Artigo

Validao do mtodo para determinao de nitrognio kjeldahl total

Resumo
O termo do nitrognio de Kjeldahl total (nKt) refere-se combinao da amnia e do nitrognio orgnico. A determinao de nKt um mtodo de referncia para a determinao do nitrognio. Em virtude da grande demanda das anlises em nosso laboratrio para determinar nKt em diferentes matrizes ambientais, torna-se necessrio validar um mtodo em que as determinaes so realizadas mais rapidamente e com exatido, em comparao ao mtodo tradicional de nKt. Para a validao, utilizou-se o mtodo 8075 do espectrofotmetro de Hach. nas comparaes, no h evidncia de erro sistemtico, as diferenas entre as mdias no so significativas no nvel de 0.05 (5%) e a hiptese nula mantida. Somente usando-se 0,1 de turfa na determinao pelo mtodo Kjeldahl tradicional apresentou-se erro sistemtico. Os mtodos Hach e Kjeldahl tradicionais apresentaram a mesma concentrao mdia de nKt; conseqentemente resultados similares so alcanados usando-se ambas as metodologias. Contudo utilizando-se o espectrofotmetro Hach possvel obter resultados com rapidez, confiabilidade e poucas variaes em comparao ao mtodo tradicional de tKn.
Jussara Aparecida Oliveira Cotta*, Fernanda Helena Salami, Almir Rogrio Marques, Maria Olmpia Oliveira Rezende e Maria Diva Landgraf Instituto de Qumica de So Carlos, Universidade de So Paulo * Autora para correspondncia: Av. Trabalhador So Carlense, 400 CEP: 13560-970 So Carlos. SP Fone: (16) 3373-9959 E-mail: japcotta@iqsc.usp.br

Palavras-chave: nitrognio Kjeldahl total, validao, anlise ambiental

Summary
the term total Kjeldahl nitrogen (tKn) refers to the combination of ammonia and organic nitrogen. the tKn determination is a reference method for nitrogen determination. In virtue of the great demand of analyses in our laboratory to determine tKn in different environmental matrices, it becomes necessary to validate a method in which the determinations are carried out faster and accuracy, in comparison to the traditional tKn method. For validation, the method 8075 of Hach spectrophotometer was used. In the comparisons, it does not have evidence of bias, the differences between the averages are not significant in the level of 0.05 (5%) and the null hypothesis is kept. Only the traditional Kjeldahl method using of peat presented bias. the Hach and traditional Kjeldahl methods have presented the same average concentration of tKn; therefore similar results are reached by using both methodologies. throughout Hach spectrophotometer it is possible to obtain results with rapidity, confiability and low variances in comparison to traditional tKn method. Keywords: total Kjeldahl nitrogen, validation, environmental analysis

Introduo
A matria orgnica existente nos solos consiste de uma mistura de produtos animais e vegetais em vrios estados de decomposio, resultante da degradao qumica, biolgica e da atividade sinttica dos microrganismos. A matria orgnica fonte de energia e nutriente para os organismos que participam de seu ciclo biolgico, e exerce um importante papel em sua fertilidade. O hmus com68

preende biomolculas, como aquelas exemplificadas como substncias no hmicas, e as substncias hmicas (SH), grosso modo, so compostos de colorao escura, persistentes e amorfos, diferenciados em cidos flvicos, cidos hmicos e humina, com base em suas caractersticas de solubilidade (1). O hmus tem importante papel na formao de agregados do solo, no controle de acidez, no ciclo dos elementos nutrientes, assim como na descontaminao de compostos indesejveis.
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As substncias no hmicas pertencem a grupos bem conhecidos e apresentam caractersticas fsicas e qumicas bem definidas. As sustncias hmicas, por sua vez, so macromolculas ou estruturas supramoleculares com massa molecular e estrutura variveis. So produtos de degradao qumica e microbiolgica de resduos de animais e plantas. As substncias hmicas so constitudas de uma mistura heterognea de compostos, em que cada frao (cidos hmicos, cidos flvicos e humina) deve ser considerada como sendo formada por uma srie de molculas de tamanhos diferentes, cuja maioria no apresenta a mesma configurao estrutural ou grupos reativos na mesma posio (1). As substncias hmicas so usualmente fracionadas com base nas suas solubilidades, sendo que os cidos hmicos constituem a frao de substncias hmicas solvel em lcalis e insolvel em meio cido. Os cidos flvicos permanecem em soluo quando o meio acidificado e a humina a frao insolvel tanto em cido quanto em lcali diludos. A percentagem de material hmico extrado varia consideravelmente de um tipo de matriz para outro e, em geral, maior quando se aumenta o pH do extrator e a temperatura de extrao (2). A solubilizao dos cidos hmicos em meio alcalino deve-se ionizao dos grupos cidos, principalmente carboxlicos e fenlicos. A turfa um solo combustvel de baixa capacidade calorfica, formada pela decomposio lenta de materiais vegetais e animais encontrados em reas alagadias como lagoas, vrzeas de rios, plancies costeiras e regies lacustres (3). A turfa in natura contm 90% ou mais de gua, quando seca ao ar, esse teor pode baixar para 40%. As turfas so classificadas de acordo com seu grau de decomposio. Segundo a International Peat Society (4), mais de 90% das turfeiras situam-se nos cintures frios e temperados do hemisfrio norte; o remanescente encontra-se em latitudes tropicais e subtropicais. Em geral, a turfa empregada intensamente na agricultura como complemento de fertilizao. O potencial calorfico de turfas e o seu poder de complexao com ons metlicos e com agroqumicos podem ser muito explorados pela comunidade brasileira, visto que o Brasil rico em bacias hidrogrficas e regies de vrzeas, que so propcias para a formao de turfas (5). A matria orgnica (MO) do solo a principal fonte de nitrognio (n) para as plantas, alm de fornecedora de elementos como fsforo e enxofre e de vrios micronutrientes.
O N, dentre os nutrientes minerais de plantas, o que mais limita a produtividade agrcola por fazer parte da estrutura de grande nmero de compostos vitais aos vegetais. As formas orgnicas de N no solo constituem 95% ou mais do total de N presente na camada arvel. Dentre os nutrientes existentes na MO, o N destaca-se com maior nfase no processo de mineralizao (1).

es de decomposio da MO que do origem produo do nitrognio inorgnico utilizado pelos vegetais dependem, em grande parte, de fatores ambientais, tais como temperatura, umidade, pH e outras caractersticas do solo (1). O n um nutriente que requer ateno, pois se apresenta na maioria das vezes em formas solveis, sofrendo lixiviao com rapidez. Em devidas propores, o n tem influncia decisiva no desenvolvimento das plantas, bem como na melhoria de suas qualidades. Porm, em excesso prejudica a economia orgnica da planta, inclusive influindo na constituio dos tecidos, tornando-os flcidos e porosos. A razo C/n indica o grau de incorporao do nitrognio na estrutura hmica e, por conseqncia, o nvel de fertilidade desse material, pois, por meio de diversos mecanismos de mineralizao da MO do solo, o nitrognio liberado para as razes das plantas sob a forma de nitrito (1). A transformao gradual do material oriundo da decomposio de plantas em matria orgnica estvel (hmus) conduz estabilizao da relao entre C e n. O destino das formas minerais de n no solo , at certo ponto, determinado pelas reaes que envolvem nH4+, nH3 e nO3-. Quando a MO com valores de relao C/n alta adicionada ao solo, os microrganismos utilizam o n dessa matria orgnica e o n existente no solo para produo de sua biomassa, diminuindo, dessa maneira, a relao C/n da MO adicionada. Um dos indicativos da bioestabilizao da MO o incio da transformao do n-orgnico em suas formas minerais (1).
O ciclo biogeoqumico do N tem sido altamente modificado pela atividade humana em relao aos outros elementos. A utilizao de fertilizantes nitrogenados no cultivo de leguminosas pode transferir mais N da atmosfera para formas biologicamente disponveis em relao ao que fixado por todos os processos combinados.

Nitrognio Kjeldahl total O termo nitrognio Kjeldahl total (nKt) refere-se combinao de amnia e nitrognio orgnico. O mtodo de determinao de nKt foi desenvolvido em 1883 por Johan Kjeldahl, e tornou-se um mtodo de referncia para determinao de nitrognio (6). O mtodo consiste de uma completa digesto das amostras em cido sulfrico concentrado com catalisadores tais como sais de cobre e titnio em alta temperatura. Outros aditivos podem ser introduzidos durante a digesto de maneira a aumentar o ponto de ebulio do cido sulfrico. A Environmental Protection Agency recomenda o uso do mtodo 351.x para determinao de nKt (7). Avaliao da metodologia analtica Avaliar uma metodologia analtica uma das etapas bsicas
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A grande maioria de n absorvida na forma inorgnica, na forma de nH4+ e, principalmente, nO3-. As rea-

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em sistemas de qualidade e integra os programas de Boas Prticas de Laboratrio, visando assegurar que o mtodo utilizado seja adequado ao que se prope identificar ou quantificar, podendo empregar diferentes procedimentos em funo do objetivo da anlise. o processo para provar se um mtodo analtico aceito para a proposta pretendida (8). A validao visa a diminuir ou controlar os fatores que levam impreciso ou inexatido de um dado gerado, tais como variabilidade da amostra, contaminao, reagentes inadequados, variaes de temperatura, calibrao ineficiente, analista despreparado e perdas durante a anlise (9). Existem diversas formas de se conduzir validao de um mtodo analtico. Alguns dos parmetros de validao de mtodos analticos so: linearidade de resposta, curva analtica, sensibilidade, limite de deteco, limite de quantificao, preciso e exatido (8,9). Em determinados trabalhos analticos conveniente a comparao de preciso entre duas amostragens de dados obtidos em condies diferentes. O teste F um teste que consiste em se determinar as varincias, colocando-se uma razo de varincias, Fc, como na Equao 1 (10-12):

tude da demanda, fez-se necessrio validar um mtodo no qual as anlises fossem feitas com rapidez, segurana, confiabilidade e que fosse de baixo custo, quando comparado com o mtodo ntK tradicional. Utilizando o mtodo 8075 do equipamento Hach, a digesto da amostra realizada em no mximo, 1 hora, em comparao ao mtodo ntK tradicional que de 5 horas. Levando-se em conta o custo, o mtodo tradicional requer uma quantidade maior de reagentes, alm do risco em seu manuseio durante a abertura da amostra e realizao das determinaes, uma vez que ele conduzido sob aquecimento.

objetIvos
O objetivo deste trabalho foi validar a determinao de nKt por espectrofotometria na regio do visvel, utilizando equipamento Hach, mtodo 8075, modelo DR/2500 e comparar o mtodo ao mtodo tradicional de determinao de ntK.

MetodologIa
O material do estudo foi turfa coletada s margens do rio Mogi-Guau, no km 40 da rodovia SP-255, no municpio de Lus Antnio (SP). Para este trabalho foi determinada a concentrao de ntK na amostra de turfa e nos cidos hmicos extrados da mesma. Foram utilizadas alquotas 0,100g e 0,500g da amostra para os dois mtodos utilizados. Os cidos hmicos foram extrados de acordo com a metodologia recomendada pela Sociedade Internacional para Substncias Hmicas (13), baseada na sua solubilidade em soluo alcalina de naOH 0,1mol L-1 e precipitao em HCl 0, 1mol L-1. Determinao do NKT pelo Mtodo Hach Abriu-se a amostra em um digestor Digesdahl, modelo 23130-20, marca Hach. Pesou-se a amostra no balo do prprio aparelho, adicionaram-se 5,0mL de H2SO4 concentrado P.A., ligou-se o aparelho em uma temperatura programada de 400C e esperou-se uma hora para a digesto da amostra. Em seguida, adicionaram-se 5,0mL de H2O2 e esperou-se at a soluo ficar transparente. transferiu-se a soluo para um balo e completou-se o volume a 100mL com gua destilada, armazenou-se em um frasco rotulado. Para posterior determinao no espectrofotmetro. Determinao do NKT segundo o mtodo 8075 do espectrofotmetro Hach Embora o termo nKt refira-se a combinao de nitrognio na forma orgnica e amnia, somente os compostos de nitrognio orgnico que aparecem como nitrognio ligado
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Fc =

s1 s2

2 2

(1)

em que s1 a estimativa do desvio-padro do conjunto 1 de resultados e s2 a estimativa do desvio-padro para o conjunto 2. A comparao de preciso feita com base em valores tabelados de constantes F, dispostas de tal modo que, para um dado limite de confiana, podem ser estabelecidos como Ft, de acordo com o nmero de amostragens, onde temos n-1 graus de liberdade. O teste t usado para comparar um grupo de determinaes com outro, a fim de decidir se so ou no diferentes. Para dois grupos de dados consistindo em n1 e n2 medidas, _ _ com mdias x 1 e x 2 , calcula-se o valor de t.

t=

x1 x2 sagr sagr =

n1 n2 n1 + n2
2 2 s1 (n1 1) + s2 (n2 1) n1 + n2 2

onde

O valor calculado de t comparado com o valor tabelado para n1+n2-2 graus de liberdade (11-12). Geralmente, determinase o nvel de probabilidade em 95% de confiana. Portanto, se o valor obtido menor que esta probabilidade, conclui-se que elas no so diferentes entre si (10-12). Para a obteno dos resultados, usou-se os programas MInItAB, Origin, Excel. no Laboratrio de Qumica Ambiental do Instituto de Qumica de So Carlos so efetuadas anlises de rotina para determinar nKt em diferentes matrizes ambientais. Em vir70

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organicamente no estado trinegativo so analisados. nitrognio nesta forma convertido em sais de amnio pela ao de cido sulfrico e perxido de hidrognio. A amnia , ento, analisada pelo mtodo 8075 (Mtodo nessler) do espectrofotmetro, modelo DR/2500, marca Hach. Em uma proveta de 25mL adicionaram-se 5,0mL da amostra, adicionou-se uma gota de indicador tKn, gotas de KOH at a soluo ficar azul, completou-se com gua destilada at 20mL, adicionaram-se trs gotas de estabilizador mineral, homogeneizou-se, adicionaram-se trs gotas de lcool polivinlico e homogeneizou-se. Posteriormente, completou-se a 25mL com gua destilada, adicionou-se uma gota de reagente de nessler e homogeneizou-se. Aps dois minutos fez-se a leitura no programa selecionado: 399 nitrogen tKn do espectrofotmetro (14), em 460nm. Seguiu-se o mesmo procedimento para o branco. O branco feito passando pelo mesmo processo de digesto sem a amostra. Para obter a quantidade de nKt, segundo o mtodo Hach, nas amostras fizeram-se os seguintes clculos, propostos pelo manual: C (mg/L) = 75 x A , (5) BxD onde, A: valor obtido no aparelho (mg L-1) B: massa da amostra (g) D: volume da amostra utilizado para anlise (mL) Os valores na tabela 1 refletem a quantidade de amostra e o volume determinado com a faixa mais estreita de concentrao, segundo o manual do espectrofotmetro Hach.

(A)

(B)

Figura 1. Sistema Kjeldahl tradicional para determinao de NKT (A) e o espectrofotmetro Hach (B) utilizado

Tabela 2. Caracterizao fsico-qumica da amostra estudada

Caractersticas pHa Carbono orgnico(g/kg)b Umidade (%)c Teor de Matria orgnica (%)d CTC efetiva (cmolckg-1)e
a

Turfa 3,52 34,9 24,25 52,08 4,47

determinao da atividade hidrogeninica atravs de uma suspenso com 25,00mL de soluo de cloreto de clcio 0,01 molL-1 e 10,00g da amostra; b medidor de carbono total, modelo TOC-VCPH, acoplado ao mdulo de amostras slidas, modelo SSM-5000A, marca SHIMADZU, com detector de combusto; cem estufa a 60-650C; d por calcinao; e soma dos ctions metlicos totais trocveis (Ca+2, Mg+2, K+, Na+) mais acidez (H +Al).

Concentrao de nitrognio esperada (mg kg-1) 42-2200 106-5600 350-18000 1000-56000 4200-220000

Quantidade de amostra (g) 0,500 0,400 0,300 0,200 0,100

Volume determinado (mL) 10,0 5,00 2,00 1,00 0,50

Tabela 1.Quantidade de amostra necessria e volume a ser determinado, segundo a concentrao de nitrognio esperada

J para a determinao do nKt pelo Mtodo Kjeldahl tradicional utilizou-se o mtodo recomendado pela EPA (7). A Figura 1 mostra o Sistema Kjeldahl tradicional para determinao de nKt e o espectrofotmetro utilizado.

Figura 2. Concentraes de NKT (mg/kg) do cido hmico nos mtodos propostos

resultados e dIscusso
A tabela 2 apresenta as caractersticas fsico-qumicas da amostra de turfa, segundo Messias (15).
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A Figura 2 mostra a mdia e o desvio-padro das concentraes de nKt pelos mtodos propostos, Kjeldahl tradicional com 0,1g (Kt1) e 0,5g (Kt5) da amostra, Hach com 0,1g (H1) e 0,5g (H5) da amostra, respectivamente. Para cada determinao foram feitas oito replicatas.
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nota-se pelas descritivas (Figura 2), que os mtodos Kt1 e Kt5 forneceram maior concentrao mdia de nKt e menor desvio-padro que o outro mtodo, tanto para a turfa quanto para o cido hmico. Isso se deve pequena quantidade de on amnio a ser titulado no mtodo, em que o volume de cido utilizado foi aproximadamente de 0,5 a 0,6mL, utilizando 0,1g da amostra, em todas as medidas. Isso pode ter levado levar a um erro sistemtico, graas a uma maior adio titulante ao utilizamos uma bureta de 25mL. Deve-se, portanto, usar uma bureta de menor graduao para evitar esse tipo de erro. Este fato pode ser visualizado na Figura 2, onde no mtodo Kjeldahl tradicional, utilizando-se 0,100g de turfa, resultou uma concentrao maior de nitrognio se comparada aos outros resultados. Pode-se levar em conta, tambm, a homogeneidade da amostra. A amostra de cidos hmicos mais homognea que a de turfa. Anlise estatstica A tabela 3 apresenta os valores encontrados estatisticamente para as comparaes dos mtodos utilizando-se cidos hmicos extrados da turfa. A comparao das mdias (teste-t) e a relao de varincias (teste-F) entre os dois mtodos utilizando-se a turfa e os cidos hmicos extrados da turfa so mostradas na tabela 4. O valor crtico tabelado de F (P= 0,05) para 7 graus de liberdade , nesse caso, 3,787. Como os valores calculados de F no excedem o valor crtico em todas as comparaes

apresentadas na tabela 4, no h diferena significante entre as duas varincias dos mtodos. J para o teste-t, o valor crtico tabelado de t (P= 0,05) para 14 graus de liberdade 2,14. Comparando-se os dois mtodos utilizando-se 0,1g de turfa e cido hmico da turfa (tabela 3), nota-se que o mtodo Kjeldahl tradicional foi o que apresentou a maior concentrao mdia de ntK (mg/kg) e desvio-padro menor que o mtodo espectrofotomtrico (Hach). As mdias para as duas amostras so praticamente iguais, mas suas variabilidades se diferenciam muito. A variabilidade do mtodo Hach praticamente duas vezes maior quando comparada com o mtodo Kjeldahl tradicional. Seguindo-se o teste para verificar se os dois mtodos produzem resultados similares (tabela 4), utilizando-se 0,1g de cidos hmicos, nota-se pelos testes estatsticos realizados, que os mtodos Kt e H produzem o mesmo resultado. Obteve-se esse resultado a partir do intervalo de confiana de 95% para a diferena das mdias, o qual obteve valor de t calculado (1,399) menor que t-crtico, de 2,14 (P=0,05), aceitando, assim, a hiptese nula, ou seja, a igualdade entre as mdias. J para a turfa, ao realizar o teste para verificar se os dois mtodos produzem resultados iguais, utilizando-se 0,1 da amostra, observa-se que as mdias no foram consideradas iguais. Este fato justificado pelo intervalo de confiana para a diferena das mdias, no qual o valor 0 no est contido, e tambm, atravs do p-calculado (3,913) associado ao teste t-student, o qual possui um valor superior a 2,14, que nos leva a rejeitar a igualdade de mdias.

Tabela 3. Resultados estatsticos

Amostra

Massa da amostra (g) 0,1 0,5 0,1 0,5

Mtodo KT1 H1 KT5 H5 KT1 H1 KT5 H5

Mdia* 16272 13981 13939 12654 13177 12781 13019 12988

Desvio Padro* 266 1635 1757 1196 334 726 351 850

Varincia 70704 2673312 3086953 1429282 111605 527036 123477 722250

IC*(95%) 16051; 16494 12616; 15345 12473; 15405 11657; 13652 12898 ; 13455 12176 ; 13387 12726 ; 13312 12279 ; 13697

Turfa

cido Hmico
* em mgkg-1 (n=8)

Comparao KT1 com H1 KT5 com H5 KT1 com KT5 H1 com H5

Tabela 4. Valores calculados de F e t

Turfa 0,026 2,160 0,023 1,870

Teste F7,7 cidos Hmicos 0,212 0,171 0,904 0,730

Turfa 3,913 1,709 3,714 1,852

Teste t cidos Hmicos 1,399 0,096 0,920 0,522

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Para os dois mtodos utilizando-se 0,5g de turfa e cidos hmicos da turfa (tabela 3), a variabilidade do mtodo Hach maior quando comparada com o mtodo Kjeldahl tradicional. Pelas descritivas, observa-se que o mtodo Kjeldahl tradicional apresentou uma concentrao mdia de nKt maior que a concentrao da mdia de nKt pelo mtodo de Hach. Seguindo-se o teste para verificar se os dois mtodos produzem resultados iguais (tabela 4), nota-pelos testes estatsticos realizados, que o resultado para os mtodos Kjeldahl tradicional e Hach produzem o mesmo resultado, as mdias foram consideradas iguais. Obteve-se esse resultado a partir do intervalo de confiana 95% para a diferena das mdias, o qual obteve valor de t calculado (1,709 utilizando-se a turfa e 0,096 utilizando-se o cido hmico) menor que t-crtico, de 2,14 (P=0,05), aceitando assim a hiptese nula, ou seja, a igualdade entre as mdias. Pode-se dizer que o valor 0 est contido no intervalo de confiana para a diferena de mdias, o que nos leva a no rejeitar a igualdade de mdias. Comparando o mtodo Kjeldahl tradicional utilizando 0,100g e 0,500g de turfa, nota-se que o mtodo utilizandose menor massa foi o que apresentou a maior concentrao mdia de nKt e o menor desvio-padro. Seguindo-se o teste para verificar se o mtodo Kt produz resultados iguais independente da massa utilizada, nota-se que as mdias no foram consideradas iguais. tal fato justificado pelo intervalo de confiana para a diferena das mdias, no qual o valor 0 no est contido e, tambm, atravs do t-calculado (3,714) associado ao teste t-student, possuindo um valor superior a 2,14 que nos leva a rejeitar a igualdade de mdias. E comparando o mtodo Hach utilizando 0,100g e 0,500g de turfa, observa-se que o mtodo Hach 0,100g apresentou uma concentrao mdia de nKt superior concentrao da mdia de nKt pelo mtodo de Hach 0,500g. Seguindo-se o teste para verificar se o mtodo Hach produz resultados iguais independente da massa utilizada, observa-se que as mdias foram consideradas iguais, pois o valor 0 est contido no intervalo de confiana para a diferena de mdias e, tambm, pelo tcalculado (1,852) associado ao teste t-student, o qual possui um valor inferior a 2,14 que nos leva a aceitar a igualdade de mdias. Baseado nos resultados descritos pode-se afirmar que, independente da massa utilizada, o mtodo Hach produz a mesma concentrao mdia de nKt. Comparando-se o mesmo mtodo Hach ou Kjeldahl tradicional, utilizando-se 0,100g e 0,500g de cido hmico da turfa pela tabela 3, observa-se que as mdias so praticamente iguais. Pode-se afirmar que as massas utilizadas de 0,1g e 0,5g produzem o mesmo resultado. Seguindo-se o teste para verificar se o mtodo produz resultados iguais independentes das massas utilizadas (tabela 4), observa-se que as mdias foram consideradas iguais. Este resultado foi concludo a partir do intervalo de confiana de 95% para a diferena das mdias, e
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pelo t-tabelado, com o qual se obteve o valor de 0,92 para o mtodo Kjeldahl tradicional e 0,522 para o mtodo Hach, que so menores que 2,14 (P=0,05), aceitando, assim, a hiptese nula, ou seja, a igualdade entre as mdias. O valor 0 est contido no intervalo de confiana para a diferena de mdias e, tambm, pelo t-tabelado associado ao teste t-student. Baseado nos resultados, chega-se a concluso que a concentrao mdia de ntK (mg/kg) igual, independente das massas utilizadas. As Figuras 3 a 6 mostram os grficos de regresso para comparar os dois mtodos analticos utilizando-se turfa e cidos Hmicos extrados da turfa, respectivamente. (Observam-se pontos fora da curva (Outliers) nos grficos 3, 4 e 5. Retirando os Outliers, os valores dos coeficientes de correlao (R) para as retas aumentaram para 0,83409 para 0,1g de turfa e 0,90273 para 0,5g de turfa, respectivamente. Pelos grficos de regresso pode observar para comparar os dois mtodos analticos utilizando-se turfa e cidos Hmicos extrados da turfa

Figura 3. Grfico de regresso na comparao dos dois mtodos de determinao de NKT (mgkg-1), utilizando 0,1g de turfa

Figura 4. Grfico de regresso na comparao dos dois mtodos de determinao de NKT (mgkg-1), utilizando 0,5g de turfa

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concluses
Portanto, em todas as comparaes utilizando-se o cido hmico, o valor experimental menor que o valor crtico, a diferena entre os dois resultados no significante no nvel de cinco e a hiptese nula mantida, no h evidncias de erro sistemtico, nas quatro situaes analisadas notou-se que as mdias foram estatisticamente iguais. Os mtodos Hach e Kjeldahl tradicional apresentaram a mesma concentrao mdia de ntK, portanto pode-se usar qualquer uma das duas metodologias que o resultado ser o mesmo. Atravs dos resultados, podemos observar que a determinao de nKt pelo mtodo Kjeldahl tradicional e Hach utilizando-se turfa so precisos. Porm, tomando como base a exatido, o mtodo de Kjeldahl tradicional utilizando 0,1g de turfa apresentou erro sistemtico na titulao, fazendo com que no houvesse igualdade entre as mdias amostrais dos dois mtodos utilizados. A hiptese nula neste caso foi rejeitada, pois a diferena entre as mdias significativamente diferente de zero. J para as outras comparaes, pode-se observar que a determinao de nKt pelo mtodo Kjeldahl tradicional e Hach so exatos. A hiptese nula neste caso foi mantida, pois no h evidncia de erro sistemtico e as diferenas entre as mdias no so ditas significantes no nvel de 0,05 (5%). Utilizando o equipamento Hach mtodo 8075, modelo DR/2500, podemos constatar que as anlises foram realizadas com mais rapidez, segurana, menor custo de reagentes e com a mesma confiabilidade nos resultados quando comparado com o mtodo ntK tradicional.

Figura 6. Grfico de regresso na comparao dos dois mtodos de determinao de NKT (mgkg-1), utilizando 0,5g de cidos hmicos

Referncias
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Figura 5. Grfico de regresso na comparao dos dois mtodos de determinao de NKT (mgkg-1), utilizando 0,1g de cidos hmicos

Revista Analytica Dezembro 2006/Janeiro 2007 N26

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