T&E Analtica

teanalitica@teanalitica.com.br

Flvio Leite
www.teanalitica.com.br

Minicurso C R Q-IV
AMOSTRAGEM
Novembro 2006 Araraquara/SP

DISCUSSO PARA PROBLEMAS

CUSTO

VALEU? CONHECIMENTO

F A T O

DISCUSSO

PROCEDIMENTOS

TEMPO

PROFISSIONALISMO

PROTOCOLOS
1- PROTOCOLO GERAL (Filosofia): descreve os objetivos ; os tipos de anlise da empresa; as principais ferramentas; as normas; os critrios a serem usados para aceitabilidade; higiene e segurana; preservao; etc.

2- PROTOCOLO ESPECFICO (operacional): descreve a anlise a ser realizada; a preservao; os valores de aceitao a definio de: quando, onde, quanto, como, etc.

POSTURA DAS PESSOAS ANALTICAS

compreenso
A CLAREZA E A CERTEZA SITUAO O equipamento parou SOLUO Verificar se h algo errado; saber a quem comunicar; introduzir medidas preventivas

estado de esprito

Pr ATIVIDADE

Um bequer quase em queda na bancada.....

A HONESTIDADE

Quebra de equipamento..

A CONVIVNCIA

Virtudes, Defeitos, Trabalhar junto

-Procurar ter a CRTICA e oferecer a SUGESTO -Dar a SUGESTO e procurar PARTICIPAR

AMOSTRAGEM
Na Amostragem ou Coleta deve-se considerar que no existe lote homogneo,portanto, apenas lotes heterogneos. Sendo lotes heterogneos, faz-se necessrio retirar uma amostra significativa
de significncia) (no sentido

. Como esta praticamente impossvel, procura-se retirar uma amostra

representativa.
AMOSTRAGEM: o processo de coleta de uma amostra representativa para anlise AMOSTRAGEM: o processo de coleta de uma amostra representativa de um lote heterogneo, ou seja, que represente a totalidade do material de interesse para que seja realizada a anlise. Mesmo para a melhor amostra representativa, haver sempre a necessidade de algum grau de PREPARAO DA AMOSTRA, quer para retirar interferentes, quer para dar forma disponvel para a anlise, etc.

AMOSTRAGEM

TONELADA OU KILOS
UNIVERSO AMOSTRAL Plantaes Solo Oceano Lagos Rios Ar Atmosfrico Processo de Fabricao Alimentos Frmacos Tecidos Chapas de metal Bobinas de papel

MICRO A NANOGRAMAS
Reduo da Amostra

Soluo Diluda

AMOSTRAGEM

Anlise/Resultado
Representatividade

OPERAO DE AMOSTRAGEM

MICRO

MACRO

COLETA DE GAS COM VAPORES

Bomba de Vcuo, caso a presso em 1 for menor que atm

gua fria

trap
5 2 1
1- tubulao do processo 2- trapcom soluo absorvedora 3- trapcom soluo absorvedora 4- trapde segurana 5- cilindro de reteno de gas 6- totalizador 7- bagpara coleta de gas

Fluxo

Medida pode ser isocintica

INFLUNCIA DA AMOSTRAGEM NA ANLISE

Orgnicos na forma de vapores

Composio Estimada Em Corrente de Processo ( N2) -Acetato de Etila -Tolueno -Metanol -Orgnico em pequisa Deteco por GC/MS - 5% - 1% - 2% - ?%

falta de massa coleta ideal stripping

Orgnico: Amina Orgnico: Clorado

Variveis Principais -fluxo -temperatura/presso -tempo de coleta

Isopropanol

10

30

60

80 100

150

Volume Coletado (Litros)

INFLUNCIA DA AMOSTRAGEM NA ANLISE

Abundance Scan 5337 (42.924 min): TE768305.D 180 170 160 150

322

Abundance TIC: TE768305.D 42.92 400

140 130 120 110

350

Biblioteca Possvel identificao de organoclorados

257

300
100 90 80

250

200

70 60 50 40

150

30 e 100 litros coletados Modo SIM

5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00 60.00

100

50

30 20

Modo SIM

0 Time-->
m/z-->

10 0

250 255 260 265 270 275 280 285 290 295 300 305 310 315 320 325 330

INFLUNCIA DA AMOSTRAGEM NA ANLISE

Abundance TIC: 4600000 4400000 4200000 4000000 3800000 3600000 3400000 3200000 3000000 2800000 2600000 2400000 2200000 2000000 1800000 1600000 1400000 1200000 1000000 800000 600000 400000 200000 0 5.00 Time--> 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00 60.00 8.46 5.19 9.04 43.74 TE035105.D

Modo SCAN

60 litros coletados

Abundance

Scan 1912 (43.737 min): TE035105.D (-) 322 9000 8000 7000 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 m/z--> Abundance #232136: bis-(octylphenyl)-amine 322 9000 8000 7000 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 50 m/z--> 100 57 98 132 150 209 200 250 300 350 400 450 250 393 29 57 50 97 100 132 154 180 209 150 200 250 250 393 281 300 345 367 350 415 400 462 490 450

AMOSTRA

CONCLUSO A AMOSTRAGEM pode reduzir ou elevar a Detectabilidade do sistema MS ou ainda garantir confiabilidade no resultado analtico, quando se conhece os possveis efeitos da composio da amostra, sobre o produto pesquisado.

Bis-(octil fenil) amina

BIBLIOTECA

DESVIOS
68% da populao (1s) EM SISTEMAS CROMATOGRFICO CONSIDERA-SE 4s 100% DA POPULAO 95% da populao (2s) 99,7% da populao (3s)

VALOR CONSIDERADO VERDADEIRO

FERRAMENTAS DA VALIDAO
Varincia

_ _

D e sv io P a d r o
n

)2

(x x
n

__

)2

E stim a tiv a d a V a r i n c ia

E stim a tiv a d o D e s v io P a d r o
2

(x

_ _

n 1

x )
i

S=

(XX )
i

__

n1

C oeficiente de variao

C.V =

S .1 0 0

_ _

a)Comp.Preciso:teste F a)Comp.Preciso:teste F b)Rejeies pelos testes: b)Rejeies pelos testes: Q Grubbs Q ee Grubbs c) Estim.CV: Horwitz c) Estim.CV: Horwitz

X = x

s .t N

Variabilidade e Incertezas
TEOR DE BENZENO = 20 mg/kg

2mg/kg

-Variabilidade - Incerteza Incerteza

Variabilidade: o analista valida a metodologia de teor de acordo com as medidas de preciso provenientes das respostas do instrumento analtico e das medidas de exatido, considerando que todas as fontes de erros esto presentes. Incerteza, alm da metodologia validada estima-se, para a medida da variabilidade sobre o resultado, fontes de erros mensurveis no trajeto percorrido pela amostra, portanto: Amostragem, Pipetas, bales volumtricos, Balanas, correes de peso molecular, etc.
So considerados nos clculos para a emisso da variabilidade, Agora denominada de Incerteza

DISTRIBUIES
DISTRIBUIO NORMAL Incerteza DISTRIBUIO TRIANGULAR

u(x) =

a 9

DISTRIBUIO RETANGULAR 2a(= a) 2a(= a)

1/a

u ( x) = s u ( x) = s

X Para medidas repetitivas

u ( x ) = x.( s / X ) CV % )x u ( x) = ( 100 u ( x) = c / 2 u ( x) = c / 3

Variaes medidas em relao estimativa do desvio padro

a u ( x) = 3
Quando h um certificado ou limites especificando um nvel de confiana 25mL 0,05mL feito uma estimativa de um valor mximo. Baixa variabilidade no sistema

Incerteza

X Incerteza

u ( x) =

a 6

Valores fechados para x so mais prximos do conjunto Quando uma estimativa feita na forma de ranges mximos ( a) descritos por distribuies simtricas .

Para c at 95% Para c at 99,7%

INCERTEZAS DE MEDIO-ISO 17025

Sequncia de Tpicos
1- Incerteza Padro = aplicada sobre a variabilidade

x 1,94

Distribuio Normal

x 3

Distribuio Retangular

x 6

Distribuio Triangular

2- Incerteza Combinada = . Neste caso ser adotado a regra da somatria das incertezas:

c =

2 1

2 2

2 n

3- Incerteza Expandida = U . Normalmente o fator k a ser aplicado ser igual aproximadamente 2

U = c .k
4- Expresso do resultado

Resultado = valor medido U (unidades)

onde, valor medido pode ser a mdia aritmtica das medidas.

IDENTIFICANDO FONTES DE ERROS Considere uma medio qualquer dentro da qumica. Dentro das operaes essenciais verifique se ela foi ideal analiticamente
Medida do pH: 1- Introduzir o eletrodo numa soluo 2- em agitao e 3- ler o resultado
DIAGRAMA DE CAUSAS E EFEITOS Solues de Calibrao Ambiente do Labo cida Temperatura ambiente eletrnica KCl Conc. Balana Analista Conc.Mensurado
odo letr oe ad pez Lim

Calibrao Slido

temperatura Bsica

Qualidade do eletrodo

Sistema de Leitura

Grau de Pureza

Voltagem Corrente Eletricidade Amostragem Potncia total do laboratrio Contaminao do peixinho Agitao

limpeza molhabilidade Vidraria

TOC Grau de Pureza gua medida Tempo de Leitura

pH

AMOSTRAGEM - COLETA 100g ; 1 litro ; 1 bag

COLETA
-Quanto coletar -Onde e como coletar -Qumica dos materiais -Quantidade suficiente -Higiene e Segurana -Quando coletar

-De lado; na bomba; a 60 cm -com trado, c/caneca, sob vcuo H reao com o recipiente

Para a duplicata; p/o LQ

Quais os riscos na coleta e anlise Estaes do ano

AMOSTRAGEM - PRESERVAO

PRESERVAO

Evitar Oxidao NO2 NO3

Evitar mudana da EVITAR A EVOLUO estrutura qumica -atmosfera inerte N2O4 NO2 -presso de equilbrio -carter do meio -reacional Alterar o pH para evitar -refrigerao evoluo microbiolgica; Reduzir Cintica Dar estabilidade: NH3(g) + H2SO4(aq)

AMOSTRAGEM
AMOSTRAGEM PROBABILSTICA AMOSTRAGEM PROBABILSTICA QUANDO A POPULAO FINITA E TOTALMENTE ACESSVEL
CASUAL SIMPLES CASUAL SIMPLES SISTEMTICA SISTEMTICA CONGLOMERADOS CONGLOMERADOS MLTIPLA MLTIPLA SEQUNCIA SEQUNCIA A ESMO A ESMO MATERIAL CONTNUO MATERIAL CONTNUO INTENCIONAL INTENCIONAL

AMOSTRAGEM NO PROBABILSTICA AMOSTRAGEM NO PROBABILSTICA A AMOSTRAGEM OBTIDA POR ESTATSTICA

QUANTAS AMOSTRAS TIRAR-Aplicao direta

Partindo-se de uma variabilidade de amostragem j determinada, pode-se estimar o nmero de amostras a serem retiradas de um lote, ou seja, universo amostral definido.

= x

t .s n

E =

t .s n

n=

t.s E

= estimativa da mdia verdadeira x = mdia dos resultados analticos t = fator de Student s = estimativa do desvio padro das amostras n = nmero de amostras tomadas E = erro de amostragem ( na realidade este termo a diferena entre a mdia da amostra e o valor real) Exemplo (Livro: Vogel) = Verificou-se que a estimativa de variabilidade do teor de nquel, num carregamento de minrio, com base em 16 determinaes , era de 1,5%. Quantas amostras devem ser tomadas a fim de dar ( a 95% de confiana) um erro de amostragem menor que 0,5% de nquel?

Resoluo:

2,13 . 1,5 n= 0,5

41

amostras

QUANTAS AMOSTRAS TIRAR

Para amostragens que envolvem universo definido, ou seja, amostragem probabilstica, muito comum o uso da expresso abaixo.

Tambores Pelletsou Paletes Tamboretes Sacos ou Bags

n 1

Normalmente se aplica:

n +1

QUANTAS AMOSTRAS TIRAR

Uma outra ferramenta, criada durante a primeira guerra mundial e aplicada para amostragens em munies o MILITAR STANDARD. Em sua verso original, h vrios critrios em funo da criticidade do produto, denominado em ingles simplesmente de Sample 1, Sample 2, etc..
TAMANHO DO LOTE I 501 A 1200 G NVEL GERAL II III J K

Com base no Militar Standard Internacional:

Norma ISO 3951

CDIGO DE AMOSTRA G J K

NMERO DE AMOSTRAS 32 80 125

Brasil:
NBR 5429 Planos de amostragem e procedimentos na inspeo por VARIVEIS NBR 5426 Planos de amostragem e procedimentos na inspeo por ATRIBUTOS

PROBABILIDADE
Imaginemos um cesto com bolas. A probabilidade de se retirar uma amostra com defeito, e a partir deste, pode-se definir o tamanho amostral. Imaginando um lote de 1000 bolas sendo 950 brancas e 50 bolas vermelhas, pode-se estimar que a frao defeituosa (vermelha) :

50 p= = 0,05 1000

100p = 5%

Se tirarmos de uma urna, aleatoriamente uma amostra de 100 bolas, o nmero de bolas vermelhas no ser exatamente 5, apesar da porcentagem de defeitos ser 5%, porm, fazendo vrias amostragens de 100 bolas, esta variar ao redor de 5% ( retornando as amostras para a urna aps cada amostragem).

PROBABILIDADE
A probabilidade de se tirar uma amostra contendo exatamente 0,1,2 .....bolas vermelhas, pode ser calculada: a) nmero de amostras n = 100 b) tamanho do lote N = 1000 c) o nmero de combinaes de N bolas pegos por grupo n dado pela frmula:

N n

N! = n! ( N n )!

N n

1000 ! = 100 !900 !

A operao com fatoriais trabalhosa, aconselha-se, portanto a aplicao de logaritmos

Se D for o nmero de defeitos contidos no lote ( D=50 bolas vermelhas ) a probabilidade de ter, na amostra n bolas com x bolas vermelhas ser:

D N D x n x , x variar de zero a 50 p(x) = N n

A probabilidade de ter x = 3 bolas vermelhas na amostra ser:

50 950 3 97 p (3) = 1000 100

= 0 ,1377

PROBABILIDADE
Aplica-se a distribuio binomial, quando o tamanho do lote infinito. Como sempre devolvemos as bolas na urna, como analogia, temos um processo de fabricao produzindo sobre um perodo longo, onde 5% dos produtos so defeituosos. A probabilidade p de se pegar uma bola vermelha 0,05, a probabilidade de que um lote de n bolas contm exatamente 0,1,2,3......x bolas vermelhas dado pela expresso

n ( x) = x

p (1 p )
x

n x

A segurana dada por um plano de amostragem est em funo da qualidade real do lote sujeito a amostragem.
a-Limite de Qualidade Aceitvel ( P1) = valor a ser respeitado na marcha normal b-Limite de Qualidade de Rejeio ( P2) = valor incompatvel com utilizao normal do lote. c-Risco = risco de rejeio de um lote P1. d-Risco = risco de aceitar um lote P2 ( grande quantidade de produto em relao a amostra a ser examinada A constatao de que um lote muito bom ou muito ruim ocorre aps um nmero pequeno de objetos, por outro lado, se o lote tem qualidade compreendida entre P1 e P2 faz-se necessrio examinar um grande nmero de objetos antes de se ter uma opinio.

PROBABILIDADE
Uma forma de verificar a qualidade de um plano de amostragem dada pela Curva de Eficcia que no exemplo ser : N = 2500 ( tamanho do lote) n = 25 ( tamanho da amostra ) C = 2 ( nmero limite de defeitos para aceitao do lote )
Pa N n c I 2500 25 2 II 2500 160 8

II

A curva construda em funo da qualidade real P do lote e a probabilidade Pa que ser aceita.

Qualidade real do lote ( 100p)

Consideremos as seguinte informaes: N = 1000 n = 20 c = 0 Quando, por exemplo, a proporo defeituosa do lote P for igual a 0,01 a probabilidade de tirar desse lote, uma amostra de 20 artigos no contendo nenhum defeito ser:

(0)

10 990 x 0 20 = 1000 20

= 0 ,816

A partir da probabilidade 0,01 , pode-se iniciar a srie de probabilidade, supondo 0,02 ; 0,03.....0,20.

QUANTO AMOSTRAR EM FUNO DA TCNICA ANALTICA

Relacionar a tcnica analtica com o que ser analisado fundamental para definir o volume ou massa de coleta.

GC/FID detecta diretamente, 5 mg/litro de BHC p/1 L inj. Massa detectada de 5 ng. Anlise:

Amostra: 0,1 mg/litro BHC no haveria sinal analtico. Amostragem: 50 litros para reduzir a 1 litro.
Concluso: 1- Amostrarmos 50 litros e concentrarmos para 1 litro 2- Utilizarmos de outro detector ou tcnica 3- Mudarmos a tcnica ou tecnologia de amostragem: por exemplo SPE, SPME

ALQUOTA DE TRABALHO A quantidade mnima de amostra a ser utilizada na anlise depende do limite instrumental do equipamento, do limite de quantificao ou ainda do VMP ( valor mximo permitido )

Exemplo 1: em funo do VMP ( fonte Farmacopia Brasileira )

m=

2 (1000 . L )

m= massa de amostra a ser tomada (gramas ) L = Valor Mximo Permitido ( % )

Exemplo: O limite mximo de Arsnio em alimentos de 5 mg/kg. Qual massa de amostra deve ser tomada para a realizao da anlise? 5mg/kg = 0,0005%

m=

2 = 4 gramas 1000 x 0,0005

AMOSTRAGEM PARA MICROBIOLOGIA

CONTAMINAO: o principal cuidado desta amostragem o da contaminao da amostra por inabilidade do amostrador. RECIPIENTE COLETOR: deve ser de qualidade a fim de evitar interferncias externas, principalmente durante o transporte ao laboratrio. EVOLUO: -Evitar o crescimento de microorganismo por alimentao do ativo presente no meio fundamental para a garantia do resultado. (refrigerao, agente de corte, etc)
-Analisar no menor espao de tempo garantia de representatividade

QUANTIDADE SUFICIENTE/MTODO VALIDADO: O primeiro evita retirar nova amostra e o segundo evita reanlises.

AMOSTRAGEM PARA MICROBIOLOGIA gua Potvel: O principal cuidado na amostragem de gua potvel a adio de um neutralizante do cloro (cloro inibe crescimento bacteriano). H no mercado bags coletores que j vm com pastilha de tiossulfato de sdio estril. Segundo USP, a anlise deve ser por plaqueamento direto. Limite: 500 UFC/mL gua Purificada (PW): No necessrio qualquer neutralizante pois a gua j passou por processo de retirada de ons. O procedimento de anlise o mesmo que para gua potvel, porm com limite diferente: Limite: 100 UFC/mL

AMOSTRAGEM PARA MICROBIOLOGIA gua para injeo (WFI): Para gua ultra-purificada necessrio que a contagem de bactrias seja feita atravs de filtrao em membrana. Limite: 10 UFC/100 mL Para qualquer amostragem, deve-se: 1. Realizar a assepsia da torneira ou sada da tubulao com etanol 70%; 2. Desprezar o volume inicial; 3. Utilizar luvas e evitar qualquer contato do manipulador com a amostra. 4. Manter sob refrigerao e iniciar as anlises o quanto antes para evitar proliferao ou morte das clulas. Referncia: USP 29 "Water for pharmaceutical purposes

AMOSTRAGEM PARA MICROBIOLOGIA

1- Nos pipetadores automticos h um feltro interno. interessante limp-lo vez ou outra. 2- Garantir que o meio de cultura est uniforme em esterilidade 3- Verificar a limpeza das salas e bancadas 4- Verificar se o fato ocorre com um determinado amostrador 5- Verificar se houve mudanas fora do normal nos locais de amostragem (remoes, construes, transportes). 6- Verificar se no est ocorrendo desvios de processos de amostragem. Criar uma planilha de incidentes x contaminao, para poder rastrear.

UNIFORMIDADE EM MISTURA

Garantir uniformidade da amostra importante para a preciso analtica , ou seja : REP e REPR. Pode ser obtida utilizando: Slidos
Reduo do Tamanho de Partculas, Moinhos: p , impacto, bolas, Enquartamento ou Quarteamento: mistura do slido sobre superfcie plana com retirada de extremidades e centro Misturadores: duplo cone, tambor a p rotativa, etc

Lquidos
Ultra som Agitao magntica ou manual Misturadores: pisto, ps, impacto

QUARTEAMENTO DE SLIDOS

Espalhar Macerar Revolver

3 Dividir e Coletar

4 Preparar para a anlise

UNIFORMIDADE EM MISTURA

Expresso de Badger e Bauchero

M=

(a a )
n( a )
__ 2

__ 2

M = grau de uniformidade da mistura a = medida sobre a mistura a = mdia das medidas Quanto mais prximo de zero M for mais uniforme ser a mistura

FREQUNCIA DE COLETA

Instantnea:

Retirada de uma nica amostra ou de vrias amostras analisadas individualmente. ( no mnimo duas ocasies ) Retirada de amostras distintas que sero agrupadas em uma nica amostra. ( em funo do amostral )

Instantnea/Composta: Randmica:

Retirada em ocasies diferentes, mas no ordenadas ( uma pela manh, outra a tarde, outra pela manh, outra a noite ) ( no mnimo trs por ponto ) Retirada no mesmo recipiente de amostras ao longo do tempo determinado ( mnimo de um ciclo do processo ) Retirada ordenada de ocasies em vrios pontos coerentes e agrupadas e uma nica amostra.( mnimo de um ciclo do processo )

Coleta acumulada:

Coleta Espaada/acumulada:

RECIPIENTES DE COLETA

Os recipientes de coleta esto principalmente em funo de:

-Resistncia do material a choques e temperatura -Inerticidade ao produto amostrado -Resistncia luz ou outra ao fsica -Material de boa lavabilidade -Material reciclvel ou biodegradvel -Boa vedao

IDENTIFICAO DA AMOSTRA
Identificar uma amostra pode ser pouco complexo e ser se houver observao
1- Coleta de A A Exemplo: 2- Coleta do ponto A da bomba-01 3- Coleta do ponto A, Alimentao da bomba-01 as 16:00hs 4- Coleta do ponto A, Alimentao da bomba-01 as 16:00hs de 24/11/2006 5- Coleta do ponto A, Alimentao da bomba-01 as 16:00hs de 24/22/2006 por Claudia-LQ 7- Coleta do ponto A, Alimentao da bomba-01 as 16:00hs de 24/11/2006 por Claudia-LQ CUIDADO CORROSIVO-USAR EPI Preservado com HNO3 Manter a 4oC Validade : 1 semana 6- Coleta do ponto A, Alimentao da bomba-01 as 16:00hs de 24/11/2006 por Claudia-LQ CUIDADO CORROSIVO-USAR EPI

Bomba

- 01

PRESERVAO DA AMOSTRA Preservar uma amostra reduzir ao mximo o processo de CINTICA QUMICA a fim de aumentar o prazo analtico para isso pode-se utilizar de:

Reduo de Temperatura Reduo de Oxignio Reduo de Umidade Reduo de Luz

Geladeira, freezers,gelo seco,N2 liq.,ar refrig. Vcuo, gases ( N2,Ar ) Dissecador, desumidificardor

mbar, insul filme,sala escura

Introduo de Agente de Corte

dicromato,cido, base,esterificante

COLETA-LQUIDO HETEROGNEO

Quando da presena de slidos em suspenso imprime-se agitao a um sistema tubular de aproximadamente 50cm de altura por 15 cm de dimetro. Deve-se desprezar as primeiras coletas, retornando-as ou no para o recipiente.

O material do sistema estar sempre em funo da inerticidade s substncias em pesquisa na amostra

AMOSTRAGEM PROCESSO DE ENVASE

A proposta de coleta pode ser alterada em funo da quantidade de produo e tempo de produo

Sequncia de 3 conjuntos Sequncia de 3 conjuntos

Incio Meio Final

Anlises individuais ou agrupadas. (discusso interna)

Sequncia de 3 conjuntos

Embalagem

Matria Prima

COLETA DE SOLO COM TRADOS

COLETA DE GASES/VAPORES E CONDENSADOS

COLETA EM REA VERMELHA

Bomba manual aspirante-premente

5 li tros

80oC 0,1 atm

. Alim

REATOR 130oC 0,3 atm

40oC 0,1 atm

Ba g5

litr

os

T R O C A D O R

Bag

3
30oC atm

Bomba manual aspirante-premente

COLETA-INSTANTNEA
Respiro ou selo de presso

Reciclo TQ 042 B 5000 litros x 1 Boca de Visita Lquido Zona Morta

manmetro

Neste caso deve-se reciclar todo o contedo do TQ pelo menos 3 vezes antes de se retirar a amostra.

x 2

Processo
Deve-se garantir que a tubulao de tomada de amostra foi drenada em pelo menos 3 vezes

COLETA-LQUIDO HETEROGNEO

Quando da presena de slidos em suspenso imprime-se agitao a um sistema tubular de aproximadamente 50cm de altura por 15 cm de dimetro. Deve-se desprezar as primeiras coletas, retornando-as ou no para o recipiente.

O material do sistema estar sempre em funo da inerticidade s substncias em pesquisa na amostra

COLETA-SLIDOS CILNDRICOS

Coleta de amostras nas reas seccionadas Exemplos: Papel de embalagem Fita crepe Fita isolante Papel de fax Bobina de papel Caso a oxidao venha a alterar A amostra, utilizar de cobertura com gas inerte

COLETA- GAS EM CILINDROS

Cilindro de 1 a 5 litros que suporte presso maior que a do cilindro amostrado

manmetro

Vlvula utilizada para limpeza e purga do sistema

Material resistente e inerte ao produto

15 kg de Gas a 100 atm

A amostragem para anlise pode resultar numa presso no cilindro analtico de 2 atm o que permite ter alquotas em seringas ou bag s

AMOSTRAGEM PROCESSO DE ENVASE

A proposta de coleta pode ser alterada em funo da quantidade de produo e tempo de produo

Sequncia de 3 conjuntos Sequncia de 3 conjuntos

Incio Meio Final

Anlises individuais ou agrupadas. (discusso interna)

Sequncia de 3 conjuntos

Embalagem

Matria Prima

AMOSTRAGEM DE AR ATMOSFRICO

Absorventes

Resinas de Absoro

Bomba de vcuo com debitmetro

Bomba de vcuo Debitmetro

Monitoramento do ambiente de contato

Estaca

Solo

AMOSTRAGEM CANAVIAL

1)

Absorventes PAHs Naftaleno Acenaftileno Bomba de vcuo com debitmetro Acenafteno Fluoreno Fenantreno TPH Tetradecano Pentadecano Hexadecano Octadecano Nonadecano Eicosano Heneicosano Docosano Tetracosano Pentacosano Hexacosano

Monitoramento do ambiente de contato

Antraceno Pireno Fluoranteno

2)

Criseno Benzo[a]antraceno Benzo[b]fluoranteno Benzo[k]fluoranteno Benzo[a]pireno Indeno[1,2,3-cd]pireno

3)

Dibenzo[ah]antraceno Benzo[ghi]perileno

ESTABILIDADE ALGUMAS FORMAS DE SE OBTER A ESTABILIDADE

ESTABILIDADE ACELERADA
- Utiliza de condio acentuada de Temperatura e Umidade - Normalmente pelo perodo de: - 6 meses ( condio acentuada 1 ) - 3 meses ( condio acentuada 2 )

ESTABILIDADE DE CURTA DURAO

- Utiliza da variao de temperatura em ciclos de congelamento e descongelamento

ESTABILIDADE DE BANCADA ou Injeo automtica

- Utiliza da condio de Temperatura e Luminosidade ambiente

ESTABILIDADE DE MDIA DURAO

- Utiliza da temperatura de armazenamento com anlises em dias alternados, sendo a estabilidade estimada pelas equaes cinticas de Arrhenius.

ESTABILIDADE DE LONGA DURAO

- Utiliza da temperatura de armazenamento com anlises mensais pelo perodo estimado da validade ( maiores que 1 ano)

ESTABILIDADE/ANVISA/Mtodo Analtico

O ensaio de Estabilidade para o mtodo analtico, tambm conhecido como ensaio de Stress busca proteger a anlise de interferncias possveis sobre a amostra durante o ensaio analtico. A Anvisa, destaca alguns tipos de estabilidade, porm fica em aberto os parmetros:

1- Luz 2- Calor 3- Umidade 4- Hidrlise cida/basica 5- Oxidao

VALIDAO QUALITATIVA
DE FORMA BEM SIMPLIFICADA
ESPECTROMETRIA DE MASSAS - Determina fragmentos e Peso Molecular INFRA VERMELHO - Determina grupos funcionais RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR- Determina posies na Cadeia Carbnica RAIO-X - DIFRAO - Determina Polimorfismo ANLISE ELEMENTAR (CHNSO) Determina a composio Centesimal ABSORO AO ULTRA-VIOLETA Determina a presena de insaturaes ABSORO AO VISVEL Determina a presena de cromgenos COLORIMETRIA - Determinaes da Qumica Clssica

OBS.: NADA IMPEDE O USO DESSAS TCNICAS DE CARACTERIZAO, DE FAZEREM ANLISE QUANTITATIVA

ACERTIVIDADE

VALIDAO
REP REPR PADRES INTERLABO

X
PRECISO

X
Linearidade Recuperao

Estabilidade

Limites Robustez

A
EXATIDO

Seletividade/Especificidade

Prefixos das Unidades do SI

Nome yotta zetta exa peta tera giga mega quilo hecto deca
Uni. Funda deci centi mili micro nano pico femto atto zepto yocto d c m n p f a z y

Smbolo Y Z E P T G M k h da

Fator de multiplicao da unidade 1024 = 1 000 000 000 000 000 000 000 000 1021 = 1 000 000 000 000 000 000 000 1018 = 1 000 000 000 000 000 000 1015 = 1 000 000 000 000 000 1012 = 1 000 000 000 000 109 = 1 000 000 000 106 = 1 000 000 10 = 1 000 10 = 100 10
100 = 1 10-1 = 0,1 10-2 = 0,01 10-3 = 0,001 10-6 = 0,000 001 10-9 = 0,000 000 001
Microscopia de Transmisso

gua

1-Volume de amostra analisada: 0,5 microlitros - split 1:50 Anlise: Clorofrmio a 100 ppb (g/l)

Dificuldade de Ver(MEV) E na Balana??

E na Balana????

2-Massa Detectada?

10-12 = 0,000 000 000 001 10-15 = 0,000 000 000 000 001 10-18 = 0,000 000 000 000 000 001 10-21 = 0,000 000 000 000 000 000 001 10-24 = 0,000 000 000 000 000 000 000 001

1 pg

DETECTABILIDADE
A DETECTABILIDADE normalmente confundida em anlise instrumental com a SENSIBILIDADE DETECTABILIDADE 1- o quanto o sistema de deteco do sistema analtico consegue enxergar. 2- a quantidade mnima da espcie qumica em massa ou volume que o sistema analtico consegue mensurar. 3-Um equipamento possui alta detectabilidade, quando consegue enxergar uma quantidade mnima da funo ou espcie em questo. Exemplo de timas Detectabilidades (considerao geral, pois depende da molcula e do meio) CFG/FID = 0,5 mg/litro CFG/ECD = 0,1 g/litro GC/MS/SIM = 5 g/litro LC/MSMS = 0,1 ng/mL ICP = 1 g/litro Se 0,5 L de amostra introduzida num GC/MS/SIM a massa detectada de 2,5 picogramas (pg) Se o split for 1:50 a massa ser 0,05 pg = 50 fentogramas

SISTEMAS DE EXTRAO/CONCENTRAO

Extrao Lquido/Lquido Extrao Lquido/Vapor Extrao p/Aquecimento (Head Space Sttico)

Extrao Por Arraste Gasoso (Head Space Dinmico) Extrao por Arraste e Trap (Head Space Purge&Trap) Extrao Contra Corrente Extrao por Ppdades Coligativas

SPE = Solid Phase Extraction

Mistura Lquida

SPME = Solid Phase Micro Extraction

Sobre agulha

Adsorvente

-Analito fica retido - extrado com solvente em funo da polaridade

Resina Polar; Apolar/Interm.

CFG

Demais Componentes
Lquido

VALIDAO
So valores de Preciso:
- Reptitividade ( inter e intra ocasio) - Reprodutividade - Desvios - Testes de rejeio

So valores de Exatido:
- seletividade/especificidade - calibrao - padres Robustez - linearidade (curvas e deteco) - recuperao - ensaio interlaboratorial - integrao do sinal analtico - experincia do analista

LINEARIDADE
Utilizando-se do Excell = correl ( A5:A12;B5:B12 ) conc. ; sinal Pode-se observar que a variabilidade, se reduz com o aumento ppm ppm rea de noves decimais. rea
0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 100 200 300 400 500 600 700 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 80 200 360 400 500 600 700 ppm rea

0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5

50 200 300 400 700 600 940

r=

1,000

r=

r= 0,993

0,965

Hoje discute-se entre a aplicao do r ou da variabilidade mxima de 15% entre a repetio dos valores obtidos na curva de resposta.

ENTENDENDO PRECISO E EXATIDO

B;M;A = conc. Baixa;Mdia;Alta
B CV Exatido 2,5% 93% M 2,0% 95% A 1,8% 96% Mdia 2,1% 94,6%

PRECISO:
-As medidas 2,5 ; 2,0 ; 1,8 correspondem as mdias obtidas na REPEtitividade - A medida 2,1 mdia dos CV, REPROdutividade

EXATIDO:
-O quanto o mtodo de amostragem ou anlise consegue representar o ativo no amostral
PERGUNTA: 1- Considerando a Exatido 94,6% e sabendo que no amostral h 100%, posso acrescentar os 5,4% no resultado?

NO

EXATIDO
Na prtica a Exatido tem por finalidade, garantir que o valor medido, esteja prximo do valor declarado.

EXATIDO : qualidade que exprime compatibilidade de valor aceito com valor

de referncia.
Espalhamento Valor Distante Valor Mdio Valor Prximo Valor nominal

ACURCIA : o grau de proximidade de um determinado valor ao valor real

ou conhecido nominal em condies determinadas. Pode ser medido em relao ao maior desvio.

Expresso da medida: valor medido x 100 % Compatibilidade = ---------------------------valor nominal

RECUPERAO

RECUPERAO e EXATIDO
Para a Farmacutica : Para a Qumica : RECUPERAO = EXATIDO RECUPERAO EXATIDO
RECUPERAO

AMOSTRAGEM

RESULTADO

EXATIDO
Quantidade Quantificada da espcie

EXATIDO ou RECUPERAO

X 100%

Quantidade Adicionada da espcie ou Especificao ou Valor de Referncia

DESENVOLVIMENTO DE MTODO
MTODO
ADEQUAO (co-validao)
DISPONVEL NO DISPONVEL

PESQUISA BIBLIOGRFICA

DISPONVEL NO DISPONVEL

VALIDAO DA METODOLOGIA
(*) A proposta T&E verificar a estabilidade na bancada, ou seja, qual o tempo de uso do padro e amostra durante o processo analtico. Obs.: O tempo pesquisado ser o obtido durante o processo de validao do mtodo.

ACEITA

DESENVOLVIMENTO -Conhecer o analito -Definir a alquota para anlise -Definir a tcnica e a condio analtica -(*)Definir a estabilidade do analito -Definies prvias de variabilidade

ESTABILIDADE (*)

PARMETROS PARA ANLISE

VALIDAO DO MTODO
CONDIO ANALTICA DEFINIDA
h interferente ou integra no confivel

SELETIVIDADE
no h interferente ou integra confivel

rever

RECUPERAO
no aceito

DEFINIR OS PARMETROS PARA ANLISE

LIMITE DE QUANTIFICAO
aceito

confivel a % no compromete a marcha analtica

no confivel a % compromete a marcha analtica

R < 0,99 ou >15% Rep e

LINEARIDADE
R 0,99 ou < 15%

Repr > 15%

PRECISO
Rep e Repr 15%

PARMETROS DE ACEITABILIDADE

aceito

h restries aceito

no aceito

EXATIDO

ENSAIOS DE ROBUSTEZ

no h interferncia ou integra confivel

h interferncia ou integra no confivel

CONFIABILIDADE ANALTICA METAIS VIA AA ou ICP

ENSAIO Estabilidade AMOSTRAL Padro meio cido:Inicial/12 horas/24 horas conc.baixa-mdia-alta Padro sobre amostra meio cido:Inicial/12 horas/24 horas conc.baixa-mdia-alta Bco./triplicata de padres sobre o bco. de conc.baixamdia-alta Soluo me previso de 5 diluies, e duplicada dos valores menores Curva de Resposta com cinco pontos com duplicata por ponto. Triplicada de conc.baixa-mdia-alta em duplicata de ocasio Mdia de duplicata de conc.baixa-mdia-alta em duplicata de ocasio -Variao da concentrao cida de abertura(duplicata) -Variao do comprimento de onda ( duplicata) Nmero de anlises 09 09

Seletividade

10

Limite de Quantificao Linearidade

10

10

Preciso

18

Exatido

12

Robustez

04 04 = 86 anlises

CONFIABILIDADE ANALTICA - CFG COM EXTRAO

ENSAIO Estabilidade AMOSTRAL Padres em trs concentraes distintas: tempo zero/12 e 24 hs em bancada Padres sobre a amostra em trs concentraes distintas: ciclos de armazenamento e temperatura ambiente Padres sobre a amostra em trs concentraes distintas mantidos no sistema de armazenamento: incio do estudo e final da previso Bco./duplicata sobre do padro sobre o bco. de conc.baixa-mdiado estudo alta Padres sobre a amostra em trs concentraes distintas: duplicata sobre cada concentrao Soluo me previso de 5 diluies, e duplicada dos valores menores Curva de Resposta com cinco pontos com duplicata por ponto. Triplicada de conc.baixa-mdia-alta em duplicata de ocasio Mdia de duplicada de conc.baixa-mdia-alta em duplicata de ocasio -Variao da temperatura da coluna (maior e menor em duplicata para o padro sobre a amostra com separao mais crtica) -Variao da coluna cromatogrfica ( para os padres sobre a amostra com baixa e alta concentrao e separao mais crtica ) Nmero de anlises 27 18 9 7 12 10 10 18 12 04 08 =

Seletividade Recuperao Limite de Quantificao Linearidade Preciso Exatido Robustez

135

VALIDAO EM AMOSTRAGEM Validar em Amostragem difere de Validar Mtodo:

- dimenso (universo de: micro; tonelada, km2; oceano, etc) - tempo e momento (longas distncias, tempo de residncia) - no repetir o mesmo amostral (oceano; solo, etc) - custo (pode ser elevado) - dificuldade de acesso (sacarias) - dificuldade de coleta (tambor de mel)

Ferramentas de Validao em Amostragem:

a)So as mesmas do mtodo, porm a pertinncia do uso deve ser estudado caso a caso. b)Normalmente utilizam-se normas ou regras para manter histrico de comparao

VALIDAO EM AMOSTRAGEM
Os items de Validao, podem ser comparados em Amostragem e Mtodo

Mtodo
Seletividade/Especificidade Recuperao Limites Quantificao/Deteco Linearidade Preciso (rep/repr) Exatido Robustez/Estabilidade Parmetros de Aceitabilidade Parmetros de Coleta Parmetros configurados

Amostragem
Normalmente visual ou teste simples. Pode-se usar Instr como I.Vermelho A princpio No Pertinente A princpio No Pertinente, porm pode-se estimar a quantidade A princpio No Pertinente A princpio Pertinente. Execuo pode ser complexa. Caso a caso. A princpio No Pertinente. Deve-se buscar probabilidades. A princpio No Pertinente para Robustez, porm vivel para Estabilidade Mais na forma de amostrar, de preservar, ou seja, parm. mensurveis Deve ser planejado em detalhes So parmetros em funo da amostragem(local, HST,reaes, equip., etc)

CONFIABILIDADE
DESENVOLVIMENTO -sinal analtico -metodologia -calibrao Padres VALIDAO ANLISE
CONDIO ANALTICA DEFINIDA SELETIVIDADE RECUPERAO LIMITE DE QUANTIFICAO LINEARIDADE PRECISO EXATIDO ENSAIOS DE ROBUSTEZ

DESENVOLVE

EMISSO DE RESULTADOS ARQUIVOS

BIBLIOGRAFIA OU ADEQUAO DO EXISTENTE

PARMETROS DE ACEITABILIDADE PARMETROS PARA ANLISE

AMOSTRANDO DOCUMENTO DE AMOSTRAGEM

Empresa: _____________________________CNPJ________________IE__________ Endereo: _____________________________Cidade:_________Estado:__CEP_____ Responsvel da Empresa durante a Coleta:_______________________Cargo:_______ Atividade da Empresa: ______________________
Identificao da Amostra data:__/__/__ hora: Descrio do Ponto

ANLISES COLETA
retirada por:

Microbiologia:__________________________ Frasco: Preservao: DBO5/DQO : _________________________ Frasco: Preservao

Metais : ______________________________ Frasco: Preservao: Materia Bruta:_________________________ Orgnicos: ___________________________ Frasco: Preservao: pH= temp: Aspecto: Obs. Gerais: Cond.:

____________________ ________,__de________de_______ T&E Analtica nome:

_____________________ Contratante nome:

AMOSTRANDO DOCUMENTO DE AMOSTRAGEM

Empresa: ____________________Endereo: _________________________________ _____________________Cidade:_________________Estado:________CEP________ Responsvel da Empresa na Coleta:______________________data da coleta__/___/__ Fone ( ) Fax ( )
Identificao da Amostra hora da coleta: Descrio do Ponto
Quantidade coletada

Identificao da Amostra

hora da coleta:

Descrio do Ponto

Quantidade coletada

Identificao da Amostra

hora da coleta:

Descrio do Ponto

Quantidade coletada

Identificao da Amostra

hora da coleta:

Descrio do Ponto

Quantidade coletada

____________________ T&E Analtica ________,__de________de_______ nome:

_____________________ Contratante nome:

CONFIABILIDADE

CARTER

Amostrador e Analista
FORMAO

ROLO COMPRESSOR
SE REALIZOU O TEMPO AVANOU SE NO REALIZOU O TEMPO TAMBM AVANOU

VELOCIDADE = 24 h/dia, para a frente

Nasc.

23

35

40

50

60

80

100 anos

SE CONTINUAS PENSANDO EM REALIZAR O TEMPO CONTINUA AVANANDO.

TRANQUILIDADE

O QUE FAZER?
LEMBREM-SE: QUEM SONHA MUITO
PORQUE DORME DEMAIS. W.Churchil

CONVERSAR SEMPRE

TRANQUILO MAS ATENTO

MUITO OBRIGADO
T&E ANALTICA
CAMPINAS Rua Lauro Vanucci 1260 J.Sta.Cndida CEP: 13087 548

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