4.4.

1
Especificaciones para la recoleccin y Transporte de Muestras Ambientales a) ESPECIFICACIONES PARA LA RECOLECCIN DE MUESTRAS DE AGUA CLORADAY NO CLORADA PARA ANALISIS MICROBIOLOGICO Una tcnica adecuada de toma de muestras es la parte crtica en el anlisis de la calidad sanitaria del agua, las muestras para un anlisis microbiolgico deben ser recolectadas en forma asptica y reflejar en la forma ms precisa posible, las caractersticas del agua en el momento del muestreo.

1.- AGUAS CLORADAS

1.1 MUESTRAS DE LLAVES Y GRIFOS: Las muestras deben ser recolectadas en envases limpios, de vidrio borosilicato o plstico polipropileno estril y contener 0.1 mL de una solucin de tiosulfato de sodio al 10% por cada 120 ml de muestra y facilitados por el Instituto de Salud Pblica.

Escoger la llave o grifo que estn en buenas condiciones de funcionamiento. Para obtener la muestra el muestreador deber lavarse las manos con agua y jabn. Abrir completamente la llave o grifo y dejar correr el agua por lo menos 3 minutos. Reducir el flujo de agua para permitir la toma de la muestra. Abrir el frasco y obtener la muestra sin enjuagar y la cantidad requerida segn anlisis. Llenar el envase hasta partes de su capacidad para permitir la agitacin de la muestra. Coliformes y coliformes 200 ml fecales: Salmonella 250 ml V.cholerae 1 litro Tapar inmediatamente el frasco cuidando cerrar bien para evitar filtraciones. Completar los datos de etiqueta adherida al frasco de muestra.. Se debe incluir una muestra blanco, que es tomada simultneamente con la primera muestra, y se usar para medir la temperatura de recepcin en el laboratorio. 2.- AGUA TRATADA Y ALMACENADA EN ESTANQUE (OSMOSIS, DESIONIZADA ETC)

2-.

Las muestras deben ser recolectadas en envases limpios, de vidrio borosilicato o plstico polipropileno estril y facilitados por el Instituto de Salud Pblica. Abrir el frasco y obtener la muestra sin enjuagar. Al recoger las muestras, coger el frasco por su base y sumergir el frasco bajo la superficie. En el caso de estanque, crear una corriente artificial colocando la botella horizontalmente hacia adelante a la direccin de la mano. Llenar el envase hasta partes de su capacidad para permitir la agitacin de la muestra. Cantidad requerida segn anlisis: Coliformes y coliformes fecales, Recuento de hetertrofos, mohos y levaduras:

3-. PREFILTRO Y LQUIDO DE DILISIS LAS MUESTRAS DEBEN SER RECOLECTADAS EN ENVASES LIMPIOS, DE VIDRIO BOROSILICATO O PLSTICO POLIPROPILENO ESTRIL Y FACILITADOS POR EL INSTITUTO DE SALUD PBLICA. La muestra de agua de prefiltro se obtiene del filtro antes que ingrese el agua a la mquina. La muestra de agua de lquido de dilisis se obtiene a la salida del capilar. No obtener de la manguera de salida de la mquina. Para obtener la muestra, el muestreador deber lavarse las manos, colocarse mascarilla y guantes estriles. Abrir el frasco y obtener la muestra sin enjuagar. Llenar el envase hasta partes de su capacidad para permitir la agitacin de la muestra. Cantidad requerida segn anlisis: Coliformes y coliformes fecales, Recuento de hetertrofos, mohos y levaduras: TRANSPORTE: Transporte muestras de agua clorada: Despus de su recoleccin deben ser mantenidas entre 0 y 10C como mximo, hasta su recepcin en el laboratorio. El tiempo mximo que puede transcurrir entre la toma de muestra y el anlisis es de 24 horas siempre que la muestra se mantenga refrigerada. No congelar la muestra. Transporte agua tratada, agua prefiltro y lquido de dilisis: Despus de su recoleccin deben ser mantenidas entre 0 y 10C como mximo, hasta su recepcin en el laboratorio. El tiempo mximo que puede transcurrir entre la toma de muestra y el anlisis es de 6 horas

siempre que la muestra se mantenga refrigerada. No congelar la muestra. ESPECIFICACIONES PARA LA RECOLECCIN DE MUESTRAS DE ALIMENTOS MUESTRAS DE ALIMENTOS

Las unidades de muestras de alimentos para anlisis bacteriolgico debern cumplir con las siguientes normas: Las muestras deben ser obtenidas en envases limpios y estriles. Los productos que se venden envasados deben venir en su envase original. Los envases deben llegar sellados, intactos y debidamente identificados. Se debe obtener una muestra blanco por Coleman de transporte utilizado para verificar en el laboratorio la temperatura de transporte de las muestras. Las muestras de productos perecibles, deben ser conservadas en refrigeracin entre 4 y 8 C, hasta su entrega en el ISP. Las muestras de helados o productos congelados deben ser conservadas en congelacin a-20 C hasta su entrega en el ISP. El tiempo entre la Toma de muestra y el anlisis no debe sobrepasar 24 horas. La cantidad mnima de unidad de muestra de alimento requerida es de 100 gramos; en el caso de mariscos el tamao de la unidad de muestra no debe ser inferior a 20 unidades y se debe obtener un peso de ms o menos 200 g. Decepcionadas las muestras por el ISP, las muestras perecibles deben ser conservadas en refrigeracin (4 C) o las muestras congeladas en congelacin (-20 C ) hasta su envo al laboratorio. El lapso de tiempo entre la recepcin en la unidad del CISP y la entrega al Tcnico de la Seccin Microbiologa no ser superior a los 20 minutos.

ESPECIFICACIONES PARA LA RECOLECCIN DE CONSERVAS Envases sellados y colocados dentro de una bolsa plstica. La cantidad mnima son 2 unidades de muestra de la misma serie o lote de produccin. Las muestras se conservan y transportan a temperatura ambiente al laboratorio. Bien identificados y acompaados con un documento que identifique claramente su procedencia. ESPECIFICACIONES DE ENVO DE CEPAS PARA ESTUDIO Las cepas que se envan para su identificacin, deben venir en: Envases metlicos con tapa, Los tubos protegidos y sellados Bien identificados y acompaados con un documento que identifique claramente su procedencia y tipo de producto del que se aisl.

http://www.ispch.cl/lab_amb/serv_lab/aerobios_especifi.html PROTOCOLO PARA TOMA DE MUESTRA

Elabor: Desarrollo Aprob: Comit de calidad Versin: 1 Fecha: 01/03/05 Estado: Controlado X No controlado MOL LABS LTDA. * PBX 4 20 52 00 * FAX 4 20 52 11 * Bogot, Colombia * www.mollabs .com

RECIPIENTES PARA ANLISIS FISICOQUMICO Los recipientes comnmente usados para anlisis fisicoqumico son de vidrio y de plstico con capacidad mnima de 1 L y tapa rosca hermtica. El vidrio debe ser neutro para no aumentar la concentracin de slice o sodio y de color marrn para disminuir la actividad fotosensible. Estos se usan para la determinacin de compuestos orgnicos y pueden adsorber trazas de metales. Los recipientes de vidrio nuevos se deben limpiar con agua y detergente para eliminar el polvo. Despus se limpian con una mezcla de cido crmico-cido sulfrico o en su defecto con un limpiador neutro y se enjuagan con agua destilada. Los recipientes plsticos deben ser de polietileno, policarbonato o tefln. Se usan para determinar sustancias inorgnicas y pueden absorber hidrocarburos. Los recipientes de polietileno se limpian llenndolos con una solucin de cido ntrico al 10% o una solucin 1M de cido clorhdrico durante 30 minutos y enjuagando con agua destilada o deionizada. No deben usarse detergentes para la limpieza cuando se va a determinar fosfatos, silicatos, boro y surfactantes. Usar recipientes de boca ancha para determinaciones de slidos o semislidos. Validar el recipiente y el procedimiento de limpieza llevando a cabo la toma, preservacin y anlisis de una muestra de referencia. Se debe identificar los recipientes de muestreo antes de recolectar la muestra utilizando lapicero, no utilizar lpiz ni lapicero de tinta mojada. TOMA DE MUESTRA PARA ANLISIS FISICOQUMICO Antes de recolectar la muestra, es necesario dejar fluir libremente el lquido durante unos cinco minutos a chorro con el objeto de captar el agua de inters y no aquella que pudiera estar retenida en las tuberas y puntos muertos del sistema. Cuando la muestra no se toma de una llave, en el sitio donde se va a recolectar la muestra el agua debe estar completamente mezclada para asegurar su representatividad. Purgar dos o tres veces el frasco con el agua a analizar. Llenar el frasco hasta el tope con el agua a analizar, evitando dejar aire atrapado en su interior y as, evitando las modificaciones durante el transporte. La cantidad mnima que se debe recoger para el anlisis es de 1 L. PROTOCOLO PARA TOMA DE MUESTRA

Elabor: Desarrollo Aprob: Comit de calidad Versin: 1 Fecha: 01/03/05 Estado: Controlado X No controlado MOL LABS LTDA. * PBX 4 20 52 00 * FAX 4 20 52 11 * Bogot, Colombia * www.mollabs .com

IDENTIFICACIN DE LA MUESTRA La identificacin de la muestra debe estar en un rtulo o cinta adherido al recipiente con tinta indeleble y debe contener como mnimo: *Identificacin de la muestra *Procedencia *Sitio de muestreo *Fecha y hora de recoleccin *Persona responsable *Color *pH *Caudal *Apariencia MANEJO DE MUESTRAS COLECTADAS Cuando es necesario redistribuir la muestra dentro de varios recipientes, esta operacin debe realizarse lo mas pronto posible despus del muestreo. Si las muestras requieren agitacin vigorosa antes de tomar las porciones para anlisis, el frasco no debe llenarse completamente. Si es necesario filtrar la muestra, este procedimiento debe realizarse inmediatamente despus de la recoleccin para evitar posibles cambios en las concentraciones. Durante el transporte de las muestras, evitar agitacin innecesaria y exposicin a la luz. Las muestras deben almacenarse en un cuarto limpio que pueda mantenerse oscuro y fresco, en el cual no se utilicen reactivos y que est separado del laboratorio. Tener en cuenta los tiempos mximos de almacenamiento y la forma de preservacin de la muestra para los diferentes anlisis. Identificar la muestra con el cdigo correspondiente y diligenciar el acta de toma de muestras. TRANSPORTE DE MUESTRAS DE AGUA Es necesario asegurar la integridad de la muestra desde su recoleccin hasta obtener el reporte de los resultados, para lo cual es til seguir las siguientes reglas: En el momento de empacarlas se debe revisar que los recipientes estn correctamente tapados para evitar posibles derrames o contaminacin . Empacar los frascos en cajas de icopor refrigeradas a 4C y protegidas de la luz. Tomar las necesarias para prevenir contaminacin por el refrigerante. Entregar inmediatamente las muestras con su identificacin al laboratorio, teniendo en cuenta que para aguas potables no deben transcurrir ms de 24 horas entre la recoleccin y llegada al laboratorio. Coordinar la realizacin del anlisis para el da de llegada de las muestras. PROTOCOLO PARA TOMA DE MUESTRA
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PRESERVACIN DE LAS MUESTRAS Se recomienda el anlisis en el sitio, especialmente para: olor, color, sabor, pH, cloro, oxono, oxgeno disuelto, acidez, alcalinidad, dixido de carbono, temperatura y conductividad. Los mtodos de preservacin generalmente se dirigen a retardar la accin microbiolgica, retardar la hidrlisis de diferentes sustancias qumicas y reducir la volatilidad de los constituyentes. Las aguas potables son menos susceptibles a reacciones qumicas y biolgicas que las aguas residuales. Las principales causas de variaciones en las muestras de agua son: La actividad biolgica puede consumir o modificar ciertos constituyentes del agua. Esta actividad incide en el contenido de oxgeno disuelto, dixido de carbono, compuestos de nitrgeno, fsforo y algunas veces silicio. Los constituyentes solubles pueden ligarse a material orgnico o la descomposicin de clulas puede alterar la solucin. Ciertos compuestos pueden oxidarse por el oxgeno presente en la muestra o en la atmsfera, por ejemplo el hierro II, los sulfuro y la materia orgnica. Algunas sustancias pueden precipitar como hidrxidos o formar complejos con otros constituyentes, por ejemplo metales, carbonato de calcio y compuestos metlicos como Al(OH)3 o Mg3(PO4)2. Y otros compuestos pueden volatilizarse, ejemplo oxgeno, cianuros y mercurio. El pH, la conductividad, el contenido de CO2, entre otros pueden modificarse por adsorcin de dixido de carbono procedente del aire, fotosntesis o respiracin biolgica. Los metales disueltos o coloidales, as como ciertos compuestos orgnicos pueden absorberse o adsorberse irreversiblemente sobre las paredes del frasco o sobre los materiales slidos de las muestras. Pueden ocurrir reacciones polimerizacin o despolimerizacin. Pueden ocurrir reacciones de oxido-reduccin. BIBLIOGRAFA Instituto Nacional de Salud. Instrucciones para la Toma, Preservacin y Transporte de Muestras de Agua de consumo humano para anlisis de laboratorio. www.col.opsoms. org/DIAA/2002/INS_guia_vigilancia.htm. Bogot, octubre - 2001 Standard Methods for Examination of Water and Wastewater, 18 TH edition 1060 B. COLLECTION OF SAMPLES, pp. 1-22

1 TOMA Y CONSERVACION DE MUESTRAS DE AGUA 1.- TOMA DE MUESTRA 1.1 Introduccin La toma de muestra de aguas es una operacin delicada, que debe llevarse a cabo con el mayor cuidado, dado que condiciona los resultados analticos y su interpretacin.

De una manera general, la muestra debe ser homognea y representativa y no modificar las caractersticas fisicoqumicas o biolgicas del agua (gases disueltos, materias en suspensin, etc.). Los tipos de envase a utilizar dependen del tipo de anlisis a realizar. Asimismo, dichos envases requieren un tratamiento previo de limpieza, esterilizacin, etc, en funcin de los parmetros a determinar. Los equipos o aparatos a utilizar para realizar la operacin de toma de muestra sern funcin de las condiciones fsicas del lugar de muestreo y de los parmetros a analizar. Por otra parte, el tipo de muestra a tomar depende del programa de muestreo establecido y de la finalidad requerida. As, pueden tomarse muestras simples, compuestas, integradas, etc. Existen diversas normativas para realizar correctamente la operacin de toma de muestra, teniendo en cuenta todos los aspectos anteriores. 1.2 Envases para la toma de muestras Exceptuando el material especfico que pueda utilizarse para determinaciones especiales, los recipientes en que se recogen las muestras debern ser de vidrio borosilicatado o material plstico y tendrn que cumplir los siguientes requisitos: a) No desprender materia orgnica, elementos alcalinos, boro, slice u otros que puedan contaminar la muestra recogida. b) Que la adsorcin ejercida por sus paredes sea mnima sobre cualquiera de los componentes presentes en la muestra de agua. c) Que el material constituyente del recipiente no reaccione con los componentes de la muestra. d) Debern poderse cerrar y sellar hermticamente. Los envases de plstico no deben utilizarse para el anlisis de gases disueltos, debido a su permeabilidad, ni para analizar compuestos orgnicos y algunos elementos minerales (por ejemplo fsforo) dada su capacidad de adsorber dichos compuestos. Los envases de vidrio no deben utilizarse para tomar las muestras en que se deben determinar elementos alcalinos, fluoruros, boro, slice o bien se vaya a medir la radiactividad. Los envases para la toma de muestra deben tratarse con permanganato potsico y cido sulfrico, y despus con agua destilada hasta eliminacin total de la acidez. En el momento de la toma de muestra, los envases han de ser enjuagados varias veces con el agua a analizar y despus llenados completamente sin dejar cmara de aire. Los envases de plstico pueden dar problemas de contaminacin, si la limpieza no ha sido perfecta, despus de cierto tiempo de utilizacin. En la tabla I se indican los tipos de envases recomendados para el anlisis de los distintos parmetros.

1.3 Tipos de muestras - Muestras simples: Son las que se toman en un tiempo y lugar determinado para su anlisis individual. - Muestras compuestas: Son las obtenidas por mezcla y homogeneizacin de muestras simples recogidas en el mismo punto y en diferentes tiempos. - Muestras integradas: Son las obtenidas por mezcla y homogeneizacin de muestras simples recogidas en puntos diferentes y simultneamente. - Muestras para el laboratorio: Son las muestras obtenidas por reduccin de las muestras anteriores (simples, compuestas o integradas) para realizar el anlisis de cada uno de los parmetros. 1.4 Procedimientos de toma de muestras La muestra puede tomarse por alguno de los siguientes mtodos: a) Directamente en la botella o recipiente que se va a enviar al laboratorio o que se utilice para las determinaciones "in situ". Este procedimiento est recomendado en grifos de redes de distribucin, fuentes, canales de riego, arroyos de poca profundidad, pozos dotados de bombas de extraccin y casos similares. En estos casos, es recomendable dejar fluir el agua durante cierto tiempo para conseguir que la muestra sea verdaderamente representativa. b) Mediante equipos de toma de muestra. Estos equipos se utilizan en ros, embalses, pozos sin bomba, grandes depsitos de almacenamiento, etc. En estos casos es preciso considerar diversos factores, tales como la profundidad, flujo de corriente, distancia a la orilla, etc. Si es posible, es recomendable obtener muestras integradas, y de no ser posible, se tomarn muestras simples en los lugares ms apropiados de la masa de agua (centro, orillas, a profundidades distintas, etc.). Asimismo, dependiendo de las necesidades, se tomarn muestras compuestas (por ejemplo, en el estudio de vertidos industriales, urbanos, etc.). 2.- CONSERVACION DE MUESTRAS Una vez tomada la muestra, sta sufre una serie de procesos que alteran sus caractersticas fisicoqumicas y biolgicas. As, por ejemplo, puede ocurrir: fijacin de ciertos elementos sobre las paredes de los recipientes y sobre las partculas suspendidas, prdida de gases disueltos, precipitaciones secundarias de cambio de valencia, accin de grmenes presentes, etc. Por ello es necesario, tomar ciertas precauciones con miras a su conservacin y estabilizacin de los constituyentes, durante el tiempo que transcurra entre la toma de muestra y el anlisis. No obstante, ciertos parmetros del agua requierendeterminaciones "in situ" (por ejemplo, pH, temperatura, oxgeno disuelto, conductividad, etc.) o bien de forma inmediata en el laboratorio. De manera general, es necesario conservar las muestras a baja temperatura (4C) tanto durante el transporte como en el laboratorio durante el tiempo que transcurra hasta la realizacin del anlisis. La adicin de ciertos compuestos qumicos facilita la conservacin de las muestras durante un cierto tiempo. No obstante, ciertos parmetros deben ser determinados dentro de las 24 horas siguientes (por ejemplo, color, turbidez, residuos, cianuros,

fenoles, detergentes, compuestos nitrogenados, etc.) aun aadindole dichos agentes preservantes.