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Dossier de lenvironnement de lINRA n25

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Disponibilit de composs traces organiques dans les sols amends par des boues dpuration
Corinne Perrin-Ganiera, Guy Soulasb, Henri Ciesielskic, Giovanni Cariac, Hlne Budzinskid
a

UMR INPL-ENSAI-INRA, Sols et environnement, BP 172, 54505 Vandoeuvre-ls-Nancy Corinne.Perrin-Ganier@ensaia.inpl-nancy.fr UMR INRA-univ. Bourgogne, Microbiologie et gochimie des sols GEOSSOL, BP 86510, 21034 Dijon cedex INRA, laboratoire d'Analyse des sols, 273 rue de Cambrai, 62000 Arras UMR CNRS-univ. Bordeaux I, laboratoire de Physico- et toxico-chimie des systmes naturels, 351 cours de la Libration, 33405 Talence cedex

b c d

Objectifs
Cette tude vise connatre la (bio)disponibilit de composs traces organiques (CTO) apports un sol agricole par lpandage de boues d'puration et prvoir leur volution aprs incorporation dans le sol. Un effort particulier est port sur lamlioration de la fiabilit des mthodes de dosage des CTO dans le sol et la boue. Des exprimentations centres sur l'tude du transfert dun CTO, de sa dgradation et de son impact sur la biocnose dans le systme boue-eau-sol-plante, doivent permettre d'obtenir une meilleure comprhension de la (bio)disponibilit des CTO apports par les boues et, plus globalement, de leur impact environnemental. On a galement mesur limpact de lpandage de boues sur la minralisation de pesticides. Cette recherche s'appuie sur le dispositif des 40 parcelles de plein champ situ sur la ferme exprimentale de La Bouzule (proprit de lcole nationale suprieure d'agronomie et de lInstitut national polytechnique de Lorraine) Vandoeuvre-ls-Nancy (Meurthe-et-Moselle) mis en place dans le cadre du programme pluridisciplinaire ADEME Effets cotoxicologiques des pandages de dchets en agriculture .

Mise au point de mthodes de dosage de composs traces organiques


En raison des difficults que comporte lanalyse de composs traces organiques, les quipes1 ont travaill lamlioration de la fiabilit des mthodes de dosages. Une campagne de comparaison des mthodes dextraction a t entreprise. Elle a t mene partir du mme chantillon de boue2 B1, lyophilise, broye et homognise et sur un chantillon de sol du site

UMR INPL-ENSAI-INRA, INRA Arras, UMR CNRS-univ. Bordeaux.

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de La Bouzule ayant reu 2 apports de cette boue, sch, broy, tamis 2 mm et homognis. Ces deux types dchantillons ont ensuite t fournis aux 3 quipes qui ont entrepris une extraction des hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP) selon un ensemble dtermin de mthodes : ultrasonication, micro-ondes, agitation, soxhlet, extraction acclre par des solvants sous pression (accelerated solvent extraction, ASE). Les HAP ont t purifis et doss selon la technique habituellement utilise dans chaque laboratoire par chromatographie liquide haute performance dtecteur ultraviolet ou par chromatographie gazeuse couple la spectromtrie de masse. Les 9 HAP communs recherchs par les 3 laboratoires sont le naphthalne, le phnanthrne, l'anthracne, le fluoranthne, le pyrne, le benzo(a)anthracne, le benzo(a)pyrne et conjointement l'indno(1,2,3-cd)pyrne et le benzo(g,h,i)prylne. La somme de ces composs est considre comme la quantit totale extraite partir de chaque mthode. Les quantits totales de HAP mesurs dans les chantillons de terre peuvent tre regroupes en trois groupes A, B et C, significativement diffrents (fig. 1, ci-aprs). Ainsi la mthode ASE utilisant de lactonitrile comme solvant (ASE 1) permet d'extraire le plus de HAP partir du sol, les mthodes d'agitation et d'ultrasonication permettent d'extraire des quantits intermdiaires. Les mthodes micro-ondes et soxhlet ne permettent d'extraire qu'environ 20% de la quantit moyenne extraite par ASE 1. Une trs grande diffrence de rendement est observe entre la mthode ASE 1 et celle utilisant un mlange dactone et de dichloromthane (ASE 2). Par contre, aucune diffrence significative napparat entre les rendements des mthodes soxhlet 1 (solvant actone et ther de ptrole) et soxhlet 2 (solvant dichloromthane). Dans le cas de la boue, comme pour le sol, la mthode ASE 1 permet d'extraire des quantits significativement suprieures celles obtenues avec les autres mthodes (fig. 2, ci-aprs). Cependant les diffrences de rendement sont moins marques que dans le cas du sol. De manire gnrale, il faut souligner que les mthodes qui permettent les taux dextraction les plus levs prsentent des carts types plus larges. Quel que soit le substrat, on mesure un ordre d'efficacit des mthodes tudies diffrent selon le solvant utilis. Par exemple, selon la mthode ASE utilise, celle-ci s'avre tre la plus efficace ou la moins performante en fonction du solvant employ. Dans la bibliographie, cette mthode est souvent cite comme tant trs performante, mais peu slective selon le solvant utilis. Les mthodes bases sur le principe de l'agitation mcanique sont rputes tre globalement quivalentes. Il est possible galement que le niveau de purification exig par la technique de dosage induise des pertes plus ou moins importantes lors de cette tape.

tude du devenir du phnanthrne dans le sol et la plante


Adsorption/dsorption par un sol agricole Le phnomne de ladsorption dun HAP par le sol a t tudi par des exprimentations d'adsorption/dsorption dans un mlange sol/solution de CaCl2 10-2 M en utilisant un HAP marqu au 14 C, le phnanthrne. Le sol agricole limono-argileux provient de la parcelle tmoin fertilisation haute du dispositif de La Bouzule.
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Les diffrents chantillons de boues utiliss dans cette tude proviennent de la mme station dpuration urbaine. La nomenclature utilise est la suivante : B1 est la boue brute, digre et liquide ; B2 est la boue B1 dshydrate en station ; B3 est la boue B2 composte avec des corces darbres.

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A 3 2 1 0 ASE 2 ASE 1 agitation ultrasons micro-ondes soxhlet 1 soxhlet 2 C B B C C C

Figure 1. Quantits totales de HAP extraites du sol par les diffrentes mthodes En ordonne : quantits de HAP en mg/kg de sol ; ASE 1 : extraction acclre par de lactonitrile sous pression ; ASE 2 : extraction acclre par un mlange dactone et de dichloromthane ; soxhlet 1 (solvant actone et ther de ptrole) ; soxhlet 2 (solvant dichloromthane).

A 12 10 8 6 4 2 0 ASE 2 ASE 1 agitation ultrasons micro-ondes soxhlet 1 soxhlet 2 C B B C C C

Figure 2. Quantits totales de HAP extraites de la boue par les diffrentes mthodes En ordonne : quantits de HAP en mg/kg de boue ; ASE 1 : extraction acclre par de lactonitrile sous pression ; ASE 2 : extraction acclre par un mlange dactone et de dichloromthane ; soxhlet 1 (solvant actone et ther de ptrole) ; soxhlet 2 (solvant dichloromthane).

La boue apporte est B1, sche 40C au laboratoire. Les expriences dadsorption/dsorption ont t ralises sur des chantillons de sol amend ou non, selon 4 modalits : - le sol seul ; - le sol amend par la boue ; - le sol enrichi en lments traces mtalliques (ETM) ; - le sol amend par la boue et enrichie en ETM. Les rsultats montrent une capacit relativement leve du phnanthrne se fixer sur le sol limonoargileux. Lapport de boue ne modifie pas sensiblement la capacit de rtention du sol. En revanche, la prsence dETM favorise ladsorption du HAP. Ladsorption nest pas totalement rversible (hystrse de dsorption) et la dsorption est plus importante en prsence dETM. Ces rsultats sexpliquent par un probable changement de conformation de la matire organique du sol en prsence dETM par la cration de ponts cationiques, modifiant ainsi laccessibilit des zones hydrophobes au phnanthrne susceptible de sy fixer.

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Dgradation et disponibilit du phnanthrne de la boue apporte au sol, en prsence ou en absence de plante Effet de la boue contamine en phnanthrne sur lactivit minralisatrice (ou dgradante) du sol La boue B1 enrichie en phnanthrne marqu au 14C a t ajoute au sol une dose quivalente 6,25 t/ha ou 4 fois cette dose (soit 25 t/ha). En comparaison, des quantits identiques de phnanthrne ont t apportes des chantillons de sol en absence de boue. Dans les diffrents cas, les teneurs rsultantes sont de 0,625 et 2,5 mg/kg de sol de phnanthrne. Tous les sols ont t amens 80% de leur capacit de rtention en eau et places dans des enceintes closes, obscures et thermostates 20C, en prsence dun pige CO2. Priodiquement, pendant 60 jours, les rsidus de phnanthrne ont t extraits des sols. En parallle, lactivit minralisatrice globale du sol a t value par dosage du CO2 et la minralisation du phnanthrne par le dosage du 14CO2. Lactivit minralisatrice gnrale de la microflore du sol se traduit par un dgagement de CO2 qui est plus important, dune part, en prsence de boue et, dautre part, lorsque les doses de boue ou de phnanthrne augmentent. Lapport de boue constitue un supplment de carbone disponible et se rvle tre un acclrateur de lactivit microbienne. La prsence de phnanthrne stimule galement lactivit de la microflore. Il est possible que sa prsence constitue un stress qui augmente lactivit microbienne ou que lhydrocarbure provoque, par sa toxicit, la mort de certaines souches qui servent de substrat supplmentaire celles qui ne sont pas sensibles. Lactivit dgradante spcifique vis--vis du phnanthrne donne lieu un taux de minralisation du polluant proche de 10% de la radioactivit introduite au bout de deux mois. La cintique de minralisation ne prsente pas de phase de latence. La minralisation du phnanthrne nest statistiquement pas diffrente en prsence ou en absence de boue, ni lorsque la dose dapport est multiplie par 4. Disponibilit du phnanthrne dans un sol aprs apport de boue, en prsence ou absence de plante Lespce vgtale cultive est la moutarde blanche, Sinapis alba, plante dinterculture susceptible dtre implante aprs un pandage de boue. Des aliquotes du mlange sol-boue B1 enrichi ou non en phnanthrne marqu au 14C ont t disposes dans des vases de vgtation dont une moiti a t ensemence avec des graines germes de S. alba. Lapport de boue a t quivalent 25 t/ha. Les vases de vgtation ont t placs en serre pour des dures de culture variant de 14 40 jours. Lhumidit des terres a t maintenue 80% de leur capacit de rtention. Les rsidus de phnanthrne ont t suivis au cours du temps. Les quantits de rsidus phnanthrne dans les plantes ont t mesures par dosage du 14CO2 produit lors de la combustion des vgtaux. Le dveloppement vgtatif nest pas statistiquement diffrent, en prsence ou non de phnanthrne. Il en est de mme pour les biomasses ariennes et racinaires mesures la rcolte. Aprs 42 jours de culture de S. alba sur un sol ayant reu une boue contamine par du phnanthrne, il apparat que prs de la moiti du HAP reste extractible du sol et donc potentiellement disponibles pour les micro-organismes, les plantes ou leau. Moins dun quart du produit est associ aux constituants du sol. Bien que 3% du phnanthrne soient retrouvs dans les plantes, la prsence des vgtaux ne modifie pas notablement les quantits de rsidus extractibles et lis. Enfin, le bilan de la distribution de la radioactivit en fin dexprience montre que prs de 30% nont pas t retrouvs dans les

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compartiments tudis du systme sol-boue-plante. Il peut sagir de pertes au cours des extractions et analyses mais, galement, de phnomnes de minralisation et volatilisation, voies de dissipation non contrles dans ce dispositif. Mobilit du phnanthrne dans un sol amend par une boue dpuration La mobilit du phnanthrne a t tudie laide de dispositifs microlysimtriques placs sous conditions climatiques naturelles durant 3 mois. Les modalits compares comportaient le sol seul ou amend par la boue B1, ventuellement enrichie en ETM. Chaque colonne a reu du phnanthrne marqu au 14C puis les rsidus de cet HAP ont t suivis dans les terres et les percolats au cours du temps. Exportation du phnanthrne par les eaux de percolation Une faible proportion du phnanthrne apport est lessive en 3 mois (2 3%). La majorit des rsidus est exporte lors du premier pisode de percolation, survenu 10 jours aprs la mise en place, alors que les molcules de phnanthrne se trouvent majoritairement sous forme extractible. Lapport de boue semble accrotre la mobilit du phnanthrne. Ceci pourrait tre d un entranement par la matire organique dissoute, issue de la boue. Cet effet nest pas apprciable en prsence dETM qui, augmentant ladsorption, rduisent sa solubilisation. Extractibilit des rsidus de phnanthrne La prsence de boue ne semble pas avoir deffet sur la disponibilit des rsidus de phnanthrne pour une extraction. Cependant la prsence dETM augmente significativement lextractibilit du phnanthrne. Leffet des ETM est sans doute indirect. Les ETM interagissent avec la matire organique, rendant les sites dadsorption plus accessibles tout en maintenant les rsidus facilement extractibles, en raison dinteractions de faible nergie. Ds le temps 0, les rsidus non extractibles par les solvants utiliss reprsentent 20 25% de la quantit introduite. Trois mois plus tard, cette quantit atteint 29 43% du phnanthrne apport. Lapport de boue ne modifie pas significativement les quantits non extractibles mais celui des ETM tend les rduire. Ceci confirme le maintien dans un pool extractible des rsidus de HAP retenu en prsence de mtaux. Les rsidus non retrouvs peuvent tre fixs sur les matriaux exprimentaux, volatiliss ou, plus vraisemblablement, minraliss. Nous avons, en effet, vrifi par ailleurs que le phnanthrne tait moins dgrad en prsence dETM et que la quantit minralise en 3 mois pouvait atteindre, dans un sol agricole biologiquement actif, 10 20% de la quantit introduite.

Effet des boues sur lactivit dindicateurs microbiens


Les indicateurs biologiques considrs ici sont la microflore des sols dans son ensemble ou des groupes fonctionnels d'importance agronomique et les descripteurs utiliss concernent les caractristiques de taille, d'activit et de diversit. Ces deux types de communaut microbienne se diffrencient par des compositions de peuplement et des niveaux d'interaction fonctionnelle diffrents auxquels correspondent diffrentes possibilits de rarrangements structuraux et de rgulation en rponse des stress chimiques. En premire approche, nous avons choisi comme indicateur microbien la microflore totale cultivable d'un sol dont nous avons analys, en cours d'incubation, l'volution

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des caractristiques du polymorphisme de taille des intergnes ribosomiques (ribosomal intergene space analysis, RISA) (Rousseaux, 2000), de la diversit mtabolique mesure par la technique biolog (Garland et Mills, 1991) et de la diversit gntique dtermine par des profils RISA ou par une technique sappuyant sur la sparation squence-spcifique de fragments dADN (terminal restriction fraction length polymorphism, T-RFLP) (Rousseaux et al., 2003). Enfin, en raison de leur importance agronomique et environnementale, nous avons analys des communauts microbiennes impliques dans la dgradation de produits phytosanitaires. Impact de lapport de boues sur la minralisation (dgradation) de pesticides par diffrents sols Minralisation de quatre pesticides dans un mme sol Le sol utilis est texture limono-argileuse (sol de Cteaux, Cte-d'Or), les 3 herbicides (2,4-D, atrazine et diuron) et linsecticide (carbofuran) ont t choisis en fonction de leur facilit tre minraliss ou tre adsorbs. Les tudes ont port sur des chantillons de sol amends ou non par la boue B3 avec ou sans addition de HAP (phnanthrne, anthracne, fluoranthne, pyrne, benzo(a)pyrne). Les apports de boues sont raliss 2 doses, 6,25 et 100 t/ha de matire sche. Paralllement, la taille de la population microbienne et sa diversit gntique ont t suivies. Toutes les molcules tudies se dgradent de faon relativement rapide dans le sol tmoin. Cependant, deux cas de figure peuvent tre observs. Dans le cas de l'atrazine et du 2,4-D, on n'observe pratiquement pas de diffrence dans la capacit du sol dgrader ces deux herbicides, quelles que soient la dose d'apport et la nature des boues. Le 2,4-D, sous forme anionique dans le sol, a une faible tendance s'adsorber. La prsence de matire organique additionnelle ne semble donc pas limiter son accessibilit biologique. Le cas de l'atrazine est plus complexe dans la mesure o cette molcule prsente une capacit certaine se fixer sur les matires organiques ; si l'apport de boues se traduit par une adsorption additionnelle, celle-ci est rversible et sans consquence sur l'accessibilit biologique de l'herbicide. Par contre, dans le cas du carbofuran et du diuron, l'effet de la dose d'apport des boues sur la vitesse de minralisation est dterminant, une augmentation de la dose entranant toujours une rduction de la vitesse de minralisation. Deux hypothses alternatives peuvent tre formules pour expliquer ces rsultats : celle d'une rtention relativement durable de ces molcules sur la matire organique apporte ou sur la biomasse noforme ou celle d'une utilisation prfrentielle de la matire organique apporte qui se ferait au dtriment du pesticide. Les cintiques de minralisation du diuron aprs un second traitement sembleraient indiquer que c'est sa rtention sur la matire organique qui est le principal frein sa dgradation dans le sol amend. Les rsultats des dnombrements de la microflore bactrienne cultivable font clairement ressortir une augmentation initiale significative du polymorphisme de la taille des communauts microbiennes avec la dose d'apport des boues, ce mme effet se reproduisant, bien que trs attnu, avec la boue B3 et la boue B3 avec ajout de HAP. Aprs 1 mois, la rgression de la microflore cultivable est gnrale et d'autant plus accentue qu'elle avait t importante. Les profils T-RFTL ne permettent pas de conclure quant un effet des diffrents traitements des boues sur la diversit microbienne. Minralisation de deux pesticides dans diffrents sols Les sols utiliss proviennent du site de la Bouzule et correspondent la parcelle tmoin haute fertilisation et aux parcelles ayant reues des apports de boues B1, B3 et B3 avec ajout de HAP, des doses de 30t/ha de matire sche. Paralllement, la biomasse microbienne aprs 15 et 80 jours a

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t suivie par la technique de fumigation-extraction et par des profils RISA permettant dvaluer la diversit gntique. Par ailleurs, la diversit mtabolique des communauts microbiennes prsentes a t mesure dans les sols des parcelles ayant reu les boues. Les cintiques de minralisation de l'atrazine et du diuron en prsence de boues brutes, compostes additionnes ou non de HAP indiquent une dgradation relativement lente dans le sol tmoin. Ceci confirme que si l'apport de boues se traduit par une adsorption additionnelle, celle-ci est rversible et sans consquence sur l'accessibilit biologique de l'atrazine ou du diuron. Le traitement organique apporte un surcrot de biomasse de l'ordre de 35 mg/kg de sol de carbone pour la boue B1 et de 20 mg/kg de sol de carbone pour la boue B3, ce qui n'apparat pas statistiquement significatif. Aucun effet significatif des HAP ajouts la boue B3 n'est observ. Les profils RISA ne montrent pas de diffrence significative entre les diffrents traitements des sols. On touche l une limite possible des approches bases sur les techniques de biologie molculaire appliques l'tude des communauts microbiennes naturelles. Les cintiques de minralisation de l'atrazine et du diuron dans le sol des parcelles traites du dispositif exprimental de La Bouzule ne permettent pas de tirer des conclusions quant un effet particulier des boues sur la vitesse de minralisation de l'atrazine. Pour le diuron, on observe une tendance relativement nette vers une augmentation de l'ordre de 15% 65 jours de la minralisation de ce compos aprs traitement avec des boues STEP, fraches ou compostes. Il y a lieu de remarquer que pour le traitement par la boue B1, la dispersion entre les blocs est extrme puisquon y retrouve le plus faible et le plus fort pourcentage de minralisation. L'volution de la biomasse microbienne dans le sol des diffrentes parcelles montre clairement que, par rapport au sol de la parcelle tmoin, l'accroissement li l'introduction des boues est significatif au seuil de 5%. On n'observe pas d'effet particulier li un type de boue ou la prsence de HAP. Concernant la diversit mtabolique, except pour le traitement avec la boue B3 enrichie en HAP, on peut globalement conclure que les autres traitements effectus sur les diffrentes parcelles du dispositif n'induisent pas de changements structuraux conduisant une modification des capacits mtaboliques de la microflore des sols. Concernant la diversit gntique, il semble que les diffrents apports de boues entranent une certaine simplification par rapport au sol de la parcelle tmoin. Effet du type de boue et de sol sur la dgradation de latrazine La valeur fertilisante des boues, comme ventuels agents de biostimulation de la capacit de diffrents sols dgrader l'atrazine, a t value. Considrant la prsence dans les boues d'autres composs organiques (type HAP) et lments minraux (type ETM), on a valu les effets cotoxicologiques ventuels que leur prsence pouvait gnrer au travers d'indices globaux bass sur le dnombrement et la mesure du carbone de la microflore totale et d'un indice d'activit, la dgradation de l'atrazine. Des chantillons de 4 sols ont t utiliss, sols de Cteaux, Dijon, poisses (Cte-dOr) et de La Bouzule, connus pour leurs capacits diffrentes dgrader l'atrazine. Les boues utilises sont la boue B2, B2 plus ajout de HAP, B2 plus ajout dETM (cadmium, cuivre, nickel, plomb et zinc), B3, B3 plus ajout de HAP, B3 plus ajout dETM. Paralllement, on a effectu des dnombrements de la microflore totale ainsi que des mesures de la biomasse microbienne par fumigation-extraction. Enfin, on a dtermin les cintiques d'adsorption de l'atrazine sur les diffrents mlanges sol-boues. Dans les sols d'poisses et de Cteaux, forte capacit de minralisation de l'atrazine, on n'observe aucun effet significatif des boues.

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Dans le sol de Dijon, d'une faon gnrale, les boues, quelles qu'elles soient, tendent inhiber trs lgrement la minralisation de l'atrazine au moins pendant les 40 premiers jours. Au-del, le phnomne s'inverse et les boues contribuent prolonger l'activit de minralisation, cet effet tant plus marqu avec les boues compostes. Les diffrences observes entre boues sont de faible ampleur et sans intrt pratique. En ce qui concerne la minralisation de la chane latrale -NH(C2H5)3 de latrazine, le phnomne le plus marquant est un effet dpressif global de faible ampleur (moins de 10%) des boues compostes. Dans le sol de La Bouzule, dont la capacit naturelle dgrader l'atrazine est la plus faible, la minralisation de l'htrocycle de latrazine n'est que faiblement affecte par la prsence de boues compostes ou non. Un effet plus important est observ pour la minralisation de la chane latrale. Cet effet n'est pas modifi par la prsence de HAP ou ETM ni par un compostage pralable de la boue. Les rsultats des dnombrements montrent que l'apport de boues peut modifier de faon faible mais significative l'abondance des bactries cultivables. De la mme faon, la biomasse microbienne peut tre significativement affecte par les diffrents traitements, mais jamais dans des proportions pouvant prsenter un intrt pratique vident. Pour les sols de Cteaux, poisses et Dijon, aucune diffrence n'apparat dans les cintiques d'adsorption qui puisse s'expliquer par les apports de boues. Pour le sol de La Bouzule, on observe au contraire des diffrences importantes indiquant une capacit d'adsorption accrue en prsence de boues par rapport au sol non amend dont la capacit d'adsorption est naturellement faible. Par ailleurs, le compostage semble favoriser l'adsorption. Pour ce sol au moins, l'observation d'une tendance gnrale une diminution de la minralisation de l'atrazine en sol amend pourrait s'expliquer par son adsorption accrue sur les matires organiques des boues

En conclusion
Parmi les composs traces organiques susceptibles dtre apports par une boue de station dpuration, les HAP sont parmi les plus difficiles doser. La comparaison de diffrentes mthodes dextraction a montr limportance du choix du solvant. Lactonitrile semble particulirement efficace, surtout lorsque les HAP sont recherchs dans le sol. La mobilit du phnanthrne apport par une boue est diffrente selon les substrats, aussi bien par son adsorption sur le sol que par son transfert dans leau. Lajout dune boue un sol ne modifie pas son adsorption ni sa dsorption. En revanche, la prsence dETM dans le sol, qui peuvent tre simultanment apports par la boue, semble rendre plus accessible la matire organique du sol au phnanthrne, probablement par modification de sa structure en prsence dETM. Ces rsultats ont pu tre complts par les expriences effectues sur des microlysimtres sous conditions climatiques naturelles. Le phnanthrne, malgr sa faible solubilit, est transfr de manire significative dans les eaux de percolation dans tous les cas et reste davantage prsent sous forme extractible par un solvant,

Cl N H N
3

N H N N C2H5

(CH3)2HC

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en prsence dETM. Les ETM ne semblent cependant pas avoir deffet sur sa concentration dans les eaux de percolation. La minralisation du phnanthrne nest statistiquement pas diffrente en prsence ou en absence de boue, mme lorsque la dose dapport est multiplie par 4. En prsence de la plante cultive, le comportement du phnanthrne ne semble pas trs diffrent. Le dveloppement des plantes na pas transform sensiblement la distribution des rsidus dans le sol, bien que 3% du phnanthrne soit retrouv dans les parties ariennes. Lapport de boue de station d'puration dans les sols ne semble pas contribuer de faon significative renforcer le potentiel de dgradation de pesticides. Au contraire, une adsorption du pesticide sur la matire organique des boues pourrait diminuer son accessibilit biologique, limitant ainsi sa minralisation, toujours dans des proportions relativement faibles. Les diffrents indicateurs d'abondance (dnombrements, biomasse microbienne) ou de diversit gntique (T-RFLP ou RISA), ou mtabolique (plaques Biolog) ont permis de mettre en vidence un effet significatif mais temporaire des boues sur la taille de la biomasse microbienne des sols mais n'ont pas permis de relier ces variations des modifications structurales. Ainsi donc, daprs les rsultats obtenus ici, on ne peut pas mettre en avant de diffrences suffisamment pertinentes pour dire qu lchelle du champ, lapport de boues a un impact sur la dgradation et la migration de composs traces organiques dans les sols agricoles. En revanche, nous pouvons conclure que la prsence dETM peut influencer, de manire non ngligeable, leur disponibilit dans le sol

Rfrences bibliographiques
GARLAND J.L, MILLS A.L., 1991. Classification and characterization of heterotrophic microbial communities on the basis of patterns of community-level-sole-carbon-source utilization. Applied and Environmental Microbiology, 57, 2351-2359. ROUSSEAUX S., 2000. Diversit taxonomique, gnotypique et physiologique des souches bactriennes dgradant l'atrazine dans les sols. Thse de doctorat de luniversit de Bourgogne, Dijon, 150 p. . ROUSSEAUX S., HARTMANN A., ROUARD N., SOULAS G., 2003. A simplified procedure for terminal restriction fragment length polymorphism analysies of the soil bacterial community to study the effect of pesticide on the soil microflora using 4, 6dinitroorthocresol as a test case. Biology and Fertility of Soils, 37(4), 250-254.

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