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EL MICROSCOPIO El microscopio es un instrumento ptico que amplifica la imagen de un objeto pequeo, siendo el instrumento ms utilizado en los laboratorios donde se estudian microorganismos. Si bien las lentes de aumento han sido conocidas desde muy temprano en la historia, slo se le utiliz en biologa con el advenimiento del microscopio de luz moderno. Desde su invencin, el microscopio ha sido una herramienta valiosa en el desarrollo de la teora cientfica (Heidcamp, 1995). En general, un microscopio est compuesto de dos elementos, los cuales constituyen un sistema similar a un telescopio: a) lentes primarias amplificadoras y b) lentes secundarias. Estos sistemas se denominan objetivo y ocular, respectivamente, y estn montados en los extremos opuestos de un tubo cerrado, de forma que el primero se encuentra en el punto focal del segundo. Entonces, la luz que pasa por un objeto es focalizada por ambos sistemas de lentes (Heidcamp, 1995), de manera que cuando se mira a travs del ocular se ve una imagen virtual aumentada de la imagen real.

Ruta que sigue la luz al observar una muestra en el microscopio: a) la ruta en el microscopio; b) detalle del reflejo de las imgenes. Fuentes: Salas y Garrido (1997-2001) y CSIC.

TIPOS DE MICROSCOPIO Actualmente existen muchos tipos de microscopios, entre los que se cuentan el microscopio ptico, el electrnico, el de sonda de barrido y el lser. No obstante, el microscopio ms utilizado es el ptico, el cual se sirve de la luz visible para crear una imagen aumentada del objeto.
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EL MICROSCOPIO PTICO Los microscopios pticos pueden clasificarse en simples y complejos, diferencindose en su capacidad amplificadora y en la complejidad del sistema de lentes asociado. La principal ventaja de un microscopio ptico es que permite observar organismos vivos y tejidos. Su principal desventaja, es que su potencia amplificadora est limitada por la longitud de onda de la luz visible. Microscopio ptico simple El microscopio ptico ms simple es la lente convexa doble, cuya distancia focal es corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Tambin se les denomina microscopios de bajo poder. Existen al menos dos tipos de microscopios de bajo poder: monoculares y binoculares. Los microscopios monoculares tienen muy bajo poder amplificador, siendo utilizado esencialmente por nios. Los microscopios binoculares, estreo microscopios o lupas, en cambio, proveen un aumento mayor. Se caracterizan, porque presentan dos objetivos, de modo que el objeto se puede ver en forma estereoscpica o tridimensional. Microscopio ptico complejo Los microscopios complejos disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores, pudiendo inclusive aumentar un objeto ms de 2.000 veces. Estos microscopios son, en general, los ms utilizados. En este caso, el objetivo est compuesto de varias lentes que crean una imagen real aumentada del objeto examinado. El aumento total del microscopio depende de las longitudes focales de los dos sistemas de lentes.

Dos tipos de microscopio ptico: a) Estereoscpico binocular; b) ptico binocular. Microscopio Marco R. Miranda V.

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MICROSCOPIOS PTICOS ESPECIALES Hay diversos microscopios pticos para funciones especiales. Entre stos se tiene los microscopios de ultravioleta, petrogrfico, de campo oscuro, de fase, de campo cercano e invertido. El microscopio de luz ultravioleta. El microscopio de luz ultravioleta utiliza el rango ultravioleta del espectro luminoso (en lugar del rango visible) para aumentar la resolucin con una longitud de onda menor o bien para mejorar el detalle absorbiendo selectivamente distintas longitudes de onda de la banda ultravioleta. Dado que el vidrio no transmite las longitudes de onda ms cortas de la luz ultravioleta, los elementos pticos de estos microscopios estn hechos con cuarzo, fluorita o sistemas de espejos aluminizados. Adems, dado que la radiacin ultravioleta es invisible, la imagen se muestra con fosforescencia, en fotografa o con un escner electrnico. El microscopio de luz ultravioleta se utiliza en la investigacin cientfica. El microscopio petrogrfico o de polarizacin. El microscopio petrogrfico se utiliza para identificar y estimar cuantitativamente los componentes minerales de las rocas gneas y las rocas metamrficas. Cuenta con un prisma de Nicol u otro tipo de dispositivo para polarizar la luz que pasa a travs del espcimen examinado. Otro prisma Nicol o analizador determina la polarizacin de la luz que ha pasado a travs del espcimen. El microscopio tiene un soporte giratorio que indica el cambio de polarizacin acusado por el espcimen. El microscopio de campo oscuro. El microscopio de campo oscuro utiliza una luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espcimen. El campo de visin del objetivo se encuentra en la zona hueca del cono de luz y slo recoge la luz que se refleja en el objeto. Por ello las porciones claras del espcimen aparecen como un fondo oscuro y los objetos minsculos que se estn analizando aparecen como una luz brillante sobre el fondo. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos biolgicos transparentes y sin manchas, invisibles con iluminacin normal. El microscopio de fase. El microscopio de fase ilumina el espcimen con un cono hueco de luz, como en el microscopio en campo oscuro. Sin embargo en el microscopio de fase el cono de luz es ms estrecho y entra en el campo de visin del objetivo, que contiene un dispositivo en forma de anillo que reduce la intensidad de la luz y provoca un cambio de fase de un cuarto de la longitud de onda. Este tipo de iluminacin provoca variaciones minsculas en el ndice de refraccin de un espcimen transparente, hacindolo visible. Este tipo de microscopio es muy

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til a la hora de examinar tejidos vivos, por lo que se utiliza con frecuencia en biologa y medicina. El microscopio de campo cercano. El microscopio de campo cercano es uno de los microscopios pticos ms avanzados que es posible encontrar. Permite ver detalles menores a la longitud de onda de la luz. Funciona haciendo pasar un haz de luz a travs de un orificio diminuto, el que se proyecta a travs del espcimen a una distancia equivalente a la mitad del dimetro del orificio, formando una imagen completa. El microscopio invertido. El microscopio invertido es utilizado para aplicaciones donde los microscopios convencionales no funcionan, tales como en la observacin de cultivo de tejidos y de organismos vivos (como por ejemplo, protozoos cultivados en forma natural en placas Petri o clulas cultivadas en botellas de cultivo). En este caso, el recurso luminoso se ubica sobre la muestra, y los objetivos, por debajo de sta. Los sistemas de objetivos y condensador estn diseados para trabajar a "grandes" distancias, pudiendo acceder a una amplia gama de filtros. Tambin es posible incorporar un sistema fotogrfico o un sistema CCTV. Entre los microscopios invertidos, existen modelos que permiten ver fluorescencia (microscopios invertidos fluorescentes), como se muestra en las figuras b y c, y epifluorescencia (microscopios invertidos epifluorescentes). Cabe sealar que la nica desventaja del microscopio invertido es su alto costo.

Microscopio ptico invertido (a) y ejemplos de observaciones realizadas utilizando este tipo de instrumento: b) Inmunofluorescencia de clulas de piel humana (triple fluorescencia mediante la aplicacin simultnea de tres tipos de "sustancias reveladoras" (FITC, Texas red y DAPI); c) Clulas Microscopio Marco R. Miranda V.

Fac. Ciencias Biolgicas. Microbiologa COS infectadas con adenovirus modificados que contienen la protena fluorescente verde (GFP); imagen obtenida, sin fijacin, 24 horas despus de la infeccin; d) Microinyeccin y micromanipulador. Fuentes: Meiji Microscopes2 y Kling (1998).

El Microscopio electrnico El microscopio electrnico, a diferencia del microscopio ptico, no est limitado por la longitud de onda de la luz visible, pues utiliza electrones para iluminar un objeto. Los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz (la longitud de onda ms corta de la luz visible es de alrededor de 4.000 3, mientras que la longitud de onda de los electrones utilizados en los microscopios electrnicos es de alrededor de 0,5 ), de manera que permiten mostrar estructuras mucho ms pequeas. Los microscopios electrnicos disponen de un can de electrones, el cual emite los electrones que chocan contra el espcimen, creando una imagen aumentada. Se utilizan lentes magnticas para crear campos que dirigen y enfocan el haz de electrones, ya que las lentes convencionales utilizadas en los microscopios pticos no funcionan con los electrones. El sistema funciona en un ambiente de vaco, el que constituye una parte relevante del microscopio electrnico, pues los electrones pueden ser desviados por las molculas del aire. Por ltimo, todos los microscopios electrnicos cuentan con un sistema que registra o muestra la imagen que producen los electrones. Existen dos tipos bsicos de microscopios electrnicos: el microscopio electrnico de transmisin (Transmission Electron Microscope, TEM) y el microscopio electrnico de barrido (Scanning Electron Microscope, SEM) Microscopio electrnico de transmisin (TEM) El microscopio electrnico de transmisin dirige el haz de electrones hacia el objeto que se desea observar. Una parte de los electrones rebota o es absorbida por el objeto, en tanto que los electrones que no rebotan o no son absorbidos lo atraviesan formando una imagen aumentada del espcimen. Para utilizar un TEM la muestra debe ser muy delgada, con un grosor no mayor que un par de miles de . Se dispone una placa fotogrfica o una pantalla fluorescente detrs del objeto para registrar la imagen aumentada. Los microscopios electrnicos de transmisin pueden aumentar un objeto hasta un milln de veces. Microscopio electrnico de barrido (SEM) El microscopio electrnico de barrido crea una imagen ampliada de la superficie de un objeto, no siendo necesario que la muestra sea cortada para observarla, sino que puede colocarse en el microscopio con muy pocos preparativos. El SEM explora la superficie de la imagen punto por punto, al contrario que el TEM, que examina una gran parte de la muestra cada vez. Su funcionamiento se basa en recorrer la muestra con un haz muy concentrado de electrones, de forma parecida al barrido de un haz de electrones por la pantalla de una televisin. Los electrones del haz pueden dispersarse de la muestra o provocar la aparicin de electrones secundarios. Los electrones perdidos y los
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secundarios son recogidos y contados por un dispositivo electrnico situado a los lados del espcimen. Cada punto ledo de la muestra corresponde a un pxel en un monitor de televisin. Cuanto mayor sea el nmero de electrones contados por el dispositivo, mayor ser el brillo del pxel en la pantalla. A medida que el haz de electrones barre la muestra, se presenta toda la imagen de la misma en el monitor. Los microscopios electrnicos de barrido pueden ampliar los objetos 100.000 veces o ms. Este tipo de microscopio es muy til porque, al contrario que los TEM o los microscopios pticos, produce imgenes tridimensionales realistas de la superficie del objeto.

Ejemplos de imgenes obtenidas con microscopio electrnico. a) y b) cristales de materiales ptreos observados con microscopio electnico de barrido; c) fibras de un geotextil observada con microscopio electnico de barrido; d) capilar visto con TEM: C: bloque de colgeno; E: endotelio; L: lumen; GR: glbulo rojo; e) ampliacin de tejido pulmonar mediante SEM; f) estoma abierto de Ohia sp. Observado con microscopio electrnico. Fuente: CEDEX,

OTROS MICROSCOPIOS ELECTRNICOS Otros tipos de microscopios electrnicos son el microscopio electrnico de barrido y transmisin y el microanalizador de sonda de electrones. El microscopio electrnico de barrido y transmisin (STEM) El microscopio electrnico de barrido y transmisin (Scanning Trasnmission Electron Microscope, STEM) combina los elementos de un SEM y un TEM, y puede mostrar los tomos individuales de un objeto.

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El microanalizador de sonda de electrones El microanalizador de sonda de electrones es un microscopio electrnico que cuenta con un analizador de espectro de rayos X, el cual puede analizar los rayos X de alta energa que produce el objeto al ser bombardeado con electrones. Dado que la identidad de los diferentes tomos y molculas de un material se puede conocer utilizando sus emisiones de rayos X, los analizadores de sonda de electrones no slo proporcionan una imagen ampliada de la muestra, como hace un microscopio electrnico, sino que tambin suministran informacin sobre la composicin qumica del material. El Microscopio de sonda de barrido Los microscopios de sonda de barrido utilizan una sonda que recorre la superficie de una muestra, proporcionando una imagen tridimensional de la red de tomos o molculas que la componen. La sonda es una afilada punta de metal que puede tener un grosor de un solo tomo en su extremo. Un tipo importante de microscopio de sonda de barrido es el microscopio de tnel de barrido. Tambin existe el microscopio de fuerza atmica. Microscopio de tnel de barrido El Microscopio de tnel de barrido (Scanning Tunelling Microscope, STM) fue desarrollado en 1981. Utiliza un fenmeno de la fsica cuntica, denominado efecto tnel, para proporcionar imgenes detalladas de sustancias conductoras de electricidad. La sonda se coloca a una distancia de pocos ngstroms de la superficie del material y se aplica un voltaje pequeo entre la superficie y la sonda. A causa de la poca distancia entre el material y la sonda algunos electrones se escapan a travs del hueco, generando una corriente. La magnitud de la corriente del efecto tnel depende de la distancia entre la superficie y la sonda. El flujo de corriente es mayor cuando la sonda se acerca al material y disminuye cuando se aleja. A medida que el mecanismo de barrido mueve la sonda por encima de la superficie, se ajusta de modo automtico la altura de la sonda para mantener constante la corriente del efecto tnel. Estos ajustes minsculos permiten dibujar las ondulaciones de la superficie. Despus de muchos barridos hacia adelante y hacia atrs, una computadora para una representacin tridimensional del material. Microscopio de fuerza atmica El microscopio de fuerza atmica (Atomic Force Microscope, AFM) no emplea la corriente de efecto tnel y, por lo tanto, puede utilizarse tambin en materiales no conductores. A medida que la sonda se mueve a lo largo de la superficie de la muestra los electrones de la sonda de metal son repelidos por las nubes electrnicas delos tomos de la misma. La altura de la sonda se ajusta de modo automtico para mantener constante la fuerza recibida. Un sensor registra el movimiento ascendente y descendente de la sonda y entrega la informacin a una computadora, que a su vez a utiliza para dibujar una imagen tridimensional de la superficie del espcimen. El Microscopio laser:

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Los microscopios laser funcionan en base a un sistema de rayo laser que permite obtener imgenes con una alta resolucin. Existen dos tipos de microscopios laser: con sistema de escaneo confocal y de escaneo con lmpara de mercurio. Microscopio laser con sistema de escaneo confocal EL Microscopio laser con sistema de escaneo confocal (Laser Sanning Confocal Microscope System), crea la imagen del objeto mediante un sistema que le permite colectar exclusivamente la luz de un plano seleccionado. El laser reconstruye el objeto basndose en barridos secuenciales realizados sobre planos paralelos muy cercanos entre s. Microscopio laser con lmpara de mercurio El Microscopio laser con lmpara de mercurio porta un canal UV que le permite mostrar imgenes con triple fluorescencia: azul (posible mediante la lmpara de mercurio), y verde y rojo posibles por las lneas laser de 488 y 543 nm, respectivamente. COMPONENTES DE UN MICROSCOPIO PTICO BINOCULAR Como se observa en la Figura 6, un microscopio ptico binocular consta de: base, pedestal, cabeza. En la base se ubica la fuente de luz. En el pedestal se ubican macro y micromtrico y la platina; sobre la platina se ubican las pinzas, y el foco coaxial, mientras que bajo sta se ubica el diafragma. En la parte superior del pedestal se ubica el revlver, pieza que porta los objetivos. En la cabeza se ubican los oculares y el sistema regulador de la distancia focal.

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Componentes de un microscopio ptico binocular.

A continuacin se define cada una de estas partes: Base: Corresponde a la parte inferior del instrumento, utilizada como soporte. Pedestal o brazo: pieza que soporta al tubo que contiene el sistema de lentes y que le conecta con la base. Cabeza: pieza, generalmente mvil, sobre la que se ubican los oculares y el sistema regulador de la distancia focal. Fuente de luz: corresponde a una ampolleta u otra fuente luz activada por corriente o pila. Antiguamente se utilizaba un espejo que concentraba la luz ambiental. Macromtrico: tornillo que permite el ajuste grosero de la muestra a observar. Se complementa con el uso del micromtrico. Micromtrico: tornillo que permite un ajuste fino de la muestra a observar. Platina: pieza dispuesta horizontalmente y sobre la cual se ubican las pinzas y el foco coaxial. Platina, pinzas y foco coaxial permiten ubicar una muestra para ser observada. La muestra debe estar dispuesta sobre un portaobjeto y protegida por un cubreobjeto). Bajo la platina se encuentran el diafragma y el filtro.
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Pinzas: Piezas prensiles que permiten sujetar la muestra, contenida en un portaobjeto, contra la platina. Foco coaxial: Sistema compuesto por dos ejes de desplazamiento horizontal, los cuales, dispuestos perpendicularmente entre s, permiten ajustar una muestra para ser observada al microscopio. Un eje desplaza la muestra en sentido lateral (izquierda derecha del observador) y el otro en sentido frontal (alejando - acercando la muestra del observador). Ambos movimientos se realizan en el plano que define la platina. Diafragma: Sistema que controla la cantidad de luz que llega al objeto. El diafragma permite controlar intensidad de luz y el tamao del cono de luz proyectado sobre la muestra. Condensador: Conjunto de lentes que focalizan la luz sobre la muestra. La lentes condensadoras ms tiles poseen poderes superiores a los 400x y ms. El uso de condensador permite mejorar la observacin de la muestra. Cuando est presente en el instrumento, el condensador se ubica generalmente bajo la platina. Filtro: Algunos microscopios portan filtros o un sistema de stos, los que corresponden a lentes de distinto color que permiten enfatizar la observacin de determinadas partes de la muestra, generalmente destacadas con tinciones. Revlver: Mecanismo giratorio sobre el cual se disponen los objetivos. El revlver permite cambiar el aumento con que se observa una muestra determinada. Un revlver generalmente porta cuatro objetivos: 4x, 10x, 40x y un objetivo de inmersin (100x) Objetivos: Conjunto de lentes responsables de aumentar y resolver (distinguir las distintas partes) de la muestra a observar. Objetivo de inmersin: El objetivo de inmersin permite lograr una mejor resolucin en un microscopio ptico mediante el uso de las propiedades de refraccin de luz del aceite de inmersin. Requiere de la disposicin de una gota de este aceite sobre la muestra fresca o sobre el cubreobjeto, en el caso de preparaciones fijas; el objetivo de inmersin debe acercarse a la muestra de modo que toque la gota de aceite. En la Figura se compara la observacin de una muestra con y sin el objetivo de inmersin. Oculares: Conjunto de lentes especializadas en aumentar la imagen previamente formada por el objetivo. Puede desmontarse e intercambiarse por otros con distintos aumentos o funciones: agujas para sealar, retculos para recuentos u otros. Sistema regulador de la distancia focal: Sistema que permite ajustar la distancia focal de los oculares con la distancia focal del observador.

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a) Objetivos dispuestos sobre el revlver de un microscopio ptico binocular. Detalle de los objetivos: la banda coloreada indica el aumento del lente contenido en el objetivo: rojo indica que el aumento es de 4X, amarillo, que es de 10X; azul que es de 40X y blanco, que el aumento es de 100X; b) detalle del condensador. Fuente: Microscopeworld4.

Comparacin de la resolucin con que se observa una misma muestra (a) sin y (b) con el objetivo de inmersin. Fuente: Microscopeworld.

AUMENTO Y RESOLUCIN DE UN MICROSCOPIO La funcin de cualquier microscopio es mejorar la resolucin, muchas veces confundida con la amplificacin (aumento). Como el microscopio es utilizado para crear una vista aumentada de un objeto tal que se observen detalles no visibles al ojo humano, se confunde resolucin con la amplificacin o aumento de tamao de la imagen de la muestra u objeto. En general, a mayor aumento, mayor resolucin, pero esto no siempre es verdad, pues existen limitaciones

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prcticas en el diseo de las lentes, las cuales permiten mejorar el aumento sin mejorar la resolucin. El poder resolutivo de un microscopio es una propiedad importante, pues la resolucin o poder resolutivo es la capacidad de distinguir separados dos puntos muy cercanos. Cuanto mayor es el poder resolutivo, mayor es la definicin con que se observa la imagen de un objeto. De este modo, los microscopios de gran poder resolutivo son adecuados para ver pequeas estructuras. En un microscopio compuesto o complejo, el poder resolutivo depende de la longitud de la onda utilizada y de una propiedad ptica de la lente conocida como apertura numrica. Como los microscopios pticos utilizan luz visible, la longitud de onda est predefinida. Esta es la razn por la cual la resolucin de un objeto es funcin de la apertura numrica; cuanto mayor es la apertura, el objeto resuelto u observado es ms pequeo. Un factor que afecta a la apertura numrica, adems de la construccin de la lente, es el medio a travs del cual pasa la luz. Mientras que el objetivo est separado del objeto por el aire, su apertura numrica nunca ser mayor de 1,0; para conseguir aperturas numricas mayores que sta, el objetivo debe estar inmerso en un lquido de mayor ndice de refraccin que el aire. A estos lquidos se les denomina aceites de inmersin, los cuales se utilizan con los objetivos de inmersin obteniendo una apertura numrica entre 1,2 y 1,4. An as, al utilizarse la longitud de onda de la luz visible, estos microscopios llegan a tener un poder de resolucin de aproximadamente 0,25 m, lo que significa que las partculas con un tamao ms pequeo que 0,25 m no pueden distinguirse unas de otras. OBSERVACIN DE UNA MUESTRA MEDIANTE MICROSCOPIO En general, para observar una muestra deben seguirse los siguientes pasos: 1. Reconozca en el instrumento las partes descritas anteriormente. El microscopio es un instrumento delicado, de modo que trtelo con cuidado. Si necesita moverlo, utilice ambas manos, sujetndolo por el pedestal y la base. 2. Encienda el microscopio. 3. Verifique que el instrumento est en buenas condiciones, es decir, que las luces encienden, que macro y micromtrico se mueven fcilmente, que el foco coaxial se desplaza fcilmente, que oculares y objetivos estn limpios. En caso que observe un desperfecto o que oculares u objetivos estn sucios, infrmelo al profesor y al encargado del laboratorio. 4. Si oculares u objetivos estn sucios, lmpielos con un papel tissue u otro especial que le entregue el encargado o su profesor. No utilice cualquier papel, pues estas lentes son delicadas y se rayan fcilmente. 5. Ubique la muestra a observar sobre la platina, en el ngulo que deja el foco coaxial; la muestra debe estar dispuesta sobre un portaobjeto y, en lo posible, debe estar protegida por un cubreobjeto. Asegure la muestra con las pinzas.
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6. Ajuste la distancia focal de los objetivos a su propia distancia focal. 7. Centre la muestra utilizando primero el objetivo de menor aumento. Si necesita mover la muestra sobre la platina, utilice el foco coaxial. No utilice las manos o la fuerza para desplazar la muestra, pues daar el instrumento. 8. Ajuste el campo de observacin utilizando el macromtrico. Para ajustes ms finos, utilice el micromtrico. 9. Una vez que ha determinado la zona de la muestra que desea observar ms detalladamente, gire el revlver hacia el siguiente objetivo de mayor aumento. Verifique que el objetivo qued bien acomodado (el revlver tiene cuatro puntos de acomodo perfecto, uno para cada objetivo). Enfoque su observacin mediante foco coaxial y macro y micromtrico. 10. Si desea aumentar an ms la imagen, gire nuevamente el revlver hasta el siguiente objetivo. Ajuste segn lo indicado previamente. 11. Si an desea ms aumento y mejor resolucin, utilice el objetivo de inmersin. Para ello, deposite una gota de aceite de inmersin sobre el cubreobjeto (si es preparacin fija) o sobre la muestra (si es preparacin fresca). Mediante el macromtrico, acerque cuidadosamente el objetivo a la muestra. Complete el acercamiento con el micromtrico, de manera que el objetivo toque la gota de aceite. El objetivo debe quedar apenas sumergido en el aceite. No debe tocar el cubreobjeto ni la muestra fresca. Ajuste la imagen utilizando el micromtrico. 12. Una vez que termine su observacin con el objetivo de inmersin, solicite los materiales para limpiarlo (papet tissue y xilol) al encargado de laboratorio. Realice la limpieza con cuidado, pues este objetivo se daa fcilmente. 13. Una vez que termine de ocupar el microscopio, apguelo y verifique que est en las mismas condiciones en que lo encontr.

CUNTO MIDE EL MICROORGANISMO QUE OBSERVAMOS A TRAVS DEL MICROSCOPIO? El ojo humano solo puede discriminar (resolver) dos puntos separados por ms de 0,1mm (= 100 m). La mayora de las clulas miden menos de ese tamao y las estructuras celulares son ms pequeas an; por eso, para el estudio de las clulas, es necesario usar instrumentos que
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permitan observarlas con un mayor tamao. Este instrumento es el microscopio. Para medir una clula o un microorganismo no tenemos ninguna regla. Sin embargo, podemos hacerlo fcilmente. El procedimiento se basa en el efecto zoom de las cmaras fotogrficas o de vdeo. Si aproximas la imagen con el zoom, veremos menos espacio (campo visual). Sin embargo, los objetos aparecern ms grandes. En la imagen inferior izquierda vemos la cabeza de Bart Simpson algo pequea, colgando de una rama. Si nos acercamos a la imagen, como en la figura de la derecha, veremos menos campo de visin, pero la cabeza de Bart se ver mucho ms grande. Un microscopio tiene dos lentes de aumento: el objetivo, que se coloca justo por encima de la preparacin y el ocular (que puede ser doble), por donde se mira. La potencia del microscopio son los aumentos que tiene y se calcula multiplicando los aumentos del objetivo por los del ocular. El campo de visin de un microscopio es la zona circular que se observa al mirar la preparacin bajo un determinado aumento. El dimetro de este campo es su medida. Para calcular el dimetro del campo de visin para un determinado aumento hay que seguir los siguientes pasos: Si hemos entendido esto, estamos en condiciones de resolver el problema que se nos plantea cuando utilizamos el microscopio. a) Recorta un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado fotocopiado en acetato. b) Ponlo sobre el portaobjetos sin cubrir. c) Enfoca con el objetivo de menor aumento hasta que se vea con claridad. d) Mide el campo visual haciendo coincidir una de las lneas del papel milimetrado con el borde del campo de visin. Cuenta el nmero de milmetros que se ven y estima aproximadamente la fraccin sobrante, si la hay. El resultado ser el dimetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular). e) Si queremos calcular el dimetro del campo de visin para aumentos mayores, hay que tener en cuenta que cuanto mayor sea el aumento, el campo ser menor, es decir, se ver menos de la muestra que estemos observando.

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