Captulo 1 - Bases para uso da metodologia isotpica 1.1.

Istopos estveis - definio Antes de comearmos o estudo sobre a aplicao dos istopos estveis do carbono, nitrognio, oxignio e deutrio em ecologia e em outras reas correlatas preciso uma breve reviso sobre alguns tpicos importantes. Por exemplo, como se definem os istopos? Istopos so espcies atmicas de um mesmo elemento qumico que possuem massas diferentes pelo fato do nmero de nutrons em seus ncleos ser distinto, ou seja, possuem o mesmo nmero de prtons (conhecido como nmero atmico, Z), mas diferentes nmero de nutrons (N) no ncleo atmico. Uma vez que a massa atmica (A) dada pela soma do nmero de prtons mais o nmero de nutrons, istopos de um mesmo elemento tero diferentes valores de A. Os istopos estveis so assim chamados por no alterarem sua massa ao longo de sua existncia, ao contrrio dos chamados instveis ou radioativos que, por sua vez, decaem (mudam suas massas) por emisso de energia ou partculas subatmicas. Abaixo, exemplifica-se a distribuio do nmero de prtons e nutrons para o carbono e nitrognio, que possuem particular interesse em estudos ligados a processos ambientais: carbono: nitrognio
12 13 14 15

C = 6 prtons e 6 nutrons C = 6 prtons e 7 nutrons N = 7 prtons e 7 nutrons N = 7 prtons e 8 nutrons

Normalmente os istopos mais "leves", ou seja, com menor massa atmica, so mais abundantes, enquanto que os istopos que possuem massa atmica maior so mais raros, estando presente em uma quantidade muito menor, quando comparada ao istopo mais leve. Alm do carbono e nitrognio, outros istopos so importantes em estudos ambientais, tais quais o oxignio, o hidrognio e o enxofre (Tabela 1).

Tabela 1.1. Alguns elementos e seus istopos estveis com suas respectivas abundncias mdias (em tomos %). Elemento carbono Nitrognio Oxignio Hidrognio Oxignio Enxofre Istopos C C 14 N 15 N 16 O 17 O 18 O 1 H D 16 O 17 O 18 O 32 S 34 S
13 12

Abundncia mdia 98.89 1.11 99.34 0.37 99.76 0.037 0.199 98.98 0.02 99.76 0.037 0.199 95.02 4.21

1.2. Breve histrico Como o prprio ttulo deste tem mostra, apresentaremos a seguir um breve histrico sobre a espectrometria de massas, que so definidos como equipamentos que "....ionizam molculas gasosas e separam os ons em um espectro de acordo com a razo massa/carga (m/z), usando campos magnticos e eltricos..." (Barrier & Prosser, 1996. Esse despretensioso histrico se faz necessrio pelo fato que sem o desenvolvimento dessa tcnica analtica, os istopos no poderiam ser utilizados. A espectrometria de massas reconhecidamente um dos mtodos analticos mais antigos. Em 1886, Goldstein descobriu os raios positivos utilizando um tubo de descarga eltrica baixa presso. Na seqncia, em 1912, Thomson utilizando non obteve duas linhas parablicas em uma chapa fotogrfica, mostrando que raios positivos eram "feixes de ons" e confirmando, desta forma, a estrutura isotpica da matria. Os feixes descritos por Thonson correspondiam ao 2ONe e 22Ne. A comunidade cientfica passou a aceitar a existncia dos istopos no campo dos elementos estveis a partir de 1920, aps F.W. Aston apresentar seu espectrgrado de raios positivos, que usava campos eltricos e magnticos para 2

separar ons de diferentes massas e foc-los em relao a velocidade de cada on. No perodo entre 1927-1932, ocorreu a descoberta dos istopos por outros tais quais: 0,15% para o H. Com o aprimoramento do espectrmetro de massas na dcada de 30 traadores ambientais. Norman e Werkman (1943) foram pioneiros na utilizao do por
15 2 13 32

S,

33

S, e

34

S, seguidos
34

C,

18

O,

17

O,

15

N e 2H. A cronologia da descoberta destes Sa

istopos reflete a abundncia destes elementos na natureza, indo de 4,3% para o

Alfred Neir e colaboradores, os istopos estveis passaram a ser utilizados como N no estudo de absoro de nitrognio por soja. No final da dcada de 1940, o aumento na preciso dos espectrmetros de massas permitiu ao grupo associado Harold Urey, da Universidade de Chicago, desenvolver uma srie de pesquisas sobre a variabilidade natural do hidrognio (Irving Friedman), carbono (Harmon Craig), nitrognio e oxignio (Sam Epstein). Em 1947, Urey explica e quantifica os efeitos da variao isotpica (fracionamento) em abundncias naturais em uma publicao que se tornou clssica aos estudos isotpicos (*). At 1950 o grupo da Universidade de Chicago tinha aprimorado a preciso dos espectrmetros de massas em 10 vezes e at 1957 os colaboradores no grupo de Urey tinha aumentado consideravelmente as possibilidades de utilizao dos istopos estveis em estudos naturais, assim como, estabelecido procedimentos rigorosos de correes e padronizao de dados. Em 1961, Harmon Craig publica um artigo seminal onde so descritos os fatores de correes analticas e padronizao dos resultados. Nas dcadas seguintes (60 e 70) viu-se um desenvolvimento considervel do espectrmetro de massas de razo isotpica (IRMS - Isotope Ratio Mass Spectrometer) e nos anos 80 a evoluo dos equipamentos deu-se em direo automao, com anlises em fluxo continuo de
13

C,

15

N,

18O

e D, utilizando gs hlio como carreador e

aumentando consideravelmente a capacidade analtica. Atualmente amostras gasosas (CO2, N2O, CH4), liquidas (H2O, bebidas, etc) ou slidas (madeira, folhas, alimentos entre outros) so analisados por fluxo continuo, seja com um cromatgrafo a gs, um pr-concentrador, ou com um sistema de cromatografia lquida acoplados ao IRMS.

Em 50 anos, portanto, pode-se salientar que houve uma melhora significativa na preciso das anlises e no sistema de preparo e admisso das amostras. Os espectrmetros de massas modernos so compostos essencialmente por (Fig. 1.1): Sistema de admisso de amostra e padro, os quais so introduzidos na forma gasosa; Fonte de ionizado, onde os gases so ionizados pela retirada de eltrons; Analisador (campo magntico), onde os feixes de ons so separados e focalizados de acordo com a relao carga/massa; Sistema coletor ou detector, onde os feixes inicos so coletados e amplificados, resultando em pulsos eltricos que so registrados; Sistema de bombas que mantm dentro do analisador um vcuo de aproximadamente 10-8 torr e dentro do sistema de admisso de 10-3 torr; Computador e software especfico para aquisio dos dados e controle do equipamento.

Figura 1.1. Esquema geral de um espectrmetro de massas.

1.3. Conceitos importantes O uso de istopos estveis em estudos ambientais baseia-se no fato que a composio isotpica varia de uma forma previsvel conforme o elemento cicla na natureza. A composio isotpica (R) de um determinado elemento expressa pela relao entre o istopo raro e o istopo mais abundante, conforme se pode observar na equao (1) abaixo. Geralmente a razo R estabelecida pelo istopo mais pesado sobre o istopo mais leve.
13 15 18 2 O H ou ..................................(1.1) 16 H O

R=

raro pesado = ou abundante leve

C ou 12 C

N ou 14 N

Um fenmeno que altere a razo R determina, portanto, uma mudana na quantidade de istopos pesados e leves presentes em um determinado elemento (ou composto). A adio de nutrons no altera significativamente a reatividade qumica dos istopos, mas altera sua massa. Assim sendo, podemos dizer que os istopos mais pesados so "mais lentos". Considerando uma reao substrato-produto, onde Rsubstrato e Rproduto so as razes isotpicas do substrato e do produto, respectivamente. O fato dos istopos leves e pesados possurem velocidades de reao levemente distintas, no final da reao o valor de Rsubtrato tende a ser distinto do Rproduto. Com isto podemos definir o Fator de Fracionamento () como sendo:

Rsubsratro R padro

...................................................................................(1.2)

Os valores so geralmente muito prximos unidade, portanto, por convenincia, definiu-se o Fator de Enriquecimento Isotpico () ou a Discriminao isotpica (), que pode ser representado por:

= ( 1) ...........................................................................................(1.3)
A interpretao da composio isotpica absoluta de uma amostra no trivial, com isto se props represent-la por seu desvio com relao razo R de um padro. Desta forma definiu-se a consagrada notao :

Ramostra 1 ........................................................................................(1.4) R padro

Os padres so variveis para cada elemento. Na Tabela 2 apresenta-se a razo R para o carbono, nitrognio, oxignio, e hidrognio. Tabela 1.2. Abundncia isotpica dos padres utilizados para os clculos dos valores de carbono, nitrognio, oxignio e deutrio

Padro Pee dee Belamite (PDB) Atmosfera V-SMOW V-SMOW

Elemento Carbon Nitrognio Oxignio Deutrio

R 0,0112372 0,0036765 0,00200052 0,00015576

Como exemplo, vamos assumir uma amostra de carbono com a seguinte relao isotpica, Ramostra = 0.0109554. O valor desta amostra seria definido por:

Ramostra 0,0109554 1 = 1 = 0,0250774 ..............................(1.5) 0,0112372 R padro

O Fator de Fracionamento () e o Fator de Enriquecimento () podem ser redefinidos em termos da notao . A partir das equaes (2) e (3), e isolando-se o Ramostra na equao (1.4) tem-se:

Ramostra = R padro ( + 1) ................................................................(1.6)

Substituindo-se a equao (5) nas equaes (2) e (3) teremos:

substrato + 1 produto + 1 .......................................................................................(1.7)

substrato produto produto + 1

............................................................................(1.8)

Tanto o valor R, como os valores de so numericamente pequenos (da ordem de 10-2), com isto se convencionou multiplicar o valor de por 1000. Desta forma o valor = -0.0250774 (do exemplo acima) passa a ser expresso como = -25.08 (por mil). Da mesma forma pode-se redefinir os fatores de fracionamento e de enriquecimento na forma "por mil" (conforme equaes 1.9 e 1.10).

substrato + 1000 produto + 1000 ..............................................................................(1.9)

= ( 1) 1000 ...........................................................................(1.10)
Pode-se tambm representar o enriquecimento isotpico na forma obtendo-se a seguinte expresso:

substrato produto produto + 1000

.......................................................................(1.11)

Utilizando-se o exemplo a seguir aplicaremos as definies dos termos descritos. Vamos assumir que o 13CCO2 (substrato) igual a -7.4 (ou -0.0074) e que o valor 13Cplantas (produto) a igual a -27.6 (ou -0.0276). Vamos calcular o Fator de Fracionamento () e o Fator de Enriquecimento () determinado quando o carbono transferido pelo processo da fotossntese da atmosfera para a planta. Neste exemplo o fator de Fracionamento () ficaria:

CO 2 + 1 0,0074 + 1 = = 1,0201 ..................................................(1.12) planta + 1 0,0276 + 1

Para o Fator de Enriquecimento teremos:

CO 2 planta 0,0074 + 0,0276 = = 0,0201 .............................(1.13) planta + 1 0,0276 + 1

Neste caso o Fator de Enriquecimento pode tambm ser multiplicado por 1000 obtendo-se = 20.1. Os denominadores (planta + 1) ou (planta + 1000) nas equaes de Fator de Enriquecimento pouco interferem no resultado, desta forma permite-se que, em determinadas situaes, o denominador possa ser desconsiderado. Nos exemplos acima em vez de um fator de enriquecimento igual a 0.021 (21) teramos um valor igual a 0.0202 (20.2). A equao do Fator de Enriquecimento pode ento ser simplificada para:

= substrato produto = CO 2 planta .....................................(1.14)

O Fator de Enriquecimento pode ser tambm chamado de Discriminao isotpica, que um termo mais comum em literatura das reas como Ecologia, Biologia e Agronomia. Alm da notao "", que normalmente denota a ocorrncia natural de uma espcie isotpica com relao ao padro, duas outras formas de expresso das medidas isotpicas so: "abundncia" em unidades de tomos% e tomos% em excesso (atom% excess ou APE). A abundancia em tomos% normalmente utilizada em experimentos com utilizao de traadores, por exemplo a aplicaco de um fertilizante enriquecido em nitrognio-15 (15N). Esta determinao nos fornece o nmero de tomos do determinado istopo em 100 tomos do elemento, e pode ser descrito pela seguinte equao:

100 (15 N ) atom%excess N = 14 15 ...........................................................(1.15) N+ N

15

Por outro lado o atom% excess mede a abundancia do istopo acima de um determinado nvel de referncia. Em alguns casos o nvel de referncia (background) determinado anteriormente a aplicao do traador. O atom% do background ento subtrado das amostras enriquecidas para determinar seu atom % excess. Um exemplo de aplicao desta tcnica a utilizao de nitrognio enriquecido em de cadeias alimentares ou em fertilizao de plantas.
15

N para estudos

1.3. Fracionamento Isotpico: efeito termodinmico e cintico O fracionamento isotpico pode ser definido como a variao na proporo entre os istopos estveis em um determinado composto ao passar por um processo fsico-qumico. Este fracionamento pode estar associado a um efeito termodinmico ou cintico. O efeito termodinmico refere-se ao fracionamento que ocorre em situaes de equilbrio qumico. Em termos ambientais, a troca de CO2 atmosfrico e HCO3 nos oceanos um bom exemplo deste fracionamento. Quando ocorre o equilbrio entre o CO2 e o HCO3 na interface ar-gua, o bicarbonato fica enriquecido em istopo pesado (13C) em cerca de 10.8 a 7.4. Equilbrio este que varia em funo da temperatura. A relao entre o fracionamento isotpico e a temperatura pode ser descrita em termos de fator de enriquecimento () e fator de fracionamento (), conforme as equaes (1.16) e (1.17) abaixo:

= a + b T 1 + c T 2 ........................................................(1.16)
1 = a + b T 1 + c T 2 ......................................................(1.17)

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O efeito cintico esta geralmente ligado reaes biolgicas e processos fsicos como o da difuso de um gs. O fluxo difusivo de um gs pode ser descrito pela lei de Graham, e est associado as velocidades cinticas das molculas. Por outro lado, a segunda lei de Fick define sistemas onde a transferncia de massas determinada por diferenas no coeficiente de difuso, como por exemplo a disfuso do CO2 pelo perfil do solo ou ao se difundir pela abertura estomtica nas folhas. O processo de fracionamento associado atividade enzimtica no processo fotossinttico outro exemplo onde a diferena cintica das molculas contendo fixado. importante mencionar o fracionamento Rayleigh que ocorre quando uma massa de ar empobrecida no istopo mais pesado por fracionamento em estado de equilbrio para uma fase continuamente removida. O exemplo mais clssico de destilao, ou fracionamento, Rayleigh a condensao de gua no interior de uma nvem (ver captulo Hidrologia Isotpica para maiores detalhes). A equao que descreve o fracionamento Rayleigh a seguinte:
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C e

13

C determina

alterao na composio isotpica entre a fonte, o CO2, e o produto, o carbohidrato

R = R0 f

(1 )

.....................................................................................(1.18)

onde f define a frao restante no corpo parental.

1.4. Modelo de mistura de duas fontes (diluio isotpica) Quando duas fontes participam da composio de um produto qualquer, a contribuio relativa de cada uma delas pode ser calculada pelo modelo de mistura, que simplesmente um balano de massa combinado a um balano isotpico. Assumindose que as fontes A e B se unem para formar o produto P, a seqncia de equaes que regem este modelo a seguinte: A + B = 1...................................................................................................(1.19)

11

Multiplicando-se cada membro pelos respectivos teremos:

( A A ) + ( B B ) = 1 p ............................................................(1.20)
Substituindo-se (1.16) por (1.17) teremos:

A=

P B A B

....................................................................................(1.21)

O modelo acima requer que: 1) Somente duas fontes estejam presentes 2) Elas devem diferir isotopicamente o suficiente para que possam ser mdias, acima do erro inerente da anlise. O erro da anlise deve ser determinado em laboratrio e vai ser dependente do espectrmetro e perifrico utilizados nas anlises. Como exemplo, admitem-se duas fontes de matria orgnica para um determinado solo. A primeira fonte (A) com valor isotpico igual a -27 e a segunda fonte (B) com valor isotpico igual a -12. O produto (P), ou seja, o solo teve um valor isotpico igual a -21. Aplicando-se o modelo de mistura isotpica descrito tem-se que a fonte A contribuiu com cerca de 60% e a fonte B contribuiu com os 40% restantes.

A=

21 + 12 = 0.6 ............................................................................(1.22) 27 + 12

Como veremos no decorrer dos captulos deste livro, esse simples modelo de mistura amplamente utilizado em vrias disciplinas. Por exemplo, a contribuio relativa de cevada e milho na elaborao de uma cerveja pode ser determinada por esse modelo, como ser visto no captulo 10.

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Bibliografia recomendada Farquhar GD, Ehleringer JR, Hubick KT (1989) Carbon Isotope Discrimination and Photosynthesis. Ann. Rev. Physiol. Plant Mol. Biol. 40: 503-537. Fritz P, Fontes JCh. (1980) Introduction. In. Handbook of Environmental Isotope Geochemistry. Fritz, P. and J.Ch Fontes (eds.). Amsterdam, Elsevier, 1980. p.1-17. Hoefs, J (1987) Stable Isotope Geochemistry. Berlin, Springer-Verlag. Martinelli LA, Victoria RL, Matsui E, Forsberg B, Mozeto AA (1988) Utilizao das Variaes Naturais de 13C no Estudo de Cadeias Alimentares em Ambientes Aquticos: Princpios e Perspectivas. Acta Limnol. Brasil. 2: 859-882. Oliveira AC, Salimon CI, Calheiros DF, Fernandes FA, Vieira I, Charbel LF, Pires LF, Salomo SMB, Nogueira SF, Vieira S, Moreira MZ, Martinelli LA, Camargo PB (2002) Istopos estveis e produo de bebidas: de onde vem o carbono que consumimos? Boletim da Sociedade Brasileira de Cincia e Tecnologia de Alimentos. 22(3): 285-288. Peterson BJ, Fry B (1987) Stable Isotopes in Ecosystem Studies. Ann. Rev. Ecol.Syst. 18: 292-320.

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Captulo 2 - Ciclos biogeoqumicos

Os ciclos biogeoqumicos dizem respeito transferncia de elementos qumicos do universo abitico ao universo bitico e vice-versa. Ou seja, os elementos minerais transferidos, e que passam a compor os tecidos de plantas e animais, retornam ao meio ambiente aps a sua morte e decomposio. Considerando-se os macro-elementos ou molculas, os principais ciclos biogeoqumicos so: do carbono, da gua (H2O), do nitrognio e do fsforo. Neste captulo descreve-se os ciclos do carbono e nitrognio, e as variaes isotpicas associadas s diversas formas destes elementos dentro da biosfera.

2.1. O Ciclo Global do Carbono 2.1.1. Introduo O elemento carbono e, provavelmente, o principal elemento da Terra. As razes que levam a essa afirmao so: (1) o carbono compe de 40 a 50% da matria orgnica viva; (2) os ciclos de outros elementos importantes como nitrognio e oxignio so altamente influenciados pelo ciclo do carbono e (3) A humanidade, pela primeira vez na Histria deste planeta est interferindo significativamente em escala global no ciclo biogeoqumico do carbono.

2.1.2. Os Reservatrios e Fluxos de Carbono O carbono na natureza est presente na forma elementar como carbono amorfo, grafite e diamante. Por outro lado, tomos de carbono na forma no elementar podem assumir estados de oxi-reduo variando de +4 to -4. Os grandes reservatrios de carbono apresentam este elemento mais comumente como dixido de carbono (CO2), com estado de oxidao de +4 (C+4O2-4) e como carbonatos. Neste ltimo caso dois reservatrios contm a maior parte do carbono: a litosfera, onde o carbono se encontra principalmente na forma HCO3 e CO3-2. de carbonatos de clcio [CaCO3(s)O], magnsio

[Mg(CO3)2] e frrico [FeCO3), e nos oceanos nas formas dissolvidas de H2CO3(aq),

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O carbono no estado reduzido "criado'' pela fotossntese (CH2O). A forma mais reduzida de carbono o metano (CH4) produzido durante a respirao anaerbia, e tem estado de oxidao -4. Portanto, o ciclo do carbono entre os diferentes compartimentos da Terra uma seqncia de reaes de oxi-reduo.

2.1.3. Atmosfera A molcula contendo carbono mais abundante na atmosfera o dixido de carbono (CO2), seguindo-se em menores concentraes o metano (CH4), o monxido de carbono (CO), compostos orgnicos volteis (VOC) entre outros. Em 1954 Keeling e colegas comearam a medir a concentrao de CO2 na atmosfera prximo ao vulco Mauna Loa e no Plo Sul. O fato mais marcante dessa serie histrica velocidade no aumento na concentrao de CO2 atmosfrico nestes 50 anos corroborando com dados que indicam o aumento de cerca de 100 ppmv desde o inicio da revoluo industrial em meados do sculo XIX, atingindo valores atuais em torno de 375 ppmv. O aumento monitorado pela srie de dados de Mauna Loa pode ser visualizado na Figura 2.1. As duas principais causas para o aumento acentuado observado nas ltimas dcadas so: (1) a queima de combustveis fsseis e (2) a queima de biomassa, principalmente nas regies tropicais da Terra. Deve ser ressaltado que a emisso de combustveis fsseis ocorre principalmente nos pases mais desenvolvidos, como esses pases esto localizados no Hemisfrio Norte a concentrao de CO2 atmosfrico maior nesse hemisfrio. Sabemos tambm que a emisso de combustveis fsseis muito maior que as emisses causadas por mudanas no uso da terra. Estes dados denotam a importncia dos pases desenvolvidos, como maiores consumidores de combustveis fsseis, as alteraes na composio da atmosfrica terrestre e conseqentemente na "sade climtica" do planeta. Concentraes elevadas de CO2 foram uma constante na histria climtica deste planeta. No entanto, no h registros de alteraes na concentrao de CO2 atmosfrico com a velocidade e intensidade observada na histria recente do planeta. A principal conseqncia da mudana na concentrao de CO2 na atmosfera o aumento do chamado "efeito estufa", que a propriedade da atmosfera terrestre reter energia na forma de ondas longas emitidas pela superfcie da Terra. Em sntese, a 14

superfcie da Terra aquecida pela incidncia de raios solares como ondas curtas que incidindo na superfcie terrestre a aquece. O comprimento de ondas da energia emitida por um corpo proporcional a sua temperatura, com isto a superfcie terrestre emite energia a atmosfera na forma de ondas longas. Essa energia pode ser refletidas ou reemitidas para superfcie do planeta por vapor d'gua, nuvens, aerossis e gases como CO2, CH4 e N2O. Portanto, um aumento na concentrao de CO2 atmosfrico pode, potencialmente, tornar a terra mais quente.

CO2-atmosfrico (ppmv)

Anos
Figura 2.1. Aumento da concentrao de CO2 atmosfrico entre 1958 a 2004. Adapatado de C.D. Keeling,T.P. Whorf, e o Carbon Dioxide Research Group. Scripps Institution of Oceanography (SIO), University of California, La Jolla, California USA 92093-0444

Arrhenius estimou que um aumento de 50% na concentrao de CO2 da atmosfrica causaria um aumento de 3 a 4C na temperatura da superfcie terrestre. Recentemente, utilizando-se modelos matemticos vrios autores estimaram que se a concentrao de CO2 fosse dobrada o aumento na temperatura seria de 2.5 a 3.5C.

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Por outro lado estimativas sobre o aquecimento real da temperatura do ar apontam para um crescimento de apenas 0.5C na temperatura do ar. Alguns fatores podem ser apontados como causadores dessa discrepncia: (1) aumento na concentrao de sulfato na atmosfera devido emisses industriais; (2) oscilao natural do planeta que recentemente tem favorecido o esfriamento da Terra e (3) destruio da camada de oznio. Em conseqncia do aumento de temperatura, so previstas alteraes no ciclo da gua, com mudanas nos regimes de precipitao global e aumento da evaporaco. Portanto, haveria uma provvel intensificao do ciclo hidrolgico. O estoque e aporte de carbono atmosfera pode ser resumido da seguinte forma: Estoque: Carbono estocado na atmosfera = 760 Pg ou x 1015g Fluxos de carbono: Queima de biomassa = 1,8 a 4,7 Pg de C/ano Queima de combustvel fssil = 6,0 Pg de C/ano

2.1.4. Biosfera Terrestre A transferncia de carbono entre atmosfera e biosfera terrestre ocorre essencialmente atravs de dois processos: fotossntese e respirao. Esses processos podem ser descritos de uma maneira resumida pela equao abaixo: CO2 + H2O (CH2O)n + O2

No processo de fotossntese, CO2 da atmosfera reduzido por organismos autotrficos em diferentes molculas orgnicas. O carbono assimilado pela fotossntese e liberado como CO2 no (i) processo de respirao e (ii) decomposio. O carbono assimilado pela fotossntese pode tambm ser estocado por longos perodos, em formas refratrias (como carvo por exemplo), no solos e sedimentos em corpos d'gua.

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Considerando um ecossistema especfico algumas definies importantes consideram o balano entre fotossntese e respirao, o que em sntese podem indicar o balano produtivo do sistema. Os conceitos a seguir so mais comumente utilizados para ambientes terrestres. O conceito de Produtividade Primaria Global (GPP) indica a fotossntese total do ecossistema e Produtividade Primaria Liquida (NPP) determinado subtraindo a taxa de assimilao de carbono pelo processo fotossinttico da taxa de respirao dos organismos fotossintetizadores (em nosso exemplo terrestre,

essencialmente as plantas). A Produtividade Liquida do Ecossistema determinada subtraindo a NPP da respirao heterotrfica (decompositores). Geralmente, medida que o sistema se torna mais velho, observa-se que sua NEP vai diminuindo, tendendo a zero. Esse o caso dos ecossistemas considerados em clmax. A Tabela 1 mostra dados de produo de alguns dos principais ecossistemas terrestres. As florestas contem 90% de todo o carbono na mataria orgnica viva do sistema terrestre. Mais importante ainda, observa-se que a maior quantidade de carbono estocado em florestas encontra-se no Brasil.

Tabela 1. rea, NPP e NPP multiplicado por rea (Total NPP) em algum dos principais ecossistemas da biosfera (Whittaker & Likens, 1973).

Ecossistema

rea (milhes de Km2)

NPP (gC.M-2 . ano-1)

Total NPP (109 tC . ano-1)

Total Carbon (109 tC)

Rocha, gelo e areia Desertos Floresta tropical Savana Terras cultivadas Florestas boreais

24.0 18.0 17.0 15.0 14.0 12.0

1.5 32.0 900.0 315.0 290.0 360.0

0.04 0.60 15.30 4.30 4.10 4.3

0.20 5.40 340.0 27.0 7.0 108.0

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Alguns pontos da Tabela 1 devem ser salientados: (1) grande rea coberta por rochas, gelo e areia, contrapondo com reduzida quantidade de carbono estocado; (2) maior quantidade de carbono estocado em florestas tropicais, quase 3 vezes o valor encontrado em florestas boreais, segundo lugar em estoque; (3) a ao do Homem, atravs de terras cultivadas, j estocou uma quantidade considervel de carbono. Em um ecossistema terrestre o carbono assimilado pelo processo de fotossntese, ou retorna atmosfera convertido novamente a CO2 ou incorporado aos tecidos vegetais que eventualmente sero depositados no solo. A Tabela 2 resume para os mesmos ecossistemas mostrados na Tabela 1 a quantidade de carbono estocada na serapilheira e nos solos.

Tabela 2. rea ocupada por alguns dos principais biomas terrestres e quantidade de carbono estocada no solo e na serapilheira nesses biomas.

Ecossistema

rea (milhes de Km2)

C - solo (109 tC) 3.0 101.0 255.0 56.0 178.0 179.0

C - serapilheira (109 tC) 0.02 0.20 3.60 1.50 0.70 24

Rocha, gelo e areia Desertos Floresta tropical Savana Terras cultivadas Florestas boreais

24.0 18.0 17.0 15.0 14.0 12.0

Pontos importantes a serem destacados da Tabela 2: (1) maior quantidade de carbono estocado nos solos encontrados em florestas tropicais, (2) maior quantidade de carbono na serapilheira em florestas boreais. Neste caso menores temperaturas levam a decomposio menos intensa, estocando mais carbono na serapilheira. O estoque e aporte de carbono aos ecossistemas terrestres podem ser quantificados da seguinte forma:

18

Estoques Carbono estocado em plantas terrestres = 756, 490, 502 Pg de C Carbono estocado no solo + serapilheira = 1636-2070; 1395; 1511; 1576 Pg de C Somente serapilheira = 50; 60 Pg de C Fluxos Fotossntese (GPP) = 90-130 PgC/ano Respirao de plantas = 40-60 PgC/ano Respirao de razes e micorrizas = 38-56 PgC/ano NPP = 38-56, 45, 52, 60, 48, 60 Pg C/ano Decomposio da serapilheira e matria orgnica do solo = 50

2.1.5. Hidrosfera As principais formas de carbono nos sistemas aquticos so: DIC carbono inorgnico dissolvido DOC carbono orgnico dissolvido POC carbono orgnico particulado BOC carbono orgnico na biota

O principal reservatrio dessas formas de carbono so os oceanos. Nesse reservatrio as trocas acontecem rapidamente, podendo o oceano "adaptar-se" rapidamente s mudanas na concentrao de CO2 na atmosfera. Por exemplo, o tempo de residncia do CO2 na superfcie do oceano em mdia de 6 anos. Por outro lado, o tempo mdio de residncia em guas profundas muito maior, cerca de 275 anos no Atlntico e 510 anos no Pacfico. O menor reservatrio no oceano a biota, no entanto tem um papel fundamental na distribuio de vrios elementos no mar. A principal entrada de carbono na biota dos oceanos atravs da fotossntese (produo primaria). Outra forma importante de aporte de carbono aos oceanos o transporte de carbono orgnico pelos rios. No entanto assumido que a quantidade de carbono orgnico que atinge o

19

oceano por essa via balanceado pelo fluxo de CO2 que sai do oceano vindo da decomposio do material vivo, subtraindo uma parcela do carbono orgnico que fica depositado no sedimento. Em forma de equao teramos:

FluxoC rio = FluxoC decomposio + FluxoC se dim ento ...................................(2.1)

O ciclo geoqumico parece ainda no ter sido perturbado pela interferncia humana. Nesse ciclo, a gua de chuva, que naturalmente carrega CO2 dissolvido, ao entrar no solo se enriquece ainda mais em CO2, essencialmente de origem biognica, e reage com carbonatos atravs da seguinte equao (em forma simplificada, "M" representa ou CIcio ou Magnsio): CO2+ H2O + MCO3 M2+ + 2HCO3-..................................................................(2.2) Os rios carream aos oceanos os ctions (Ca+2 ou Mg+2) e HCO3+2. Nos oceanos organismos como moluscos e crustceos sintetizam carbonatos liberando CO2+H2O em uma reao inversa a descrita acima para os solos. Portanto, a equao descreve dois processos, o de intemperismo da rocha com liberao de ctions e a formao de estruturas de sustentaco, como o exemplo dos exoesqueletos (carapaas de animais marinhos). Com a morte dos organismos o exoesqueleto depositado no fundo dos mares imobilizando o carbono por um longo perodo. Processo semelhante ocorre com os silicatos. CO2 e gua reagem com um mineral silicatado liberando um ction (M) mais SiO2 e HCO3. Esquematicamente teremos: CO2 + H2O + MSiO3 SiO2 + M2+ + 2HCO3-.......................................................(2.3) Da mesma forma, ao chegar no oceano ocorre a incorporao do silicato em estruturas de sustentao e proteo (carapaas). Com a morte desses animais, o silicato depositado no fundo dos oceanos. O SiO2 pode tambm ser seqestrado por algas pois um componente importante na formao da parede celular. No sedimento os xidos de silcio (SiO2) reagem com o carbonato sedimentado liberando CO2 20

(equao 2.3, da direita para a esquerda). Portanto, assumindo-se uma condio de equilbrio fsicoqumico:
( rio ) ( se dim ento )

FluxoHCO 3

= FluxoMCO 3

+ FluxoCO 2 .................................(2.4)

Com relao a atmosfera, o mecanismo mais importante de troca de CO2 com os oceanos o fluxo desses gs atravs da interface gua ar. Este fluxo regido pela seguinte equao:

F = k ( pCO2 ( atmosfera ) pCO2 ( oceano ) ) .................................................(2.5)

O aumento na concentrao de CO2 na atmosfera pode determinar o incremento nos fluxos da atmosfera para os oceanos, no entanto a superfcie dos oceanos tem um volume limitado (5%) quando comparado com seu volume total. A relao superfcie/profundidade nos oceanos relativamente pequena, fazendo com que grande parte das guas dos oceanos no tenha contato imediato com a atmosfera. Esse uma das causas da no absoro total do excedente de carbono que vem sendo emitido pela queima de combustveis fsseis e biomassa, determinando um aumento considervel nas concentraes atmosfricas de CO2. Nos oceanos o CO2 da superfcie levado para o fundo pelo fenmeno de downwelling. O oceano aquecido pela radiao solar nas camadas superficiais (75 a 200m, com temperatura mdia de 18C). Como a gua quente menos densa, no h mistura com a gua fria do fundo (com temperaturas mdias em torno de 3C). O sistema de circulao de gua dos oceanos, leva, ento, gua quente dos trpicos para os plos e traz gua fria dos plos para os trpicos, transferindo assim calor dos trpicos para os plos. A perda de calor da gua quando ela chega nos plos, faz com que essa parcela de gua afunde (downwelling), levando gua da superfcie para o fundo do oceano. Essa circulao nos plos cria uma corrente no fundo do oceano dos plos para a regio equatorial, ressurgindo na superfcie dessas regies (upwelling).

21

O CO2 ao entrar no oceano pela interface gua-ar se dissolve na gua formando cido carbnico (H2CO3). Conforme as condies de temperatura e pH do meio, o cido carbnico pode se dissociar, passando a bicarbonato (HCO3) e carbonato (CO3) e liberando H+. CO2(ar) CO2(dis) + H2O H2CO3 H+ + HCO3 H+ + CO32-......................(2.7) Para que o equilbrio qumico se mantenha, equao (2.7) se desloca para a esquerda ou direita. Por exemplo, caso haja adio de prtons (H+) a reao se deslocar para a esquerda, consumindo assim esse prton e evitando que o pH do meio mude. Esse o denominado sistema tampo das guas.

Estoques DIC = 37900 Pg C DOC = 1000 Pg C POC = 30 Pg C BOC = 3 Pg C Fluxos Seqestro pelo oceano = 92 Pg de C/ano Liberao pelo oceano = 90.6 Pg de C/ano

2.1.6. Litosfera Ainda que na litosfera seja o maior reservatrio de carbono do planeta, o fluxo entre esse grande reservatrio e os outros reduzido, determinando um longo tempo de residncia para o carbono nesse compartimento. Recentemente os fluxos da litosfera e outros compartimentos tm sido catalisados pela ao do homem, pela queima de combustveis fsseis, ou carvo mineral. Cerca de 75% do carbono presente na litosfera encontra-se na forma de carbonatos, sendo as formas predominantes a calcita e a aragonita.

22

Estoque Carbono na crosta terrestre 75.000.000 Pg de C Fluxos Intemperimso de rochas = 0.24-0.26 Pg C/ano

2.1.7. O Balano Contemporneo do Carbono Uma das equaes mais recentes para o balano contemporneo de carbono proposto por House et al. (2003) sugere os seguintes nmeros (os valores sac em Pg C/ano):

Fontes de CO2 1. Emisso combustveis fsseis = + 6.3 0.4 2. Desmatamento = + 1.4 3.0 3. Total de emisses antropognicas (1+2) = 7.7 3.4

Sumidouros de CO2 4. Aumento na atmosfera = - 3.20.1 5. Seqestro pelos oceanos = - 2.00.8 6. Fluxo Atmosfere-Biosfera terrestre = -1.0 0.8

Como a soma das fontes maior que a soma dos sumidouros, suposto que os sistemas terrestres do planeta estejam absorvendo anualmente de 1.6 a 4.8 Pg C.

2.2. O Ciclo Global do Nitrognio 2.2.1 Introduo

O nitrognio, juntamente com o fsforo, so os maiores limitantes da produo primria tanto aqutica quanto terrestre em nosso planeta. A ribulose bi-fosfato carboxilase/oxigenase a enzima que catalisa a reao de fixao do CO2 na 23

fotossntese e sua abundancia chega a 40% de toda protena solvel no interior das folhas da maioria das plantas. Ou seja, a intensidade com que CO2 ser reduzido pela fotossntese, passando para uma forma orgnica, depende muito da abundncia do nitrognio. Portanto, a compresso do funcionamento de um ecossistema est intimamente ligada ao conhecimento do ciclo desse nutriente. O nitrognio, assim como o carbono, assume diferentes estados oxidativos, podendo passar de 3 ate +5. Descrevem-se a seguir os principais compostos nitrogenados e as reaes qumicas que medeiam o ciclo desse elemento.

2.2.2 Compostos de N e principais reaes qumicas Listam-se a seguir os principais compostos nitrogenados e a contribuio do Homem em sua ocorrncia.

HNO3 (acido ntrico) - um cido forte, sendo que somente nos EUA cerca de 0.007 Pg desse cido sintetizado por ano. A maioria desse acido utilizado na produo de fertilizantes e explosivos. HNO3 tambm produzido naturalmente na troposfera pela oxidao do nitrognio. NO2 (nitrito) - gs a temperatura ambiente, produzido industrialmente como um produto intermedirio. NO3 (nitrato) - gs temperatura ambiente, produzido industrialmente como um produto intermedirio. NO (xido ntrico) - gs temperatura ambiente, produzido industrialmente. N2O (xido nitroso) - gs temperatura ambiente, utilizado como anestsico. A

concentrao desse gs vem subindo, e como o CO2 ele contribui para o aumento do efeito estufa. N2 - Tambm um gs temperatura ambiente. Constitui 78% da composio da atmosfera e uma molcula relativamente pouco reativa. NH3 (amnia) - gs temperatura ambiente. uma base forte, solvel em gua. Cada ano cerca de 0.012 Pg de amnia produzida atravs do processo de Haber-Bosch, principalmente para a produo de acido ntrico. Pode ser utilizado como fertilizante pela injeo direta de gs em um liquido ou transformado em sal de amnio. 24

NH4 (amnio) - alguns sais de amnio so fabricados: NH4NO3 (0.006 Pg) e NH4SO4 (n.002 Pg) e so utilizados principalmente como fertilizantes.

As mais importantes transformaes biolgicas do nitrognio so as seguintes: Fixao do nitrognio qualquer processo que leve o N2 atmosfrico a ser transformado em qualquer composto nitrogenado. Fixao biolgica do nitrognio a passagem de N2 para NH3, NH4 ou outro composto nitrogenado. Assimilao da amnia ou amnio o processo pelo qual NH3 ou NH4+ absorvido por um organismo; Nitrificao a oxidao do NH3 ou NH4+ para NO2- ou NO3 por um organismo, visando a produo de energia; Reduo assimilatria do nitrato - a reduo do nitrato, formando-se NH4+, seguido por assimilao do nitrognio por organismos; Amonificao - a quebra de compostos orgnicos de N em NH3 ou NH4+ ; Denitrificao - a reduo do nitrato para formas gasosas de N, geralmente, N2 ou N2O, passando intermediariamente pela formao de NH4+. A fixao do nitrognio um processo de grande importncia para a dinmica de ecossistemas naturais, pois a nica forma biolgica de transferncia do nitrognio da atmosfera para os sistemas aquticos ou terrestres. As principais limitaes ao processo de fixao biolgica so: (i) alto requerimento energtico e, (ii) ausncia de oxignio. A fixao biolgica e um processo anaerbio sendo que a presena de oxignio no microstios de fixao inibe o processo. Aps a fixao do nitrognio como NH3 ou NH4+ existem dois caminhos principais a serem seguidos. Oxidao para NO3- ou assimilao por microrganismos. ons livres de amnio no existem por muito tempo em condies de aerobiose, portanto, so rapidamente oxidados para nitrato, tanto em ambientes aquticos, como terrestres. Nesses sistemas o nitrato pode seguir dois caminhos: servir como aceptor de eltrons em condies anaerbias (denitrificao) ou pode ser reduzido e assimilado pela biomassa.

25

Alem da fixao de N2, outra fonte para o solo e sistema aqutico a decomposio da matria orgnica, liberando nitrognio. Esse processo chamado amonificao ou mineralizao e feito por bactrias heterotrficas, que ao decompor tecidos mortos de plantas e animais como fonte de carbono essas bactrias geram formas inorgnicas de nitrognio (NH3 e NH4+). Parte dessa amnia pode ser volatilizada e retornar atmosfera.

2.2.3 Reservatrios e Fluxos de Nitrognio 2.2.3.1 Atmosfera - A atmosfera o maior reservatrio de nitrognio, principalmente na forma de N2 (mais que 99%), o restante encontra-se na forma de xidos de nitrognio. O estoque de nitrognio na atmosfera estimado em 3,9 x 106 Pg.

2.2.3.2 Biosfera - O ambiente terrestre estoca uma quantidade muito menor, cerca de 3,5 Pg de N, na forma de plantas e animal e cerca de 95 Pg de N como matria orgnica do solo. Considerando-se os valores de carbono estocados na vegetao terrestre (610 Pg de C) e nos solos (1600 Pg de C), a relao C:N da vegetao e do solo seria de 60 e 15, respectivamente. A maior parte do nitrognio nos ambientes terrestres e aquticos encontra-se na forma orgnica, muito pouco se encontra na forma inorgnica devido intensidade das reaes de transformaes das vrias formas do nitrognio. Como visto, a transferncia do nitrognio da atmosfera aos sistemas biolgicos ocorre atravs do processo de fixaco. Existem dois tipos de fixao, a simbitica e a assimbitica. A simbitica, feita por organismos, a mais importante. As estimativas da quantidade fixada anualmente variam de 44 a 200 Tg de N, sendo o valor mediano aproximadamente igual a 110 Tg N/ano. Por outro lado, a fixao no simbitica que utiliza essencialmente a energia de raios provocados por atividades atmosfricas, o N2 passa para NOx, e por deposio seca e/ou mida chega na superfcie da terra. Este processo responsvel pela adio anual de 5 a 10 Tg de N. Assumindo-se a produo primria Iquida (NPP) do sistema terrestre igual a 60 Pg de C/ano, e que os tecidos fotossinteticamente ativos tenham uma razo C:N igual a 50, seriam necessrios cerca de 1.2 Pg de N/ano, somente so fixados cerca de 110 Tg 26

de N/ano, portanto, somente 12% do necessrio. O restante fornecido pela ciclagem interna e pela decomposio da matria orgnica morta. O impacto da atividade humana no ciclo do nitrognio j bastante intenso. Na produo industrial de fertilizantes nitrogenados pelo processo Haber-Bosch,

anualmente so fixados de 85 Tg de N. A combusto industrial, por sua vez, lana como N2 para atmosfera mais cerca 30 Tg de N/ano que transformado posteriormente para xidos de nitrognio que por deposio seca e mida retornam para a superfcie terrestre. O mesmo caminho seguem cerca de 15 Tg de N/ano que so lanados pela queima de biomassa, onde incluem florestas, reas agrcolas (como cana de acar) e pastagens. Outra fonte antropognica importante no ciclo do carbono o cultivo de leguminosas que anualmente injetam cerca de 30 TgN/ano nos sistemas terrestres. O processo de fixao de nitrognio atmosfrico pelas leguminosas obviamente natural. Porm, quando a floresta amaznica, que fixa cerca de 20 kgN.ha.ano, derrubada e substituda por uma plantao de soja que fixa cerca de dez vezes mais, demonstra claramente um tipo de fixao que apesar de advim de um processo natural, foi induzida pela ao do Homem. Dentro do ciclo do nitrognio, a ciclagem da amnia tambm tem lugar de destaque. As maiores fontes de amnia para a atmosfera so os processos de amonificao (quebra de compostos orgnicos de nitrognio em NH3 ou NH4+) e volatilizao de excretas de animais. Um efeito indireto do Homem nesse ciclo particular a emisso de nitrognio pela criao de animais para consumo e animais domsticos. A maior parte da amnia lanada atmosfera retorna como NH4+ na precipitao ou como gs NH3 via deposio seca. Portanto, as mudanas recentes ocasionadas pela ao do Homem na Terra vm determinando o aumento no aporte atmosfrico de nitrognio a biosfera, com vrias conseqncias para os ecossistemas. Por exemplo, algumas florestas da regio da Bavaria esto morrendo por excesso de nitrognio, sendo que potencialmente o mesmo problema pode estar ocorrendo em Cubato, SP. Em rios identificam-se efeitos semelhantes, como no rio Piracicaba, em So Paulo, onde concentraes de nitrato esto muito acima do normal alterando

significativamente a dinmica ecolgica do ambiente.

27

Historicamente assume-se um equilbrio no ciclo do nitrognio, e o processo de desnitrificao utilizado para fechar o balano, por ser normalmente pouco quantificado (Tab. 2.1.). No entanto algumas evidncias indicam um desequilbrio no balano: (i) A concentrao de N2O no Hemisfrio Norte major que no Hemisfrio Sul e, (ii) a concentrao de N2O esta aumentando em todo o globo a uma taxa de 0.2% ao ano.

Tabela 2.1. Balano de nitrognio no sistema terrestre.

biosfera

Processo Fixao biolgica Fixao no-simbitica Queima de biomassa

Fluxo (Tg de N/ano) 110 5 12 30 85 30 30 357

Aportes (sinks)

Combusto industrial Consumo fertilizantes Fixao industrial Cultivo de leguminosas

Total Denitrificao Fontes (sources) Volatilizao de NH3 River runoff Total Balano

155 122 34 311 46

2.2.4 Ciclo do Nitrognio O sistema terrestre ganha anualmente cerca de 46 Tg de N (Tab. 2.1). A

pergunta cientifica importante neste momento qual ser o destino desse nitrognio?

28

O nitrognio adicional poder ser acumulado em trs reservatrios terrestres: gua subterrnea, vegetao e solos. No entanto, ainda no podemos afirmar

categoricamente para onde o excesso de nitrognio ser alocado. Essa informao no entanto crucial no somente para o ciclo do nitrognio, mas tambm para o ciclo do carbono, pois se sabe da interdependncia entre os ciclos na natureza e a importncia ecolgica dessas relaes.

Bibliografia recomendada

Boyer EW, Goodale CL, Jaworski NA, Howarth RW. (2002). Anthropogenic nitrogen sources and relationships to riverine nitrogen export in the northeastern U.S.A. Biogeochemistry 57/58: 137-169. Butcher SS, Charlson RJ, Orians GH, Wolfe GV. (1992). Global Biogeochemical Cycles. Academic Press, 379p. Galloway JN, Aber JD, Erisman JW, Seitzinger SP, Howarth RW, Cowling EB, Cosby BJ. (2003). The nitrogen cascade. Bioscience 53 (4): 341-356. Galloway JN, Dentener FJ, Capone DG, Boyer EW, Howarth RW, Seitzinger SP, Asner GP, Cleveland CC, Green PA, Holland EA, Karl DM, Michaels AF, Porter JH, Townsend AR, Vorosmarty CJ. (2004) Nitrogen cycles: past, present, and future Biogeochemistry 70 (2): 153-226. Howarth RW (2004) Human acceleration of the nitrogen cycle: drivers, consequences, and steps toward solutions. Water Science and Technology 49 (5-6): 7-13 Sarmiento JL. (1992). Revised budget for the oceanic uptake of anthropogenic carbon dioxide. Nature 356: 589-593. Schlesinger WH. (1991). Biogeochemistry: An Analysis of Global Change. Academic Press, 443p. Schimel DS. Terrestrial Ecosystems And The Carbon-Cycle. Global Change Biology 1 (1): 77-91 Feb 1995. Siegenthaler U, Sarmiento JL (1993). Atmospheric carbon dioxide and the ocean. Nature 365: 119-125.

29

Vitousek PM, Aber JD, Howarth RW, Likens GE, Matson PA, Schindler DW, Schlesinger WH, Tilman DG (1997) Human alteration of the global nitrogen cycle: Sources and consequences. Ecological Applications 7 (3): 737-750.

30

Captulo 3 - Atmosfera 3.1. Introduo A composio isotpica da atmosfera em termos espaciais relativamente constantes, variando entre -7 a -8. Por qu -7 a -8 ? O equilbrio isotpico entre o CO2 atmosfrico e o HCO3 dissolvido na gua ocorre atravs da seguinte reao:

CO2 ( gasoso ) + H 2 O HCO3

( aquoso )

+ H + .....................................................(3.1)

O 13C do bicarbonato nos oceanos varia entre 0 a 2, conseqentemente, o valor e da reao ser cerca de 6 a 8, ou seja:

13CO2 = 13 HCO3 7 ...............................................................................(3.2)

Note que o 13C do CO2 "mais leve" que o 13C do HCO3, o que vale dizer que o CO2 fica empobrecido em
13

C em relao ao bicarbonato. Devido s ligaes

atmicas, o bicarbonato "retm" mais 13C em relao ao CO2 atmosfrico. Devemos tambm ressaltar que, como vimos no Captulo 1, o fracionamento isotpico dessa reao de equilbrio uma funo da temperatura. Em um trabalho clssico, Deuser & Degens (1967) estabeleceram, em condies de laboratrio, a variao do fracionamento isotpico em funo da temperatura. Observa-se que o fracionamento major em temperaturas menores. Tabela 3.1. Fracionamento isotpico entre o CO2 atmosfrico e bicarbonato aquos0. Adaptado de Deuser e Degens (1968).

31

Tabela 3.1. Fracionamento isotpico entre o CO2 atmosfrico e bicarbonato aquoso. Adaptado de Deuser e Degens (1968).

Temperatura (C) 0 0 0 0 10 10 20 20 30 30

Fracionamento 9.3 8.8 9.1 9.6 8.1 8.1 7.6 7 6.6 7.1

3.2. Variaes Locais no 13CO2 da Atmosfera De uma maneira geral, os valores de 13CO2 da atmosfera sofrem poucas variaes espacialmente, como veremos mais frente. Assim, se coletarmos amostras de ar a uma altitude de 200m, provavelmente a composio isotpica do ar ser a mesma aqui como na China. No entanto, prximo superfcie, a composio isotpica do CO2 atmosfrico influenciada pela biota. A variabilidade espacial da composio isotpica e na concentrao de CO2 na atmosfera est intimamente relacionada biota. Quanto maior a proximidade da biosfera maior ser a variabilidade destes parmetros, ou seja se coletarmos ar a 500m de altitude em uma mesma latitude, as variaes isotpicas e de concentrao sero mnimas.

32

Dentro de um determinado ecossistema podemos aplicar o mesmo raciocnio e concluir que quanto mais prximos se estiver das fontes emissoras maiores sero as variaes de concentrao e composio isotpica do CO2. Por exemplo, em um ecossistema florestal medida que chegamos mais perto do solo, a concentrao de CO2 ser mais elevada. A respirao do solo, da vegetao e decompositores, associados baixa turbulncia nas camadas de ar do sub-bosque florestal, determina a variao na concentrao de CO2 e consequentemente sua composio isotpica Analisando-se a Figura 3.1, observamos que a concentrao de CO2 foi mais elevada nos primeiros estratos de uma floresta tropical localizada na Reserva Ducke, prxima cidade de Manaus, devido respirao do solo e da vegetaco. Nota-se que a concentrao de CO2 foi maior s 6 horas da manh, diminuindo ao longo do dia (curva das 10 s 18 horas) devido retirada de CO2 pelo processo da fotossntese. Por volta das 23 horas a concentrao de CO2 aumenta novamente, pois noite cessa a fotossntese e prevalece a respirao das plantas e do solo. Por outro lado, interessante notar que as 6 horas da manh, quando a concentrao de CO2 estava mais elevada, os valores de 13C foram menores. Esse fato ocorre porque o valor isotpico do CO2 respirado por um determinado organismo, seja planta ou animal, tem o sinal isotpico do carbohidrato, ou de outro composto, que foi oxidado no processo respiratrio. De forma geral, pode-se considerar que no h fracionamento isotpico no processo respiratrio quando se define precisamente o composto que est sendo oxidado e o organismo envolvido no processo. No solo a respiraao heterotrfica acontece pelo metabolismo de vrios organismos associados a diversos substratos e compostos orgnicos, que por distintas caractersticas bioqumicas possuem valores isotpicos tambm diferenciados. Isso se confirma por dados recentes em que questionado o fato de o processo respiratrio noite,

realmente representar isotopicamente o composto sintetizado durante o dia pelo processo fotossinttico (Ekblad e Hgbeg, 2001; Shweizer et al, 1999; Duranceau et al, 2001).

33

Altura da medida ao longo da copa (m)

30 25

18:00 6:00

20 15 10 5 0 320

23:00

360

400

440

480

CO2 atmosfrico (ppmv)

Altura da medida ao longo da copa (m) 30 18:00 25 20 15 10 5 0 -7 -8
13

6:00

23:00

-9

-10

-11

-12
o

-13

-14

C-CO2 atmosfrico ( /oo)

Figura 3.1. Acima variao da concentrao de CO2 atmosfrico ao longo da copa. Abaixo variao dos valores de 13C do CO2 atmosfrico ao longo da copa. Adaptado por Quay et al. (1990).

34

O mesmo tipo de estudo feito na Reserva Ducke em Manaus foi repetido na Floresta Nacional do Tapajs (FLONA), prxima cidade de Santarm. Da mesma forma que Quay et al. (1990), Ometto et al (2002) demonstram os efeitos dos processos de fotossntese e respirao na concentrao e no 13C do CO2 no interior da floresta (Figura 3.2). Durante o dia (12 horas) o processo fotossinttico retira CO2 da atmosfera reduzindo sua concentrao no perfil florestal e enriquecendo-o isotopicamente. A noite (20 horas) observa-se o efeito inverso, com uma maior concentrao de CO2 em todos os nveis do perfil e valores isotpicos mais leves, ocasionado pelo processo respiratrio.

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Altura da medida ao longo da copa (m)

35 30 25 20 15 10 5 0 320 360 400 440 480 CO2 atmosfrico (ppmv) 12:00 16:00 9:00

Altura da medida ao longo da copa (m)

35 30 25 20 15 10 12:00 5

9:00

16:00 0 -7 -8 -9
13

-10

-11

-12
o

-13

-14

C-CO2 atmosfrico ( /oo)

Figura 3.2. Acima variao da concentrao de CO2 atmosfrico ao longo da copa. Abaixo variao dos valores de 13C do CO2 atmosfrico ao longo da copa. Adaptado por Ometto et al. (2002).

36

Admitindo um ecossistema florestal onde o valor isotpico mdio do carbono orgnico (13Corg ) em torno de -28, o CO2 liberado no interior da floresta pelo processo respiratrio teria um 13C mdio prximo a -28 o que dilui o 13C atmosfrico (com valor isotpico em torno de -7.5). Em suma, o processo respiratrio lana atmosfera um carbono mais leve, e a seguinte relao pode ser descrita: Temos ento duas fontes isotopicamente distintas compondo o ar atmosfrico no interior da floresta. Isso nos faz lembrar nosso modelo de diluio isotpica visto na aula anterior.

C atmosfera + C biognico = C floresta ..................................................................(3.3)

Multiplicando-se a equao (3.3) pelos respectivos valores de 13C teremos:

(C atmosfera 13C atmosfera ) + (Cbiognica 13Cbiognica ) = (C floresta 13C floresta ) ..........(3.4)

Geralmente difcil determinar a concentrao de carbono biognico (Cbiognico), pois so vrias fontes difusas, portanto mais simples se isolarmos esse parmetro na equao (3.4):

C biognico = C floresta C atmosfera ................................................................(3.5)

Podemos substituir a equao (3.5) pela equao (3.4) e teremos:

13C atm C atm + 13Cbio (C flor C atm ) = 13C flor C flor .................(3.6)
Assim, atm a abreviao de atmosfera, bio de biognico e flor de floresta. Dividindo-se todos os membros da equao (3.6) por Cflor no se altera a equao:

37

 13 C atm C atm
C flor

13 C bio C flor
C flor

13 C bio C atm
C flor

13 C flor C flor
C flor
............(3.7)

Desenvolvendo-se a equao (3.7) teremos:

13 C atm

C atm C 13 C bio atm + 13C bio = 13C flor ...............(3.8) C flor C flor

Rearranjando-se a equao (3.8) teremos:

13C flor = 13Cbio + ( 13Catm 13Cbio )

Catm C flor

....................(3.9)

A equao (3.9) pode ser comparada a uma equao de reta:

Y = a + b X .............................................................................(3.10)
Onde, Y = 13Cfloresta a = 13Cbiognico b = (13Catmosfera - 13Cbiognico). Catmosfera X = 1/Cfloresta O 13C da floresta (13Cfloresta) inversamente relacionado como a concentrao de CO2 na floresta (Cfloresta). Portanto, se plotarmos os valores de 13C da floresta contra o inverso da concentrao de CO2 (1/Cfloresta) deveremos ter uma reta.

38

crescente. Pelo contrrio, se plotarmos 13Cfloresta contra a concentrao de CO2 deveremos ter uma reta decrescente. Para a floresta tropical na Reserva Ducke em Manaus encontramos a seguinte equao de reta:

13C flor = 27,3 + 6603

1 C flor
................................................................(3.11)

Portanto: 13Cbiognico = -27,3

Com os dados obtidos na Floresta Nacional do Tapajs, obtivemos uma equao de reta semelhante equao obtida na Reserva Ducke

13C flor = 26,96 + 6821,8

Portanto: 13Cbiognico = -27,0

1 C flor

Outro exemplo pode ser dado pelo mesmo tipo de anlise feita no cerrado brasileiro por Miranda et al. (1997).

13 C cerrado = 21,8 + 5033

Portanto, 13Cbiognico = -21,8

1 C cerrado
.......................................................(3.12)

39

Figura 3.2. Variao dos valores de 13C do CO2 atmosfrico em virtude da concentrao de CO2 atmosfrico no Cerrado Brasileiro em duas pocas distintas: maio e novembro de 1993. Adaptado por Miranda et al. (1997).

No caso do Cerrado a equao de reta foi distinta das equaes encontradas nas florestas da amaznia, o 13Cbiognico foi significativamente mais elevado, pois a vegetao do Cerrado distinta em relao floresta tropical, com major contribuio de plantas do tipo C4, que isotopicamente so mais pesadas que plantas do tipo C3. Recentemente, vrios estudos foram feitos visando determinar 13Cbiognico. A Tabela 3.2 abaixo resume alguns valores encontrados em outras florestas tropicais e cerrado.

40

Tabela 3.2. Valores de 13Cbiognico em florestas tropicais e cerrado. 13C -28,0 -27,8 -27,7 -27,1 -27,2 -25,8 -27,4 -27,8 -27,5 -27,9 -23,4 -21,8 -17,7 -17,2 -13,4 Floresta Tropical Santarm Tropical Manaus Tropical Ji-Paran Tropical Jara Tropical Manaus Tropical Manaus Tropical Manaus Tropical Manaus Tropical Guiana Tropical Guiana Cerrado Braslia Cerrado - Braslia Pastagem Manaus Pastagem - Santarm Pastagem Ji-Paran Referncia Ometto et al. (2002) Ometto et al. (2002) Ometto et al. (2002) Lloyd et al. (1996) Sternberg et al. (1997) Sternberg et al. (1997) Sternberg et al. (1997) Sternberg et al. (1997) Buchmann et al. (1997a) Buchmann et al. (1997a) Miranda et al. (1997) Miranda et al. (1997) Ometto et al (2002) Ometto et al (2002) Ometto et al (2002)

Note que os valores encontrados em florestas tropicais no foram muito distintos. Por outro lado, os dois valores determinados no Cerrado foram maiores, indicando a contribuio de gramneas que seguem o ciclo fotossinttico C4, como j mencionado acima. Estudos em pastagens na regio Amaznica dominadas por gramneas do gnero Bracchiaria, uma gramnea do tipo C4, mostraram que os valores de 13Cbiognico eram ainda mais elevados que os valores encontrados no Cerrado (Tab. 3.2.). Ometto et al. (2002) identificaram que os valores de 13Cbiognico em pastagens dependem da idade da pastagem, do regime de fogo e da quatindade de arbustos C3 presentes na pastagem. Dentre as trs pastagens mostradas na Tabela 3.2., a mais antiga a de Ji-Paran, no Estado de Rondnia, pois justamente essa pastagem teve o valor 13Cbiognico mais elevado devido maior incorporao no solo do material vegetal produzido pelas gramneas.

41

3.3. Variao Secular na Concentrao e Composio Isotpica do CO2 Atmosfrico

Pela anlise de bolhas de ar presas no gelo da Antrtica, Friedli et at, 1986 e por medidas diretas de CO2 e 13CO2 que comearam em 1982, foi possvel construir a variao histrica desses dois parmetros. Observou-se que a concentrao de CO2 da atmosfera vem aumentando e os seus valores de 13C vem se tomando "mais leve": Causas: queima de combustveis fsseis (13C = -24 a -28) queima de vegetao (13C = -28 a -32)

42

Figura 3.3. Variao temporal (secular) na concentrao do CO2 atmosfrico (A) e dos valores de 13C do CO2 atmosfrico. Adaptado por Joos & Bruno (1998). 3.4. Variao entre hemisfrios Cerca de 90% das emisses de combustveis fsseis ocorrem no Hemisfrio Norte e a maioria das emisses devido queima de vegetao ocorre no Hemisfrio Sul. Sabemos que as emisses de combustveis fsseis so maiores que as emisses "biognicas", esse fato cria um gradiente de concentrao de CO2 entre os dois hemisfrios e conseqentemente um gradiente nos valores de 13CO2. As

concentraes de CO2 no Hemisfrio Norte so mais elevadas em cerca de 1 a 2 ppm e os valores de 13CO2 so mais leves cerca de 0.1 a 0.2 (Fig. 3.4). interessante notar que a diferena na composio isotpica do CO2 atmosfrico entre hemisfrios varia sazonalmente. Durante o vero no Hemisfrio Norte (julho-setembro) as plantas esto fotossinteticamente ativas. Ao fazerem fotossntese as plantas discriminam
13 12

C em favor do
13

C. Assim, reatar na atmosfera durante o

vero, relativamente, mais tomos de no verso em relao aos

C, portanto, os valores de 13C sero maiores encontrados no inverno (Fig. 3.4).

valores

43

Figura 3.4. Variao latitudinal dos valores de 13C do CO2 atmosfrico durante inverno e vero. Adaptado por Fung et al. (1997). 44

Bibliografia recomendada

Broadmeadow MSJ, Griffiths H, Maxwell C, Borland AM. (1992). The carbon isotope ratio of plant organic material reflects temporal and spatial variations in CO2 within tropical forest formations in Trinidad. Oecologia 89; 435-441. Buchmann N, Guehl JM, Barigah TS, Ehleringer JR. (1997a). Interseasonal comparison of CO2 concentrations, isotopic composition, and carbon dynamics in an Amazonian rainforest (French Guiana). Oecologia 110: 120-131. Buchmann N, Kao WY, Ehleringer J. (1997b). Influence of stand structure on carbon-13 of vegetation, soils, and canopy air within deciduous and evergreen forests in Utah, United States. Oecoloiga 110: 109-119. Ciais P, Tans P, Trolier M, White JCC, Francey RJ. A large Northernn Hemisphere terrestrial CO2 sink indicated by the 1098-1102. Deuser WG, Degens ET. (1967). Carbon Isotope Fractionation in the System CO2(gas)CO2(aqueous)-HCO3-(aqueous). Nature 215: 1033-1035. Flanagan LB, Brooks JR, Varney GT, Berry SC, Ehleringer JR. (1996). Carbon isotope discrimination during photosynthesis and the isotope ratio of respired CO2 in boreal forest ecosystems. Global Biogeochemical Cycles 10: 629-640. Francey RJ, Tans PP, Allison CE, Enting IG, White JWC, Trolier M. (1995). Changes in oceanica and terrestrial carbon uptake since 1982. Nature 373: 326-330. Friedli, H.; H. Lothscher; H. Oeschger; U. Siegenthaler and B. Stauffer. (1986). Ice core record of the 13C/12C ration of atmospheric CO2 in the past two centuries. Nature 324: 237-238. Fung I, Field CB, Berry JA, Thompson MV, Randerson JT, Malmstrm CM, Vitousek PM, James Collatz G, Sellers PJ, Randall DA, Denning AS, Badeck F, John J. (1997). Carbon 13 exchanges between the atmosphere and biosphere. Global Biogeochemical Cycles 11: 507-533. Joos F, Bruno M. (1998). Long-term variability of the terrestrial and oceanic carbon sinks and the budgets of the carbon isotopes 12: 277-295,.
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13

C/12C ratio of

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47

Captulo 4: Vegetao

4.1. Definies Antes de entrarmos no tema deste captulo, oportuno relembrarmos certos parmetros, como o chamado fator de fracionamento :

Ra Rp

..........................................................................(4.1)

onde: Ra a relao molar produto (planta) Vamos tambm relembrar o fator de fracionamento , que os fisiologistas de plantas denominaram , portanto:
13

C/12C da fonte (atmosfera) e RP: relao molar

13

C/12C do

= ( 1) = (

Ra 1) ....................................................(4.2) Rp

Vale repetir que = , que foi definido na primeira aula. Portanto, somente houve uma mudana de letra de para . Devemos lembrar que Ra, maior que RP, dessa forma o valor de ser maior que 1, conseqentemente o valor de ser positivo. Portanto, quando utilizamos a notao 13C, este valor negativo para as plantas. Por outro lado, quando utilizamos a notao , este ter um valor positivo. Qual seria a relao entre e ? J demostramos essa relao na primeira aula, vamos somente repet-las, trocando-se por :

48

a p p + 1000 ..............................................................(4.3)

4.2. As plantas C3 e a fotossntese Os modelos sobre fracionamento isotpico durante a fotossntese consideram que a descriminao dos tomos de 13C ocorre em duas etapas: (a) Durante a difuso do CO2 pelos estmatos, conhecido pelo valor a, que estimado em 4.4 e (b) Durante a fixao do CO2 atmosfrico em um composto orgnico (rubisco) atravs da reao de carboxilizao, conhecido como valor b, estimado em cerca de 30. H um terceiro parmetro que exerce uma influncia decisiva na composio isotpica das plantas, a relao entre a presso interna de CO2 na cmara estomatal (pi) e a presso externa da atmosfera (pa). As equaes que expressam essas relaes so as seguintes:

= a + (b a)

pi pa

...................................................(4.4)

Ou utilizando-se a notao teremos que:

13C planta C 3 = 13CO2 a (b a )

pi pa

...........................................(4.5)

A Tabela 4.1 resume alguns valores de 13C de folhas coletadas em vrias florestas tropicais brasileiras, folhas coletadas no Cerrado do planalto Central brasileiro

49

e folhas oriundas de algumas florestas temperadas. Note que os valores nas florestas tropicais so sempre menores que os valores encontrados em outros tipos de vegetao. Tabela 4.1. Valores mdios de 13C () de folhas coletadas em diferentes formaes vegetais.
Local Manaus ZF2 C14 Manaus ZF2 K34 Santarm Km 67 Santarm seca floresta Rondnia Rebio Rondnia Samuel S.C. do Rio Negro (V) Amazon river Manaus Res. Ducke Pantanal Manaus Faz. Dimona Braslia Res. IBGE Hokaiddo (Japo)* Jlich (Alemanha)* Utah (EUA)* Prince and Thompson Albert (Canad)* Tipo de vegetao Terra-firme Terra-firme Terra-firme Terra-firme Terra-firme Terra-firme Terra-firme Vrzea Terra-firme Savana Terra-firme Cerrado Floresta temperada F. sylvatica P. contorta and P. tremuloides P. mariana, P. banksina, P. tremuloides 13C () -32.1 -32.6 -32.8 -32.1 -31.9 -32.1 -32.1 -32.1 -31.6 -30.9 -30.8 -29.0 -29.5 -29.0 -27.3 -26.9 Referncia Ometto et al. (no prelo) Ometto et al. (no prelo) Ometto et al. (no prelo) Ometto et al. (no prelo) Ometto et al. (no prelo) Martinelli et al. (1998) Medina and Minchin (1980) Martinelli et al. (1994) Ducatti et al. (1991) Victoria et al. (1995) Kapos et al. (1993) Miranda et al. (1997) Hanba et al. (1997) Schleser (1992) Buchmann et al. (1997) Flanagan et al. (1996)

*Florestas temperadas Note na Figura 4.1 que os valores de 13C de folhas de rvores de florestas tropicais brasileiras coletas em Manaus, Santarm e So Gabriel da Cachoeira e folhas do Cerrado do plananto Central (Braslia) variaram entre -24 a -38, portanto uma variao significativa de cerca de 14. Ainda que os valores mais freqentes estejam entre -30 e -32. Por que observamos essa grande variao nesses tipos de vegetao?

50

Se observarmos os valores foliares de 13C de espcies temperadas, observararemos que so maiores que os valores encontrados em florestas tropicais. Novamente cabe a pergunta, qual a causa dessa diferena? Estas perguntas sero respondidas na prxima aula, quando trataremos das causas que levam estas grandes variaes isotpicas.
450 400 350 300 250 200 150 100 50 0

Nmero de observaes

-42 -40

-38 -36

-34 -32

-30 -28

-26 -24

-22 -20

-42 -40

-38 -36

-34 -32

-30 -28

-26 -24

-22 -20

Localidade: Santarm 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0

Localidade: Manaus

-42 -40

-38 -36

-34 -32

-30 -28

-26 -24

-22 -20

-42 -40

-38 -36

-34 -32

-30 -28

-26 -24

-22 -20

L oc al id ade : SGCa cho ei ra

L oc alidade : Bras li a

C ( /oo)
13 o

Figura 4.1. Distribuio de freqncia dos valores de 13C de folhas de espcies arbreas coletadas em diferentes localidades. Fonte: Ometto et al. (2007).

4.3. As plantas C4 e a fotossntese Nas plantas do tipo C3 foram observados valores de 13C que variaram entre -24 a -38. Por outro lado, para as plantas C4 so observados valores entre -11 a -15. Portanto, isso significa que h uma menor discriminao isotpica dos tomos de
13

C pelas plantas do tipo C4 em relao s plantas do tipo C3. 51

A razo para esse fato reside no modo com que o CO2 fixado nessas plantas durante a fotossntese. Ocorre fracionamento em trs fases distintas: a) Durante a difuso do CO2 atmosfrico pelo estmato, como nas plantas C3, portanto o valor a o mesmo, em torno de 4. b) Durante a passagem do CO2 para HCO3. No mesfilo das folhas de plantas C4 o CO2 dissolvido e hidratado passando a HCO3. Essa etapa denominada de eb e como vimos anteriormente, quando tratamos do equilbrio oceano-atmosfera no captulo 3, o fracionamento desta reao e de aproximadamente -8 a temperatura de 20 C. c) Durante a carboxilizao do HCO3. No ciclo fotossinttico das plantas C4 o HCO3 ser fixado como molcula orgnica, e no o CO2. O fracionamento isotpico durante a fixao do bicarbonato menor que o fracionamento durante a fixao do CO2. Como vimos, o valor b foi igual a 30, no caso das plantas C4, o valor calculado (denominado b4*) ser igual a 2. Portanto, o fracionamento total em uma planta C4, denominado b4, ser igual a:

b4 = eb + b4

*
..................................................................(4.6)

Numericamente teremos que b4 ser igual a -8+2 = -6. d) Durante o "vazamento" do CO2 e HCO3. Uma certa proporo dessas duas espcies carbonatadas pode vazar do mesfilo e seguir os mesmos caminhos bioqumicos em relao as plantas C3. Nesse caso o fracionamento volta a ser de 30 (o valor b). No entanto, como somente uma certa proporo das espcies carbonatadas que vaza do mesfilo, esse tipo de fracionamento comumente expresso como uma proporo do valor b, que comumente expressa como: b, onde exprime a proporo de espcies carbonatadas que vaza do mesfilo. importante notar, que para a maioria das espcies de plantas C4, essa proporo se encontra em torno de 34%. Computando-se todas essas etapas a equao que exprime o fracionamento isotpico em plantas C4 passa a ser:

52

 = a + (b4 + b3 a)
Utilizando-se a notao teremos:

pi pa

...................................................(4.7)

13C planta C 4 = 13CO2 a (b4 + b3 a)

pi pa

.......................(4.8)

Segundo Farquhar et al.(1989), geralmente o termo (b4 + b3- a) igual a zero. Pois, como citado acima, a proporo se encontra ao redor de 34%. Dessa forma, a equao 4.8 resultar em:

13C planta C 4 = 13CO2 a .......................................(4.9)

Nota-se pela equao 4.9 acima, que especificamente para as plantas que seguem o ciclo fotossinttico C4, a relao pi/pa no ter influncia na composio isotpica deste tipo de planta. A Figura 4.2 mostra os valores de 13C de gramneas tropicais depositadas at 1974 no herbreo do Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia. Nota-se que um grupo de gramneas segue o ciclo fotossinttico C3, com valores caractersticos de 13C entre -35 a -23. Por outro lado, nota-se que um outro grupo de gramneas segue o ciclo fotossinttico C4 tendo valores entre -15 a -9.

53

80 70 60 50 40 30 20 10 0

Nmero de observaes

-33 -31 -29 -27 -25 -23 -21 -19 -17 -15 -13 -11 -9

13 C ( o /oo )
Figura 4.2. Distribuio de freqncia dos valores de 13C de amostras de gramneas depositadas at 1974 no herbreo do Instituto Nacional de Pesquisas da Amaznia. Fonte dos dados: Medina et al. (1998).

4.4. As plantas crassulceas (CAM) e a fotossntese As plantas CAM sintetizam oxaloacetato a partir do CO2 atmosfrico, usando a PEP carboxilaze, o oxaloacetato ento convertido e estocado como malato. noite, essas plantas fecham seus estmatos e fazem o processo inverso, transformando o omalato em CO2 e fixando-o como as plantas C3 o fazem. Como todo o CO2 fixado no haver fracionamento nessa fase (b = 0). O malato para ser produzido resulta em um fracionamento semelhante s plantas C4, sem nenhum "vazamento" ( = 0), portanto, a equao para as CAM se reduz a:

54

 = a + (b4 a)
Utilizando-se da notao teremos:

pi pa

...........................................(4.10)

13C planta CAM = 13CO2 a (b4 a)

pi pa

.................................(4.11)

A Figura 4.3 mostra a distribuio de freqncia de valores de 13C de folhas da famlia Poaceae (gramneas) e do gnero Aloe (CAM).

55

Figura 4.3. Distribuio de valores de 13C de 351 espcies de gramneas (painel superior) e de 63 espcies do gnero Aloe (CAM) . Adaptado por Vogel (1993).

56

Bibliografia recomendada Buchmann N, Kao WY, Ehleringer JT (1997) Influence of stand structure on carbon-13 of vegetation, solids, and canopy air within deciduous and evergreen forests in Utah, United States. Oecologia 110:109-119. Ducatti C, Salati E, Martins D (1991) Measurement of the natural variation of Management 38:201-210. Ehleringer JR, Bowling DR, Flanagan LB, Fessenden J, Helliker B, Martinelli LA, Ometto JP (200) Stable Isotopes and Carbon Cycle Processes in Forests and Grasslands. Plant Biology 4: 181-189. Farquhar, G.D.; J.R. Ehleringer and K.T. Hubick (1989) Carbon Isotope Discrimination and Phothossynthesis. Annu. Rev. Physiol. Plant Mat. Biol. 40: 5O3-537, 1989. Flanagan LB, Brooks JR, Varney GT, Berry SC, Ehleringer JR (1996) Carbon isotope discrimination during photosynthesis and the isotope ratio of respired CO2 in boreal forest ecosystem. Global Biogeochem Cycles 10:629-640. Hanba YT, Shigeta M, Lei TT, Koike T, Wada E (1997) Variations in leaf d13C along a vertical profile of irradiance in a temperate Japanese forest. Oecologia 110:253361. Hattersley P.W. 13C Values of C4 Types in Grasses. Kapos V, Ganade G, Matsui E, Victoria RL (1993) Partial-Derivative-C-13 as an Indicator of Edge Effects in Tropical Rain-Forest Reserves. Journal of Ecology 81 (3): 425-432 SEP 1993. Martinelli LA, Victoria RL, Forsberg BR, Richey JE (1994) Isotopic composition of major carbon reservoirs in the Amazon floodplain. International Journal of Ecology and Environmental Sciences 20 (1-2): 31-46. Martinelli LA, Almeida S, Brown IF, Moreira MZ, Victoria RL, Sternberg LSL, Ferreira CAC, Thomas WW (1998). Stable carbon isotope ratio of tree leaves, boles and fine litter in a tropical forest in Rondonia, Brazil. Oecologia 114 (2): 170-179. Medina E, Minchin P (1980) Stratification of 13C values of leaves in Amazonian rain forests. Oecologia 45:377-378.
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C:12C

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13

C/12C Ratios for Higher Plants. Plant

58

Captulo 5 - Fatores Ambientais e a Composio Isotpica das Plantas Em princpio, todo e qualquer fator que altere a composio isotpica do CO2 atmosfrico e ou a relao pi/pa, alterar a composio isotpica das plantas. Examinemos alguns destes fatores: 5.1 Intensidade de luz Quando a intensidade de luz baixa, a planta permanece com seus estmatos abertos tentando otimizar o processo de fotossntese, com isso, pi tende a ser igual a pa, portanto a relao pi/pa, tende hipoteticamente para 1. Substituindo-se a relao pi/pa pelo valor 1 na equao 5.1 teremos que:

13C plantaC 3 = 13CO2 b = 13CO2 30 ......................................(5.1)

Por outro lado, quando a intentidade de luz alta, a planta permanece com seus estmatos mais fechados, diminuindo a concentrao de pi, conseqentemente, a relao pi/pa, tende hipoteticamente a zero, e a equao 5.2 fica reduzida a:

13C plantaC 3 = 13CO2 a = 13CO2 4.4 .........................................(5.2)

Portanto, um gradiente na intensidade de luz provocar um gradiente na composio isotpica das plantas. Locais onde a abundncia de luz menor e no h restrio de gua, as plantas tendem a ter valores menores de 13C. Examinando-se a Figura 5.1 notamos que para um fluxo de ftons ao redor de 25 mmol.m-2.d-1 teremos um valor de 13C em torno de -31. Fixando-se hipoteticamente o valor de 13C do CO2 atmosfrico cerca de 8 podemos calcular o valor da relao pi/pa atravs da equao (41), resultando em um valor igual a 0,77. Para um fluxo de ftons igual a 50 mmol.m-2.d-1, teremos um valor de 13C aproximadamente igual a -27, que resultaria em uma relao pi/pa igual a 0,61 mantendo-se o valor de 13C do CO2 atmosfrico cerca de 8.

59

Dessa forma fica demonstrado que com menor quantidade de luz os estmatos esto mais abertos, fazendo com que a relao pi/pa aumente.

Figura 5.1. Variao dos valores de 13C de espcies coletadas na floresta de Ding Hu Shan na China em funo da quantidade de luz, expressa pelo fluxo de ftons. Adaptado de Ehleringer et al. (1986).

5.2. Variao na fonte de CO2 Existem ocasies em que a variao na composio isotpica das plantas ditada por variaes na fonte do CO2 atmosfrico para as plantas.

60

A Figura 5.2 ilustra uma situao dessas, em que os valores de 13C variaram ao longo de um gradiente devido variaes na composio isotpica do CO2 atmosfrico.

61

Figura 5.2. Variao rio abaixo dos valores de 13C de (A) folhas de espcies arbreas e (B) folhas de gramneas flutuantes coletadas ao longo do rios Solimes e Amazonas. Adaptado por Martinelli et al. (1991).

Na regio do Alto Solimes, portanto, rio acima, o CO2 produzido pela respirao das plantas e matria orgnica do solo que produzido durante a noite, permanece em contato com a vegetao por mais tempo durante a manh, quando as plantas esto fotossintetizando. Assim, as plantas tm uma maior oportunidade de absorver este CO2 empobrecido. Conseqentemente, os seus valores de 13C sero mais leves que os encontrados rio abaixo. Assumindo-se hipoteticamente que a relao pi/pa seja constante para todas as plantas amostradas e igual a 0,6, podemos calcular que o valor do 13C do CO2 atmosfrico atravs da equao (41), que com os valores aplicados se torna igual a:

13CO2 = 13C plantaC 3 19,8 .......................................(5.3)

Prximo marca 0 km o valor de 13C das plantas foi ao redor de -35, substituindo-se esse valor na equao acima, o 13Catm seria igual a -15,2. Por outro lado, cerca de 1800km rio abaixo, o valor de 13C das plantas foi igual a -30, conseqentemente, o valor de 13C do CO2 atmosfrico seria igual a -10,2. Portanto, haveria uma diferena mdia em torno de 5 entre a composio isotpica do CO2 atmosfrico coletado rio acima em relao daquele coletado rio abaixo.

5.3. Variao da fonte de luz e fonte de CO2 simultaneamente Os exemplos mais conhecidos sobre esse tipo de variao simultnea (luz e CO2) so as plantas que crescem ao longo do dossel de florestas tropicais. A Figura 5.3 ilustra esse tipo de variabilidade exibindo os valores de 13C em amostras de folhas coletadas ao longo da copa de florestas situadas na regio amaznica (Ometto et al., 2005).

62

Apesar de existirem duas causas para as variaes dos valores de 13C em plantas do sub-bosque - luz e CO2 advindo da respirao do solo e das plantas (biognico) - alguns trabalhos tm demonstrado que a causa principal da variabilidade observada ao longo da copa a limitao de luz, que faz com que pi/pa aumente, causando um maior fracionamento em relao ao CO2 atmosfrico. Schelser e Jayasekera (1985) estimaram que somente 5% do CO2 fixado pelas plantas adivinha do CO2 biognico. Por outro lado, utilizando um modelo distinto, Sterngerg et al. (1989) estimaram que essa proporo era tambm baixa, ao redor de 7%.

Figura 5.3. Variao dos valores de 13C de folhas de espcies arbreas em funo da altura da copa em diferentes localidades da Amaznia. ZF2 prximo ciade de Manaus; Flona-1 e Flona-2 Floresta Nacional do Tapajs, prximo cidade de Santarm e Rebio prximo cidade de Ji-Paran.

63

As equaes que representam a correlao entre os valores de 13C e altura da copa encontram-se descritas na Tabela 1 (Ometto et al. 2005). Note que a inclinao da reta uma medida de quanto o valor de 13C aumenta para um acrscimo de 1 metro. A floresta localizada em Manaus parece ter o acrscimo mais vigoroso, ou seja 0.24 por metro. Nas outras florestas o acrscimo situou-se entre 0.16 a 0.19 por metro de altura da copa. Tabela 1. Equaes de reta entre a altura do dossel e os valores de 13C dos mesmos locais descritos na Figura 5.3. H denota a altura da copa, r2 o coeficiente de correlao da equao e N o nmero de amostras utilizados nas respectivas equaes. Local
Manaus-ZF2 Santarm-Flona-2 Santarm-Flona-1 Ji-Paran-Rebio Equao r2 0.72** 0.64** 0.75** 0.63** N 137 165 153 48

13C = -35.6 + 0.24*H 13C = -34.8 + 0.19*H 13C = -34.9 + 0.17*H 13C = -34.0 + 0.16*H

Lembrando-se das equaes (4.4) e (4.5), repetidas abaixo como equaes (5.4) e (5.5), notamos que se tivermos os valores de 13C do CO2 da atmosfera podemos calcular os valores de pi/pa (Tab.2).

pi = a + (b a) pa

..............................................................(5.4)

13C planta C 3 = 13CO2 a (b a )

pi pa

...........................................(5.5)

Note que os valores de pi/pa diminuem ao longo do dossel em direo ao topo das rvores, pois, como a incidncia luminosa aumenta, os estmatos permanecem mais tempo fechados, levando a um decrscimo na relao pi/pa.

64

Tabela 2. Concentrao mdia do CO2 atmosfrico, valores de 13C do CO2 e das folhas ao longo do dossel. a diferena entre o 13C do CO2 atmosfrico e da folha e os valores ci/ca foram calculados atravs das (5.4) e (5.5). Altura da copa
(m) 0.5 5 22 42 445.4 376.2 373.3 368.6 -11.9 -8.8 -8.7 -8.5 -36.2 -35.0 -30.3 -24.8 24.5 26.4 21.6 16.1 0.78 0.86 0.67 0.46

CO2-atm
(ppmv)

13CO2 ()

13C-folha ()

()

pi/pa

5.4. Disponibilidade de gua A resposta das plantas ao baixo teor de gua no solo, ocorre pelo fechamento dos estmatos, evitando maiores perdas de gua. Ocorre tambm um decrscimo na fotossntese. Caso esse decrscimo ocorra em um nvel maior que a entrada de CO2 na cmara estomatal, haver um conseqente decrscimo no valor de pi. Por sua vez, a relao pi/pa decrescer, aumentando os valores de 13C da planta. O mesmo raciocnio pode ser aplicado quando a umidade relativa do ar muito baixa. Evitando perder gua, as plantas tendem a fechar seus estmatos, diminuindo a relao pi/pa e conseqentemente aumentando seus valores de 13C. Para exemplificar esses aspectos, mostramos na Figura 5.4. um histograma dos valores de 13C de folhas de espcies coletadas na Floresta Nacional do Tapajs (Flona), situada prxima cidade de Santarm, e de espcies coletadas em uma rea de Cerrado, situada prxima cidade de Braslia. Como sabemos, a disponibilidade de gua para as plantas do Cerrado sensivelmente menor
13

que

as

plantas

da

Flona-Tapajs.

Conseqentemente, os valores de C das plantas do Cerrado so mais elevados que as plantas da Flona-Tapajs (Fig. 5.4). Enquanto que a maioria dos valores de plantas

65

do Cerrado se encontram agrupados entre -29 a -27, a maioria do valores de plantas da Flona-Tapajs se encontram agrupados entre -33 a -31 (Fig. 5.4).

240 220 200 180 Santarm Braslia

Nmero de observaes

160 140 120 100 80 60 40 20 0 -36 -35 -34 -33 -32 -31 -30 -29 -28 -27 -26 -25

13C (o/oo )
Figura 5.4. Distribuio dos valores de 13C de espcies arbreas coletas em uma rea de Cerrado prxima a Braslia e na Floresta Nacional do Tapajs, prxima cidade de Santarm. Fontes: Ometto et al. (no prelo) e Mercedes Bustamante, Universidade de Braslia, dados no publicados.

66

Referncias Bibliogrficas

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67

composition of vegetation in tropical forests of the Amazon Basin, Brazil. Biogeochemistry (no prelo) Sparks JP, Ehleringer JR (1997) Leaf carbon isotope discrimination and nitrogen content for riparian trees along elevational transects. Oecologia 109: 362-267. Sternberg LS, Mulkey SS and Wright SJ (1989) Ecological Interpretation of Leaf Carbon sotope Ratios: Influence of Respired Carbon Dioxide. Ecology 70: 1317-1324. Vitousek PM, Field ChP, Matson PA (1990) Variation in foliar 13C in Hawaiian Metrosideros polymorpha: a case of internal resistance? Oecologia 84: 362-370. Williams DG, Ehleringer JR (1989) Carbon isotope discrimination in three semi-arid woodland species along a monsoon gradient. Oecologia 106: 455-460.

68

Captulo 6 - A Composio Isotpica dos Solos 6.1. Introduo Examinando-se os valores de 13C da matria orgnica do solo (MOS) ao longo de uma transeo realizada no Pantanal na Fazenda Nhumirim da Embrapa (Victoria et al., 1995), nota-se que os valores de 13C da MOS seguiram os valores isotpicos da vegetao presente. Na parte da transeo dominada por gramneas (0 a 350 metros) os valores de 13C da MOS foram prximos aos valores isotpicos das gramneas C4, enquanto que na parte dominada por plantas C3 os valores se tornaram prximos composio isotpica dessas plantas (Fig. 6.1). O fato mais relevante que observamos na Figura 6.1. que: "o solo tende a ter uma composio isotpica similar cobertura vegetal presente".
-14 -16 -18
13 o C ( /oo)

C4

C 4/C 3

C3

-20 -22 -24 -26 -28 -30 0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 Comprimento da transeco (m)

Figura 6.1. Valores de 13C da matria orgnica do solo ao longo de uma transeo com predomnio de gramneas C4, seguido por uma rea de transio com mistura entre plantas C3 e C4 e terminando em uma rea dominada por plantas arbreas que

68

seguem o ciclo fotossinttico C3. Fazenda Nhumirim, EMBRAPA, pantanal matogrossense. Adaptado de Victoria et al. (1995).

Nota-se tambm que existe uma certa variabilidade na composio isotpica desses solos. Provavelmente essa variabilidade seja reflexo da variabilidade existente na composio isotpica da vegetao presente e tambm devido ao fracionamento isotpico envolvido no processo de decomposio do material vegetal no solo. Nas reas florestais, notamos que sempre o 13C da MOS maior que o 13C da vegetao. Esse fato indica que entre a vegetao e o solo ocorre uma perda preferencial de tomos de
12

C. Estudos indicam que durante a decomposio do tecido

vegetal ocorre um enriquecimento em torno de 1 a 2. A Figura 6.2 mostra essa tendncia com dados de um estudo conduzido pelo nosso grupo nas vrzeas da Amaznia, onde entre a vegetao e a serapilheira houve um fracionamento isotpico em torno de 2 e entre a serapilheira e o solo houve um segundo fracionamento tambm de quase 2. Voltando Figura 6.1, notamos que nas reas cobertas por gramneas, os valores de 13C da MOS foram menores que os valores da vegetao. Lembre-se que no caso das florestas ocorreu o oposto, os valores da SOM foram maiores que na vegetao. A explicao mais provvel para esse fato que a vegetao atual, predominantemente composta por gramneas, coexista com arbustos do tipo C3, que contribuem tambm para a formao da matria orgnica do solo. 6.2. Variao dos valores de 13C com a profundidade Uma coletnea de vrios trabalhos mostrou que quando a vegetao predominante do tipo C3 e no h indcios de mudana no tipo de vegetao em tempos remotos, o valor de 13C da MOS sofre um aumento em direo as camadas mais profundas do solo (Fig. 6.3). Geralmente, o aumento nos valores de 13C da MOS cerca de 3 a 4 entre a camada superficial e as camadas mais profundas, como o caso do exemplo que contempla amostras de solo coletadas na regio de Paragominas, no sul do Estado do Par (Fig. 6.3). 69

As provveis explicaes para essa tendncia so as seguintes: 1) Conforme o processo de decomposio prossegue, vai havendo um progressivo acmulo de material enriquecido em
13

C no perfil. Segundo essa hiptese, a

idade da matria orgnica deveria aumentar com a profundidade, fato que freqentemente ocorre. 2) A eluviao da matria orgnica ao longo do perfil do solo contribuiria para o acmulo de material rico em
13

C nas camadas mais profundas. O solo

funcionaria como uma resina trocadora.

Solo

Serapilheira

Folhas

-25

-26

-27

-28

-29
13

-30
o

-31

-32

-33

-34

-35

C ( /oo)

Figura 6.2. Valores de 13C de folhas, serapilheira e matria orgnica do solo coletadas ao longo das reas de vrzea dos rios Solimes e Amazonas. Adaptado por Martinelli et al. (1994).

Nos casos de perfis de solo em que o enriquecimento isotpico com a profundidade maior que 3 a 4, provvel que tenha havido uma mudana no tipo de vegetao durante a pedognese desses perfis. Por exemplo, a substituio de uma floresta, predominantemente do tipo C3, por uma savana, onde as espcies de

70

gramneas estabelecidas tenham sido predominantemente do tipo C4. Esse o caso dos perfis de solos coletados prximos s cidades de Piracicaba e Londrina (Fig. 6.3).

C ( /oo) -28 Profundidade do solo (cm) 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 Piracicaba Londrina Paragominas -26 -24 -22 -20 -18 -16 -14

13

Figura 6.3. Variao dos valores de 13C da matria orgnica do solo sob floresta com a profundidade do perfil em trs localidades distintas. Adaptado por Martinelli et al. (1996).

Por outro lado, em solos onde dominam campos naturais de gramneas do tipo C4, a variao dos valores de 13C com a profundidade do solo distinta em relao s florestas e variam conforme a dinmica da vegetao precedente. Geralmente encontram-se dois tipos de perfis: (1) perfis onde por muito tempo a vegetao dominante vem sendo composta por gramneas (Fig. 6.4) e 2) perfis onde atualmente dominam as gramneas, mas antigamente o domnio era de uma vegetao dominada por plantas C3, ou de uma mistura de plantas C3 e C4 (Fig. 6.5). Na Figura 6.4, nota-se que no perfil do solo sob floresta houve um discreto aumento nos valores de 13C, em torno de 3 a 4, sugerindo que esse stio tem tido 71

 13C (o/oo)
-30 0.0 0.5 Profundidade do solo (m) 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 Amap 3.5 4.0 -28 -26 -24 -22 -20 -18 -16 -14 -12

Figura 6.4. Variao dos valores de 13C da matria orgnica do solo sob floresta (crculo preto) e savana (crculo cinza) em relao profundidade de perfis de solo coletados no Amap. Adaptado de Sanaiotti et al. (2002).

uma cobertura florestal por longo tempo. Por outro lado, no perfil de solo sob savana, nota-se que houve uma diminuio de cerca de 6 entre a camada mais superficial e a mais profunda; sugerindo que a savana predominante em tempos remotos era mais arbustiva (plantas do tipo C3). Progressivamente, houve uma diminuio de plantas do tipo C3, passando essa savana a ter uma dominncia quase total de gramneas do tipo C4. importante notar que as duas curvas no se encontram nem nas camadas mais profundas do solo, fato que difere do perfis de solo encontrados na Figura 6.5, onde nas camadas mais profundas havia uma dominncia de plantas C3 tanto no perfil sob

72

floresta como no perfil sob savana. Com o passar do tempo, o perfil de floresta passou a ser composto exclusivamente por plantas C3, tpicas desse tipo de vegetao e o perfil sob savana foi progressivamente sendo enriquecido com plantas do tipo C4. Finalmente, um outro exemplo da variao dos valores de 13C da matria orgnica do solo com a profundidade pode ser visto na Figura 6.6. Nesta figura mostramos a variao em profundidade da composio isotpica de amostras de solos coletadas no Cerrado, em uma rea situada na reserva do IBGE, prxima cidade de Braslia.

13C (o /oo )
-30 0.0 0.5 Profundidade do solo (m) 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 -28 -26 -24 -22 -20 -18 -16 -14 -12

Humait

Figura 6.5. Variao dos valores de 13C da matria orgnica do solo sob floresta (crculo preto) e savana (crculo cinza) em relao profundidade de um perfil de solo coletado prximo cidade de Humait, no Estado do Amazonas. Adaptado de Sanaiotti et al. (2002).

O Cerrado tem vrias fisionomias que variam em funo da proporo entre gramneas e arbustos, arvoretas e rvores. reas onde as gramneas so quase a totalidade, recebem o nome de campo limpo. A medida que vai aumentando o nmero de espcies no graminosas, as fisionomias vo mudando de campo limpo para campo

73

sujo, cerrado stricto sensu, cerrado denso e, finalmente, cerrado, onde quase no existem gramneas. Na Figura 6.6 mostramos dois perfis, um com amostras de solo coletadas em um campo sujo e outro com amostras coletadas no cerrado denso.
13 o C ( /oo)

-25 0 Profundidade do solo (cm) 100 200 300 400 500 600 700 800 900

-24

-23

-22

-21

-20

-19

-18

-17

Campo sujo

Cerrado denso

Figura 6.6. Variao dos valores de 13C da matria orgnica do solo sob campo sujo e cerrado denso em relao profundidade de um perfil de solo coletado em uma regio de Cerrado situada prxima a Braslia. Mercedes Bustamante, Universidade de Braslia, dados no publicados.

No perfil representando o cerrado denso, houve um aumento dos valores de 13C da MOS com a profundidade, sugerindo que em tempos remotos havia uma mistura maior entre plantas do tipo C3 e C4. Atualmente, como indicado pelas amostras superficiais, h um claro predomnio de plantas do tipo C3. No campo sujo, por outro lado, houve uma mistura entre plantas do tipo C3 e C4 e a proporo de ambos os tipos de plantas parece no variar significativamente com a profundidade (Fig. 6.6). Estes tipos de estudo, que utilizam a composio isotpica do carbono, para aferir mudanas passadas no tipo de vegetao so particularmente importantes em 74

reas

que

tiveram

mudanas

climticas

pretritas

significantes.

Estudos

paleoecolgicos (geomorfolgicos e palinolgicos) demonstraram em duas regies do Brasil a ocorrncia de mudanas climticas importantes no fim do Pleistoceno (10.000 a 13.000 anos) e no meio do Holoceno (5.000 a 6.000 anos). Os estudos palinolgicos foram desenvolvidos com maior intensidade na Amaznia e na regio Centro-Leste do Brasil (Minas Gerais, Salinas e Vale do Rio Doce). 6.3. Os valores de 13C nas fraes granulomtricas do solo At agora analisamos os valores de 13C na MOS como um todo, nesta seo analisaremos a composio isotpica do carbono nas diferentes fraes

granulomtricas do solo. Primeiro observaremos que existem diferenas significativas entre elas, e que essas diferenas podem ser utilizadas para estudarmos a dinmica da matria orgnica do solo. A tendncia geral observada que nas fraes mais grosseiras do solo se acumulam restos vegetais da cobertura vegetal atual, e na frao mais fina se acumula a matria orgnica mais intensamente decomposta, geralmente de origem microbiana (Tab.1). Atravs de datao feita por
14

C demonstrou-se que a frao silte-argila do

solo geralmente a mais antiga. Esse padro de comportamento causa diferenas interessantes entre solos sob diferentes coberturas vegetais.

75

Tabela 1. Variao dos valores de 13C em diferentes fraes granulomtricas do solo. Frao
Vegetao antiga Floresta (-30 () Areia grossa Argila fina -28.2 -24.4 Floresta (-30.5 () Areia grossa Argila fina -28.9 -26.5 Savana (-12.9) Areia grossa Argila fina -12.7 -14.1 Vegetao atual Cana (-12) -18.7 -20.9 Cana (-12) -18.0 -21.0 Vitorello et al. (1989) Referncia Vitorello et al. (1989)

Flor. (-28.3)
-25.3 -15.0

Martin et al. (1990)

Primeiramente,

vamos

analisar

composio

isotpica

das

fraes

granulomtricas de solos cobertos originalmente por florestas (total predomnio de plantas C3). Nas primeiras linhas da Tabela 1 temos uma floresta localizada aqui em Piracicaba, estudada por Vitorello et al. (1989), seguindo-se um estudo feito na Amaznia por Desjardin et al. (1994). Obviamente existem diferenas entre as duas florestas. Contudo, a mesma tendncia pode ser observada em ambas. As fraes mais grossas do solo tiveram valores mais leves de 13C, refletindo a composio isotpica da cobertura vegetal. Nas fraes mais finas observou-se um aumento nos valores de 13C, provavelmente fruto da decomposio da matria orgnica. Analisando-se os valores de 13C de solos cobertos originalmente por plantas C4, estudo de Martin et al. (1990), nota-se uma tendncia muito semelhante, onde a frao grossa reflete basicamente a composio isotpica da vegetao. Agora nos ateremos s mudanas de vegetao. No estudo de Vitorello et al. (1989), havia originalmente uma floresta que foi retirada para a introduo de cana-deacar. Note que interessante, no solo sob cana, as fraes mais grosseiras so as que tiveram maiores valores de 13C, mais uma vez, refletindo na composio isotpica da cobertura vegetal atual. As fraes mais finas conservam ainda parte da cobertura vegetal original (as florestas), misturada ao material originado pela cobertura atual

76

(cana-de-acar). A mesma tendncia pode ser vista no estudo de Desjardin et al. (1994), onde a floresta amaznica foi substituda por uma pastagem. O estudo de Martin et aI. (1990), ilustra uma situao oposta anterior, uma savana natural na Costa do Marfim, sendo invadida por plantas C3, ou seja uma recolonizao pela floresta. Note que nas fraes mais grossas est refletida a vegetao atual, a floresta que dominou toda a rea. Portanto, os valores de 13C so menores. Nas fraes mais finas ainda permanece uma grande proporo de material oriundo das vegetao original, as gramneas C4 da savana. 6.4. Modelo de mistura e suas aplicaes em estudos de solos Como as plantas C3 e C4 tm valores de 13C totalmente distintos, podemos aplicar o modelo de mistura que vimos no Captulo 1 para determinar a contribuio relativa de cada um dos tipos de plantas na composio da matria orgnica dos solos. Estudos desse tipo so interessantes em sistema onde, por exemplo, foi retirada uma floresta e implantada culturas agrcolas com plantas C4, dentre elas: pastagens, canade-acar e milho. Por outro lado, estes estudos so tambm interessantes quando se estuda as relaes savanas-florestas ou campos de florestas naturais, uma vez que savanas e campos naturais tm uma proporo elevada de plantas C4 na sua composio florstica. Primeiramente relembremos nosso modelo de mistura e depois o ilustraremos com alguns exemplos:

13C solo 13C planta C 3 100 ................................(6.1) C4 (%) = 13 C planta C 4 13C planta C 4
Tendo a quantidade de carbono em cada perfil, obtida pela equao abaixo, podemos calcular a massa de carbono proveniente de cada tipo de planta.

77

Ct = z C (%) ....................................................(6.2)
Onde Ct a massa de carbono, z a espessura do perfil, p a densidade do solo e C(%) a porcentagem de carbono contida no solo. Multiplicando Ct por %C4 teremos a massa de carbono no solo oriunda das plantas C4.

Tabela 2. Massa de carbono (Ct) nas respectivas profundidades, contribuio da planta C4 (%C4) e planta C3 (%C3) e massa de carbono oriunda de plantas C4 (Ct-C4) e planta C3 (Ct-C3) em uma pastagem instalada na Amaznia. Fonte: Desjardin et al. (1994).

Prof. (cm) 0 36087

Ct (t/ha) 18.2 11.5

%C4 52 26

%C3 48 74

Ct-C4 (t/ha) 9.5 3

Ct-C3 (t/ha) 8.7 8.5

A Tabela 2 ilustra a quantidade de carbono oriundo de plantas C3 e C4 em uma pastagem na Amaznia que substituiu a floresta primria de terra firme que havia na regio (Desjardin et al., 1994). Na camada mais superficial (0-10cm), a proporo entre plantas C3 e C4 quase a mesma na composio da matria orgnica do solo. Por outro lado, na camada subsuperficial (10-20cm), a matria orgnica remanescente da floresta ainda predomina, com quase 9 toneladas de carbono por hectare contra somente 3 toneladas de carbono por hectare sendo originado pela vegetao introduzida recentemente.

78

Bibliografia recomendada Ambrose SH, Sikes NE (1991) Soil Carbon Isotope Evidence for Holocene Habitat Change in the Kenya Rift Valley. Science 253: 1402-1404. Balesdent J, Wagner GH, Mariotti A (1988) Soil Organic Matter Turnover in Long-Term Field Experiments as Revealed by Carbon-13 Natural Abundance. Soil Sci. Soc. Am. J. 52: 118-124. Balesdent J, Mariotti A Boisgontier D (1990) Effect of tillage on soil organic carbon mineralization estimated from Science 41: 587-596. Camargo PB, Trumbore SE, Martinelli LA, Davidson EA, Nepstad DC, Victoria RL (1999) Soil carbon dynamics in regrowing forest of eastern Amazonia. Global Change Biology 5 (6): 693-702. Desjardins T, Andreux F, Volkoff B, Cerri CC (1994) Organic and
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80

Captulo 7 - Nitrognio - Solo e Plantas 7.1. Introduo As plantas terrestres tm como nica fonte de carbono o CO2 atmosfrico, as plantas aquticas podem tambm se utilizar do carbono dissolvido na gua. Essa fonte nica, ou quase nica, facilitou muito a compreenso dos fatores que determinam as variaes na composio isotpica do carbono estvel nas plantas. Por outro lado, as fontes de nitrognio para as plantas so inmeras. Provavelmente, essa multiciplicidade de fontes se deve ao fato desse elemento ser limitante ao crescimento das plantas. Portanto, durante sua evoluo as plantas criaram diversos mecanismos para se aproveitar de vrias fontes. Assim, as plantas podem receber nitrognio da atmosfera atravs do processo de fixao biolgica ou pela deposio seca e mida desse elemento. Podem tambm se abastecer das vrias formas de nitrognio que existem no solo, inclusive de nitrognio orgnico. A composio isotpica do nitrognio estvel dessas diferentes formas varivel em funo de inmeros parmetros. Dessa forma, a interpretao dos valores de 15N encontrados nas plantas muito mais complexa que dos valores de 13C. Adicionalmente, a determinao da composio isotpica do nitrognio estvel, at cerca de 10-15 anos, era muito mais difcil que a do carbono estvel. Em decorrncia dessas duas dificuldades, somente nos ltimos anos comeamos a entender os fatores que determinam as diferenas entre os valores de 15N encontrados nas plantas. Neste captulo discutiremos primeiramente as causas das variaes na composio isotpica da matria orgnica do solo (MOS). Em seguida discutiremos essas variaes nas plantas superiores terrestres e, finalmente, discutiremos as principais causas destas variaes. 7.2. Valores de 15N da matria orgnica do solo Na grande maioria das vezes determinamos os valores de 15N da matria orgnica do solo e no das formas inorgnicas, tais quais NH4 ou NO3, que so as formas corriqueiramente absorvidas pelas plantas. Esse fato ter conseqncias

81

importantes que ajudaro a explicar as diferenas observadas entre a composio isotpica dos solos e das plantas, como veremos mais adiante. Os valores de 15N da matria orgnica do solo na maioria das vezes decrescem com a profundidade. Essa variao com a profundidade especialmente acentuada em solos tropicais, onde so comuns diferenas de 8 entre os valores de 15N da superfcie em relao s camadas mais profundas do solo (Fig. 7.1).

15 o N ( /oo)

-8 0 10 20
Profundidade do solo (%)

-6

-4

-2

10

12

14

16

30 40 50 60 70 80 90 100 1 9 2 10 3 11 4 12 5 13 6 14 7 15 8 16

Figura 7.1. Variao dos valores de 15N da matria orgnica do solo em perfis de solos tropicais em relao profundidade. Como os perfis tinham profundidades de amostragem distinta, foi transformada em porcentagem em relao camada mais profunda para facilitar a comparao. Perfis 1,2, 6 e 7 - Piccolo et al.(1996); perfis 3 a 5

82

- Bustamante et al. (2004); 8 a 10 - G.B. Nardoto (dados no publicados); perfis 11 e 12 - Silver et al. (2000); perfis 13 a 16 - Telles et al. (2003). As maiores variaes em profundidade ocorrem nas primeiras camadas do solo, abaixo h uma certa constncia nos valores de 15N. Outro ponto importante que os valores de 15N medidos em solos tropicais foram at o momento exclusivamente maiores que 0, nenhum valor negativo foi ainda observado (Fig. 7.1). Os menores valores encontrados foram aqueles oriundos do perfil 16, que se refere a um perfil situado em uma rea de baixo de uma Floresta Ombrfila Densa, prximo a cidade de Manaus (Telles et al., 2003).
N ( /oo)
15 o

-8 0 10 20
Profundidade do solo (%)

-6

-4

-2

10

12

14

16

30 40 50 60 70 80 90 100 17 25 18 26 19 27 20 28 21 29 22 30 23 31 24 32

83

Figura 7.2. Variao dos valores de 15N da matria orgnica do solo em perfis de solos temperados em relao profundidade. Como os perfis tinham profundidades de amostragem distinta, ela foi transformada em porcentagem em relao camada mais profunda para facilitar a comparao. Perfis 17 a 21 - Koopmans et al. (1997); 22 Mariotti et al. (1980); 23 e 24 - Riga et al. (1971); 25 a 29 - Vervaet et al. (2002); 30 a 32 - Brenner et al. (2004). Por outro lado, quando examinamos as variaes em profundidade dos valores de 15N em perfis de solos temperados notamos que, ainda que o padro de variao seja o mesmo, valores menores que aqueles observados em solos tropicais (Fig. 7.2). A diferena entre solos tropicais e temperados fica ainda mais ntida em um histograma (Fig. 7.3). A mdia dos valores de 15N para solos tropicais foi igual a 10.2, sendo o menor valor 3.5 e o maior 21.7. Esse valor mdio estatisticamente maior que a mdia dos valores observada em solos temperados, que igual a 2.0, sendo o menor valor -7.5 e o maior 8.0. Essas diferenas entre solos tropicais e temperados sero discutidas posteriormente. Aqui ser discutida a principal similaridade entre os dois solos - o enriquecimento em
15

N com a profundidade. Os principais motivos para esse

enriquecimento so: (i) constante adio de matria orgnica de plantas nas camadas superficiais do solo. Como veremos adiante, os valores de 15N das plantas so geralmente menores que aqueles encontrados na MOS; (ii) as transformaes de Norgnico para N mineral e mesmo entre molculas inorgnicas de N levam a um enriquecimento do substrato. Ou seja, conforme as reaes de mineralizao, nitrificao, denitrificao e volatizao ocorrem a matria orgnica restante tronandose enriquecida em tomos de
15

N. Na superfcie esse efeito no to sentido porque a

maioria do N est na forma orgnica. No entanto, conforme a profundidade aumenta, aumenta tambm a proporo de formas inorgnicas de N em relao orgnica. Nesse caso, o pool orgnico "sente" mais as reaes de transformao e torna-se isotopicamente mais pesado, ou seja, enriquecido em tomos de 15N.

84

100

80

Nmero de observaes

60

40

20

0 -10 -5

10 15

20 25 -10 -5

10 15

20 25

15 N ( o /oo) - Solos tropicais

15N ( o /o o) - Solos te m pe rados

Figura 7.3. Histograma de freqncia referente aos valores de 15N da matria orgnica do solo determinada em perfis localizados em regies tropicais e regies temperadas. Dentre os solos tropicais, o perfil 16 foi aquele que teve um menor enriquecimento com a profundidade. Provavelmente essa ausncia de enriquecimento seja devida ao fato que a zona de baixio, prxima a um igarap, freqentemente inundada. A alternncia de perodos encharcados e secos dificulta a mineralizao da matria orgnica e, conseqentemente, reaes subseqentes como nitrificao e denitrificao, que tendem a deixar o substrato enriquecido em tomos de h pouco enriquecimento ao longo do perfil do solo.
15

N. Assim,

85

7.3. Valores de 15N de espcies de rvores nativas Como j dito, as causas das variaes na composio isotpica do nitrognio estvel so mais complexas que a composio isotpica do carbono estvel. Neste ltimo caso h uma diferena constante entre plantas que seguem o ciclo fotossinttico C3 e C4. Estas ltimas so relativamente imunes a mudanas ambientais. Por outro lado, a composio isotpica das plantas C3 depende da abertura e fechamento dos estmatos, que por sua vez so dependente de variveis ambientais, tais quais luzes e disponibilidade de gua. Esta interdependncia foi elegantemente capturada em uma equao simples desenvolvida por Farqhar, Osmond and Joe Berry em 1982 e discutida no Captulo 4. Outro fator importante que a principal fonte de carbono para as plantas terrestres o CO2 atmosfrico e em raras ocasies, o carbono se torna um elemento limitante para o crescimento das plantas. Pelo contrrio, o nitrognio, juntamente com o fsforo, so os principais elementos limitantes. Assim, as plantas desenvolveram vrios mecanismos a fim de utilizarem diferentes formas de nitrognio, bem como de explorarem diferentes fontes deste elemento. Como as principais fontes de nitrognio se encontram no solo, seria til uma breve reviso das formas de N e tambm sobre as transformaes desse elemento nesse meio. Essas transformaes so na verdade uma seqncia de reaes de oxireduo que envolvem fracionamentos isotpicos variveis e, geralmente, elevados. A maior parte do nitrognio do solo se encontra na forma orgnica, ligado matria orgnica. Quando da produo de NH4 atravs da mineralizao da matria orgnica aceito que no h um fracionamento isotpico significativo. Portanto, se uma planta absorver o NH4 que foi recentemente criado, sua composio isotpica ser similar da composio isotpica da matria orgnica do solo. No entanto, na maioria das vezes esse no o caso, pois o NH4 pode ser rapidamente transformado em NH3 e volatilizado sob condies de pH elevado, ou pode ser rapidamente transformado em nitrato (processo de nitrificao) em condies de anaerobiose. No primeiro processo, volatilizao, Hgberg (1997) atribuiu como valor mdio para o fracionamento envolvido nesse processo algo em torno de 29. No processo de nitrificao o fracionamento

86

isotpico tambm considerado elevado, geralmente variando de 15 a 35 (Hgberg, 1997). Vale lembrar que em ambos processos o NH4 restante se tornar enriquecido em tomos de
15

N. Portanto, sua composio isotpica no ser mais similar

composio isotpica da matria orgnica do solo. Como as plantas absorvem do solo principalmente as formas inorgnicas NH4 e NO3, a composio isotpica das plantas ser uma funo da composio isotpica dessas formas inorgnicas e tambm da disponibilidade dessas duas fontes. Portanto, uma mesma espcie de planta pode ter composies isotpicas distintas em funo da disponibilidade das formas inorgnicas de nitrognio e de sua composio isotpica. Como vimos anteriormente neste captulo, a composio isotpica do nitrognio estvel do solo varia com a profundidade, assim sendo, plantas explorando o mesmo solo, mas com diferentes profundidades de razes tero tambm composies isotpicas distintas. Certos tipos de plantas, principalmente membros das famlias das leguminosas, so capazes de fixar nitrognio atmosfrico atravs de um processo simbitico com bactrias do gnero Rhizobium. Essas bactrias transformam o N2 inerte da atmosfera em uma molcula de NH3 disponvel para a planta hospedeira. Assim, estas plantas, alm do solo, tem tambm na atmosfera uma fonte de N alternativa. Da mesma forma, existem plantas que estabelecem associaes com micorrizas do solo. Embora a fonte seja o solo, o nitrognio ao ser absorvido pela micorriza e distribudo para as plantas sofre fracionamentos elevados. Logo, o estabelecimento de associaes entre plantas e micorrizas contribuem tambm para alterar a composio isotpica das plantas.. Vale lembrar que associaes com micorrizas so comuns em solos deficientes em fsforo, como a maioria dos solos tropicais. Conseqentemente, em nosso pas, onde abundam solos tropicais, essas associaes so freqentes.

87

500 450 400 Nmero de observaes 350 300 250 200 150 100 50 0 -8 -6 -4 -2 0 2 4 6 8 10

1 5 N ( o /o o )
Figura 7.4. Histograma de freqncia dos valores de 15N de folhas de rvores e arbustos de formaes florestais (barras cinza claras) e savanas (barras pretas) brasileiras. Para se ter uma idia da variao existente nos valores de 15N de folhas de rvores de diversos tipos de vegetao brasileira, agrupamos cerca de 3.400 dados analisados pelo nosso laboratrio de espectrometria de massas. A mdia de todos esses valores foi 3.6, sendo o menor valor observado igual a -15.1 e o maior 12.3. Portanto, houve uma variao de aproximadamente 27 entre esses dois extremos. Para facilitar a visualizao no inclumos esses valores extremos no histrograma mostrado na Figura 4, somente inclumos aqueles valores que ocorreram com maior freqncia. Nota-se claramente dois picos distintos no histograma, um correspondente a valores ao redor de -2 a 0 e o segundo ao redor de valores entre 5 88

a 7. Os menores valores foram comuns em plantas das savanas brasileiras, enquanto os maiores valores foram mais freqentes nas florestas brasileiras. O valor mdio para as savanas foi de -0.3, enquanto para as florestas o valor mdio foi igual a 5.2. Estes valores so estatisticamente distintos e sero discutidos mais adiante. Posteriormente nessa primeira anlise reagrupamos os dados referentes s florestas distintas formaes. Assim, as florestas Amaznicas foram divididas em florestas de terra firme, florestas de baixio, florestas de vrzea e campinarana (Tab. 1). As florestas de terra firme, como o prprio nome diz no so inundadas; as florestas de baixio ocupam os locais mais baixos dos terrenos e so periodicamente inundarias por igaraps; as florestas de vrzea so aquelas periodicamente inundadas pelos grandes rios de gua-branca da Amaznia. Finalmente, campinarana um tipo de vegetao arbrea assentada sob solos arenosos e bastante infrteis. As formaes florestais situadas no Estado de So Paulo pertencem ao domnio da Mata Atlntica. As formaes florestais situadas prximas ao oceano so genericamente classificadas pelo IBGE como Floresta Ombrfila Densa e as do interior do Estado como Floresta Ombrfila Estacional Semidecdua. Ainda que os valores de 15N das formaes florestais foram sempre mais elevados que os valores das savanas, nota-se que houve uma variabilidade acentuada entre os valores de 15N das formaes florestais (Tab. 1). Os maiores valores mdios foram observados nas florestas de terra firme da Amaznia, seguindo-se a Floresta Ombrfila Estacional localizada no Parque Estadual do Morro do Diabo no interior de So Paulo. As florestas de vrzea e os valores da Mata Atlntica costeira (Parque Estadual de Intervales, SP) tiveram valores mdios praticamente iguais e ambos foram quase o dobro do valor mdio da campinarana, que por sua vez foi significativamente mais elevado que a floresta de baixio, prxima a Manaus (Tab. 1). As causas dessas diferenas sero discutidas no prximo item.

89

Tabela 1. Valores mdios de 15N de folhas de rvores acompanhados dos desviospadro, valores mnimos e mximos e nmeros de dados de diversos tipos de vegetao do Brasil. Vegetao Terra Firme M.Atl.Estac. Vrzea M.Atl.Densa Campinarana Baixio Savana Mdia 5.89 3.93 3.15 3.13 1.43 0.36 -0.29 Desviopadro 1.91 1.62 1.77 1.73 1.76 1.23 2.29 Mnimo -2.04 -1.29 -1.07 -0.63 -2.05 -2.59 -15.1 Mximo 12.33 8.60 7.29 7.57 5.66 3.70 8.40 Nmero de dados 1959 105 69 118 113 95 959

7.4. Causas da variabilidade dos valores de 15N em plantas Diferentemente do carbono, onde uma planta que segue o ciclo fotossinttico C3 ou C4 ter uma composio isotpica do carbono estvel relativamente constante, a variabilidade da composio isotpica do nitrognio estvel muito maior e no h um padro a seguir. Pois, as variveis que determinam a composio isotpica do nitrognio so tantas que fica difcil prev-las de antemo. Um exemplo pode ser visto em plantas coletadas em diferentes fisionomias do Cerrado, na reserva do IBGE, prxima cidade de Braslia, no Planalto Central brasileiro (Bustamante et al., 2004). Uma mesma espcie pode ter valores de 15N distintos em funo de seu habitat. Algumas espcies, como E. pubescens tiveram diferenas de 4 a 5 em indivduos distantes algumas centenas de metros um do outro (Fig. 7.5). Devido complexidade que envolve a composio isotpica do nitrognio estvel nas plantas terrestres, muito difcil interpretar qual o significado ecolgico desses valores sem informaes adicionais sobre o sistema que se estuda. Assim sendo, todas informaes referentes ao ciclo do nitrognio do ecossistema em questo

90

e detalhes sobre a nutrio das plantas que vivem no local so de extrema valia (Hogberg, 1997). Em certos casos, existem padres relativamente constantes entre plantas que nos permitem fazer algumas inferncias sobre a dinmica do nitrognio baseando-se na composio isotpica das plantas. Ou, por outro lado, determinar a fonte de nitrognio vigente para um determinado tipo de planta. Este ltimo caso ilustrado pela diferena entre a composio isotpica de plantas que retiram nitrognio exclusivamente do solo e plantas da famlia das Leguminosas, que em certas condies, podem retirar nitrognio do ar para seu sustento.

cerrado

cerrado

cerrado

cerrado

c.sujo

c.sujo -2.5 -2.0 -1.5 -1.0 -0.5

15 o

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

N ( /oo)

Figura 7.5. Valores de 15N de Eriotheca pubescens que habitam diferentes fisionomias do Cerrado localizado na Reserva do IBGE, prximo cidade de Braslia, no Planalto Central brasileiro. Fonte: Bustamante et al. (2004).

91

7.4.1. Fixao de nitrognio atmosfrico por plantas da famlia das Leguminosas Alguns gneros de Leguminosas tm a capacidade de formar uma simbiose com bactrias do gnero Rhizobium, que so organismos fixadores de nitrognio atmosfrico. Ou seja, retiram N2 inerte da atmosfera e o transforma em NH3, que se torna disponvel para a planta hospedeira. Como a maioria dos valores de 15N do solo so positivos e os valores de 15N do ar atmosfrico so prximos a zero, uma vez que o ar atmosfrico o padro, as plantas que fixam nitrognio da atmosfera tendem a ter valores de 15N variando entre zero e o valor isotpico do solo em que esto vivendo. A presena ou no de fixao somente pode ser feita de forma comparativa, ou seja, se comparando uma planta supostamente fixadora com outra no fixadora que explorem o mesmo reservatrio de nitrognio e tenham formas de vida similares. Alguns exemplos so vistos na Tabela 2. Na floresta de terra firme localizada no plateau de uma vertente, a mdia das plantas no leguminosas foi de 4.2 e de duas Fabaceas - S.tomentifera e A.micrantha - foi de 0 e 0.6, respectivamente. Por conseguinte, neste caso, poderamos afirmar que S.tomentifera e A.micrantha estariam fixando N da atmosfera. Por outro lado, B.elegans, outra Fabaceae, por ter um valor de 15N prximo mdia das plantas no leguminosas, no estaria fixando N da atmosfera. No Cerrado de Braslia, a mesma espcie, D. miscolobium teve distintos valores de 15N. Quando comparamos os valores de 15N dessa plantas com a mdia dos valores de plantas no leguminosas, nota-se que no houve uma diferena significativa entre elas. Tambm importante mencionar que o desvio padro do valor mdio de 15N das no-leguminosas do Cerrado foi de 2.4. Portanto, a variabilidade dentro das no-leguminosas foi suficientemente elevada para no permitir uma comparao segura entre leguminosas e no-leguminosas. Na campinarana e na floresta de baixio a mesma dificuldade foi observada. Ou seja, o valor mdio das plantas no leguminosas muito prximo a zero e a variabilidade tambm acentuada. Assim sendo, atmosfrico nestas florestas. torna-se difcil constatar a presena de fixao de N

92

Tabela 2. Valores de 15N de espcies de plantas pertencentes subfamlias das Leguminosas coletadas em diferentes formaes vegetais. Espcies do cerrado Bustamante et al. (2004). 15N ()
0.0 0.6 4.1 4.2 -0.7 -1.0 -2.1 0.6 -1.9 0.0 -0.2 0.7 -2.2 -0.5 0.3 0.5

Famlia
Fabaceae Fabaceae Mimosaceae No-leguminosas Minosaceae Fabaceae Fabaceae No-leguminosas Fabaceae Fabaceae Fabaceae No-leguminosas Fabaceae Fabaceae Fabaceae No-leguminosas

Espcie Swartzia tomentifera Andira unifoliolata Balizia elegans

Local Manaus Manaus Manaus Manaus

Vegetao plateau plateau plateau plateau baixio baixio baixio baixio campinarana campinarana campinarana campinarana cerrado cerrado cerrado cerrado

Parkia pamurensis Platymiscium duckei Macherium multifoliolatum

Manaus Manaus Manaus Manaus

Hymenolobium sericeum Swartzia tomentifera Andira unifoliolata

Manaus Manaus Manaus Manaus

Dalbergia miscolobium Dalbergia miscolobium Dalbergia miscolobium

Braslia Braslia Braslia Braslia

7.4.2. Ciclo aberto x ciclo fechado de nitrognio - diferenas isotpicas Vrios trabalhos tm demonstrado que ecossistemas com menores limitaes de nutrientes, especialmente de nitrognio, tendem a ter valores mais elevados de 15N tanto no solo como nas plantas.

93

A razo para tal fato que sistemas menos limitados geralmente tm uma ciclagem mais aberta de nitrognio. Em outras palavras, as perdas de nitrognio so relativamente elevadas em funo dos estoques deste nutriente. Logo, processos como mineralizao, nitrificao e perdas por lixiviao e emisso de gases so maiores em sistemas com ciclagens mais abertas. Geralmente, nesses sistemas as concentraes foliares de N so maiores, a serapilheira enriquecida em N e a queda de folhas relativamente alta. As relaes C:N do solo e das plantas tambm costumam ser menores nesses sistemas mais ricos em N. Como as perdas de N so grandes, e os processos que produzem nitrognio disponvel para estas perdas so isotopicamente fracionantes, com o substrato ficando enriquecido em tomos de
15

N, o nitrognio que deixa o sistema na sua maioria

empobrecido em tomos de 15N. Ao longo do tempo, tomos de 15N vo se acumulando nestes sistemas perdedores de nitrognio, como conseqncia, seus valores de 15N vo se tornando mais elevados. De maneira oposta, sistemas significativamente limitados por N tendem a segurar este nutriente no sistema, portanto, as perdas so menores e, conseqentemente, o fracionamento isotpico tambm menor. Confirmando a hiptese acima, valores de 15N de solos e plantas de florestas tropicais (ricas em N) foram significativamente mais elevados que em florestas temperadas (pobres em N) (Martinelli et al., 1979). Um exemplo claro dessa diferena pode ser observada nas Figuras 7.1 e 7.2, onde se nota claramente que os valores de 15N da matria orgnica do solo mais elevada na grande maioria dos perfis de solos oriundos de regies tropicais, quando comparados a valores de perfis oriundos de regies temperadas.. Da mesma forma, os valores de 15N de plantas que habitam sistemas ricos em nitrognio so mais elevados em relao a plantas que habitam sistemas limitados (Tab. 3). Essa comparao pode ser feita dentre os diferentes tipos de vegetaes tropical e subtropical ou entre estes tipos e as vegetaes temperadas.

94

Tabela 3. Valores mdios de 15N () de vrios tipos de vegetaes tropicais, subtropicais e temperadas.
Vegetao Terrafirme M.Atl. Estac. Vrzea M.Atl. Densa Campinarana Baixio Savana Tundra Tundra Tundra Temperada Heath Temperada Heath Pas Brasil Brasil Brasil Brasil Brasil Brasil Brasil Sucia Sibria Alasca Alasca Sucia Alemanha Groelndia Mdia 5.89 3.93 3.15 3.13 1.43 0.36 -0.29 -1.70 -2.63 -2.91 -3.10 -3.58 -4.00 -5.00 Referncia Ometto et al. (2005) Silva (2005) Nardoto et al. (200x) Silva (2005) Nardoto et al. (200x) Nardoto et al. (200x) Bustamante et al. (2004) Michelsen et al. (1998) Nadelhoffer et al. (1996) Nadelhoffer et al. (1996) Hobbie et al. (2000) Michelsen et al. (1998) Gebauer & Schulze (1991) Michelsen et al. (1998

No primeiro caso, nota-se que h uma diferena acentuada entre as florestas de terra firme e as florestas parcialmente inundadas de baixio, campinarana e savanas tropicais (Cerrado). O Cerrado significativamente limitado por nitrognio devido ao perodo de seca prolongado e incidncia de fogo. Conseqentemente, as taxas de nitrificao e denitrificao so baixas, numa tentativa do sistema de perder uma quantidade mnima de N. Da mesma forma, grande quantidade de nitrognio retranslocada antes das perdas das folhas, gerando uma serapilheira extremamente pobre em N. Conseqentemente, no ocorrem grandes fracionamentos e, portanto, no ocorrem perdas acentuadas de tomos de 14N. As florestas de baixio, localizada nas reas mais baixas do terreno, ao longo das margens dos igaraps, so tambm sistemas limitados por N em relao s florestas de terra-firme que se encontram nas reas mais elevadas das vertentes. 95

Nesse caso a limitao causada pelo excesso de gua, atravs das inundaes peridicas dos igaraps. Essa alternncia de inundao reduz as taxas de mineralizao e nitrificao, levando falta de N no sistema. Alm disso, h predominncia de solos arenosos nos baixios, que facilita a lixiviao de nutrientes. As campinaranas geralmente esto tambm localizadas sob solos arenosos, no to arenosos quanto os solos de baixios, mas suficientemente arenosos para facilitar a lixiviao de nutrientes. Devido esse fato so tambm sistemas limitados em N, no tanto quanto os baixios, mas certamente mais que as florestas de terra-firme localizadas nos plats. Como conseqncia, os valores de 15N das plantas da campinarana so intermedirios entre as florestas de baixio e as florestas situadas nos plats. As florestas temperadas so consideradas ainda mais limitadas em nitrognio que as formaes florestais tropicais. Como conseqncia, os valores de 15N desses tipos de florestas so significativamente menores que aqueles encontrados em florestas tropicais. Note que h uma diferena de praticamente 10 entre os valores mdios encontrados na florestas de terra-firme na Amaznia e aqueles encontrados na Groelndia, em um tipo de vegetao denominado "heath". interessante notar que mesmo dentre as florestas de terra-firme da Amaznia existem diferenas nos valores de 15N das folhas deste tipo de vegetao. Nardoto (2005) mostrou que existe uma relao direta entre a durao da estao seca e os valores de 15N de folhas de florestas de terra-firme na Amaznia. Assim, quanto maior a durao da estao seca, maior os valores de 15N (Fig. 7.6) . A provvel explicao para essa relao seria que o excesso de gua limitaria os processos de mineralizao e nitrificao, que tornam o nitrognio disponvel para as plantas. Alm disso, o excesso de chuvas facilitaria as perdas de nitrognio por lixiviao.

96

7 6 5

N ( /oo )

o 15

4 3 2 1 0 S.G.Cachoeira Manaus Santarm

Figura 7.6. Valores mdios de 15N (quadrados), erros-padro das mdias (retngulo) e desvios-padro das mdias (barras) de folhas de florestas de terra-firme da Amaznia. Perodo seco foi definido como meses que tiveram menos que 100 mm de precipitao. So Gabriel da Cachoeira (2 meses de seca); Manaus (3 meses de seca) e Santarm (5 meses de seca). Adaptado de Nardoto et al. (2005). Outro exemplo interessante se refere ao estabelecimento de florestas secundrias aps a ocorrncia da retirada da vegetao original. Michela Figueira (dados no publicados) determinou os valores de 15N de folhas de rvores em florestas secundrias de diferentes idades em uma regio situada no nordeste do Estado do Par (Fig. 7.7). Os resultados referentes as florestas secundrias foram comparados aos resultados oriundos de uma floresta primria que foi utilizada como

97

referncia para este estudo. Nota-se que conforme a idade da floresta secundria aumenta, os valores de 15N tornam-se mais elevado (Fig. 7.7)

2.5 2.0

N ( / oo )

1.5 1.0 0.5 0.0 -0.5 6 anos 20 anos 40 anos madura

15

Figura 7. Valores mdios de 15N em folhas de plantas das famlias oriundas de florestas secundrias de 6, 20 e 40 anos de idade e da floresta primria. Adaptado de Michela Figueira (dados no publicados). A explicao para esse fato seria que nos primeiros anos de sucesso, a vegetao presente seria mais limitada por nitrognio, conseqentemente, as perdas de nitrognio seriam menores e os valores de 15N tambm menores por razes j mencionadas. Neste comeo de sucesso bem provvel que as leguminosas estariam ativamente fixando nitrognio do ar atmosfrico para compensar a falta deste nutriente. No entanto, como j visto anteriormente, no possvel se verificar essa informao baseando-se nos valores de 15N. Pois, os valores de 15N das no-leguminosas na floresta secundria de 6 anos foram menores que os valores isotpicos das prprias leguminosas.

98

Com o avanar da idade as florestas secundrias vo se tornando menos limitadas por nitrognio, gerando maiores perdas desse nutriente e, conseqentemente, um enriquecimento em tomos de
15

N. Corroborando com esta hiptese h o fato que

as perdas de N via denitrificao aumentam das menores para as maiores idades. Adicionalmente, a serapilheira se torna progressivamente mais rica em nitrognio com o aumento das idades das florestas secundrias, assim como a concentrao de nitrognio nas folhas. De uma maneira geral, se conclu que qualquer evento ou processo que leve h um aumento ou diminuio na disponibilidade de nitrognio em um determinado sistema, o levar a alterar a composio isotpica do nitrognio. Os diversos mecanismos pelo qual essa mudana acontece ainda no conhecidos em detalhe. Pois, como dito anteriormente, nosso conhecimento sobre a composio isotpica do nitrognio ainda bem menor que nosso conhecimento sobre a composio isotpica do carbono.

99

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15

N natural

101

Captulo 8: A Composio Isotpica do Carbono no Hidrosfera 8.1. Introduo

Na hidrosfera (oceanos, rios, lagos e gua subterrnea) existem vrias formas de carbono, as principais so o carbono inorgnico dissolvido (DIC), o carbono orgnico dissolvido (DOC), o carbono orgnico particulado (POC), sedimentos e os produtores primrios que incluem os fitoplnctons, perifiton e plantas superiores submersas. Vamos primeiro abordar os oceanos e suas vrias formas de carbono, posteriormente rios e lagos, e finalmente a interface entre o sistema aqutico e terrestre, que so as zonas costeiras tais como esturios, mangues, banhados e etc.

8.2. Oceano 8.2.1. Carbono Inorgnico Dissolvido (DIC) O oceano um grande reservatrio de carbono, a maior parte dele se encontrase em uma forma dissolvida, seja como HCO3 ou CO2. O estudo mais abrangente sobre a composio isotpica das formas inorgnicas dissolvidas nos oceanos foi feita por Kroopnick (1985). Foram analisadas mais de 2252 amostras de gua dos cinco oceanos. A forma analisada foi o CO2 dissolvido. Segundo Kroopnick (1985) a composio isotpica dessa espcie determinada pela reao de equilbrio com outras espcies carbonatadas dissolvidas (e.g. reao de equilbrio entre HCO3 e CO2); reao de equilbrio entre CaCO3 e o CO2 e reao de equilbrio com a matria orgnica presente. Alm desses fatores as variaes verticais e horizontais das massas de gua contribuem para homogeneizao desses fenmenos, sendo que a importncia relativa de todos esses parmetros ser varivel em funo da localizao geogrfica. No entanto, de uma maneira geral, como predominam as reaes com o carbonato de clcio (13C = 0 a 2), geralmente o valor do 13C-CO2 prximo a esse valor. Na figura abaixo podemos ver a variao nos valores de 13C-CO2 na regio oeste do Atlntico, a qual envolve a costa leste americana e o litoral brasileiro.

102

Observa-se na figura acima que existe uma certa variabilidade nos valores de 13C-CO2 em funo da profundidade (Fig. 8.1). A Figura 8.2 mostra um tpico perfil encontrado na regio norte do Oceano Pacfico (Kroopnick, 1985).

Figura 8.1. Variao dos valores de 13C do CO2 dissolvido no oceano em relao profundidade e latitude. Adaptado por Kroopnick (1985).

A concentrao mnima de oxignio observada a grosso modo 1000 m de profundidade devido ao consumo desse elemento na decomposio da matria orgnica produzida na superfcie. Nesse ponto a concentrao de CO2 mxima, uma vez que o produto final desse processo oxidativo o CO2. Por sua vez, seus valores de 13C decrescem, uma vez que est sendo oxidada uma matria orgnica com valores de 13C em torno de -21.

103

Figura 8.2. Variao dos valores de 13C, concentrao de oxignio dissolvido e fsforo em relao profundidade do oceano. Adaptado de Kroopnick (1985).

8.2.1. Fitoplncton

As outras formas de carbono encontradas no oceano, ou seja, POC e DOC so dependentes da composio isotpica do fitoplncton. Portanto, seria til se antes de discutirmos a composio isotpica dessas outras espcies de carbono, discutssemos a composio isotpica desses organismos. Como sabemos esses organismos so fotossintetizadores, portanto, fixam carbono do meio em que vivem. Farquhar et al. (1989) propuseram o seguinte modelo para explicar a composio isotpica encontrada em fitoplnctons.

104

 13C fitoplancton = 13Cdissolvido aL (b aL )

pc pa

...................................(8.1)

Onde, 13Cdissolvido a composio isotpica da fonte de carbono dissolvido na gua; aL representa a difuso do CO2 na gua (0.7) e b refere-se fixao do CO2 em uma forma orgnica. Como j vimos b aproximadamente igual 30. Portanto, substituindo-se esses valores na equao (2) teremos:

13C fitoplancton = 13Cdissolvido 0,7 (29,3)

pc pa

.......................................(8.2)

Podemos novamente assumir valores extremos (zero e 1) para a relao pc/pa e deduzir o possvel valor do fitoplncton. Quando pc/pa tender a 1, teremos que:

13C fitoplancton = 13Cdissolvido 30,0 ...............................................................(8.3)

Portanto, os valores do fitoplncton sero relativamente mais negativos. Quando igualamos pc/pa igual a zero, teremos que:

13C fitoplancton = 13Cdissolvido 0,7 .................................................................(8.4)

Nesse caso, os valores do fitoplncton sero relativamente mais positivos. Vrios autores estudaram a composio isotpica de fitoplnctons marinhos, os resultados variaram entre -18 a -24, com uma mdia em torno de -21. Vrias relaes tais como espcie, temperatura, massa de gua, foram colocadas como responsveis pela composio isotpica de fitoplncton. Hoje em dia existe uma tendncia em se acreditar que a varivel mais importante a disponibilidade de CO2 105

dissolvido para as clulas. Fato que est perfeitamente de acordo com o modelo proposto por Farqhuar et al. (1989). Essa relao entre disponibilidade de CO2 e composio isotpica do fitoplncton foi elegantemente mostrada por Raul et al. (1989) (Fig. 8.3). medida que a solubilidade do CO2 aumenta os valores de 13C do fitoplncton tornam-se menores. Esse fenmeno especialmente acentuado em altas latitudes, como nas regies polares. Por esse motivo, os primeiros pesquisadores que encontraram valores extremamente negativos nas regies polares atriburam esses valores temperatura. Na verdade o efeito da temperatura indireto, uma vez que interfere na solubilidade do CO2 dissolvido. 8.2.3. Carbono Orgnico Dissolvido (DOC) e Particulado (POC)

A origem dessas duas fraes parece ser comum: produo primria e material de origem terrestre. No entanto, sua composio qumica distinta, bem como seu tempo de residncia sensivelmente distinto. Na verdade no existem muitas medidas sobre esses dois componentes. No caso do POC difcil fazer uma distino clara entre uma coleta pura de fitoplncton vivo e uma coleta de POC que envolve fitoplncton morto e vivo e debris de vrias origens. Assim sendo, em mar aberto, os valores de POC so muito parecidos isotopicamente com os valores do fitoplncton (-18 a -24) com uma mdia geral de -21. E interessante notar, entretanto, que o os valores de 13C do POC em regies polares foram ao redor de -26 a -28, refletindo os valores do fitoplncton nessas regies mais frias, que como vimos so mais negativos que em regies mais quentes.

106

Figura 8.2. Variao dos valores de 13C de amostras de fitoplncton e da concentrao de CO2 dissolvido em funo da temperatura do superfcie da gua do mar. Adaptado de Rau et al. (1989). Valores de 13C para o DOC so mais restritos ainda, Deines (1980) cita uma variao entre -20 a -23, sendo que o valor mais freqente seria -23. Portanto, em mdia o valor de DOC seria ligeiramente mais negativo que o valor mdio do fitoplncton. Essa diferena geralmente atribuda a fracionamento que ocorrem na formao desses compostos. Por outro lado, analisando-se 26 amostras do golfo do Mxico, mar do Caribe e Atlntico, Edie et al. (1978) encontrou um valor mdio igual a 22.30.9, sendo o menor valor igual a -24.2 e o maior valor igual a -19.6. Portanto, ainda que esses valores sejam mais pesados que -23, so ainda mais leves que -21, mdia encontrada para os fitoplnctons.

107

8.2.4. Sedimentos marinhos

O sedimento marinho, como os solos, parece refletir a composio isotpica de sua fonte de carbono. No caso dos oceanos a principal fonte o fitoplncton, nas reas costeiras alm do fitoplncton, h a influncia do material terrestre que erodido e chega ao oceano principalmente pelos rios. Deines (1980) fez uma compilao de dados existentes sobre a composio isotpica do sedimento marinho. Podemos observar por essa figura que existe uma distribuio bimodal, uma moda com valores mais pesados entre -10 a -19 e outra entre -20 a -30, sendo que os valores mais freqentes nessa moda mais leve esto entre -23 a -25. Os valores mais pesados foram provenientes de regies costeiras e refletem a composio isotpica de plantas e organismos que vivem na rea. O autor discute que entre a moda mais leve, a composio isotpica parece ser realmente uma funo da fonte de carbono. Os autores isolaram as amostras com influncia terrestre mnima, em preto na figura, e notaram que os valores mais leves tiveram procedncia em amostras coletadas em regies mais frias, onde a composio isotpica do fitoplncton mais leve. Pelo contrrio, as amostras mais pesadas tiveram origem principalmente no golfo do Mxico, uma regio mais quente, onde os valores de 13C do fitoplncton so mais pesados.

108

Figura 8.4. Distribuio de freqncia de valores de 13C de amostras de sedimentos marinhos. Adaptado por Deines (1980).

109

8.3. Rios e lagos 8.3.1. Dissolved Inorganic Carbon (DIC)

Segundo Mckenzie (1985), a composio isotpica do DIC em um lago controlada por trs fatores: 1) a composio isotpica das fontes de carbono; 2) trocas de CO2 com a atmosfera e 3) fotossntese e respirao. Segundo a mesma autora o principal fator o balano entre fotossntese e respirao.

Figura 8.5. Variao dos valores de 13C do carbono inorgnico dissolvido em amostras de guas coletadas no lago Washington, Seattle, Estados Unidos. Adaptado por Quay et al. (1989).

110

Para exemplificarmos examinaremos a variao do 13DIC no lago Washington, localizado em Seattle, nos Estados Unidos. Nos meses de inverno no h uma variao dos valores de 13DIC com a profundidade. Nos meses de vero h uma mudana radical nesse comportamento. Na regio euftica, onde ocorre a fotossntese, os fitoplnctons esto fixando preferencialmente 12C, portanto, restar na gua em soluo uma maior quantidade relativa de 13C, tornando os valores de 13DIC mais pesados em relao ao inverno. Em agosto, no vero o mximo valor de 13DIC encontrado foi 4.5. Aproximadamente a partir de 10 a 15 m os valores de 13DIC tornam-se menores em relao aos valores de inverno mesma profundidade (Fig. 8.5). observado decrscimo nos valores de 13DIC deve-se a decomposio da matria orgnica produzida na zona euftica. Como sabemos os fitoplnctons so isotopicamente leves, portanto, a decomposio dessa massa produzira um CO2 tambm mais leve que ir se misturar com o CO2 remanescente do inverno. Nos rios a histria mais ou menos a mesma, ou seja, ocorre uma mistura de DIC originado da decomposio de carbonatos (13C = 0) com DIC gerado biogenicamente. No existem muitos dados a respeito da composio isotpica do DIC em rios. Provavelmente a maior coleo de dados foi feita pelo projeto CAMREX. Nesse projeto foram amostrados o rio Amazonas e seus principais tributrios em vrias pocas do ano. Para efeito de comparao ns dividimos as amostras oriundas do rio Amazonas coletadas durante a descida e a subida das guas, e as amostras dos tributrios em amostras vindas de tributrios de guas brancas e guas pretas. Tabela 1. Valores mdios de 13C do carbono inorgnico dissolvido de alguns rios da Amaznia. RIOS E TRIBUTRIOS Rio Amazonas subida das guas Rio Amazonas descida das guas Tributrios guas brancas Tributrios guas pretas 13DIC () -13.2 -15 -17.3 -23.4 111

Parece que a composio isotpica do DIC reflete o grau de mistura entre o carbono biognico e o mineral. No rio Amazonas, nascido nos Andes, portanto com um razovel aporte de DIC mineral observamos os valores mais pesados de 13DIC, na subida das guas o valor mdio foi igual a -13.2 1.3 (n = 44). Por outro lado, na descida das guas, os valores foram significativamente mais negativos (-15.0 1.4, n = 33), provavelmente devido drenagem da gua dos lagos de vrzea que devem ter valores de 13DIC mais negativos. Os tributrios de gua-branca, que nascem nas regies andinas e subandinas, tambm carregam uma quantidade razovel de DIC de origem mineral, no entanto, esses tributrios proporcionalmente drenam uma maior rea de terras-baixas (florestas). Essa condio refletida nos valores de 13DIC, nesses tributrios o valor mdio foi igual a -17.3 2.7 (n = 33). A mxima influncia do material biognico no DIC pode ser visto nos tributrios de gua-preta que drenam exclusivamente terras-baixas, tendo pouco quantidade de DIC de origem mineral, sendo a maioria de origem biognica. Nesses rios (Jutai e Negro) a mdia foi igual a -23.4 2.6 (n = 14). Uma outra forma de visualizarmos a mistura entre carbono biognico e carbono mineral refletido no DIC, observarmos a Figura 8.6, a qual ilustra a variao espacial nos valores de 13D1C durante a subida e a descida das guas. Note que em ambos os perodos ns valores ria 13DIC tornam-se mais leves rio abaixo. A explicao para esse fato seria a constante entrada de material biognico atravs dos tributrios, que como vimos apresentam valores de 13DIC mais leves, e tambm de material biognico das vrzeas. Essas contribuies parecem ser mais importantes durante a descida das guas, quando o decrscimo rio abaixo nos valores de 13DIC foi claramente mais acentuado que o decrscimo observado durante a subida das guas.

112

Figura 8.6. Variao ao longo dos rios Solimes e Amazonas dos valores de 13C do carbono inorgnico dissolvido (DIC) em amostras coletadas durante a subida das guas (crculo fechado) e durante a descida das guas (crculo aberto). Adaptado por Martinelli et al. (1991). Comparativamente, podemos citar os valores de 13DIC em dois rios localizados no Estado de Washington, nos Estados Unidos, onde predomina um clima temperado, com inverno rigoroso (Quay et al., 1986). O rio Sammamish teve um valor mdio

prximo ao valor encontrado no rio Amazonas durante a subida das guas, a mdia no rio temperado foi igual a -13.1 (n = 8). O rio Cedar, por outro lado, teve um valor sensivelmente mais pesado, em torno de -10.5 0.6 (n = 8). Vale lembrar que esses

113

dois rios so os principais alimentadores do lago Washington, o qual nos referimos acima.

8.3.2 Fitoplncton Em geral, os valores de 13C do fitoplncton (13Cfito) de gua doce so mais negativos que os valores de gua salgada (Tab. 2). Tabela 2. Valores de 13C do fitoplncton (13Cfito) de gua doce so mais negativos que os valores de gua salgada (Tab.2). Local Mdia marinho Rio Piracicaba Rio Jacar-Pepira Rio Amazonas Rio Doce Lago subalpino 13C () -21 -30 -32 -34 -37 -41

Quais seriam as causas desse empobrecimento isotpico ???

1) Em primeiro lugar, sistemas de gua doce, principalmente lagos, so ricos em espcies dissolvidas de carbono devido decomposio da matria orgnica produzida in situ, ou suprida pela bacia de drenagem. Dessa forma, se nos lembrarmos do esquema proposto por Degens et al. (1968), esse fato permitir um mximo de fracionamento entre a clula e a fonte de carbono (18 a 19). 2) Devido decomposio da matria orgnica, que na maioria das vezes, tem composio isotpica ao redor de -27, o DIC, fonte de carbono para os fitoplnctons, ser tambm menor. Como vimos anteriormente, os rios de guapreta da Amaznia podem ter valores to negativos quanto -24.6. No rio Amazonas a mdia entre os perodos de subida e descida das guas foi de -14.0

114

 1.6, vamos admitir que esse valor seja tambm representativo dos lagos da regio, como vimos na figura acima, o 13Cfito da Amaznia foi de em mdia 34, isso supe um fracionamento entre o DIC e a clula em torno de -20 a 19 como previsto no modelo de Degens et al. (1968).

8.3.3 Dissolved (DOC) and Particulate (POC) Organic Carbon

DOC - A origem do DOC da gua doce parecem ser as substncias hmicas do solo, misturado a substncias mais lbeis como carbohidratos e aminocidos. As medidas da composio isotpica dessa frao so bastante reduzidas, existem vrios problemas metodolgicos. Os poucos valores existentes, indicam que o DOC em termos isotpicos reflete os valores encontrados em ambientes terrestres. Assim, algumas medidas feitas pelo nosso grupo no rio Amazonas indicam valores constantes entre -26 a -27. Uma segunda medida foi feita por Matson and Brinson (1990) em rios de esturio localizados na Carolina do Norte. Os valores encontrados por esses autores foram semelhantes aos valores encontrados por ns na Amaznia. Para o rio Tar, o valor mdio foi igual a -25.5 0.4, enquanto que para o rio Neuse foi igual a -25.1 1.0. POC - A origem do POC dos rios parece estar ligada aos solos e plantas presentes na bacia de drenagem e a produo in situ dos rios e lagos. A maioria dos valores existentes em rios refletem valores geralmente encontrados em solos da regio, j nos lagos parece haver uma contribuio maior do fitoplncton. A tabela abaixo resume os valores de 13POC em vrios rios. Um maior nmero de dados vm do rio Amazonas e seus tributrios.
Tabela 3. Valores de 13C no carbono orgnico particulado de vrios rios.

RIOS Alto Amazonas Tributrios guas-brancas Tributrios guas-pretas

13C-POC -27,2 -28,5 -29,1

115

Tributrios guas-claras Rio Atibaia Rio Jaguari Rio Piracicaba Rio St. Lawrence (Canad) Rio Otsuchi (Japo) Rio Congo (frica) Rio Sanaga (Camares)

-32,0 -27,2 -26,4 -25,8 -25,5 -26,0 -26,7 -24,4

Note que em geral todo o sistema Amaznico apresenta valores de 13C mais negativo que os outros rios, provavelmente devido aos baixos valores de 13C encontrados em sua vegetao e em seus solos. Mesmo dentro desse sistema existem diferenas entre os diferentes tributrios. Entre esses, os tributrios de gua-branca so os que apresentam valores mais pesados de 13C, mas mesmo assim, esses valores foram ligeiramente mais leves que o canal principal. Os tributrios de guas-pretas que drenam uma poro relativamente maior de terras-baixas, apresentaram valores mais leves de 13C em relao ao rio Amazonas e tributrios de gua-preta, provavelmente refletindo na maior contribuio de material isotopicamente mais leve produzido nas terras baixas. Finalmente, os tributrios de guas-claras, apresentaram os valores mais negativos de todos. importante lembrar que a produo primria nesses rios de guas claras elevada, principalmente em sua foz, onde foram coletadas as amostras. Portanto, esses valores mais negativos podem estar refletindo. No valor do 13C dos fitoplnctons, que como vimos anteriormente bastante negativo. No caso da regio Amazonas, tivemos um valor mdio de -34. Antes de encerrarmos essa discusso sobre POC em rios, importante mencionar que os estudos feitos com POC no projeto Camrex levaram em conta duas fraes: a chamada frao fina <63pm e a frao grossa >63pm. Hedges et al. (1986) demonstraram pelo uso dos valores de 13C, C:N e produtos de oxidao da lignina, que essas duas fraes apresentam uma gnese distinta. A frao fina tem origem nos solos da regio, e composta por material hmico, j bastante degradado. Por outro

116

lado, a frao grossa tem origem no material vegetal produzido na bacia, principalmente folhas e madeira de plantas de ciclo C3, assim a contribuio das gramneas que crescem nas vrzeas foi contabilizada menor que 10%. O POC dos lagos parece refletir mais a produo primria in situ do lago. Ou seja, nesses ambientes o POC ser uma mistura de fitoplncton vivo e morto, bactrias, restos vegetais, zooplncton, material fecal e etc... Em vrios lagos de vrzea da Amaznia essa relao torna-se clara. Enquanto que o POC do rio Amazonas foi em mdia igual a -27.0, o POC mdio de alguns lagos de vrzea da Amaznia foi igual a -33.8.

-14 -16 -18 -20 -22 -24 -26 -28 -30 -32 -34 -36 -38 -14 -16 -18 -20 -22

Frao fina

13

C( /

o oo

Frao grossa

-24 -26 -28 -30 -32 -34 -36 -38 0,5 5,0 50,0 500,0 0,5 5,0 50,0 500,0 0,5 5,0 50,0 500,0 0,5 5,0 50,0 500,0 0,5 5,0 50,0 500,0 0,5 5,0 50,0 500,0

A ma z onas

Ji- par an

P iracicaba

Mogi

Cabras

P iracicami rim

Slido s susp en sos to tais

(mg .L -1 )

Figura 8.7. Relao entre a concentrao de slidos suspensos totais e 13C do material orgnico particulado fino de amostras coletadas em diversos rios do Brasil. Adaptado por Martinelli et al. (2005). 117

Bibliografia recomendada

Bernardes MC, Martinelli LA, Krusche AV, Gudeman J, Moreira M, Victoria RL, Ometto JPHB, Ballester MVR, Aufdenkampe AK, Richey JE, Hedges JI (2004) Riverine organic matter composition as a function of land use changes, Southwest Amazon. Ecological Applications 14 (4): S263-S279 Suppl. S. Bird MI (1992) Carbon isotope indicators of catchment vegetation in the Brazilian Amazon. Global Biogeochemical Cycles 6: 293-306. Bird MI, Giresse P, Ngos S (1998) Effect of forest and savanna vegetation on the carbon-isotope composition of sediments from the Sanaga River, Cameroon. Cai Dl, Tan FC, Edmond JM (1988) Sources and Transport of Particulate Organic Carbon in the Amazon River and Estuary. Estuarine, Coastal and Shelf Science 26: 1-14. Deuser WG, Degens ET, Guillard RRL (1968) Carbon isotope relationships between plankton and sea water. Geoch. Cosmoch. Acta 32: 657-660. Kendall C, Steven RS, Kelly VJ (2001) Carbon and nitrogen isotopic compositions of particulate organic matter in four large river systems across the United States. Hydrological Process 15: 1301-1346. Kroopnick PM (1985) The distribution of 13C of CO2 in the world oceans. Deep-Sea Research 32: 57-84. Krusche AV, Martinelli LA, Victoria RL, Bernardes MC, Camargo PB, Trumbore SE (2002) Composition of particulate organic matter in a disturbed basin of southeast Brazil (Piracicaba River basin). Water Research 36(11): 2743-2752. Mariotti A, Gadel F, Giresse P, Kingamouzeo (1991) Carbon isotope composition and geochemistry of particulate organic matter in the Congo River (Central Africa): Application to the study of Quaternary sediments off the mouth of the river. Chemical Geology 86: 345-357. Martinelli LA, Ballester MVR, Krusche AV, Victoria RL, Camargo PB, Bernardes M, Ometto JPHB (1999) Landcover changes and
13

C composition of riverine

particulate organic matter in the Piracicaba River basin (southeast region of Brazil). Limnology and Oceanography 44: 1826-1833.

118

Martinelli LA, Camargo P, Bernardes M, Ometto JP (2004) Carbon, nitrogen, and stable carbon compostion and land use changes in rivers of Brazil. Bulletin du Reseau Erosion 22: 399-419. Matson EA, Brinson MM (1990) Stable carbon isotopes and the C:N ratio in the estuaries of the Pamlico and Neuse Rivers, North Carolina. Limnol. Oceanogr. 35: 1290-1300. Quay PD, Wilbur DO, Richey JE, Hedges JI, Devol AH, Victoria RL (1992) Carbon Cycling in the Amazon River: Implications fro the and Solutes. Limnol. Oceanogr. 37: 857-871. Rau GR, Takahashi T, Des Marais D (1989) Latitudinal variations in plankton 613C: implications for CO2 and productivity in past oceans. Nature 341: 516-518. Sherr EB (1982) Carbon isotope composition of organic seston and sediments in a Georgia salt marsh estuary. Geoch. Cosmoch. Acta 46: 1227-1232.
13

C Compositions of Particles

119

Captulo 9 - Animais e sua dieta atravs dos valores de 13C

9.1. Introduo A identificao das fontes alimentares de um animal pode ser feita, essencialmente de duas formas: (i) observao de hbitos alimentares por um tempo suficientemente longo, que permita ao animal alimentar-se de todos os itens que compe a sua dieta; (ii) anlise do contedo estomacal. O primeiro mtodo considerado por demais tedioso e, s vezes perigoso, incorrendo em imprecises. Este mtodo pautou o incio dos estudos de dietas e pouco utilizado atualmente, a no ser em identificao de dietas de aves. O segundo mtodo tem o agravante que o animal pode no digerir tudo que se encontra em seu estmago. O maior exemplo so os tubares, existem relatos que j foram encontrados em seus estmagos, desde placas de automvel at pneus. Alm disto, a identificao de itens em avanados estgios de decomposio no trato digestivo muito imprecisa. Ainda assim, esse mtodo fornece informaes que subsidiam enormemente a interpretao de resultados advindos de estudos que utilizam istopos estveis em nutrio animal. Alguns aspectos importantes sobre o emprego da metodologia isotpica em nutrio animal devem ser salientados antes de seu emprego. Em relao s fontes alimentares devem ser consideradas todas as provveis fontes. Essas informaes so obtidas principalmente atravs de estudos comportamentais ou de contedo estomacal. Obviamente, a composio isotpica dessas fontes deve ser determinada, levando-se em conta inclusive, fontes alimentares. Quanto ao organismo considerado vrias questes devem ser consideradas. Em casos de uma nica fonte alimentar devemos conhecer o fracionamento isotpico que por ventura possa existir entre a dieta e o tecido do organismo considerado, ou no caso de pequenos invertebrados, entre a dieta e o animal como um todo. Esse tipo de fracionamento ocorre principalmente devido ao caminho metablico que o alimento percorre antes de ser incorporado em algum tecido (Fig. 9.1). possveis variabilidades sazonais na composio isotpica das

119

Os istopos so fracionados nos tecidos animais em funo de sua atividade metablica. Por exemplo, o fgado tem uma funo metablica totalmente distinta que um msculo. Portanto, no podemos comparar diretamente a composio isotpica do fgado com do msculo, pois certamente o fracionamento isotpico entre a dieta e esses dois tecidos ser distinto. Por exemplo, o fracionamento isotpico entre a rao fornecida a porcos mostrou que a cartilagem, o plo e as unha dos animais tiveram um fracionamento isotpico menor que 1; enquanto tecidos metablicos com o muscular teve um fracionamento isotpico ao redor de 1,5 e o fgado e o tecido adiposos tiveram fracionamentos maiores que 2 (Fig. 9.1).

Cartilagem Plo Rao Unha Msculo Fgado -18.2 Gordura -18.2 -2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0 0.5
o -17.6 -16.7 -15.9 -15.7

-14.9

1.5

Fracionamento dieta-tecido ( /oo)

Figura 9.1. Fracionamento isotpico mdio entre a rao (dieta) e vrios tecidos de cinco porcos criados e abatidos pelo Departamento de Zootecnia dos Animais NoRuminantes da ESALQ. Os valores prximo s barras representam os valores mdios de 13C de cada tecido e da rao. Por exemplo, o fracionamento entre a rao e o fgado foram obtidos por 13Cfgado - 13Crao, ou seja, -15,9 (-18,2) = 2,3. Fonte dos dados: Gabriela Nardoto (dados no publicados).

120

Estudos em que a composio isotpica da fonte alimentar de um determinado organismo varia sazonalmente, pode existir o problema da memria isotpica. Ou seja, quanto tempo leva para que o carbono ou nitrognio fixado a partir de uma fonte alimentar em um determino perodo seja substitudo pela nova fonte alimentar. Por exemplo, o tambaqui, uma espcie nobre de peixe que habita a bacia Amaznica alimenta-se, como veremos adiante, de frutos e sementes na poca em que rios e lagos esto cheios e basicamente de fitoplnctons quando rios e lagos esto vazios. Considerando-se que a composio isotpica de frutos e sementes seja distinta da composio isotpica do fitoplancton, podemos utilizar a metodologia isotpica para estudar a nutrio do tambaqui. Vamos supor que o perodo de cheia dure 4 meses na Amaznia e que o perodo de guas baixas tambm dure 4 meses. Caso exemplares de tambaqui sejam amostrados logo no incio do perodo de cheia, provavelmente o carbono ou nitrognio de seus tecidos foram adquiridos durante o perodo de guas baixas. Portanto, seria prudente que os exemplares fossem capturados no final do perodo de cheia para garantir que a maioria do carbono adquirido neste perodo j tivesse sido incorporado no tecido dos peixes. Finalmente, vale lembrar que para a maioria dos alimentos existe mais que uma fonte alimentar e nem todos os componentes dessa mistura de alimentos so digeridos com a mesma eficincia. Os primeiros estudos empregando a metodologia isotpica em nutrio animal foram publicados em meados da dcada de 70. Em 1975 Minson et at. publicaram, provavelmente, o primeiro estudo empregando a composio isotpica para identificar a provvel dieta de lotes de bovinos que se alimentavam exclusivamente de plantas C3 e lotes que se alimentavam exclusivamente de plantas C4. No ano seguinte, Haines (1976), publicou um estudo elucidativo sobre a dieta de uma espcie de caranguejo que vive em manguezais (Uca pugnax). A autora mostrou que esses animais, que so detritvoros, baseavam sua alimentao principalmente em detritos gerados por uma planta C4 muito comum em manguezais - Spartina alterniflora. Esses trabalhos abriram uma nova perspectiva no estudo de nutrio animal. Aps esses estudos pioneiros, DeNiro & Epstein (1978) aliceraram o uso dessa nova tcnica, atravs de testes de laboratrio que permitiram conhecer com

121

exatido a composio isotpica tanto da dieta como do animal. Alm desse aspecto foram elucidados pontos importantes como a variabilidade inter e intra-especfica e sobre a composio isotpica de vrios tecidos e fraes bioqumica dos animais. Esses autores, em mdia, encontraram que os valores de 13C do animal como um todo foi isotopicamente mais pesado que a respectiva dieta:

13C animal = 13C dieta + (0,8 1,1) ..............................(9.1)

Sendo que a diferena 13Canimal - 13Cdieta comumente denominado pela terminologia animal-dieta. Outras informaes importantes advindas deste estudo foram que: (i) duas espcies alimentando-se da mesma dieta tero animal-dieta similares e (ii) a mesma espcie alimentando-se de diferentes dietas apresentar animal-dieta relativo ao alimento consumido. Nos prximos itens discutiremos a relao entre composio isotpica de alimentos e consumidores em trs nveis distintos. Primeiramente a relao entre dieta e pequenos animais invertebrados feito por De Niro & Epstein (1978). Em seguida a relao isotpica entre dieta e tecidos de animais vertebrados como ratos e, finalmente, a relao isotpica entre dieta e fraes bioqumicas, como carboidratos, protenas e gorduras.

9.2. Balano de carbono entre pequenos invertebrados e suas dietas Como vimos, pequenos animais so geralmente isotopicamente mais pesados que suas dietas, para se manter o balano isotpico o carbono perdido pela respirao e excreo deve ser, portanto, mais leve que a respectiva dieta. A Tabela 1 adaptada de DeNiro & Epstein, (1978) ilustra o balano de massa e isotpico para Melanoplus (gnero da Classe Insecta que engloba espcies de gafanhoto) que foram alimentados com sementes de trigo (planta do ciclo fotossinttico C3).

122

Tabela 1. Balano isotpico em Melanoplus alimentado com semente de trigo. Componente

Alimento CO2 respirado Fezes Corpo todo Total calculado 13C -40.2 -40.8 -39.5 -37.5 -39.7

Podemos observar que o CO2 respirado pelo animal foi realmente mais leve que a dieta, por outro lado, as fezes foram mais pesadas que a dieta, no entanto mais leve que o animal. Os autores consideram que no geral o balano isotpico parece ter sido satisfatrio para insetos pertencentes ao gnero Melanopus. Em um outro experimento conduzido por De Niro & Epstein (1978), o balano isotpico no foi mantido para Helix aspersa (caramujo comum) alimentado com alface romana e fosfato de clcio. Segundo os autores, a ausncia de balano nesse caso foi provavelmente devido ao fato de no ter sido coletado o cido rico e o muco que as lesmas deixam aderidas a superfcies quando se locomovem. 9.3. Relao entre os valores de 13C de tecidos e valores 13C de suas dietas. Um aspecto importante a ser considerado com relao anlises isotpicas de tecidos animais o quanto um determinado tecido integra e reflete isotopicamente a dieta do animal. Os msculos so comumente utilizados para estudos isotpicos associados a dietas animais, principalmente animais de grande porte, por sua facilidade de utilizao e integrao do sinal isotpico da dieta. Em inmeros estudos foi demonstrado que o fracionamento isotpico entre a musculatura e a dieta varia em torno de 1 a 2. Em alguns estudos a musculatura teve um 13C ligeiramente maior que a dieta e em outros foi encontrado o inverso. De qualquer forma, devido pequena diferena entre dieta e musculatura, ficou provada a possibilidade e a utilidade de estudos de nutrio animal

123

empregando-se istopos do carbono. Podemos de uma forma geral, estabelecer a seguinte relao entre a musculatura e a dieta:

13Cmsculo = 13Cdieta + 0,5 ....................................................(9.1)

Vale lembrar que no estudo que fizemos com porcos o fracionamento entre a musculatura e a rao foi igual, aproximadamente, a 1,5. tambm importante mencionar que no foi constatada uma grande diferena entre a composio isotpica de organismos ao longo de uma cadeia trfica. Esse tipo de diferena muito mais clara no caso do nitrognio, o qual intensamente utilizado para esse propsito, como veremos adiante. No caso do carbono o mesmo muito mais utilizado na investigao do tipo de dieta de um determinado animal e no sobre sua posio em uma determinada cadeia trfica. 9.4. Relao entre os valores de 13C das fraes bioqumicas dos animais e suas dietas. Geralmente a relao encontrada para o 13C de diferentes compostos bioqumicos para dois gneros de moscas, Calliphora e Musca, que se alimentaram de carne de cavalo foi a seguinte: 13Clipdios < 13Ctotal = 13Cglicognio = 13Cprotena No geral, esses autores concluem que, devido a diferenas encontradas, melhor que se evitem fraes bioqumicas em estudos com istopos, sendo mais aconselhvel que se trabalhe com tecidos, principalmente o muscular. A mesma tendncia foi encontrada por Tieszen et al. (1983) analisando a composio isotpica de herbvoros da frica que se alimentavam de trigo e milho. A tendncia mais clara foram os valores de 13C menores (2 a 3) encontrados em lipdeos, tanto nas plantas como nos animais. No nosso exemplo com porcos, tambm obtivemos resultados muito semelhantes, ou seja, o fracionamento entre a rao e o tecido adiposo foi cerca de 2,3.

124

9.5. O uso de 15N em nutrio animal O uso de outros traadores isotpicos, principalmente o 15N, so interessantes na interpretao dos nves trficos estudados, acrescentando informaes adicionais que em muitos casos permitem uma caracterizao melhor do organismo, ou cadeia trfica estudada (Michener e Schell, 1994). muito comum o uso do istopo de nitrognio em estudos de nutrio animal interessados em definir a posio de um animal na cadeia trfica. Geralmente h uma perda progressiva de produtos enriquecidos em tomos de
14

N ao longo de ma cadeia
15

trfica. Portanto, ocorre um progressivo enriquecimento em tomos de

N ao longo de

uma cadeia trfica. Estudos realizados por Minagawa & Wada (1984) mostraram a variao do 15N ao longo de uma cadeia alimentar, tendo os consumidores apresentado valores isotpicos maiores que a respectiva dieta, apresentando um valor mdio para cada transferncia de nvel trfico de 3,4 1,1. Vale mencionar que no nosso exemplo com porcos, o fracionamento isotpico mdio entre a rao e o tecido muscular de cinco indivduos foi de 3,3, portanto, muito semelhante aos valores encontrados por Minagawa e Wada. A relao hipottica entre carbono e nitrognio ao longo de uma cadeia trfica aqutica, pode ser demonstrada pela Figura 9.2. Essa figura demonstra a utilidade do uso de dois traadores simultaneamente. Como mencionado anteriormente, os istopos de carbono so teis para se investigar o tipo de dieta, principalmente quando se trata de se comparar a importncia de plantas C3 e C4 e componentes terrestres vs. componentes marinhos em uma determinada dieta. Por outro lado, como vimos no Captulo 7, as variaes dos valores de 15N em plantas muito mais complexa que as variaes dos valores de 13C. Portanto, extremamente complexo analisar o tipo de dieta baseando-se em istopos de nitrognio. Os istopos de nitrognio so especialmente importantes na determinao da posio de um determinado organismo na cadeia trfica a que pertence.

125

12 3 nvel trfico 11 10
15 o N ( /oo )

carnvoros

9 8 7 6

2 nvel trfico insetvoros

detritvoros omnvoros 1 nvel trfico herbvoros

5 -36 -35 -34 -33 -32 -31 -30 -29 -28 -27 -26 -25 -24 C ( /oo)
13 o

Figura 9.2. Relao hipottica entre valores de 13C e 15N em uma cadeia alimentar.

9.6. Estudo de casos 9.6.1. Nutrio Animal 9.6.1.1. Nutrio de animais domsticos com alternncia de C3 e C4 Jones et aI. (1979) realizaram uma srie de experimentos com diferentes animais alternando a alimentao desses animais com plantas C3 e C4. Por exemplo, forneceram primeiramente dietas puras de C3 e C4 aos animais. Como esperado, os animais tiveram valores de 13C das fezes prximos ao valor isotpico das respectivas dietas (Tab. 2). Tabela 2. Valores de 13C de alimentos e fezes de carneiro e bovinos alimentados com leguminosas C3 e gramnea C4. Adaptado por Jones et al. (1975).

Alimentao
C3

Alimento -23,5

Fezes-carneiro -21,2

Fezes-bovino

126

C3 C4

-26,6 -13,1 -13,5

-24,2 -14,0

Apesar de prximos, os valores de 13C no foram iguais. No caso de animais alimentados com plantas C3, o valor das fezes foi cerca de 2,4 maior que a alimentao. Enquanto que no houve diferena estatstica entre os valores de 13C das fezes dos animais alimentados por C4 e a dieta. Os autores atriburam essas discrepncias a um sinal remanescente da dieta anterior, que era exclusivamente de plantas C4, ou seja, atriburam essa diferena memria isotpica que discutimos no incio deste captulo. Um segundo experimento contemplou mudanas abruptas entre dietas puras de C3 para dietas puras de C4 e vice-versa. Observamos na Figura 9.3 que as fezes em cerca de 6 dias, aproximadamente, estabilizaram seus valores isotpicos em torno dos valores de 13C da alimentao fornecida (Fig. 9.3). Em seguida, um terceiro experimento contemplou mudanas progressivas entre uma dieta exclusivamente feita por plantas C3 e adies crescentes de plantas leguminosas que seguem o ciclo C3. Nota-se que, tanto para cabras como para os bovinos, houve um decrscimo nos valores de 13C das fezes com o aumento da porcentagem de leguminosas (C3) na rao (Fig. 9.4). Em mdia, um declnio de 1 no valor de 13C-fezes significou um aumento mdio de 7 para cabra e 7,5% para os bovinos. A mesma tendncia foi observada para carneiros e coelhos (Fig. 9.4).

127

Figura 9.3. Variao dos valores de 13C em amostras de fezes de animais submetidos mudana de alimentao. Adaptado de Jones et al. (1975).

128

Figura 9.4. Variao dos valores de 13C de amostras de fezes em animais alimentados com plantas C4 que tiveram propores crescentes de leguminosas (C3) adicionadas dieta. Adaptado por Jones et al. (1975). A partir dos experimentos acima foi possvel determinar a proporo de C3 e C4 na dieta e a digestibilidade de cada componente.

13C fezes 13C planta C 4 100 .........................(9.1) Ind C 3(%) = 13 13 C planta C 3 C planta C 4
Onde, Ind-C3(%) o percentual de plantas C3 indigerida. Por que indigerida? Porque Jones e colaboradores analisaram as fezes dos animais. Caso tivessem analisado, por exemplo, o tecido muscular, determinaramos o porcentual de plantas C3 incorporado ao tecido muscular. No entanto, o modelo acima de leguminosas indigerida na dieta. A equao (9.1) pode ser reescrita na forma abaixo, e assim anula-se a possvel diferena entre 13Cfezes e o 13Cdieta, ou seja, o fracionamento entre esses dois componentes. no leva em considerao o provvel fracionamento entre as fezes e a dieta, o que causa uma sub-estimativa na proporo

13C fezes 13C planta C 4 100 ...........................(9.2) Ind C 3(%) = 13 C fezes C 3 13C planta C 4
Uma outra possibilidade seria determinar a proporo de C3 e C4 em uma dieta desconhecida atravs do 13Cfezes . Nesse caso temos dois caminhos a seguir: a) Assumir a mesma digestibilidade para as fontes alimentares dos tipos C3 e C4. Portanto, nosso modelo seria muito simples igual a equao (9.2) b) Assumir que a digestibilidade das fontes C3 e C4 sejam distintas. Nesse caso 129

teramos que recorrer tcnicas convencionais para determinar a digestibilidade das duas e incorpor-las no nosso modelo, o qual passaria a ter a seguinte equao:

Ind C 3(%) =

1 D3 100 ........................................(9.3) (1 D4 ) ( 13C4 1) M

Onde M dado pela seguinte equao:

Ind C 3(%) =

1 1 [( 13C plantaC 3 1) /( 13C fezesC 3 )] .................................(9.4)

As diferenas encontradas entre as duas equaes no so acentuadas. Por exemplo, para um digestibilidade da leguminosa (D3) igual a 60% e para uma disgestibilidade da gramnea (D4) igual a 80%, tendo-se o valor 13CfezesC3 igual a -17, o da fonte C3 igual a -28 e, finalmente, o da fonte C4 igual a -13, a equao (9.3) produziu um valor igual a 27% contra 29% para a equao (9.2).

9.6.1.2 Contedo estomacal e composio isotpica em animais africanos Tieszen et al. (1979) comparou resultados entre anlise microscpica do material do rmen de animais domsticos e selvagens da frica com a composio isotpica do rmen (Tab. 3).
Tabela 3. Valores de 13C medido e estimado em funo da composio do contedo estomacal de diversos animais.

Espcie
Kongoni

C3% 1.4

C4% 98.6

13C-estimado -12.7

13C-observado -14.4

130

Wildbeest Bovino Carneiro Gazela-1 Cabra Impala Gazela-2

2.6 5.8 4 20.2 36.3 30.2 69.1

97.4 94.2 96 79.8 63.3 69.8 30.9

-12.9 -13.4 -13.1 -16 -18.1 -17.2 -23.2

-14.4 -14.6 -15.3 -16.9 -17.7 -19 -21.9

Com a proporo relativa de cada tipo de alimento para cada espcie, obtida atravs da anlise microscpica, os autores estimaram os valores de 13C que os rmens teriam e comparam com os valores de 13C medidos no material colhido desses mesmos rmens. Como se pode observar na tabela acima, houve uma concordncia relativamente boa entre os valores. Entretanto, os valores medidos foram geralmente um pouco menores que os estimados. Esse fato sugere que, nesse caso, as gramneas no tiveram a mesma digestibilidade das plantas C3 ingeridas. Utilizando a anlise do rmen, os autores evitaram o fracionamento observado entre as fezes e o alimento, como o caso mencionado no exemplo anterior. Mas, por outro lado, no puderam estimar quanto do alimento que se encontrava no rmem foi efetivamente absorvido pelos animais.

9.6.1.3 Nutrio de peixes da Amaznia I Characiformes e Siluriformes Arajo-Lima et al. (1986) coletaram peixes em vrias regies da Amaznia, determinando sua composio isotpica e de suas possveis fontes de carbono. Pela anlise da Figura 9.5, vemos que os peixes Characiformes tm sua alimentao baseada no carbono orgnico particulado e fitopnctons. Por outro lado, a interpretao dos Siluriformes no to clara, podem derivar sua dieta de vrias fontes, por exemplo uma mistura entre fitoplnctons e gramneas C4. Contudo, o fato desse estudo demonstrar que os Characiformes no dependem de gramneas C4 como fonte alimentar foi importante, uma vez que estudos anteriores, baseados nas tcnicas clssicas, apontavam as gramneas C4 como um grupo de plantas importante dieta desses peixes. Os Characiformes representam cerca de 30% do pescado na regio

131

Amaznica, portanto, uma importante fonte de protena, e tem sua fonte principal de carbono nos lagos de vrzea da Amaznia.

Figura 9.5. Valores de 13C de peixes capturados na regio Amaznica e de provveis itens alimentares. Adaptado por Arajo-Lima et al. (1986).

132

Em outro estudo similar, Hamilton et al. (1992), confirmaram que os peixes na Amaznia pouco dependem das plantas C4, bem como outros invertebrados (Fig. 9.6).

Figura 9.6. Relao entre valores de 13C e 15N de amostras de peixes capturados na bacia do rio Orinoco. Na figura A encontram-se as fontes potenciais de alimentos e peixes no carnvoros. Algas (C3) denota colnias de algas crescendo sobre plantas que seguem o ciclo fotossinttico C3. Algas (C4) denota colnias de algas crescendo sobre plantas que seguem o ciclo fotossinttico C4. Na figura B encontram-se os peixes carnvoros. Adaptado por Hamilton et al. (1992).

133

9.6.1.3.1 Nutrio de peixes da Amaznia II tambaqui O estudo desenvolvido por Ana Cristina Oliveira (2003) em nosso laboratrio utilizou os istopos estveis do C e N como indicadores qualitativo e quantitativo da dieta do tambaqui (Colossoma macropomum). Este peixe de grande importncia e ocorrncia nas vrzeas da regio Amaznica, que por sua vez so responsveis por 90% de todo pescado capturado na regio. O grfico mostrado na Figura 6, que relaciona valores de 13C e 15N das principais fontes de alimento e da musculatura de tambaquis capturados no lago Camaleo, na regio central da Amaznia, demonstra novamente a pouca importncia das gramneas C4 na alimentao do tambaqui e evidncia importncia de frutos e sementes oriundos de plantas C3 e insetos que se alimentam destas plantas e terminam fazendo parte da dieta do tambaqui. importante tambm ressaltar que no caso dos valores de 15N houve um fracionamento isotpico ao redor de 3 a 4 ao longo da cadeia trfica, semelhante aos valores encontrados na literatura por outros autores. 9.6.1.3.2 Cadeia alimentar no Pantanal Outro estudo desenvolvido em nosso laboratrio e liderado por Dbora Calheiros (2003) estudou a cadeia trfica aqutica em um baa do Pantanal mato grossense durante um ciclo hidrolgico completo com objetivo de identificar as fontes primrias de carbono que regem o fluxo de energia. Neste trabalho a autora utilizou os istopos de carbono e nitrognio conjuntamente, e sua avaliao incluiu algas (sestnicas e epiflicas), plantas vasculares, invertebrados (epiflicos, planctnicos e bentnicos) e peixes detritivoros adultos. Alguns aspectos importantes apontados relacionam-se primeiramente composio isotpicas das algas, com valores de 13C entre -34.5 e 26.9, mas com a maioria dos valores posicionando-se prximos a 28 a -27. No geral, esses valores podem ser considerados mais elevados em comparao a valores encontrados para algas fluviais das regies tropicais na Amrica do Sul, tambm sujeitas a regimes de inundao peridicos. Por exemplo, vale lembrar que no estudo de Arajo-Lima et al. (1986), desenvolvido ao longo do rio Amazonas, o valor mdio do fitoplacton esteve em

134

torno de -34 (Fig. 9.5), que por sua vez prximo ao valor mdio encontrado no lago Camaleo por Ana Cristina Oliveira (Fig. 9.7). Da mesma forma, foram encontrados valores entre -38 a -34 em amostras de fitoplancton coletadas ao longo do rio Orinoco por Hamilton et al. (1992) (Fig. 9.6)
11 10 Tambaqui 9 8 Camaro Zooplancton Plantas (C4) Fitoplancton Sedimentos Frutas/ Moluscos sementes (C3) Insetos (C3) Insetos (C4)

N ( /oo)

o 15

7 6 5 4 3 2 -38

-36

-34

-32

-30

-28

-26
13

-24
o

-22

-20

-18

-16

-14

-12

C ( /oo)
Figura 9.7. Relao entre valores de 13C e 15N de amostras de tambaqui ( capturados no lago do Funil na ilha da Marchantaria, localizada no rio Solimes, prxima cidade de Manaus. Insetos (C3) denota colnias de algas crescendo sobre plantas que seguem o ciclo fotossinttico C3. Insetos (C4) denota colnias de algas crescendo sobre plantas que seguem o ciclo fotossinttico C4. Adaptado de Oliveria (2003). O fato de os valores de 13C de amostras de fitoplancton do Pantanal terem sido mais elevados que os de outros sistemas similares pode ser explicado pela existncia de, indicaria utilizao de uma fonte de carbono dissolvido de origem mineral, provavelmente, oriundo da decomposio de uma rocha carbonatada. Como vimos em vrios captulos, os valores de 13C de rochas carbonatadas encontram-se entre 0 a 2.

135

Outro ponto importante do trabalho de Calheiros (2003), que foi considerado surpreendente, foi o fato de os valores de 13C de alguns consumidores primrios terem sido significativamente menores que os valores das algas, como vimos, foram tambm surpreendentemente elevados. O 13C de alguns organismos chegou a valores bastante elevados, ao redor de -43 e alguns chironomdeos bentnicos tiveram valores to negativos quanto -62. A hiptese lanada pela autora que esses organismos estariam consumindo uma fonte de carbono bastante negativa, produzido possivelmente por bactrias metanotrficas. Os valores de 15N apresentados por Calheiros (2003) tambm indicam uma possibilidade ecolgica que a fixao de nitrognio atmosfrico (N2) por cianobactrias, sugerido pelos valores prximos a 0 para o 15N. Outro aspecto importante que valores mais enriquecidos para o 15N estariam relacionados ao consumo de uma fonte rica em NH4+ por exemplo. 9.6.2. Estudos sobre paleodietas Contrastando com os estudos anteriormente expostos, que demonstraram o uso de istopos estveis para a abordagem da dieta de animais contemporneos, o estudo de paliodietas, com utilizao de fsseis uma rea onde a utilizao de istopos estveis abriu uma perspectiva totalmente nova esse tipo de esutdo. O material usualmente utilizado para esse tipo de estudo o colgeno, principal protena do tecido sseo e encontrado com certa facilidade em stios arqueolgicos. Vrios trabalhos atestam que esse material sofre pouca mudana aps a morte do animal (DeNiro, 1985; Nelson et al., 1986 e Turross et al., 1988). Esses estudos sugerem a escolha de ossos que se mostrem bem preservados na sua aparncia e com relao C:N prxima ao que originalmente encontrado em tecidos sseos modernos, em torno de 2 e 4. Vrios estudos indicaram que h um fracionamento isotpico em torno de 5 entre a dieta e o colgeno. Desta forma uma dieta baseada somente em plantas C4 (12 a -13) produziria um 13Ccolgeno variando entre -7 a -8, enquanto que uma dieta baseada em plantas C3 (-26 a -28) produziria um 13Ccolgeno variando entre 19 a -21.

136

Na evoluo dos estudos arqueolgicos utilizando-se de istopos estveis, um dos estudos clssicos foi desenvolvido por Van der Merwe & Vogel (1978), que demonstraram a evoluo da espcie humana ao passar de caador/coletor a agricultor, cultivando milho, uma planta C4. No continente norte-americano, em torno do ano 200 d.C., a domesticao do milho pelo Homen foi um dos aspectos importantes, ocasionando uma mudana comportamental dramtica para a espcie. O Homem tornou-se mais sedentrio, houve um aumentando importante na populao e o desenvolvimento de sociedades maiores e mais complexas.

137

Figura 9.8. Variao secular dos valores de 13C em amostras de colgeno de ossos humanos e a possvel contribuio de plantas C4 na alimentao humana ao longo dos sculos nos Estados Unidos da Amrica. Adaptado por: Van der Merwe & Vogel (1978) Outro exemplo interessante foi mostrado por Sealy & van der Merwe (1985). Algumas teorias propunham que nossos ancestrais "caadores-coletores" tinham uma alta mobilidade em busca, basicamente, de comida. Sealy & van der Merwe questionaram esta teoria atravs de dados isotpicos, demonstrando que a mobilidade se restringia a uma determinada regio uma vez que amostras de colgeno vindas de regies de montanha conservavam valores isotpicos de ambiente terrestres (-18.9 1.156, n = 4), enquanto que amostras advindas de regies prximas ao litoral apresentaram valores de 13C caractersticos de ambiente marinho (-13.5 1.4, n = 13). Um outro exemplo que pode ser dado baseando-se no trabalho de van der Merwe et.al. (1981) e se refere a uma polmica entre os arqueologistas sobre a fonte de alimento nas florestas tropicais. De um lado alguns pesquisadores argumentavam que plantas C4, como milho, tiveram pouca influncia na alimentao humana, e que portanto, as populaes da Amaznia eram pequenas e esparsas, apenas sustentadas pela caa e extrativismo. Anna Roosevelt, baseando-se em dados arqueolgicos obtidos nas vrzeas do rio Orinoco, afirma que, pelo contrrio, o milho fez parte da alimentao na Amaznia e que, como conseqncia, teriam desenvolvido sociedades mais complexas que antes imaginado. A polmica foi resolvida pelo uso de 13C em amostras de colgeno de ossos encontrados na regio em dois perodos distintos 800 a.C. e 400 d.C. Pelo exame da tabela abaixo, observamos que os valores de 13Ccolgeno das amostras de 400 d.C. claramente indicam a ingesto de plantas que seguem o ciclo fotossinttico C4. Por outro lado, as amostras de 800 a.C. apresentam valores menores, indicando a presena de plantas C3 na dieta, oriundas certamente da floresta Amaznica (Tab. 4).

138

Tabela 4. Valores de 13C de colgenos de esqueletos humanos escavados na regio Amaznica (Van der Merwe et al., 1981).
13C () -9.7 -10.5 -10.8 -26.1 -25.8

Amostras
UCT259-400 DC UCT258-400 DC UCT286-400 DC UCT260-800 AC UCT287-800 AC

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141

Captulo 10 - Adulterao de alimentos 10.1. Introduo Vrios alimentos so adulterados, principalmente, por razes econmicas. Geralmente, o produto adulterado pela utilizao de um componente menos oneroso, que pouco altere a aparncia e o gosto do produto. Os istopos estveis cada vez mais esto sendo utilizados para detectar esses tipos de adulterao. Inmeros so os exemplos: sucos de frutas, vinho, destilados, leos, mel e outros. Obviamente, para que a tcnica isotpica seja utilizada, a composio isotpica do produto e do adulterante devem ser diferentes. Discutimos a seguir algumas aplicaes onde a composio isotpica do carbono e/ou nitrognio estvel, elegantemente detectou a adulterao de

determinados produtos.

10.2. Estudos de caso 10.2.1. Mel de abelha As abelhas europias melferas utilizam, na maioria das vezes, plantas do tipo C3 para elaborarem o mel. Na maior parte do pas, os apicultores colocam suas colmias em pomares de laranja, plantaes de flores silvestres e de eucalipto. A adulterao feita utilizando-se acares comerciais que, na sua grande maioria, so feitos de cana. Alternativamente, o mel tambm pode ser adulterado utilizando-se glicose de milho (C4). Portanto, mais uma vez temos o caso clssico de C3 x C4. Nos Estados Unidos, a tcnica isotpica , desde 1992, considerado um dos mtodos padro na determinao da adulterao de mel. Somente nos casos em que a composio isotpica do mel suscite dvidas quanto presena de acares, a amostra testada pelos mtodos clssicos. O primeiro passo para a implementao dessa metodologia no Brasil seria conhecer a variabilidade natural em amostras de mel. Tempos atrs, iniciamos no nosso laboratrio determinaes da composio isotpica em amostras de mel de diferentes origens botnicas. Para alcanar esse objetivo foram feitos: (1) testes especficos para avaliar a dimenso do fracionamento isotpico na produo do mel

142

pelas abelhas; (2) testes de adulterao, onde foram adicionadas quantidades crescentes de acares comerciais em amostras de mel puro para verificar a sensibilidade da tcnica isotpica e (3) anlise isotpica de cerca de 61 amostras comerciais de mel, visando conhecer as variaes isotpicas dentre as diferentes origens botnicas (eucalipto, citrus e flores silvestres) e tambm eventuais adulteraes.

10.2.1.1. Fracionamento isotpico na produo de mel

Para se averiguar a ocorrncia de fracionamento isotpico durante a produo do mel, foram comparados os valores de 13C de plantas do tipo C3 com a composio isotpica de amostras certificadas de mel, que o produto final (Tab.1). Para fins comparativos foram tambm determinados os valores isotpicos do fabricante (abelhas) e outros produtos (cera e favo), (Tab.1). A mdia dos valores de 13C das folhas de plantas do tipo C3 foi igual a 29,4 1,7 (n = 9) e a mdia das amostras certificadas de mel foi igual a 24,6 0,4 (n = 4). Portanto, houve uma diferena mdia entre as plantas, fonte de nctar, e o mel (produto) aproximadamente 5. No entanto, como os agentes adulterantes (acares) tiveram um valor mdio -11,1 0,7, (n = 3), significativamente diferente das amostras de mel certificadas, conclui-se que seria vivel o uso da metodologia isotpica para se verificar adulterao de amostras de mel por adio de acares produzidos por cana ou milho. As mdias dos valores de 13C das abelhas, que so os produtores do mel, foi igual a 23,9 1,3 (n = 8), que foi ligeiramente maior que o valor mdio encontrado para as amostras de mel certificados. Por outro lado, as mdias dos valores de 13C das amostras de favo e cera foram ligeiramente inferiores aos valores do mel, -25,3 0,9 (n = 3) e 25,1 1,8 (n = 4), respectivamente.

143

Tabela 1. valores de 13C () em diferentes amostras. Amostra

Ameixa Coentro-C3 Jabuticaba-C3 Laranja-C3 Laranja-C3 Limo-C3 Limo-C3 Mostarda-C3 Pitanga-C3 Melao de cana-C4 Acar refinado-C4 Glicose de milho-C4 Apis melfera A. melfera A. melfera Apis sp Composta de 5 abelhas A. melfera Composta de 7 abelhas A. melfera Rainha de A. melfera Zango de A. melfera Cera Cera Cera Cera Favo Favo Favo Plem Mel certificado - floral Mel certificado - floral Mel certificado - eucalipto Mel certificado - laranja

13C
-28.7 -30.2 -28.1 -27.2 -30.2 -27.8 -32.8 -29.3 -29.8 -11.8 -11.1 -10.4 -24.2 -24.9 -24.9 -24.6 -23.3 -20.9 -24.7 -23.6 -23.1 -27.3 -24.2 -25.8 -26.2 -25.4 -24.4 -26.4 -24.4 -24.9 -24.8 -241

144

10.2.1.2. Simulao de adulterao do mel pela adio de melao de cana

Com intuito de se testar a sensibilidade da metodologia isotpica, foram adicionadas quantidades crescentes de melao de cana (-11,7) a uma amostra de mel certificada (-26,7). A Figura 10.1 mostra os valores de 13C dos diferentes nveis de mistura mel-melao. Nota-se que mesmo para adies baixas de melao (10%) houve um aumento sensvel (1,7) no valor de 13C da mistura. Considerando-se que o valor mximo entre amostras duplicatas foi de 0,3%, uma diferena ao redor de 2 facilmente mensurvel.
-10 -12 -14

13C = -0.15(C4-% ) - 11.9

R = 0.99
2

C ( /oo )

-16 -18 -20 -22 -24 -26 -28 0 20 40 60 80 100

13

Percentual de melao de cana (C 4) na mistura

Figura 10.1. Variabilidade dos valores de 13C em amostras de mel com propores crescentes de melao de cana-de-acar. Adaptado por Rossi et al. (1999). 10.2.1.3. Valores de 13C em amostras de mel comercializadas

145

As determinaes dos valores de 13C em amostras de mel comercializadas foram feitas com o intuito de se conhecer a variabilidade entre as amostras e detectar possveis adulteraes (Tab. 2). Das 61 amostras analisadas, 5 amostras (8%) tiveram valores de 13C considerados "suspeitos", uma vez que esses valores foram significativamente maiores em relao s outras amostras comercializadas e mesmo em relao s amostras certificadas. As amostras 13 e 14 (mel de laranja) tiveram valores de 13C iguais a 21,0 e 19,9, respectivamente. As amostras 33 e 34 (mel de flores silvestres), tiveram valores iguais a 21,9 e 12,9, respectivamente. Finalmente, a amostra 54 (mel de eucalipto) teve um valor igual a 17,6. Excetuando-se as amostras suspeitas, a mdia de todas as outras amostras foi igual a 25,3 1,0 (n = 56). Essa mdia muito prxima daquela encontrada por White & Doner, que analisaram 84 amostras de mel produzidas nos Estados Unidos (25,2 0.9).

146

26 24 22 20
Localidade: Piracicaba Localidade: Santarm

Nmero de observaes

18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 -30 -28 -26 -24 -22 -20 -18 -16 -14 -12

13 C-mel
Figura 10.2. Distribuio de valores de 13C de amostras de mel comercializadas nas cidades de Piracicaba e Santarm. Adaptado por Rossi et al. (1999). Comparando-se a mdia dos valores de 13C entre amostras de diferentes origens botnicas, notou-se que a mdia dos valores de 13C para o mel de laranja foi aproximadamente 0,7% mais elevada em relao mdia obtida para amostras de mel de outras origens botnicas (Tab. 3). No entanto, essa diferena no foi estatisticamente significativa (teste de Tukey). Essa caracterstica do mel de laranja (valores maiores de 13C) foi tambm observada nos Estados Unidos. White & Robinson (19xx) analisaram 15 amostras desse tipo de mel, obtendo um valor mdio igual a -23,8 1,0, sendo o menor valor igual a -25,5 e o maior igual a -22,1.

147

Tabela 2. Valores de 13C () em amostras de mel comercializados. Valores em negrito indicam amostras suspeitas de adulterao. Amostra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Origem botnica Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Laranja Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral Floral 13C () -26.7 -26.6 -25.9 -25.5 -25.1 -24.5 -24.4 -24.3 -24.2 -24.1 -23.9 -22.3 -21.0 -19.9 -26.5 -26.3 -26.2 -26.0 -26.0 -25.9 -25.8 -25.7 -25.6 -25.5 -25.5 -25.5 -25.4 -25.4 -25.0 -24.9 -24.4 148

32 33 34 Amostra 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61

Floral Floral Floral Origem Botnica Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Eucalipto Sem origem Sem origem Sem origem Sem origem Sem origem Sem origem Sem origem

-23.4 -21.9 -12.9 d13C -26.7 -26.6 -26.5 -26.1 -26.1 -26.0 -25.9 -25.9 -25.8 25.7 -25.7 -25.6 -25.5 -25.4 -24.8 -24.7 -24.1 -23.6 -23.5 -17.6 -23.3 -25.9 -24.3 -26.4 -24.8 -25.1 -257

149

Tabela 3. Valores mdio de 13C (), desvio padro, nmero de amostras e valores mnimos e mximos de amostras de mel agrupadas de acordo com as suas origens botnicas. Geral significa valor mdio geral para todas as amostras e Geral (-

laranja) significa o valor mdio de todas as amostras menos as 12 amostras de mel de laranja (ver texto para detalhar). Mel Laranja Floral Eucalipto Sem origem Geral Geral (-laranja) 13C -24.8 -25.5 -25.5 -25.1 -25.3 -25.4 Desv. padro 1.3 0.7 0.9 1.1 1.0 0.9 Nmero 12 18 19 07 56 44 Mnimo -26.7 -26.5 -26.7 -26.4 -26.7 -26.7 Mximo -22.3 -23.4 -23.5 -23.3 -22.3 -233

10.2.2. Conhaque e brandies

"Brandy" definido como uma bebida destilada de vinho ou suco de uva fermentado. Quando o brandy feito na regio da Frana, conhecida como Conhaque, a bebida leva o mesmo nome. Ento, todo Conhaque um brandy, mas nem todo brandy um Conhaque. Na legislao brasileira existem dois tipos de brandy: "conhaque de gengibre", que pode ser elaborado da fermentao e destilao de qualquer planta e outro

denominado "brandy", que deve ser feito exclusivamente de variedades de uva, uma planta C3. O lcool mais barato produzido no Brasil o lcool de cana, que uma gramnea C4. Portanto, o brandy, por razes econmicas, pode ser adulterado com lcool de cana. importante ressaltar que no caso de "conhaque de gengibre", o uso de lcool de cana no uma adulterao, uma vez que a legislao permite que se utilize qualquer tipo de lcool. Ns determinamos a composio isotpica de 23 amostras de brandy feitas no Brasil, 11 amostras de brandy elaboradas em outros pases e 28 amostras de conhaque de gengibre (Fig 10.3).

150

-30 -25

C ( /oo )

-20 -15 -10 -5 0 Brandy internacional Brandy nacional Conhaque-degengibre

Figura 10.3. Mdia e desvio padro dos valores de 13C de amostras de brandies elaborados em outros pases (internacional) e no pas (nacional) e de amostras de conhaque de gengibre.

13

Nota-se claramente que existem 3 grupos distintos de amostras na Figura 3. Os valores menores foram observados nos brandies internacionais e nas maiores amostras de conhaque de gengibre. Esse fato indica que os conhaques de gengibre no Brasil so feitos exclusivamente de lcool de cana. Enquanto os brandies internacionais so

feitos muito provvel exclusivamente de uva. No se pode dizer o mesmo quanto aos brandies brasileiros. Os valores de 13C dessas amostras foram intermedirios entre os valores de brandies internacionais e conhaque de gengibre, sugerindo uma mistura de lcool de uva com lcool de cana. No preciso mencionar que essas diferenas foram estatisticamente significativas. Reforando a suspeita sobre adulterao em amostras de brandies brasileiros, existe o fato que houve uma correlao positiva entre a porcentagem de uva e o preo do produto. Ou seja, quanto mais uva na bebida, maior foi o seu preo. 10.2.3. Vinho 151

O vinho deve ser uma bebida fermentada da uva, que como sabemos uma planta C3. Uma adio clssica ao vinho de acares comerciais adicionado fermentao, quando as uvas que no contm teores naturais de acares suficientemente elevados para promover uma fermentao adequada. Esse processo denominado "chaptalizao". Como no Brasil o acar mais barato o acar de cana, mais uma vez temos o paradigma C3 x C4. importante salientar que a legislao brasileira permite que seja adicionada uma quantidade de acar suficiente para elevar a graduao alcolica do vinho para 3 GL. No continente europeu, os pases da comunidade europia mantm um banco de vinhos, e vrios tipos de anlises so feitas nessas amostras, dentre elas tambm determinada a composio isotpica. Em alguns pases, como a Itlia, o processo de chaptalizao totalmente proibido. A seguir mostramos alguns resultados obtidos desse banco de dados. As mdias gerais para cada pas durante 3 anos (1991 a 1993) esto resumidas na Tabela 4.

Tabela 4. Mdia dos valores de 13C de vinhos Italianos, franceses e alemes, elaborados nos anos de 1991, 1992 e 1993. Rosmann et al. (1996).

Pas Itlia Alemanha Frana

1991 -25.81.2 -26.21.2 -26.81.1

1992 -25.81.2 -27.70.9 -27.80.8

1993 -25.81.2 -26.71.3 -26.61.2

Nota-se uma certa variabilidade anual nos vinhos alemes e franceses. Mas, de qualquer forma, nota-se claramente que existe um inequvoco sinal de planta C3 nos valores de 13C dos vinhos europeus. No Brasil, analisamos um grande nmero de amostra de vinhos e produtos relacionados. Comeamos pelas anlises de variedades de uvas vinferas utilizadas na vinicultura nacional. Com essas uvas fizemos fermentaes experimentais

concomitantes, adicionando-se em cada uma delas uma quantidade de acar 152

suficiente para elevar o teor alcolico do vinho para

cerca de 1 a 1,5 pontos

percentuais de lcool. Paralelamente determinamos os valores de 13C no lcool formado durante as fermentaes (Fig. 10.4). Nota-se claramente que os istopos foram capazes de "enxergar" as adies de acar de cana. Houve uma correlao bastante significativa entre a quantidade de lcool formada e os valores de 13C deste lcool (Fig. 10.4). Um segundo experimento que realizamos foi seguir a marcha de duas fermentaes distintas: uma sem adio de acar e a outra com uma adio de acar de cana suficiente para elevar o teor de lcool produzido para aproximadamente,

cerca de 3%, como permite a legislao brasileira. A cada intervalo de tempo regular amostras de mosto de cada fermentao eram recolhidas, o lcool produzido era destilado e seus valores de 13C eram determinados (Fig. 10.5).

-20
13 o oo C-etanol ( / )

-22 -24 -26 -28 -30 9

y = 1.45x - 41.6 r2 = 0.93

y = 1.10x - 38.6 r2 = 0.96

10

11

12

13

14

15

Teor alcolico (%)

Figura 10.4. Valores de 13C do etanol produzido durante fermentaes experimentais com adies crescentes de acar de cana. Cada ponto representa a mdia de 3 repeties das seguintes adies de acar: 0g; 2,89g; 8.63g; 14.37g e 20.11g, que

153

produziram as seguintes graduaes alcolicas mdias: 9.2%, 10.2%, 11.1%, 13.3%, 14.4%. As barras representam os desvios padro das mdias

Note como logo nas primeiras horas da fermentao ocorre uma abrupta elevao dos valores de 13C do lcool produzido, indicando que o acar de cana adicionado prontamente consumido pelas leveduras da fermentao (Fig. 10.5). Essa fermentao experimental tambm nos demonstrou que o lcool produzido das fermentaes em que foram adicionadas quantidades de acar suficiente para aumentar a graduao alcolica para 3% devem ter valores de 13C entre -23 a -21.

-22 -23 C-etanol ( /oo ) -24 -25 -26 -27 -28 -29 0 20 40 60 80 100 Tempo (horas)
Figura 10.5. Valores de 13C do lcool produzido durante a fermentao de mosto sem adio de acar de cana (crculo branco) e com adio de acar para elevar o teor alcolico do mosto para cerca de 3% (crculo cinza). As barras representam os desvios padro dentre 3 repeties.

13

154

Aps esses experimentos determinamos a composio isotpica de um nmero elevado de amostras de vinhos adquiridas no mercado. A Tabela 5 mostra os valores mdios de 13C dessas amostras, que foram agrupadas de acordo com o tipo do vinho. Tabela 5. Valores de 13C de amostras de uva, mosto, vinho padro eleaborado pela Embrapa e vinhos nacionais agrupados conforme o tipo do vinho. 13C () Mdia Uva Mosto Vinho padro Embrapa Tinto seco Tinto demi-sec Tinto suave Branco seco Branco demi-sec Branco suave Rose suave Espumante Brut Espumante Asti Espumante Demisec Espumante Doce -26.7 -27.8 -27.5 -23.4 -23.7 -23.5 -22.3 -21.3 -21.5 -21.2 -20.5 -19.4 -18.3 -15.1 Desv.-pad. 0.6 0.4 0.6 2.0 1.1 1.5 2.1 2.9 2.3 2.9 1.2 2.9 1.3 2.1 N 11 10 12 109 11 21 39 10 40 10 18 4 8 3

interessante notar que a uva, o mosto e o vinho elaborados pela Embrapa, sem nenhuma adio de acar de cana, tiveram valores de 13C semelhantes aos vinhos europeus, ou seja, exibindo valores tpicos de plantas C3. Por outro lado, os valores mdios de 13C dos vinhos tintos e brancos nacionais foram valores tpicos de fermentaes onde houve adio de acar de cana. Esses valores encontram-se dentro da faixa de -23 a -21 que so valores aceitveis de adio de acar, ou seja, suficiente para elevar a graduao alcolica do vinho para 3%, conforme reza a legislao.

155

Os valores mdios de 13C dos espumantes, so valores maiores que 20,5 a -15, indicando uma adio de acar maior que o permitido. Observando-se um histograma de freqncia de todos os valores de vinhos tintos e brancos, e no se incluem vinhos espumantes, nota-se claramente que a

mdia dos valores indica que vrias vincolas vm respeitando os valores estabelecidos por lei (Fig. 10.6). No entanto, algumas adicionam uma quantidade de acar maior da que permitido. Interessante que algumas outras vincolas produzem vinho sem

nenhuma adio de acar de cana, demonstrando claramente que possvel a produo deste tipo de vinho em nosso pas.

40 35 30

Nmero de observaes

25 20 15 10 5 0 -29 -27 -25 -23 -21 -19 Tinto -17 -15 -13 -29 -27 -25 -23 -21 -19 -17 -15 -13

Branco

1 3C-etanol (o /o o )
Figura 10.6. Distribuio de valores do 13C do etanol de amostras de vinhos nacionais tintos e brancos.

156

10.2.4. Cerveja A maioria das fermentaes que produzem cerveja incluem no somente cereais como a cevada ou o trigo, mas tambm outros cereais como o milho. Como sabemos a cevada e o trigo so plantas que seguem o ciclo fotossinttico C3, enquanto o milho segue o ciclo fotossinttico C4. Portanto, com o emprego da metodologia isotpica trivial distinguir na cerveja a presena de milho na sua elaborao. Juntamente com colegas dos Estados Unidos, analisamos um grande nmero de marcas de cervejas de vrios pases. Para detalhes ver Brooks et al., 2002. A mdia dos valores de 13C das cervejas europias foi de -25.6 1.5, enquanto que a mdia dos valores de 13C das cervejas brasileiras foi de -19.7 2.4. Sabemos que a cerveja elaborada da cevada e do lpulo. A anlise isotpica de vrios tipos de cevada resultou em um 13C mdio igual a -25.2 0.7, enquanto o valor mdio do lpulo foi de -24.9 1.4. Valores tpicos de plantas que seguem o ciclo fotossinttico C3. Logo, valores em torno de -19.7 indicam a presena de milho na fermentao, que um adjunto comumente utilizado na cervejaria. importante esclarecer, no entanto, que essa utilizao permitida pela legislao brasileira at um mximo de 49%, os restantes 51% devem ser necessariamente lcool produzido pela fermentao da cevada. Caso outro cereal, como o milho, seja utilizado em maior proporo deve conter no rtulo algo como "cerveja de milho". Atravs de um simples modelo de mistura pode se determinar a porcentagem de milho presente em uma determinada cerveja . Assim teremos a seguinte frmula:

13C cerveja 13C cevada C 4 (%) = 13 C milho 13C cevada

........................................................(10.1)

Onde 13Ccerveja a composio isotpica da cerveja, 13Ccevada a composio isotpica mdia da cevada (-25.2) e 13Cmilho a composio isotpica do milho (12.5).

157

Utilizando o 13C mdio das cervejas brasileiras (-19.7) na equao acima, a proporo mdia de milho presente nas cervejas brasileiras seria de aproximadamente 44%. Portanto, permitido pela legislao brasileira. A Figura 10.7 mostra um histograma com os valores de 13C dentre cervejas produzidas na Europa, Canad, Estados Unidos e Brasil. Nota-se uma distribuio unimodal dos valores de 13C de cervejas produzidas na Europa. Nos outros pases nota-se uma distribuio bimodal dos valores de 13C. Com valores concentrados ao redor de -27 a -25 e entre -19 a -17. Particularmente as cervejas brasileiras, na sua maioria agrupam-se ao redor -21 a -17 e poucos valores entre -27 a -25, indicando que a maioria das cervejas brasileiras levam alguma proporo de milho em sua composio.
26 24 22 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0

Nmero de observaes

-29 -27 -25 -23 -21 -19 -17 -15 -13 Eu ro pa

26 24 22 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0

-29 -27 -25 -23 -21 -19 -17 -15 -13 C an ad

-29 -27 -25 -23 -21 -19 -17 -15 -13 EU A

-29 -27 -25 -23 -21 -19 -17 -15 -13 B ras il

13C (o/oo)
Figura 10.7. Distribuio de valores de 13C de amostras de cervejas produzidas em pases da Europa, no Canad, Estados Unidos e Brasil. Adaptado por Brooks et al. (2003). 158

Utilizando-se a equao (1) e os valores de 13C de cada cerveja foram calculados os percentuais de milho na elaborao das amostras (Fig. 10.8). Note que no Brasil a maioria das amostras se encontram ao redor de 40 a 60%. Como a metodologia isotpica neste caso no precisa a ponto de assegurar uma diferena menor que 10% (Brooks et al., 2002), razovel afirmar que a maioria as cervejas brasileiras encontram-se dentro da legislao. Pelo contrrio, na Europa, a maioria das cervejas no levam adio de milho, sendo a cevada, ou em certos casos especfico, o trigo o cereal mais utilizado. Nos Estados Unidos h vrias cervejas que no utilizam milho como adjunto. Essas cervejas, na sua maioria, so fabricadas em pequenas cervejarias, que tm uma produo limitada. Por outro lado, as grandes cervejarias americanas tambm utilizam milho como adjunto. As cervejas produzidas no Canad seguem uma distribuio semelhante s cervejas produzidas nos Estados Unidos. Um bom nmero de cervejas sem adio de milho e vrias com adies entre 30 a 40% (Fig. 10.8).

159

Nmero de observaes

28 26 24 22 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

Eu ro p a
28 26 24 22 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

C an ad

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

EU A

B ras il

Pe rce ntual de m ilho com o adjunto na e laborao da ce rve la

Figura 10.8. Distribuio dos valores do percentual de milho utilizado como adjunto na elaborao de cerveja em pases da Europa e no Canad, Estados Unidos e Brasil. Adaptado por Brooks et al. (2002).

160

Bibliogrficas recomendadas

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Martinelli LA, Moreira MZ, Ometto JPHB, Alcarde AR, Rizzon LA, Stange E, Ehleringer JR (2003) Stable Carbon Isotopic Composition of the Wine and CO2 Bubbles of Sparkling Wines: Detecting C4 Sugar Addition. Journal of Agricultural and Food Chemistry 50: 6413-6418. Pissinato L, Martinelli LA, Victoria RL, Camargo PB (1999) Using stable carbon isotopic analyses to access the botanaical origin of ethanol in Brazilian brandies. Food Research International 32: 665-668. Oliveira AC, Salimon CI, Calheiros DF, Fernandes FA, Vieira I, Charbel LF, Pires LF, Salomo SMB, Nogueira SF, Vieira S, Moreira MZ, Martinelli LA, Camargo PB (2002) Istopos estveis e produo de bebidas: de onde vem o carbono que consumimos? Boletim da Sociedade Brasileira de Cincia e Tecnologia de Alimentos. 22(3): 285-288. Pupin AM, Dennis MJ, Parker I, Kelly S, Bigwood T, Toledo MCF (1998) Use of isotopic analyses to determine the authenticity of Brazilian orange juice (Citrus sinensis). J. Agric.Food Chem. 46: 1369-1373. Remaud A, Guillou C, Vallet C, Martin GJ (1992) A coupled NMR and MS isotopic method for the authentication of natural vinegars. Fresenius J. Anal. Chem. 342: 327-331.

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Rossmann A, Schmidt H L, Reniero F, Versini G, Moussa I, Merle MH (1996) Stable carbon isotope content in ethanol of EC data bank wines from Italy, France and Germany. Z. Lebensm.Unters. Forsch 203: 293-301. Rossi NF, Martinelli LA, Lacerda THM, Victoria RL, Camargo PB (1999) Adulterao de mel pela adio de acares comerciais utilizando-se a composio isotpica do carbono. Revista Brasileira de Tecnologia de Alimentos 19: 199-204.

162

163 Captulo 11 - Hidrologia Isotpica 11.1. Introduo

Os istopos da molcula de gua utilizados em estudos hidrolgicos so dois: o oxignio e o hidrognio. No primeiro caso, a relao utilizada
18

O/16O, e no

segundo 2H/1H, em que o 2H conhecido como deutrio. O padro utilizado nos dois casos o VSMOW, uma mistura de gua dos cinco oceanos na qual foi atribudo o valor 0. Continuamos com a notao "delta por mil" que passa a ser expressa por 18O para o oxignio e D para o hidrognio. O estudo do ciclo desses istopos na natureza se confunde com o prprio estudo do ciclo da gua. Esse ciclo basicamente regido por dois fenmenos fsicos: a condensao e a evaporao. Na condensao a chuva formada por uma determinada massa de vapor d'gua contida em uma nuvem. Por outro lado, a evaporao o processo inverso, na qual a gua do estado lquido passa para o estado vapor. Na maioria das vezes, observamos que mudanas de fase, como as descritas acima, levam a um fracionamento isotpico. Ou seja, uma das fases ficar isotopicamente mais leve, enquanto a outra ficar isotopicamente mais pesada. Para os istopos da gua no poderia ser diferente, assim existe um determinado fracionamento isotpico entre as fases envolvidas. Comecemos pelo estudo do fracionamento pertinente ao processo de condensao. Como existe um fracionamento na passagem da fase gasosa para a fase lquida, podemos express-lo atravs da seguinte equao:

= 18 Ovapor 18 Ochuva ........................................(11.1)

Ou

= Dvapor Dchuva .........................................(11.2)

Como vimos at agora, o fracionamento isotpico depende da temperatura. A tabela abaixo ilustra a variao do fracionamento isotpico entre as duas fases em funo da temperatura.

164

Tabela 1. Fracionamento isotpico entre a fase gasosa e lquida em funo da temperatura onde
D

o fracionamento em relao ao deutrio e

18

fracionamento em relao ao oxignio.

t (C) 100 80 60 40 20 0 -10 -20

D 29 37 46 60 79 106 123 146

18 3.3 4.5 5.8 7.4 9.1 11.1 12.3 13.5

D /18 8.8 8.2 7.9 8.1 8.7 9.5 10 10.7

Portanto, quanto menor a temperatura, maior ser o fracionamento entre a fase gasosa e lquida. A dependncia do fator de enriquecimento em funo da temperatura para cada istopo descrita abaixo:

76,25 10 3 24,84 10 6 + D = 52,61 T T 2 3,21 103 1,53 103 O = 6,64 + T T 2

...................................(11.3)

..............................................(11.4)

Onde T a temperatura em graus Celsius. A Figura 11.1, que segue o modelo de Railegh, mostra a evoluo isotpica do vapor d'gua na nuvem e da chuva formada subsequentemente. Como a gua da chuva constantemente removida, o sistema aberto, assim sendo, a gua da chuva e o vapor d'gua vo se tornando cada vez mais empobrecidos em tomos de
18

O e 2H.

165

Figura 11.1. Esquema ilustrando as alteraes dos valores de 18O em relao frao residual de vapor, segundo a equao de Raylegh.

A condensao nas nuvens ocorre em condies de equilbrio ??? Na maioria das vezes que se mediu a composio isotpica do vapor d'gua e da precipitao, a diferena entre os dois era prxima do valor de para uma dada temperatura (Fig. 11.1). Portanto, parece que o processo de condensao ocorre em condies de equilbrio e pode ser razoavelmente estimado pelo modelo de Raylegh (equao 1). Note o exemplo da Figura 11.2, ainda que o vapor d'gua tenha sido coletado diariamente de forma contnua das 9 s 15 horas, e as

amostras de chuvas de maneira mais espordica, devido prpria caracterstica aleatria desses eventos, houve uma boa concordncia entre os valores de estimados por 18Ovapor - 18Ochuva e aqueles extrados da Tabela 1. Outro fenmeno importante no ciclo hidrolgico a evaporao, ou seja, a passagem da gua de um estado lquido para um estado gasoso. Caso esse fenmeno ocorra em condies de equilbrio, os mesmos valores de fracionamento utilizados na condensao sero vlidos na evaporao.

166

0 -2

O ( /oo ), ( /oo )

-4 -6 -8 -10 -12 -14 -16 -18 Vapor Chuva

18

Figura 11.2. Valores de 18O em amostras de vapor dgua e chuva coletadas na regio de Belm, regio Amaznica por Matsui et al. (1979). A linha preta grossa representa os valores de calculados por 18Ovapor - 18Ochuva. A rea delimitada pela cor cinza claro representa os valores de para temperaturas entre 20C a 30C estimados pelos dados da Tabela 1.

No entanto, sabemos que na maioria dos casos a evaporao ocorre em condies de no-equilbrio, principalmente devido presena de vapor d'gua na atmosfera, que no permite a ocorrncia da evaporao em condies de

equilbrio. A tendncia geral que a fase lquida remanescente torna-se isotopicamente mais pesada, enquanto que a fase vapor torna-se mais leve. Nesse caso Craig and Gordon (1953) derivaram uma outra equao muita mais complexa que a de Raylegh, em que fazem parte estimativas sobre difuso turbulenta na atmosfera e outras complicaes. Essa nova equao nos fornecer a mudana na composio isotpica de um corpo de gua durante o processo de evaporao.

go N ov Fe v M ai A go N ov Fe v M ai O ut Ja n A br Ju l O ut Ja n A br

167

h( g L ) + + (1 h) L = log f 1 h

....................................(11.5)

Obviamente essa equao vlida tanto para oxignio como para hidrognio. No entanto, como j vimos, os valores de so distintos para cada istopo. Assim tambm o o valor de , que para o oxignio vale 16 e para o deutrio vale 32. O parmetro h a umidade relativa do ar, L e g so prefixos que indicam as fases lquidas e gasosas, respectivamente e f a frao de vapor remanescente. Claramente, muito mais complicado trabalhar com evaporao em relao condensao, que segue equao (11.1).

11. 2. A reta meterica mundial e o valor d (excesso de deutrio)

Agora j conhecemos as equaes que regem a composio isotpica resultante de dois processos, o de condensao e o de evaporao. No processo de condensao, ao passar da fase de vapor para lquido, o oxignio e o deutrio o fazem atravs de um determinado fator de fracionamento que varia com a temperatura. No entanto, a relao entre esses fatores aproximadamente constante e em torno de 8 (ver Tabela 1). Assim sendo, teremos que:

D 8 ............................................................(11.6) O
Supondo-se que um vapor d'gua a 20C tenha a seguinte composio isotpica: 18O = -1 e D = -8. Caso o mesmo se condense em equilbrio a composio isotpica da chuva ser igual a: 18O = (-1 + 9.1) = 8.1 e D = (-8 + 79) = 71. Note que para a fase vapor a relao D/18O igual a 8. O mesmo verdadeiro para a chuva, ou seja, a fase lquida, a relao D/18O igual a 8.7. Caso as mesmas operaes sejam repetidas para diversas temperaturas, conclui-se que a relao D/18O se manter em torno de 8. Assim:

168

D = 8 18 O ............................................(11.7)
Graficamente essa equao representa uma reta de inclinao igual a 8 (reta A representada na Figura 11.3). O que ocorre com essa reta quando um determinado corpo d'gua sofre evaporao? Em condies de no equilbrio, a inclinao da reta alterada, passando a ser importante a umidade local, pois em ltima anlise esse parmetro que determina a taxa de evaporao:

S=

h(DV DCH ) + D + (1 h) D h( 18 OV 18 OCH ) + O + (1 h) O

...............................(11.8)

Nesses casos o valor da inclinao S passa a ser menor do que 8, pois a evaporao afeta menos o deutrio e mais o oxignio. Assim, inclinaes menores que 8 identificam linhas de evaporao (reta LE representada na Figura 11.3). Note que sobre a reta D = 8*18O podemos imaginar um lago que esteja perdendo gua por evaporao (Fig. 11.3). O Iquido remanescente ser enriquecido em
18

O e D, no entanto esse lquido em sua nova composio no ser alocado

sobre a linha D = 8*18O, pelo fato de a evaporao ter ocorrido em condies de no equilbrio. Assim o lquido remanescente ser alocado sobre a linha de evaporao, onde a inclinao menor que 8 que dada pela equao (11.8) (reta LE representada na Figura 11.3). 0 vapor resultante, para manter o balano de massa, ser mais leve que o lago e ocupar a regio oposta ao lquido na chamada linha de evaporao (Figura 11.3).

169

18O
chuva
d = 10

LE

vapor dgua

8*

18

10 8*
18

lago

lquido remanescente

Figura 11.3 Esquema ilustrando a reta meterica mundia (B), a reta que a deu origem (A) e uma linha de evaporao (LE). Para detalhes ver o texto.

Suponhamos que esse vapor na atmosfera seja condensado e produza uma nova chuva (reta B representada na Figura 11.3) Como a condensao do vapor ocorre dentro do equilbrio, o valor da chuva ser dado por:

chuva = vapor + ..............................................(11.9)

Assim, a chuva, em relao ao vapor que lhe deu origem, plotar em uma reta de inclinao igual a 8, paralela a reta D = 8*18O, e separada do vapor pelo valor

Ora, se a nova reta formada estiver acima da reta D = 8*18O, a sua

interseo com o eixo Y ser maior que a reta anterior, portanto ser maior que 0. Esta nova reta pode ser expressa pela seguinte equao: D = 8*18O + d (reta B representada na Figura 11.3).

170 Imagine uma reta em que sua inclinao seja igual a 8 e a sua interseo com o eixo Y seja igual a 10, logo a nova reta ser:

D = 8 18 O + 10 .........................................(11.10)
As chuvas coletadas nos mais diferentes locais do mundo caem sobre essa reta (Fig. 11.4).

100
18 o O ( /oo)

50 0

-40

-30

-20

-10 -50 -100

10

y = 8.1x + 9.9 2 r = 0.99

-150 -200 -250 -300

o D ( /oo)

Figura 11.4. Relao entre valores de 18O e D de amostras de gua de chuva coletadas em vrios locais do mundo de 1978 a 2001 pela Agncia Internacional de Energia Atmica (AIEA).

O fato da reta meterica mundial ter uma interseco prxima de 10, significa que a evaporao nos oceanos ocorre em condies de no-equilbrio. Caso nenhum processo altere a composio da chuva depois de formada, a sua composio isotpica variar em cima da reta meterica mundial. O valor "d", chamado de excesso de deutrio calculado atravs da seguinte frmula:

d = D 18O ...........................................(11.11)

171

O valor d pode ser interpretado como a interseco de um ponto no diagrama D x 18O que obrigatoriamente teria uma inclinao igual a 8. Valores d maiores que 10, pelo mesmo raciocnio que fizemos para chegar reta meterica mundial, seria indicativo da presena de uma gua que j tenha passado por sucessivos processos de evaporao (Fig. 11.3). Na Figura 11.5 vemos a Regio Norte do Brasil com as estaes de coletas de gua de chuva. Nota-se que, sem exceo, todos os valores de excesso de deutrio (d) so maiores que 10. Esse fato se deve imensa rea coberta por gua na regio Amaznica sujeita evaporao, no somente rios, lagos e plancies inundveis, mas tambm devido grande quantidade de gua que fica retida nas copas das rvores.

Figura 11.5. Regio Norte do Brasil mostrando as estaes de coleta da rede da AIEA. Para cada estao so apresentados nos quadrados de cima para baixo o valor da inclinao da reta 18O x D, o coeficiente de correlao da reta e o valor d. Adaptado por Martinelli et al. (1996).

172 10.3. Composio isotpica das precipitaes no globo terrestre

Agora que sabemos como a condensao funciona, conheceremos a composio isotpica mdia da precipitao no globo. A Agncia Internacional de Energia Atmica (AIEA) montou um vasta rede de coleta de amostras de chuva a fim de medir sua composio isotpica. O Cena participa dessa rede, sendo responsvel pelas coletas de amostras de gua de chuva aqui no Brasil. Dados sobre a rede podem ser obtidos em: http://isohis.iaea.org.

Figura 11.6. Valores mdios de D () ponderados pela quantidade de precipitao de amostras de chuvas coletadas no globo terrestre. Adaptado de www. isohis.aiea.org.

A Figura 11.6 e 11.7 ilustram a mdia anual ponderada pela quantidade de precipitao dos valores de D e 18O para o mundo, obtida pelas extrapolaes dos valores obtidos nas estaes da rede da AIEA. Podemos observar que os valores de 18O e D das chuvas mostram variaes em vrias partes do globo. Por exemplo, os valores de 18O vo desde 0 at -34. Nota-se que uma das tendncias mais claras nesta figura que os valores de 18O so maiores nos trpicos e menores em direo s regies polares. Esse efeito conhecido como "efeito da latitude" e encontra-se ilustrado na Figura 11.8.

173

Figura 11.7. Valores mdios de 18O () ponderados pela quantidade de precipitao de amostras de chuvas coletadas no globo terrestre. Adaptado por www. isohis.aiea.org.

Na Figura 11.8 so comparadas as composies isotpicas da cidade de Manaus, situada aproximadamente a 3S e a cidade de Vienna, na ustria, situada em uma latitude aproximada de 48N. Nota-se claramente que os valores isotpicos das amostras de chuvas de Viena so menores que a maioria dos valores encontrados para as chuvas coletadas em Manaus (Fig. 11.8). A principal causa para o efeito de latitude a temperatura, como vimos anteriormente, o fracionamento entre o vapor e a chuva depende da temperatura. O fracionamento ser maior, quanto menor for a temperatura. Um outro fenmeno observado atravs da rede foi que estaes de coleta no interior dos continentes tinham valores isotpicos mais negativos que estaes localizadas em ilhas no meio do oceano.

174

O ( /oo)
-15 -10 -5

18

20 0 0 -20

Manaus -40 -60 -80 -100

D ( /oo)
o

Viena

Figura 11.8. Relao 18O x D de amostras de chuva coletadas na cidade de Manaus, regio Amaznica e em Viena, capital da ustria (www.isohis.iaea.org).

A provvel explicao para esse fenmeno seria o deslocamento da massa de ar em direo ao interior do continente. Pela equao de Raylegh, a massa de vapor e, conseqentemente, a chuva, ficariam cada vez mais leve. Um outro motivo seria, que a massa de gua ao se mover em direo ao interior do continente receberia vapor d'gua de composio isotpica mais leve, devido aos processos de evaporao que ocorrem nos continentes. Esse efeito chamado "efeito de continentalidade". A Figura 11.9 ilustra o efeito de continentalidade comparando os valores mdios de 6180 de amostras de gua de chuva coletadas em Belm e Manaus entre os perodos de 1969 a 1987. Nota-se que a mdia dos valores em Manaus quase 2 menor que em Belm.

175
-6.0 -5.0 -4.0 -3.0 -2.0 -1.0 0.0 Manaus Belm

Figura 11.9. Mdia dos valores de 18O de amostras de chuva coletadas em Manaus em Belm entre 1969 a 1987.

18 o O ( /oo )

Um terceiro efeito, conhecido com "efeito de quantidade" ("amount effect") diz que as chuvas mais intensas apresentam valores menores de 18O e D, ou seja ocorre um efeito inverso em relao ao volume de gua precipitada. A variao sazonal dos valores de 18O da precipitao em Manaus um bom exemplo desse efeito. Nos meses mais secos, os valores tornam-se mais elevados, enquanto nos meses mais midos h um decrscimo acentuado nos valores isotpicos (Fig. 11.10).

As principais causas para o efeito de quantidade seriam:

1) Com uma maior quantidade de gua sendo condensada,

haveria um

resfriamento mais elevado, aumentando o valor do fracionamento isotpico entre a chuva e o vapor que lhe deu origem; 2) Na poca seca h uma maior intensidade de troca isotpica com o ar atmosfrico, enriquecendo isotopicamente as partculas de chuva; 3) Na poca seca, as gotas de chuvas podem ser evaporadas no seu percurso at o cho. Esse fato causa tambm um enriquecimento das gotas de chuva.

176

-1 -2 -3
O ( /oo )
o

l Ag o Se t O ut No v De c Ja n Fe v M ar Ab r M ai

Ju

Ju

350 300 250 200 150 100 50 0 Precip. 18

P (mm)

-4 -5 -6 -7 -8

Figura 11.10. Valores mdios mensais de 18O de precipitao de amostras coletadas na cidade de Manaus entre 1972 a 1986. Adaptado por Victoria et al. (1991). Um outro efeito seria o chamado "efeito de altitude". Os valores de 18O e D tornam-se mais leves com o aumento da altitude, devido a uma reduo na temperatura em relao altitude. Esse efeito pode ser demonstrado se utilizarmos a composio isotpica de gua de rios em vez de gua de chuva. Utilizando-se os dados publicados por Salati et al. (1980) sobre a composio isotpica de rios da bacia Amaznica, nota-se claramente que os rios andinos so empobrecidos em O-18 quando comparados com os rios pertencentes s terras baixas da Amaznia (Fig. 11.11).

18

177

-2 -4

O ( /oo )

-6 -8 -10 -12 -14 -16 -18 85 75 65 Longitude ( W)

o

18

55

45

Figura 11. 11. Variao longitudinal de valores de 18O de amostras de gua de rios da regio Amaznica. Adaptado por Salati et al. (1980).

11.4. Hidrologia isotpica na Amaznia: alguns exemplos

O atual laboratrio de Istopos Estveis do CENA,

antigamente

denominado de laboratrio de Hidrologia Isotpica, teve uma atuao destacada no estudo do ciclo da gua na bacia Amaznica. Dessa atuao foram publicados uma srie de artigos, culminando com o seminal artigo publicado por Salati et al.(1979). Nesse artigo foi elegantemente demonstrado que a floresta amaznica seria responsvel por, pelo menos, metade da precipitao gerada na regio, sendo a outra metade de origem ocenica. Esse artigo demonstrou claramente a importncia da reciclagem da gua na Amaznia. As rvores funcionariam como reatores, os quais retirariam gua do solo e a retornariam para a atmosfera. Logo, esse artigo foi um catalisador para futuros exerccios de modelagem sobre os efeitos da retirada da vegetao sobre o clima da regio Amaznica. As previses de Salati et aI. (1979) foram confirmadas em um estudo posterior publicado em 1991 por Victoria et al. (1991). Esse ltimo estudo de baseando em uma srie mais longa de dados, confirmou a importncia da

178 evaporao d'gua na regio. Primeiramente, atravs de dois diagramas 18O vs 13D, um contendo os dados de chuva coletados na poca seca e outro contendo dados coletados durante a poca de chuva (Fig. 11.12). A equao de reta resultante do perodo de seca teve um valor d de interseco com o eixo Y aproximadamente igual a 13 , enquanto o mesmo valor obtido durante o perodo chuvoso foi aproximadamente igual a 10. O valor d>10 obtido no perodo seco indica que durante esse perodo os processos de evaporao so de magnitude tal que elevam significativamente este valor.
(A) 40 O ( /oo)
18 o

20 0 D ( o/oo )
o

-14

-12

-10

-8

-6

-4

-2 -20 0 -40 -60 -80

y = 8.2x + 13.4 R2 = 0.91 (B) O ( /oo) -14 -12 -10 -8 -6 -4

18 o

-100

20 0 -2 -20 -40 -60 0 2 D ( /oo )

y = 7.9x + 10.2 2 R = 0.97

-80 -100

Figura 11.12. Relao 18O x D de amostras de chuva coletadas na cidade de Manaus. (A) perodo seco, junho a novembro de 1972 a 1986. (B) perodo chuvoso, dezembro a maio de 1972 a 1986. Adaptado por Victoria et al. (1991).

179 O efeito da sazonalidade na evaporao da gua das chuvas e conseqente sazonalidade dos valores d pode ser observada na Figura 11.13 Nos meses mais secos, o valor d adquire valores acima de 10, em torno de 13 a 15. Entre novembro e maro esses valores decrescem e variam de 8 a 10. A partir de abril se elevam novamente para algo em torno de 11 a 12.

15 14
valor "d" ( /oo )

350 300 250 200 150 100 50 0

P (mm)

13 12 11 10 9 8

Figura 11.13. Valores mdios mensais de excesso de deutrio (d) e da precipitao de amostras coletadas na cidade de Manaus entre 1972 e 1986. Adaptado por Victoria et al. (1991).

Para que haja evaporao, obviamente, deve haver uma fonte de gua a ser evaporada. As plancies de inundao da Amaznia no perodo de cheia podem atingir uma rea inundada equivalente ao Estado de So Paulo, ou seja, cerca de 250.000 km2. Nessas plancies existem centenas de lagos de vrzea que mesmo na seca formam um imenso espelho d'gua. Devido importncia desses lagos como fontes de gua evaporada, acompanhamos as variaes isotpicas sazonais desses lagos (Martinelli et al., 1986). De particular interesse o lago Grande, situado prximo cidade de Santarm, onde tivemos a oportunidade de acompanhar a composio isotpica desse lago durante todo um ano hidrolgico (Fig. 11.14).

Ju n Ju Ag l o Se t O ut N ov De c Ja n Fe v M ar Ab r M ai
Precip. "d"

180
L.Sal -S.Nicolau Ig. Fazenda bidos nvel do rio Amazonas

1 0 -1 -2 O ( /oo )
o

800 700 600 500 400 300

Nivel do rio Amazonas (cm)

-3 -4 -5 -6 -7 -8
20/8/2001 20/2/2002 20/4/2002 20/6/2002 20/8/2002 20/2/2003 20/4/2003 20/10/2001 20/12/2001 20/10/2002 20/12/2002 20/6/2003

18

200 100

Figura 11.14. Variao sazonal dos valores de 18O - lago do Sal, na localidade de So Nicolau; no igarap da Fazenda e no rio Amazonas amostrado prximo cidade de bidos, no Estado do Par. A linha negra contnua representa a variao no nvel dgua do rio Amazonas na localidade de bidos. Nota-se claramente um aumento acentuado dos valores de 18O durante a poca seca, sugerindo claramente a ocorrncia de um processo intenso de evaporao (Fig.11.14). Essa possibilidade confirmada pelo diagrama 18O vs D, no qual uma clara linha de evaporao formada durante o perodo de seca (Fig. 11.15).

181
20

O ( /oo)

18

10 0

-8

-6

-4

-2 -10 -20 -30 -40 -50 -60

RMM

Cheia 2001

Seca 2001

Cheia 2002

Fig. 11.15. Relao entre 18O vs D em amostras de gua coletadas no lago Sal, na localidade de So Nicolau, prximo cidade de Santarm, em trs perodos distintos: cheias de 2001 e 2002 e no perodo de seca de 2002. RMM a abreviao para reta meterica mundial.

Sugestes para leitura

Gat J.R. & Matsui E. Atmospheric water balance in the Amazon Basin: an isotopic evapotranspiration model. Journal of Geophysical Research 96: 13179-13188, 1991. International Energy Atomic Agency. Atmospheric Waters. In Stable Isotope Hydrology. Technical Reports Series, n 210, p. 103-142, 1981. Martinelli, L.A.; Victoria, R.L.; L.S.L. Sternberg, A. Ribeiro, M.Z. Moreira.Using stable isotopes to determine sources of evaporated water to the atmosphere in the Amazon Basin. Journal of Hydrology 183 (3-4): 191-204, 1996. Martinelli L.A; Gat J.R; Camargo P.B; Lara L.L; Ometto J.P.H.B. The Piracicaba River basin: Isotope hydrology of a tropical river basin under anthropogenic stress.

D ( / oo)

182 Isotopes in Environmental and Health Studies 40 (1): 45-56, 2004. isotope study. Water Research Resources 15: 1250-1258. Victoria, R.L; L.A. Martinelli; J. Mortatti and J. Richey. Mechanisms of water recycling in the Amazon Basin: Isotopic Insigths. Ambio 20: 384-387, 1991.