Universidad de La Cinega del Estado de Michoacn de Ocampo

Licenciatura en Genmica Alimentaria

Biologa molecular

Prctica #4
Preparacin de soluciones

Alumna: Nancy Danae Castaeda Escalera 5A

Profesor: Dr. Pedro Damin Loeza Lara

Fecha de entrega: 05 de Enero de 2012

Introduccin: Una disolucin es una mezcla homognea de dos o ms sustancias y se compone de disolvente y soluto. El disolvente es la sustancia de mayor concentracin en la mezcla y el soluto el componente minoritario que se disuelve en el disolvente. Generalmente, las disoluciones siempre tienen un componente lquido y pueden ser gas-lquido, lquidolquido o slido-lquido. Las soluciones se pueden clasificar en dos grupos: Electrolticas: Son disoluciones de compuestos inicos o polares en disolventes polares, los solutos se disocian en disolucin para formar iones, son disoluciones que conducen electricidad, y pueden disociarse completamente o parcialmente. No electrolticas: Son disoluciones de compuestos covalentes o en disolventes no polares, en donde los solutos no se disocian sino que simplemente se dispersan, y no conducen electricidad.(Annimo, 2012)

Para realizar una solucin es necesario conocer su concentracin, es decir, la cantidad de soluto presente en determinada cantidad de una solucin. Para conocer la concentracin de una solucin se utilizan generalmente tres unidades de concentracin: porcentaje en masa, molaridad y molalidad. El porcentaje en masa (peso porcentual) es la relacin de la masa de un soluto en la masa de la disolucin, multiplicado por cien.

La molalidad es el numero de moles de soluto disueltos en 1 kg de un disolvente.

La molaridad es el nmero de moles de soluto en 1 L de solucin. Es la unidad ms utilizada debido a que es ms fcil medir el volumen de la solucin, y su frmula general es (Chang, 2007, p. 507-509):

La solubilidad es un factor importante en las disoluciones; y representa la cantidad de sustancia que se puede disolver en una cantidad dada de disolvente. Una sustancia con una solubilidad menor a 0.01 mol/L se puede considerar como insoluble, ya que la

atraccin entre los iones con carga opuesta en el solido es muy grande y no pueden ser disgregados fcilmente. (Brown, LeMay, Bursten y Burdge, 2004, p. 118)

Objetivo(s): Aprender los clculos necesarios para la preparacin de las soluciones ms empleadas en el laboratorio de Biologa molecular. Preparar las soluciones necesarias para la extraccin de ADN de clulas de la bacteria Escherichia coli.

Materiales: Materiales: Balanza analtica o digital Micropetas y puntas de 10, 100 y 1000 l. Vasos de precipitado de 50 o 100 ml. Frascos estriles de vidrio. Agua destilada estril. Probetas de 100, 200 y 500 ml. Papel aluminio. Esptulas. Agitadores magnticos. Potencimetro. Reactivos: Glucosa. cido etilendiaminotetraactico (EDTA). Tris hidroximetil aminometano (tris base). Hidrxido de sodio (NaOH). Dodecilsulfato sdico (SDS). Acetato de sodio (CH3COONa). cido actico glacial. cido clorhdrico.

Procedimiento 1. Preparar 200 ml de solucin I de plsmidos (glucosa 0.1M, EDTA 0.01M, Tris 0.05M, pH 8). 2. Preparar 300 ml de la solucin II de plsmidos (NaOH 0.2M, SDS 1%). 3. Preparar 500 ml de la solucin III de plsmidos (acetato de sodio 3M, pH 4.8, ajustar pH con cido actico). 4. Preparar 1 lt. de la solucin TAE 50X (242 g de tris base, 57.1 ml de cido actico glacial, y 100 ml de EDTA 0.5 M, pH 8, ajustar pH con cido clorhdrico 0.1 M). 5. Preparar 250 ml de la disolucin TAE 1X (a partir de la solucin TAE 50X y diluir en agua destilada) (Sambrook y Rusell, 2001). Conclusin: Durante la prctica realizada se hicieron clculos de molaridad necesarios para medir las sustancias que despus se utilizaron para obtener las soluciones que permitirn extraer ADN de la bacteria Escherichia coli. Fue importante realizar stos clculos previamente,

ya que facilitaron la medicin de las sustancias y se pudieron obtener rpidamente las soluciones que se necesitaban.

Fuentes y referencias: [1] Estequiometria de las disoluciones, consultado el 3 de Enero del 2012 de http://www.eis.uva.es/~qgintro/esteq/tutorial-05.html [2] Chang, Raymond, Qumica (9a edicin), Mxico, 2007, Editorial McGraw-Hill, p. 507509. [3] Brown, Theodore L., LeMay, H. Eugene Jr., Bursten, Bruce E., Burdge, Julia R., Qumica la ciencia central, Mxico, 2004, Editorial Pearson educacin, p. 118