Eduardo Arturo Orendain Adalid Materia: Fisiologa microbiana Clave: 1500 Grupo 1 Semestre 2012-2 Entrega: 25/3/12

Candida albicans

Tarea 2 (Alteracin de la estructura microbiana y mecanismos de invasin y supervivencia) Inmunofluorescencia directa Como su nombre lo indica es un mtodo directo que detecta la presencia de antgenos virales. Es una de las tcnicas ms antiguas y de uso ms difundido en el laboratorio clnico. Principio bsico y funcionamiento de la Inmunofluorescencia directa: las muestras clnicas apropiadas son recolectadas y colocadas sobre portaobjetos donde se dejan secar y fijar. Luego se agregan anticuerpos especficos marcados con isotiocianato de fluorescena, que difunden a travs de la membrana celular y se combinan con los antgenos vricos en el interior de las clulas. La reaccin antgeno-anticuerpo se visualiza con un microscopio de fluorescencia, con la aparicin de fluorescencia de color verde manzana. Esta tcnica se puede utilizar para una identificacin rpida del virus directamente sobre la muestra (por ejemplo: clulas eluidas de un lavado nasal, o de un hisopado nasofarngeo), o se la puede emplear para la confirmacin del efecto citoptico (Efecto de la infeccin viral sobre el cultivo celular, visible al microscopio o por examinacin visual directa. Provoca cambios en la morfologa celular, lisis celular, vacuolizacin, formacin de sincitios, formacin de cuerpos de inclusin, etc.) Observados en cultivo celular. Sin embargo la realizacin de la reaccin es laboriosa, depende mucho de la calidad de los reactivos, requiere un microscopio de fluorescencia y de una persona con experiencia para un diagnstico certero, as como una recoleccin y preparacin de la muestra adecuados. Aun as, el mtodo en manos de una persona con experiencia resulta til para la identificacin rpida de ciertos virus como los virus respiratorios, ya que nos proporciona un diagnstico etiolgico en el curso de una jornada de trabajo. Adems se puede estudiar varias muestras simultneamente. El advenimiento de los anticuerpos monoclonales, ha incrementado la especificidad y en algunos casos la sensibilidad de estos ensayos. Esta tcnica requiere de 2-4 horas y se ha reportado una sensibilidad del 70-80% comparada con cultivos celulares para la identificacin del virus Herpes Simple, 80-95% para VRS y 71% para influenza A.

Eduardo Arturo Orendain Adalid Materia: Fisiologa microbiana Clave: 1500 Grupo 1 Semestre 2012-2 Entrega: 25/3/12

La tincin con inmunoperoxidasa es similar a la de inmunofluorescencia y es la tcnica de eleccin en algunos laboratorios. El procedimiento implica unos pocos pasos adicionales ya que en este caso el anticuerpo monoclonal est marcado con una enzima que requiere la adicin de un sustrato para evidenciar la reaccin por un cambio de color que es visible micro y macroscpicamente.

Depsito de inmunoglobulinas entre las clulas de tejido de la piel (epidermis) en un paciente con pnfigo.

Referencias: http://www.dermatologia.cat/es/tecnifd.html http://www.definicionesdemedicina.com/efecto-citopatico/ http://www.educa2.madrid.org/c/document_library/get_file?p_l_id=194476&groupId=34 663&folderId=206039&name=DLFE-5432.pdf http://www.biologia.edu.ar/viruslocal/diagnostico%20viral.htm