Resist en CIA A de Staphylococcus Aureus Islados de Leche de Vacas Con Mastitis de Tjaro Michoacn

UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLS DE HIDALGO
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
TESIS RESISTENCIA ANTIBITICA DE Staphylococcus aureus AISLADOS DE LECHE DE VACAS CON MASTITIS DE TJARO MICHOACN
QUE PRESENTA
EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA
PARA OBTENER EL TTULO DE
MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA
MORELIA, MICHOACN., OCTUBRE DE 2011.
UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLS DE HIDALGO

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
TESIS
RESISTENCIA ANTIBITICA DE Staphylococcus aureus AISLADOS DE LECHE DE VACAS CON MASTITIS DE TJARO MICHOACN
QUE PRESENTA
PARA OBTENER EL TTULO DE
MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA
ASESOR: MC. Jos Luis Carlos Bedolla Cedeo COASESORES: QFB. Rosalva Meja Alfaro DR. Jos Herrera Camacho
MORELIA, MICHOACN., OCTUBRE DE 2011.
Resistencia antibitica de Staphylococcus aureus aislados de leche de vacas con mastitis de Tjaro Michoacn
La presente investigacin titulada Resistencia antibitica de Staphylococcus aureus aislados de leche de vacas con mastitis de Tjaro Michoacn, forma parte del proyecto de investigacin 14.10-2011. Uso de extractos de semillas de ctricos para el control de la mastitis bovina, financiado por la Coordinacin de la Investigacin Cientfica de la Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo.
DEDICATORIA
Quisiera iniciar brindndoles las gracias a mis padres Jos Luis Carlos Bedolla Cedeo y Edith Garca Cedeo por el apoyo que me han dado para la realizacin de mis estudios y por siempre estar ah cuando los necesito.
A mis hermanos Jos Carlos, Brenda y Karla por haberme apoyado en toda mi carrera.
AGRADECIMIENTOS
A mis padres y a todas aquellas personas que al paso del tiempo de esta carrera me hicieron y brindaron su apoyo y dedicacin para que pudiese hoy terminar mis estudios y presentar el siguiente trabajo.
Gracias a mis maestros, por compartir sus conocimientos y vivencias conmigo.
CURRICULUM VITAE
Eduardo Austreberto Bedolla Garca Fecha de Nacimiento: 29 de septiembre de 1986 Lugar de Nacimiento: Morelia Michoacn Pascasio Ortiz de Letona No. 189 Col. Agustn Arriaga Rivera. Morelia Michoacn. Tel. 3 26 70 19 Cel. 4432571919
E-mail: neon_3_15@hotmail.com
FORMACIN ACADMICA 1993-1998. Primaria. Escuela Primaria 18 de Marzo. Morelia, Michoacn. 1999-2001. Secundaria. Escuela Secundaria Federal No. 6 Dr. Alfonso Garca Robles. Morelia, Michoacn.
2001-
Bachillerato. Centro de Bachillerato Tecnolgico Agropecuario No. 7
La Huerta, Michoacn.
2002-
Preparatoria. Colegio de San Nicols de Hidalgo. Universidad Michoacana
de San Nicols de Hidalgo.
2003-2006. Bachillerato. Colegio de Bachilleres del Estado de Michoacn. Plantel Quiroga. Quiroga, Michoacn.
2006-2011. Licenciatura. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo.
ASISTENCIA A CURSOS, TALLERES O SEMINARIOS DE ACTUALIZACIN PROFESIONAL
Curso de Capacitacin de Informtica. Realizado de Febrero a Julio de 2006, en el Colegio de Bachilleres Plantel Quiroga, con un total de 56 crditos. 6 Curso Internacional Avances en el Diagnstico y Control de la Mastitis, realizado del 17 al 20 de 0ctubre de 2006 en el Centro Universitario de Ciencias Biolgicas y Agropecuarias de la Universidad de Guadalajara, Jalisco. Mxico (valor curricular de 40 horas). XII Congreso Veterinario de Len. Realizado del 5 al 8 de Septiembre del 2007, en la ciudad de Len Guanajuato. Con una duracin de 32 horas. Primer Congreso Regional de Buiatra. Realizado los das 21 y 22 de Septiembre de 2007, por la Asociacin Michoacana de Mdicos Veterinarios Zootecnistas Especialistas en Bovinos A. C., en Morelia, Michoacn. VI Ciclo de Conferencias AMVEC de la Piedad. Realizado por la Asociacin de Mdicos Veterinarios Especialistas en Cerdos de la Piedad, A. C., el 28 de Septiembre del 2007, en la ciudad de La Piedad Michoacn. Con una duracin de 8 horas. Seminario de anestesia y manejo del dolor, Realizado por Especialidades Virbac
CANIGEN 2008, el 14 de Marzo de 2008, en la ciudad de Morelia, Michoacn. Con una duracin de 5 horas. XIV Congreso Veterinario de Len. Realizado del 2 al 5 de Septiembre del 2009, en la ciudad de Len Guanajuato. Curso Internacional Diagnstico y Control de la Mastitis Bovina, realizado del 12 al 15 de Abril de 2010 en el Centro Universitario de Ciencias Biolgicas y Agropecuarias de la Universidad de Guadalajara, Jalisco. Mxico (40 horas de duracin).
3er. Congreso Regional de Buiatra. Realizado los das 10 y 11 de Junio del 2010, en la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Participacin en la segunda semana nacional de vacunacin antirrbica canina de reforzamiento, llevada a cabo del20 al 24 de Septiembre de 2010, en la ciudad de Morelia, Michoacn. Curso de Capacitacin Reconocimiento de la principales enfermedades exticas y emergentes de los animales, su vigilancia, prevencin y control, efectuado los das 20 al 23 de Junio de 2011. 3er Congreso Internacional y 12 Congreso Nacional de Investigacin Socioeconmica y Ambiental de la Produccin Pecuaria, Realizado los das 18,19 y 20 de Mayo del 2011 en la ciudad de Morelia Michoacn. Curso de Inseminacin Artificial en Bovinos, realizado los das 8 y 9 de Julio de 2010 en el municipio de Tarmbaro con una duracin de 25 horas. Gobierno del Estado de Michoacn y Secretara de Desarrollo Rural. 10 Precongreso Internacional de Actualizacin Veterinaria. Realizado el da 10 de agosto del 2011 en la ciudad de Len Guanajuato Mxico. 2 Congreso Internacional de Inocuidad Pecuaria. Realizado los das 1 y 2 de Septiembre de 2011 en la ciudad de Morelia Michoacn.
ASISTENCIA A CURSOS, TALLERES O SEMINARIOS DE ACTUALIZACIN PEDAGGICA VIII Curso-Taller Estatal del Educador Popular. Seccin XVIII SNTE-CNTE. Realizado del 18 al 22 de Julio de 2011 en la Ciudad de Morelia, Michoacn.
PARTICIPACIN EN ARTCULOS EN EXTENSO Artculo Prevalencia de mastitis bovina en Tjaro, Michoacn. Publicado en las memorias del XVII Encuentro de Investigacin Veterinaria y produccin Animal. Realizado los das 6 y 7 de Diciembre de 2006 en la FMVZ-UMSNH. Artculo Tcnicas de inseminacin artificial en ovinos. Publicado el 24 de Abril de 2007 en Monografas.com rea: Biologa. Artculo Frecuencia y etiologa de la mastitis subclnica en el municipio de Chern Michoacn, presentado en el V Encuentro Participacin de la Mujer en la Ciencia. Realizado del 21 al 23 de mayo de 2008, por el Centro de Investigaciones en ptica, A. C. Len, Guanajuato. Artculo Frecuencia y etiologa de la mastitis bovina en Cotzio municipio deTarmbaro Michoacn, presentado en el V Encuentro Participacin de la Mujer en la Ciencia. Realizado del 21 al 23 de mayo de 2008, por el Centro de Investigaciones en ptica, A. C. Len, Guanajuato. Artculo Incidencia y etiologa de la mastitis bovina en Maravato Michoacn, Presentado en el XXI Congreso panamericano de Ciencias Veterinarias. Realizado del 12 al 16 de octubre de 2008 en la ciudad de Guadalajara, Jalisco. Artculo Etiologa de la mastitis bovina en Maravato Michoacn, presentado en el VI Encuentro Participacin de la Mujer en la Ciencia. Realizado del 13 al 15 de mayo de 2009, por el Centro de Investigaciones en ptica, A. C. Len, Guanajuato. Artculo Prevalencia de mastitis subclnica en Ptzcuaro Michoacn, presentado en el VI Encuentro Participacin de la Mujer en la Ciencia. Realizado del 13 al 15 de mayo
de 2009, por el Centro de Investigaciones en ptica, A. C. Len, Guanajuato. Artculo Determinacin de consumo de alimento y ganancia de peso en conejos (oryctolagus cuniculus) durante la etapa de engorda con dos diferentes dietas comerciales Presentado en el VII Encuentro Participacin de la Mujer en la Ciencia.
Realizado en el Centro de Investigaciones en ptica, A. C. del 26 al 28 de Mayo de 2010 en la Ciudad de Len Guanajuato. Artculo Manejo del becerro recin nacido hasta el destete en un hato lechero en el GGAVATT Ganaderos Unidos de Tjaro, Michoacn Presentado en el VII Encuentro Participacin de la Mujer en la Ciencia. Realizado en el Centro de Investigaciones en ptica, A. C. del 26 al 28 de Agosto de 2010 en la Ciudad de Len Guanajuato. Artculo Origen y aislamiento microbiolgico de mastitis clnica en el ganado lechero en el municipio de Tarmbaro Michoacn Presentado en el V Congreso Universitario de Ciencias Veterinarias. Realizado en Puerto Vallarta, Jalisco, del 24 al 26 de Septiembre de 2008.
PARTICIPACIN COMO PONENTE EN CONGRESOS Y OTROS EVENTOS INTERNACIONALES, NACIONALES Y ESTATALES
Ponencias estatales Ponencia Prevalencia de mastitis en el ganado lechero del municipio de Tarmbaro, Michoacn, presentada en el marco de las actividades acadmicas del 2do. Congreso Estatal de Ciencia y Tecnologa, celebrado en el Colegio de Michoacn, A. C., el 10 de noviembre de 2006. Zamora, Michoacn. Ponencia Prevalencia y etiologa de la mastitis en el ganado lechero de Tjaro, Michoacn, presentada en el marco del II Congreso de Investigacin Cientfica, realizado del 21 al 24 de noviembre de 2006, en la ciudad de Morelia, Michoacn. Ponencia Prevalencia de mastitis bovina en el municipio de Tarmbaro, Michoacn, presentada en el marco del II Congreso de Investigacin Cientfica, realizado del 21 al 24 de noviembre de 2006, en la ciudad de Morelia, Michoacn.
Ponencias nacionales Ponencia Prevalencia de mastitis bovina en el municipio de Tarmbaro, Michoacn, presentada en el III Congreso Universitario de Ciencias Veterinarias. Realizada los das 29 y 30 de septiembre de 2006 en Puerto Vallarta Jalisco. Centro Universitario de Ciencias Biolgicas y Agropecuarias. Universidad de Guadalajara y Universidad Autnoma de Aguascalientes. Ponencia Prevalencia y etiologa de la mastitis en el ganado lechero de Tjaro, Michoacn, presentada en el III Congreso Universitario de Ciencias Veterinarias. Realizada los das 29 y 30 de septiembre de 2006 en Puerto Vallarta Jalisco. Centro Universitario de Ciencias Biolgicas y Agropecuarias. Universidad de Guadalajara y Universidad Autnoma de Aguascalientes. Ponencia Frecuencia de mastitis bovina causada por estafilococos coagulasa negativos en Tjaro Michoacn, presentada en la XX Semana de la Investigacin Cientfica. Realizada del 23 al 27 de noviembre de 2009 en el Centro Universitario de Ciencias Biolgicas y Agropecuarias. Universidad de Guadalajara, Jalisco. Ponencia Determinacin de la calidad de la leche del bote de recepcin de los hatos lecheros del municipio de Tarmbaro, Michoacn. Presentado en el VII Encuentro
Participacin de la Mujer en la Ciencia. Realizado en el Centro de Investigaciones en ptica, A. C. del 26 al 28 de Agosto de 2010 en la Ciudad de Len Guanajuato. Ponencia Resistencia antibitica de Staphylococcus aureus y estafilococos coagulasa negativos aislados de leche de vacas con mastitis subclnica de Tjaro Michoacn, presentada en el XXXV Congreso Nacional de Buiatra en Len, Guanajuato, realizado los das 11 al 13 de Agosto del 2011.
Ponencias internacionales Ponencia Etiology of subclinic mastitis in Patzcuaro Michoacan, presentado in The International Conference MASTITIS CONTROL 2008 From Science to Practice.
Realizada del 30 de septiembre al 2 de Octubre de 2008. In The Hague, the Netherlands. Ponencia Determinacin del conteo de clulas somticas con fossomatic en cabras lecheras de Ecuandureo Michoacn. Presentada en el XIV Congreso Latinoamericano de Buiatra. Realizado del 15 al 17 de Septiembre de 2009 en Lima, Per. Ponencia Determination of the quality of the milk cattle ranches of Tarimbaro
Michoacan. Presentada en el XXVI World Buiatrics Congress 2010. Realizado del 14 al 18 de noviembre de 2010 en Santiago, Chile. Ponencia Etiological agents of the Mastitis in dairy cows of the municipality of Alvaro Obregon Michoacn. Presentada en el XXVI World Buiatrics Congress 2010.
Realizado del 14 al 18 de noviembre de 2010 en Santiago, Chile. Ponencia Somatic cell count and somatic cell score in goats from Ecuandero,
Michoacan. Presentada en el XXVI World Buiatrics Congress 2010. Realizado del 14 al 18 de noviembre de 2010 en Santiago, Chile.
PARTICIPACIN EN CONFERENCIAS-TALLER Colaborador de la Conferencia-Taller Crianza de la codorniz en el XII Tianguis de la Ciencia, realizado los das 19 y 20 de abril de 2002, en la Unidad de Ciencias, Ingenieras y Humanidades de Morelia, Michoacn, organizado por la Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo y la Secretaria de Educacin en el estado. Colaborador de la Conferencia-Taller Crianza del conejo domstico en el XII Tianguis de la Ciencia, realizado los das 19 y 20 de abril de 2002, en la Unidad de Ciencias, Ingenieras y Humanidades de Morelia, Michoacn, organizado por la Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo y la Secretaria de Educacin en el estado. Colaborador de la Conferencia-Taller Cra y explotacin del conejo domstico en el XII Tianguis de la Ciencia, realizado los das 4 y 5 de abril de 2003, en la Unidad de Ciencias, Ingenieras y Humanidades de Morelia, Michoacn, organizado por la
Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo y la Secretaria de Educacin en el estado. Colaborador de la Conferencia-Taller Cra de Conejos en el XIV Tianguis de la Ciencia, realizado los das 23 y 24 de abril del 2004, en la Unidad de Ciencias, Ingenieras y Humanidades de Morelia, Michoacn, organizado por la Universidad
Michoacana de San Nicols de Hidalgo y la Secretaria de Educacin en el estado. Colaborador en la Conferencia-Taller Cra del conejo domstico en el Tianguis de la Ciencia 2005, realizado los das 22 y 23 de abril de 2005, en la Direccin General de Bibliotecas de la Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Organizado por la Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo, la Coordinacin de la Investigacin Cientfica y el Departamento de Comunicacin de la Ciencia. Colaborador en la Conferencia-Taller Embriognesis animal en el XVII Tianguis de la Ciencia 2007, realizado el 27 de abril de 2007, en Ciudad Universitaria. Organizado por la Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo, la Coordinacin de la Investigacin Cientfica y el Departamento de Comunicacin de la Ciencia. Colaborador en la Conferencia-Taller Sanidad de la ubre en el XVII Tianguis de la Ciencia 2007, realizado el 27 de abril de 2007, en Ciudad Universitaria. Organizado por la Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo, la Coordinacin de la Investigacin Cientfica y el Departamento de Comunicacin de la Ciencia.
DISTINCIONES Aprobacin del examen EGEL de Medicina Veterinaria y Zootecnia, con testimonio de desempeo SATISFACTORIO. Realizado el 26 de Agosto de 2011.
NDICE Pginas RESUMEN INTRODUCCIN........... 1 TIPOS DE MASTITIS. 1 Mastitis clnica. 1 Mastitis subclnica.. 3 IMPACTO DE LA MASTITIS EN LA SALUD PBLICA 4 CLASIFICACIN DE LOS AGENTES PATGENOS CAUSANTES DE LA MASTITIS BOVINA 5 Patgenos causantes de la mastitis contagiosa... 6 Patgenos causantes de la mastitis ambiental. 7 Gnero Staphylococcus 9 Habitat de los estafilococos.. 9 Divisin de los estafilococos. 10 Aislamiento e identificacin 11 Staphylococcus aureus. 12 Resistencia del Staphylococcus aureus a los antibiticos.. 15 FARMACOS EMPLEADOS PARA EL TRATAMIENTODE LA MASTITIS BOVINA 17 Aminoglucsidos 18 Cefalosporinas 18 Fenicoles.. 18
Macrlidos 19 Penicilinas... 19 Quinolonas. 20 Sulfamidinas-Trimetoprim 20 Tetraciclinas 21 DESVENTAJAS DE LOS ANTIBITICOS EN SALUD PBLICA.... 21 PRUEBAS DE SENSIBILIDAD ANTIBITICA.. 23 Pruebas de difusin en gel de agar o mtodo de Kirby Bauer 23 Pruebas de dilucin o concentraciones inhibitorias mnimas (C.I.M.). 23 OBJETIVO .. 26 MATERIAL Y MTODOS. 27 Prueba de California y toma de muestras de leche. 27 Aislamiento e identificacin de cepas de S. aureus. 28 Prueba de sensibilidad a antibiticos. 28 RESULTADOS Y DISCUSIN 30 CONCLUSIN .. 34 LITERATURA CITADA . 35
RESISTENCIA ANTIBITICA DE Staphylococcus aureus AISLADOS DE LECHE DE VACAS CON MASTITIS DE TJARO MICHOACN
RESUMEN
El objetivo del presente trabajo fue determinar la resistencia antibitica de Staphylococcus aureus aislados de leche de vacas con mastitis de Tjaro, Michoacn. El estudio se realiz de septiembre de 2010 a enero de 2011 en 16 hatos lecheros de la poblacin de Tjaro municipio de Tarmbaro, Michoacn, los cuales cuentan con 8 vacas en promedio. La mastitis subclnica se determin mediante la prueba de California de acuerdo con Wolter et al (2004), se obtuvieron 484 muestras de leche de 122 vacas en produccin. La identificacin de los estafilococos se llev a cabo a travs de su morfologa colonial, prueba de catalasa, tincin Gram, prueba de coagulasa, prueba de manitol gelatina y hemlisis. La prueba de susceptibilidad antibitica se llev a cabo a travs del mtodo de difusin en disco en agar Mueller-Hinton con 102 cepas de estafilococos (41 S. aureus y 61 Estafilococos Coagulasa Negativos) aisladas de las muestras de leche que se obtuvieron de los casos de mastitis subclnica de los hatos lecheros. Se encontr que de las 41 cepas de S. aureus estudiadas, 26 (63.41%) fueron resistentes a cuatro antibiticos, de las cuales 12 (29.2%) fueron resistentes a la penicilina, 9 (21.9%) a la ampicilina, 4 (9.7%) a la eritromicina y solamente 1 (2.4%) result resistente a las tetraciclinas. Se concluye que las cepas de Staphylococcus aureus aisladas en este trabajo mostraron mayor resistencia in vitro a los antibiticos de uso frecuente en la terapia de la mastitis bovina como son la Penicilina y Ampicilina. Resistencia que trae como consecuencia una disminucin en la respuesta al tratamiento en caso de mastitis clnica y la transmisin de bacterias resistentes a antibiticos a los consumidores a travs de la cadena alimentaria, cuando se consumen productos elaborados a partir de leche cruda, por lo que en el tratamiento de los animales infectados por S. aureus, es importante determinar a travs de un antibiograma la resistencia que estos presentan a los antibiticos y as aplicar el tratamiento adecuado.
Palabras clave: Mastitis bovina | Staphylococcus aureus | Resistencia antibitica
INTRODUCCIN
La mastitis es un proceso inflamatorio de la glndula mamaria y es comnmente una consecuencia de una infeccin microbiana causada por patgenos que penetran a la glndula a travs del canal del pezn (Seegers et al, 2003; Zhao y Lacasse, 2008). Es considerada una enfermedad altamente prevaleciente en el ganado lechero, y es una de las ms importantes que afecta mundialmente la industria lechera; pues ocasiona prdidas econmicas muy fuertes a todos los productores de leche en el mundo debido a la disminucin de la calidad y cantidad de leche producida y un aumento en los costos de tratamiento y servicios veterinarios, y prdida de animales (Correa et al., 2002; Ceron-Muoz et al., 2002; Wellenberg et al., 2002; Tomasinsig et al., 2010).
La mastitis bovina como ya se menciono arriba, normalmente se da como resultado de la infeccin intramamaria por bacterias que pueden producir la enfermedad de manera clnica o subclnica (Leigh, 1999; Dos Santos et al., 2002). Es decir, puede ser acompaada de signos clnicos o no. Una inflamacin intramamaria est asociada con un aumento en el conteo de clulas somticas (CCS) en la leche. Sin embargo, la magnitud del aumento en el conteo de clulas somticas vara de acuerdo a la bacteria involucrada en la infeccin intramamaria (Djabri et al., 2002).
TIPOS DE MASTITIS
Mastitis clnica
En algunos casos la inflamacin de los cuartos mamarios es acompaada de signos clnicos (signos pronunciados de inflamacin mamaria y de enfermedad sistmica), por lo que es diagnosticada entonces como mastitis clnica (Djabri et al., 2002).
La mastitis clnica es una anormalidad fcilmente observada por los granjeros en cualquiera de los dos casos: la leche y/o la ubre (de Mol, 2000). Es un problema que subsiste en muchos hatos lecheros (Barkema et al., 1999).
Se caracteriza por la tumefaccin o dolor en la ubre, enrojecimiento, la leche presenta una apariencia anormal y, en algunos casos, hay aumento de la temperatura rectal, letargo, anorexia e incluso la muerte. Adems, las bacterias estn presentes en la leche, el rendimiento es muy reducido, y su contenido est alterado
considerablemente (Heringstad et al., 2000; Schrick et al., 2001).
La mastitis clnica debida a Escherichia coli (E. coli), estreptococos ambientales, y Staphylococcus aureus (S. aureus) continua siendo un problema importante (Schukken et al., 1999). Y puede ser una condicin aguda y dolorosa que afecta el comportamiento animal (Zadoks, 2002). Durante la primera lactacin, este tipo de mastitis, resulta en obvias prdidas como son disminucin en la produccin de leche y alteraciones en la composicin de la misma (Barker et al., 1998).
En un estudio realizado por Barker et al. (1998), demostraron que las vacas con mastitis clnica durante la primera lactacin presentaron un prolongado intervalo hasta el primer servicio (94 das) comparado con animales que no presentaron mastitis clnica (71 das).
Adems, las vacas con mastitis clnica entre el primer servicio y el establecimiento de la gestacin tuvieron un aumento en el nmero de das abiertos y un doble aumento de servicios por concepcin (Hockett et al., 2000).
La mastitis clnica es una enfermedad costosa en las granjas lecheras de los Estados Unidos, con una tasa promedio de incidencia lactacional de 14.2% de acuerdo a un anlisis retrospectivo de 62 reportes realizados (Smith et al., 2001).
En el Reino Unido, la incidencia de mastitis clnica es aproximadamente de 40 casos por cada 100 vacas por ao o un milln de casos anualmente (Hillerton y Kliem, 2002).
Segn Heringstad et al. (2000) en 1993, el nmero de casos de mastitis clnica por 100 vacas al ao fue de 56, 32, 30 y 21 en Dinamarca, Finlandia, Noruega y Suiza respectivamente. En varios estudios realizados en California, Michigan y Ohio las incidencias de mastitis que se encontraron fueron de 30, 33 y 37 casos por 100 vacas por ao respectivamente. Estas estimaciones incluyen las mastitis reportadas por los dueos y tratadas por los veterinarios.
Los costos estimados por mastitis clnica varan dependiendo del pas y presupuesto e incluyen los costos del tratamiento y veterinario, la reducida produccin de leche durante la parte restante de la lactacin, las prdidas de leche que ha sido desechada debido a contaminacin con antibiticos, eliminacin temprana, labor extra, disminucin de la calidad de la leche e incremento de los riesgos de la enfermedad en el futuro. Los costos estimados por caso de mastitis clnica en Noruega son de 460 dlares americanos, en base a todos los costos arriba mencionados.
Las prdidas econmicas estimadas en Finlandia debido a un caso de mastitis clnica fueron de 215 dlares americanos en base al valor de leche desechada, costos en veterinario, medicina y de labor extra. Los costos de la mastitis clnica reportados por granjeros de Estados Unidos varan de 108 a 122 dlares por caso, en base a medicamentos y veterinario, preventivos, de trabajo extra, desecho y prdidas de leche (Heringstad et al., 2000).
Mastitis subclnica.
La mastitis subclnica es definida como la presencia de un microorganismo en combinacin con un conteo elevado de clulas somticas de la leche (de Mol, 2000).
EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA 3
El conteo elevado de clulas somticas en la leche indica mastitis subclnica (Hultgren, 2002).
Este tipo de mastitis no presenta cambios visibles en la leche o ubre. Se caracteriza por el reducido rendimiento de leche (Schrick et al., 2001), composicin alterada de la leche y la presencia de componentes inflamatorios y bacterias en la leche (Heringstad et al., 2000).
Cuando los signos no son visibles, la presencia de patgenos y las modificaciones citolgicas de la leche traen como resultado una mastitis subclnica (Djabri et al., 2002), por lo que las tcnicas de laboratorio como la medicin del conteo de clulas somticas y el cultivo bacteriolgico son necesarios para detectar inflamacin e infeccin (Barker et al., 1998).
La mastitis, particularmente subclnica y crnica, es la ms persistente y ms comn del grupo de enfermedades de importancia por la higiene de la leche en el ganado lechero. La mastitis subclnica ocurre frecuentemente, y puede conducir a grandes prdidas econmicas debido al reducido rendimiento de leche, y multas a causa de los elevados conteos de clulas somticas presentes en los tanques de leche. En la prctica, los casos de mastitis subclnica con frecuencia no son detectados rpidamente, o pueden incluso no ser reconocidas por el ordeador (Wellenberg et al., 2002).
Segn Wellenberg et al. 2002, actualmente las prdidas ocasionadas por ambos tipos de mastitis clnica y subclnica pueden ascender a 20% de la produccin potencial.
IMPACTO DE LA MASTITIS EN LA SALUD PBLICA
El amplio consumo de productos lcteos y las recientes epidemias de enfermedades animales que reciben mucha publicidad ha aumentado la preocupacin del
consumidor acerca de la calidad de alimentos de origen animal, coincidente con estas tendencias, la globalizacin que ha influenciado la definicin de leche de alta calidad adems que las expectativas del consumidor cada vez afectan ms las prcticas de manejo animal (Patio, 2008).
La resistencia cuesta dinero, medios de subsistencia y vidas humanas, y amenaza con socavar la eficacia de los programas de atencin de la salud. Se ha descrito recientemente como un problema para la estabilidad mundial y la seguridad de los pases. Pocos estudios han indicado que los clones resistentes se pueden reemplazar por otros susceptibles; sin embargo, en general, tarda en revertirse o es irreversible (Organizacin Mundial de la Salud, 2001).
La leche contaminada pone en peligro la salud de quienes la consumen, en el caso del hombre cobra gran importancia la diseminacin de bacterias causantes de enfermedades tales como: tuberculosis, brucelosis, faringitis estreptoccica, entre
otras (vila et al., 2004; Ruiz y Romero, 2003; Patio, 2008).
Segn Reinemann, (1998) las dos fuentes ms importantes de bacterias en la leche cruda son: 1) Los patgenos de la mastitis de la ubre. 2) Los patgenos ambientales que contaminan la mquina de ordeo (Patio, 2008).
CLASIFICACIN DE LOS AGENTES PATGENOS CAUSANTES DE LA MASTITIS BOVINA
En la glndula mamaria bovina se han identificado hasta 140 especies, subespecies y serovariedades microbianas. Las tcnicas microbiolgicas han permitido la
determinacin precisa de la identidad de muchos microorganismos patgenos de la mastitis. Tomando como base la epidemiologa y la fisiopatologa, se han clasificado estos microorganismos como causantes de la mastitis contagiosa o ambiental, en base a su asociacin epidemiolgica con la enfermedad y a su proclividad de causar
la infeccin oportunista, persistente o transente, respectivamente (Bedolla y Castaeda, 2003; Radostits et al., 2002; Riffon et al., 2001; Rossitto et al., 2002; Gallegos y Moncada, 2011).
Segn Riffon et al. 2001, las bacterias responsables de la mastitis bovina pueden ser clasificadas como contagiosas y ambientales, dependiendo de su reservorio primario y el ambiente contra el cuarto de la glndula mamaria infectada.
Patgenos causantes de la mastitis contagiosa
Los patgenos contagiosos de primera importancia incluyen al Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium spp., y al Mycoplasma spp. (Riffon et al., 2001; Rossitto et al., 2002; Djabri et al., 2002). Son organismos transmitidos de vaca a vaca a travs de los paos utilizados para limpiar las ubres, la leche residual en las pezoneras y un equipo de ordeo inadecuado donde el reservorio primario que alberga los patgenos es el animal infectado o el cuarto de la ubre (Bedolla y Castaeda, 2003; Rossitto et al., 2002; Zadoks et al., 2001; Radostits et al., 2002), y la exposicin de los cuartos mamarios no infectados se restringe al proceso de la ordea (Zadoks et al., 2001; Zadoks, 2002; Gallegos y Moncada, 2011; Bedolla, 2011).
Los patgenos contagiosos de la mastitis como el Staphylococcus aureus y Streptococcus agalactiae que son infecciosos a nivel individual y a nivel de poblacin (Zadoks, 2002), han sido reportados bajo control en los hatos lecheros a travs del uso de prcticas de manejo que utilizan la desinfeccin de las tetas despus de la ordea, terapia de la vaca seca, desecho, mantenimiento del equipo de ordeo, y terapia antibitica de las infecciones intramamarias (Rossitto et al., 2002; Bedolla, 2011).
A pesar de que la mastitis por organismos contagiosos (especialmente Streptococcus agalactiae) ha disminuido por mejoramiento en el manejo, las prdidas econmicas debido a la enfermedad pueden continuar porque los organismos causales no pueden ser erradicados del medio ambiente de las vacas lecheras (Nash et al., 2002).
En general, un programa de control de la mastitis concienzudo puede erradicar a Streptococcus agalactiae de la mayora de los rebaos lecheros. Es mucho ms difcil tratar los rebaos en los que Staphylococcus aureus tiene una prevalencia alta (Radostits et al., 2002).
Patgenos causantes de la mastitis ambiental
Los patgenos principales en este grupo son los bacilos entricos Gramnegativos (Escherichia coli, Klebsiella spp.), Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, y Enterococcus spp. (Rossitto et al., 2002). Otros microorganismos patgenos se incluyen en la clase ambiental de este tipo de infecciones.
Se trata generalmente de oportunistas que invaden la glndula mamaria cuando los mecanismos de defensa estn disminuidos o cuando se introducen inadvertidamente en la glndula mamaria al realizar un tratamiento intramamario. Este grupo de microorganismos oportunistas incluyen a Pseudomona spp., levaduras, Prototheca spp., Serratia marcescens y Nocardia spp. Cada uno de estos agentes poseen caractersticas de cultivo, mecanismos patgenos y consecuencias clnicas singulares (Radostits et al., 2002).
La fuente de estos agentes patgenos es el entorno de la vaca. La forma de transmisin principal es del ambiente a la vaca a travs de un manejo inadecuado del primero. Algunos ejemplos incluyen la cama hmeda, terrenos sucios, ubres mojadas por la leche, preparacin inadecuada de la ubre y los pezones antes del ordeo y sistemas de estabulacin que favorecen las lesiones en los pezones (Radostits et al.,
2002). Y la exposicin de los cuartos no infectados a los patgenos ambientales que puede ocurrir en cualquier momento durante la vida de una vaca (Zadoks et al., 2001). Estas infecciones generalmente ocurren de forma espordica. Sin embargo, se pueden producir brotes en los rebaos o en una regin entera, normalmente como consecuencia de problemas con la higiene o el tratamiento. Por ejemplo, se ha producido mastitis causada por Pseudoma aeruginosa en brotes relacionados con la contaminacin de las conducciones de goma en las salas de ordeo (Radostits et al., 2002).
La mastitis ocasionada por patgenos ambientales es el principal problema que afecta a muchos hatos lecheros bien manejados, que aplican un programa de control de los patgenos contagiosos de la mastitis (Calvinho et al., 1998; Phuektes et al., 2001).
Debido a que en la actualidad estos patgenos no han sido bien controlados por los mtodos arriba mencionados, ahora estn surgiendo como la causa ms frecuente de mastitis en muchos hatos, particularmente bien manejados, hatos con bajo conteo de clulas somticas (<200,000 cs/ml) (Rossitto et al., 2002).
Tradicionalmente, los agentes ms comunes causantes de la mastitis tambin han sido clasificados como patgenos principales (mayores) y menores segn el grado de inflamacin que estos producen en la glndula mamaria (Ariznabarreta et al., 2002).
Los patgenos principales son definidos como los patgenos responsables, la mayora de las veces, de las mastitis clnicas o de fuertes respuestas inflamatorias (conteos elevados de clulas somticas en la leche) y comprenden al Staphylococcus aureus, estreptococos (S. uberis, S. agalactiae, S. dysgalactiae) y coliformes (Ariznabarreta et al., 2002; White et al., 2001; Djabri et al., 2002).
Los patgenos menores son definidos como los patgenos que infectan la glndula mamaria, causando conteos moderados de clulas somticas, pero en lo general no causan signos clnicos. Estas infecciones, son especialmente frecuentes, debidas
sobre todo a estafilococos coagulasa negativos (principalmente S. chromogenes, S. hyicus, S. epidermidis, y S. xylosus) o por Corynebacterium bovis y Micrococcaceae coagulasa-negativos (Ariznabarreta et al., 2002; White et al., 2001; Djabri et al., 2002).
Gnero Staphylococcus
El
gnero
Staphylococcus
se
ha
clasificado
tradicionalmente
en
la
familia
Micrococcaceae junto con, entre otros, el gnero Micrococcus.
Los estafilococos son cocos grampositivos (de 0.5 a 1.5 um de dimetro) que se presentan sueltos, en parejas, en pequeas cadenas (de 3 4 clulas) y mas caractersticamente en grupos irregulares en forma de racimos (su denominacin procede del griego staphyle, racimo de uvas) (Vadillo et al., 2002).
Son anaerobios facultativos, catalasas positivos, generalmente oxidasa negativos, no esporulados, inmviles y generalmente no forman cpsula o tienen una limitada formacin capsular.
En la actualidad en el gnero Staphylococcus
se reconocen 32 especies y varias
subespecies, si bien solo algunas de ellas tienen importancia desde el punto de vista clnico (Vadillo et al., 2002).
Hbitat de los Estafilococos
Los estafilococos estn ampliamente difundidos en la naturaleza. Su hbitat natural es la piel y las membranas mucosas de los mamferos y las aves. Tambin pueden encontrarse de forma transitoria en el tracto intestinal.
La presentacin de varias de las especies de estafilococos coagulasa negativos descritas en los ltimos aos como est prcticamente restringida a la especie animal a la que se hace referencia su denominacin latina. Otras especies, como
Staphylococcus hyicus, Staphylococcus chromogenes, Staphylococcus sciuri y Staphylococcus lentus tienen una difusin algo ms amplia y se presenta en los ungulados (Vadillo et al., 2002).
Divisin de los estafilococos
Los estafilococos, segn produzcan o no la enzima coagulasa, grandes grupos:
se dividen en dos
1. Estafilococos
coagulasa
positivos
(ECP)
(Staphylococcus
aureus,
Staphylococcus intermedius, Staphylococcus hyicus).
2. Estafilococos
coagulasa
negativo
(ECN)
(Staphylococcus hominis,
chromogenes, Staphylococcus
Staphylococcus
heamolyticus,
Staphylococcus
simulans, Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus hyicus).
Existe una buena correlacin entre
la
produccin de coagulasa y la capacidad
patgena de los estafilococos, de tal manera que, en general, se considera que los ECP son patgenos y que los ECN no lo son (Cuadro 1) (Vadillo et al., 2002).
10
Cuadro 1. Familia micrococacceae Familia Micrococacceae Gnero Staphylococcus Especie Staphylococcus aureus S. intermedius S. hyicus
Coagulasa +
Staphylococcus chromogenes S. heamolyticus S. hominis Coagulasa S. hyicus S. simulans Otros Micrococcus M. roseus M. varians
Planococcus Stomatococcus (Fuente: Saran y Chaffer, 2000).
En el grupo de ECP se incluyen S. aureus, S. intermedius, S. hyicus (aunque solo entre un 24 y 56 % de las cepas son coagulasa positivas) (Vadillo et al., 2002).
Aislamiento e identificacin
Los estafilococos crecen en los medios de cultivo ordinarios, como el agar nutritivo, si bien para la siembra de muestras clnicas (exudados, pus de abscesos, leche mamtica, raspados de piel, orina, etc.) se utiliza habitualmente el agar sangre (preferentemente de oveja), medio en que puede apreciarse la capacidad hemoltica producido por las bacterias.
Existen varios medios selectivos para los estafilococos, como el agar sal manitol y el medio de Baird-Parker, que se utiliza principalmente para anlisis de alimentos. Las
colonias aparecen normalmente a las 24 horas de incubacin pueden alcanzar los 4 mm de dimetro. Estas colonias son redondas, lisas y brillantes y en agar sangre opacas, lo que las diferencia de las colonias de los estreptococos beta-hemolticos, que son ms pequeas y translcidas. Las colonias pueden ser o no pigmentadas mostrando en este caso distintas tonalidades, desde el crema plido al amarillo vivo (Vadillo et al., 2002).
El criterio generalmente utilizado para la identificacin de las especies patgenas es la capacidad de coagular el plasma. Esta capacidad se determina bien con una prueba de tubo, o bien con una prueba en portaobjetos. La prueba en tubo, permite detectar la coagulasa libre y se realiza aadiendo a 0.5 ml de plasma de conejo citratado o con EDTA un par de gotas bien en un cultivo lquido de 18 horas, o bien de una suspensin densa preparada a partir de un cultivo de agar. La lectura de la prueba se hace a las 4 y a las 24 horas.
La prueba de la coagulasa en parte permite detectar el clumping factor y se realiza preparando una suspensin muy densa de bacterias en una gota de agua depositada en un portaobjetos y sobre la suspensin se aade con un asa de platino una gota de plasma de conejo y se mezcla rotando el asa (Vadillo et al., 2002).
Staphylococcus aureus
El Staphylococcus aureus (S. aureus) es la principal causa de infeccin intramamaria en los rumiantes (Bayles et al.,1998; Yugueros et al.,1999; Zadoks et al., 2000; Mullarky et al., 2001) por lo que se le considera el agente causal ms importante y frecuente de la mastitis bovina (Ferens et al., 1998; Lammers et al., 2000; Sordelli et al., 2000; Tollersrud et al., 2000; Fitzgerald et al., 2001; dos Santos et al., 2002).
Aunque varios patgenos bacterianos pueden causar la mastitis, el S. aureus es el primer agente etiolgico en la mayor parte del mundo (Tollersrud et al., 2000), ha
surgido como el ms prevaleciente, y una vez establecido en la glndula mamaria es muy difcil de erradicar (Sordelli et al., 2000) y causa las prdidas econmicas ms considerables en la industria de la leche (Lammers et al., 2000).
En muchos pases el S. aureus es un patgeno de la ubre, muy importante que causa la mastitis (Bjorland et al., 2001). En 1998 Smith, informo de un brote de mastitis causada por S. aureus, en el estado de Washington, en un hato lechero (Middleton et al., 2002); el S. aureus y las bacterias estreptococales son los agentes etiolgicos ms comunes involucrados en los casos clnicos y subclnicos de mastitis en los hatos lecheros de Nueva Zelanda (Douglas et al., 2000).
El S. aureus es el patgeno principal responsable de una amplia gama de infecciones agudas y crnicas. El primer paso en las infecciones por S. aureus es la adherencia a las diferentes superficies y colonizacin de tejidos del organismo infectado. Para este propsito el S. aureus presenta una familia de adherencias llamada MSCRMMs (componentes de la superficie microbiana que reconocen las molculas adhesivas de la matriz).
Estas interacciones permiten al S. aureus adherirse a una variedad de lneas celulares y promover la invasin y muerte por apoptosis de clulas epiteliales infectadas. Otro paso en la colonizacin del S. aureus es la formacin de una biopelcula. La formacin de esta biopelcula es una inquietud importante en las infecciones porque protege a los microorganismos de los leucocitos y antibiticos, llevando a la infeccin crnica y septicemia. Fenmenos similares ocurren con otras bacterias patgenas, como Staphylococcus epidermidis, Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae, Neisseria meningitisdis, Escherichia coli y Haemophylus influenzae (Cucarella et al., 2002).
El S. aureus se reconoce mundialmente como una causa frecuente de infecciones intramamarias subclnicas en las vacas lecheras (Riollet et al., 2001). El reservorio principal del S. aureus parece ser el cuarto infectado y la transmisin entre las vacas,
normalmente, ocurre durante la ordea (Akineden et al., 2001), la interaccin del S. aureus con las clulas de la glndula mamaria bovina es considerada esencial en el rol que desempea en la patognesis de la mastitis (Lammers et al., 1999).
Recientemente se ha demostrado que el S. aureus induce la apoptosis en las clulas epiteliales de la glndula mamaria bovina, indicando que este proceso pudiera estar involucrado en la persistencia o patognesis de este patgeno (Wesson et al., 1998).
En recientes experimentos que evalan la invasin y supervivencia intracelular del S. aureus en las clulas del tejido endotelial, epitelial y osteoblasto; se ha indicado que la supervivencia intracelular pudiera contribuir a la persistencia del patgeno, induciendo endocarditis, mastitis bovina y osteomielitis (Gresham et al., 2000).
El S. aureus es actualmente uno de los patgenos ms difciles de controlar porque puede extenderse rpidamente entre el hato y puede responder pobremente a una terapia antibitica convencional (Soltys y Quinn, 1999); la naturaleza crnica de la mastitis bovina por S. aureus, indica que algunos productos o componentes de este patgeno pueden interferir en el desarrollo de la inmunidad protectora (Ferens et al., 1998).
Este patgeno puede causar muchas enfermedades en los humanos y animales (Fitzgerald et al., 2001), es el agente causal de muchas infecciones oportunas en los humanos y los animales (Yugueros et al., 1999). Las infecciones debidas al S. aureus es de la mayor importancia en la medicina veterinaria y humana (Zadoks et al., 2000). En el humano el S. aureus es un patgeno responsable de la septicemia, endocarditis y el sndrome del shock txico; ocasionando la mastitis en las vacas y ovejas (Fitzgerald et al., 2001).
El S. aureus exporta una gran variedad de enzimas, algunas de las cuales tienen factores de virulencia conocidos (Reed et al., 2001), algunas de estas enzimas son
14
capaces de incrementar las caractersticas invasoras del microorganismo y lo protegen de los mecanismos corporales de defensa.
El S. aureus sigue siendo un patgeno persistente alrededor del mundo que causa serias infecciones. Las enfermedades que se han asociado con el S. aureus son diversas, yendo de las infecciones en heridas menores a las enfermedades ms serias, incluso la endocarditis, osteomielitis y el shock sptico (Wesson et al., 1998).
Resistencia del Staphylococcus aureus a los antibiticos
La resistencia no es un fenmeno nuevo; al principio se reconoci como una curiosidad cientfica y luego como una amenaza a la eficacia del tratamiento. Sin embargo, el desarrollo de nuevas familias de antimicrobianos en dcadas de 1950 y 1960, y las modificaciones de esas molculas en las de 1960 y 1980 nos indujo a creer que siempre podramos adelantarnos a los agentes patgenos. Al comenzar el nuevo siglo, estamos pagando muy cara esa complacencia. La generacin de medicamentos nuevos se est estancando y son pocos los incentivos para elaborar antimicrobianos nuevos que permitan combatir los problemas mundiales de la farmacorresistencia (Patio, 2008).
Las bacterias adquieren la capacidad de resistir la accin de los antibiticos a travs de varios mecanismos como lo son:
La variabilidad gentica La modificacin de la permeabilidad de la membrana interna La extraccin del compuesto y la inhibicin enzimtica La modificacin del blanco ribosomal o la alteracin de la composicin y el contenido de glicoprotenas de la pared bacteriana. Esta resistencia es transmitida entre microorganismos de un mismo gnero (transmisin horizontal) y entre microorganismos de gneros diferentes (transmisin
vertical). A todo lo anterior se adiciona el hecho de que se dispone de escasos datos de susceptibilidad a los antimicrobianos y la vigilancia de la resistencia no se lleva a cabo en todos los pases (Patio, 2008)
La mastitis causada por S. aureus es casi imposible de controlar con terapia de antibiticos nicamente.
La efectividad de la terapia tiene un rango de un 20 a un 70%, dependiendo de si las infecciones son crnicas y/o acompaadas de formaciones grandes de tejido de cicatrizante. Sin embargo, muchas infecciones persisten, provocando manifestaciones clnicas durante el inicio de la lactancia. Los animales que presentan estos signos deben separarse del hato pues representan una reserva significativa de contagio a otras vacas.
El tratamiento con antibiticos en la lactancia es de poco beneficio. Slo de un 10 a un 30% de los cuartos infectados sern curados. La infusin de drogas puede reducir temporalmente el conteo de clulas somticas y hasta mejorar la apariencia de la leche en cuartos clnicamente infectados, pero realmente no eliminan muchas
infecciones. Esto se debe a que los microorganismos quedan amurallados con el tejido cicatrizante el cual los protege de los antibiticos (Patio, 2008).
El S. aureus tambin desarrolla una resistencia a ciertos antibiticos y puede producir una enzima (penicilinasa) que inactiva a la penicilina. Por eso el mtodo para infecciones subclnicas usando terapia convencional durante la lactancia, no debe recomendarse.
Se han descrito a lo menos, tres mecanismos de resistencia del S. aureus a los Blactmicos, en muchas ocasiones relacionados entre s: produccin de B-lactamasas, fenmenos de tolerancia, y resistencia por protenas fijadoras de penicilina
modificadas o supernumerarias, conocida como resistencia intrnseca a meticilina (Patio, 2008).

Cuando se detecta una cepa resistente a oxacilina, ninguna otra penicilina resistente a penicilinasa, cefalosporina, combinacin de B-lactmicos, con inhibidores de Blactamasa o incluso imipenem, sern eficaces para el tratamiento del S. aureus, independientemente de que las distintas cepas muestren sensibilidad in vitro en los estudios de laboratorio (Patio, 2008).
FRMACOS EMPLEADOS PARA EL TRATAMIENTO DE LA MASTITIS BOVINA
Los antimicrobianos son sustancias producidas por fermentacin de microorganismos o en forma sinttica y que se utilizan para curar infecciones bacterianas, favorecen la recuperacin de los animales enfermos y alivian el sufrimiento y las lesiones asociados con la enfermedad.
El tratamiento de los animales con antibiticos debe tener una adecuada relacin costobeneficio, un claro ejemplo es el tratamiento de todas las glndulas mamarias de todas las vacas que finalizan lactacin.
Las mastitis subclnicas por lo general no se tratan ya que realizando medidas de higiene y desinfeccin, buen ordeo y buen funcionamiento de la mquina de ordeo se corrigen estos problemas (Patio, 2008).
Si bien existe una gran variedad de medidas de control de la enfermedad, la terapia con antibiticos desempea un papel determinante en la eliminacin de la mastitis bovina. La mayora de las drogas antimicrobianas utilizadas son -lactmicos, aminoglucsidos y macrlidos). La respuesta a estos antibiticos vara segn el agente etiolgico (Patio, 2008; Pellegrino et al., 2011).
17
Aminoglucsidos
Se denominan as, por estar formados por aminoazcares unidos por enlaces glucosdicos. Su mecanismo de accin incluye la inhibicin de la sntesis proteica bacteriana debido a la unin de la sub-unidad ribosmica 308 de la bacteria. Estos son captados activamente por la bacteria mediante un proceso que requiere condiciones aerbicas. La resistencia bacteriana a estos antimicrobianos se desarrolla rpidamente y se produce como resultado de la modificacin enzimtica del frmaco en varios lugares. Un microorganismo resistente a un aminoglucsido puede ser todava sensible a otro del mismo grupo. Tienen una rpida absorcin por la va intramuscular y subcutnea. Estos se distribuyen en los lquidos extracelulares, pero tienen una escasa acumulacin en el lquido cefalorraqudeo. Se inactivan rpidamente en altas concentraciones de pus (Fuentes, 1992; Patio, 2008). Los de mayor uso en el bovino son la gentamicina, estreptomicina y dihidroestreptomicina (derivado sinttico de la estreptomicina).
Cefalosporinas
Este grupo est estrechamente relacionado con las penicilinas y tiene un ncleo 7 amino-cefalospornico, siendo similar a su modo de accin, disposicin fisiolgica y toxicidad. Tienen una resistencia superior a la inactivacin por las enzimas Blactamasas producidas por los estafilococos. Inhiben la formacin de la pared celular (Meyer, 1982; Patio, 2008).
Fenicoles
Son compuestos bacteriostticos de amplio espectro y presentan accin contra bacilos gram-positivos y gram-negativos. Acta interfiriendo con la sntesis proteica mediante el bloqueo de la sntesis en el ribosoma. Se combina competitivamente con la subunidad
ribosmica 50S, bloqueando la entrada de aminocidos en la cadena peptdica en desarrollo. La conjugacin del cloranfenicol tiene lugar en el hgado y la eliminacin es principalmente por va urinaria. Actualmente la utilizacin del cloranfenicol est limitada en Mxico y otras partes del mundo debido a los casos de reacciones txicas, provocando particularmente discrasias sanguneas. Este compuesto inhibe el metabolismo microsomal del frmaco en el hgado y por lo tanto prolonga los efectos de otros frmacos, que normalmente son eliminados del organismo por oxidacin. Adems de los efectos txicos de este compuesto, su utilizacin est restringida por su implicacin en las resistencias transmisibles (Meyer, 1982; Patio, 2008).
Macrlidos
Este grupo de componentes antimicrobianos posee un gran anillo lactnico. Son activos contra la mayora de los microorganismos gram-positivos. La mayora de los macrlidos son bacteriostticos, pero en altas concentraciones y contra determinadas bacterias pueden ser bactericidas. Su modo de accin es por interferencia con la sntesis proteica por alteracin de los ribosomas bacterianos (Sumano y Ocampo, 1997; Fuentes, 1992).
Penicilinas
Se distribuyen en los lquidos extracelulares, incluyendo las articulaciones, los lquidos de las heridas, la glndula mamaria y el feto en el animal gestante. Sin embargo, cuando se administra parenteralmente no alcanza el lquido cefalorraqudeo ni el ojo. En general presenta eficacia para la mayora de las bacterias Gram-positivas como los estafilococos. Su mecanismo de accin interfiere con la sntesis de la pared celular bacteriana, siendo por tanto bactericida, es decir, interfiere con la sntesis de los polipptidos necesarios para la pared celular y presenta su eficacia mxima contra las bacterias en rpido crecimiento. Presenta poco efecto contra las bacterias maduras que no estn en divisin. Determinadas cepas de las bacterias estafiloccicas producen
una penicilinasa (B-lactamasa), que transforma la penicilina en cido peniciloico inactivo. Este grupo de compuestos no son inactivados por la sangre, el pus, los autolisados tisulares, ni por un gran nmero de bacterias. En algunos casos se pueden observar reacciones de hipersensibilidad que van desde urticaria y prurito hasta anafilaxia aguda (Sumano y Ocampo, 1997).
Quinolonas
Son el grupo farmacolgico de mayor desarrollo en la actualidad. Se distinguen tres generaciones con potencia antibacteriana y rasgos farmacolgicos progresivamente mayores. Las bacterias resistentes a las quinolonas aparecen en clnica como resultado de la terapia con estos agentes. Su efecto citotxico depende de que penetren a travs de la membrana bacteriana y alcancen su diana celular (DNA girasa o topoisomerasa IV) para inducir la muerte de la bacteria. En principio, las resistencias a las quinolonas puede deberse a mutaciones que afecten cualquier paso de este proceso. As, los mecanismos de resistencia bacteriana a las quinolonas pueden agruparse en tres categoras: a) Resistencia de tipo cromosmico que dan lugar a mutaciones en segmentos definidos de los genes que codifican la DNA girasa (especialmente en la subunidad A y la topoisomerasa IV, dando lugar a las QRDR (regiones-determinantesde resistencia-a quinolonas); b) Resistencia por alteraciones en la membrana externa bacteriana que disminuyen la presin intracelular del frmaco. Estas modificaciones se originan en alteraciones de los genes que codifican los canales de las purinas, lo que impide la entrada del quimioterpico en la bacteria; c) Resistencias basadas en la expulsin del antibacteriano desde el medio intracelular al extracelular por accin de transportadores endgenos activos (Sumano y Ocampo, 1997; Patio, 2008).
Sulfamidinas-Trimetoprim
Las sulfonamidas son cidos dbiles y moderadamente solubles. Actan interfiriendo con la sntesis de acido flico a partir de acido paraminobenzoico (PABA). Dado que las
sulfonamidas actan de esta forma, los grmenes que pueden utilizar el cido flico transformado son insensibles. Ya que la sntesis de cido flico es necesaria para un rango amplio de bacterias, las sulfonamidas tienen un amplio espectro de accin. Su espectro incluye a bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. La frecuente utilizacin previa de sulfonamidas ha dado lugar a muchos grmenes resistentes. Para evitar la resistencia se ha utilizado exitosamente la incorporacin de trimetoprim, que acta sinrgicamente con la sulfonamida bloqueando la sntesis de cido flico, por tanto esta asociacin es eficaz contra un amplio rango de grmenes. Tambin aumenta la potencia utilizando mezclas mltiples (generalmente 3) de sulfonamidas las cuales ya se encuentran disponibles comercialmente (Sumano, 1997; Patio, 2008).
Tetraciclinas
Tienen el espectro ms amplio que todos los antibiticos y acta bien contra los cocos Gram-positivos. Actan interfiriendo la sntesis de proteica en la unidad ribosmica 30S, y en menor grado interfieren con la fosforilacin oxidativa, con la oxidacin de la glucosa y con permeabilidad de la membrana celular. Este grupo se distribuye ampliamente, atraviesan la placenta y alcanza el lquido cefalorraqudeo (Patio, 2008).
DESVENTAJAS DE LOS ANTIBITICOS EN SALUD PBLICA
Cada vez son ms las pruebas cientficas que relacionan la administracin de antimicrobianos a los animales destinados al consumo y el desarrollo de resistencia de los agentes patgenos comunes (Patio, 2008).
La resistencia de las bacterias a los antibiticos es un problema que tiene consecuencias para la salud animal y humana cuando los agentes patgenos se introducen en la cadena alimentaria. Grupos de expertos cientficos tanto del Instituto de Medicina, la Sociedad Americana de Microbiologa y la Organizacin Mundial de la
Salud han expresado preocupacin acerca del incremento global de las resistencias (Patio, 2008; Fedorka et al., 1998). En la prdida de sensibilidad a un antibitico intervienen varios factores. Las dos fuerzas principales son la prevalencia de genes de resistencia (que determinan protenas que protegen a las bacterias de los efectos de los frmacos) y la difusin del uso de antibiticos. Si la flora bacteriana de una comunidad carece de genes que confieren resistencia contra un antibitico, este podr eliminar con xito toda la infeccin, pero si en la flora existen genes de resistencia y la comunidad hace uso persistente de un antibitico, las bacterias que escapen a la erradicacin por ese frmaco harn acto de presencia y proliferarn y adems la resistencia puede propagarse a lugares distantes.
Los antibiticos si bien son necesarios para el control de las infecciones bacterianas, pueden tener efectos indeseables sobre la ecologa microbiana. Pudiendo producir cambios en las proporciones de las bacterias sensibles/resistentes a los antibiticos, tanto en el individuo sometido al tratamiento como en el medio y la comunidad en general (Stuart, 1998; Ruiz et al., 2001).
La contaminacin de la leche con diferentes frmacos como son; antibiticos, antispticos, promotores del crecimiento, etc., es una secuela frecuente posterior al tratamiento o prevencin de enfermedades que afectan a los animales de produccin. Existen prdidas evidentes si se retiran de la ordea de manera muy estricta y sin datos especficos a los animales tratados con frmacos. Por otro lado, la consecuencia de permitir la distribucin de esos productos para la poblacin, puede acarrear serios problemas de salud. Un claro ejemplo es la presencia de residuos antibiticos en la leche, puede inducir alergias y resistencias bacterianas; a otro nivel puede afectar los procesos de industrializacin de la misma. Aunado a esto el aspecto que ms temor causa es la incertidumbre de que aun no se sabe cules y qu tan graves efectos tendrn los residuos de tantos frmacos ingeridos de manera crnica. Por ejemplo, se ha estimado que la presentacin de anemia aplstica en humanos se puede inducir con tan solo 1 ppm de cloramfenicol presente en productos de origen animal (Doyle, 2008; Patio, 2008).
PRUEBAS DE SENSIBILIDAD ANTIBITICA
Los clnicos en cualquiera de las reas de la salud, dependen ampliamente de los datos microbiolgicos de laboratorio para el tratamiento de sus pacientes. Por esto la importancia de las pruebas de sensibilidad a antibiticos, ya que proveen una informacin valiosa para las decisiones teraputicas; y deben ser realizados en condiciones ptimas para su eficiente interpretacin (National Committee for Clinical Laboratory Standars, 1999). Algunas de stas son las siguientes:
1. Pruebas de difusin en gel de agar o mtodo de Kirby - Bauer
Este mtodo consiste en el cultivo de los agentes patgenos en medios apropiados para su crecimiento, en el cual se colocan antibiticos en discos que dependiendo de la concentracin del antibitico en este y de la sensibilidad del microorganismo al antimicrobiano, da como resultado zonas donde el crecimiento bacteriano es inhibido luego de varias horas de incubacin (National Committee for Clinical Laboratory Standars, 1999).
Este mtodo da como resultado datos cualitativos ordinales (sensible, intermedio y resistente), dichos resultados son la conclusin de varias consideraciones como la especie de microorganismo, la clase de antibitico, concentracin del antibitico en el disco, el halo de inhibicin del crecimiento (medido en mm) (Bauer et al., 1996).
2. Pruebas de dilucin o concentraciones inhibitorias mnimas (C.I.M.)
La determinacin de las Concentraciones Inhibitorias Mnimas (C.I.M.), para los patgenos especficos, provee datos, que conjuntamente con los parmetros farmacocinticos de los agentes antibacteriales en el animal, permiten predecir la eficacia in vivo del compuesto en el tratamiento de una enfermedad especfica. Aunque existen regmenes teraputicos para muchos agentes antibacteriales utilizados en el tratamiento de infecciones intramamarias, la sensibilidad del germen puede variar
de tal manera que es necesario replantear el esquema teraputico; de acuerdo al patrn de sensibilidades desarrollado, y para esto las C.I.M. permiten a los veterinarios monitorear la sensibilidad antimicrobial de las cepas en los hatos lecheros (Watts et al., 1995).
La seleccin de los antibiticos se hace teniendo en cuenta el microorganismo a evaluar y los diferentes grupos farmacolgicos que serian de primera eleccin para la teraputica (de acuerdo con el espectro) y los resultados de los C.I.M. que se reportan con criterios de interpretacin definidos como: sensible, intermedio y resistente.
2.1. Sensible: Esta categora aplica a las infecciones por cepas que pueden ser apropiadamente tratadas con dosis de antibiticos recomendadas para ese tipo de infeccin y especie infectada.
2.2. Intermedio: sta categora incluye aislamientos bacteriales, evaluados con agentes antibacterianos, cuyas C.I.M. se aproximan a los niveles alcanzables en tejidos y sangre, y para los que la tasa de respuesta puede ser ms baja que los de las cepas sensibles. La categora intermedia implica aplicabilidad clnica en los sitios corporales en donde la droga es fisiolgicamente concentrada (por ejemplo, Quinolonas y Blactmicos en orina) o cuando altas dosis de la droga pueden ser usadas (por ejemplo B-lactmicos).
2.3. Resistente: Las cepas no son inhibidas por las concentraciones sistmicas usualmente alcanzables de un agente con rgimen teraputico normal y/o fallas atribuibles a mecanismos de resistencias (por ejemplo B-lactamasa) y cuya eficacia clnica no es confiable en estudios teraputicos (National Committee for Clinical Laboratory Standars. 1999).
La determinacin de las Concentraciones Inhibitorias Mnimas es una prueba con mejor poder predictivo de la eficacia in vivo que las pruebas de difusin en gel de agar (Salomon et al., 1998).
Considerando pues lo anteriormente expuesto, el tratamiento de las mastitis bovina con antibiticos, es una prctica que debe hacerse con criterios profesionales debido a que son muchos los factores que intervienen no slo para una eficiente teraputica, sino tambin para la prevencin en la generacin de resistencia bacterial y la presencia de residuos de antibiticos en leche; problemas que competen no slo a la salud animal sino tambin a la salud humana. Por tales motivos el desarrollo de un programa de control efectivo requiere un extenso conocimiento de la epidemiologa de la mastitis bovina, incluyendo la evaluacin de la susceptibilidad a los antibiticos de los microorganismos aislados de la glndula mamaria, as como programas de prevencin (Ruiz et al., 2001).
25
OBJETIVO El objetivo del presente estudio fue determinar la resistencia antibitica de Staphylococcus aureus aislados de leche de vacas con mastitis de Tjaro, municipio de Tarmbaro, Michoacn.
26
MATERIAL Y MTODOS
El presente trabajo se realiz de Septiembre de 2010 a Enero de 2011 en la comunidad de Tjaro, municipio de Tarmbaro Michoacn, la cual se encuentra ubicada en las coordenadas entre los paralelos 1944 y 1954 de latitud norte; los meridianos 10103 y 10117de longitud oeste; altitud entre 1 900 y 2 400 metros sobre el nivel del mar (INEGI, 2002).
Prueba de California y toma de muestras de leche
Antes de la toma de muestras y de realizar la prueba de California, los pezones fueron desinfectados con alcohol al 70% y secados con papel absorbente y el primer chorro de leche descartado.
La prueba de California (CMT), se realiz utilizando para ello una paleta de plstico, depositando en ella una muestra de leche de cada pezn, la cual se mezcl con un reactivo de nombre comercial Diagmastin (aquil-aril sulfonato de sodio ms purpura de bromocresol), haciendo movimientos rotativos, la leche de los pezones infectados forman un gel, la consistencia del gel se evalo en forma visual, por lo que los resultados fueron ledos como negativos, trazas, 1+, 2++, 3+++, y mastitis clnica.
Se recolectaron 484 muestras de leche, provenientes de 122 vacas en produccin (de 16 establos). La toma de muestras se realiz de acuerdo a las instrucciones recomendadas por el National Mastitis Council (NMC) (1999). Es decir, se utiliz para ello tubos de ensayo estriles los cuales fueron llenados en dos tercios como mximo e identificados previamente con el nmero de vaca y pezn. La toma de muestra se hizo ejerciendo una sola vez una presin mnima del pezn. Posteriormente, las muestras fueron colocadas inmediatamente dentro de una hielera cerrada hermticamente y transportadas refrigeradas al Laboratorio de Bacteriologa de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la UMSNH, en donde se mantuvieron a 4 C hasta su procesamiento al da siguiente durante un tiempo inferior a 18 horas de su recoleccin.
Aislamiento e identificacin de cepas de S. aureus
Las muestras de leche se homogeneizaron y se sembraron en agar 110 estafilococos (Bioxon) y en placas de agar sangre de borrego (Agar sangre ms sangre de borrego al 5%) y se incubaron durante 48 h a 37C. Los aislamientos fueron seleccionados de acuerdo con Sears y McCarthy (2003), es decir, segn su morfologa, tamao y
pigmentacin de la colonia, prueba de catalasa, tincin Gram, prueba de coagulasa, as como tambin a la presencia y tipo de hemlisis. Las colonias presuntivas de pertenecer al gnero Staphylococcus se identificaron en base a su morfologa y caractersticas microscpicas: tincin de Gram, produccin de catalasa y coagulasa, crecimiento a 37C (Pellegrino et al., 2011). Los cocos Gram-positivos, catalasa, manitol, gelatinasa, y coagulasa positivos y que presentaron hemolisis, fueron clasificados como pertenecientes a la especie S. aureus.
Los casos de mastitis que mostraron al momento de realizar la prueba de California un conteo de clulas somticas arriba de 200.000 cel/ml, con o sin aislamiento de microorganismo, se los consider como afectados por mastitis subclnica. Por otro lado, las vacas que presentaron signos clnicos, leche con presencia de cogulos o sangre, alteraciones de la ubre (enrojecimiento, hinchazn, calentamiento, dolor) elevado conteo de clulas somticas y aislamiento de microorganismos se les consider como afectados por mastitis clnica.
Prueba de sensibilidad a antibiticos
Las cepas aisladas de S. aureus fueron analizadas con el mtodo de difusin en disco de BIO RAD de acuerdo con Torutoglu et al. (2006). 3 a 5 colonias de cada cepa previamente identificada, fueron suspendidas en 2 ml de solucin salina estril a una densidad aproximadamente igual a la densidad del estndar 0.5 de McFarland. Enseguida, la suspensin bacteriana se homogeniz y se incub a 37C por 24 horas. Posteriormente, un hisopo estril seco de algodn fue colocado en la suspensin,
enseguida se quit el exceso de caldo presionando y girando el hisopo contra el interior del tubo. La suspensin bacteriana fue inoculada sobre el agar Mueller-Hinton (Oxoid) con el hisopo estril realizando estras en todas direcciones con el fin de cubrirla completamente, de tal manera que la superficie entera del agar quedo cubierta. Posteriormente los discos que contenan los siguientes antibiticos: ampicilina (Bio-Rad, 10 g), cefalotina (Bio-Rad, 30 g), cefotaxima (Bio-Rad, 30 g), ceftazidima (Bio-Rad, 30 g ), cefuroxime (Bio-Rad, 30 g), Dicloxacilina (Bio-Rad, 1 g), eritromicina (BioRad, 15 g), gentamicina (Bio-Rad, 10 g), pefloxacina (Bio-Rad, 5 g), penicilina (BioRad, 10 UI), tetraciclina (Bio-Rad, 30 g), y trimetoprim/sulfametoxazol (Bio-Rad, 25 g) fueron colocados en condiciones de esterilidad en la superficie del medio haciendo presin sobre estos cuidadosamente para asegurar el completo contacto con la superficie del agar e incubados aerobicamente a 37C por 18 horas. Los resultados fueron registrados como sensibles (S) o resistentes (R) por el dimetro del halo de inhibicin de acuerdo a los estndares interpretativos de BIO-RAD (recomendaciones de la FDA y CLSI, 2008) (Cuadro 2). La cepa de referencia utilizada para los ensayos de susceptibilidad antibitica fue la ATCC 25923 de S. aureus.
Cuadro 2. Interpretacin del dimetro de las zonas de inhibicin para patgenos de inters veterinario Agente antimicrobiano Concentracin Zona de inhibicin (mm) Sensible Intermedio Resistente
Ampicilina Cefalotina Cefotaxima Cefepime Cefuroxima Dicloxacilina Eritromicina Gentamicina Levofloxacina Penicilina Tetraciclina TrimetropimSulfametoxazol 10 g 30 g 30 g 30 g 30 g 1 g 15 g 10 g 5 g 10 UI 30 g 25 g 29 18 23 18 23 13 23 15 17 29 19 16 15-17 15-22 15-17 15-22 11-12 14-22 13-14 14-16 15-18 11-15 28 28 14 14 14 10 13 12 13 28 14 10
* Dimetros del halo de inhibicin segn BIO RAD (recomendaciones de la FDA y CLSI), 2010. Cuadro modificado de Pellegrino et al., 2011. EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA 29
RESULTADOS y DISCUSIN
A partir del muestreo realizado a los 16 hatos lecheros, se obtuvieron 484 muestras de leche (ya que 4 cuartos estaban ciegos y no se consideraron) de las cuales se aislaron 102 cepas bacterianas correspondientes al gnero Staphylococcus. De stas, 41 (40.2%) fueron identificadas como S. aureus (Cuadro 3), mientras que el resto 61 (59.8%) correspondieron a estafilococos coagulasa negativos (ECN), mismas que se obtuvieron de los casos de mastitis clnica y subclnica de los hatos lecheros de Tjaro Michoacn.
Cuadro 3. Resistencia antibitica de S. aureus aislados de leche de vacas con mastitis. ________________________________________________ S. aureus (n= 41) ________________________________________________ Antibitico Susceptible Resistente n % n % Ampicilina 32 78.4 9 21.9 Cefalotina 41 100 0 0 Cefotoxina 41 100 0 0 Cefepime 41 100 0 0 Cefuroxima 41 100 0 0 Dicloxacilina 41 100 0 0 Eritromicina 37 90.2 4 9.7 Gentamicina 41 100 0 0 Levofloxacina 41 100 0 0 Penicilina 29 70.7 12 29.2 Tetraciclina 40 97.5 1 2.4 Trimetropim41 100 0 0 Sulfametoxazol _________________________________________________
En el presente trabajo se determino la resistencia a antimicrobianos de uso frecuente en el tratamiento de la mastitis bovina de cepas de Staphylococcus aureus aisladas de muestras de leche provenientes de 16 establos lecheros de la poblacin de Tjaro, Michoacn.
30
Para evaluar los perfiles de resistencia de las cepas de S. aureus, se realizaron ensayos de resistencia in vitro frente a 12 agentes antimicrobianos de uso frecuente para el tratamiento de la mastitis bovina. De las 41 cepas de S. aureus estudiadas, 26 (63.41%) fueron resistentes a cuatro antibiticos, de ellas el 100% fueron aisladas de vacas con mastitis subclnica. El 29.2% (12) del total de las cepas aisladas de S. aureus fueron resistentes a la penicilina, 21.9% (9) a la ampicilina, 9.7% (4) a la eritromicina y solamente el 2.4% (1) de las cepas resultaron resistentes a las tetraciclinas (Cuadro 1).
El anlisis del comportamiento de las cepas de S. aureus aisladas frente a los antimicrobianos de uso frecuente en mastitis bovina, mostr que el porcentaje de resistencia encontrado para penicilina (29.2%) fue superior a lo encontrado por Fara et al. (2005) en Venezuela (13%), y similar en comparacin con lo informado por San Martn. (2006) en Chile; Reinoso et al. (2008), y Pellegrino et al. (2011) en Argentina, quienes informaron un 26%, 28% y 22.2%, respectivamente.
Este mismo resultado de resistencia a la penicilina fue relativamente menor a lo reportado por Bezek, (1998) en un estudio realizado con vacas con mastitis en Estados Unidos (44%), por Gentilini et al. (2002) en Argentina (40%), e inferior a lo observado por Malinowski et al. (2002) en Polonia (66.7%), por Ruiz et al. (2001) en Colombia y por Mylus et al. (1998) en Finlandia (50%).
Lo anterior, puede ser debido a que el S. aureus es una bacteria que desarrolla rpidamente resistencia a antibiticos como la penicilina, sobre todo posterior a su uso teraputico en terreno como es el caso de los tratamientos de mastitis bovina, debido al aumento de la presin de seleccin sobre las susceptibles lo que es de gran preocupacin en Medicina Veterinaria (Betancourt et al., 2003).
Esta resistencia observada en este estudio y en diversas investigaciones realizadas a nivel mundial en donde reportan este fenotipo de resistencia como el ms comnmente observado en cepas de origen bovino, tambin puede ser debido a que este antibitico
representa el principal antibitico recomendado para el tratamiento de la mastitis en las vacas (Li et al., 2007; Turutoglu et al., 2006; Guardabassi y Courvalin, 2006).
Por otro lado, la resistencia observada en este estudio para ampicilina (21.9%) fue inferior a lo encontrado por Ruiz et al., 2001) en Colombia (71.4%).
Debido a que la ampicilina pertenece a un extenso grupo de penicilinas conocido como aminopenicilinas, similares en espectro de actividad a las penicilinas naturales, pero ms resistente a betalactamasa. Los resultados muestran que la actividad de este antimicrobiano fue menos afectada que la de la penicilina, lo que concuerda con otros autores (Betancourt et al., 2003).
En cuanto a los resultados de resistencia a eritromicina el valor obtenido (9.7%) se encuentra por encima de lo obtenido por Valero et al. (2010) en Venezuela (3.7%), y fue similar a lo observado por Valero et al. (2010) y por Gentilini et al. (2000) en Argentina (11,6%). Sin embargo, la resistencia a este macrlido est por debajo de los resultados encontrados por Aslantas et al. (2006) en Hatay (28%), por Patio, (2008) en
Michoacn y por Adwan, (2006) en Palestina (40.9%).
Los resultados del presente estudio sobre la resistencia a tetraciclinas del 2.4% (1/41 cepas), son comparables a los obtenidos por Pitkl, et al. (2004) en Finlandia (5,1%) y por Anderson et al. (2006) en Carolina del Norte y Virginia (Estados Unidos de Norteamrica) (0,5%). Sin embargo, es menor a la reportada por Fara et al. (2005) previamente en la regin (9,09%). Mientras que otras investigaciones efectuadas en diferentes pases revelan un mayor porcentaje de resistencia a tetraciclina desde un 9 hasta un 67% (Ruiz et al., 2001; Adwan, 2006; Aslantas et al., 2006; Malinowski et al., 2002; Turutoglu et al., 2006).
Respecto a la sensibilidad de las cepas de S. aureus, se encontr que el 100% (41) de estas fueron sensibles a la cefalotina, cefotoxina, cefepine, cefuroxima, dicloxacilina, lo cual fue similar a lo obtenido en un estudio realizado por Morales y Huerta (2004), en un
estudio realizado de sensibilidad al Ceftiofur, que es uno de los principios activos de mayor uso en medicina veterinaria. Lo anterior, probablemente se deba a que por el elevado precio de esta familia de antimicrobianos no sea uno de los principios activos de primera eleccin para el granjero y aun no se ha desarrollado tanta resistencia (Patio, 2008).
En cuanto a gentamicina, investigadores en Argentina (Franois et al., 2000; Gentilini et al., 2000; Revelli et al., 2001,), Uruguay (Giannechini et al., 2002), Venezuela (Fara et al., 2005) y Estados Unidos (Trinidad et al., 1990; Owens et al., 1997) observaron tambin una sensibilidad total (100%) de las cepas de S. aureus, igual a lo obtenido en este estudio.
Asimismo, mostr el 100% de sensibilidad hacia el trimetoprim-sulfametoxazol igual a lo reportado por Myllys et al. (1998) y Ruiz et al. (2001). Sin embargo debemos tener en cuenta que la eficacia de estos medicamentos en ubre bovina es limitada, debido a su pobre distribucin y la disminucin de su potencia en medios lcteos (Ruiz et al., 2001). Por otro lado, en cuanto a tetraciclinas este estudio mostr un 97.5% de susceptibilidad similar a lo informado por Morales y Huerta (2004) y por Valencia y Ansalmeti, los cuales reportaron una sensibilidad del 100% a la tetraciclina de Staphylococcus aureus aislados de leche de vacas con mastitis subclnica en el estado de Veracruz, Mxico (Patio, 2008).
33
CONCLUSIN
Se concluye que las cepas de Staphylococcus aureus aisladas en este trabajo mostraron mayor resistencia in vitro a los antibiticos de uso frecuente en la terapia de la mastitis bovina como son la Penicilina y Ampicilina.
Esta resistencia trae como consecuencia por un lado una disminucin en la respuesta al tratamiento en caso de mastitis clnica y por el otro, la transmisin de bacterias resistentes a antibiticos a los consumidores a travs de la cadena alimentaria, cuando se consumen productos elaborados a partir de leche cruda, por lo que en el tratamiento de los animales infectados por S. aureus, es importante determinar a travs de un antibiograma la resistencia que estos presentan a los antibiticos y as aplicar el tratamiento adecuado.
34
LITERATURA CITADA
Adwan, G. 2006. Antibiotic resistance against staphylococcal isolates recovered from subclinical mastitis in the north of Palestine. Islam. Univ. J. 14: 1-9.
Anderson, K., Iyman, R., Bodeis-Jones, S., White, D. 2006. Genetic diversity and antimicrobial susceptibility profiles among mastitis causing Staphylococcus aureus isolated from bovine milk samples. AJVR. 67: 1185-1191.
Akineden, ., Annemller, C., Hassan, A. A., Lmmler, C., Wolter, W. y Zschck, M. 2001. Toxin Genes and other Characteristics of Staphylococcus aureus Isolates From Milk of Cows with Mastitis. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology.
Ariznabarreta, A., Gonzalo, C., San Primitivo, F. 2002. Microbiological Quality and Somatic Cell Count of Ewe Milk with Special Reference to Staphylococci. J. Dairy Sci. 85: 1370-1375.
Aslantas, ., ztrk, F., Celebi, A., Aik, l., Ergn, Y. 2006. Characterization of Staphylococcus aureus strains isolated from subclinic bovine mastitis by protein patterns, antibiotic resistance and plasmid profile. Ankara niv. Vet. Derg. 53: 47-51.
vila, T. S. 2004. Mastitis en Ganado Bovino. Seminario Pre-Congreso del XXVIII Congreso Nacional de Buiatria, Morelia Michoacn, Mxico.
Barkema, H. W., Schukken, Y. H., Lam, T. J. G. M., Beiboer, M. L., Benedictus, G., Brand, A. 1999. Management Practices Associated with the Incidence Rate of Clinical Mastitis. J Dairy Sci. 82: 16431654.
Barker, A. R., Schrick, F.N., Lewis, M. J., Dowlen, H. H., Oliver, S. P. 1998. Influence of Clinical Mastitis During Early Lactation on Reproductive Performance of Jersey Cows. J Dairy Sci. 81: 12851290.
Bauer, A. W., Kirby, W. M., Sherrisj, C. y col. 1996. Antibiotic susceptibility testing by standardized single disck method. American Journal Clinical Pathology. 45 : 493 - 496.
Bayles, K. W., Wesson, C. A., Liou, L. E. , Fox, L, K., Bohach, G. A., y Trumble, W. R., 1998. Intracelular Staphylococcus aureus escapes the endsome and induces apoptosis in epithelial cell. Infection and Immunity. 66: 336-342
Bedolla, C. C. y Castaeda, V. H. 2003. Agentes patgenos causantes de la mastitis bovina. Cuatro Vientos. No. 38:27-29.
Bedolla, C. C. 2011. Mastitis contagiosa. Monografias.com. 31 de Mayo. pp. 1-15.
Betancourt, O., Scarpa, C. y Villagrn, K. 2003. Estudio de resistencia de cepas de Staphylococcus aureus aisladas de mastitis subclnica bovina frente a cinco antibiticos en tres sectores de la ix regin de chile (Nota Tcnica). Revista Cientfica, FCV-LUZ / Vol. XIII, N 5, 413-417, 2003
Bezek, D. M. 1998. Genus identification and antibiotic susceptibility patterns of bacterial isolates from cows with acute mastitis in a practice populations. Journal American Veterinary Medical Association. 212 (3) : 404-406.
Bjorland, J., Sunde, M., y Steinar, W. 2001. Plasmid- Borne smr Gene Causes Resistance to Quaternary Ammonium Compounds in Bovine Staphylococcus aureus. Jornal of Clinical Microbiology. 39: 3999-4004.
Calvinho, L. F., Almeida, R. A. y Oliver, S. P. 1998. Potential virulence factors of Streptococcus dysgalactiae associated with bovine mastitis. Veterinary Microbiology. 61: 93-110.
36
Ceron-Muoz, M., Tonhati, H., Duarte, J., Oliveira, J., Muoz-Berrocal, M., JuradoGmez, H. 2002. Factors Affecting Somatic Cell Counts and Their Relations with Milk and Milk Constituent Yield in Buffaloes. J. Dairy Sci. 85: 2885-2889.
Correa, M. G. P. y Marin, J. M. 2002. O-serogroups, eae gene and EAF plasmid in Escherichia coli isolates from cases of bovine mastitis in Brazil. Veterinary Microbiology. 85: 125-132.
Cucarella, C., Tormo, M. A., Knecht, E., Amorena, B., Lasa, I., T. J. y Penads, J. R. 2002. expression of the Biofilm-Associated Protein Interferes with Host Protein Receptors of Staphylococcus aureus and Alters the infective Process. Infection and Inmunity. 70: 3180-3186. De Mol, R. M. 2000. Chapter 1 A framework for automated dairy cow status monitoring. Automated detection of oestrus and mastitis in dairy cows. PhD. thesis. Wageningen University, Netherlands. pp. 1-13.
Djabri, B., Barielle, N., Beaudeau, F., Seegers, H. 2002. Quarter milk somatic cell count in infected dairy cows: a meta-analysis. Vet. Res. 33: 335-357.
Dos Santos, J. N., Netto dos Santos, K.R., Gentiline, E., Sordelli, D., de Freire Bastos, M. C. 2002. Phenotypic and genetic characterization of bacteriocin-producing strains of Staphylococcus aureus involved in bovine mastitis. Veterinary Microbiology. 85: 133144.
Douglas, L., Fenwick, S. G., Pfeiffer, D. U., Williamson, N. B., Holmes, C. W. 2000. Genomic typing of Streptococcus uberis isolates from cases of mastitis, in New Zealand dairy cow, usig pulsed gel electrophoresis. Veterinary Microbiology.
Doyle, P. M. 2008. Dealing Whith Antimicrobial Resistance, Food Technology, En lnea. http/:www.ift.org
Fara, R. J. F., Valero-Leal, K., DPool, G., Garca, A., Allara, M. 2005. Sensibilidad a los agentes antimicrobianos de algunos patgenos mastitognicos aislados de leche de cuartos de bovinos mestizos doble propsito. Rev. Cientfica. FCV-Luz. Maracaibo. 15 (3): 227-234.
Fedorka-Cray, P. J., Dargatz, D. A., Wells, S. J. y col. 1998. Impact of antimicrobic use in veterinary medicine. Journal American Veterinary Medicine Association. 213 (12): 1739 1741.
Ferens, W. A., Davis, W. C., Hamilton, M. J., Park, Y. H., Deobald, C. F., Fox, L. and Bohach, G. 1998. Activation of bovine Lymphocyte Subpopulations by Staphylococcal Enterotoxin C. Infection and Immunity. 66: 573-580.
Fitzgerald, R. J., Monday, S. R., Foster, T. J., Bohach, G. A., Hartigan, P. J., Meaney, W. J., y Smyth, C. J. 2001. Characterization of a Putative Pathogenicity Island from Bovine Staphylococcus aureus Encoding Multiple Superantigens. Journal of
Bacteriology. 183: 63-70.
Franois, S., Meregalli, S., Sutich, E. 2000. Mastitis bovina: tipificacin de cocos Gram positivos y determinacin de su sensibilidad a quimioterpicos. Disponible en Internet: http://www.e-campo.com.
Fuentes, H. V. O. 1992. Farmacologa y Teraputica Veterinarias, 2 Ed, McGraw-Hill Interamericana, pp. 65-153.
Gallegos, S. A., y Moncada, C. J. N. 2011. Uso de extractos de semillas de ctricos para el control de la mastitis bovina. Tesis de Licenciatura. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Morelia, Michoacn. 47 pp.
38
Gentilini, E., Denamiel, G., Llorente, P., Godaly, S., Rebuelto, M., DeGregorio, O. 2000. Antimicrobial Susceptibility of Staphylococcus aureus Isolated from Bovine Mastitis in Argentina. J. Dairy Sci. 83, 12241227.
Gentilini, E., Denamiel, G., Betancor, A., Rebuelto, M., Rodriguez, F. M. De Torres, R. A. 2002. Antimicrobial Susceptibility of Coagulase-Negative Staphylococci Isolated from Bovine Mastitis in Argentina. J. Dairy Sci. 85, 19131917.
Giannechini RE, C Concha, A Franklin. 2002. Antimicrobial Susceptibility of Udder Pathogens Isolated from Dairy Herds in the West Littoral Region of Uruguay. Acta Vet. Scand. 43, 31-41.
Gresham, H. D., Lowrance, H. H., Caver, T. E., Wilson, B. S., Cheung, A. L., y Lindberg, F. P. 2000. Survival of Staphylococcus aureus Inside Neutrophils Contributes to Infection. The Journal of Immunology. 164: 3713-3722.
Guardabassi, l., y Courvalin, L. 2006. Modes and antimicrobial action and mechanisms of bacterial resistance. In: Antimicrobial resistance in bacteria of animal origin. Aarestrup, F. (Ed.). ASM. Press. Washington, DC. 1-19 pp. 2006.
Heringstad, B., Klemetsdal, G., Ruane, J., 2000. Selection for mastitis resistance in dairy cattle: a review with focus on the situation in the Nordic countries. Livestock Production Science. 64:95-106.
Hillerton, J. E. y Kliem, K. E. 2002. Effective Treatment of Streptococcus uberis Clinical Mastitis to Minimize the Use of Antibiotics. J. Dairy Sci. 85: 1009-1014.
Hockett, M. E., Hopkins, F.M., Lewis, M. J., Saxton, A. M., Dowlen, H. H., Oliver, S. P., Schrick, F. N. 2000. Endocrine profiles of dairy cows following experimentally induced clinical mastitis during early lactation. Animal Reproduction Science. 58: 241-251.
39
Hultgren, J. 2002. Foot leg and udder health in relation to housing changes in Swedish dairy herds. Preventive Veterinary Medicine. 53: 167- 189.
INEGI. (Instituto Nacional de Estadstica Geogrfica e Informtica). 2002. Anuario Estadstico del Estado de Michoacn. Censo General de Poblacin y Vivienda.
Lammers, A., Nuijten, P. J. M., Kruijt, E., Stockhofe-Zurwieden, N., Vecht, U. Smith. H. E. y van Zijdeveld, F. G. 1999. Cell tropism of Staphylococcus aureus in bovine mammary gland cell cultures. Veterinary Microbiology. 67: 77-89.
Lammers, A., Kruijt, E., van de Kuijt, C., Nuijten, P. J. M. y Smith, H. E. 2000. Identification of Staphylococcus aureus genes expressed during growth in milk: a useful model for selection of genes important in bovine mastitis. Microbiology. 146: 981-987.
Las Heras, A., Vela, A. I., Fernndez, e., Legaz, E., Domnguez, L. y FernndezGarayzbal, J. F. 2002. Inusual Outbreak of Clinical Mastitis in Dairy Sheep Caused by Streptococcus equi subsp. Zooepidemicus. Journal of Clinical Microbiology. 40: 11061108.
Leigh, J. A. 1999. Streptococcus uberis: a permanent barrier to the control of bovine mastitis?. Veterinary Journal. 157(3): 225 -38.
Li, X., Mehrotra, M., Ghimire, S., Adewoye, l. 2007. Lactam resistance and lactamases in bacteria of animal origin. Vet. Microbiol. 121: 197-214. 2007.
Lin, J., Hogan, J. S. y Smith, K. L. 1999. Antigenic Homology of the Inducidle Ferric Citrate Receptor (FecA) of Coliform Bacteria Isolated from Herds with Naturally Occurring Bovine Intramammary Infections. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 6:920-927
40
Malinowski, E., Klossowska, A., Kaczmarowski, M., Lassa, H., Kuzma, K. 2002. Antimicrobial susceptibility of staphylococci isolated from affected with mastitis cows. bull. vet. inst. pulawy. 46: 289-294.
Meyer, L. J. A. 1982. Farmacologa y Teraputica Veterinaria, Hispano Americana, Mxico, pp. 804-811.
Middleton, J. R., Fox, L. K., Gay J. M., Tyler, J. W. y Besser, T. E. 2002. Influence of Staphylococcus aureus Strain-type on Mammary Quarter Milk Somatic Cell Count and N-acetyl--D-glucosaminidase Activity in Cattle from Eight Dairies. J. Dairy Sci. 85:1133 1140.
Mullarky I. K., Su, C., Frieze, N., Park, Y. H. and Sordillo, L. M. 2001. Staphylococcus aureus agr Genotypes with Enterotoxin Production Capabilities Can Resist Neutrophil Bactericidal Activity. Infection and Immunity. 69:45-51. Myllys, V., Asplund, K., Brofeldt, E., Hirvel Koski, V., Honknanen Buzalski, T. y col. 1998. Bovine mastitis in Finland in 1998 and 1995 Changes in prevalence and microbial resistance. Acta vet Scand. 39 : 1 : 119 126.
Nash, D. L, Rogers, G. W, Cooper J. B., Hargrove, G. L., Keown, J. F. 2002. Relationships Among Severity and Duration of Clinical Mastitis and Sire Transmitting Abilities for Somatic Cell Score, Udder Type Traits, Productive Life, and Protein Yield. J. Dairy Sci. 85:1273-1284.
National Committee for Clinical Laboratory Standars (NCCLS). 1999. Performance standars for antimicrobial susceptibility testing; Ninth Informational Supplement. M100S9. 19 (1): 104 pp.
National Mastitis Council (NMC), INC. 1999. Laboratory Handbook on Bovine Mastitis. Revised Edition Walton Commons West Madison. 222 pp.
Organizacin Mundial de la Salud (OMS). 2001. Estrategia Mundial OMS de Contencin de la Resistencia a los Antimicrobianos, en lnea, from:
http//:www.who.int/emc/diseases/zoo/who_global_principles.html
Owens, W. E., Ray, C. H., Watts, J. L., Yancey. R. J. 1997. Comparison of Success of Antibiotic Therapy During Lactation and Results of Antimicrobial Susceptibility Tests for Bovine Mastitis. J. Dairy Sci. 80, 313-317.
Patio, S. N. 2008. Resistencia a antimicrobianos del Staphylococcus aureus en vacas lecheras con mastitis subclnica de tres municipios del estado de Michoacn. Tesis de licenciatura. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Morelia, Michoacn. 37 pp.
Pellegrino, M. S., Frola, I. D., Odierno, L. M., Bogni, C. I. 2011. Mastitis Bovina: Resistencia a antibiticos de cepas de Staphylococcus aureus asiladas de leche (Bovine Mastitis: Antimicrobial resistance of Staphylococcus aureus strains isolated from milk). Revista electrnica de Veterinaria. Volumen 12 N 7. pp. 1-14.
Phuektes, P., Mansell, P. D., Dyson, R. S., Hooper, N. D., Dick, J. S. y Browning G. F. 2001. Molecular Epidemiology of Streptococcus uberis Isolates from Dairy Cows with Mastitis. Journal of Clinical Microbiology. 39:1460-1466.
Pitkl, A., Haveri, M., Pyrl, S., Myllys, V., Honkanen-Buzalski, T. 2004. Bovine mastitis in finland 2001-prevalence, distribution of bacteria, and antimicrobial resistance. J. Dairy Sci. 87: 2433-2441. 2004.
Radostits, O. M., Gay, C. C., Blood, D. C. y Hinchcliff, K. W. 2002. Medicina Veterinaria. Tratado de las enfermedades del ganado bovino, ovino, porcino, caprino y equino. 9a ed. Vol. 1. Ed. McGraw HiII Interamericana. Madrid, Espaa, pp. 711-718.
42
Reed, S. B., Wesson, C. A., Liou, L. E., Trumble, W. R., Schlievert, P. M., Bohach, G. A., Bayles, K. W. 2001. Molecular Characterization of a novel Staphylococcus aureus Serine Protease Operon. Infection and Immunity. 69:1521-1527.
Reinoso, E. B., Bettera, S. G., CL Odierno, C. L., Bogni, C. I. 2008. rep-PCR of Staphylococcus aureus strains isolated from bovine mastitis in Argentine. Braz. J. vet. Res. Anim. Sci. 44, 115-121.
Revelli, G. R., Rodriguez, C. G. 2001. Prevalencia de agentes etiolgicos causales de mastitis bovina. Tecnologa Lctea Latinoamericana N23.
Riffon, R., Sayasith, K., Khalil, H., Dubreuil, P., Drolet, M. y Lagac J. 2001. Development of a Rapid and Sensitive Test for Identification of Major Pathogens in Bovine Mastitis by PCR. Journal of Clinical Microbiology. 39:2584-2589.
Riollet, C., Rainard, P. y Poutrel, B. 2000. Differential Induction of Complement Fragment and Inflammatory Cytokines during Intramammary Infections with Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 7:161167.
Rossitto, P. V., Ruiz, L., Kikuchi, Y., Glenn, K., Luiz, K., Watts, J. L. 2002. Antibiotic Susceptibility Patterns for Environmental Streptococci Isolated from Bovine Mastitis in Central California Dairies. J. Dairy Sci. 85:132-138.
Ruiz,
J. D., Ramrez, N. F., Arroyave, O. 2001. Determinacin de concentraciones
inhibitorias mnimas a algunos antibiticos de las bacterias aisladas de glndula mamaria bovina en San Pedro de los Milagros, Antioquia. Rev Col Cienc Pec Vol. 14(2): 143-154.
43
Ruiz, S. H. y Romero, A. T. 2003. 10 Estrategias en la Prevencin de la Matitis Bovina, Manual de Buenas Prcticas de Ordeo para el Aseguramiento de la Calidad de la Leche, AMMVEPA y AMMVEB.
Salomon, S. A., Watts, J. L., Aarestrup, F. M. y col. 1998. Minimum inhibitory concentrations for selected antimicrobialagents organisms isolated from the mammary glands of dairy heifers in New Zealand and Denmark. Journal Dairy Science. 81: 570 578.
San Martin B, Kruze, J., Morales, M. A., Agero, H., Leon, B., Esppinoza, S., Iragen, D., Puga, J., Borie, C. 2002. Resistencia bacteriana en cepas patgenas aisladas de mastitis en vacas lecheras de la V Regin, Regin Metropolitana y X Regin, Chile. Arch. Med. Vet. 34(2), 1-18.
Saran, A. y Chaffer, M. 2000. Mastitis y calidad de leche, editorial Inter mdica, Buenos Aires, Argentina.
Schrick, F. N., Hocket, M. E., Saxton, A. M., Lewis, M. J., Dowlen, H. H., Oliver, S. P. 2001. Influence of subclinical mastitis during early lactation on reproductive parameters. J. Dairy Sci. 84:1407-1412.
Sears, P. M. y McCarthy, K. K. 2003. Diagnosis of mastitis for therapy decisions. Vet Clin Food Anim. 19: 93-108.
Seegers, H., Fourichon, C. y Beaudeau, F. 2003. Production effects related to mastitis and mastitis economics in dairy cattle herds. Vet. Res. 34:475491.
Smith, G. W., C. Peter D. y Morin, D. E. 2001. Ability of hematologic and serum biochemical variables to differentiate Gram-negative and Grampositive mastitis. J Vet Intern Med. 15:394-400.
44
Soltys, J. y Quinn, M. T., 1999. Selective Recruitment of T-Cell Subsets to the Udder During Staphylococcal and Streptococcal Mastitis: Analysis of Lymphocyte Subsets and Adhesion Molecule Expression. Infection and Immunity. 76:6293-6302.
Sordelli, D. O., Buzzola, F. R., Gomez, M. I., Steele-Moore, L., Berg, D., Gentilini, E. Catalano, M., Reitz, A. J., Tollersrud, T., Denamiel, G., Jeric, P. y Lee, J. C. 2000. Capsule Expression by Bovine Isolates of Staphylococcus aureus from Argentina: Genetic and Epidemiologic Analyses. Journal of Clinical Microbiology. 38: 846-850.
Stuart B L. La resistencia contra los antibiticos. Investigacin y Ciencia. Mayo de 1998; 14 21.
Sumano, L. H. S., y Ocampo, C.L. 1997. Farmacologa Veterinaria, 2 Ed, McGraw-Hill Interamericana, Mxico, pp. 95189.
Tollersrud, T., Kenny, K., Reitz, A, J. Jr. y Lee, J.C. 2000. Genetic and Serologic Evaluation of Capsule Production by Bovine Mammary Isolates of Staphylococcus aureus and Other Staphylococcus spp. From Europe and the United States. Journal of Clinical Microbiology. Tomasinsig, L., De Conti, G., Skerlavaj, B., Piccinini, R., Maria Mazzilli, DEste, F., Tossi, A. y Zanetti, M. 2010. Broad-Spectrum Activity against Bacterial Mastitis Pathogens and Activation of Mammary Epithelial Cells Support a Protective Role of Neutrophil Cathelicidins in Bovine Mastitis. Infection and Immunity. Vol. 78 (4): 1781 1788.
Torutoglu, H., Ercelik, S., Ozturk, D. 2006. Antibiotic resistance of Staphylococcus aureus and coagulase negative staphylococci isolated from bovine mastitis. Bull. Vet. Inst. Pulawy. 50: 41-45.
45
Trinidad, P. S., Nickerson, C., Luther, D. G. 1990. Antimicrobial susceptibilities of Staphylococcal species isolated from mammary glands of unbred and primigravid dairy heifers. J. Dairy Sci. 73, 357-362.
Vadillo, S., Priz, S. y Mateos, E. 2002. Manual de Microbiologa Veterinaria. Ed. McGraw-Hill-Interamericana. Espaa.
Valero-Leal, K., Olivares, Y., Perozo, A., Valbuena, E., Boscn, L., Colina, G., Briez, W. 2010. Susceptibilidad a los agentes antimicrobianos en cepas de Staphylococcus aureus aisladas en leche de bovinos con mastitis subclnica y leche de tanque. Revista Cientfica, vol. XX, No. 4, pp. 367-376.
Watts, J. L., Salmon, S. A. y Yancey, J. R. 1995. Antimicrobial susceptibility of microorganisms isolated from the mammary glands of dairy heifers. Journal Dairy Science. 78 (7): 1637 1648.
Wellenberg, G. J., van der Poel, W. H. M. y Van Oirschot, J. T. 2002. Viral infections and bovine mastitis: a review. Veterinary Microbiology. Article 2361.
Wesson, C. A., Liou, L. E., Todd, K. M., Bohach, G. A., Trumble, W. R. and Bayles., K. W., 1998. Staphylococcus aureus Agr and Sar Global Regulators Influence Internalization and Induction of Apoptosis. Infection and Immunity. 66:5238-5243.
White, L. J., Schukken, Y. H., Lam, T. J. G. M., Medley, G. F., Chappell, M. J. A. 2001. multispecies model for the transmission and control of mastitis in dairy cows. Epidemiol. Infect. 127:567-576.
Wolter, W., Castaeda, H., Kloppert, B., Zschck, M. 2004. Mastitis bovina. Prevencin diagnstico y tratamiento. Editorial Universitaria. Universidad de Guadalajara. Mexico. 146pp.
46
Yugueros, J. M., Soriano, A. C., Salazar, M. S., Moral, C. H., Ramos, S. S., Smeltzer, M.S. y Carrasco, G. N. 1999. Rapid Identification and Typing of Staphylococcus aureus by PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism Analysis of the aroA Gene. Journal of Clinical Microbiology. 37: 570-574.
Zadoks, R., van Leeuwen, W., Barkema, H., Sampimon O., Verbrugh, H., Schukken, Y. H. y van Belkum, A. 2000. Application of Pulsed-Field Gel Electrophoresis and Binary Typing as Tools in Veterinary Clinical Microbiology and Molecular Epidemiologic Analysis of Bovine and Human Staphylococcus aureus Isolates. Journal of Clinical Microbiology. 38: 1931-1939.
Zadoks, R. N., Allore, H. G., Barkema, H. W., Sampimon, O. C., Grhn, Y. T., Schukken, Y. H. 2001. Analysis of an outbreak of Streptococcus uberis mastitis. J. Dairy Sci. 84(3): 590-599.
Zadoks, R. N. 2002. Molecular and mathematical epidemiology of Staphylococcus aureus and Streptococcus uberis mastitis in dairy herds. Dissertation Utrecht University, Faculty of Veterinary Medicine: 2-3, 239.
Zhao, X. y Lacasse, P. 2008. Mammary tissue damage during bovine mastitis: causes and control. J. Anim. Sci. 86:5765.
47

Resist en CIA A de Staphylococcus Aureus Islados de Leche de Vacas Con Mastitis de Tjaro Michoacn

Transféré par

Informations du document

Description originale:

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Resist en CIA A de Staphylococcus Aureus Islados de Leche de Vacas Con Mastitis de Tjaro Michoacn

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLS DE HIDALGO

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

PARA OBTENER EL TTULO DE

MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

MORELIA, MICHOACN., OCTUBRE DE 2011.

UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLS DE HIDALGO

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

PARA OBTENER EL TTULO DE

MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

MORELIA, MICHOACN., OCTUBRE DE 2011.

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

Gracias a mis maestros, por compartir sus conocimientos y vivencias conmigo.

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

Bachillerato. Centro de Bachillerato Tecnolgico Agropecuario No. 7

Preparatoria. Colegio de San Nicols de Hidalgo. Universidad Michoacana

de San Nicols de Hidalgo.

ASISTENCIA A CURSOS, TALLERES O SEMINARIOS DE ACTUALIZACIN PROFESIONAL

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

PARTICIPACIN COMO PONENTE EN CONGRESOS Y OTROS EVENTOS INTERNACIONALES, NACIONALES Y ESTATALES

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

Palabras clave: Mastitis bovina | Staphylococcus aureus | Resistencia antibitica

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

considerablemente (Heringstad et al., 2000; Schrick et al., 2001).

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

IMPACTO DE LA MASTITIS EN LA SALUD PBLICA

otras (vila et al., 2004; Ruiz y Romero, 2003; Patio, 2008).

CLASIFICACIN DE LOS AGENTES PATGENOS CAUSANTES DE LA MASTITIS BOVINA

Patgenos causantes de la mastitis contagiosa

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

Patgenos causantes de la mastitis ambiental

Micrococcaceae junto con, entre otros, el gnero Micrococcus.

En la actualidad en el gnero Staphylococcus

se reconocen 32 especies y varias

Hbitat de los Estafilococos

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

Divisin de los estafilococos

Los estafilococos, segn produzcan o no la enzima coagulasa, grandes grupos:

Staphylococcus intermedius, Staphylococcus hyicus).

simulans, Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus hyicus).

Existe una buena correlacin entre

produccin de coagulasa y la capacidad

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

Planococcus Stomatococcus (Fuente: Saran y Chaffer, 2000).

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

Resistencia del Staphylococcus aureus a los antibiticos

modificadas o supernumerarias, conocida como resistencia intrnseca a meticilina (Patio, 2008).

FRMACOS EMPLEADOS PARA EL TRATAMIENTO DE LA MASTITIS BOVINA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCA

DESVENTAJAS DE LOS ANTIBITICOS EN SALUD PBLICA

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD ANTIBITICA

1. Pruebas de difusin en gel de agar o mtodo de Kirby - Bauer

2. Pruebas de dilucin o concentraciones inhibitorias mnimas (C.I.M.)