diatomeas ya era un grupo especializado desde el Cretceo Inferior (HARWOOD, 1992), (MAIDANA, N., DIAZ, V. & KRAMMER, K. 2002). En su distribucin, de modo general podemos dividir a las diatomeas en continentales y marinas, y adems por su permanencia en el cuerpo de agua, pueden ser bentnicas y/o planctnicas. Las formas bntico-nerticas, viven sobre un sustrato y la mayora de ellas poseen rafe y como tal presentan movimiento. Su ocurrencia depende de la penetracin de la luz, as como cantidades disponibles de nutrientes, O2, H2S, CH4, CO2 y temperatura adecuada. Las formas bnticas o perifticas, por lo comn viven adheridas al medio en que se desarrollan: rocas o piedras (epilticas), plantas (epifitas) sobre animales (epizoicas) o dentro de animales (endozoicas). Las epfitas secretan sustancias mucilaginosas que fluye a travs de poros del frstulo o bien se adhieren al sustrato por medio de sus valvas. (FERNNDEZ, 1999), (MANGUIN, E. 1966) Las aguas continentales varan ampliamente en su composicin qumica, principalmente por la variabilidad litolgica de la cuenca o lago, clima, vegetacin y factores ambientales. Los factores de origen antropognico tambin son importantes de considerar pues afectan directamente sobre la erosin del suelo, las actividades agrcola-ganaderas, la irrigacin, as como el impacto negativo que se produce en el rea destinada al vuelco de los desperdicios y la urbanizacin. Todo ello tiende a la acumulacin y concentracin de compuestos que, en su proceso de degradacin orgnica, sustancias minerales o de iones, derivan a las aguas del ro (POTAPOVA & CHARLES, 2003). Las algas comnmente son usadas en la caracterizacin biolgica del ecosistema y determinacin de la salubridad del recurso hdrico y su posterior uso en distintas aplicaciones, (PRYGIEL et al, 1996). La diversidad, la combinacin de caractersticas morfolgicas, fisiolgicas y reproductivas hacen de las algas importantes organismos diagnsticos adecuados para el uso y aplicacin en el anlisis y evolucin de los ecosistemas (LANGE-BERTALOT, H. 1979) El conocimiento de la composicin especfica, en el ambiente acutico seleccionado, permitir asignar el grado de salubridad, detectar los orgenes y gradientes de contaminacin, puntual o difusa, mediante los registros especficos y la diferenciacin entre especies con distintos grados de tolerancia (ALVERSON et al., 2003). De la extensa biodiversidad algal, las diatomeas presentan una serie de ventajas para el estudio mencionado en los prrafos precedentes. Estos organismos, se desarrollan en diversos ambientes, como ser, distintos tramos a lo largo de un ro, desde la naciente, hasta el estuario as como en un ambiente marino (LANGE-BERTALOT, H. 1979), (OLIVEIRA et al, 2001). Algunas especies de este grupo son muy sensibles a pequeos cambios que ocurren en el medio
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en que habitan, mientras que otras son ms tolerantes, pero que respondern a mediano o largo plazo a los cambios ambientales. A diferencia de otros tipos de algas, que su identificacin depende de estructuras desarrolladas en su ciclo vital y que muchas veces no estn presentes en la muestras, las diatomeas son ms factibles de determinar mediante la observacin de su pared celular con ornamentaciones constantes de valor taxonmico y a la vez por ser regularmente dominantes en la mayora de cuerpos de agua (WILLIAMS, 1972). En muchos pases se han incluido, en los proyectos de investigacin, el uso de las diatomeas como parte de las actividades de rutina en el monitoreo de la calidad de las aguas de sus ros, o estn en el proceso de desarrollar estas tcnicas. (KELLY et al. 1998). El uso de las diatomeas como indicadores de calidad del agua de ros ha comenzado a ser ampliamente utilizado en varios pases. La relacin existente entre la abundancia relativa de diatomeas, la conductividad y composicin inica del agua, a partir de una base de datos de 3239 muestras de diatomeas bentnicas colectadas de 1109 ros en EE.UU., demuestra que estos parmetros ambientales tienen estadsticamente una relacin estrecha con la composicin diatmica. (POTAPOVA & CHARLES, 2003). El incremento de la contaminacin de origen orgnico, viene a constituir uno de los principales problemas en las aguas superficiales, pues est alterando la naturaleza de los ros, arroyos, lagos, etc. Dichos ecosistemas son considerados como la puerta trasera, donde se deposita la mayora de desperdicios originados por los desages o por el vertimiento de cualquier compuesto orgnico (basura) que se ubique cerca al ecosistema del ro. En la actualidad, para la evaluacin de la calidad de agua se utilizan tanto los anlisis fsicos, qumicos y microbiolgicos, en la que incluyen anlisis simples como temperatura, pH, conductividad, salinidad, turbidez, hasta los mas complejos como nitratos, nitritos, amonio disuelto, demanda bioqumica de oxigeno (DBO5), coliformes totales y fecales, pesticidas, metales pesados, etc. (RODRIGUES, L. M. & LOBO, E. A. 2000). El costo para cada uno de los anlisis viene a ser muy elevado, considerando que se realizar por un buen periodo de tiempo. Estos problemas ya han sido resueltos en otros pases, con la aplicacin de organismos bioindicadores, ya sean los macroinvertebrados o las diatomeas, y en algunos casos la utilizacin de ambos organismos para establecer ndices biolgicos adecuados, capaces de reflejar la verdadera condicin de calidad orgnica del agua (SLDECEK, V. 1973). Las diatomeas tienen la ventaja de permanecer en el tiempo por la caracterstica de su pared celular (frstulo) y adems por las asociaciones en que se presenta en una comunidad ficolgica. Por ejemplo, la mayor abundancia de Cyclotella meneghiniana con Craticula cuspidata y con Navicula rhyncocephala nos indica que es un estado trfico mayor (contaminacin orgnica moderada), y si adems se encuentran anabaenas, microcystis u otras clorofitas como ankistrodesmus confirma que son aguas eutrficas y seguro que el indice daria en betamesosaprobias. Con respecto al costo, el biomonitoreo es mas barato, que el qumico, (aunque no se le debe descartar sino al contrario, un anlisis qumico sin el biolgico esta mas incompleto, que un biolgico sin el qumico. Los datos qumicos son puntuales, slo los del da de la toma de muestra, mientras que las comunidades algales representan una poblacin que responde a los cambios sustituyendo una especie por otra o tolerando el cambio y eso es lo que denomina como la autoecologa de cada especie, esto es constante (PRYGIEL, J. & COSTE, M. ,1993)
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Adems las diatomeas tambin pueden ser heterotrficas, como muchas Hantzschia spp o Nitzschia spp que reflejan datos de la carga de materia orgnica y si se encuentran euglenales, se puede confirmar mas rpido que hacer un DBO o DQO. En el congreso de limnologa realizado en Espaa - Valencia en junio del 2000, qued estipulado como obligatorio el uso de las algas como indicadoras de calidad de agua para la comunidad europea. En el congreso estaban legisladores, empresarios de varios pases de Europa adems de talleres de las algas como indicadoras de calidad de agua, coordinado por los Dres. Sergi Sabater y Luc Ector, cuyas conclusiones del taller fueron: conocer la flora algal a nivel regional o por cuenca como primer paso, y en especial las diatomeas. Indicadores biolgicos: El vuelco de efluentes con residuos orgnicos puede inhibir el desarrollo de ciertos grupos de microorganismos y macroorganismos acuticos, o por el contrario puede llegar a estimular su desarrollo, ya sea por mecanismos de seleccin o por accin directa sobre stos en merced al efecto de nutrientes (LECLERCQ, L & DEPIEREUX, E. 1987). Esto nos indica que pueden desarrollarse bien en aguas de calidad muy diversa, en mayor grado de eutrofizacin, pero otros estn estrechamente ligados a condiciones ambientales muy especficas; slo estos ltimos son apropiados como organismos indicadores (bioindicadores) (OLIVEIRA et al, 2002). En los saprobios un gran nmero de factores desempean un papel importante en su relacin con un determinado grado de contaminacin, entre ellos el oxgeno cuya demanda es muy diversa en las distintas especies. Los anaerobios o aquellos que pueden desarrollarse en microaerobiosis dependen muy poco del oxgeno disuelto, mientras que otras especies dependen de modo extremo de la concentracin de oxgeno, entre ambos extremos existen todas las formas intermedias imaginables, (PRYGIEL, J. & COSTE, M. 1995). As tambin, las sustancias en estado de putrefaccin y eliminacin de toxinas causan alteraciones en muchos seres vivos como por ejemplo el cido sulfhdrico y amoniaco. De otro lado, los productos de descomposicin de las protenas tienen un efecto positivo sobre ciertos seres vivos y negativo sobre otros. (JOHNSON et al., 1993). Por lo que se ha establecido que un indicador biolgico es una especie, o asociacin de especies, que presenta requerimientos especficos para un conjunto de variables fsicas y qumicas, de tal forma que cambios en su presencia/ausencia, nmero, morfologa, fisiologa o comportamiento indicar que las condiciones fsicas y qumicas, del medio acutico, se encuentran fuera del lmite de tolerancia de aquella especie (JOHNSON et al., 1993). Segn JOHN. (1998) muchas instituciones realizan monitoreos en forma rutinaria de las condiciones y propiedades fsicas y qumicas de los ros y arroyos. Estos valores registrados nos proveen datos determinados en un tiempo dado, pero no proveen una informacin ms global de la salud del ecosistema. Las interacciones dinmicas (fsicas, qumicas y biolgicas) que caracterizan a un ecosistema estn mejor reflejadas por la presencia de los organismos que habitan en ese medio acutico, ya que los registros fsico-qumicos del agua pueden fluctuar en un relativo corto tiempo. Actualmente los organismos ms utilizados son las diatomeas como indicadores biolgicos, en los monitoreos de calidad de agua en los ros que lo contienen (PRYGIEL, 2002). Los indicadores biolgicos integran las respuestas a cambios medioambientales tanto en un corto como largo plazo. Ellos deberan ser sensibles a cambios finos del medioambiente e idealmente deberan tener un buen demarcado rango de tolerancia y preferencia a variables medioambientales ante un cambio ambiental que puede ser reflejado en un cambio en la especie
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dominante. JOHN (1998) considera a Rhopalodia, Amphora y Mastogloia como sensibles a la salinidad, ya que cuando incrementa este factor, ellos incrementan su abundancia, as tambin Cyclotella meneghiniana fue caracterizada de lugares mesotrficos a eutrficos con elevada conductividad. Mtodos de estudio de diatomeas para determinar el grado de saprobiedad: Para el estudio de la calidad de agua en ros y arroyos basados en diatomeas, se puede hacer uso de cuatro mtodos: ndices biticos, Anlisis multivariado, ndice de diversidad y anlisis de relacin abundancia especies (LOBO et al, 1995a). Indices Biticos: Refleja un dato numrico, que brinda una idea del efecto de la polucin sobre las comunidades existentes. Para poder determinar dichos ndices, se elaboran tablas que registran valores saprbicos para cada especie, con dicho valor se puede determinar el DAIpo (ndice para la contaminacin orgnica del agua), como en Japn, o el SI (Indice Saprbico) en Alemania, ndices muy aplicados a nivel mundial (DESCY 1979, Lange BERTALOT, 1979, SCHOEMAN, 1979). El DAIpo es la transformacin lineal del ndice de Pantle & Buck (KOBAYASI & MAYAMA, 1989). Anlisis multivariado: El uso del anlisis multivariado tiene como objetivo resumir una gran base de datos sobre la comunidad bitica, relacionndolos con los gradientes ambientales y determinar gradientes ambientales que no relacionados previamente. Entre los anlisis ms utilizados e importantes para obtener interpretaciones ms claras y con mayor precisin tenemos al Anlisis de componentes principales (ACP), Anlisis de correlacin (AC), Anlisis de correspondencia cannico (ACC) (LOBO et al, 2002). ndices de Diversidad: Estos ndices dan un reflejo de la variabilidad especfica y concomitante a ello la riqueza de especies. Por lo general se fundamenta en el hecho de que la diversidad de especies disminuye conforme aumenta la contaminacin, aunque cuando el grado de contaminacin no indica riesgos para los organismos sino un ambiente con un alto grado de eutrofizacin, los valores de diversidad suelen ser altos debido a la disponibilidad de nutrientes. Son prcticos ya que no necesitan de una identificacin precisa de especies, pero segn LOBO et al. (2002), los datos obtenidos reducen a las especies a nmeros annimos y no considera sus adaptaciones ambientales. Relacin abundancia especies: El anlisis comparativo entre las especies y su abundancia es utilizado para determinar el impacto que recibe un cuerpo de agua debido a agentes contaminantes (PATRICK et al., 1954, KOBAYASI, 1979). Su aplicacin requiere el recuento de numerosos organismos por taxa.

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OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN:
Objetivo General: Establecer si las diatomeas son organismos sensibles para determinar la calidad orgnica del agua en la cuenca del ro Locumba. Objetivos Especficos: 1.- Identificar y cuantificar las diatomeas existentes en diferentes niveles geogrficos (espacio) y en forma peridica (tiempo) en la cuenca del ro Locumba. 2.- Identificar y cuantificar las algas existentes en la cuenca del ro Locumba. 3.-Determinar la calidad del agua desde el punto de vista fsico, qumico y microbiolgico en diferentes niveles geogrficos (espacio) y en forma peridica (tiempo) en la cuenca del ro Locumba. 4.-Establecer la relacin estadstica entre las diatomeas y los datos fsicos, qumicos y microbiolgicos obtenidos. 5.-Comparar los costos de medicin entre las diatomeas y los mtodos fsicos, qumicos y microbiolgicos. Hiptesis: Las diatomeas (bioindicadores) se comportan como herramientas alternativos para determinar la calidad orgnica del agua en la cuenca del ro Locumba. METODOLOGA TIPO DE ESTUDIO Tipo de investigacin es transversal descriptivo SELECCIN DEL AREA O AMBITO DE ESTUDIO El rea de estudio, es la Cuenca del Ro Locumba, que se sita en las provincias de Jorge Basadre Grohmann y la provincia de Candarave. Tiene una superficie de 5900Km2, con una longitud de 170 Km. Sus aguas riegan alrededor de 7162 has. de cultivo. Comprende 9 distritos haciendo aproximadamente una poblacin total de 35 652 hab. (INEI, 1992). SUJETOS Universo: Esta formado por todo aquel tramo (estacin de muestreo) de ro, cercano a una comunidad no menor de 200 personas. Muestra: Esta formado por 20 estaciones de muestreo CRITERIOS DE INCLUSIN Y EXCLUSIN Criterios de Inclusin: Todo cuerpo de agua que: - Se encuentre cerca de una comunidad formada por ms de 200 individuos. - Se encuentre cerca a comunidades de desarrollo agrcola, ganadero o empresas con evidente impacto ambiental negativo. - Se encuentre a comunidades con falta de servicios de alcantarillado o de tratamiento de sus aguas residuales que las vierte al ro.
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Criterios de Exclusin: Todo cuerpo de agua que: - Se encuentre en las nacientes, donde no hay rastros de contaminacin. - Se encuentre llegando al mar (estuario). - Se encuentre muy cerca de actividades mineras. DISEO MUESTRAL: Se considera como el tamao muestral, al conjunto de puntos de muestreo que cumplen los criterios de inclusin. Las comunidades que presentan mas de 200 individuos son: Candarave, Huaytire, Mullini, Patapatani, San Pedro, Santa Cruz, Talaca, Totora, Cairani, Ancocala, Calacala, Boroguea, Camilaca, Cambaya, Corahuaya, Tacalaya, Curibaya, Huanuara, Quilahuani, Aricota, Pallata, Locumba, Ilabaya, Mirave, Toquepala. DEFINICIONES OPERACIONALES DE LAS VARIABLES Contaminacin orgnica del agua: Es el estado de alteracin del agua por un contaminante de origen orgnico. Diatomeas: Son organismos sensibles ante un cambio en el grado de contaminacin orgnica en un cuerpo de agua, manifestndose como la variacin en cuanto a la composicin de especies y en cuanto a abundancia relativa, dentro de una misma poblacin. Anlisis fsico qumicos y microbiolgico: Son las tcnicas utilizadas para la determinacin cualitativa y cuantitativa de la materia orgnica en un cuerpo de agua. DESCRIPCIN DE LA INTERVENCIN PROPUESTA: 1.- Revisin bibliogrfica. 2.- Delimitacin del rea de muestreo. 3.- Seleccin de los puntos de muestreo. 4.- Preparacin del material de laboratorio y capacitacin a personal ayudante. 5.- Toma de muestra: evaluacin de datos fsico qumicos de campo y recoleccin de diatomeas. 6.- Evaluacin de datos qumicos en laboratorio y preparacin e identificacin de diatomeas. 7.- Anlisis estadstico de las diatomeas con los parmetros ambientales. 8.- Establecimiento de las diatomeas indicadoras. 9.- Elaboracin de un mapa hidrogeogrfico de la calidad de agua de la Cuenca del Ro Locumba. PROCEDIMIENTOS PARA LA RECOLECCIN DE LA INFORMACIN: a)Para la muestra Biolgica: Alverson, et al,(2003), Kelly, M (1998), Martnez de Fabricius, A. (1996). - Muestreo y Transporte: Cada estacin de muestreo representa 100 m de longitud del ro. En cada estacin se establecern puntos equidistantes de muestreo. Se extrae la muestra a partir de las piedras presentes en el bentos de 20 a 32 cm (3cm x 3cm) de dimetro, que deben estar libres de macroalgas y macrfitas. Posteriormente la muestra es colocada y transportada en un frasco al 70% de etanol hacia el laboratorio. - Trabajo en Laboratorio:, Se oxidar la muestra segn Hasle y Fryxel (1970), con HCl, H2SO4 y H2O2 , con la finalidad de eliminar la materia orgnica que dificulta la identificacin de la diatomea, la cual se basa esencialmente en la ornamentacin presente en la pared celular (frstulo). Se realizar el montaje de las diatomeas en lminas portaobjeto con su respectivo cubreobjeto, utilizando una resina especial para diatomeas.
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La identificacin se realizar utilizando un microscopio de transmisin de luz en objetivos de inmersin, y mediante las claves taxonmicas especializadas en Diatomeas. Luego de la identificacin se realizar el conteo de todos los individuos hasta un mximo de 400. - Evaluacin Ecolgica: Son herramientas tiles para poder entender el comportamiento de las diatomeas con otros grupos algales. Estos ndices son: Riqueza de especies, diversidad, equitabilidad, similitud, dominancia, etc. b)Para el anlisis fsico qumico y microbiolgico: Daz de Santos, E. (1998). Algunos anlisis se realizarn junto con el muestreo de diatomeas. Para los anlisis llevados a cabo en el laboratorio se utilizar las metodologas descritas por normas nacionales e internacionales. RECLUTAMIENTO DE LOS PARTICIPANTES: En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio, si no con agua INDICADORES PARA EL MONITOREO: VARIABLE: Contaminacin del agua. INDICADOR: Turbidez, crecimiento de macroalgas, anlisis organolptico VARIABLE: Diatomeas indicadoras: INDICADOR: Presencia / ausencia, abundancia relativa. VARIABLE: Anlisis fsico qumicos y microbiolgico INDICADOR: Temperatura, conductividad, pH, turbidez, slidos totales, caudal, coliformes, nitratos, nitritos, fosfatos, Oxgeno disuelto, DBO5, dureza. Segn la Ley General de Aguas Per, e internacionales CONTROL DE CALIDAD - Los datos fsico qumico y microbiolgicos obtenidos, sern comparados con los resultados que pueda tener DESA TACNA de DIGESA y del Proyecto Especial Tacna (PET). - La identificacin taxonmica ser verificada por: Dra. Nora Maidana de Universidad de Buenos Aires, Argentina. Dra. Ana L. Martnez de Fabricius de Universidad Ro Cuarto, Argentina. PhD. Pedro Tapia de Universidad Cayetano Heredia, Per. Dra. Haydee Montoya, Universidad Mayor San Marcos, Per. - El procesamiento estadstico de los datos ser supervisado por: PhD. Pedro Tapia. Universidad Cayetano Heredia, Per. MSc Elmer Limache Universidad Nacional Jorge Basadre Grohmann, Per.

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ANLISIS DE LOS DATOS Primero se debe estandarizar todos los datos, esto incluye las tcnicas de normalizacin de datos (massage).Para luego aplicar los siguientes anlisis: - Anlisis de Regresin y Correlacin. Sern realizados con los datos obtenidos de los ndices ecolgicos, indicadores fisicoqumicos y microbiolgicos, adems de datos del hbitat. - Anlisis de componentes principales (PCA): Para reducir en una base de componentes principales todos los datos ms importantes de los indicadores fisicoqumicos y microbiolgicos, as como el carcter del hbitat. Esta tcnica es til cuando se trabaja con datos multivariados, primero porque muestra los cambios entre sitios, que son multivariados y segundo porque reduce el riesgo que haya correlaciones al azar, entre las variables ambientales y la composicin de la flora diatomeca. - Anlisis de correspondencia (DCA): Se realizar ste procedimiento para observar los distintos cambios en cuanto a composicin de especies entre los diferentes puntos de muestreo. - Anlisis de correspondencia cannica (CCA): Para evaluar el mayor grado de relacin entre la composicin diatomeca y los datos fisicoqumicos y microbiolgicos. Segn JTTNER et al, (2003), LOBO, E. (1997), POTAPOVA, M. & CHARLES, D. (2003). ORGANIZACIN Y RESPONSABILIDADES: - Blgo. Jose Alberto Calizaya Anco: Preparacin de la muestra, identificacin, conteo y evaluacin del trabajo - Ing. Miriam Avendao: Toma de muestra de cada estacin, y evaluar los valores ambientales in situ - Blga. Silvia Sakuray Montalvo Anlisis microbiolgico de la muestra de agua - Tc. Irma Sofa Delgado Vargas: Preparacin de documentos, trmites en aspectos logsticos

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ASPECTOS TICOS 1. PARTICIPACIN DE SERES HUMANOS : El estudio NO involucra la participacin (o inclusin de muestras) de seres humanos (Si marca esta respuesta, entonces no es necesaria una constancia de aprobacin del CEI). El estudio involucra la participacin de seres humanos (Si marca esta respuesta, es necesario la revisin y aprobacin del CEI). 2. PROCESO DEL CONSENTIMIENTO INFORMADO El estudio no requiere consentimiento informado El estudio requiere del consentimiento informado de los participantes X

Describir y justificar el tipo de consentimiento informado que se emplear (verbal o escrito). Si usted no utilizar un consentimiento informado durante el estudio, explique el motivo. En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio Si usted utilizar un consentimiento informado durante el estudio, explique: Quin estar a cargo de su obtencin?las personas encargadas de la obtencin del consentimiento informado sern previamente capacitadas, cmo?. Nota: Recuerde adjuntar el documento de consentimiento informado que se utilizar en el estudio. Asegrese que en el documento conste el nmero de versin y la fecha. En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio 3. RECLUTAMIENTO DE LOS PARTICIPANTES Describa las medidas que sern tomadas para evitar la discriminacin de participantes. En el caso de que algn grupo de participantes sea discriminado (gestantes, nios, estratos socio-econmicos, etc.). Explique y justifique los motivos de esta discriminacin. En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio Describa las medidas que sern tomadas para evitar la coaccin de los participantes al momento del reclutamiento y/o al momento de dar el consentimiento informado. En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio 4.- CONSECUENCIAS DE LA PARTICIPACIN EN EL ESTUDIO En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio 4. PAGO A LOS PARTICIPANTES Especifique si existir algn tipo de pago o compensacin econmica, las cantidades promedio y la forma como ser realizado. Los sujetos de investigacin debern pagar alguno de los procedimientos usados en el estudio? S / No Si su respuesta fue afirmativa, explique cules y por qu? En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio
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5. CONFIDENCIALIDAD DE LA INFORMACIN OBTENIDA Describa las medidas que sern tomadas para proteger la confidencialidad de la informacin (Cmo sern almacenados y protegidos los documentos y resultados?, Dnde se almacenar esta informacin?, por cunto tiempo?, quines tendrn acceso a esta informacin?). En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio 6. INFORME DE LOS RESULTADOS DE LAS PRUEBAS A LOS PARTICIPANTES Se les informar los resultado de sus pruebas (exmenes) a los participantes? S / No. Si la respuesta es afirmativa, especifique la forma cmo se realizar (quin lo har?, en cunto tiempo ser eso?, se le explicar el resultado?). Si su respuesta es negativa, especifique las razones. En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio 7. INFORME AL PBLICO Ser la informacin de este estudio accesible pblicamente al final del mismo? S / No Si su respuesta es afirmativa, por favor detalle la forma cmo ser publicada. Si su respuesta es negativa, explique los motivos. Seale si existe alguna restriccin. En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio 8. OTROS ASPECTOS TICOS RELEVANTES Explique brevemente la forma de monitoreo, manejo y informe de los probables efectos adversos que pudieran presentarse durante el estudio. En el proyecto no se trabajar con personas como sujetos de estudio

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 1.-ALVERSON, A., MANOYLOV, K. & JAN STEVENSON R. 2003. Laboratory sources of error for algal community attributes during sample preparation and counting. Jounal of Applied Phycology . 99: 1-13. 2.-ASAI, K. & WATANABE, T. 1996. Statistical classification of epilithic diatom species into three ecological groups relating to organic water pollution. 14TH Diatom Symposium: 413-418. 3.-DAZ DE SANTOS, E. 1998. Mtodos Normalizados. APHA-AWWA-W-PCF. Cap. 10. 4.-FERNNDEZ, A. 1999. Manual de las diatomeas peruanas. I edicin. Publicaciones del Hortus Botanicus Truxillense. 5.-JTTNER, I., SHARMA, S., MANI DAHAL, B., ORMEROD, S., JAMES CHIMONIDES, P. & COX, E. 2003. Diatoms as indicators of stream quality in the Kathmandu Valley and Middle Hills of Nepal and India. Freshwater Biology, 48: 2065-2084. 6.-KELLY, M. 1998. Recommendations for de routine sampling of diatoms for water quality assessments in Europe. Journal of Applied Phycology. 10: 215-224.
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24.-MARTINEZ DE FABRICIUS, A. L & GARI, E. 1991. Estudios sistemticos de las Bacillariophyceae del Ro Grande (Dpto. Calamuchita, prov. Crdoba, Argentina). Pennales II. Bol. Soc. Argent. Bot. 27(3-4): 207. 215.MIRETZKY, P. & MAIDANA, N. 2002. Stability of diatom composition in a variable lake environment: Lake Chascoms, Argentina. Limnology. 3: 77-85. 26.-OLIVEIRA, M. A., TORGAN, L. C., LOBO, E. A. & SCHARZBOLD, A. 2001. Association of periphytic diatom species of artificial substrate in lotic environments in the arroio Sampaio Basin, RS, Brazil: Relationships with abiotic variables. Braz. J. Biol., 61(4): 523-540. 27.-OLIVEIRA, M. A., TORGAN, L. C. & RODRIGUES, S. C. 2002. Diatomceas perifticas dos arroios Sampaio e Sampainho, rio Grande do Sul, Brasil. Acta. Bot. Bras. 16(2): 151-160. 28.-POTAPOVA, M. & CHARLES, D. 2003. Distribution of benthic diatoms in U.S. rivers in relation to conductivity and ionic composition. Freshwater Biology. 48: 13111328. 29.-PRYGIEL, J. 2002. Determination of the biological diatome index (IBD NFT 90-354): results of an intercomparison exercise. Journal of Applied Phycology 14: 27-39. 30.-PRYGIEL, J. 2002. Management of the diatom monitoring networks in France. Journal of Applied Phycology 14: 19-26. 31.-PRYGIEL, J. & COSTE, M. (1993). The assessment of water quality in the Artois Picardie water basin (France) by the use of diatom indices. Hydrobiology 269/270: 343-349. H. van Dam (ed.). Twelfth International Diatom Symposium. 32.-PRYGIEL, J. & COSTE, M. 1995. Les diatomes et le diagnostic de la qualit del eaux courantes continentales: Les principales mthodes indicielles. Vie Milieu, 45(3-4): 179-186. 33.-PRYGIEL, J., LEVEQUE, L & ISERENTANT, R. 1996. Un nouvel Indice Diatomique Pratique pour lvaluation de la qualit des eaux en rseau de surveillance. Revue des Sciences de leau. Rev. Sci. Eau 1: 97 113. 34.-REAVIE, E. D. & SMOL, J. P. 1998. Epilithic diatoms of the St. Lawrence River and their relationships to water quality. Can. J. Bot. 76: 251-257. 35.-RODRIGUES, L. M. & LOBO, E. A. 2000. Anlise da estrutura de comunidades de diatomceas epilticas no arroio Sampaio, municipio de Mato Leitao, RS. Brasil. Cuaderno de Pesquisa Sr. Bot., Santa Cruz do Sul, 12(2): 5-27. 36.-SLDECEK, V. 1973. System of Water Quality from the Biological Point of View. Arch. Hydrobiol. Belh. 7: 1 - 218 37.-WETZEL, R. (1981). Limnologa. Ed. Omega. S. A. Barcelona.: 259-319.

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES ACTIVIDAD/MES 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

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Rev. Bibliogrfica X Equipamiento de reactivos e instrumental X necesario Muestreo X X X X X X X X X X X X Identificacin y conteo de algas X X X X X X X X X X X Anlisis fsico y qumico del agua X X X X X X X X X X X Anlisis estadstico (univariada) X X X X X X Anlisis estadstico (multivariada) X X X X X X Mapa de calidad de agua X X X Elaboracin del informe X X X X

PRESUPUESTO DETALLADO
RUBRO REVISION BIBLIOGRAFICA Fotocopias Libros especializados Internet PREPARACION DE REACTIVOS E INSTRUMENTAL GPS Material de escritorio Fotografas MUESTREO Combustible Viticos para conductor Cooler Analisis fisico quimico de campo Anlisis microbiolgico de campo Frascos para transporte de muestra Conservantes Investigador principal IDENTIFICACION Y CONTEO DE ALGAS Resina para montaje de algas Tela nanz aceite de cedro Laminas porta objeto Laminas cubreobjetos Peroxido de hidrgeno concentrado alcohol unidad metro frasco caja caja litro litro 250 4 60 30 30 11 12 2 2 1 20 20 30 4 500 8 60 600 600 330 48 un viaje (25 glns) un dia unidad alquiler de equipo 02 kits (para 10 pruebas) unidad unidad servicios no personales 325 50 120 40 280 4 70 800 12 12 4 12 12 200 4 15 3900 600 480 480 3360 800 280 12000 alquiler por dia paquete revelado 01 rollo 70 60 24 3 1 4 210 60 96 MEDIDA 01 hoja 01 libro 01 hora COSTO (soles) UNITARIO CANTIDAD COSTO TOTAL 0.1 300 1 200 3 200 20 900 200

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Frascos para conservacin Internet Fotografas Fotografas en MEB ANALISIS FISICO - QUMICO DE LABORATORIO Nitratos Nitritos DBO5 Fotografas ANALISIS UNIVARIADO Fotocopias Servicios profesionales ANALISIS MULTIVARIADO Fotocopias Servicios profesionales MAPA CALIDAD DEL AGUA Servicios profesionales Internet ELABORACION DEL INFORME Fotocopias Internet Papel Bond A4 Tipeo e impresin ESTADISTICO ESTADISTICO

unidad hora revelado 01 rollo revelado 01 rollo

4 1 24 100

200 100 4 3

800 100 96 300

prueba por salida de campo prueba prueba revelado 01 rollo

400 400 800 24

12 12 12 4

4800 4800 9600 96

01 hoja honorarios

0.1 1000

200 1

20 1000

01 hoja honorarios

0.1 1000

200 1

20 1000

honorarios hora

1000 1

1 100

1000 100

01 hoja hora paquete de millar hoja

0.1 1 36 0.5

200 100 1 400

20 100 36 200

TOTAL:

49 920

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PRESUPUESTO MENSUALIZADO
RUBRO/MES 1 RECURSOS HUMANO 800 MATERIAL E INSUMOS 5061 5511 2 800 3 800 4 800 5 800 2291 2741 6 800 7 800 8 800 9 800 10 800 11 800 12 800 13 800 14 15

800 800

5461 2291 2291 5911 2741 2741

2291 2291 2291 2291 2291 2291 2743 1440 1666 630 2741 2741 2741 2741 2741 2741 3193 1440 1666 630

TOTAL:49 920 ANEXOS - Diagrama de flujo de trabajo - Tarjetas de recoleccin de informacin - Mapa Hidrogrfico de la Cuenca del Ro Locumba

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Diatomeas de la Cuenca del Ro Locumba como posibles bioindicadores de la calidad de 22 agua. Fecha: 14 de Junio del 2005