Universidade Federal do Rio de Janeiro Faculdade de Farmcia Farmacognosia

Cumarinas

Bruna de Souza Barbeto Thiago de Barros Pigozzo Professoras: Ivana Leal, Michelle Muzitano e Denise 23 de novembro de 2011

Introduo:

Cumarinas:
As cumarinas constituem uma classe de metablitos secundrios, amplamente distribudos no reino vegetal, podendo tambm ser encontrados em fungos e bactrias. Estruturalmente so lactonas do cido o-hidroxi-cinmico (2H-1-benzopiran-2onas) sendo o representante mais simples da cumarina. As cumarinas so derivadas do cido cinmico por ciclizao da cadeia lateral do cido ocumrico. s cumarinas so atribudas uma grande variedade de atividades farmacolgicas, bioqumicas e teraputicas, as quais dependem de seus padres de substituio.

Estrutura bsica das cumarinas Extrao e Isolamento: As cumarinas possuem um anel lactnico, e isso faz com que o processo de extrao seja vantajoso, visto que, em meio alcalino, ocorre abertura deste anel, proporcionando a obteno das substncias n forma de sais solveis em gua. A relactonizao ocorre por acidificao do meio aquoso, recuperandose as cumarinas por extrao com solventes orgnicos. As cumarinas possuem espectro ultravioleta (UV) caracterstico, o qual fortemente influenciado pela natureza e posio dos grupos substituintes. Desse modo, elas so facilmente visualizadas por cromatografia em camada delgada. As manchas do cromatograma, sob ao da luz UV, aparecem em cores diversas, como azul, amarela e roxa, as quais podem ser realadas aps exposio ao vapor de amnia ou a solues alcolicas de KOH.

Usos e Propriedades Farmacolgicas: Na rea de medicamentos destacam-se os derivados da 4-hidroxi-cumarina, descobertos durante a investigao de uma doena hemorrgica no gado alimentado com trevo-de-cheiro-amarelo fermentado (Melilotus officinalis Lam.), o que levou a descobertas da ao anticoagulante do dicumarol, sendo

ele o primeiro frmaco com essa ao por via oral e constitui o modelo para o desenvolvimento de uma classe de anticoagulantes com o ncleo bsico da 4hidroxi-cumarina, da qual derivam importantes frmacos como a varfarina, entre outros.

A cumarina (1,2-benzopirona) um dos principais constituintes da Mikania glomerata Sprengel (guaco). definida como o marcador qumico para controle de qualidade de formulaes a base de guaco, conforme a Lista de Registros Simplificados de Fitoterpicos da ANVISA, Resoluo RE n 89, de 16 de maro de 2004. Origem da Mikania glomerata: Ocorre principalmente na Floresta Atlntica do Brasil, crescendo desde o estado de So Paulo at o Rio Grande do Sul, podendo, tambm, ser encontrado na Bahia, Paraguai e noroeste da Argentina. Apesar da oficializao do uso das folhas dessa espcie, grande parte dos produtos comercializados contm tambm outras partes areas, como caules e at mesmo inflorescncias.

astanha da ndia (Aesculus hippocastanum)

Objetivos:
Obter o extrato da Mikania glomerata (guaco) a partir da droga vegetal e analisar por Cromatografia em Camada Delgada (CCD) o extrato obtido e a tintura comparando com o padro de cumarina e de cido p-cumrico. Calcular o Rf de cada padro.

Materiais e Mtodos: Materiais Utilizados:

Balana Pipeta graduada de 10 mL Becker de 10, 250 ml Placa de slica gel Capilares Esptula

Placa de aquecimento poda Rgua de 10 cm

Papel de filtro

Tesoura de

Aparelho de UV

Reagentes Utilizados:
Mikania glomerata gua destilada Etanol 30%

Tintura de guaco comercial Soluo padro de cumarina Soluo padro de cido cumrico tolueno:diclorometano:acetona(45:25:30) Soluo alcolica de KOH 10% Mtodo Experimental:
1- Ferveu-se por 2 minutos 1g da droga com 10 mL de etanol 30%.

Resfriou-se. 2- Aplicou-se o extrato obtido sobre cromatoplaca de slica gel com auxlio de capilar de vidro. 3- Aplicou-se tintura de guaco comercial. 4- Utilizou-se placa de aquecimento para auxiliar na secagem das aplicaes do extrato e tintura comercial de guaco.
5- Aplicaram-se as solues padro de cumarina e de cido p-

cumrico (1% em metanol) e secou-se. 6- Eluiu-se a placa com tolueno:diclorometano:acetona(45:25:30). 7- Realizou-se a exposio luz UV 254 nm. 8- Borrifou-se soluo alcolica de KOH 10% e deixou-se secar.
9- Realizou-se novamente a exposio luz UV 254 nm.

Resultados: Cromatoplaca aps aplicao das solues e eluio do solvente (tolueno:diclorometano:acetona):

Legenda: E = Extrato de Mikania glomeata obtido, T = Tintura de Mikania glomeata comercial, PC = Padro de cumarina, PA = Padro de cido p-cumrico.

Clculos do Rf: Rf=(distncia percorrida pela amostra)/(distncia percorrida pelo solvente) Extrato(E)Rf: (1 marca) Rf= 0,9cm/3,4cm Rf=0,264cm Extrato(E)Rf: (2 marca) Rf= 2,3cm/ 3,4cm Rf=0,676cm Tintura(T)Rf: (1 marca) Rf=1cm/3,4cm Rf=0,294cm

Tintura(T)Rf: (2 marca) Rf=2,4cm/3,4cm Rf= 0,705cm Padro de cumarna(PC)Rf: Rf=2,4cm/3,4cm Rf=0,705cm Padro de cido p-cumrico(PA)Rf: Rf=1cm/3,4cm Rf=0,294cm Colorao observada no ultraviolenta antes e depois da aplicao do KOH 10%: Antes da aplicao de KOH 10%:

Aps aplicao de KOH 10%

Discusso:
As substncias: E = Extrato de Mikania glomeata obtido, T = Tintura de

Mikania glomeata comercial apresentaram cada uma, duas marcas significativas na cromatoplaca em suas eluies, o que j era esperado, pois no extrato e na tintura, segundo a literatura, h grande presena de cumarinas e cido cumrico.

Comparao dos resultados de Rf do extrato e tintura com os pades utilizados: - As primeiras marcas apresentadas pelo extrato e pela tintura tem o resultado de Rf igual ou prximo ao resultado do Rf da marca observada no padro de cido p-cumrico (resultados em azul), confirmando presena do mesmo no extrato e tintura de Mikania glomeata. - As segundas marcas apresentadas pelo extrato e pela tintura tem o resultado de Rf igual ou prximo ao resultado do Rf da marca observada no padro de cumarinas (resultados em vermelho), confirmando presena da mesma no extrato e tintura de Mikania glomeata. Colorao observada aps aplicao de KOH 10% na cromatoplaca: -No extrato a marca referente ao cido p-cumrico apresentou colorao (verde-amorronzado) diferente das marcas na tintura e no padro (amarelado) referente ao mesmo cido. Segundo a literatura isso se deve a maior presena no extrato de Mikania glomeata do cido o-cumrico que a do cido p-cumrico o que no acontece na tintura de Mikania glomeata e obviamente no padro de cido p-cumrico apresentando colorao diferente devido maior presena do cido p-cumrico. Concluso: Com a anlise do resultado conclumos que: - O extrato e tintura de Mikania glomeata apresentam em sua composio presena de cumarinas. -A tintura de Mikania glomeata apresenta em sua composio o cido p-cumrico diferentemente do extrato de Mikania glomeata que apresenta em sua composio maior quantidade do cido o-cumrico. Referncias Bibliogrficas:
Cleinils R. da Silva, Vctor S. Gomes, Irene C. Kulkamp, Luiz A. Kanis; Mtodo espectroscpico para determinao de cumarina em xarope de Mikania glomerata Sprengel; Grupo de Pesquisa em Tecnologia Farmacutica, Curso de Farmcia, Universidade do Sul de Santa Catarina,Revista Brasileira de Farmacognosia, 18(4): 594-599, Out./Dez. 2008

Joo C. Gasparetto,1 Francinete R. Campos,1 Jane M. Budel,2 Roberto Pontarolo, Mikania glomerata Spreng. e M. laevigata Sch. Bip. ex Baker, Asteraceae: estudos agronmicos, genticos, morfoanatmicos, qumicos, farmacolgicos, toxicolgicos e uso nos programas de fitoterapia do Brasil,1-Departamento de Farmcia, Universidade Federal do Paran e 2-Laboratrio de Farmacognosia, Unibrasil, Revista Brasileira de Farmacognosia, 20(4): 627-640, Ago./Set. 2010 Disponvel em: www.ebah.com.br/content/ABAAAAqsgAJ/cumarinas-texto sbfgnosia.org.br/Ensino/cumarinas.html Acessados em: 29/11/11