Universidade Federal De Sergipe Campus prof. Alberto Carvalho Departamento De Qumica prof.

: Heloisa De Mello

Alunos: Agnes Gardnia Passos Bispo Suely De Souza Lucas Chagas Santos

Qumica Orgnica Experimental Prtica: Cromatografia em camada fina de slica gel.

Itabaiana, 201

Introduo A cromatografia o meio mais conveniente de separar compostos para purifica-los e identifica-los por distribuio entre duas fazes, uma das quais estacionria e a outra, se move. Vrios tipos de cromatografia so possveis, dependendo da natureza das duas fases envolvidas temos os mtodos cromatogrficos mais comuns: slido-lquido (coluna, camada fina e papel), lquido-lquido (lquida com alta eficincia) e gs-lquido (com fase gs). Todos os mtodos cromatogrficos funcionam mais ou menos com o mesmo princpio da extrao com solventes. Os mtodos dependem, basicamente, das solubilidades ou das adsortividades diferenciais das substncias a serem separadas em relao s duas fases entre as quais elas se particionam. Muitos tipos de foras intermoleculares de intensidades diferentes fazem as molculas orgnicas ligarem-se ao slido. Os compostos ter uma maior ou menor adsoro, dependendo das foras de interao que variam na seguinte ordem: formao de sais > coordenao > pontes de hidrognio > dipolo-dipolo > van der Waals. A cromatografia em camada fina uma tcnica muito importante para a separao rpida e a anlise qualitativa de pequenas quantidades de materiais. Sendo uma tcnica de partio slido-lquido. A fase lquida mvel forada a ascender uma camada fina de adsorvente que cobre um suporte de apoio. Quando uma placa de camada fina colocada verticalmente em um recipiente que contm uma pequena quantidade de solvente, este sobe pela placa devido capilaridade. Antes de subir o solvente na camada de adsorvente a amostra aplicada na placa em um ponto pequeno, por aplicaes sucessivas de uma soluo com um pequeno tubo capilar, prximo da base da placa. Na subida do solvente, a amostra se particiona entre a fase liquda, mvel, e a fase estacionria, slida. Durante o desenvolvimento, os vrios

componentes da mistura se separam. Baseando-se nos vrios processos de equilbrio que o soluto experimento entre as fases mvel e estacionria. Na cromatografia em camada fina a separao ocorre devido s diferenas de velocidades dos componentes que sobem a placa. Quando muitas substncias esto presentes em uma mistura, cada uma tem solubilidade e adsortividade caractersticas, que dependem dos grupos funcionais da estrutura. Aps a corrida a placa removida da cmara para secar completamente. Se a mistura original se separar, existir uma srie vertical de manchas na placa. Cada mancha corresponde a um componente separado da mistura. Se os componentes da mistura forem coloridos, as vrias manchas sero claramente visveis aps e desenvolvimento. O mais comum, entretanto, que as manchas no sejam visveis, se isto acontecer, as manchas s pode ser vistas se um mtodo de visualizao for utilizado. As manchas podem ser vistas sob luz ultravioleta ou uma cmara que contm cristais de iodo. As condies de cromatografia em camada fina incluem: sistema de solvente, adsorvente, espessura da camada de adsorvente e quantidade relativa de material aplicado. Sob um dado conjunto dessas condies, um determinado composto

percorre sempre a mesma distncia em relao ao deslocamento da frente de solvente. A razo entre o deslocamento do composto e o deslocamento do solvente chamada de valor Rf. O smbolo Rf significa fator de atraso ou razo at a frente e expresso por uma frao decimal: Kf =distncia percorrida pela substncia/distncia percorrida pela frente de solvente

Objetivo separao e identificao dos componentes da mistura. I- Materiais e reagentes: 3 amostras de comprimidos analgsicos, grau com pistilo, erlenmeyer de 250ml, soluo CH2CL2/ETOH(1:1), funil de filtrao simples, papel de filtro, 3 tubos de ensaio, soluo de acetato de etila com 0,5% de cido actico, vidro de relgio, placas cromatogrficas, bquer de 500ml, proveta de 25 ml, tubo capilar e 4 amostras( ASS, ibuprofeno, acetaminofeno e cafena. II - Procedimento experimental: II.1- Aplicao na Placa de Referncia: a)Aplicao dos padres na placa: Recebeu-se do professor 4 solues de amostras padro contendo: ASS, Ibuprofeno, Acetaminofeno e cafena.Com um capilar, semeou-se uma poro de cada padro(separadas entre si de 0,5cm)sobre uma placa de slica(8x3cm) a 1,0 cm da base da placa. Deixou-se o solvente evaporar. b)Desenvolvimento do cromatograma: Preparou-se uma cuba cromatogrfica(bquer de 250ml, uma folha pequena de filtro e um vidro de relgio)e papel 5ml da soluo de 0,5% de cido actico em acetato de etila. Esperou-se o tempo suficiente para que ocorra a completa saturao da cuba.Com o auxlio de uma pina colocou-se cuidadosamente a placa dentro da cuba, evitando que o ponto de aplicao da amostra mergulhe no eluente. Quando o eluente atingiu cerca de 0,5cm do topo da placa, removeu-se a placa e marcou-se a frente do solvente(linha de chegada da fase mvel). Deixou-se secar ao ar. c)Revelao das placas: As placas foram reveladas com lmpada ultra-violeta. Os contornos das manchas observadas foram marcados com o auxlio de um lpis. Copiou-se no caderno o cromatograma, obedecendo fielmente a distncia entre o ponto de aplicao e a frente do solvente, bem como a distncia percorrida por cada substncia, iniciando pelo ponto de aplicao at o centro de maior concentrao da mancha. Calculou-se o Rf para cada amostra padro. II.2 Anlise dos analgsicos comerciais.

Recebeu-se do professor 3 comprimidos diferentes usados comercialmente como analgsicos. Um deles, contem na sua formao, alm do principio ativo, a cafena. Macerou-se em um grau com pistilo o comprimido.Tranferiu-se o p para um erlenmeyer de 125ml e adicionou-se 10ml de uma soluo de CH2CL2/ETOH(1:1).Aqueceu suavemente o erlenmeyer em banho maria a 500C por 2 minutos com agitao. Filtrou a soluo para um tudo de ensaio e identificou-se. Seguiu-se o mesmo procedimento para as outras amostras de comprimidos. Aplicou-se as 3 amostras, na ordem, em uma placa cromatogrfica seguindo os passos anteriores. Calculou-se o Rf para cada amostra de comprimido do cromatograma e fez a anlise comparativa com a placa de referncia. II.3- Mudando a polaridade da fase mvel. Repetiu-se o procedimento do item II.2 usando uma nova placa cromatogrfica e uma mistura de eluente contendo 0,5% de cido actico em clorofrmio. Comparou-se as placas obtidas em II.2 e II.3 e analisou-se. Resultados e discusso:
Padro 0,5% AA/AcOET 3,0 cm 3 cm Placas de cromatografia fina comprimidos 0,5% AA/AcOET 2,5 cm 2 comprimidos 0,5% AA/CHCl3 2,5 cm

8,0cm

8,0cm

8,0cm

Na placa com os padres as substncias so respectivamente: cido Acetilsaliclico, Ibuprofeno, Acetaminofeno e Cafena. Nas placas com os comprimidos foram utilizados como referncia: o primeiro foi o comprimido vermelho, o segundo o redondo, e o ltimo alivium. Porm com solventes diferentes. A partir da corrida cromatogrfica foram obtidos os fatores de atraso (Rf) para as seguintes medidas. Para a placa com os padres em 0,5% de AA/AcOET. AAS o Rf foi: 5,5/6,3=0,85 Ibuprofeno o Rf foi: 6,0/6,5=0,92 Acetaminofeno o Rf foi: 4,0/6,5=0,62 Cafena o Rf foi: 1,5/6,5=0,23 A reteno de uma substncia est ligada aos grupos funcionais. Sendo assim podemos afirmar pelo valor do tempo de reteno que a cafena tem uma maior reteno comparada com as demais isto devido cafena apresentar quatro grupos funcionais de amina que se liga mais fortemente com a slica, j no acetominofeno temos apenas um grupo de amina no qual ficou menos retido que a cafena. Comparando o AAS com o Ibuprofeno, temos duas substncias polares, porm o Ibuprofeno apresenta uma caracterstica menos polar do que o AAS por isso o Ibuprofeno ficou menos retido. Placa com os comprimidos em 0,5% de AA/AcOET. Aps a corrida cromatogrfica obteve os seguintes tempos de reteno: No comprimido vermelho apareceram duas substncias. O mais redito: 1,4/6,3=0,22 O menos retido: 3,6/6,3=0,57 Comprimido redondo. 4,7/6,3=0,75 Comprimido alivium. 5,4/6,3=0,86

Comparando os tempos de reteno dos comprimidos com os padres podemos identificar qual a substncia est presente em cada comprimido.
Tabela 1

Padro Cafena Acetaminofeno AAS Ibuprofeno

Rf 0,23 0,62 0,85 0,92

Comprimido Vermelho Vermelho Redondo Alivium

Rf 0,22 0,57 0,75 0,86

Comparando os resultados da tabela acima podemos identificar que o comprimido vermelho apresenta a Cafena e o Acetaminofeno, no redondo apresenta o AAS e no alivium temos o Ibuprofeno, apesar dos tempos de reteno dos comprimidos no serem muitos prximos ao seu padro, devido aos comprimidos terem em sua composio outras substncias que afetou na eluio. Mesmo assim podemos identificar qual a substncia presente nos comprimidos. Placa dos comprimidos com 0,5% AA/CHCl3 Obteve os seguintes tempos de reteno. Comprimido vermelho. 0,3/5,7=0,05 Comprimido redondo. 0,5/5,7=0,09 Comprimido alivium. 1,5/5,7=0,26

Tabela 2

0,5% AA/CHCl3 Comprimido Rf Vermelho 0,05 Redondo 0,09 Alivium 0,26

0,5% AA/AcOET Comprimido Rf Vermelho 0,22 Vermelho 0,57 Redondo 0,75 Alivium 0,86

Comparando os tempos de reteno apresentados na tabela acima podemos concluir que a diferena devido a polaridade do acetato de etila ser mais polar que o clorofrmio, mas a proporo da sada das substncias seram as mesmas Pelas placas obtidas do item II.2 e II.3 percebe-se que na placa do item II.2 uma menor reteno do que na placa II.3.Essa evidncia devido o tipo de

adsorvente e o sistema de solventes. Sabemos que a fase estacionria fortemente polar e liga-se fortemente as substncias polares. A fase lquida mvel usualmente menos polar do que o adsorvente e dissolve mais facilmente substncias menos polares e, at mesmo, apolares. Assim, as substncias mais polares sobem lentamente, ou nem sobem, e as substncias apolares sobem mais rapidamente se o solvente suficientemente apolar. Questes: 1. Foras de van der waals e dipolo-dipolo. 2. Ajuda a manter a cuba saturada com vapores de solvente, acelerando o desenvolvimento. 3. Luz ultravioleta e cmara de cristais de iodo. Concluso medida que o solvente sobe pela placa, a amostra compartilhada entre a fase lquida mvel e a fase slida estacionria. Durante este processo, os diversos componentes da mistura so separados. Diferentes componentes movem-se na placa a diferentes velocidades, os que interagem menos avanam mais rapidamente e so encontrados mais perto da frente do solvente do que os que interagem mais fortemente. Esta diferena na velocidade resultar numa separao dos componentes da amostra. Quando estiverem presentes vrias substncias, cada uma comportar-se- segundo as suas propriedades de solubilidade e adsoro, dependendo dos grupos funcionais presentes na sua estrutura.