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UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS FACULDADE DE CINCIAS FARMACUTICAS INTRODUO A BACTERIOLOGIA E MICOLOGIA ERICK FROTA GOMES FIGUEIREDO

PRTICA DE MICOLOGIA

MANAUS 2012

ERICK FROTA GOMES FIGUEIREDO

PRTICA DE MICOLOGIA

Trabalho

solicitado

pela

Professora para obteno de nota parcial referente ao 3 Perodo do Curso de Cincias Farmacuticas.

Professora: MARIA ZELI MOREIRA FROTA

MANAUS 2012

SUMRIO

1. INTRODUO............................................................................................................3

2. OBJETIVO....................................................................................................................4

3. MATERIAIS.................................................................................................................4

4. PROCEDIMENTOS.....................................................................................................5

5. RESULTADOS.............................................................................................................6

6. REFERNCIAS............................................................................................................8

INTRODUO

A tcnica de repique uma das mais antigas formas de cultura de fungos, sendo utilizada mesmo em dias atuais. O repique consiste em transferir microorganismo de uma cultura para a outra, a fim de tornar esse novo meio de cultura mais puro que o anterior. Ou simplesmente para evitar a morte do meio de cultura, que pode acontecer devido ao encerramento de nutrientes do meio ou pelo envelhecimento do fungo. Repiques contnuos so utilizados para evitar a mutao de colnias e para controlar o crescimento do fungo. Fazendo-se um repique para tornar o meio de cultura mais puro possvel fazer um estudo mais aprofundado dos aspectos macromorfolgicos da colnia, como a cor, textura, topografia e outros. Para fazer um estudo de fungos em nvel microscpico, usada a tcnica de fragmentao de cultura. Consiste em retirar microorganismo do meio de cultura e preparar uma lmina para a visualizao em microscpio com a adio do corante Azul de Lactofenol, que prprio para da microscopia de culturas de fungos filamentosos. Essa tcnica permite a visualizao das estruturas fngicas com uma maior integridade, sendo falha apenas no tempo de se conseguir o diagnstico.

OBJETIVO

Observar, realizar e analisar as tcnicas de repique e de fragmentao de cultura em fungos.

MATERIAIS

Capela de Fluxo Laminar; Lminas; Lamnulas; Bico de Bunsen; Ala de platina; Meio de cultura com fungos para as tcnicas utilizadas; Tubos de ensaio com meio de cultura Agar Sabouraud com antibitico Cloranfenicol; Conta-gotas; Azul de lactofenol;

PROCEDIMENTO

1. REPIQUE Qualquer tcnica laboratorial deve comear com a esterilizao do ambiente, a capela de fluxo laminar no caso; So selecionados os meios para fazer a tcnica de repique; Numerao os tubos de ensaio para ter um controle dos materiais trabalhados; Flambar a ala de platina para que no haja nenhum material que possa contaminar o experimento; Abrir o tubo de ensaio com o meio de cultura prximo a chama do bico de Bunsen; Com a ala retirar um pequeno pedao do fungo localizado na periferia desse meio; Com ala deve colocar-se a poro retirada no centro do tudo de ensaio com meio de cultura gar Saboraud, proporcionando assim o crescimento do fungo em uma forma mais pura.

2. FRAGMENTAO DE CULTURA Seleo dos meios de cultura para o experimento; Identificao da lmina para o controle das amostras; Flambagem da ala de platina para evitar contaminao; Abertura do tubo de ensaio prximo ao bico de Bunsen, para evitar contgios; Resfriamento da ala de platina no meio de cultura para a coleta da poro com microorganismos; Retirada da ala de platina com a amostra e deposita-la na lmina; Flambagem da ala de platina para destruir qualquer material que tenha ficado nela; Com a lamnula feita a repicagem do material para a melhor visualizao; Pinga-se uma gota do corante Azul de Lactofenol, para a visualizao em microscpio; Com a lamnula homogeneza a amostra com o corante; Coloca-se a lamnula em cima do homogeneizado e tm-se pronta a lmina para a observao no microscpio.

RESULTADOS

Com a tcnica de repique possvel fazer um meio de cultura puro. E com isso, pode-se fazer os estudos dos aspectos macromorfolgicos das colnias, com a cor do fungo e do meio de cultura, alm da textura e topografia. Essa anlise foi feita nos tubos do laboratrio, analisando-se os aspectos da FRENTE (cor, textura e topografia) e do VERSO (ausncia ou presena de pigmento, cor do pigmento e topografia).

Tubo A: Colorao: Marrom Textura: Veludnea Topografia: Umbilicada Pigmento ausente Pigmento no verso: Marrom Topografia do verso: Plana

Tubo C: Colorao: Branco amarelado Textura: Granuloso Topografia: Rugosa Pigmento ausente Pigmento do verso: Ocre Topografia do verso: Rugosa

Tubo B: Colorao: Ocre Textura: Cotonosa Topografia: Plana Pigmento presente Pigmento do verso: Marrom Topografia do verso: Plano

Tubo D: Colorao: Branco Textura: Pulverulenta Topografia: Plana Pigmento ausente Pigmento do verso: Ausente Topografia do verso: Plana

Tubo E: Colorao: Branca Textura: Cotonosa Topografia: Montanhosa Pigmento ausente Pigmento do verso: Ausente Topografia do verso: Plana

Tubo H: Colorao: Cinza Textura: Cotonosa Topografia: Plana Pigmento presente Pigmento do verso: Cinza Topografia do verso: Plana

Tubo F: Colorao: Branco / Rosa claro Textura: Cotonosa Topografia: Rugosa Pigmento ausente Pigmento do verso: Ausente Topografia do verso: Plana

Tubo I Colorao: Vinho Textura: Cotonosa Topografia: Rugosa Pigmento presente Pigmento do verso: Vermelho Topografia do verso: Plana

Tubo G: Colorao: Branca Textura: Cotonosa Topografia: Plana Pigmento ausente Pigmento do verso: Ausente Topografia do verso: Plana

REFERNCIAS

ANVISA - Agencia Nacional de Vigilncia Sanitria. Deteco e Identificao dos Fungos de Importncia Mdica. Disponvel em: <http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/microbiologia/mod_7_2004.pdf> Acesso em: 23 mar. 2012

MINAMI. Paulo S. MICOLOGIA: Mtodos Laboratoriais de Diagnsticos das Micoses. Barueri, SP: Manole, 2003.

Ebah. CONSERVAO DE MICRORGANISMOS. Disponvel em: < http://www.ebah.com.br/content/ABAAAAXDwAD/conservacao-microrganismos# >

Acesso em: 24 mar. 2012

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