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Medicina, Ribeiro Preto, 39 (1): 89-100, jan./mar.

2006

X SIMPSIO BRASILEIRO DE FISIOLOGIA CARDIOVASCULAR

Captulo

IX

OS NCLEOS VASOMOTORES DO BULBO E A REGULAO CARDIOVASCULAR: NOVAS EVIDNCIAS E NOVAS QUESTES


VENTROLATERAL MEDULLA AND THE CARDIOVASCULAR CONTROL: NEW EVIDENCE NEW DOUBTS

Sergio L Cravo1, Daniel A Rosa2, Fernanda Kalassa2, Willian S Korim2, Julia M Hinrichs3, Marcos L Ferreira-Neto2, Luciana R Di Mnaco2, Gustavo R Pedrino2
Docente. 2Alunos da Ps-graduao. 3Aluna Bolsista de Iniciao Cientfica. Departamento de Fisiologia. Escola Paulista de Medicina UNIFESP CORRESPONDNCIA: Dr. Sergio L. Cravo Disciplina de Fisiologia Cardiovascular. Departamento de Fisiologia. Escola Paulista de Medicina UNIFESP. Rua Botucatu, 862 CEP 04023-062 So Paulo SP Brasil - FONE: 5576-4536 - FAX: 5573-7820 Email: sldcravo@fcr.epm.br
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Cravo SL, Rosa DA, Kalassa F, Korim WS, Hinrichs JM, Ferreira-Neto ML, Di Mnaco LR, Pedrino GR. Os ncleos vasomotores do bulbo e a regulao cardiovascular: novas evidncias e novas questes. Medicina (Ribeiro Preto) 2006; 39 (1): 89-100.

RESUMO: H mais de 30 anos foi proposto um modelo para explicar como o sistema nervoso central promove a regulao do sistema cardiovascular, onde os ncleos vasomotores do bulbo seriam as principais estruturas envolvidas no controle do reflexo cardiovascular. Segundo este modelo, o ncleo do trato solitrio (NTS) o primeiro ncleo a integrar as informaes cardiovasculares vindas dos baroceptores e tambm parece integrar vias descendentes provenientes de ncleos superiores como o hipotlamo, importantes para as reaes de alerta e defesa. Do NTS saem projees excitatrias para a regio caudoventrolateral (CVL) do bulbo, a qual inibe a regio rostroventrolateral (RVL). Esta ltima regio constitui a principal fonte de eferncias excitatrias para os neurnios simpticos pr-ganglionares (SPN), sendo responsvel pelo tonus simptico para o corao e vasos. Projees importantes do CVL para estruturas dienceflicas (ncleo preptico mediano, ncleo paraventricular do hipotlamo e ncleo supraptico) tambm esto envolvidas no controle da composio e/ou volume do compartimento extracelular. A rea depressora gigantocelular (GiDA) constitui outro possvel centro vasomotor envolvido nos ajustes de fluxo sangneo por meio de projees diretas para o SPN. No entanto, o meio pelo qual a GiDA exerce seu efeito vasodepressor ainda desconhecido. Nos ltimos 10 anos, nosso laboratrio tem se dedicado a deslindar as vias e mecanismos neurais associados regulao do fluxo sangneo visceral e muscular. Resultados obtidos ao longo destes estudos resultaram em evidncias que so incompatveis com o modelo proposto. Descritores: Presso Arterial. NTS. RVL. CVL.

1- INTRODUO A perfuso do leito vascular capilar constitui um elemento essencial da homeostasia. atravs do fluxo sangneo que percorre este territrio e das tro-

cas que a se realizam, que o interstcio pode ser renovado, mantendo-se nas condies ideais para a homeostasia celular. A perfuso do leito capilar depende de nveis adequados de presso sangnea arterial, uma vez que esta constitui a fora motriz que 89

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propulsiona o sangue at o territrio capilar. H mais de um sculo, sabe-se que o tronco cerebral e, mais especificamente, o bulbo (ou medula oblongata) constitui o segmento crtico para a regulao neural da presso arterial. No entanto, foi s a partir da dcada de 70, que um avano significativo nesta rea ocorreu. Em uma srie de trabalhos basilares, Guertzenstein e colaboradores1/4 demonstraram que regies restritas do tegmento ventrolateral do bulbo continham neurnios cuja atividade era fundamental para a manuteno do tono vasomotor e da presso arterial. Literalmente, milhares de artigos cientficos publicados desde ento, confirmaram e expandiram conceitos firma-

dos pelas observaes originais de Guertzenstein e colaboradores, o que a maior prova da qualidade excepcional destes estudos. A Figura 1 apresenta uma representao esquemtica dos principais ncleos vasomotores do bulbo e as suas relaes com outras reas do sistema nervoso central envolvidas na regulao cardiovascular. De acordo com este modelo: 1) o tono simptico para o corao, vasos de resistncia e medula adrenal se origina de neurnios simpticos pr-ganglionares (SPN) localizados na coluna intermediolateral (IML) nos segmentos torcicos da medula espinal;

Figura 1: Representao esquemtica de um corte sagital do encfalo com os principais ncleos vasomotores presentes no tegmento ventrolateral do bulbo e suas conexes com outros ncleos autonmicos do sistema nervoso central.

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2) os SPN so tonicamente excitados por projees diretas de um grupo restrito de neurnios localizados na poro rostroventrolateral do bulbo (RVL); 3) os neurnios do RVL so controlados por projees inibitrias (tnicas e reflexas) de neurnios situados na poro caudoventrolateral do bulbo (CVL); 4) os reflexos baroceptores utilizam a via inibitria CVL-RVL para modulao da atividade simptica do corao, vasos e medula adrenal: a estimulao dos baroceptores arteriais excita neurnios de projeo no ncleo do trato solitrio (NTS), que excitam neurnios no CVL, aumentando a sua inibio sobre os neurnios do RVL, o que resulta em diminuio do tono simptico para o corao e vasos; 5) alm de suas projees inibitrias ao RVL, o CVL contm neurnios distintos que se projetam para ncleos dienceflicos como o ncleo paraventricular do hipotlamo (PVH) e ncleo supra-ptico, modulando a secreo de vasopressina; 6) neurnios localizados na poro mais caudal do tegmento bulbar constituem a rea pressora caudal (CPA). Essa regio contribue para a gerao do tono vasomotor e manuteno da presso arterial, entretanto as vias pelas quais a CPA exerce o seu papel ainda no so conhecidas. Trata-se, claro, de uma descrio sumria, que visa apenas a delinear as principais concluses derivadas destes 30 anos de pesquisas desde os trabalhos pioneiros de Guertzenstein e colaboradores (para uma reviso detalhada destes conceitos ver Colombari et al., 20015. Nos ltimos 10 anos, nosso laboratrio tem se dedicado a deslindar as vias e mecanismos neurais associados regulao do fluxo sangneo visceral e muscular. Resultados obtidos ao longo destes estudos resultaram em evidncias que so incompatveis com o modelo proposto. Neste artigo pretendemos descrever brevemente estes resultados, indicando as sugestes que eles contm e indicando os pontos em que eles discordam de nossa viso atual. 2- A VASODILATAO MUSCULAR DAS REAES DE ALERTA E A REGULAO CARDIOVASCULAR As reaes de alerta e defesa constituem uma ampla classe de comportamentos exibidos por numerosas espcies, inclusive a humana. Embora quase que exclusivamente referidos como os comportamentos exibidos por um indivduo frente a estmulos potenci-

almente lesivos ou um agressor mais poderoso, os comportamentos defensivos provavelmente constituem um contnuo, incluindo desde o simples abanar de uma orelha ou cauda para afastar um inseto, a retrao de um membro (comportamento de flexo) ou a cabea de um agente nocivo, a esquiva ou fuga, manifestaes verbais de desculpa, de justificativas, etc.6 Os comportamentos de alerta e defesa englobam diversos ajustes motores e neurovegetativos com a inteno de preparar e dar suporte metablico para situaes de luta ou fuga7,8. Os ajustes cardiovasculares incluem: hipertenso, taquicardia, vasoconstrio visceral e vasodilatao muscular. Uma vez que estes comportamentos geralmente se acompanham de intensa ativao motora, a vasodilatao muscular tem sido admitida como um de seus componentes principais ao fornecer suporte metablico. Embora s possam ser observadas plenamente em animais despertos e expostos a estmulos naturais, os ajustes vegetativos das reaes de defesa podem ser provocados em animais anestesiados pela estimulao eltrica ou qumica do sistema nervoso central. A estimulao eltrica de regies hipotalmicas ao redor do fornix, por exemplo, desencadeia reaes caracterizadas por um aumento transitrio da presso arterial, taquicardia, vasoconstrio visceral e intensa vasodilatao muscular esqueltica7/10, por esta razo esta rea tem sido denominada rea de defesa hipotalmica (HDA). Utilizando bloqueios farmacolgicos seletivos, em trabalhos anteriores de nosso laboratrio9,10, demonstramos que a vasodilatao muscular provocada por estimulao da HDA em ratos anestesiados parece resultar de trs mecanismos distintos: 1) reduo do tnus vasoconstrictor simptico, 2) liberao de catecolaminas pelas clulas cromafins localizadas na medula da adrenal e 3) ativao de um sistema envolvendo a liberao de xido ntrico e fatores nitrosilados11. Em um estudo posterior, demonstramos que o bloqueio de sinapses glutamatrgicas no RVL capaz de bloquear completamente esta vasodilatao9. Em conjunto, estes resultados indicam que a vasodilatao muscular das reaes de alerta parece depender da excitao glutamatrgica de neurnios no RVL e, a partir da, ativao dos trs mecanismos efetores j citados. Em uma continuidade a estes estudos buscamos identificar as possveis vias e estruturas envolvidas na ativao do RVL durante as reaes de alerta9. Estudos anteriores demonstram que alm de suas 91

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j bem conhecidas aes nas vias reflexas dos baro e quimioceptores, o NTS parece participar como stio de integrao de respostas cardiovasculares durante as reaes de alerta e defesa12,13. A estimulao qumica do NTS provoca vasodilatao muscular que parece envolver a reduo do tono vasoconstrictor simptico, a liberao de catecolaminas pela adrenal e a liberao de NO de acordo com o subtipo de receptor purinrgico estimulado14,15. O NTS apresenta projees diretas para o RVL, cujo significado funcional permanece ainda em grande parte desconhecido. No NTS, o ATP e a adenosina derivada do catabolismo extracelular atuam como importantes neurotransmissores / neuromoduladores na regulao do fluxo sangneo regional muscular e visceral13,16,17. Estudos

autoradiogrficos18/21 demonstram alta densidade de receptores P1 (adenosina) e P2 (ATP) nos centros cardiovasculares e respiratrios do NTS. Estes estudos anteriores demonstraram que a adenosina rapidamente liberada no NTS durante a estimulao eltrica da HDA12, participando na ativao dos subtipos de receptores A119,22. Estes estudos nos levaram a investigar a hiptese de que as reaes de alerta possam envolver a ativao de uma via HDA-NTS-RVL e que a neurotransmisso purinrgica do ATP possa participar destas reaes. Como podemos observar na Figura 2, em ratos anestesiados, a microinjeo no NTS de agonistas purinrgicos do subtipo P2x ,meATP (100pmol/50nl) desencadeou hipotenso, bradicardia e vasodilatao

A
25
Control Ps Control Ps Revertid
250 200

B
eeHIPO Suramin bilat NTS

PAP mmH
0 3

150

CVMP (%Basal)

100 50 0 0 20 40 60 80 100

FSMP ml/min

-50

0 25

Tempo (s)

PAM mmH
0 60
250 200 150

C
  MeATP NTS Suramin bilat NTS Revertido

FC bpm

CVMP (%Basal)
30s eehipo eehipo -MeATP -MeATP -MeATP

100 50 0 -50 0 20 40 60 80 100

20

Tempo (s)
Figura 02: (A) Efeitos da estimulao eltrica do hipotlamo (eehipo) e da microinjeo de ba-meATP (100pmol/50nl) no NTS intermdio na presso arterial pulstil (PAP) , presso arterial mdia (PAM), freqncia cardaca (FC) e fluxo sangneo para os membros posteriores (FSMP) antes e aps o bloqueio bilateral no NTS com Suramin (100pmol/50nl) em ratos anestesiados. (B) Curvas de condutncia vascular dos membros posteriores antes (quadrados) e aps (crculos) o bloqueio bilateral com Suramin no NTS, durante a estimulao eltrica do hipotlamo expresso como % do valor basal. (C) Curvas de condutncia vascular dos membros posteriores antes (quadrados), aps (crculos) e aps a reverso do bloqueio (tringulos) bilateral com Suramin no NTS, durante a microinjeo de ba-meATP no NTS expresso como % do valor basal

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nos membros posteriores, indicando que a neurotransmisso purinrgica capaz de promover vasodilatao muscular. Nestes animais, a estimulao da HDA provoca hipertenso, bradicardia e vasodilatao muscular. A microinjeo bilateral de suramin (100pmol/ 50nl), um antagonista P2x, no NTS capaz de reduzir drasticamente a vasodilatao muscular de membros posteriores, sem afetar as respostas pressoras ou taquicrdicas induzidas pela estimulao eltrica da HDA. Esta dose de suramin capaz de bloquear completamente as respostas cardiovasculares provocadas pela microinjeo de seu agonista ,meATP., indicando que a dose de suramin utilizada eficiente no bloqueio destes receptores. O bloqueio do suramim reversvel, i.e., aps 60 a 80 min, a vasodilatao muscular em resposta estimulao da HDA e microinjeo do agonista so restabelecidas. Os nveis basais de presso arterial, freqncia cardaca e fluxo sangneo para os membros posteriores no so modificados pelo bloqueio bilateral dos receptores P2x. Estes resultados indicam que a reduo da vasodilatao pelo suramim no NTS no um efeito lesivo ou inespecfico ou devido a modificaes nos nveis de perfuso dos tecidos. Para determinarmos a relao entre a ativao dos receptores P2x localizados nos neurnios do NTS com o ncleo RVL durante os ajustes hemodinmicos, microinjetamos ,meATP (100pmol/50nl) no NTS. Em seguida, realizamos o bloqueio bilateral de receptores glutamatrgicos no RVL atravs da microinjeo bilateral de cido quinurnico (5nmol/50nl). Passados vinte minutos microinjetamos novamente ,meATP no NTS. A vasodilatao dos membros posteriores foi totalmente abolida, assim como a hipotenso e a bradicardia. Passados 90 minutos de bloqueio, todos os ajustes retornam s suas condies normais, demonstrando uma reverso desse bloqueio. Os valores basais de presso arterial, freqncia cardaca e fluxo sangneo para as patas posteriores permaneceram inalterados aps o bloqueio no RVL. Em conjunto, estes resultados so compatveis com a hiptese de que s respostas de alerta provocadas por estimulao hipotalmica envolvem a ativao de uma via purinrgica no NTS, e a partir da ativao desse ncleo, o RVL ativado por vias glutamatrgicas, mobilizando vias neurais e mecanismos capazes de promover intensa vasodilatao muscular.

3- A REA GIGANTOCELULAR DEPRESSORA (GIDA) E A GERAO DO TONO VASOMOTOR SIMPTICO Em um estudo de 1994, Aicher et al.23 demonstraram que a estimulao qumica por microinjees de glutamato em uma rea localizada na regio ventral e medial do bulbo provocava hipotenso e reduo da atividade simptica, caracterizando esta regio como uma regio vasodepressora. Por esta razo, esta regio foi ento denominada de rea Depressora Gigantocelular (GiDA)*1. Mais significante, todavia, era a observao de que a microinjeo do agente neuroexcitatrio/neurotxico cido canico nesta regio provocava hipertenso arterial acentuada de origem neurognica, ou seja, com aumento da atividade simptica. Estes resultados sugeriam que a GiDA se constitua em uma regio com atividade simpatoinibitria tnica, i.e., a atividade dos neurnios ali presentes era fundamental para inibir a gerao do tono vasomotor. Estes resultados no eram compatveis com o modelo de gerao do tono simptico at ento adotado e descrito anteriormente neste trabalho. Ainda utilizando tcnicas de microinjeo de aminocidos excitatrios e analisando os efeitos reflexos e tnicos sobre a atividade simptica e a presso arterial, Aicher e Reis, 199724 demonstraram que a GiDA era funcionalmente distinta de outras regies do tegmento medular cujo envolvimento com a regulao cardiovascular j era bem conhecido como, por exemplo, o CVL ou os ncleos da rafe. Combinando tcnicas de rastreamento neuronal retrgrado e antergrado e microscopia eletrnica, estes autores buscaram estabelecer as possveis vias pelas quais a GiDA exercia os seus efeitos simpatoinibitrios. Os resultados obtidos demonstraram que a GiDA mantm conexes com outros ncleos autonmicos da medula oblonga como a regio ventral do ncleo reticular ventral, os ncleos reticulares parvocelular, plido e obscuro e o ncleo do trato solitrio (subncleos comissural e medial), alm destes locais, algumas poucas fibras marcadas foram observadas no RVL. Todavia, as suas principais eferncias parecem se dirigir para a medula espinal e, mais especificamente, para os segmentos torcicos da medula espinal, na regio da coluna intermediolateral. Combinando a marcao antergrada de fibras provenien-

* De maneira a evitar a proliferao de abreviaturas e sinnimos desnecessrios, nesta reviso optamos por adotar a abreviao GiDA, originalmente proposta pelos autores.

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tes da GiDA com a identificao retrgrada de neurnios simpticos pr-ganglionares, Aicher et al. 199525 demonstraram que a GiDA mantm conexes sinpticas diretas inibitrias com neurnios simpticos prganglionares que inervam clulas cromafins da medula da adrenal. No entanto, essas evidncias anatmicas no suportam, de modo inequvoco, a funo vasodepressora/simpatoinibitria da GiDA. Estes achados anatmicos eram compatveis com os achados funcionais que indicavam um papel inibitrio da GiDA sobre a gerao da atividade simptica. Todavia, inibio destes neurnios, provocaria apenas reduo da secreo de catecolaminas circulantes, um efeito que no poderia explicar completamente a significativa hipotenso resultante da estimulao da GiDA. Outros resultados funcionais sobre a atividade tnica da GiDA permanecem em grande parte desconhecidos. intrigante a observao, por exemplo, que microinjees unilaterais de muscimol (agonista de receptores GABArgico do subtipo A) provoca hipotenso, ao passo que microinjees bilaterais provocam hipertenso26. Outra evidncia interessante que microinjees de clonidina (agonista de adrenoceptores do subtipo 2 na GiDA produz bradicardia e hipotenso que persiste por at 2 horas, sendo estes efeitos similares aos da clonidina no RVL27. Vrios estudos tm demonstrado que o efeito antihipertensivo da clonidina e outros adrenoceptores 2 so mediados principalmente ou somente por meio de regies medulares especficas, incluindo o NTS, a formao reticular gigantocelular, e particularmente o RVL28,29,30. No entanto, os resultados demonstrados por Aicher e Drake, 199927, indicam que a clonidina possui o mesmo efeito em duas regies funcionalmente distintas do bulbo: a GiDA, que uma regio simpatoinibitria e vasodepressora tonicamente ativa, e o RVL, que uma regio simpatoexcitatria e vasopressora tonicamente ativa31,32. A partir destas evidncias, temos desenvolvido uma linha de pesquisa que visa colaborar com a caracterizao anatmica e funcional desta possvel nova regio bulbar envolvida na regulao cardiovascular. Dentre os estudos anatmicos realizados em nosso laboratrio, focalizamos, com mais ateno, a distribuio das eferncias da GiDA nos ncleos autonmicos da regio torcica da medula espinal. Para isso, foram realizados depsitos iontoforticos do traador antergrado BDA na GiDA. Aps o tempo de sobrevida necessrio para o transporte do traador at a medula espinal, os animais foram sacrificados e os cortes da regio torcica da medula espinal foram 94

submetidos imunoistoqumica para acetilcolina transferase (ChAT). Os neurnios simpticos pr-ganglionares so os ltimos neurnios das vias do sistema nervoso central envolvidos com a regulao da funo autonmica. Todos estes neurnios so colinrgicos e, portanto, contm ChAT, sendo assim, a imunoistoqumica para esta enzima serve como marcador para estes neurnios. Neste estudo, observamos que as projees da GiDA descendem pelo funculo lateral ipsolateral exclusivamente. A maioria dessas fibras descendentes se projeta e arboriza-se na regio da IML. No entanto, um nmero considervel de fibras cruza a linha mdia aps entrar na substncia cinzenta e arborizase por todo o seu trajeto. Como conseqncia desta intensa arborizao observa-se botes terminais no s na IML ipsolateral, como tambm na IML contralateral, e em outros ncleos autonmicos da medula, como a rea autonmica central e o ncleo intercalado. Nos ncleos autonmicos citados acima podemos observar aposies entre as eferncias da GiDA e os neurnios simpticos marcados com ChAT. A possibilidade das eferncias da GiDA contatarem um grande nmero de SPNs ao longo de todo o eixo rostro caudal da regio torcica da medula espinal, alm dos SPNs que originam a inervao simptica da adrenal, juntamente com o efeito fisiolgico demonstrado por Aicher et al., 199423, nos indica que esta rea bulbar provavelmente exerce uma influncia mais ampla e funcionalmente distinta na regulao autonmica do que a sabida at o momento. A partir das observaes citadas acima, procuramos outras evidncias anatmicas que justifiquem o efeito simpatoinibitrio da GiDA. A existncia de conexes da GiDA com SPNs que originam a inervao a outros alvos simpticos como o corao e a vasculatura visceral e muscular tem sido objeto de nosso trabalho. Inicialmente foram feitos depsitos de Amino Dextrana Biotinilada (BDA) na GiDA (Figura 3c) e microinjees de Fluorogold no gnglio celaco. Na anlise da regio torcica da medula espinal foram observadas aposies na IML (Figura 3b). Frequentemente, foram visualizados fibras e neurnios marcados no ncleo intercalado, no entanto sem aposies. Estas aposies ocorrem em ramificaes proximais, indicando que a GiDA exerce um forte efeito inibitrio sobres estes neurnios, j que, sinapses em locais proximais dos neurnios geralmente causam uma inibio absoluta do sinal33.

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Este conjunto de informaes nos permite supor que a GiDA inerva SPNs que do origem a inervao simptica dos vasos mesentricos e levando em considerao a funo desta regio e os resultados obtidos, razovel supor que essas sinapses so provavelmente inibitrias. No entanto, a natureza qumica e fisiolgica destas sinapses ainda precisam ser demonstradas, assim como, a conexo da GiDA com neurnios simpticos pr-ganglionares que originam a inervao simptica para outros territrios. As eferncias da GiDA provavelmente contm os neurotransmissores que j foram localizados na formao reticular gigantocelular, como GABA 34 , glicina34,35 e serotonina36. Destes neurotransmissores, o candidato mais provvel o GABA, j que neurnios reticulo-espinais da rea gigantocelular contm GABA 37 e SPNs recebem contatos sinpticos GABArgicos38. Dentre os primeiros estudos funcionais da GiDA realizados em nosso laboratrio buscamos caracterizar os efeitos da estimulao qumica da GiDA sobre a condutncia vascular nos territrios muscular e visceral, bem como investigar os seus principais mecanismos envolvidos. Neste estudo, pode-se observar que microinjees de L-glutamato na GiDA produz reduo da presso arterial mdia (PAM) e FC; aumentos no fluxo sangneo de membros posteriores e fluxo sangneo renal (FSR), alm de vasodilatao dos territrios vasculares do trem posterior e renal. Aps a administrao de prazosin (antagonista de adrenoceptores 2) observamos que as respostas de PAM e FC e a vasodilatao nos territrios vasculares do trem posterior e renal induzidas por microinjees de L-glutamato na GiDA foram significantemente reduzidas. Em conjunto, estes resultados sugerem que a hipotenso, bradicardia e vasodilatao visceral e muscular por estimulao da GiDA so decorrentes da reduo do tono simptico vasoconstrictor. Em outros experimentos, analisamos o papel do RVL nas respostas cardiovasculares induzidas por inativao da GiDA com cido canico (KA). Nestes estudos, observamos que microinjees bilaterais de KA na GiDA produziram acentuada hipertenso arterial com hiperatividade simptica. Nesta condio, a inativao qumica do RVL com muscimol no reverte a hiperatividade simptica induzida por KA na GiDA, embora os valores de presso arterial apresentem-se reduzidos. Alm disso, observamos em outro grupo de animais que se a inativao qumica do RVL com muscimol precede as microinjees bilaterais de KA

na GiDA, os efeitos hipertensores e de hiperatividade simptica induzidos por KA ainda assim ocorrem (Figura 3a). Estes resultados sugerem que os efeitos da GiDA sobre o sistema cardiovascular independem da integridade funcional dos neurnios do RVL39. 4- PAPEL DOS NEURONIOS A1 NA REGULAO DO VOLUME EXTRACELULAR Imediatamente caudal ao RVL situa-se a regio do CVL. Embora a descrio original dessa regio e suas principais caractersticas tenha sido feita por Guertzenstein e colaboradores simultaneamente descrio do RVL, surpreendente como o desenvolvimento dos conhecimentos sobre o CVL tem se desenvolvido to lentamente quando comparado ao RVL. Talvez uma das principais causas desta discrepncia deva-se ao fato que, ao contrrio do RVL, o CVL parece ser uma rea funcionalmente heterognea, contendo diversos sistemas anatmica e funcionalmente muito distintos ( por esta razo que no caso do CVL prefervel utilizar o termo regio CVL e no ncleo CVL) . O CVL parece conter pelo menos dois circuitos que podem ser distintos quanto a sua natureza: um envolvido com a regulao do tono vasomotor simptico e outro que parece envolvido com a regulao do volume extracelular. Como descrito na figura 01, neurnios do CVL projetam-se para o RVL, onde exercem modulao inibitria (provavelmente GABArgica) sobre os neurnios do RVL que se projetam para a IML. Estudos neuroanatmicos indicam que, alm de suas projees para o RVL, neurnios do CVL projetam-se para reas hipotalmicas como o ncleo paraventricular do hipotlamo (PVH) e ncleo supraptico (SON). Estes ncleos so particularmente importantes por conterem neurnios magnocelulares responsveis pela sntese, transporte e liberao de vasopressina por terminais axonais na neurohipfise40,41,42. A liberao de vasopressina constitui um dos vrios mecanismos que contribuem para manter a homestase cardiovascular e hidromineral, sendo importante mecanismo para a reabsoro de gua e aumento da resistncia vascular perifrica. O CVL tambm envia densa projeo para a regio anteroventral do terceiro ventrculo (AV3V), tendo particular importncia o ncleo pr ptico mediano (MePO)40,41,42. Este alvo um elemento central na regulao do equilbrio hidroeletroltico. 95

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Figura 3: (A) Registro da presso arterial pulstil (PAP), atividade simptica do nervo esplncnico (SNA) e integral da atividade simptica (SNA) em ratos anestesiados durante o perodo controle (CTR), aps inativao bilateral do RVL com muscimol (MUSC RVL), 5 (ka GiDA) e 30 minutos aps microinjees bilaterais de cido canico (1nmol/50nL) na GiDA. (B) desenho semiesquemtico de um corte coronal do bulbo mostrando o local de depsito de BDA na GiDA (hachurado- lado direito da figura). No lado esquerdo pode-se identificar as seguintes estruturas anatmicas: NTS (ncleo do trato solitrio); Sp5I (ncleo espinal do nervo trigmeo); 12 (ncleo hipoglossal); Gi (ncleo reticular gigantocelular); GiV (ncleo reticular gigantocelular ventral); 12n (raiz do nervo hipoglosso) e Py ( trato piramidal). (C) Fotomicrografia de campo claro de corte transversal e desenho esquemtico da regio torcica da medula espinal. No desenho esquemtico nota-se a localizao da IML em negro dentro do detalhe. Na fotomicrografia pode-se observar SPNs que do origem a inervao do gnglio celaco marcados retrogradamente com Fluorogold (asteriscos brancos). Nestes neurnios podemos observar locais de possveis aposies (setas pretas) entre fibras marcadas com BDA (setas brancas) e os SPN marcado com Fluorogold.

Estas eferncias do CVL dirigidas a diversos alvos dienceflicos representam as vias envolvidas na regulao do volume extracelular. As vias ascendentes do CVL originam-se predominantemente de neurnios noradrenrgicos dos grupamentos A1 localizados nesta regio40,41,42. importante ressaltar que os neurnios A1 no se projetam ao RVL e, portanto, no esto primordialmente envolvidos na regulao do tono simptico. Sabe-se que as informaes viscerais provenientes de receptores perifricos (como barorreceptores, receptores cardiopulmonares, quimiorreceptores e osmorreceptores perifricos localizados na veia por96

ta) enviam projees para o NTS. A partir deste, as informaes podem alcanar diferentes destinos no sistema nervoso central, incluindo-se o tegmento ventrolateral do bulbo (RVL e CVL). Nos ltimos anos, trabalhos de nosso laboratrio43/46 tm se dedicado a estudar as aferncias, reas de integrao bulbar e eferncias das respostas hemodinmicas provocadas por alteraes agudas do volume e concentrao do fluido extracelular. Entre os diversos modelos experimentais empregados, temos utilizado a infuso de pequenos volumes (0,5 ml) de salina hipertnica (NaCl 3 M). Em estudos anteriores demonstramos que, em

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ratos anestesiados, a infuso de NaCl 3 M provoca hipertenso transitria e aumentos mantidos do FSR e da condutncia vascular renal (CVR)43/46. Admite-se que o aumento da CVR, i.e., a vasodilatao do territrio renal, constitua um dos mecanismos essenciais para promover a excreo da carga de sdio infundida e o restabelecimento das condies normais de volemia e tonicidade. Os resultados obtidos indicam que a denervao sinoartica abole a vasodilatao renal induzida pela infuso de salina hipertnica, enquanto que a vagotomia bilateral (bloqueando as aferncias de receptores cardiopulmonares) no modifica essa resposta46. Estes dados indicam que so os barorreceptores arteriais, e no os receptores cardiopulmonares, responsveis pela origem da vasodilatao renal. Alm disso, a vasodilatao renal pode tambm ser observada aps desnervao renal, o que indica que ela pode ser devida a fatores humorais. Dentre os possveis peptdeos vasoativos envolvidos com

esta resposta, o papel do petdeo natriurtico atrial (ANP) tem sido investigado. O ANP secretado pela infuso de salina hipertnica, e sua secreo modulada por aferentes dos baroceptores47. A partir destes resultados buscamos testar a hiptese que a infuso de salina hipertnica provoca a ativao de aferentes dos baroceptores que, atravs da via NTS-CVL, ativariam alvos dienceflicos como o MePO (ncleo integrante da regio AV3V), ativando os mecanismos que resultariam em vasodilatao renal. Como mencionado anteriormente, a injeo endovenosa de salina hipertnica promove aumento transitrio da presso arterial e aumentos mantidos de FSR e da CVR. Entretanto, ao realizarmos leso eletroltica da regio AV3V, os aumentos de presso, fluxo e condutncia so abolidos45. Estes resultados evidenciam que a regio AV3V participa na integrao das respostas cardiovasculares salina hipertnica (Figura 4a).

Figura 4: Efeitos da leso eletroltica da regio AV3V (A) e do bloqueio dos adrenoceptores 1 localizado no MePO (microinjeo do antagonista 1 prazosin; B) sobre as variaes da presso arterial mdia (PAM) e da condutncia vascular renal (CVR) induzidas pela sobrecarga de sdio (NaCl 3M) em ratos anestesiados.

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Estudos neuroanatmicos e imunoistoqumicos demonstram que a regio AV3V recebe importantes projees noradrenrgicas do CVL. Desta forma investigamos o papel dos receptores adrenrgicos do subtipo a1 nas respostas cardiovasculares induzidas aps a sobrecarga de sdio. Os resultados obtidos demonstram que a microinjeo prvia de prazosin (antagonista a1) reduz o FSR e abole a vasodilatao renal observada aps salina hipertnica (Figura 4b). Se a microinjeo de prazosin realizada mesmo aps o pleno desenvolvimento da vasodilatao, ou seja, aps uma hora da injeo endovenosa de salina hipertnica, ainda assim esta droga capaz de bloquear a vasodilatao renal. Estes resultados em conjunto, so indi-

cativos que os receptores a1 presentes no MePO participam na gnese e manuteno da vasodilatao renal provavelmente atravs de modulao da atividade simptica e liberao de ANP. Portanto, com base nos subtratos neuroatanmicos anteriormente citados, podemos supor que essas projees noradrenrgica do grupamento A1 para os ncleos MePO, estimulada por aferncias baroceptoras, podem modular as respostas cardiovasculares, endcrinas e neurais induzidas por variaes na composio e/ou volume do compartimento extracelular. O desenvolvimento atual deste projeto envolve leses seletivas do grupamento A1 de modo a confirmar estas hipteses.

Cravo SL, Rosa DA, Kalassa F, Korim WS, Hinrichs JM, Ferreira-Neto ML, Di Mnaco LR, Pedrino GR. Ventrolateral medulla and the cardiovascular control: new evidence new doubts. Medicina (Ribeiro Preto) 2006; 39 (1): 89-100.

ABSTRACT: More than 30 years ago a model was proposed trying to explain how the central nervous system controls the cardiovascular adjustments. According to this model the medullary vasomotor nuclei are the main structures involved in the cardiovascular reflex control. It also shows the nucleus tractus solitarius (NTS) as being the first integrative center for the baroceptors afferents and the descending pathways from supramedullary nuclei of hypothalamus, which contribute at defense and alert reactions. The NTS exhibits excitatory projections to the caudal ventral lateral medulla (CVL) which inhibits the rostral ventral lateral medulla (RVL). The RVL is the main source of excitatory inputs to the sympathetic preganglionic neurons, being responsible for the sympathetic tonus to heart and blood vessels. Important projections from CVL to diencephalon structures (Median preoptic nucleus, Hypothalamic paraventricular nucleus, Supraoptic nucleus) also play an important role in the control of the extracellular compartment composition and volume. The gigantocellular depressor area (GiDA) is likely to be another vasomotor center involved in blood flow adjustments through direct projections to Preganglionic Sympathetic Neurons (SPN). How GiDA mediates its vasodepressor effects is unknown. In the last 10 years we have been studying the pathways and neural mechanisms related to muscle and visceral blood flow regulation. Obtained data are not compatible with the proposed model. Keywords: Bood Pressure. NTS. RVL. CVL.

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