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Universit Abou Bekr Belkaid Tlemcen

Enseignants : F.Lahfa & A.Bedrane

Dosage des sucres rducteurs.


I- Extraction des sucres : Jus de fruit Presser le fruit et recueillir le jus. Centrifuger 5mn 3000t/ min 10 ml de surnageant, ajouter 30ml de mthanol. Laisser reposer 10min. Observer et conclure. Centrifuger le surnageant 10mn 3000t/min. Recueillir le surnageant qui contient les sucres. Solutions inconnues (X, Y, Z) : elles sont fournies prtes lemploi. II- dosage des sucres rducteurs : Le dosage des sucres rducteurs est ralis avec la liqueur de Fehling. 1/ principe : la liqueur de Fehling contient de lhydroxyde cuivrique qui, en prsence de sucres rducteurs se rduit en hydroxyde cuivreux (prcipit rouge brique ) dont la quantit forme est proportionnelle la quantit de sucres rducteurs prsent dans la solution. Dans les limites dutilisation de cette technique, le surnageant rste bleu. Si les solutions sont trop concentres en sucres rducteurs, il passe au bleu lincolore, puis au jaune orang (degr croissant de concentration) les teneurs en sucres rducteurs peuvent tre dtermines avec prcision par spectrophotomtrie. Pour cela, le ractif molybdique est ajout dans chacun des tubes fin de remettre le prcipit en solution 2 / protocole exprimental : 2.1 Gamme talon et solutions inconnues : La gamme talon est prpare, partir dune solution mre de glucose 2g/l prvoir 9 tubes supplmentaire qui recevront 2ml de chacune des solutions inconnues et 2ml de jus pur ou dilu ou encore 2ml deau distille (tmoin) les diffrentes dilutions retenues pour la gamme talon et pour le jus de fruit sont les suivantes : Gamme talon : 0,5 ; 0,75 ; 1 ; 1,25 ; 1,5 ; 1,75 ; et2g/l Jus : pur ; 1/2 ; 1/4 ; 1/10 et1/100. 2.2dosage : Ajouter 2ml de liqueur de Fehling (1ml de solution A et 1ml de solution B) dans chaque tube (gamme talon et solutions inconnues de jus.) Porter les tubes au bain marie bouillant pendant 8min Observer et conclure :

2.3lecture au spectrophotomtre ou au colorimtre : Aprs refroidissement des tubes, 2ml de ractif molybdique sont ajouts. Au bout de 2min chaque tube est complt 25ml avec de leau distille afin de raliser la lecture au colorimtre. La lecture des D.O est effectue, contre le tmoin 700nm 3 /exploitation des rsultats : N.B : Inclure dans votre compte rendu, la discussion du thme suivant :

Prciser lintrt des tmoins Quelles conclusion faits vous ? -Aprs le dosage la liqueur de Fehling. -Aprs obtention des D.O Tracer la courbe talon D.O=f ([c]) En dduire la teneur en sucres rducteurs pour chacune des solutions tudies, ainsi que leur ventuelle composition.

Le mme protocole exprimental peut il tre appliqu ltude des glucides membranaire et quelles propositions feriez vous pour lamliorer ventuellement.

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