UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA CENTRO UNIVERSITARIO DEL NORTE INGNIERIA AGRONOMICA FITOPATOLOGIA I

PRACTICA No. 2 TOMA, TRASLADO Y PRESENTACION DE MUESTRAS.

ANTONY RANFFERY GOMEZ HERRERA 200740154 AUXILIAR DE LABORATORIO T.U. DANNY MALDONADO ARGUETA COBAN FEBRERO DE 2011

INTRODUCCION

Las muestras tomadas en el campo deben de ser bien recolectadas teniendo el cuidado que no se contaminen y que se preserven bien hasta el traslado al laboratorio, muchas de las enfermedades estn relacionadas con los factores biticos y abiticos, se debe realizar una observacin minuciosa en el cultivo para recolectar toda la informacin posible que nos servir para dar un diagnostico de la situacin por ejemplo diferenciar bien entre una planta enferma y una sana, observar si la enfermedad est generalizada o focalizada, dar con recorrido a los cultivos alrededor para conocer su estado actual y si no estn siendo afectas por la enfermedad.

El follaje pude mostrar deficiencias de nutrientes y agua, si el problema se observa en parches que han sido aumentados ao con ao se ha detectado la posibilidad que se trate de nematodos o algn otro patgeno del suelo; conviene en estos casos tomar muestras de suelo dentro del parche del problema y fuera de l, lo que se persigue es comparar la poblaciones de los organismos en ambas situaciones y asociarlas con el problema.

OBJETIVOS. GENERAL.

Realizar en forma correcta la coleccin, traslado y presentacin de las muestras fitopatologicas.

ESPECIFICOS. Observar el medio de donde se desarrollan las plantas para posibles explicaciones de otros factores biticos y abiticos que pueden estar afectando la plantacin. Conocer la forma adecuada de la toma de muestras en el campo, desde el corte de la planta hasta el traslado al laboratorio. Identificar plantas sanas y enfermas.

REVISION BIBLIOGRAFICA. 1.0.0 FITOPATOLOGA

El diagnstico de una enfermedad, es una tarea delicada que requiere el estudio de los sntomas, aislamientos en medio de cultivo, observacin microscpica de las estructuras del patgeno.1 1. Seleccin de la muestra La muestra para el anlisis deber ser representativa de los sntomas observados en el campo. De preferencia se recomienda el envo de aquellas partes de las plantas en las cuales, comience a manifestarse la infeccin. Las muestras deben recolectarse en horas soleadas para evitar que las plantas se encuentren hmedas. 2. Preparacin de la muestra 2.1. Races: una muestra de races debe solicitarse con tierra adherida, para lograr su mejor conservacin, se debe colocar en una funda plstica aproximadamente entre 50 - 200 gramos de races, que estn semi-afectadas.2
QU DATOS DEBEN TOMARSE EN EL MUESTREO? Es importante que el tcnico anote cierta informacin que le ser de utilidad en la interpretacin de los resultados o para que si es necesario un nuevo muestreo le sea fcil localizar el lugar. Debe informarse del tipo de manejo del cultivo (fertilizacin, aplicacin de plaguicidas, riegos, etc.), las caractersticas del suelo (textura, ph, etc.), tipo de malezas, as como la localizacin exacta, fecha, cultivo (anterior, actual), colector y otra informacin que le sea til. Para esto deber tener una libreta de campo y etiquetas para colgar, en estas ultimas anotar el numero de muestra (identificacin), fecha de muestreo, cultivo y variedad. CMO DEBEMOS MANEJAR LAS MUESTRAS? Las muestras al ser transportadas del campo al laboratorio deben cuidarse que no le peguen directamente los rayos solares y no se golpeen porque muchos nemtodos morirn por deshidratacin. En el laboratorio deben ser procesadas inmediatamente, y si no conservarlas en el refrigerador a unos 4 C.3 ___________________________________
1 AGROCALIDAD (en lnea). http://www.agrocalidad.gov.ec/laboratorio/servicios.php#fito (4 de febrero de 2011). 2 Practica nematodo lgica (en lnea) http://www.slideshare.net/themena1/antologia-practicasnematologa. (4 de febrero de 2011). 3

dem.

En relacin con el estado de desarrollo de la enfermedad, es necesario recolectar estado inicial e intermedio, para facilitar el cultivo de tejido en medio artificial o estudiar la evolucin de la enfermedad en cmara hmeda. Estados muy avanzados no son muy recomendados por cuanto se encuentran invadidos por saprofitos y organismos oportunistas lo cual enmascara o altera caractersticas tpicas del verdadero agente etiolgico y dificultan o contaminan los cultivos en medio artificial.4

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4 introduccin a la fitopatologa (en lnea). http://books.google.com/books? id=xpTHXEWG_t8C&pg=PA253&lpg=PA253&dq=la+importancia+de+tomar+muestras+en+diferentes+estad os+de+avance+de+la+enfermedad+de+las+plantas+para+fines+de+fitopatologia&source=bl&ots=OORN06i y_l&sig=RWiLuDOEg2dKBEuEL8D-v4pz4bY&hl=es&ei=ZxNTaDLDsP7lweqwowi&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=1&ved=0CBUQ6AEwAA#v=onepage&q &f=false (5 de febrero de 2011)

MATERIALES Y METO DOLOGIA MATERIALES. Libreta de campo. Cmara. Bolsas de nylon de 5 y 10 libras. Navaja. Algodn Agua. METODOLOGIA. Se realiz una observacin en el rea del cultivo afectado y sus alrededores. Se procedi a tomar muestras focalizadas, recolectando plantas con diversos estados de la enfermedad, cuando inicia, y avanzada. Se recolectaron tallos, hojas, y races de la papa y colocaron en bolsas de nylon con algodn hmedo en su interior para conservar las condiciones de la planta y la enfermedad. Se procedi a tomar muestras del suelo tanto del rea afectada como de los alrededores donde no se presento la enfermedad. Se tomaron muestras de frijol que estaban alrededor de la plantacin afectada.
Se procedi al traslado de las muestras al laboratorio y colocaron

en la refrigeradora para su preservacin. RESULTADOS

Las plantas observadas en el campo presentaban marchitamiento cuando la enfermedad ya estaba avanzada, y al inicio de la enfermedad manchas en las hojas y en la raz de la papa nudos con un tamao muy pequeo, la enfermedad se encontraba focalizada, con daos ms severos en ciertas areas, el agricultor de la zona le atribuye que el problema se debe a que la planta no tiene sombra, que los rayos del solo producen esos sntomas en la planta, porque ellos han visto que en lugares con sombra las plantas se desarrollan sin ningn problema, los cultivos de los al rededores no presentan este problema los que se encuentran en partes ms bajas y los que se encuentran al mismo nivel que el terreno o ms elevados si lo presentan y se pudo notar bien en el frijol que tenia las mismas caractersticas de la enfermedad encontrada en la papa. Las muestras fueran tomadas con los cuidados necesarios para no contaminarlas colocndolas en bolsas de nylon con algodn en su interior para que no perdieran sus condiciones ambientales y se preservara mejor la muestra hasta su traslado al laboratorio. Se realizaron muestros de suelo para realizar estudios de suelos y descartar la posibilidad de nutricin de la planta.

DISCUSION DE RESULTADOS.

En la toma de muestras es indispensable conocer antes el manejo que se le est dando al cultivo, que insecticidas se estn aplicando, fertilizacin, etc, conocer factores que cree el agricultor que puedan estar ocasionando los problemas, en el caso de la papa el agricultor dijo que la enfermedad la manifest porque el sol le pega directo, estos nos puede servir para asociar que quizs la planta pierda turgencia, sus clulas se plasmolicen y la dejen susceptible al ataque de virus, nematodos, hongos etc. conocer el sistema de fertilizacin para descartar la posibilidad que la planta le hacen falta nutrientes o tiene exceso y se manifieste en el marchitamiento de la planta.

Las muestras tienen que ser recolectadas con el mayor cuidado posible de no contaminarlas esterilizando las navajas y bolsas, las muestras se recolectan donde la enfermedad inicia y en su estado intermedio, se hace un recorrido para ver que las plantaciones aledaas no estn presentando el misma enfermedad, las plantas depositadas en las bolsas de nylon deben de llevar algodn con agua para conservarla las caractersticas de la planta, para evitar que los nematodos no se plasmolicen.

Observar cmo se manifiesta la enfermedad es importante para dar un diagnostico, si la enfermedad solo se presenta en lugares focalizados o es en toda la plantacin.

CONCLUSIONES. Colocar la muestra en una bolsa transparente, empaquetada

correctamente para su traslado y manejando la humedad, evitar la contaminacin y deterioro de la muestra.

Entre ms y mejor informacin acompae una muestra es ms factible el resultado del anlisis, debido a que en ella puede encontrarse pistas claves para llegar a descubrir la causa real del problema.

Colocar las plantas en un medio hmedo para que evolucione enfermedad y manifieste sntomas, signos o ambos.

la

Desinfectar los materiales (navaja, bolsas de nylon), garantiza que las muestras no se contaminaran con otros patgenos.

Cuando la enfermedad esta avanzada no se recomienda tomar muestras porque ya est invadida por otros microorganismos (saprofitos) que nos pueden confundir a la hora de analizarlos en el microscopio.

BIBLIOGRAFIAS.

AGROCALIDAD (en lnea). http://www.agrocalidad.gov.ec/laboratorio/servicios.php#fito (4 de febrero de 2011).

Practica nematodo lgica (en lnea) http://www.slideshare.net/themena1/antologia-practicas-nematologa. (4 de febrero de 2011).

Introduccin a la fitopatologa (en lnea). http://books.google.com/books? id=xpTHXEWG_t8C&pg=PA253&lpg=PA253&dq=la+importancia+de+t omar+muestras+en+diferentes+estados+de+avance+de+la+enfermeda d+de+las+plantas+para+fines+de+fitopatologia&source=bl&ots=OORN 06iy_l&sig=RWiLuDOEg2dKBEuEL8D-v4pz4bY&hl=es&ei=ZxNTaDLDsP7lweqwowi&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=1& ved=0CBUQ6AEwAA#v=onepage&q&f=false (5 de febrero de 2011)

CUESTIONARIO. 1. Cul es la razn de colocar las muestras recolectadas en lugares a baja temperatura cuando las mismas no se van a examinar de inmediato? Es para que la enfermedad se siga desarrollando y se presenten los signos y sntomas, tambin para que los nematodos, virus, hongos no sufran una disecacin o deshidratacin, la planta al estar humedad sus clulas se encuentran turgentes esto le permite seguir desarrollndose a la enfermedad.

2. Cul cree usted que sea la ventaja de realizar un historial de campo a la

hora de muestreo cuando se va a efectuar un diagnostico fitopatologico? Que entre ms informacin tengamos ser mejor porque en ella se encuentra la clave del origen de la enfermedad, si nos dicen por ejemplo que se le est aplicando algn nutriente en grandes cantidades quizs esto provoque un intoxicacin en las plantas y no se tenga nada que ver con nematodos, conocer los puntos de vista del agricultor ayudan muchas veces a descifrar el problema que se presenta. Si se recolecta material vegetal donde la enfermedad ya est muy avanzada esto tendera a confundirnos en el laboratorio ya que encontraremos otros microorganismos que no tienen nada que ver con el problema. Si no colocamos las muestras en un medio hmedo los microorganismos se disecaran echndose a perder la muestra. Si no tenemos el cuidado de desinfectar nuestras navajas y bolsas de nylon contaminaremos nuestras muestras con otros microorganismos que tendern a confundirnos. 3. Por qu es importante tomar muestras en diferentes estados de avance de la enfermedad? Es necesario recolectar estado inicial e intermedio, para facilitar el cultivo de tejido en medio artificial o estudiar la evolucin de la enfermedad en cmara hmeda. Estados muy avanzados no son muy recomendados por cuanto se encuentran invadidos por saprofitos y organismos oportunistas lo cual enmascara o altera caractersticas tpicas del verdadero agente etiolgico y dificultan o contaminan los cultivos en medio artificial