1 INTRODUO

As pastagens cultivadas representam forma mais pratica e econmica de alimentao dos bovinos constituindo a base de sustentao da pecuria de corte e leite no Brasil (TEIXEIRA 2010). As cigarrinhas-daspastagens so consideradas os principais insetos-praga das gramneas forrageiras na Amrica Tropical (COSENZA ET al., 1981; FONTES et al., 1995), e a partir, da dcada de 60, estes insetos-praga passaram a ser relatados em todo o Brasil (SANTOS et al., 1982; GALLO et al., 2002). A ocorrncia das cigarrinhas-daspastagens se d durante o perodo chuvoso, podendo ocorrer de trs a cinco geraes anuais, dependendo das condies climticas (FONTES et al., 1995). As cigarinhas-das-patagens (Deois flavopicta) so insetos sugadores, pertencentes famlia Cercopidae, distribudas nas mais diversas condies ecolgicas. Os adultos sugam a seiva das folhas e injetan toxinas, causando intoxicao sistmica das plantas (fitotoxemia) que interrompe o fluxo de seiva e o processo vegetativo. Os sintomas iniciais so estrias longitudinais amareladas que aumentam para o pice da folha e posteriormente secam. Quando o ataque intenso, pode haver amarelecimento geral da pastagem ("queima das pastagens"). As formas jovens (ninfas) sugam continuamente a seiva das razes, produzindo espuma branca tpica, que as protege dos raios solares e de certos predadores. Nessa fase causam desequilbrio hdrico e esgotamento das reservas orgnicas da planta. Os danos causados s pastagens so variveis em funo da severidade do ataque. Ocorre decrscimo significativo na produo, prximo a 15%, e na qualidade da forragem, resultando em diminuies na capacidade de suporte, na produo de leite e no ganho de peso. Em certas condies a severidade do ataque das cigarrinhas tem causado a "queima" total das pastagens, deixando os produtores sem alternativa de manejo do rebanho. Alm das pastagens, as lavouras de milho, arroz, aveia-preta e cana podem sofrer srios danos pelo ataque dessa praga, principalmente dos adultos, pela injeo de toxinas durante a suco de seiva. Havendo a necessidade de utilizao de grandes quantidades de pesticidas, ou utilizao de controle fsico (fogo), usados pelos pecuaristas para o controle, gerando o risco de intoxicaes de pessoas e animais, contaminaes do meio ambiente por os mesmos, e ainda a necessidade da retirada dos animais do local de aplicao, gerando altos custos de logstica e mo de obra. Uma alternativa aos manejos convencionais o uso do controle biolgico. No Brasil se utiliza M. anisopliae, para controlar as populaes de insetospraga, de importncia mdica, veterinria e agrcola (GERRA 2009). Para esse fim M. anisopliae apontado como um agente de controle biolgico de grande potencialidade. A

utilizao de fungos para o controle de insetos est fundamentada na capacidade que eles tem de infectar os insetos e lhes causar doena e morte, num processo dependente de fatores biticos e abiticos, descrito por Agostino Bassi, o pai da patologia de insetos, e que teve sua utilizao proposta como controladores alternativos de pragas em 1879 por Metchnikoff (MESSIAS 1989). O fungo entomopatognico Metarhizium anisoplia uma das alternativas mais utilizadas como controle biolgico de pastagens. Porm o uso de controle biolgico barrado ou limitado por fatores ambientais com temperatura, umidade do ar etc.

2. OBJETIVOS 2.1 Objetivos gerais Os objetivos do presente trabalho ser avaliar a evoluo do desenvolvimento do fungo M. anisoplia comercializado, com o nome comercial de Metaril, em diferentes temperaturas e umidade relativa, e o grau de infecciosidade em cigarinhas-das-pastagens. 2.2 ObjetivoS especficoS Delimitar a as temperaturas abaixo de 24C, e umidades relativa do ar de 55% e 65% , e como o fungo M. anisopleae, se comporta quanto ao seu desenvolvimento, e a sua capacidade de infeco alterada nestas condies ambientais.

3. REVISO BIBLIOGRFICA O fungo Metharizium anisopleae um deutoremiceto pertencente ordem Monilaces, famlia moniliaceaes. Esta amplamente distribudo na natureza, sendo facilmente encontrado nos solos, onde pode sobreviver por longos perodos.Este fungo infecta mais de 300 especies de incetos das diferentes ordens, includo impotantes pragas.A espcie M. anisopliae tem sido usada em diversos pases, como Estados Unidos, Canad, Frana, Austrlia, frica e Brasil . Esta espcie ataca inmeras espcies de insetos, e est amplamente distribudo na natureza (LIMA 2007). Seus condios podem ser elipsides ou ovides e sua colorao pode variar de verde plida a verde oliva. As estruturas mais produzidas e comercializadas de M. anisopliae so os condios, utilizando-se meio de cultura slido. Esse processo tem sido usado para a manuteno

rotineira de isolados e produo em pequena escala de condios visando estudos de laboratrio, bem como a produo em grande escala visando testes de campo e comercializao. O fungo produzido na superfcie de meio slido, dentro de diferentes recipientes conforme o objetivo e escala de produo. O processo de infeco iniciado pela germinao dos esporos sobre a cutcula do hospedeiro. O esporo germina e o tubo germinativo se diferencia por dilatao da extremidade das hifas para a formao do apressrio, que estimulada pelo contato fsico com a cutcula do hospedeiro. Esse estmulo tambm sensvel a alteraes da superfcie, indicando um possvel mecanismo pelo qual o patgeno reconhece seu hospedeiro. Aps a formao do apressrio, ocorre o desenvolvimento de estruturas denominadas grampos de penetrao, que so caracterizadas por uma alterao na parede celular da parte do apressrio que est em contato com o hospedeiro, sendo mais fina e saliente. Evidncias obtidas por microscopia eletrnica e histoqumica sugerem que a etapa de penetrao ocorre por uma combinao de degradao enzimtica e presso mecnica Aps o processo de penetrao, o fungo inicia a colonizao do hospedeiro. As hifas que atravessam a cutcula do hospedeiro sofrem um engrossamento e se ramificam inicialmente no tegumento e, posteriormente, na cavidade geral do corpo, liberando toxinas e ocasionando a morte do hospedeiro devido produo de metablicos secundrios denominados destruxinas, que afetam os canais de transportes de ons, envolvidos na resposta muscular e a integralidade da membrana celular. O hospedeiro exibe vrios sintomas incluindo inquietao, perda de coordenao e parada de ingesto de alimento. O processo de infeco em seus hospedeiros ocorre em fases sucessivas de germinao, diferenciao, penetrao, colonizao, reproduo e disseminao Vrios fatores tm sido apontados como possveis determinantes de patogenicidade, entre os quais, a produo de toxinas e a produo e secreo de enzimas hidrolticas, como quitinases, proteases e lpases (MARI, 2006). 4. MATERIAL E MTODOS O fungo ser cedido por comerciantes de produtos de controle biolgico. Para a realizao dos bioensaios do metaril com consentrao de 5 x 1011 p emosoluvel, o material ser diludo conforme recomendao do produto em gua destilada, e inoculados em placas de Petri, de 9,0 cm de dimetro, contendo meio de cultura BDA, ser inoculado em trs pontos nas placas atravs de uma ala de platina, previamente flambada.

As placas sero mantidas em cmaras para germinao (B.O.D.), a Temperaturas de 13 C, 15C, 17C, 19C, 20C com UR 55 e 65, com fotofase de 12 horas, e testemunha com temperatura de 24C e UR 80% com perodo de incubao de 10 dias. Para os experimentos de virulncia sero realizadas trs repeties, contendo 10 cigarinhas-daspastagens (Deois flavopicta) para cada um dos 12 tratamentos, totalizando 20 cigarigasdas-pastagens por tratamento e 240 para o experimento. Cada lote de 10 cigarinhas-daspastagens foi colocado sobre uma placa de Petri de 12,0 cm de dimetro para serem pulverizadas na torre de Potter. Os insetos sero pulverizados com 2 mL da suspenso de fungo, As testemunhas sero pulverizadas com 2 mL de gua estril. Em todos os tratamentos ser adicionado espalhante adesivo a (0,01% de Tween 80). Em seguida, as cigarinhas-das-paasagens sero transferidas para potes de plstico transparente de 6,5 cm de altura x 5,0 cm de dimetro, com tampa de rosca, permanecendo em jejum, Cada inseto morto foi lavado em lcool 70% e gua destilada, para desinfestao Superficial. Em seguida, os insetos sero transferidos para placas plsticas de 4,5 cm de dimetro, contendo algodo embebido em gua para formar um ambiente mido. As placas sero mantidas em cmara climatizada temperatura de 251C, com fotofase de 12 horas e umidade relativa de 7010%. Por meio deste procedimento que ser observada a confirmao da mortalidade causada pelo patgeno, observando-se o crescimento micelial e conidiognese no cadver. 5. RESULTADOS ESPERADOS Os resultados obtidos no trabalho sero posteriormente divulgados em revistas do gnero, e com a realizao de um novo trabalho que ser desenvolvido a campo para comprovao dos dados obtidos em laboratrio, e verificao da eficcia do fungo a campo.

6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

COSEGA, G. W. (s.d.). Resitencia de gramineas forageiras cigarinhas-das-pastgens Deois flvopicta(stal 1854). Brasilia: EMBRPA-CPAC, 1981. 16p. ( Boletim de Pesquissa, 07). GALHO, D. e. (2002). Entomologia Agricola. Piiracicaba,SP.: FELAQ.

GERRA, S. M. (abril/junho de 2009). Persitncia de Metarhizium anisopliae spp no solo sob diferentes condies de emperatura e umidade. Revista Caatinga (Mossor, Brasil) , v.22, n.1, p.50-54. LIMA, D. O. (2007). Produo de Metharizium(metsch)sorok.E beauveria bassiana (bals) vuill. Em diferentes substratos e efeito da radiao ultravioleta e da temperatura sobre estruturas infectivas desses entopatgenicos- Tese (doutorado)- Univercidade Estadual Paulista, Facul. Botucatu,. SANTOS, P. B. (1982.). Avaliao de dano e controle da cigarinhas-das-pastagens em plantas de milho com diferentes idades. Sete Lagoas: EMBRAPA-CNPMS. p8 TEIXEIRA, V. M. ( 2010). EFICINCIA DE Metarhizium anisopliae (Metsch) SOROKIN NO CONTROLE DE CIGARRINHAS-DAS-PASTAGENS (Hemiptera: Cercopidae) EM Brachiaria bryzantha EM RONDNIA - BRASIL. REVISTA VERDE DE AGROECOLOGIA E DESENVOLVIMENTO SUSTENTVEL GRUPO VERDE DE AGRICULTURA ALTERNATIVA (GVAA) , v.5, n.3, p. 263 273.

UNIVERSIDADE ESTADUAL DO RIO GRANDE DO SUL UNIDADE DE VACARIA CURSO DE AGROPECUARIA INTEGRADA

LUCAS DE ALMEIDA BIZOTTO

PROJETO DE PESQUISA

VACARIA 2011

LUCAS DE ALMEIDA BIZOTTO