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MD Editado por: Department of Clinical Hematology, Osaka City University Medical School Takahisa Yamane, MD Department of Central Clinical Laboratory, Osaka City University Hospital Hiroshi Kubota, MT Traducido al espaol por: Sysmex Latinoamrica Oficina representativa en Miami
XE-2100
Casos clnicos
Volumen 2
SYSMEX CORPORATION
INDICE
Introduccin Casos de clulas linfoides anormales Casos de clulas inmaduras de tipo mieloide Casos de clulas de apariencia especfica 3 5 25 45
INTRODUCCION
Como parte de los proyectos de colaboracin internacional, frecuentemente visito laboratorios clnicos en ciudades del sudeste de Asia. En cada visita me he quedado impresionado por el conocimiento que tienen sobre las ms recientes pruebas clnicas, su gran deseo por aprender y la atmsfera energtica que existe en el lugar de trabajo. Algunos de estos laboratorios han introducido pruebas con mtodos de punta, incluyendo la tecnologa de PCR, mientras que otros estn tratando de alcanzar la sistematizacin. No obstante, el desarrollo es lento debido a las inadecuadas condiciones sociales y financieras, aunque esto mejorar tanto como la economa crezca en el futuro. En los laboratorios de hematologa de instituciones mdicas de estas ciudades del sudeste de Asia, las mediciones automatizadas de sangre se estn incrementando e incluyen los ms recientes parmetros en hemates y plaquetas, como por ejemplo, el cambio del diferencial de tres partes al de cinco partes en la cuenta de leucocitos. Adems, est aumentando el reconocimiento a la importancia que debe tener la calidad de los anlisis. Pese a ello, con la actual difusin de modernos analizadores multiparamtricos totalmente automatizados, algunos sectores tienen temor a que las tcnicas de microscopio se pierdan. Este es un tema que debe recibir atencin en los entrenamientos tcnicos y mdicos, mientras tanto, no se debe concluir que la automatizacin del diferencial es algo malo. Los analizadores automatizados del diferencial de leucocitos pueden proveer cuentas exactas y precisas de las clulas presentes con alto nivel de veracidad. Esto permite al personal del laboratorio tener tiempo suficiente para la examinacin microscpica de las pocas muestras que no pueden ser manejadas por los equipos. Esto se debe aplicar no slo en el sudeste de Asia, sino tambin en todo el mundo. Sin embargo, para usar los analizadores automatizados del diferencial de leucocitos eficiente y efectivamente, los laboratorios deben establecer estrategias para reconocer anormalidades en los histogramas y dispersogramas. Tambin se deben establecer estrategias para el manejo de avisos y mensajes de interpretacin provedos por el instrumento. Mtodos elctricos, pticos _y ahora sistemas hbridos_ son ampliamente aceptados para la diferenciacin de leucocitos debido a la superioridad que tienen en cuanto a precisin, exactitud y rapidez. No obstante, con el impresionante aumento en la velocidad del proceso de cmputo, en esta etapa de informacin en tecnologa puede ser que esta actitud requiera de una reevaluacin en un futuro cercano. Muchos hematlogos tienen ms confianza en las caractersticas morfolgicas encontradas en una tincin o coloracin Giemsa particularmente para clulas raras . Por esta razn, es previsible que para un futuro cercano los tcnicos y doctores deban mantener sus habilidades en la identificacin de clulas por microscopio mientras aprecian el valor de los analizadores automatizados en la rutina prctica. Espero que la presente literatura les sea til en el trabajo diario. Diciembre, 2000
Noriyuki Tatsumi
Profesor, Departamento de Clnica y Laboratorio Mdico, Escuela de Medicina de la Universidad de Osaka, Osaka (Japn)
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
IMI
FSC DC RF
NRBC
SFL
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
Abn Lympho/L_Blasts
Banda 5.0 [%] Segmentados 65.5 [%] Linfocitos 17.0 [%] Monocitos 5.0 [%] Eosinfilos 3.0 [%] Basfilos 0.5 [%] Mielocitos 1.0 [%] Clulas atpicas 3.0 [%]
Observaciones
El lmite confuso entre las reas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la presencia de clulas linfoides anormales en este lugar. Estos puntos corresponden a los linfocitos atpicos de LAT (de los cuales se encontraron 3% en la sangre perifrica). La aparicin del aviso Abn Lympho/L_Blasts? demuestra la excelente sensibilidad del canal DIFF para detectar clulas linfocticas anormales.
Observaciones
Clulas T CD2 86.1 CD3 75.4 CD4 54.8 CD7 72.9 CD8 24.6 Clulas B CD20 7.9 HLA-DR 31.4 Otros CD25 51.4
Resultados positivos para marcadores CD7 y CD25. El valor de CD4 no aument significativamente, lo que sugiere que las clulas LAT no se incrementaron.
(x 1000)
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Se encontraron clulas segmentadas, enclavadas y onduladas (tambin conocidas como clulas en flor) entre linfocitos maduros.
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
NRBC
SFL
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
4.0 [%] 19.0 [%] 13.0 [%] 4.0 [%] 0.5 [%] 0.5 [%] 59.5 [%]
Observaciones
El lmite confuso entre las reas de monocitos y linfocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la presencia de clulas linfoides anormales. Fueron consideradas como clulas LAT (encontradas en un 60% en la sangre perifrica).
Observaciones
Clulas T CD2 91.6 CD3 91.5 CD4 84.1 CD5 94.5 CD7 19.5 CD8 7.6 Clulas B CD10 7.7 CD19 6.2 CD20 6.7 CD23 4.6 Otros CD25 82.3
El alto ndice de positividad para CD4 y CD25 sugiere clulas T tumorales, mientras que el bajo ndice de positividad para CD7 sugiere leucemia T crnica o aguda en adulto. Este caso fue diagnosticado como LAT aguda.
Observaciones
Se encontr un significativo nmero de linfocitos con forma de flor segmentada.
(x 1000) (x 1000)
WBC/BASO
SSC
IMI
RF
NRBC
FSC DC
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
Banda 0.5 [%] Segmentados 8.5 [%] Linfocitos 23.5 [%] Monocitos 0.0 [%] Eosinfilos 0.0 [%] Basfilos 2.0 [%] Clulas peludas 65.5 [%]
Observaciones
Este es un caso de leucemia de clulas peludas (LCP). En el dispersograma DIFF se form un grupo de puntos en la regin del rea de linfocitos hacia el rea de monocitos (indicado por ), lo que sugiere la presencia de clulas peludas.
10
Observaciones
Resultados positivos para marcadores CD19 y CD20, lo que sugiere un tumor de tipo clula B. CD11c-positivo, CD24negativo y FMC7-positivo indican leucemia de clulas peludas. El valor bajo para CD25 sugiere que la leucemia es de tipo japons.
32.6 CD19 40.6 CD20 18.6 CD24 29.4 CD38 17.0 FMC7 SM-IgD SM-IgM SM-IgA SM-IgG SM-IgT SM-IgK SM-IgL
(x 1000)
(x 1000) (x 1000)
Observaciones
Se observan clulas en forma de huevo frito. En el frotis estn presentes clulas peludas con numerosas proyecciones. En la tincin de fosfatasa cida se encontraron clulas granulares grandes que contienen una o dos clulas dbilmente positivas, las cuales fueron resistentes al tartrato. Se sabe que la leucemia de clulas peludas de tipo japons muestra positividad dbil en la tincin de fosfatasa cida.
*La mayora de laboratorios japoneses usan un ventilador para secar sus tinciones o coloraciones de sangre perifrica.
11
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
IMI
RF FSC DC
NRBC
* * * * *
SFL
Diferencial manual
Banda 3.5 [%] Segmentados 2.5 [%] Linfocitos 8.5 [%] Monocitos 0.5 [%] Eosinfilos 1.5 [%] Basfilos 0.0 [%] Mielocitos 1.0 [%] Clulas anormales 82.5 [%] (Blastos +) Hemates nucleados 2.5/100 leucocitos
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
Thrombocytopenia
Observaciones
El lmite confuso entre las reas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por sugiere la presencia de clulas linfoides anormales, ya que representan la mayora en el frotis. )
12
Observaciones
Los datos sugieren que existe una proliferacin neoplsica de clulas pre-T, las cuales son CD3 negativas; y CD4, CD8, CD10 y CD56 fueron positivas.
(x 1000)
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Predominan pequeas clulas con particiones celulares, las cuales se consideran como clulas de linfoma (82.5% del total). Tambin se observa un pequeo nmero de clulas grandes y blastos.
13
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
IMI
RF FSC DC
NRBC
SFL
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
Banda 8.5 [%] Segmentados 74.0 [%] Linfocitos 6.5 [%] Monocitos 7.0 [%] Eosinfilos 0.5 [%] Basfilos 0.0 [%] Clulas linfoma maligno 3.5 [%]
Observaciones
El lmite confuso entre las reas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la presencia de clulas linfoides anormales, las cuales fueron clasificadas como clulas de linfoma maligno (3.5% del total del frotis). Aparece la alarma Abn Lympho/L_Blasts? .
14
Observaciones
Se encontraron clulas grandes de linfoma propensas a la segmentacin y blastos (3.5% del total) en el frotis.
(x 1000)
(x 1000)
15
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
IMI
RF FSC DC
NRBC
SFL
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
0.0 [%] 11.0 [%] 1.5 [%] 1.5 [%] 0.0 [%] 0.0 [%] 86.0 [%]
Observaciones
Linfocitos granulares grandes (90% en el frotis) aparecen en el rea de linfocitos del dispersograma DIFF los cuales mostraban mayor dispersin lateral que los linfocitos normales debido a su gran con, tenido granular (indicado por ).
16
Observaciones
Los datos sugieren una proliferacin neoplsica de clulas positivas para CD3, CD4, CD8 apagado, CD16 y CD56. El linfoma linfoctico granular grande es clasificado en clulas tipo T o clulas nulas. Es raro aun para clulas tipo T el expresar CD4.
99.7 CD10 99.6 CD19 99.0 CD20 99.5 HLA-DR 82.9 87.4 apagado
Otros
CD25
18.5
Observaciones
La mayora de linfocitos son grandes y contienen grnulos.
(x 1000)
17
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
IMI
RF
NRBC
FSC DC
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
3.0 [%] 30.5 [%] 41.5 [%] 1.0 [%] 0.5 [%] 2.0 [%] 21.5 [%]
(clulas segmentadas +)
Observaciones
El lmite confuso entre las reas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la aparicin de clulas linfoides anormales segmentadas, las cuales fueron encontradas en el frotis.
18
Observaciones
CD56 8.1 El alto ndice de positividad (por encima del 90%) para CD2, CD3, CD4, CD5 y CD7 sugiere un incremento significativo en clulas T.
(x 1000) (x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Se encontr un importante nmero de clulas anormales linfocticas con cmulos burdos en la cromatina y nuclolos claros y poco claros. Los hallazgos por los cuales este paciente fue diagnosticado con leucemia prolinfoctica fueron leucocitosis, ndulos linfticos y bazo inflamados, as como por los resultados de la citometra de flujo y el anlisis del frotis de la sangre perifrica.
19
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
IMI
RF FSC DC
NRBC
SFL
Diferencial manual
Banda Segmentados Linfocitos Monocitos Eosinfilos Basfilos Mielocitos Metamielocitos Linfocitos atpicos Blastos 9.0 [%] 30.5 [%] 9.0 [%] 26.0 [%] 0.0 [%] 0.0 [%] 2.5 [%] 1.5 [%] 0.5 [%] 21.0 [%]
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
Anemia
Observaciones
El espacio ocupado por los monocitos es ms grande de lo normal en el dispersograma DIFF y se extiende al rea de fluorescencia lateral alta. Se puede concluir que los blastos grandes y segmentados se encuentran localizados en esta rea (indicado por ). Los blastos constituyeron el 21% en el diferencial manual.
20
Observaciones
Se concluy que este caso era una leucemia aguda tipo T. Fue positiva para CD3 y negativa para CD4 y CD8.
CD2 99.7 CD10 CD3 97.0 CD19 CD4 1.7 CD20 CD7 79.9 HLA-DR CD8 6.9
Otros CD25
0.6
(x 1000)
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Esta es una leucemia aguda tipo T recurrente. Los blastos (21% en el frotis) tienen una elevada relacin ncleo/citoplasma (N/C), un solo ncleo por clula y cromatina burda.
21
WBC/BASO
FSC
SSC RF
SSC
IMI
FSC
NRBC
DC
SFL
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
Anemia
0.0 [%] 0.5 [%] 6.0 [%] 0.0 [%] 0.5 [%] 0.0 [%] 93.0 [%]
Observaciones
Los blastos (90% en el frotis) aparecen en el rea de linfocitos y monocitos del dispersograma DIFF (indicado por ), pero muestran menos fluorescencia lateral que en el caso de LLA-T ilustrado en las pginas 20 y 21.
22
Observaciones
CD10 y CD19 positivos, as como CD20 negativo, sugieren una proliferacin neoplsica de clulas pre-B. A estas clulas se les ha considerado bifenotpicas, ya que fueron positivas para CD13 y CD33.
Tincin May-Giemsa
Tincin peroxidasa
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Predominan blastos pequeos con una elevada relacin ncleo/citoplasma (N/C). Se observ la presencia de algunas clulas segmentadas o con cisuras.
23
Por: Ken-ichi Anami, MT, Gerente del laboratorio clnico del Hospital Nacional Miyakonojo, Japn.
24
25
WBC/BASO
+ +
SSC
IMI
FSC DC RF
NRBC
* * * * *
SFL
PLT
FSC RF
PLT-O
WBC IP Messages
Diferencial manual
Banda 2.5 [%] Segmentados 66.5 [%] Linfocitos 15.0 [%] Monocitos 3.5 [%] Eosinfilos 6.5 [%] Basfilos 5.0 [%] Blastos 1.0 [%] Hemates nucleados 2.5/100 leucocitos
Anisocytosis
PLT IP Messages
SFL
Observaciones
Este caso es una variante del sndrome mielodisplsico con anemia refractoria. La agrupacin de neutrfilos en el dispersograma DIFF es anormal y se extiende desde el rea de los fantasmas (indicado por ), lo que sugiere una dispersin lateral reducida y por lo tanto un menor contenido de grnulos. Esto fue confirmado en el examen de sangre perifrica. Las plaquetas gigantes encontradas en el frotis fueron identificadas con una fluorescencia alta en el dispersograma PLT-O (indicado por ) y aparecen por encima de los 20fL en el histograma PLT (indicado por ). Debido a ello, la informacin obtenida en el dispersograma PLT-O fue usada para el reporte.
26
(x 1000)
(x 1000)
(x 1000)
Tincin May-Giemsa
Observaciones
Estn presentes neutrfilos hipersegmentados, plaquetas gigantes y eritroblastos con nuclolos bilobulados, todos caractersticos del sndrome mielodisplsico. Se encontraron blastos en una proporcin del 1%.
(x 1000)
27
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
NRBC
FSC
DC
SFL
Diferencial manual
Banda 14.0 [%] Segmentados 22.5 [%] Linfocitos 2.5 [%] Monocitos 5.0 [%] Eosinfilos 1.0 [%] Basfilos 1.0 [%] Blastos 38.5 [%] Mielocitos 9.5 [%] Metamielocitos 6.0 [%] Hemates nucleados 1.0 /100 leucocitos
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
Anemia
Observaciones
En el dispersograma DIFF se puede observar en el rea de monocitos una agrupacin grande de puntos, la cual se extiende en la direccin de mayor fluorescencia lateral (indicado por ). Esto concuerda con la presencia de blastos encontrados en la sangre perifrica.
28
Observaciones
A la izquierda se muestran los marcadores de superficie en el examen inicial. CD4, CD11b, CD14 y CD36, marcadores conocidos de la serie monoctica, son todos positivos.
Tincin May-Giemsa
Observaciones
Este es un paciente con LMC en crisis blstica. Se identific en el frotis un gran nmero de blastos con ncleos hendidos y citoplasma altamente basoflico. Tambin fueron identificadas clulas inmaduras de la serie monoctica. Se encontr una reaccin dbilmente positiva a la esterasa -naftol butirato sensitiva al fluoruro de sodio (NaF).
(x 1000)
Tincin esterasa
(x 400)
(x 1000)
29
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
NRBC
FSC
DC
SFL
Diferencial manual
Banda 2.0 [%] Segmentados 4.5 [%] Linfocitos 15.5 [%] Monocitos 5.0 [%] Eosinfilos 0.5 [%] Basfilos 0.0 [%] Blastos 68.0 [%] Promielocitos 0.5 [%] Mielocitos 2.0 [%] Metamielocitos 2.0 [%] Hemates nucleados 2.0/100 leucocitos
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
WBC Abn Scattergram Monocytosis Basophilia Blasts? Immature Gran? Left Shift?
Anemia
Observaciones
Este es el mismo paciente mencionado en las pginas 28 y 29 despus de tres semanas de tratamiento. Aun cuando el mismo grupo de puntos en el rea de fluorescencia lateral fuerte todava est presente en el dispersograma DIFF (indicado por ), otro grupo pequeo aparece en el rea de monocitos (indicado por ). Esto sugiere una reduccin en las clulas con alto contenido de cido nucleico en comparacin con los exmenes previos.
30
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Apariencia del frotis de sangre perifrica despus de tres semanas de tratamiento. Los blastos eran grandes con vacuolas numerosas y de citoplasma profundamente basoflicos. Se encontraron clulas con apotosis por todo el frotis.
31
WBC/BASO
FSC
SSC
SSC
IMI
FSC DC RF
NRBC
SFL
Diferencial manual
Banda 0.0 [%] Segmentados 0.0 [%] Linfocitos 2.5 [%] Monocitos 0.0 [%] Eosinfilos 0.0 [%] Basfilos 0.0 [%] Blastos 97.5 [%] Cuerpos de Auer+
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
Anemia
Observaciones
Este caso es una leucemia mieloide aguda ( (LMA)-M2 ) en recada. Se pens que los blastos (97.5% en el frotis) estaban localizados en el rea de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ). Los puntos rojos que aparecen en el dispersograma IMI (indicado por ) sugieren la presencia de clulas inmaduras de la serie neutroflica.
32
Observaciones
El marcador CD13 fue positivo, mientras que CD14 y CD36 fueron negativos, lo que sugiere la presencia de blastos de tipo mieloide.
Observaciones
Se observan blastos con nuclolos bastante evidentes y citoplasmas ligeramente turbios, algunos de los cuales contienen cuerpos de Auer. La tincin de peroxidasa es fuertemente positiva.
(x 1000)
(x 1000)
33
WBC/BASO
FSC
SSC
SSC
NRBC
* * * *
SFL
Diferencial manual
Banda 0.0 [%] Segmentados 0.5 [%] Linfocitos 1.0 [%] Monocitos 0.0 [%] Eosinfilos 0.0 [%] Basfilos 0.0 [%] Blastos 3.0 [%] Promielocitos 91.5 [%] Mielocitos 3.5 [%] Metamielocitos 0.5 [%]
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
RBC Abn Distribution PLT Abn Distribution Dimorphic Population Thrombocytopenia RET Abn Scattergram Anemia PLT Clumps? Fragments?
Observaciones
Un grupo de puntos localizado en el rea de linfocitos y monocitos que se extiende en direccin del sitio de mayor fluorescencia (indicado por ), sugiere que los promielocitos (91.5% en el frotis de sangre perifrica) aparecen aqu. Tambin se observan pequeos puntos en reas usualmente ocupadas por neutrfilos y eosinfilos, lo que concuerda con las observaciones del recuento microscpico. La gran cantidad de puntos rojos que aparecen en el dispersograma IMI sugieren clulas inmaduras de la serie mieloide (indicado por ).
34
Observaciones
Los marcadores mieloides CD13 y CD33 fueron positivos, mientras que los marcadores CD14 y CD36, a los cuales se conoce como reaccin de clulas monocticas, fueron negativos. Esto sugiere leucemia mieloide.
(x 1000) (x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Se observan muchas clulas bilobuladas, otras exhiben clivaje o ncleos hendidos. El citoplasma present variaciones de color, que fueron de azul profundo a gris con algunas vacuolas y pequea cantidad de grnulos azurfilos y fardos de cuerpos de Auer (clulas de Faggot). Se observ una reaccin fuertemente positiva a la tincin de peroxidasa en la mayora de las clulas. Todos estos datos indican variante forma-M3. En la mayora de casos de esta variante el recuento perifrico de leucocitos es bajo, pero en el presente caso es elevado.
35
DC
DC
IG
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages
Diferencial manual
PLT IP Messages
Banda 0.5 [%] Segmentados 0.0 [%] Linfocitos 3.5 [%] Monocitos 20.0 [%] Eosinfilos 0.5 [%] Basfilos 0.0 [%] Promielocitos 4.0 [%] Mielocitos 15.5 [%] Metamielocitos 3.5 [%] Blastos 52.5 [%]
Observaciones
Presentacin de un caso de LMA-M4. Aparecen muchos puntos rojos en el dispersograma IMI, lo que sugiere la presencia de granulocitos precursores. En el dispersograma DIFF la fusin de puntos en el , rea de linfocitos y monocitos y su extensin dentro del rea de alta fluorescencia (indicado por ), sugiere la presencia de blastos (52.5% de la preparacin). Los datos de los parmetros de investigacin del XE-2100 indican 15% de blastos, nivel ligeramente diferente del diferencial manual (promielocitos: 4.0% + mielocitos: 15.5% + metamielocitos: 3.5% = 23%). Sin embargo, el recuento original de leucocitos rebas el lmite de linearidad, se repiti el anlisis en una dilucin de 1 a 10 (indicado por la flecha ) dando como resultado un recuento de granulocitos inmaduros (IG) del 20%, el cual fue ms cercano al conseguido por el mtodo visual. La proporcin de IMI obtenida de los datos de la pantalla de servicio fue de 73.6% (indicado por ), lo que se acerca al 75.5% obtenido por el mtodo visual.
36
Observaciones
Los marcadores CD11b, CD13, CD14, CD15, CD33 y HLA-DR fueron positivos, mientras que CD14 estuvo cercano al 40%. Esto sugiere hiperplasia de las dos lneas celulares: mieloctica y monoctica.
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Se aprecia un incremento de clulas mieloides inmaduras (en el rango de promielocitos y metamielocitos) y tambin de monocitos (incluyendo promonocitos). La tincin de peroxidasa va desde positiva o dbilmente positiva a negativa.
37
(x 400)
(x 1000)
Observaciones
En la tincin de esterasa se encontraron clulas positivas para -naftil butirato y clulas positivas para naftol-AS-D-cloroacetato.
38
8 21
Por: Ken-ichi Anami, MT, gerente del laboratorio clnico del Hospital Nacional Miyakonojo, Japn.
39
WBC/BASO
FSC SSC
SSC
NRBC
FSC DC
SFL
Diferencial manual
Banda 14.0 [%] Segmentados 17.5 [%] Linfocitos 24.0 [%] Monocitos 33.0 [%] Eosinfilos 0.0 [%] Basfilos 0.0 [%] Linfocitos atpicos 1.0 [%] Blastos 10.0 [%] Mielocitos 0.5 [%] Hemates nucleados 1/100 leucocitos
WBC IP Messages
PLT IP Messages
Observaciones
Los monocitos se extienden verticalmente en el rea del dispersograma DIFF (indicado por ), lo que sugiere la presencia de blastos (10% de la preparacin de sangre perifrica). La lectura de Otros (Other), los cuales proveen informacin acerca de clulas con alto contenido de cido nucleico, fue 1.5% (indicado por ). Esta rea corresponde a los linfocitos atpicos. El recuento obtenido por el mtodo visual concuerda con el de linfocitos atpicos del 1%. La nube de neutrfilos est anormalmente localizada, contigua al rea de clulas fantasmas (indicado por ). Esto sugiere que los neutrfilos son hipogranulares y bajos en contenido de cido nucleico.
40
Observaciones
Los resultados iniciales de los marcadores. CD13, CD14, CD33 y HLA-DR fueron positivos, lo que indica la presencia de blastos de lnea mieloide y monoctica.
(x 1000) (x 1000)
Observaciones
Este caso fue diagnosticado como LMA-M4 a partir del anlisis de la mdula sea. En sangre perifrica se observ incremento de clulas inmaduras de las lneas mieloide y monoctica. La mayora de los monocitos mostraron una reaccin negativa a la peroxidasa. Las clulas mieloides mostraron reaccin positiva con las tinciones de esterasa, -naftol butirato o naftol-AS-D-cloroacetato.
41
WBC/BASO
SSC
SSC
IMI
RF FSC DC
NRBC
SFL
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
PLT Clumps?
Banda 1.5 [%] Segmentados 1.5 [%] Linfocitos 12.5 [%] Monocitos 24.5 [%] Eosinfilos 0.5 [%] Basfilos 0.0 [%] Promielocitos 0.5 [%] Blastos 59.0 [%] Hemates nucleados 0.5/100 leucocitos
Observaciones
Este caso fue diagnosticado como LMA-M5b. Aparecen muchos puntos rojos en el dispersograma IMI, lo que sugiere la presencia de clulas mieloides inmaduras. La fusin de linfocitos y monocitos en el rea del dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la localizacin de los blastos encontrados en el frotis de sangre perifrica (59%).
42
Observaciones El marcador CD14 fue positivo, lo que indica la presencia de clulas monocticas. El alto ndice de positividad para CD4 sugiere hiperplasia de blastos, en su mayora monocitos.
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Se observ en el frotis un gran nmero de blastos hendidos con una relacin ncleo/citoplasma (N/C) elevada y con citoplasma basfilo. Los monocitos, incluyendo los promonocitos, estn elevados. La tincin de peroxidasa vari de dbilmente positiva a negativa, mientras que se hallaron clulas positivas para -naftol butirato esterasa inhibidas por el NaF (ver pgina siguiente).
43
(x 1000)
(x 1000)
44
45
WBC/BASO
SSC
SSC
IMI
RF
NRBC
FSC DC
SFL
Diferencial manual
PLT IP Messages
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
NRBC Present
PLT Clumps?
Banda 2.0 [%] Segmentados 27.5 [%] Linfocitos 42.0 [%] Monocitos 23.0 [%] Eosinfilos 4.0 [%] Basfilos 1.0 [%] Mielocitos 0.5 [%] Hemates nucleados 26/100 leucocitos
Observaciones
En el dispersograma NRBC aparecen muchos puntos azules entre el rea normal de clulas fantasmas y el rea de normoblastos (indicado por ), lo que sugiere la presencia de cuerpos de Howell-Jolly. Estos puntos fueron incluidos en la fraccin de clulas fantasmas sin tener influencia en los datos de hemates nucleados. Los puntos rosados (indicado por ) representan hemates nucleados, cuyo recuento concuerda muy cercanamente con el diferencial manual. En el dispersograma WBC/BASO, esos normoblastos aparecen en el eje de alta dispersin (indicado por ). Esto demuestra que el XE2100 provee informacin verdadera despus de descontar los hemates nucleados que aparecen en el rea de leucocitos (indicado por WBC &).
46
(x 1000)
(x 1000)
(x 1000)
(x 1000)
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Los cuerpos de Howell-Jolly son normalmente de 2 m o menores y se pueden diferenciar fcilmente de los hemates nucleados. Sin embargo, este caso presenta gran cantidad de normoblastos con ncleos pequeos y eritrocitos con cuerpos de Howell-Jolly de gran tamao.
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WBC/BASO
SSC FSC
SSC
IMI
RF
NRBC
DC
SFL
Diferencial manual
WBC IP Messages RBC/RET IP Messages PLT IP Messages
Thrombocytopenia
Banda 0.0 [%] Segmentados 0.0 [%] Linfocitos 43.0 [%] Monocitos 0.0 [%] Eosinfilos 0.0 [%] Basfilos 0.0 [%] Clulas anormales 57.0 [%]
(clulas segmentadas +)
Observaciones
Este es un caso de LMA-M2 bajo tratamiento. nicamente se hallaron linfocitos en el frotis de sangre perifrica y la mayora estaban segmentados. Se cree que estas clulas se detectaron en el rea de linfocitos/monocitos del dispersograma DIFF (indicado por ). Debido al muy bajo recuento de leucocitos, aparece la alarma de Abn Lympho/L_Blasts? lo que sugiere un problema con los linfocitos. ,
48
Observaciones
Los marcadores CD2, CD3 y CD4 fueron positivos, lo que indica un incremento en la relacin cooperador/supresor de las clulas T. Como el CD25 y el HLA-DR tambin fueron positivos, se consider que estas clulas estaban activadas.
Observaciones
Este caso es una M2 en tratamiento. Se encontr un bajo recuento de leucocitos. La mayora de las clulas eran linfocitos. Cerca del 50% de ellos fueron pequeos linfocitos anormales segmentados.
(x 1000)
(x 1000)
49
WBC/BASO
SSC
SSC
IMI
RF FSC
NRBC
DC
SFL
Diferencial manual
Banda 4.5 [%] Segmentados 51.0 [%] Linfocitos 31.0 [%] Monocitos 5.5 [%] Eosinfilos 1.0 [%] Basfilos 0.0 [%] Clulas anormales 7.0 [%]
(clulas segmentadas +)
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
Observaciones
El lmite confuso entre las reas de linfocitos y monocitos en el dispersograma DIFF (indicado por ) sugiere la presencia de clulas linfoides anormales. En el frotis se observaron clulas linfoides segmentadas anormales.
50
Observaciones
Se encontraron pequeas clulas linfoides segmentadas anormales con alta relacin ncleo/ citoplasma (N/C) en sangre perifrica (7%).
(x 1000)
Tincin May-Giemsa
(x 1000)
51
WBC/BASO
FSC
SSC
SSC
NRBC
FSC
DC
SFL
Diferencial manual
Banda 17.0 [%] Segmentados 38.5 [%] Linfocitos 6.0 [%] Monocitos 10.0 [%] Eosinfilos 2.0 [%] Basfilos 0.5 [%] Mielocitos 17.0 [%] Metamielocitos 8.5 [%] Linfocitos atpicos 0.5 [%]
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
Observaciones
En el dispersograma DIFF un grupo de puntos se extiende desde el rea de neutrfilos hacia el rea de , fluorescencia alta (indicado por ), lo que sugiere la presencia de granulocitos inmaduros. El XE-2100 ofrece un parmetro de investigacin, el IG o granulocitos inmaduros, que report un valor de 19.1%, el cual corresponde cercanamente al 17% de mielocitos obtenidos por el diferencial manual. La presencia de granulocitos inmaduros tambin fue sugerida por la gran cantidad de puntos rojos en el dispersograma IMI (indicado por ). Adems, la determinacin del porcentaje de clulas mieloides inmaduras desde el men de datos de servicio fue del 28.0%, lo que corresponde a la suma de los mielocitos (17%) + metamielocitos (8.5%) = 25.5%, obtenido en el frotis.
52
Observaciones
Se aprecia un gran nmero de clulas mieloides en sangre perifrica (incluyendo mielocitos inmaduros y metamielocitos).
(x 1000)
53
Caso de esquizocitos
Informacin del XE-2100
Informacin medida por el XE-2100
WBC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC PLT & RDW-SD RDW-CV PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO NRBC RET IRF LFR MFR HFR 5.82 [109/L] 4.44 [1012/L] 86 [g/L] 31.3 [%] 70.5 - [fL] 19.4 - [pg] 275 - [g/L] 342 [109/L] (PLT-I : 379) 49.7 [fL] 19.3 + [%] 11.9 * [fL] 9.7 * [fL] 23.5 * [%] 0.37 * [%] 3.88 [109/L] 66.7 [%] 1.51 [109/L] 25.9 [%] 0.33 [109/L] 5.7 [%] 0.08 [109/L] 1.4 [%] 0.02 [109/L] 0.3 [%] 0.00 [109/L] 0.0 [/100WBC] 0.93 [%] 41.3 [109/L] 14.9 [%] 85.1 [%] 13.5 [%] 1.4 [%]
RBC/RET IP Messages
RET
FSC FSC SFL
PLT-O
SFL
RBC
PLT
344 [109/L]
WBC IP Messages
Observaciones
El frotis de sangre perifrica muestra muchos esquizocitos. Sin embargo, aun cuando en el dispersograma RET los esquizocitos se extienden desde el rea de hemates hacia las plaquetas (indicado por ), en el dispersograma PLT-O se observa una clara distincin entre las dos poblaciones (indicado por ). Ello indica que no hubo influencia de los esquizocitos en el recuento ptico de plaquetas. La alarma PLT Abn Distribution se gener debido a que los esquizocitos estn presentes en el umbral de 30 fL en el histograma PLT (indicado por ), por lo que los datos del dispersograma PLT-O fueron usados para el recuento. Este resultado concuerda con los resultados obtenidos en el diferencial manual (344 vs. 342 x 109/L).
54
Observaciones
Se observ un gran nmero de esquizocitos, tal como lo indican las flechas.
(x 400)
55
WBC/BASO
SSC
SSC
IMI
RF
NRBC
FSC
DC
SFL
Diferencial manual
Banda Segmentados Linfocitos Monocitos Eosinfilos Basfilos Promielocitos Mielocitos Clulas sin clasificacin
(sospecha de basfilos)
WBC IP Messages
RBC/RET IP Messages
PLT IP Messages
Observaciones
Este paciente tiene SMD (AREB). En el dispersograma DIFF aparece slo un pequeo nmero de puntos en el rea normal de neutrfilos (indicado por ). Sin embargo, aparece un grupo grande entre el rea de linfocitos y clulas fantasmas (indicado por ). Se considera que este grupo de puntos corresponde a los neutrfilos con ausencia o reduccin en la granulacin. El eje de las X del dispersograma DIFF corresponde a la intensidad de dispersin que indica el contenido celular.
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Basfilo?
(x 1000)
(x 1000)
Tincin peroxidasa
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
En el frotis se encontro un gran nmero de neutrfilos con reduccin o ausencia de grnulos secundarios. La tincin de peroxidasa estuvo ausente en ms del 90% de los neutrfilos maduros. Los grnulos de los eosinfilos fueron muy finos y en los basfilos no se pudieron distinguir. Adems, en el 18.5% de las clulas fue difcil la diferenciacin porque tienen ncleos semejantes a los basfilos, pero con ausencia de grnulos.
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(x 1000)
Tincin PAS
(x 1000) (x 1000)
Tincin esterasa
Tincin esterasa
(x 1000)
(x 1000)
Observaciones
Los neutrfilos se clasificaron como clase III IV en la coloracin de fosfatasa alcalina. Algunas clulas mostraron reaccin PAS difusa. En tincin de esterasa, naftol-AS-D-cloroacetato fue negativa o dbilmente positiva en la mayora de los neutrfilos; slo muy pocos mostraron reaccin fuertemente positiva.
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La intencin de los mensajes generados por este instrumento se limita a la identificacin de muestras que contengan clulas anormales, sujetas a revisin por personal de laboratorio calificado. SYSMEX CORPORATION Divisin Cientfica 4-4-4 Takatsukadai, Nishi-ku KOBE 651-2271, Japn Telf.: 078-991-1911 Fax: 078-992-5842 e-mail: scientific@sysmex.co.jp
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