Preguntas razonadas tema II.

Por Luis Daz-Casanova Porres

1.- Cul es la primera herramienta que que utilizaramos en la deteccin de elementos translocadores de protenas a travs de bicapas? Porqu? Una de las principales herramientas que podemos utilizar en la deteccin de elementos translocadores (includos retrotranslocadores) de protenas a travs de bicapas lipdicas son los reactivos de Crosskinking, ya que se van a unir con eficacia al canal del complejo translocador por el que va a pasar la protena. Aunque este tipo de reactivos tambin se une a otros complejos hidrosolubes con los que la protena interacciona a lo largo de su trnsito a travs de la clula, no ser muy difcil purificar la protena de inters dadas sus propiedades hidrofbicas caractersticas. Me parece interesante esta pregunta porque gracias a su simplicidad conceptual (la protena siempre va a pasar por el canal translocador) sta tcnica puede consituir una herramienta segura en los primeros pasos de dichos estudios. 2.- Cules son las primeras herramientas que deberemos usar en el estudio individualizado de cada uno de los compartiemntos de la ruta secretora? Las primeras herramientas que deberamos utilizar en stos casos, son aquellas que nos ayuden a delimitar el compartimento que vamos a estudiar dentro de la clula. Normalmente ser mediante marcaje (radiactivo, cromforo, ) de una o ms protenas definidoras de compartimento. Esto nos ayudar a delimitar nuestro objeto de estudio dentro de la clula, lo cul es fundamental en los primeros pasos de cualquier trabajo. Me parece interesante esta pregunta (tal vez sea demasiado obvia) porque es un concepto bsico que vamos a manejar en todos los compartimentos que vamos a estudiar a lo largo del curso y porque es bsico en el complejo estudio de los procesos celulares. 3.- Describe brevemente posibles modificaciones (sobreexpresin, silenciamiento de la protena, modificacin en la secuencia de aminocidos, etc) en los componentes celulares relacionados con el origen y mantenimiento de la forma del RE, que manifiesten dichas funciones, e indica el grado de importancia de cada protena en la funcin que realiza. Citoesquleto Tubulina la eliminacin de los microtbulos produce el desacople y un retraimiento tardo del RE . Importancia principal Actina la supresin de la sntesis de actina produca la desubicacin de los orgnulos dentro de la clula, en especial la del Aparato de Golgi

Protenas motoras

Dinena su silenciamiento provoca que el RE se colapsa, expandindose hacia el crtex. Importancia principal Kinesina su silenciamiento provoca que el RE se colpasa, comprimindose hacia el centrosoma. Importancia principal Protenas no motoras >> De unin a citoesqueleto Huntingtina su sileciamiento promueve una retraccin del RE por acortamiento de los microtbulos(que deriva finalmente hacia la muerte celular), por lo que sabemos que juega un papel fundamental en la estabilidad de los microtbulos. Importancia principal P22 su sobrexpresin provoca el arqueamiento del RE y los microtbulos, curvndose hacia la membrana nuclear (esto ocurre si la p22 est miristoilada). VAP su sla sobrexpresin no tiene ningn efecto, aunque su coexpresin con Nir-2 (ms formas cisternales) o Nir-3 (se arquea el RE) s >>Propias del RE Climp 63 la supresin de sta protena disminuye considerablemente la cantidad de formas cisternales en el RE, aunque no desaparecen . Importancia relativa Kinectina su silenciamiento tiene un efecto similar al de la kinesina, con un retraimiento del RE hacia el ncleo Tnl4/NogA in vitro se vi que, en ausencia de citoesqueleto, sta protena arqueaba y mantena la forma del RE su sobreexpresin aumentaba el nmero de formas tubulares y disminua el nmero de formas cisternales DP1 DEM Tnl4/NogA

Atlastina su supresin evita la posibilidad de fusin de membranas del RE. Muy relacionada con las formas geomtricas de las Three-Way Junctions Adems tambin se hicieron las mismas observaciones que para Tnl4/NogA Esta pregunta me parece interesante ya que, aunque simple, puede ser una un guin muy til para asentar las bases tericas de los factores morfognicos del RE, su importancia relativa, as como para adquirir una buena visin de conjunto, muy necesaria en las consideraciones tericas sobre la clula.