Universidad de La Serena Facultad de Ciencias.

Departamento de Biologa

Difusin y Potencial Hdrico

Relaciones hdricas en las plantas.

Integrantes: Alejandra Araya Luis Castillo Luis Garbarini Valentina Rivera Ral Toledo Profesora Curso Fecha : Nancy Olivares : Laboratorio Fisiologa Vegetal : 23 de Abril de 2012

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Resumen
En el conjunto de sesiones realizadas hasta hoy, se realizan una serie de experimentos relacionados con difusin y potencial hdrico de vegetales. Dentro de las primeras sesiones se logr apreciar caractersticas de la difusin tales como la velocidad con la cual actan diferentes colorantes en un tiempo determinado, lo cual depende de sus propiedades. Se observo tambin como la temperatura es una variable que afecta directamente la difusin calculando el Q10. En los experimentos de absorcin qued determinado que el agua y ciertos materiales orgnicos, los presentes en las semillas por ejemplo, tienen gran capacidad para mostrar propiedades imbibitorias o de hidratacin. Por ultimo en difusin, se logra verificar que las concentraciones de soluto trabajan ligadas directamente con el flujo y direccin del agua en movimiento.

Introduccin
Los mecanismos de difusin y osmosis son primordiales para el traslado del agua a travs de la planta. El movimiento de agua lleva consigo la disolucin de grandes cantidades de solutos, muchas veces arrastrando algunos, lo cual se debe en gran parte a las propiedades qumicas del agua. En los experimentos realizados en los laboratorios se demostrara como actan y cmo influyen las propiedades fsicas en la fisiologa vegetal. La imbibicin es la capacidad que tienen las plantas para absorber el agua y mantenerla dentro de ellas, lo cual se demostrara en un prctico trabajado con semillas. Estos tres procesos son fundamentales en las plantas, debido a que sus interacciones permiten explicar fenmenos fisiolgicos relacionados con estas, en especial con el agua y las diferentes formas de difusin que esta presenta. Objetivos 1.- Entender e identificar las principales variables cuantitativas y cualitativas que interfieren en el proceso de difusin, como por ejemplo temperatura, permeabilidad, etc. 2.- Entender e identificar las principales variables que interfieren en el proceso de imbibicin, como por ejemplo nmero de poros de una muestra, potencial matrico, etc. 3.- Entender e identificar las principales variables cuantitativas y cualitativas que interfieren el proceso de osmosis, como por ejemplo tamao del soluto, cohesin, etc.
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A.- Difusin y Potencial Hdrico

Materiales y Mtodos.
Experiencia 1. Tome 4 tubos con gelatina y llene un 1 cm. Del espacio libre en cada uno con una dilucin de los colorantes que se indican a continuacin. Asegurndose de que queden bien tapados y con un espacio libre de aproximadamente 2 cm. Sobre las disoluciones. Tubo 1: Tubo 2: Tubo 3: Tubo 4: 0.01 M Permanganato de potasio 158 PM 0.01 M Anaranjado de metilo 327 PM 0.01 M Rojo Congo (*) 697 PM 0.01 M Eritrosina 897 PM

(*) = Tiene propiedades coloidales. Anote en cada tubo: el colorante agregado, la hora y fecha de inicio. Mida las distancias recorridas por las partculas en cada tubo segn la tabla 1.La exactitud de las medidas debe ser 1 mm; conceda especial importancia a las medidas del primer da. Deje los tubos a 20C (estufa 1). Calcule Tericamente las distancias recorridas por difusin en cada medio a partir de la ecuacin:

,donde d = distancia, a = factor de proporcionalidad (i.e.. la distancia recorrida en una unidad de tiempo), t = tiempo (en das). Tabla 1: Distancias observadas (O) y tericas (T) recorridas por difusin por 4 colorantes con concentracin 0.01 M. (* resultados de la experiencias 3).(ver Pg. 9)
Da 1 O (a) Da 2 O T Da 3 O T Da 5 O T Da 7 O T

Colorante Permanganato de Potasio Anaranjado de Metilo Rojo Congo Eritrosina (0,01 M)

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Eritrosina (0,001 M)

Experiencia 2.

Tome 2 tubos con gelatina y llene el espacio libre con una disolucin al 0.01 M de Eritrosina. Coloque uno de los tubos a 0C (refrigerador), deje otro a 10C (estufa 2). Mida la distancia (en mm) a que se difunde el colorante en ambos tubos haciendo las lecturas siempre a las mismas horas en los intervalos indicados. El tubo con Eritrosina 0.01 M de la experiencia 1 (20C) forma parte de esta experiencia. Con los valores obtenidos calcule el coeficiente de temperatura para cada 10C (Q10). El coeficiente de temperatura o coeficiente trmico Q10 de cualquier proceso qumico o fisiolgico, es el numero de veces que aumenta la velocidad o intensidad del proceso, por cada 10 grados de aumento de temperatura. Interprete sus resultados.

Tabla 2. Efectivo de la temperatura sobre la distancia recorrida por difusin en soluciones de eritrosina, d = distancia, Q10 = coeficiente trmico. (ver pg. 9)
Tratamiento Refrigerado a 0C Estufa a 10C Estufa a 20C Da 1 d Q10 Da 2 d Q10 Da 3 d Q10 Da 5 d Q10

Experiencia 3.

Tome un tubo con gelatina y llene el espacio libre con una disolucin de eritrosina diluida 10 veces respecto a la experiencia 1 (i.e., 0.001 M). Deje el tubo a 20C. Registre las distancias (en mm) recorridas por eritrosina en 1, 2, 3, 4, 7 y 10 das, y compare sus resultados con los obtenidos con la eritrosina 0.001 M. Anote sus valores en la tabla 1.

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Anlisis de resultados.

Experiencia 1 y 3: Para cada colorante, haga un grafico en papel milimetrado con los datos obtenidos, anotando la distancia recorrida (mm) en la ordenada y el tiempo (das) en la abscisa. Repita el grafico transformando sus datos (logaritmo). Compare la curva terica con sus resultados experimentales. Luego de realizar el anlisis de los resultados obtenidos en su trabajo practico, disctalos. Finalmente escriba sus conclusiones, las que deben incorporar, adems, una discusin del siguiente temario. 1.- Defina el proceso de difusin y establezca los factores que lo determinan. 2.- Por qu algunos colorantes se comportan de manera diferente a lo esperado? 3.- Qu Factores controlan la intensidad de la difusin y su direccin? Explique por qu decrece con el tiempo. 4.- Cual es la diferencia entre difusin y flujo de masa? 5.- Si la velocidad de difusin de un gas es inversamente proporcional a la raz cuadrada de su peso molecular, calcule cual sera la velocidad de difusin del H2, C2 y CO2. 6.- Basndose en los resultados de la experiencia 3 Cunto tiempo tardara una sustancia para llegar de las hojas a las races de un rbol de 45 m de altura, suponiendo que el traslado se efectuara exclusivamente por difusin?

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B.- Imbibicin Materiales y Mtodos.

Experiencia 1. Rol del lquido en la Imbibicin.

Coloque un trozo de cochayuyo seco en agua y ter pesndolo previamente. Repita lo mismo con un trozo de gelatina. A) Despus de 24 horas, determine el peso de cada trozo B) Determine la cantidad de liquido embebido por gramo de sustancia.

Explique los resultados obtenidos. Tabla 3. (Ver pg. 9)

Tratamie nto En Agua En ter Cochayuyo Masa Masa Inicial Final Gelatina Masa Masa Inicial Final

Experiencia 2. Aumento de volumen (ver pg. 9) Coloque porotos y almidn insoluble en agua (volumen conocido). Despus de 24 horas, determine el aumento de volumen de la sustancia. Explique cmo Calcul el cambio de volumen.
Poroto Volumen Volumen Inicial Final Almidn Insoluble Volumen Volumen Inicial Final

Experiencia 3. Efectos osmticos sobre la imbibicin. En recipientes (tubos o vasos) que contiene soluciones de 4 M, 2 M, 1M, 0.5 M de NaCl y el control con agua destilada. Agregue en cada una 5 granos de trigo seco previamente pesados (Pi, en gramos).

Despus de 48 hrs, remueva los granos y obtenga el peso final (Pf, en gramos). Represente sus resultados en una curva de agua embebida / gramos de trigo vs concentracin. Interprete.

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Anlisis. 1. Qu condiciones se requieren para que ocurra imbibicin? 2. Qu es presin de imbibicin? Describa un experimento para desmostarla.

Experiencia 4. Pese 30 gr. De almidn soluble y seco y colquelos dentro de una botella thermos limpia y seca. A continuacin agregue 30 ml de agua a temperatura ambiente (tome la temperatura inicial). Mezcle con varilla de vidrio y determine la mxima temperatura alcanzada por la mezcla.

Tabla.

A) Cul es la fuente de energa calrica desarrollada durante el proceso

de imbibicin?

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C.- Osmosis:
Experiencia 1: Demostracin de la pasin osmtica mediante un osmmetro.

La osmosis puede ser medida con un osmmetro que posee una membrana de celofn. (Permeable al agua pero no a la sacarosa). En el interior se coloca una solucin concentrada de sacarosa y el osmmetro se coloca dentro de un vaso con agua destilada.

Monte la experiencia al comienzo del periodo de laboratorio e indique la posicin de la solucin de sacarosa en el capilar con un lpiz de cera. Mida la posicin de la solucin en el capilar respecto al tiempo cero cada 10 minutos. Hay una difusin neta de agua a travs de celofn? Qu sucedera con el nivel en el capilar si el osmmetro fuera colocado en una solucin mas concentrada de sacarosa? Por qu?.

Experiencia 2: Determinacin del potencial Osmtico de una clula.

Monte epidermis de Rhoeo discolor (u otro material entregado por su ayudante) en gotas de solucin de sacarosa de 0.22 M, 0.26 M, 0.30 M, 0.38 M. Monte una hoja en cada concentracin sobre un portaobjeto. Examine las hojas al microscopio despus de 30 a 40 minutos y revise la presencia de clulas plasmolizadas. Determine la concentracin en que se produce Plasmlisis incipiente; en este punto la concentracin de soluto dentro y fuera de la clula es la misma y no hay flujo neto de agua dentro o fuera de las clulas.

1. Cul es la importancia de la concentracin osmtica en las clulas vegetales?, Cul es su significado en relacin a la turgidez de la planta? 2. Defina osmosis. Describa para ilustrarla en un experimento diferente al citado.

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3. Cul es la importancia del potencial de presin en el crecimiento de la clula y de la planta? 4. Explique si la intensidad de la osmosis depende de la naturaleza qumica del producto, de su tamao molecular o peso molecular. 5. Qu es la plasmlisis? Tiene alguna importancia biolgica? 6. Analice tres funciones del agua en las plantas. 7. Relaciones los conceptos potencial hdrico y DPV. Explique los dos trminos. 8. Qu importancia biolgica tienen los fenmenos de difusin, smosis e imbibicin? Resultados
A _ DIFUSIN Experiencia 1 Tabla 1 (cms)

Da 1 Colorante Permanganato de potasio Anaranjado de metilo Rojo congo Eritrosina 0,01M Eritrosina 0,001M O (a) 0,1 2,5 0,1 1,2 0,8

Da 2 O 0,1 3,6 0,1 1,3 1,0

Da 2 T 0,14 3,5 0,14 1,68 1,12

Da 3 O 0,1 4,0 0,1 1,5 1,4

Da 3 T 0,17 4,25 0,17 2,04 1,36

Da 5 O 0,1 6,0 0,5 2,7 2,0

Da 5 T 0,22 5,5 0,22 2,64 1,76

Da 7 O 0,1 6,5 0,7 2,8 2,5

Da 7 T 0,26 6,5 0,26 2,64 2,08

T: Resultado terico mediante la frmula d= a*t ^0.5 O: Resultado observado

Experiencia 2 Tabla 2 Da 1 d Q10 8 mm 9.09x10-3 Da 2 d Q10 11 mm Da 3 d Q10 Da 5 d Q10

Tratamiento Refrigerado a 0C

0.3

14 mm

0.22

17 mm 0.55
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8
Estufa a 10C 5 mm

10 mm 12 mm

12 mm

17.7 6

16 mm

Estufa a 20C

12 mm 6.34x10

6.19 16 mm

19 mm 5.58

B _ IMBIBICIN Experiencia 1 Tabla 1 Cochayuyo Masa Masa Inicial Final

1,099 g 0,07 g 1,45 g 0,17 g

Tratamiento En Agua En ter Experiencia 2 Tabla 2

Gelatina Masa Masa Inicial Final

0,06 g 0,04 g 0,9 g 0,05 g

Poroto Masa Inicial

0,34 gr

Agua Volumen Inicial

5 ml

Masa Final
2,84 gr

Volumen Final
2,5 ml

Experiencia 3 Tabla 3 C 4M Peso inicial Pi Peso final Pf (Pf-Pi)/Pi 0,22 0,37 0,68 O N C 2M 0,22 0,38 0,72 E N T 1M 0,19 0,35 0,84 R A C I 0,5 M 0,24 0,42 0,75 O N E S

H2O d 0,24 0,44 0,83

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Experiencia 4 Tabla 4 Temperatura inicial Temperatura final 24 C 30 C

Anexos

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Discusin
DIFUSIN: Experiencia 1. Algunos de los colorantes debido a sus propiedades qumicas e interacciones que pueden tener o asimilar con el gel logran difundir con mayor velocidad que otros, logrando notar de inmediato la diferencia y distinguindolo en el primer da. Sin embargo, a medida que transcurran los das, se observa claramente que los datos obtenidos arrojaban grandes diferencias con los datos que tericamente calculamos en cuando a la distancia recorrida, llegando a la conclusin que se trataba gracias al instrumento de medicin (una regla de 30cm) ya que al hacer un comparacin con la formula, esta carece bastante de precisin, y adems de que la medicin al ojo humano nunca es 100% exacta. Experiencia 2. Segn la tabla 2, en la mayor parte de los datos se observa un aumento en la distancia recorrida por difusin a medida que aumentamos la temperatura, claramente la velocidad de la eritrosina a la que se difunde tambin aumenta. Esto se produce gracias a la cintica de partculas, ya que a mayor temperatura el movimiento, y en consecuencia el choque de las molculas, ser mayor aumentando la distancia recorrida por difusin. Sin embargo tericamente, al paso del tiempo la difusin avanza con ms lentitud, ya que las concentraciones van siendo ms estables. Experiencia 3. 1. Defina el proceso de difusin y los factores que lo determinan. Es el transporte de masa que ocurre en una solucin cuando existe un gradiente de concentracin qumica. Los factores que lo determinan son los siguientes: la cantidad de concentracin de ambas sustancias, la temperatura absoluta y la permeabilidad del medio.
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2. Por qu algunos colorantes se comportan de manera diferente a lo esperado? Puede ser por diversos motivos, el primero es el mal empleo de instrumentos y una mala metodologa que puede llevar a resultados errneos. 3. Qu factores controlan la intensidad de la difusin y su direccin? Explique porque decrece con el tiempo. El intensidad es afectada por la cantidad de concentracin de las sustancias, temperatura del medio (a mayor temperatura, es mayor la difusin) y la permeabilidad del medio. La direccin es vinculada principalmente por el gradiente de concentracin ya que dependiendo de cada sustancia implica en qu direccin difundir a travs del medio. Este decrece con el tiempo, porque al ir difundiendo las concentraciones en el medio se vuelven estables (de igual cantidad en concentracin qumica), por lo cual dentro de un periodo de tiempo la difusin decrecer. 4. Cul es la diferencia entre difusin y flujo de masa? Que la difusin responda a un gradiente de concentraciones, en cambio la direccin que establece el flujo de masa es hacia un gradiente de presin. 5. Si la velocidad de difusin de un gas es inversamente proporcional a la raz cuadrada de su peso molecular, calcula cual sera la velocidad de difusin del H2, O2 y CO2.

No esta presente la variable temperatura, por lo tanto es complejo determinar la velocidad de difusin de los tres gases.

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IMBIBICIN: Experiencia 1. En esta experiencia podemos establecer la relacin entre la masa del cochayuyo y el volumen que puede absorber en un periodo de tiempo determinado, por ejemplo por cada 1gr entran 23mL de agua, mientras que por cada 1gr de cochayuyo slo penetran 2,8mL de ter. La mayora de las sustancias orgnicas como la celulosa tienden a desarrollar cargas cuando estn mojadas y de este modo atraen las molculas de agua. La adhesin de las molculas de agua es responsable de la imbibicin o hidratacin. Como se pudo observar, el cochayuyo se hincha en mayor cantidad cuando est en un medio lquido acuoso que con ter. Absorbe casi 7 veces ms agua que ter en la misma cantidad de tiempo, esto es debido por las propiedades fsico-qumicas del agua y las propiedades morfo-anatmicas de las algas terrestres que estn adaptadas a absorber (imbibicin) y mantener grandes cantidades de agua para poder sobrevivir. Experiencia 2. En esta experiencia antes que todo debimos masar el poroto para tener en cuenta su peso inicial y as compararlo con el final despus de 24 horas. A simple vista el poroto se va aumentado en volumen y masa, para cuantificar el cambio medimos nuevamente el volumen de agua en el tubo de ensayo y ste haba disminuido a la mitad, el poroto absorbi ese volumen a travs de la micrpila, ya que necesita hidratarse para ablandar los tejidos y dar inicio a la germinacin. Experiencia 3. 1. Qu condiciones se requieren para que ocurra imbibicin? Se requiere de materiales porosos que posean una gran capilaridad, como las clulas vegetales o materiales inorgnicos como una servilleta.

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2. Qu es presin de imbibicin? Describa un experimento que lo demostrara. Es la presin que ejerce la absorcin de agua (producida gracias a una sustancia inmiscible al agua) por medio de imbibicin. Se puede demostrar utilizando varias semillas en contacto con agua e ir pesndolas en funcin de tiempo, ya que las semillas tienen gran poder de imbibicin para mantenerse hidratadas y poder germinar.

OSMOSIS: (Experimento demostrativo). Experiencia 1. Este fue un experimento demostracin, que consista en un modelo osmmetro. El cual se poda observar como un flujo de agua ingresaba a un compartimento (actuaba papel celofn como membrana semipermeable), debido a que el interior del compartimento haba una mayor concentracin de soluto (que se le inyectaba por una jeringa), y se poda ir midiendo a travs de una pipeta la cantidad agua que iba aumentando en ciertos intervalos de tiempo. 1. Hay una difusin neta de agua a travs del papel celofn? S, pero solo de agua, no de soluto, por lo cual la sacarosa es inmvil entre los dos compartimentos. 2. Qu sucedera con el nivel en el capilar si el osmmetro fuera colocado en una solucin ms concentrada de sacarosa? Por qu? El agua saldra del capilar, porque al estar concentrado el medio externo con sacarosa ms que el interno, el flujo se mantendra hacia afuera hasta que se estableciera el equilibrio.

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Experiencia 2: 1. Cul es la importancia de la concentracin osmtica en las clulas vegetales?, Cul es su significado en relacin a la turgidez de la planta? Dependiendo de la concentracin osmtica se establece la direccin del agua, especial en los tejidos de las plantas (compuesto por clulas) ya que les permite mantenerse hidratadas. Mientras vayamos cambiando la concentracin de soluto en la planta esta podr mantenerse trgida (alta cantidad de agua hacia el interior de la planta) o marchitarse (movimiento hacia el exterior por la cantidad de solutos superior en el medio externo). 2. Defina osmosis. Describa para ilustrarla en un experimento diferente al citado. La osmosis es un tipo de transporte pasivo, que implica el movimiento de agua influenciado por una gradiente qumica de solutos a travs de una membrana semipermeable. Un experimento sera colocar un huevo duro en vinagre, y luego de unos das el vinagre habr accedido al interior cambiando el color y sabor. 3. Cul es la importancia del potencial de presin en el crecimiento de la clula y de la planta? Que la planta necesita de niveles ptimos de presin para su crecimiento, mientras hay ms presin en las paredes celulares primarias, estas se estiran y crecen ms, sin embargo cuando es adulta y se desarrolla la pared secundaria, esta no puede seguir creciendo. 4. Explique si la intensidad de la osmosis depende de la naturaleza qumica del producto, de su tamao molecular o peso molecular. Hay algunas leyes que fundamentan que no dependen de la naturaleza qumica de la membrana semipermeable, ni de la sustancia disuelta. Sin embargo, estas leyes se cumplen rigurosamente slo en algunas disoluciones diluidas.

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5. Qu es la plasmlisis? Tiene alguna importancia biolgica? Es un fenmeno que ocurre cuando la membrana celular se separa de la pared celular porque que hay un estrs hdrico en la planta. La importancia radica que la plasmlisis se ve generalmente en plantas marchitadas o sin la suficiente cantidad de agua. 6. Analice tres funciones del agua en las plantas. 1. El agua tiene importante funcin como solvente de solutos o gases, disolvindolos y transportndolos dentro de la planta. 2. Gracias a su cohesin permiten formar las columnas de agua que impulsadas en el xilema, desde un las races a las hojas. 3. Cuando se produce la evaporacin en los estomas, la hoja se enfra manteniendo su temperatura. 7. Relaciones los conceptos potencial hdrico y DPV. Explique los dos trminos. Ambos gradientes de concentracin determinan que ocurran el proceso de transpiracin en la planta, por ejemplo el potencial hdrico es mayor a nivel del suelo y menor a nivel de la atmosfera por cual influir en el ascenso de agua a travs de la planta, y la diferencia de vapor acta en la hoja permitiendo que el CO2 entre a la clula para que el agua pueda evaporarse y transpirar. El potencial hdrico es la energa potencial que posee una masa de agua, DPV significa diferencia de presin de vapor, es un componente de la presin total causada por la presencia de vapor (en este caso el vapor de agua en el aire). 8. Qu importancia biolgica tienen los fenmenos de difusin, smosis e imbibicin? Que por medio de estos procesos se pueden trasladar y dirigir las molculas de agua y nutrientes por toda la planta, para que estas cumplan sus funciones biolgicas vitales.

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Conclusin
Difusin: La naturaleza de los compuestos puede determinar la velocidad y la tasa de esparcimiento en solucin. La temperatura aumenta la cintica molecular de las partculas en solucin, lo que acelera el proceso difusivo. La permeabilidad ser un factor determinante en cuanto al movimiento de molculas. Las molculas se difundirn slo en la medida en que la permeabilidad de la membrana lo permita. Para que exista difusin debe existir un gradiente de concentracin. La difusin se llevar a cabo aceleradamente slo hasta que las concentraciones de la solucin se igualen. Muchos factores que influyen en la disyuncin de la teora con la prctica, estn asociados a fallos humanos y/o de uso del instrumental. Imbibicin: Algunas sustancias desarrollan bajo ciertas condiciones (humedad por ejemplo) cargas, las cuales atraern molculas de agua, aumentando el volumen de la sustancia absorbente. Materiales como el cochayuyo poseen propiedad morfo-anatmicas que favorecen la incorporacin y permanencia del agua dentro de sus estructuras. En cuanto a los componentes que integran el potencial hdrico, la imbibicin se relaciona estrechamente con el potencial mtrico, el cual es directamente proporcional al nmero de poros y al tamao de estos. Aparte del potencial mtrico de los objetos y el desarrollo de cargas, tambin existe un factor biolgico relacionado con la imbibicin. Como es el caso del poroto, quin absorbe agua para desarrollar sus estructuras internas. Osmosis: Es un proceso de difusin simple, su ms grande diferencia radica en que slo consta de movimiento de molculas de agua gracias a la presencia de una membrana semi-permeable. Sustancias de mayor tamao, como la sacarosa, no sern capaces de atravesar la membrana, por lo que para lograr el equilibrio es necesario el movimiento de agua. Es un mecanismo de vital importancia para las plantas. Ellas pueden mantener sus funciones biolgicas funcionando gracias a la osmosis.

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 La cohesin del agua permite que esta, al moverse, arrastre ms molculas de su especie consigo. Lo que explica la tensin que se genera dentro de estructuras vegetales como el xilema.

BIBLIOGRAFIA Neil A. Campbell, Lawrence G. Mitchell, Jane B. Reece, Biologa: Conceptos y Relaciones 3ra Edicin, Pearson Education, 2001. Pginas WEB consultadas: Enciclopedia GER: http://www.canalsocial.net/GER/ficha_GER.asp?id=10483&cat=quimica http://www.elergonomista.com/biologia/turgencia.htm

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