CONDICIONES DE CRECIMIENTO Y MEDIOS DE CULTIVOS

1. INTRODUCCIN. Todos los seres vivos necesitan para poder desarrollar sus funciones vitales de unas condiciones marcadas por factores ambientales los cuales estn estrechamente relacionados con su naturaleza, es decir todos los seres vivos para que se puedan desarrollar necesitan que el medio que les rodea tenga unas determinadas condiciones fisicoqumicas y unos nutrientes entre otros elementos. Todo ello tambin se aplica a las bacterias y en funcin de estos elementos se pueden clasificar:

Segn el pH a travs del cual pueden sobrevivir. Segn la temperatura a travs de la cual se pueden desarrollar. Segn su capacidad para crecer en medios de elevada osmolaridad. Segn su capacidad para crecer en medios aerobios y/anaerobios. Segn la humedad que presente el medio representado por aw o actividad de agua. Segn su capacidad de crecer en presencia o ausencia de luz y/o radiaciones.

2. PRINCIPALES FACTORES FISICOQUMICOS QUE INTERVIENEN EN EL CRECIMIENTO BACTERIANO Entre todos estos factores hay bacterias que segn su naturaleza pueden crecer a un determinado pH por lo que se clasifican en :

Bacterias acidfilas, cuyo crecimiento lo realizan en un medio cido. Bacterias basfilas, cuyo crecimiento lo realizan en un medio bsico. Bacterias neutrfilas, cuyo crecimiento lo realizan en un medio neutro.

La temperatura tambin es un elemento importante para su crecimiento debido a que hay bacterias que solo crecen en una determinada de temperatura clasificndolas por tanto como: Bacterias psicrfilas, cuyo crecimiento lo realizan a temperaturas inferiores a 20C. Bacterias mesfilas, cuyo crecimiento lo realizan a temperaturas que oscilan entre los 20C y los 45C. Bacterias termfilas, cuyo crecimiento lo realizan a temperaturas superiores a 40C. Bacterias hipertermfilas, cuyo crecimiento lo realizan a temperaturas superiores a 100C. A su vez en funcin de su rango de temperatura de crecimiento las bacterias se clasifican en:

Bacterias esteotrmicas, siendo aquellas cuyo crecimiento lo realizan en un rango pequeo de temperatura. Bacterias euritrmicas, siendo aquellas cuyo crecimiento lo realizan en un rango amplio de temperatura.

Otro factor importante es la presencia o ausencia de oxgeno, debido a que hay bacterias que limitan su crecimiento en funcin de su presencia o ausencia, en funcin de ello las bacterias se pueden clasificar en: Bacterias aerobias estrictas, son aquellas que necesitan de oxgeno para poder crecer. Bacterias anaerobias estrictas, son aquellas que slo pueden crecer en ausencia de oxgeno, estas bacterias carecen de la enzima superxido dismutasa por lo que en presencia de oxgeno, los radicales libres producen mutaciones que matan a la bacteria. Bacterias aerobias/anaerobias facultativas, son aquellas que pueden sobrevivir en ausencia de oxgeno. Bacterias microaerfilas, son aquellas que crecen mejor a bajas presiones de oxgeno.

Por ltimo, la concentracin del medio donde se quiere desarrollar su crecimiento tambin es una caracterstica importante y esa concentracin viene representada por la osmolaridad, en funcin del tipo de sustancia que interviene en ella y su concentracin hay bacterias:

Halfilas, cuando pueden crecer en un medio con una alta concentracin de sales. Sacarfilas, cuando pueden crecer en un medio con una alta concentracin de azcares.

3.MEDIOS DE CULTIVO, DEFINICIN, CARACTERSTICAS Y CLASIFICACIN. Un medio de cultivo se define como una solucin que cuenta con los nutrientes necesarios para recuperar, multiplicar, aislar e identificar los microorganismos bajo condiciones favorables de temperatura y pH, as como efectuar pruebas de susceptibilidad. Esta definicin a su vez abarca una serie de medios cuyas caractersticas permitirn el crecimiento o no de determinadas bacterias, influyendo por tanto en el diagnstico de una enfermedad bacteriana, entre ellos se encuentran: Medios quimicamente definidos: son aquellos en el que se conoce la composicin qumica exacta. Medios complejos: son aquellos cuya composicin qumica exacta vara ligeramente de un lote a otro. Caldo nutritivo: es aquel medio complejo lquido. Agar nutritivo: es un medio complejo con agar. Medios selectivos: son aquellos medios a los que se le aaden sustancias que inhiben el crecimiento de bacterias no deseadas y facilitan el de las que se buscan. Medios diferenciales: son medios que permiten la diferenciacin entre colonias. Medios de enriquecimiento: son medios lquidos que proporcionan nutrientes y condiciones ambientales para el desarrollo de un microorganismo en muy pequea cantidad, siendo no aptos para el crecimiento de otros.

Entre todos lo medios expuestos, lo que ms se utilizan son los que se exponen a continuacin en la siguiente tabla: CLASIFICACIN Medios generales TIPOS Agar-sangre Agar-chocolate Caldo tioglicolato Caldo Shaedler, para anaerobios Peptona alcalina, para Vibrio cholerae Medio de Kuffman-Muller, para Salmonella spp Medio Fletcher , para Leptorpira spp Agar-chocolate-bacitracina, para Haemophilus spp Medio de Loeffler, para Corynebacterium diphteriae Medio de Thayer-Martin, para Neisseria spp Agar-manitol-sal, para S.aureus Medio McConkey, para enterobacterias Agar TCBS, para Vibrio spp Agar EMB, para coliformes

Medios de enriquecimiento

Medios selectivos

Medios selectivos diferenciales

4.ETAPAS DEL CRECIMIENTO BACTERIANO En el crecimiento bacteriano se distinguen 4 etapas bien diferenciadas:

Etapa 1: fase de latencia, en esta fase se observan pequeos cambios en el nmero de clulas pero su actividad metablica es elevada. Etapa 2: fase exponencial, en esta fase el ritmo de crecimiento de las bacterias es muy elevado. Etapa 3: fase estacionaria, en esta fase se aprecia un equilibro entre su crecimiento y su muerte. Etapa 4: fase de muerte, en esta fase el nmero de bacterias muertas supera al nmero de bacterias formadas.

Todas estas etapas se pueden observar en la curva de crecimiento bacteriano, imagen extrada de es.wikipedia.org :

A su vez esta curva viene representada por la frmula: dN/dt=KN Como se puede observar en el grfico, cada etapa se encuentra representada segn la fase en la que se encuentre dicho crecimiento.