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Micropipetas

09/03/2012

RECOMENDAES PARA USO CORRETO DAS MICROPIPETAS A qualidade dos resultados das anlises em muitos laboratrios depende da exatido e preciso com que so medidos os volumes das amostras ou reagentes pipetados.

Micropipetas Automticas As micropipetas so instrumentos de laboratrio utilizados para a transferncia com preciso e exatido de pequenos volumes de lquido. Podem ser simples, que empregam apenas uma ponteira (Figura 1A) ou multicanal (Figura 1B), que permitem uso de vrias ponteiras simultaneamente, pipetando o mesmo volume em todas elas. As pipetas de deslocamento de ar so recomendadas para amostras aquosas e para trabalhos em geral.

Figura 1 Pipetas de deslocamento de ar; A monocanal; B multicanal.

Cuidados necessrios para uso correto das micropipetas Para o uso adequado das micropipetas automticas, visando obter preciso e exatido, necessrio primeiramente que as micropipetas sejam de qualidade, que se tenha suficiente experincia prtica em seu uso correto e que a manuteno e calibrao estejam em conformidade com as orientaes do fabricante. Ponteiras de m qualidade podem ter rebarbas ou ondulaes no plstico que retm lquidos, de modo que o volume aspirado no o volume dispensado. Outro problema no uso de ponteiras de m qualidade a abertura no concntrica da ponta da ponteira, afetando a distribuio do lquido na ponteira. Nunca deitar a micropipeta quando estiver com lquido na ponteira.

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Manter a ponteira na posio vertical e efetuar a aspirao de lquido lentamente, dando uma pausa de uma frao de segundos aps a aspirao. recomendvel que se faa uma ambientao na ponteira com o lquido a ser pipetado. Com isso se obtm melhor exatido e preciso da pipetagem. Sugerimos consultar o manual da micropipeta. Nunca mover a micropipeta de cabea para baixo. Para pipetagem de amostras viscosas e sangue total, sugerimos limpar com cuidado a parte externa da ponteira e lavar a ponteira no lquido que vai receber a amostra. Para prevenir corroso do pisto, evitar aspiraes acidentais do lquido para dentro da micropipeta. Se o lquido acidentalmente aspirado para dentro da pipeta, o pisto deve ser imediatamente limpo com lcool isoproplico a 70% ou de acordo com orientaes do fabricante. O uso de ponteiras com filtro previne o contato. O modo de encaixe da ponteira correto pressionando com movimento de rotao. Nunca encaixe a micropipeta na ponteira como se fosse uma faca. Aps o uso, as micropipetas devem ser mantidas na posio vertical em estantes apropriadas. E tambm aps o uso, as micropipetas devem ser guardadas com o controlador no volume mximo; Para micropipetas que utilizam controladores de volumes intercambiveis, informamos que os controladores no podem ser trocados entre as pipetas, em funo da calibrao que realizada no conjunto. Portanto, importante manter o conjunto para garantir a preciso na pipetagem.

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As variadas tcnicas de pipetagem adotadas por cada usurio tornam improvvel que se obtenha resultados de preciso e exatido idnticas. Recomendamos implantar procedimento/tcnicas padro de pipetar, por exemplo, utilizando indicaes descritas no ISO8655-6. Use uma tcnica de pipetar consistente. Para obter o volume desejado ajuste o controlador lentamente, e NO ultrapasse de forma alguma o volume mximo ou mnimo, pois isso danifica o controlador. Aps o ajuste do volume desejvel, travar o controlador para garantir sua correta utilizao.

De acordo com a norma NP EN ISO/IEC 17025 (requisito 5.5.), equipamentos que so utilizados em ensaio (com impacto significativo nos resultados) devem estar sujeitos a um plano de calibrao e de manuteno. Deste modo, o laboratrio deve cumprir os requisitos especficos do laboratrio e as especificaes normativas relevantes.

Calibrao Micropipetas so instrumentos de alta preciso constitudos por diversos componentes mecnicos sujeitos ao desgaste aps uso prolongado ou disfuno devido ao uso inadequado. A verificao da calibrao deve ser realizada nas seguintes situaes: Aps uma manuteno e troca de peas; Quando a pipeta sofre uma queda ou dano; Mudana do controle da qualidade do sistema analtico; De acordo com orientaes do fabricante. A freqncia da verificao da calibrao depende de quanto micropipeta utilizada, da qualidade e condio deste uso. A freqncia tambm pode ser definida com base em resultados anteriores e na crticidade da medida. importante estabelecer os limites aceitveis de acordo com as suas aplicaes. Isso geralmente informado pelo fabricante.

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O laboratrio deve definir a freqncia da calibrao e os limites aceitveis, registrando todas as calibraes realizadas e devidas aes.

Observao: A calibrao das pipetas, no garante por si s a qualidade de seu uso. As micropipetas devem ser mantidas em bom funcionamento por meio da manuteno adequada, incluindo a limpeza, lubrificao, substituio de vedantes e ajuste. Aps a calibrao, necessrio verificar se o instrumento cumpre a todos os limites estabelecidos. Para manter a confiana at a prxima calibrao, deve-se instituir um programa de verificaes intermdias.

Referncias EN-ISO 8655-6:2002; NP EN ISO/IEC 17025; Info Qualidade A Manuteno das pipetas fundamental; Isabel Farias, dez. de 2009; RDC 302:2005 - Regulamento Tcnico para Funcionamento de Laboratrios Clnicos; Infotec - Informativo Tcnico da Labtest; set. de 2010.

Qualquer dvida em relao a este informativo, favor entrar em contato conosco atravs do canal: lab@biometrix.com.br.

Cordialmente Biometrix Laboratrio