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Glose de SABOURAUD

DOMAINE DUTILISATION La glose de Sabouraud constitue un milieu classique pour les culture, isolement et identification des levures et des moisissures. Elle est recommande essentiellement pour lisolement des moisissures dans les prlvements peu chargs en bactries, les contrles de strilit des produits pharmaceutiques, cosmtiques ou alimentaires, la culture des moisissures en vue de raliser leur identification. Dans le cas de prlvements fortement contamins, il est prfrable dutiliser la glose de Sabouraud au chloramphnicol. La glose de Sabouraud peut servir de base la prparation de milieux spciaux par addition dantibiotiques (chloramphnicol, gentamicine), de sang ou de vitamines. Lajout de chlorure de triphnylttrazolium raison de 100 mg par litre en fait un milieu de diffrenciation pour les Candida.

HISTORIQUE Le milieu a t recommand par Sabouraud pour la culture des champignons pathognes associs aux infections cutanes.

PRINCIPES La glose de Sabouraud est un milieu pepton et glucos permettant la croissance des levures et des moisissures.

PREPARATION - Mettre en suspension 61,4 g de milieu dshydrat (BK025) dans 1 litre deau distille ou dminralise. - Porter lentement le milieu bullition sous agitation constante et ly maintenir durant le temps ncessaire sa dissolution. - Rpartir en tubes ou en flacons. - Striliser lautoclave 121C pendant 15 minutes. NOTA : Tout chauffage excessif du milieu conduit la dnaturation de lagar en pH acide et par consquent lobtention dun milieu trop mou.

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Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B.P. 10245 F60002 Beauvais Cedex France Tl : + 33 (0)3 44 14 33 33 Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 www.biokar-diagnostics.fr

MODE DEMPLOI - Si le milieu est prpar lavance partir du milieu dshydrat, faire fondre la glose pendant le minimum de temps ncessaire sa reliqufaction totale. - Refroidir et maintenir le milieu 44-47C. - Ajouter strilement (si ncessaire) 1 mL de supplment slectif reconstitu : Gentamicine 25 mg (BS009) ou/et Chloramphnicol 50 mg (BS021) 100 mL de milieu. - Bien homogniser l'ensemble. - Couler en botes de Petri striles. - Laisser solidifier sur une surface froide. - Faire scher les botes ltuve, couvercle entrouvert. - Transfrer lchantillon analyser sur le milieu. - Etaler linoculum en surface laide dun taleur strile. - Incuber 25-30C de 3 5 jours.

LECTURE / INTERPRETATION Les botes doivent tre examines chaque semaine, pendant plusieurs semaines avant de conclure l'absence de cultures. Dnombrer sparment les levures et les moisissures. Faire les observations microscopiques et les tests spcifiques appropris pour confirmer les rsultats.

FORMULE - TYPE du milieu de base (pouvant tre ajuste de faon obtenir des performances optimales) Pour 1 litre de milieu : - Polypeptone ...................................................................................10,0 g - Glucose anhydre ............................................................................36,4 g - Agar agar bactriologique ..............................................................15,0 g pH du milieu prt--lemploi 25C : 5,7 0,2.

CONTRLE QUALITE - Milieu dshydrat (base sans supplments) : poudre blanc crme, fluide et homogne. - Milieu prpar : glose ambre clair. - Rponse culturale typique aprs 72 heures dincubation 25-30C : Microorganismes Saccharomyces cerevisiae Candida albicans Candida kefyr Aspergillus brasiliensis ATCC 9763 ATCC 10231 ATCC 2512 DSM 1988 Croissance (Rapport de productivit : PR) PR 70% PR 70% PR 70% PR 70%

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STOCKAGE / CONSERVATION Milieu de base dshydrat : 2-30C. - La date de premption est mentionne sur ltiquette. - Milieu de base prpar en flacons ou en tubes : 6 mois 2-8C ( titre indicatif). - Milieu complet prpar en botes, avec supplment(s) : 1 mois 2-8C ( titre indicatif). Supplment TTC 50 mg, Supplment slectif Gentamicine 25 mg, Supplment slectif Chloramphnicol 50 mg : - Stocker entre 2 et 8C, labri de la lumire. - Les dates de premption sont mentionnes sur les tiquettes.

PRESENTATION Milieu de base dshydrat (sans supplment) : - Flacon de 500 g Supplment TTC 50 mg : - Coffret de 10 flacons Supplment slectif Gentamicine 25 mg : - Coffret de 10 flacons Supplment slectif Chloramphnicol 50 mg : - Coffret de 10 flacons

Code

BK025HA BS02708 BS00908 BS02108

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
SABOURAUD, R.. 1900. Les teignes, Masson et Cie, Paris, 553. AJELLO, L.. 1957. Cultural methods for human pathogenic Fungi. Journal of Chronic Diseases, 5 : 545. PAGANO, J., LEVIN, J.D., and TREJO, W.. 1957/1958. Diagnostic medium for differentiation of species of Candida. Antibiotics Annual, 5 : 137-143. XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la prparation et la production des milieux de culture. Partie 2 : Guide gnral pour les essais de performance des milieux de culture. Pharmacope Europenne 5.6. 01/2007:20613. 2.6.13. Contrle microbiologique des produits non striles : Recherche de microorganismes spcifis. Solution et milieux de culture recommands, 4679-4682. United States Pharmacopeia 30. 2007. Microbiological Tests / Microbial Limit Tests. Buffer Solution and Media. 84-86. Microbiological Tests / Microbiological Examination. Recommended Solutions and Culture Media, 96-97. United States Pharmacopeia 30. 2007. Dietary Supplements / Microbial Enumeration Tests. Media. 713. Dietary Supplements / Microbiological Procedures. Buffer and Media, 716-718. Pharmacope Europenne 6.0. 01/2008:20613. 2.6.13. Contrle microbiologique des produits non striles : Recherche de microorganismes spcifis. Solution et milieux de culture recommands. NF ISO 16212 (T 75-608). Dcembre 2008. Cosmtiques. Microbiologie. Dnombrement des levures et des moisissures. NF EN ISO 18416 (T 75-607). Septembre 2009. Cosmtiques. Microbiologie. Dtection de Candida albicans.

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PHOTO SUPPORT Rfrence produit : BK025HA Utilisation : Culture, isolement et identification des levures et des moisissures

Trichophyton spp. Glose de SABOURAUD Rf : BK025HA Incubation : 72 heures / 25C Caractristiques : bonne croissance avec invasion aprs une incubation prolonge.

Les mentions portes sur ltiquette sont prdominantes sur les formules ou les instructions dcrites dans ce document. Les informations et les spcifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2010-01-12. Elles sont susceptibles dtre modifies tout moment, sans pravis. Code document : BK025/F/2003-01 : 7.

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