LABORATORIO N.

8 IDENTIFICACIN DE LA CROMATINA SEXUAL

INTRODUCCIN Pasaron muchos aos antes de que pudiera establecerse una diferencia entre las clulas masculinas y las femeninas durante la interfase. Pero gracias a los trabajos experimentales en neurofisiologa, de Barr y Bertram (1949), se observ por primera vez una diferencia morfolgica entre las clulas de las gatas y los gatos. Las primeras, presentan un pequeo corpsculo de una a dos micras de dimetro, adherido a la membrana nuclear, que no aparece en las clulas masculinas normales y que durante mucho tiempo se denomin corpsculo de Barr. Por las relaciones que guarda con la presencia de los cromosomas X, a este cromocentro se le llama actualmente cromatina X. Muy rpidamente, las observaciones realizadas por Barr se replicaron en otros tejidos por diferentes investigadores, lo que condujo al mejoramiento de los mtodos de estudio de esta cromatina en individuos sanos y enfermos. De estos ltimos, se realizaron estudios en individuos que presentaban alteraciones o fallas en la diferenciacin sexual con sndromes como el Turner y klinelfelter (Ve a galera de imgenes). El desarrollo de estos mtodos permiti adems, estudiar una gran diversidad de clulas para la observacin de la ahora llamada cromatina sexual, tal es el caso de los neutrfilos, las neuronas, la mucosa vaginal y como en el caso de esta prctica clulas de la mucosa bucal. 8.1.2 OBEJTIVOS ESPECIFICOS Reconocer el cuerpo de Barr en clulas de la mucosa bucal. Comprender la importancia de la cromatina sexual en aquellos sndromes que cursan con problemas de diferenciacin sexual. 8.2 MATERIALES Esptula metlica o de madera con extremo redondeado Solucin fijadora: 3 partes de etanol al 95% + 1 parte de cido actico glacial. Cubetas de coloracin Aceto-orcena Papel filtro Lminas y laminillas. Gasa 8.3 PROCEDIMIENTO 1. Limpie la mucosa de la cavidad oral con un pedazo de gasa. El paciente debe mantener la boca abierta y disponer la lengua en el lado opuesto al que va a ser frotado. 2. Para el frotis de la mucosa se utiliza la esptula. Este debe hacerse con presin moderada, asegurndose de obtener una capa de material blanquecino. 3. El material de la esptula se extiende delgada y suavemente sobre una lmina y sta se sumerge inmediatamente en la solucin fijadora. Pueden obtenerse tres lminas de cada lado de la boca. 4. Las lminas pueden permanecer en el fijador entre un minuto y una semana. 5. Las lminas se colocan en una cubeta de coloracin y el colorante aceto-orcena se aplica por 10 minutos.

8.1 OBJETIVOS 8.1.1 OBJETIVO GENERAL Observar la cromatina sexual en clulas humanas masculinas y femeninas.

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S solo cuenta con orcena en el laboratorio, entonces adicione a 1gramo de esta 45 mL de cido actico concentrado; caliente hasta ebullicin, deje enfriar y filtre para obtener la aceto-orcena. 6. Se dispone una laminilla sobre la lmina y el colorante en exceso se remueve aplicando papel de filtro y ejerciendo firme presin. 7. Observe inmediatamente con el objetivo de menor aumento, para buscar reas donde las clulas estn bien extendidas. 8. Observe con el objetivo de mayor aumento (o inmersin) e identifique las estructuras ligeramente alargadas o plano-convexas, adyacentes a membrana nuclear de coloracin oscura en comparacin con el resto del ncleo. 8.4 CUESTIONARIO Consulta, que otras patologas diferentes a los sndromes de Turner y klinelfelter, estn relacionados con la cromatina sexual. Cual es el patrn de herencia de las patologas consultadas?. Investiga acerca de genes holndricos y importancia Biomdica. los su

8.5 ENLACES: http://turner-syndrome-us.org/ pgina de la organizacin sndrome de Turner http://gslc.genetics.utah.edu/e s/ Pgina de la universidad de Utah que habla sobre anormalidades cromosomicas, cariotipo, identificacin y anlisis de los cromosomas, etc. http://www.biologia.arizona.ed u/: Aprenda sobre el mtodo de Polimorfismo en la Longitud de los Fragmentos de Restriccin (RFLP) para caracterizar muestras de ADN humano, tal como se aplica en el anlisis de paternidad y en las investigaciones de delitos sexuales. http://www.nature.com/natur e/journal/v437/n7060/index.htm l Conoce la secuencia de genes presentes en el cromosoma X leyendo el artculo publicado en NATURE | VOL 434 | 17 MARCH 2005 | 2005 Nature Publishing Group

Que otros mtodos diferentes al utilizado en esta prctica, se pueden utilizar para identificar cromatina sexual?. Investiga sobre las aplicaciones que en medicina legal tiene la determinacin de cromatina sexual.

Figura No. 8.1 El cromosoma X es ms grande que el Y

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GALERIA DE IMGENES
1. Representacin
Esquemtica de las regiones homologas de los cromosomas sexuales humanos

3. Sndrome de Turner y su cariotipo

2. Sndrome de Klinefelter y su cariotipo

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