Direccin General de Educacin General Superior Tecnolgica

Instituto Tecnolgico de Lerma Ingeniera en Acuicultura

Cultivos de Apoyo

Lectura 3:

Cultivo de Zooplancton
Facilitador

MC ngel Ancona Ordaz

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INDICE Pgina INTRODUCCION...5 3.1 Rotferos7 3.1.1 Taxonoma de las especies de importancia en acuicultura.7 3.1.2 Morfologa, estructura interna, ciclo biolgico.8 3.1.3 Ecologa, distribucin, hbitat y alimentacin...12 3.1.4 Reproduccin, crecimiento y ciclo de vida.13 3.1.5 Usos......16 3.1.6 Requerimientos del cultivo....16 3.1.6.1 Origen y conservacin de las cepas. .17 3.1.6.2 Salinidad. .....19

3.1.6.3 Temperatura......................19 3.1.6.4 Alimentacin..................19 3.1.6.5 Medios de cultivo.......21 3.1.7 Tcnicas de cultivo. .................21 3.1.7.1 Produccin contina. ..23 3.1.7.2 Produccin semicontinua ...25 3.1.8 Mtodos de cosecha. ... 26 3.2 Cladceros.26 3.2.1 Generalidades de los cladceros.27 3.2.2 Taxonoma de las especies de importancia acuicultura..28 3.2.3 Daphnia ssp.29 3.2.4. Moina sp..31 3.2.5 Reproduccin y ciclo de vida32 3.2.6 Tcnicas de cultivo................33 3.2.7 Produccin continua.34 3.2.8 Mtodos de cosecha.35 3.3 Oligoquetos y poliquetos.36 3.3.1 Generalidades.36 3.3.2 Taxonoma de las especies de importancia acuicultura..40 3.3.3 ciclo de vida.....42 3.3.4 Tcnicas de cultivo.....43
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3.3.5 Mtodos de cosecha......46 3.4 Coppodos.47 3.4.1 Generalidades.47 3.4.2 Taxonoma de las especies de importancia en acuicultura....49 3.4.3 Importancia y usos..50 3.4.4 Ciclo de vida.51 3.4.5 Tcnicas de cultivo.53 3.4.6 Produccin continua..55 3.4.7 Mtodos de cosecha..56 3.5 Cultivo de Artemia56 3.5.1 Biologa y ecologa de la Artemia.57 3.5.2 Clasificacin y sistemtica57 3.5.3 Morfologa y ciclo de vida..59 3.5.4 Ecologa y distribucin natural..61 3.5.5 Morfologa y metabolismo de los quistes63 3.5.5.1 Morfologa de los quistes..63 3.5.5.2 Desarrollo de los quistes...64 3.5.5.3 Metabolismo del desarrollo...66 3.5.5.4 Criterios de seleccin67 3.5.6 Descapsulacin y eclosin de Artemia68 3.5.6.1 Mtodos de descapsulacin.69 3.5.6.2 Hidratacin de los quistes.69 3.5.6.3 Tratamiento con la solucin descapsulante...70 3.5.6.4 Lavado y tratamiento de desactivacin..71 3.5.6.5 Deshidratacin y conservacin73 3.5.6.6 Uso directo de quistes. Descapsulados e hidratados..74 3.5.6.7 Ventajas de la descapsulacin75 3.5.6.8 Mtodos de eclosin..75 3.5.6.9 Parmetros para la eclosin.78 3.5.6.9.1 Temperatura..78 3.5.6.9.2 Salinidad80 3.5.6.9.3 Oxgeno..80 3.5.6.9.4 PH81 3.5.6.9.5 Iluminacin82
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3.5.6.9.6 Densidad de quistes.82 3.5.6.9.7 Desinfeccin de quistes...83 3.5.7 Calidad de eclosin de los quistes...83 3.5.7.1 Conteo de nauplios84 3.5.7.2 Porcentaje de eclosin..86 3.5.7.3 Eficiencia de eclosin86 3.5.7.4 Tasa de eclosin87 3.5.7.5 Biometra de los quistes87 3.5.8 Mtodos de cosecha..88 3.5.9 Enriquecimiento de los nauplios de Artemia por bioencapsulacin92 3.6.0 Dosificacin de los diferentes estadios de Artemia para alimentar93 BIBLIOGRAFIA.97

INTRODUCCION: Unos de los problemas a resolver en la acuicultura es la necesidad especifica de las larvas de peces en sus primeras capturas de alimento, despus de la reabsorcin de la vescula vitelina que les permitir alcanzar la talla minina para partir de donde puedan nutrirse de zooplancton hasta alcanzar la alimentacin artificial. Aunque no son un componente habitual del zooplancton marino, los rotferos se ha comprobado que son los ms accesibles de todos los organismos ensayados con este fin. Los rotferos juegan un papel fundamental en la cadena trfica pelgica. Son un eslabn entre el fitoplancton y los consumidores secundarios, pero su importancia se acrecienta porque pueden transferir materia y energa desde bacterias y partculas detrticas de pequeo tamao, que son recursos no utilizables por otros organismos planctnicos. Unas pocas especies pueden ser depredadoras de otras especies de rotferos. Los cladceros son organismos de gran utilidad para la acuicultura ya que representan un aporte nutritivo, diversifican el alimento y son presa fcil para larvas de peces y crustceos. Entre los organismos del zooplancton, los cladceros representan un importante rengln en la cadena trfica de muchos cuerpos de agua. La produccin exitosa de peces con fines acucolas depende en gran medida de la disponibilidad de organismos zooplanctnicos de talla apropiada para la alimentacin de sus larvas y post-larvas En este sentido, los cladceros constituyen una buena herramienta en acuicultura debido a su pequea talla, rpido desarrollo, temprana reproduccin, alta tasa de multiplicacin, fcil manejo y considerable valor comercial entre otros aspectos. Los poliquetos constituyen el grupo ms numeroso de los anlidos: 10.000 especies. Son anlidos de vida marina, que habitan generalmente en las zonas litorales y nerticas. Adems, se caracterizan por presentar unas expansiones laterales denominadas parpodos, que no poseen los otros grupos de anlidos. Los Oligoquetos son los anlidos ms sencillos: no poseen parpodos, como ocurre en los poliquetos, ni otros apndices u ojos. Incluye especies terrestres y de agua dulce. Un ejemplo de Oligoquetos son las lombrices de tierra. Estos
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pequeos animales desempean una importante funcin en los ecosistemas ya que con su actividad excavadora colaboran en el reciclaje de la materia orgnica del suelo. Es el mayor grupo de pequeos crustceos, ya que incluye unas 8500 especies la mayora marinas, aunque algunas son dulceacucolas o terrestres. Son generalmente plantnicas representando un eslabn de gran importancia en las cadenas trficas marinas, ya que se alimentan de fitoplancton y son la base de la alimentacin de muchos peces. Desde que Seale (1933) y Rollefsen (1939) informaron del elevado valor nutritivo que tenan los nauplios recin eclosionados para la alimentacin de alevines de peces; el uso de Artemia en acuicultura se ha incrementado exponencialmente. Hoy en da, los nauplios de esta especie constituyen no solo el mejor, sino que en muchos casos son tambien el nico tipo de alimento vivo vlido para los primeros estados larvarios de la mayora de las especies de peces y crustceos cultivados (Bardach et al., 1972; Goodwim, 1976; Kinne y Rosenthal, 1977). Adems de esto y a pesar de que se han ensayado numerosas dietas artificiales, las larvas metanauplios as como los adultos de Artemia constituyen el mejor alimento para el cultivo de alevines de peces y postlarvas de crustceos (Botsford et al., 1974; Kelly et al., 1977; Sorgeloos, 1983).

3.1 ROTIFEROS El nombre de rotfero proviene del latn rota (rueda) y ferre (llevar) en referencia a su aparato succionador, la corona, que recuerda una corona real o una sierra
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dentada circular. La corona est compuesta de cilios que, al moverse, crean pequeas corrientes que atraen las partculas del entorno hacia ella. De la corona pasan a una faringe y de sta al aparato masticador denominado mstax, donde se trituran las partculas succionadas, para despus ser digeridas en el estmago y finalmente excretados los residuos por la cloaca. La corona tambin la utilizan para desplazarse por el agua, a modo de turbohlice. En el extremo opuesto a la corona se distingue un pie (generalmente un par de pies) con el cual pueden aferrarse al sustrato.

3.1.1 TAXONOMA DE LAS ESPECIES DE IMPORTANCIA EN ACUICULTURA. Una de las especies seleccionadas para su uso en Acuacultura es: Brachionus plicatilis de la cual presentamos la taxonoma.

La taxonoma de los rotferos se basa en los anlisis de caracteres morfolgicos externos e internos (trophi), evaluados a distinto nivel entre los que se incluyen anlisis biomtricos y la microscopia electrnica de barrido. Desde algunos aos estos anlisis han comenzado lentamente a completarse con estudios de cariotipos, empleo de electroforesis para el anlisis de las protenas, y secuenciacin de ADN. La taxonoma de este organismo fue descrita por Ruthner & Kolisko (1974). El tamao y la forma de este organismo pueden variar en funcin de su hbitat. Est ampliamente distribuida debido a la alta longevidad y resistencia de los huevos latentes. Su amplia distribucin indica que es una especie euriterma (520 C). Adems, el rango de salinidad que soporta vara entre 1 y 97 ppm (Ruthner & Kolisko, 1974) con lmite extremo en 200 ppm. El ciclo de vida de este organismo involucra una alternancia en la reproduccin sexual y asexual.

B. plicatilis ofrece la vantaja de incrementar su contenido nutricional en relacin a su dieta. Uso como cultivo auxilia.

3.1.2 MORFOLOGA, ESTRUCTURA INTERNA, CICLO BIOLGICO

Rotatoria (= Rotifera) pertenecen a los ms pequeos metazoarios. Ellos raramente alcanzan 2 mm en la longitud del cuerpo. Los machos tienen un tamao reducido y son menos desarrollados que las hembras; algunos miden tan solo 60 mm. El cuerpo de todas las especies consiste de un nmero constante de clulas, las diferentes especies de Brachionus contienen aproximadamente 1000 clulas las que no deben considerarse como identidades nicas sino como un rea de plasma. El crecimiento del animal es asegurado por el aumento de plasma y no por la divisin de la clula. El cuerpo del rotfero se diferencia en tres partes distintas que consisten de la cabeza, el tronco y pie. La mayora es de vida libre, hay pocos parsitos, generalmente son solitarios, pero hay especies que forman colonias de variable tamao. Son organismos muy diversos en formas que se caracterizan por dos elementos particulares como son la corona de cilios de la cabeza y el trophi o estructura masticatoria. Constituyen comparativamente un pequeo filum pero son muy importantes en los ambientes continentales a causa de su tasa reproductora, su habilidad para ocupar rpidamente los nichos vacantes, constituyendo ms del 30% de la

biomasa planctnica, son recicladores eficientes de la materia orgnica y responden rpidamente a los cambios ambientales.

La gran mayora ocupa aguas continentales ya que son comparativamente muy pocas las especies marinas. Colonizan ambientes con distinto grado de salinidad, pH y temperatura, tolerando muchos de ellos concentraciones muy bajas de oxgeno. Actualmente se considera que existen unas 2000 especies. Los rotferos dulceacucolas se renen en dos grandes subclases Monogonta y Bdelloidea. La subclase Monogonta es la ms importante en los ambientes acuticos continentales, rene 95 gneros y 1600 especies (Nogrady et al., 1993, Segers 2002). Ciclo biolgico El macho suele ser ms pequeo que la hembra, y tiene un saco espermtico con un conducto ciliado. Este va directamente al gonoporo y equivale al ano en las hembras y actan como pene. El sistema reproductor de la hembra, consiste de un solo ovario y un vitelario que produce el vitelo.

Para la fecundacin el pene arroja los espermatozoides hacia los vulos. Los huevos fecundados pueden ser arrojados y depositados en el sustrato o se fijan al cuerpo de la hembra. En el ciclo reproductivo del rotfero Brachionus existen dos fases; el ciclo amctico, donde las hembras no requieren de los machos para producir huevos, y el ciclo mctico, en donde hay presencia de machos y se realiza la fecundacin. La reproduccin bisexual se ve afectada por la edad de la hembra y por factores como temperatura, fotoperiodo, densidad poblacional, calidad y

cantidad de alimento. Los rotferos tienen la habilidad de formar huevos en estado latente (de reposo) que se enquistan, permitiendo a la especie escapar de los cambios bruscos del ambiente. Los trophi (y mstax) son muy variables, y dependen principalmente del rgimen alimentario de cada especie, por lo que es un buen identificador taxonmico. Situado en la parte posterior de la faringe encontramos glndulas salivares que vierten al mstax diversas enzimas digestivas. Por detrs de la faringe se encuentra un esfago que desemboca a un amplio estmago, situndose entre ambos un par de glndulas gstricas. Despus del estmago aparece un intestino que desemboca en una cloaca a la que tambin vierten el sistema excretor y reproductor.

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Algunas especies carecen de rganos digestivos, aparte del estomago. Entre la pared del cuerpo y el tubo digestivo existe un pseudoceloma lleno de lquido, sin revestimiento especial, con clulas sinciciales ramificadas. Los msculos del cuerpo se encuentran por debajo de la epidermis sincicial. Hay msculos longitudinales y circulares, pero no en capas diferentes como en los gusanos planos. Otros msculos sirven para retraer la corona y para mover o contraer el pie. La excrecin la realizan dos protonefridios filiformes conectados con una gran vescula pulstil o vejiga, que descarga cantidades relativamente grandes de agua en la cloaca. El movimiento a travs del rin de cantidades tan grandes de agua indica que la vejiga tiene como funcin fundamental la regulacin del agua y las sales (osmorregulacion). Cada protonefridios esta arrollado irregularmente y posee varias ramas laterales que se inician en clulas flamgeras. Gran ganglio nervioso, dorsal respecto a la boca, da origen a nervios que se dirigen a los distintos rganos. Suele haber un par de cortos penachos sensitivos (antenas laterales) situados hacia atrs, en los lados del cuerpo; algunos rotferos tambin poseen un penacho (o dos) encima del encfalo, as como entre una y tres manchas oculares dorsales. El ectodermo forma la cubierta externa, los rganos nerviosos y el revestimiento de los extremos del tubo digestivo; el tubo digestivo medio es endodermo y los otros rganos se forman del mesodermo. Se refiere a una hembra tpica (Bdeloideos). Las hembras dominan en las poblaciones de la mayor parte de los rotferos y se desconocen los machos de algunas especies. Las hembras poseen un solo ovario y una glndula vitelina, que forman una unidad. Los huevos se desplazan por el oviducto hasta la cloaca. El macho, en las especies que se conocen, es mucho menor que la hembra, carece de boca y de ano, y tiene corta vida; en la cavidad del cuerpo posee un gran testculo; este se abre, mediante conducto, en un pene que puede proyectarse dorsalmente o en un pie. En varios rotferos, el cuerpo es alargado (Rotaria neptunius), ancho (macrochaetus), sacciforme (Asplanchna), aplanado (Ascomorpha) o incluso esfrico (Trochosphaera). La loriga puede poseer costillas, anillos o espinas. El pie puede ser largo corto o ausente; sirve para la fijacin y de timn al nadar, y
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tambin en algunos casos sirve para saltar. La corona puede poseer una o dos series concntricas de cilios o puede estar modificada en forma de embudo, con cerdas pero no con cilios (collotheca). Existen rotferos con una cutcula relativamente gruesa y rgida que dan al animal una apariencia capsular; otros son flexibles y de aspecto y movimiento vermiforme. Aunque la gran mayora de rotferos son nadadores, algunos son ssiles y viven en el interior de tubos o cpsulas gelatinosas. Alrededor de 25 especies son coloniales (como Sinantherina semibullata). En la mayora de especies los machos son escasos, de forma que la reproduccin por partenognesis es bastante comn. Adems existe un marcado dimorfismo sexual ya que los machos existentes suelen tener el aparato digestivo atrofiado, y su existencia se reduce a la produccin de esperma. La vida de una hembra suele ser de una o dos semanas. Algunas especies son xerobiontes, es decir, sus huevos fertilizados se enquistan y crean formas de resistencia capaces de sobrevivir a los perodos de sequa y desecacin en los que el hbitat acutico desaparece por motivos estacionales. Al ser rehidratados emergen rpidamente (en menos de dos horas) como organismos con capacidad natatoria. Algunas especies producen un derivado del azcar trehalosa con el que crean una sustancia gelatinosa que ayuda a resistir a la falta de agua ambiental.

3.1.3 ECOLOGA, DISTRIBUCIN, HABITAD Y ALIMENTACIN. Hbitat y distribucin La mayor parte viven en agua dulce; menos de 5% se localiza en aguas marinas, salobres y someras, suelos hmedos y en musgos, en los granos de arena de las orillas de los lagos; en las rocas cercanas a los cuerpos de agua, desde el rtico y antrtico hasta los trpicos. Aproximadamente 75% de las especies conocidas viven en reas litorales y alrededor de 100 especies son planctnicas. Las especies B. plicatiiis y B. pterodinoides estn confinadas a aguas extremadamente alcalinas. Las especies Brachionus se manifiestan como manchones en el agua, cambian de lugar y varan de profundidad en un ciclo de 24 horas. Se pueden observar movimientos verticales de estas manchas hacia la superficie al anochecer, la

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mayor abundancia se observa en la superficie en la maana; por el contrario, la migracin se va al fondo y se observa al medioda. Alimentacin Alimento preferencial de rotferos en cultivo es Tetraselmis o Nannochloropsis La mejor tcnica consiste en conseguir altas densidades de rotfero alimentndolos durante 3 -4 das con levadura, para despus alimentarlos durante 6 -12 horas con alga. ste es el periodo de tiempo entre la fase de latencia y la fase exponencial del crecimiento del cultivo, se alimentan de: Chlorella, Saccharomyces cerevisiae, detritus, bacterias, algas pequeas, protozoo.

3.1.4 REPRODUCCIN, CRECIMIENTO, Y CICLO DE VIDA. Las hembras en diferentes estaciones suelen producir huevos de verano (amcticos) y de invierno (mcticos). Los primeros tienen una cubierta delgada, se desarrollan inmediatamente por partenognesis y solo producen hembras (amcticos); en aguas favorables pueden producirse una serie de generaciones de esta manera. Cuando ocurre algn cambio en las condiciones ambientales, todava no precisado con exactitud, se origina una generacin en que las hembras (mcticos) ponen huevos que si no son fecundados, se desarrollan en machos. Si son fecundados por estos machos, los huevos forman huevos de invierno con cascaras gruesas y resistentes, como los quistes de los protozoos. Estos necesitan un periodo de reposo y pueden permanecer en vida latente durante largos periodos de tiempo, pueden sobrevivir a la congelacin y a la desecacin, pueden ser transportados en las patas o plumas de las aves. La cra de rotferos pueden reemplazar pequeas porciones de citoplasma y a veces incluso fragmentos que contengan ncleos, pero la parte sustituyente carece de ncleos, as los rotferos se hallan sumamente especializados a nivel celular hasta el grado de que no es posible el crecimiento. El lapso de vida de los rotferos depende de la temperatura del cultivo, pero en un ambiente controlado (25 C) el perodo de vida se ha estimado en 3.4 a 4.4 das. Generalmente, las larvas llegan a ser adultas despus de 0.5 a 1.5 das por lo cual las hembras comienzan a poner huevos aproximadamente cada cuatro horas.
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Los huevos mcticos que eclosionarn en machos son significativamente menores en tamao, mientras que los huevos mcticos fertilizados son ms grandes y consisten de una capa externa gruesa y dbilmente granulada. Estos son los huevos latentes y nicamente eclosionarn hembras amcticas bajo cambios repentinos en las condiciones ambientales. Estos pueden ser originados por cambios en las condiciones climatolgicas eventualmente provocando variaciones en la temperatura, salinidad o en las condiciones alimenticias. En el ciclo reproductivo del rotfero Brachionus existen dos fases: Ciclo amctico, en donde las hembras no requieren de los machos para producir huevos. Ciclo mctico, en donde hay presencia de machos y se realiza la fecundacin. La reproduccin bisexual de los rotferos se ve afectada por la edad de la hembra y por factores externos como temperatura, fotoperiodo, densidad poblacional y calidad y cantidad de alimento. Los rotferos tienen la habilidad de formar huevos en estado latente (de reposo) que enquistan, permitiendo a la especie escapar de los cambios bruscos del ambiente.

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3.1.5 USOS. Su uso para la acuicultura comprende generalmente el cultivo larvario de peces y crustceos tanto marinos como de agua dulce y corales de ornato. Su uso en moluscos es restringido pues generalmente estos en su etapa larvaria se alimentan de microalgas. Razn del porque usar rotferos: nutricin viva a todas aquellas especies (sean corales o larvas) para los cuales los nauplios de artemia son demasiado grandes. Los rotferos, movindose de un modo lento y continuo, estimulan el instinto de caza de los alevines, en general no muy hbiles nadadores. Las principales ventajas que ofrece el cultivo de Brachionus plicatilis son: rangos amplios de T y S%, y diferentes alternativas prcticas de cultivo masivo, su pequeo tamao (100300), lo que permite a las lavas de peces y crustceos ingerirlos cuando todava no pueden ingerir nauplios de artemia. su fcil y barata alimentacin con diferentes especies de fitoplancton, levaduras y dietas artificiales. Su alta velocidad de reproduccin bajo condiciones ptimas de cultivo, pudiendo duplicarse la poblacin en menos de 24 horas, lo que permite obtener altas densidades 3.1.6 REQUERIMIENTOS DE CULTIVO. Rotferos marinos Salinidad B.plicatilis tolera salinidades De 1 -60 ppt.Pero su rango Optimo es de 10 -20 ppt Temperatura y luz La temperatura Debe mantenerse ente 20- 30oC La intensidad luminica debe Permanecer entre 2000 5000 lux. Brindndoles 16 Horas de luz y 8 horas de oscuridad Rotferos de agua dulce Temperatura B. rubens y B. calyciflorus tolera temperaturas entre 10o y 31oC. Composicin del agua El pH ptimo para el cultivo de B. calyciflorus es de 6 a 8.
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Los niveles de O2 para un buen crecimiento debe ser de1,2 mg/L 1.- Para el crecimiento intensivo de B. plicatilis la temperatura ptima es de 25C. 2.- La concentracin de salinidad ms adecuada para el desarrollo se sita entre 16 y 18%(a la mitad del agua del mar). 3.- Para mantenimiento de la cepa se recomienda una temperatura de 25C. 4.- Se recomienda para la produccin regular de Brachionus, mantener separadamente cultivos de algas y rotferos en volmenes de 2 a 200 litros. 5.- En condiciones de cultivo masivo con una alimentacin a base de Chlorella y levadura de pan, la densidad debe estar entre 100 y 200 org/ml/dia (no debe pasar de 1,000 org/ml/dia). 6.- En cultivos al aire libre en estanques de 10 a 20 m3 la poblacin debe estar entre 100 y 300 org/ml. 7.- Brachionus plicatilis puede ser alimentado a partir de productos naturales monoespecficos (Spirulina ,Chlorella o levadura). 8.- Alimentos compuestos agregados, pellets o microencapsulados, de Spirulina, almidn de maz, sales minerales, vitaminas, colina, glucosamina y aceite de hgado de bacalao permiten mantener una poblacin de 150 a 200 org/ml, con una tasa de extraccin diaria del 25%.

3.1.6.1 ORIGEN Y CONSERVACIN DE LAS CEPAS. Las muestras pueden ser tomadas desde mar abierto por lo que las cepas son originarias de poblaciones naturales o compradas en algn laboratorio siendo este de reproductores. La muestra pasa por captacin del medio natural realizado con ayuda de un calcal o filtro pequeo con tamao de malla de 53 y colocada en baldes plsticos o cualquier otro recipiente, para despus ser trasladado, recepcin de muestras, reconocimiento, adaptacin, limpieza, purificacin y aislamiento de cepas. Las hembras micticas son seleccionadas con ayuda del microscopio con el fin de obtener clones con reproduccin exclusivamente partenogenica, o al menos semiesclusiva El mantenimiento del stock comprendi: la preservacin de la cepa aislada y la preservacin del monocultivo.

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La obtencin de cepas se realiza a travs de aislamiento de los rotferos colocados en vasos de precipitado(3) con 40 ml de agua de mar (35 ppm de salinidad) filtrada y esterilizada por triplicado a la cual se le adiciona como alimento algas unicelulares (Nannochloris sp.), luego de una semana se filtra la suspensin del cultivo, se enjuagan los rotferos en una malla de 53 micras y se traspasa a vasos de precipitado (3) de 500 ml conteniendo agua de mar

filtrada y esterilizada (350 ml) y nuevamente se le adiciona como alimento microalga (Nannochloris sp.), se mantiene las cepas en un ambiente

semicontrolado con temperatura ambiente e iluminacin artificial.

El cultivo de rotferos se puede hacer en escala o masivas.

Para mantener la cepa se utilizan tubos de ensayo de 20 millitros, los cuales se lavan y esterilizan en autoclave; se llenan a la mitad con agua de mar a 35 g/L de salinidad, filtrada y esterilizada, y se diluye con agua dulce hasta obtener una salinidad de entre 18 a 22 g/L. Despus, se agrega cloro (5 g/L) durante una hora y luego, para quitar el exceso, se agrega tiosulfato de sodio a 5 mg/L Los tubos se inoculan a una densidad de 1 org./mL, y se alimentan con microalgas, cuidando que la densidad para la primera sea de 0.5 millones de clulas/mL, y para la segunda de 5 millones clulas/ml. Los cultivos se llevan a una densidad de 10 individuos/ml, se alcanza en 2 o 3 semanas. Se filtra el agua del tubo de ensayo con un tamiz de 60 micras, y los rotferos se enjuagan con agua dulce y se pasan a matraces de 1 lt. Cuando se llega a la densidad de 10 org./mL se cosechan los rotferos y una porcin se separa para renovar la cepa en los tubos. Los tubos de 20 y los matraces de 1 lt deben mantenerse en reas aisladas, con temperatura controlada a 25 C en donde no existan riesgos de contaminacin. Para el cultivo masivo se inicia con los rotferos producidos en los matraces de 1 lt, y se colocan en garrafones de plstico de 20 lts de capacidad o tanques cnicos de 50 lts, a una densidad de 10 org./mL. Se alimentan con las algas; despus de 4 das se alcanza una densidad de 30 org./mL y se procede a cosechar todo el volumen del recipiente. De cada cosecha se separa 20% que servir como inoculo de un nuevo recipiente, y 80% ser para la alimentacin acutico en cultivo.

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Se pueden inocular tanques de 200 a 500 litros, a una densidad de 30 org./mL. En un lapso de cuatro das la densidad de rotferos habr alcanzado entre 80 a 150 org./mL y se cosecha el volumen total del tanque.

3.1.6.2 SALINILIDAD. Se recomienda la utilizacin de agua de mar (32~35%). La concentracin de salinidad ms adecuada para el desarrollo se sita entre 16 y 18%(a la mitad del agua del mar). Los rangos de salinidad que soporta van desde 1 a 97 ppm (Ruthner & Kolisko, 1974) con el lmite extremo de 200 ppm. Pero la mayora de las especies cultivadas son de rangos entre 32~35% de salinidad aunque la especie B. plicatilis es una especi considerada a menudo como mixosalina, ya que es frecuentemente, abundante y veces dominantes en aguas de salinidad

comprendida entre 1,8 y 36%o. No obstante puede ser capturada en abundancia en medios hipersalinos de hasta 100 g de sales por litro. No obstante en laboratorios salinidades medias. se ha obtenido un crecimiento ptimo en las

3.1.6.3 TEMPERATURA. Soportan rasgos amplios de temperatura dada la especie (5~20C) y algunas de estas, las ms comerciales son cultivadas a 25C. sin embargo hay que tener mucho cuidado ya que la tasa neta de reproduccin est afectada negativamente por las temperaturas muy bajas (menores a 15C ) o muy altas (mayores a 27 C ) en las especies cultivadas. Marinos: Debe mantenerse ente 20- 30C Dulce: Tolera temperaturas entre 10- 31C.

3.1.6.4 ALIMENTACION. Los rotferos en la naturaleza consumen microalgas, bacterias, levaduras y protozoarios. Los animales cultivados se alimentan mayormente con algas unicelulares y/ o levaduras. Nannochloropsis es una de las microalgas utilizadas usualmente como alimento del rotfero. Aunque tambin se puede alimentar de Cianoficeas, Chloroficeas, Pheoficeas, etc.
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Se puede alimentar de microalgas: Cianoficeas, Chloroficeas, Pheoficeas, etc., bacterias y levaduras. Pejler seala que no se incluye en su dieta las Familias Cryptomonas y Chrysophytas. Otros autores demuestran que slo pueden ingerir partculas de 1215 en tamao. Existen diferentes trabajos que reportan tasas de ingestin de: 0.14 1/min de Chlamidomonas, 0.034 1/min de Olisthodiscus, 0.1 1/min de Chlorella, 0.025 1/min. Requerimientos alimenticios Rotferos marinos Microalgas vivas: Nannochloropsis, Nannochloris, Chaetoceros, Dunaliella, Pyramimonas, Isochrysis y Tetraselmis. Rotferos de agua dulce Microalgas vivas: Nannochloropsis, Nannochloris, Scenedesmus, Kirchneriella y Chlorella. Levaduras
.COMPOSICION DE AMINOACIDOS EN Brachionus plicatilis, CULTIVADO CON DIFERENTES MICROALGAS Y LEVADURAS (g/100 g PROTEINA CRUDA) Nagasaki 1975
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Gifu 1976
1

1975
3

Levadura

Levadura + Chlorella

Chlorella Levadura 4.4 6.9 1.0 0.7 4.5 3.0 4.0 1.1 4.4 6.6 5.2 1.7 3.9 9.8 10.1

Levadura+ Chlorella

Chlorella Levadura 3.2 6.2 0.9 0.9 3.9 3.2 3.4 1.2 4.0 5.5 4.4 1.5 3.9 8.5 10.1

Chlorella

Isoleucina Leucina Methionina Cystina Phenylalanina Tyrosina Threonina Tryptophano Valina Lysina Arginina Histidina Alanina Acido Asprtico

2.9 5.5 0.8 0.7 3.5 3.0 3.5 1.1 3.6 5.7 4.2 1.4 3.2 7.7

2.8 5.3 0.8 1.1 3.4 3.0 3.1 1.2 3.5 5.8 4.5 1.4 3.2 7.5 8.8

3.1 5.6 0.8 0.8 3.5 3.2 3.4 1.2 3.8 5.8 4.6 1.4 3.7 8.0 9.3

4.0 6.1 0.9 0.7 4.1 2.8 3.5 1.1 4.0 6.0 4.6 1.5 3.5 8.9 9.7

4.0 6.2 0.9 0.7 4.1 2.9 3.4 1.2 4.2 6.0 4.8 1.7 3.5 8.8 9.5

3.4 6.1 0.8 0.6 3.9 3.1 3.2 1.2 4.2 6.1 4.6 1.5 3.8 8.0 9.8

Acido Glutmico 8.9

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Glycina Prolina Serina TOTAL

2.9 5.2 3.7 67.5

2.9 5.9 3.7 67.9

3.1 5.8 3.9 71.0

3.6 5.0 3.7 79.5

3.1 4.8 3.6 72.9

3.2 4.9 3.7 73.7

3.1 6.1 4.2 74.2

3.1 6.7 4.0 74.1

Muestra obtenida con Etanol al 80%, por hidrlisis con ter dietlico. 1. Rotferos cultivados con Chlorella minutissima. 2. Rotferos cultivados con levadura. 3. Rotferos cultivados con Chlorella marina y levadura (1 g de levadura/10 cel/ml agua de mar/da). 4. Rotferos cultivados con levadura y enriquecidos con Chlorella marinapor 36 horas (Watanabe, et al., 1978b; Hirata, 1983).

3.1.6.5 MEDIOS DE CULTIVO. El primer sistema utilizado es el llamado mtodo de estanque de transferencia en cultivos sucesivos de Chlorella. a) Tierra de monte sin hojarasca. b)Chlorella en polvo. c) Spirulina en polvo. d) Extracto de tierra de jardin. e) Espinaca molida finamente. f) Levadura de panificacin. Cultivos continuos Cultivos a pequea escala La produccin promedio que se obtiene es de 475 rotferos por ml, lo que equivale a 39 millones de rotferos, en 5 das. Cultivos masivos La produccin promedio que se obtiene de este sistema es 187 millones de rotferos por da. 3.1.7 TCNICAS DE CULTIVO. Las tcnicas de cultivo de rotferos pueden ser de dos tipos, si el nmero de las especies asociadas es conocido o no; monoaxnico (una especie), axnico (varias especies). Para realizar un cultivo monoaxnico se deben de considerar los siguientes puntos: 1) Tener una fuente axnica de alimento de algas o bacterias, de las especies nutritivas ms comunes o escoger especies que pueden ser cultivadas en condiciones axenicas.
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2) Obtener embriones de rotferos axnicos para iniciar los cultivos. Estos se obtienen de huevos resistentes tratados en 0.1-1% de solucin de hipoclorito. El manejo debe ser en condiciones estriles. El inicio y mantenimiento de cultivos monoaxnicos de rotferos fitfagos y bacterifagos, no presenta dificultades si se dispone de una fuente de alimento axnica.

En cuanto a la seleccin del mejor mtodo de cultivo masivo a continuacin se describen esquemticamente, algunos ejemplos de sistemas de cultivo desarrollados por diferentes autores para la produccin masiva de rotferos. El primer sistema utilizado fue el llamado mtodo de estanque de transferencia en cultivos sucesivos de Chlorella (SISFFA, 1964a, b).

Posteriormente la produccin de B. plicatilis con levadura de pan (Hirata & Mori, 1967) sustituye la transferencia sucesiva por tanques de recirculacin, mejorando el tanque con grava en el fondo y colocando un ascensor de aire en el centro.

Esquema del sistema de cultivo en tanque de recirculacin: A) Bomba de aire; B) Rotferos en el medio; C) Tubo de vinil (25 cm de dimetro); D) Filtro de recirculacin; E) Tina de policarbonato (Pan-light), cubierta de fibra de vidrio. La Figura siguiente muestra un cultivo sistemtico, alternando la dieta de Chlorella y levadura llamado thinning out method (Fukusho et al., 1976). Este

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mtodo es el de mayor uso en cultivos masivos pues reporta una alta produccin de rotferos (300 R/ml).

Tcnica de cultivo desarrollada por la asociacin The Seto Inland Farming Fisheries Association (SISSFFA) y la Estacin de Maricultura de Nagasaki. Este mtodo es el ms comnmente utilizado y es llamado Thinning out method (Fukusho et al., 1976).

3.1.7.1 PRODUCCION CONTINUA. El inicio de la cra se realiza con una salinidad del 25 %, y la temperatura se ajusta a 27C, con la finalidad de acelerar la reproduccin; se agrega el alga unas 2 veces al da segn sea el consumo por parte de las presas, cuando la concentracin de los rotferos, es del orden de 50ml., se aumenta progresivamente el volumen de cra. Esta tcnica permite alcanzar una concentracin de 200 rotferos por ml. En un mes en un volumen de 0.4 m3.
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Las tasas de conversin de alimento de este tipo de sistemas diariamente se incrementan. Se puede concluir que los sistemas de retroalimentacin tienen dos ventajas al mismo tiempo: la purificacin del agua y la minimizacin de prdida de energa a travs de la alimentacin. Esto permite el establecimiento de un cultivo de produccin continua. Un cultivo continuo es un sistema de flujo en el cual las clulas individuales estn suspendidas en un volumen constante en un estado de equilibrio dinmico, establecido por una remocin de cultivo y adicin de medio nutritivo por unidad de tiempo con tendencia al infinito. El mtodo desarrollado por Hirata et al. (1977), llamado sistema de retroalimentacin, semejando un ecosistema con la participacin de bacterias pseudomonas (produccin de nutrientes por biodegradacin) para Chlorella y sta como alimento de rotferos, los desechos de stos hacia un biodepsito, etc. (Feedback System; Hirata, 1980). Las tasas de conversin de alimento de este tipo de sistemas diariamente se incrementan. Se puede concluir que los sistemas de retroalimentacin tienen dos ventajas al mismo tiempo: la purificacin del agua y la minimizacin de prdida de energa a travs de la alimentacin. Esto permite el establecimiento de un cultivo de produccin continua.

Figura1: Sistema de retroalimentacin de nutrientes (Feedback System) para el cultivo masivo de rotferos (Hirata, 1980).
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3.1.7.2 PRODUCCION SEMICONTINUA. Esta tcnica ha sido descrita por GIRIN Y DEVAUCHELLE, EN 1974. Una cuarta parte del volumen producido se separa cada da y se reemplaza con agua nueva, aadiendo en su totalidad o una parte de la racin alimenticia necesaria, para la produccin del da siguiente. Si se cumplen las exigencias troficas, este mtodo permite mantener la poblacin a una concentracin constante de ejemplares. En estos cultivos es importante determinar la concentracin ptima de los nutrientes por unidad de tiempo en relacin a la tasa de dilucin o cosecha del cultivo. Cuando se establece el estadio de equilibrio del sistema, la produccin es mxima. Una cuarta parte del volumen producido se separa cada da y se reemplaza con agua nueva aadiendo la totalidad o una parte de la racin alimentaria para la produccin del da siguiente. Se habla de una diferencia entre un cultivo semicontnuo y un cultivo continuo. Al parecer esto es incorrecto, ya que la diferencia estriba en el nmero de perodos de remocin del cultivo y adicin del medio nutritivo y en los sistemas continuos este perodo de remocin y adicin es generalmente automtico en aparatos llamados turbidostatos y Quimiostatos. Cuando se requiere de grandes cantidades de clulas a intervalos frecuentes para alimentar especies en cultivo (peces, crustceos, moluscos), los cultivos semicontnuos o intensivos proveen un gran nmero con mayor consistencia en forma uniforme y constante. En estos cultivos es importante determinar la concentracin ptima de los nutrientes por unidad de tiempo en relacin a la tasa de dilucin o cosecha del cultivo. Cuando se establece el estadio de equilibrio del sistema, la produccin es mxima. Una cuarta parte del volumen producido se separa cada da y se reemplaza con agua nueva aadiendo la totalidad o una parte de la racin alimentaria para la produccin del da siguiente

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Figura 2: Seccin del sistema de retroalimentacin del cultivo de rotferos: A) Tanque de 2,700 l; B) Biodepsito en zig-zag; C) Aireador mvil; D) Motor de reduccin; E) Regulador de automvil; F) Compresor

3.1.8 METODOS DE COSECHA. Los mtodos ms utilizados para la extraccin de rotferos son: Sifoneado; Este mtodo consiste en extraer litros del medio del cultivo, colocando en el extremo del sifn un tamiz de 60 micras. De tal manera que los rotferos queden retenidos en el tamiz y puedan ser fcilmente utilizados. Extraccin de la capa superficial, este mtodo se debe agitar el cultivo y dos horas despus recoger los rotferos en la capa obtiene uperficial, con lo que se

un 10% del total de la poblacin. Actualmente se considera a los

rotferos como el micro capsulas efectivas a disposicin de los acuicultores.

3.2. CLADCEROS. Los cladceros (Cladocera) son un suborden de crustceos braquipodos que comprende unas 400 especies, casi todas de agua dulce, siendo las ms conocidas las pulgas de agua (Daphnia). El tamao de la mayora de las especie oscila entre 0,5 y 3 mm. El cuerpo de los cladceros est cubierto por un caparazn que deja solo fuera la cabeza y las largas antenas nadadoras. Muchas especies excavan y reptan por el fondo alimentndose de materia orgnica del sedimento, y otras forman

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parte del plancton y son suspensvoras; pocas especies son depredadoras de otros cladceros. Muchas especies se reproducen por partenognesis y poseen machos enanos; en la mayora de casos se ha comprobado que existen perodos ocasionales de reproduccin sexual, sobre todo cuando hay superpoblacin, carencia de alimento o temperaturas adversas, las hembras partenogenticas producen machos. La forma del cuerpo de algunas especies planctnicas sufre cambios estacionales a travs de sucesivas generaciones producidos por

partenognesis, fenmeno conocido como ciclomorfosis.

3.2.1. GENERALIDADES DE LOS CLADCEROS. Dentro de los cladceros se han seleccionado principalmente los gneros Daphnia y Moina por ser de gran importancia en la piscicultura. Estos organismos son muy estudiados con relacin a sus condiciones ptimas de cultivo, debido al alto valor nutritivo y a su facilidad de produccin. Cladceros del gnero Moina son considerados presa fcil debido a su forma, movimiento, perfil nutricional y pigmentacin. Los cladceros presentan rico valor nutricional, presentan espectro de enzimas importantes (proteinasas,

peptidasas, amilasas, lipasas y celulasas) que sirven como exoenzimas en el intestino de las postlarvas y algunas especies, pueden presentar 60 % de protena de su peso seco y aminocidos favorables para los requerimientos nutricionales de larvas y alevinos de peces, as como cantidad total de grasa por peso seco de 20% - 27% para las hembras adulto y del 4% - 6% para los juveniles. De las 400 especies que se conocen de cladceros nicamente 9 son marinas, incluida Bosmina maritima (P. E. Mller 1867) que est presente. Los cladceros marinos son crustceos de pequeo tamao, no llegando a sobrepasar, por regla general, el milmetro de longitud (mesozooplancton). En la cabeza hay un ojo medio de tipo naupliar en Penilia, mientras que en el resto de especies se presenta un ojo impar compuesto y mvil. El cuerpo no tiene una segmentacin definida. En la regin torcica, tienen de cuatro o seis pares de apndices que son birrmeos, al igual que el resto de los

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apndices que poseen. La parte posterior del cuerpo se divide en abdomen y postabdomen, y carece de extremidades. 3.2.2. TAXONOMA DE LAS ESPECIES DE IMPORTANCIA ACUICULTURA. Dentro de esta clase de organismos existen dos gneros de agua dulce de gran importancia en acuacultura, que son Daphnia y Moina, las cuales se localizan en diversos medios. El gnero Daphnia comprende ms de 20 especies, de las cuales las ms conocidas son: Daphnia magna, D. pulex, D. longispina, D. strauss. En relacin al gnero Moina podemos mencionar a las especies: Moina rectirostris, M. macrocopa, M. brachiata y M. affinis. Clasificacin cientfica Reino: Animalia Filo: Arthropoda Subfilo: Crustacea Clase: Branchiopoda Subclase: Phyllopoda Orden: Diplostraca Suborden: Cladocera Latreille, 1829 Infrardenes: Ctenopoda, Anomopoda, Onychopoda, Haplopoda Segn Martin & Davis (2001), los cladceros se clasifican como sigue: Infraorden Ctenopoda Sars, 1865 Familia Holopediidae Sars, 1865 Familia Sididae Baird, 1850 Infraorden Anomopoda Stebbing, 1902 Familia Bosminidae Baird, 1845 Familia Chydoridae Stebbing, 1902 Familia Daphniidae Straus, 1820 Familia Macrothricidae Norman & Brady, 1867 Infraorden Onychopoda Sars, 1865 Familia Cercopagididae Mordukhai-Boltovskoi, 1968 Familia Podonidae Mordukhai-Boltovskoi, 1968 Familia Polyphemidae Baird, 1845Infraorden Haplopoda Sars, 1865 Familia Leptodoridae Lilljeborg, 1900
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3.2.3 DAPHNIA SSP. Estos organismos se caracterizan por poseer un cuerpo comprimido lateralmente y; no se distinguen segmentos como en otros crustceos. Presentan dimorfismo sexual marcado, la hembra es ms grande que el macho. Presentan un carapacho de quitina transparente, las antenas o apndices con numerosas setas; ojos compuestos y simples (ojo nauplio). Una cavidad embrinica con huevos y embriones situados en la parte dorsal, entre el carapacho y el dorso del cuerpo. Para la identificacin de especies son importantes los apndices torxicos en la forma y nmero de espinas y setas.

Nombre comn Reino Phylum Subphylum Clase Orden Familia Nombre cientfico (gnero especie)

Pulga de Agua Animalia Arthropoda Crustacea Branchiopoda Cladocera Daphniidae Daphnia sp. y

Descripcin del Las Daphnias tambin conocidas como pulgas de agua, animal son diminutos crustceos. Existen varios tamaos, desde casi imperceptibles, hasta los que miden 3 mm; tienen dos pares de antenas y patas adaptadas para nadar y agarrarse. Las segundas antenas agrandadas sirven de rganos locomotores.

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Representan un alimento para muchos peces en estado de libertad. Tipo de La daphnia es un filtrador de agua y su principal alimentacin alimento son las microalgas y restos microscpicos. (herbvoro, carnvoro, omnvoro, etc.) Tipo de reproduccin sexual (ovpara o vivpara) La daphnia tiene dos maneras distintas de reproduccin dependiendo de las condiciones ambientales, especialmente las de carcter estacional: Una asexual y otra sexual. La primera se produce por partenognesis y, segn la edad y el tipo de alimentacin de la pulga, puede llegar a dar entre 5-6 hasta los 100 ejemplares. En la reproduccin sexual la hembra produce vulos que luego de ser fertilizados por el macho y que se alojan en el epifio (saco que soporta los huevos). La produccin de estos huevos se debe a la sabidura de la naturaleza, que de esta manera asegura la subsistencia de la especie cuando las condiciones de vida no son favorables. Estos pueden ser mantenidos por ms de 50 aos. Nmero de cras Entre 5, 6 hasta los 100 ejemplares. que tiene Nmero de Alta tasa de reproduccin. reproducciones Duracin vida de 6 a 8 das.

Descripcin Por las caractersticas de su alimentacin (restos breve de su microscpicos del fondo), comen bacterias que seran comportamiento perjudiciales para la salud tanto de los peces que cohabitan con ellas, como para el humano que habra de beber de esta fuente. El mejor alimento que se puede usar es el agua verde, misma que puede utilizarse en cultivos al aire libre. El agua verde la podemos conseguir de la siguiente forma: usando una solucin dbil de Miracle Grow con quelato de hierro en agua sin cloro y aadiendo zumo de pera. Si colocamos esta agua llena de nutrientes en un lugar con mucho sol, en pocas semanas tendremos el agua verde, que se llama as por el color que tienen la enorme cantidad de esporas de algas. Se dice que pequeas cantidades aadidas de lechuga pulverizadas tambin funcionan bien.
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Medio donde Acutico. habita (acutico o terrestre) Tipo ecosistema donde encuentra de Lacustre. se

Distribucin Global. geogrfica de la especie Caractersticas 22.5 C en promedio; PH: 8.32; oxgeno: 7.2 mg/l y del medio fsico buena iluminacin. (luz, temperatura, humedad, etc.) Mecanismos de Presenta gran resistencia a las variaciones ambientales, adaptacin corto tiempo generacional, alta tasa reproductiva y su relativamente poca selectividad como organismo filtrador. 3.2.4. MOINA SP. Temperatura Moina macrocopa se desarrolla en un rango amplio de temperatura desde 5C a 30C y se considera de 24C 26C como su temperatura ptima. Moina brachiata crece en temperaturas de 8C 13C. Requerimientos de Oxgeno Estos organismos habitan en medios donde la concentracin de O2 es variable, ya que pueden crecer tanto en completa saturacin de O2 hasta concentraciones muy bajas. Estas concentraciones estn en relacin a temperatura, concentracin de materia orgnica, concentracin de microalgas, etc. La supervivencia en medios pobres de oxgeno depende de la capacidad de sintetizar hemoglobina. Este fenmeno est en relacin directa del oxgeno ambiental. Un incremento en hemoglobina est en razn directa de alta temperatura y excesiva densidad de poblacin. Incluso la hemoglobina est presente tambin en los huevos y la sntesis de hemoglobina tambin est relacionada con la concentracin de CO2 ambiental. Requerimientos en pH
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Al igual que Daphnia El pH ptimo en estas especies es difcil de determinar. En trminos generales, el pH oscila entre 7.1 8 y por ejemplo en D. pulex el pH ptimo es de 5 a 6. Otros Requerimientos Al igual que la especie anterior los requerimientos son los mismos para que se pueda dar un buen desarrollo y un cultivo exitoso.

3.2.5 REPRODUCCIN Y CICLO DE VIDA. Tipo de reproduccin sexual (ovpara o vivpara): La daphnia tiene dos maneras distintas de reproduccin dependiendo de las condiciones

ambientales, especialmente las de carcter estacional: Una asexual, se produce por partenognesis y, segn la edad y el tipo de alimentacin de la pulga, puede llegar a dar entre 5-6 hasta los 100 ejemplares. En la reproduccin sexual la hembra produce vulos que luego de ser fertilizados por el macho y que se alojan en el epifio (saco que soporta los huevos). La produccin de estos huevos se debe a la sabidura de la naturaleza, que de esta manera asegura la subsistencia de la especie cuando las condiciones de vida no son favorables. Estos pueden ser mantenidos por ms de 50 aos. Duracin de vida: de 6 a 8 das. Muchas especies se reproducen por partenognesis y poseen machos enanos; en la mayora de casos se ha comprobado que existen perodos ocasionales de reproduccin sexual, sobre todo cuando hay superpoblacin, carencia de alimento o temperaturas adversas, las hembras partenogenticas producen machos. La abundancia y distribucin de estas especies depende de la variacin estacional pues el nmero y tamao de huevos de resistencia partenogenticos y la madurez sexual dependen de las variaciones de T, S, pH y luz, entre otros. Un exceso de luz solar reduce considerablemente una poblacin. En relacin a la produccin de huevos Ephippia (huevos de resistencia

partenogenticos) dependen de la temperatura principalmente. Por ejemplo, en Moina rectirostris stos se producen a 20~27C en M. macrocopa a 14C.

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La forma del cuerpo de algunas especies planctnicas sufre cambios estacionales a travs de sucesivas generaciones producidos por

partenognesis, fenmeno conocido como ciclomorfosis.

Figura 1: Estructura de antenulas en macho y hembra de D. magna (Irleva, 1973).

Figura 2: Huevo de resistencia efipios en D. pulex (a) y D. magna (b). (Irleva, 1973).

3.2.6 TCNICAS DE CULTIVO. La produccin de Daphnia y Moina en condiciones de cultivo es relativamente sencilla por su resistencia a variaciones ambientales y diversas dietas alternativas que se pueden usar.

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Como en otras especies de alimento vivo, las alternativas de produccin de estas especies pueden ser: cultivo en laboratorio para fines de investigacin, cultivo intensivo y cultivo extensivo. Condiciones ptimas de cultivo TC - 15C a 25C O2 - 3 a 6 mg/l pH - (6.8 7.8) Grado de oxidacin - 14.826.2 mg O2/l Medios de cultivo recomendables Medios minerales (sales de fosfatos y nitratos) Medios orgnicos (estircol de caballo, res, cerdo, gallina) Medios enriquecidos (combinacin de medios orgnicos e

inorgnicos o extractos de suelo Se recomienda cosechar estos organismos a intervalos regulares para mantener un equilibrio en el cultivo. En condiciones ptimas de cultivo para iniciar la cosecha (de 20 a 25 das despus del inicio del cultivo), se puede obtener una biomasa de 10 g/m3.

3.2.7 PRODUCCIN CONTINUA. Diariamente o cada tercer da, dependiendo del desarrollo del cultivo, deben retirarse los neonatos, los cuales pueden ser destinados al desarrollo de pruebas o eliminados. Con igual periodicidad se deber efectuar la limpieza y el suministro de alimento. Para la limpieza se emplea un sifn con el cual se remueven las mudas y los restos de alimento depositados en el fondo de los recipientes. Al finalizar, se recupera el volumen de agua en cada recipiente, adicionando y/o haciendo el recambio de 1/3 del volumen con agua reconstituida fresca. Una vez por semana (por ejemplo, el viernes), despus del retiro de los neonatos y antes del suministro de alimento, se transfieren las hembras adultas a recipientes limpios, conteniendo partes iguales del agua antigua y agua de dilucin fresca. Se recomienda desechar los organismos mayores a cuatro o cinco semanas, reemplazarlos e iniciar un nuevo cultivo con los neonatos colectados ese da.
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Cuando se van a realizar pruebas, el da previo se extraen los neonatos presentes en el cultivo para de esa forma garantizar que los neonatos encontrados al da siguiente tengan menos de 24 h de nacidos.

3.2.8 MTODOS DE COSECHA. El mtodo que empleamos para cultivar y cosechar Cladceros (Daphnia) destinados a la alimentacin del pejerrey se basa en los siguientes requisitos:

Reciclaje de un desecho, especialmente estircol vacuno, mediante su incorporacin al medio de cultivo. Normalmente no se utilizan los alimentos experimentados en condiciones de laboratorio debido a que el volumen de los cultivos de cladceros alcanza cierta envergadura, el empleo de alguno de los alimentos ad-hoc ensayados bajo dichas condiciones, puede tornarse econmicamente prohibitivo.

Una vez que la calidad del medio ha evolucionado y el mismo puede calificarse como biolgicamente activo, se procede al repicaje con cladceros provenientes de otros cultivos. Los indicadores de calidad son tanto de naturaleza qumica (niveles de amonio, nitritos, nitratos, sulfdrico, oxgeno y taninos entre otros) como fsico-qumica (pH, potencial redox) y biolgica (DBO, recuentos de colonias bacterianas, etc). Con el tiempo, al adquirir progresivamente experiencia, la prctica del acuicultor reemplazar a la necesidad de realizar muchas de las determinaciones anteriores de manera sistemtica.

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3.3 OLIGOQUETOS Y POLIQUETOS. Los oligoquetos (Oligochaeta; del griego oligos, poco, pequeo, y del latn chaetae, cerdas) es una subclase del filo Annelida, (anlidos o gusanos segmentados), Clase Clitellata (que poseen un clitelo, o 'collar' que forma un cocn reproductivo). Los poliquetos Pertenecen al filo de los Anlidos (Filo Annelida) en el cual tienen la categora de clase. En este filo tambien se encuentran las sanguijuelas que pertenecen a los hirudineos (Cl. Hirudinea) La clase de poliquetos (Cl. Polychaeta) esta comnpuesta princialmente por organismos marinos. A diferencia de los poliquetos, los oligoquetos estn desprovistos de parapdos y las quetas son pequeas y escasas.

3.3.1 GENERALIDADES Los Anlidos comprende las Clases de los Poliquetos (lombrices marinas principalmente) que es el grupo ms antiguo y del que derivan las otras dos Clases (Hirudineos y Oligoquetos), ambas con representantes tanto en el medio acutico continental como el terrestre. Los Oligoquetos comprenden a las lombrices que cultivamos. El cuerpo es alargado, con segmentacin notoria (anillado) y en el caso de Eisenia ftida con pigmentacin rojiza intensa que, en los animales subadultos y adultos, no permite vislumbrar al tubo digestivo por transparencia. En la porcin ventral los animales son ms claros. En seccin transversa son subtriangulares. La segmentacin o metamera, es propia de los animales provistos de un celoma, o sea unas cavidades secundarias tapizadas por un revestimiento mesotelial en
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la que haya suspendidas las vsceras. Cada segmento en cierta medida semeja un compartimiento estanco con fluido (lquido celmico) que, salvo condiciones patolgicas, nunca se mezcla con la sangre. La segmentacin conlleva la repeticin de algunos sistemas, como el excretor, donde el par de metanefridios (riones) con sus ductos se halla en cada uno de los metmeros. El tubo digestivo es completo, con una boca en el extremo anterior, faringe bulbosa, corto esfago y dos dilataciones contiguas conformando un buche seguido de una molleja provista de musculatura potente. A la molleja le sigue un largo intestino, con el dorso invaginado y plegado (el pliegue, conocido como tiflosolis, aumenta la superficie de absorcin), que desemboca en el ano situado en el extremo posterior del animal. Los Oligoquetos son micrfagos alimentndose de bacterias, hongos, protistas y restos particulados de materia orgnica parcialmente descompuesta (detrito). Son hermafroditas que recurren generalmente a la fecundacin cruzada (intercambian el esperma para fecundar sus propios vulos), con 2 pares de testculos y solo un par de ovarios (localizados en 3 segmentos diferentes). El desarrollo de los huevos en la puesta (cocn) es directo al igual que en los Hirudineos y a diferencia de los Poliquetos cuyo desarrollo es indirecto (larva trocsfera). El sistema circulatorio es cerrado con un vaso dorsal al tubo digestivo que lleva la sangre de la regin posterior a la anterior y uno ventral que conduce la sangre en sentido contrario (caudal). En la regin anterior, el vaso dorsal se comunica con el ventral por una serie de 5 o ms pares de vasos circulares pulstiles (corazones). La sangre posee pigmentos (hemoglobina, clorocruorina) y clulas. La respiracin es cutnea, y la piel produce una cutcula protectora que se mantiene hmeda por clulas glandulares intercaladas entre las epiteliales. El sistema nervioso es ganglionar y se inicia con una condensacin ceflica supraesofgica (cerebro) que se relaciona por conectivos con una condensacin subesofgica. La cadena ganglionar, con un par de ganglios fusionados por segmento, se contina hasta la porcin caudal del animal. La regin ceflica posee abundantes terminaciones nerviosas sensitivas, y la falta de ojos no es impedimento para la percepcin lumnica.

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Los poliquetos son mayormente marinos y bentnicos, habitan humedales costeros y ambientes estuarinos y tambin grandes profundidades, y colonizan sustratos fangosos, arenosos, rocosos y arrecifes coralinos. Pueden ser pelgicos y formar parte del meroplancton y holoplancton, en cuyo caso presentan cuerpo transparente, ojos bien desarrollados y lbulos parapodiales expandidos. Habitan en la mayora de sustratos (blandos o rocosos) que cubren el fondo ocenico de todo el mundo. Desempean un papel muy importante en el ecosistema marino ya que reciclan gran parte de la materia orgnica de la zona litoral, modifican el fondo marino, la concentracin de gases disueltos, la mezcla de agua intersticial, la consistencia del sedimento y la dinmica de los contaminantes. La cabeza de los poliquetos est formada por el prostomio y el peristomio, a veces hay segmentos cefalizados. Presenta los rganos sensoriales y/o apndices alimentarios. El prostomio contiene el cerebro, los ojos y lleva las antenas, de funcin sensorial, y los palpos, que pueden ser ciliados alimentarios, sensoriales o apndices de la corona tentacular. El peristomio lleva palpos o cirros. Tambin pueden llevar cirros tentaculares en los primeros segmentos cefalizados, o asociados a estructuras en los segmentos del cuerpo. Algunos cirros dorsales forman los litros o escamas. Pueden llevar o no un rgano bucal asociado a la boca. ste puede tener una parte muscular o faringe y una reversible o proboscis; otros aparatos bucales presentan estructuras mandibulares duras asociadas.

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El tronco est formado por los segmentos del trax y abdomen. Los segmentos tpicos llevan un par de parpodos y quetas asociadas, los que varan dependiendo del tipo de vida del poliqueto (enterrado o activo). Cada parpodo es birramoso, su rama dorsal se denomina notopodio y su rama ventral neuropodio (Figura). En algunos casos, noto o neuropodio pueden estar ausentes. Las quetas o setas en general estn compuestas por una protena compleja quitinosa; en algunos casos estn al menos parcialmente calcificadas. Algunas son internas y fuertes, o acculas de soporte de la rama parapodial. La estructura de las quetas externas vara ampliamente; pueden ser simples, aguzadas o capilares, y compuestas, con una parte basal y un apndice distal articulado por ligamentos.

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ESPECIE

GENERO

USO Fertilidad de los suelos y dieta para los peces ornamentales

Peces adultos y ms que todo para peces en reproduccin.

IMAGEN

Lumbriculus variegatus (Lumbriculidae) Tubifex (Tubificidae) LOMBRIZ DE TIERRA

OLIGO QUETOS
Pontodrilus litoralis

Dieta para peces, aves, altos contenidos nutricionales

3.3.2. TAXONOMA DE LAS ESPECIES DE IMPORTANCIA EN ACUICULTURA. Oligoquetos. Reciente anlisis cladsticos basados en datos moleculares sugieren que los oligoquetos y los hirudneos seran subclases de la clase clitelados (Clitellata). En otras clasificaciones ms tradicionales, los clitelados tiene rango de superclase y por tanto oligoquetos e hirudneos se elevan a clases. As, segn Brusca y Brusca:

Clase Oligochaeta
o

Orden Lumbriculida

Familia Lumbriculidae

Orden Moniligastrida

Familia Moniligastridae

Orden Haplotaxida

Familia Alidae Familia Megascolecidae Gnero: Pontodrilus Especie: P. ephippiger P. litoralis P. primoris Familia Tubificidae Familia Naidiade
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Poliquetos La sistemtica de los poliquetos es compleja e intrincada y dista mucho de estar resuelta, no habiendo acuerdo entre los diferentes especialistas. La antigua subdivisin entre poliquetos errantes y sedentarios est hoy superada. Los filos Pogonophora y Vestimentifera se tienden a clasificar hoy dentro de los poliquetos.

Subclase Palpata
o

Orden Aciculata

Suborden uncertain Suborden Eunicida Suborden Phyllodocida

o

Orden: Phyllodocida o Familia: Nereidae o Gnero: Neris

o

Especie: Diversicolor

Orden Canalipalpata

Suborden uncertain

Suborden Sabellida Suborden Spionida Suborden Terebellida. Poliquetos Reino: Animal Filum: anlido Clase: Polychaeta Orden: Phyllodocida Familia: Nereidae Oligoquetos Reino: Animal Filum: anlido Clase: oligoqueto Orden: haplotaxida Familia: Lombrcidae, megascolecidae Gnero: Neris Gnero: Lombricus, Eisenia, eudrillus, pontodrilus Especie: Diversicolor Especie: terrestris (de tierra comn), foetida (Californiana), eugenie (Africana), p. ephippiger p. litoralis p. primoris
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3.3.3 CICLO DE VIDA. Oligoquetos

Los espermatozoides de cada organismo pasan al clitelo del otro gusano donde se almacenan en los receptculos seminales, separan y el clitelo secreta un capullo que contiene un lquido albuminoide. Este capullo se desliza por el cuerpo hasta la cabeza y, cuando pasa por el poro genital femenino los huevos se depositan. Despus de que el capullo queda libre del gusano, sus aberturas se constrien y se forma una cpsula en forma de hueso; as, los huevos ya fecundados se convierten en los lombrices diminutas, que salen cuando se abre el capullo. Las lombrices son animales invertebrados del tipo anlidos, o sea, gusanos segmentados son hermafroditas muy prolficas; pero no se autofecundan, por tanto es necesaria la cpula, la cual ocurre cada 7 o 10 das. Luego cada individuo depositan sus huevos protegidos en una cpsula llamada cocn cada 10 das (huevo en forma de pera de color amarillento) de unos 2 mm. La cpula produce 2 cocones de la cual emergen hasta un mximo de 9 nuevas lombrices (promedio 2 a 4 lombricitas/cocn). lombricitas/cocn).

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Poliquetos

Tpicamente son dioicos, si bien hay especies hermafroditas. Su reproduccin puede ser sexual, con liberacin de gametos y fertilizacin externa o liberacin de huevos fertilizados y larva trocfora nadadora o desarrollo directo, o asexual por particin de segmentos individuales o fragmentos que se desarrollan para generar un nuevo individuo. Las tallas varan entre <1mm (intersticiales) hasta >3m (Onuphidae). El perodo de vida de los poliquetos puede ser de pocas semanas a varios aos.

3.3.4 TCNICAS DE CULTIVO. Oligoquetos Espacio rectangular de 1 a 2 metros de ancho por el largo que se desee. Aire libre o cubierto. Madera, ladrillo, bloques de cemento o cualquier otro material que sirva de contencin. Sustrato, desechos agropecuarios (estircol, rastrojos de cultivos, residuos de hortalizas y frutas y malezas).
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Para la crianza de la lombriz E. foetida, es necesario contar con algunas herramientas como pala, azadn, zaranda para separar lombrices, mangueras, PVC, substrato, un operador y carreta de mano para transporte del alimento. Es necesario dejar por lo menos una rea de una tarea (437 m2) de terreno para dedicarse a la lombricultura; utilizando los materiales disponibles que hay en la finca, como el erul (Pteridium aquilinum), postes de cn o tatascn (Perymenium grande), alambre de pas y alambre de amarre se prepara una ramada o tendal, que servir para proteger como techo las camas donde se sembrarn las lombrices. Para la crianza de la lombriz debemos tener en cuenta lo siguiente: Preparacin de arriates o camas de crianza. Preparacin del substrato. Siembra de lombrices. Manejo de arriates o camas. Cosecha de humus y lombriz. Temperatura, humedad, pH. Riego disponible Cultivo industrial El objetivo de la explotacin industrial es netamente econmico. En este sistema se intensifica la produccin y aumenta la inversin en mano de obra, ya que se necesitan varios operadores y la infraestructura a utilizar resulta cara. Hay otras alternativas de construccin, como camas al aire libre, con una proteccin a los rayos solares directos y si se hace mecanizada, deber dejarse espacio suficiente para el paso de maquinaria. camas se ubican en la misma direccin de los vientos. El terreno donde se realice la explotacin debe ser de topografa plana y con buen drenaje; alejado de otros cultivos, para evitar contaminacin por uso de productos qumicos y otras sustancias txicas. Manejo El xito del buen manejo consiste en la dedicacin e importancia que se le d al cultivo, en la revisin diaria de las camas, para asegurar las condiciones ptimas necesarias de la lombriz y la alimentacin adecuada que se le suministre.
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Generalmente las

Recordemos que de los animales que utiliza el hombre en la actividad agropecuaria, la lombriz de tierra realiza una de las labores ms beneficiosas, consumiendo los residuos vegetales y estircoles para luego excretarlos en forma de humus. Bioabono de gran importancia en la fertilidad de los suelos y al mismo tiempo que puede utilizarse en la alimentacin animal como protena, harina u alimento fresco.

Poliquetos Para la realizacin del cultivo debe ser un sistema de recirculacin de agua que consta de 3 partes principales: Instalacin del cultivo con control de temperatura y a fotoperiodo: se trata de un acuario de gran volumen que acta como depsito de amortiguacin, desde el que se distribuye el agua a las diferentes cubetas de ensayo. La iluminacin se realiza por medio de tubos fluorescentes con simulacin de condiciones de fotoperiodo. Incorpora adems sistemas de depuracin que permiten el mantenimiento de los niveles de amonio, nitritos y nitratos en un rango adecuado para el cultivo de gusanos marinos. Instalacin de cultivo estanque exterior: se vienen realizando en este estanque ensayos de capacidad de carga con objeto de establecer densidades de cultivo ptimas para el desarrollo en cautividad. Combina sistema biolgicos y fisicoqumicos para el mantenimiento de la calidad del agua, tales como filtros de grava, arena y conchas, donde las bacterias retiran materia orgnica y nutrientes, y un catalizador de urea que elimina su exceso con el agua por absorcin a finas burbujas de aire. Cmaras de incubacin y alteracin de condiciones de fotoperiodos: en estas se realizan experiencias de alteracin de los ciclos de luz a los que estn sometidos los gusanos en laboratorio, con objeto de acelerar los procesos de maduracin y puesta de los gusanos en edad reproductora.

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3.3.5 MTODOS DE COSECHA. Se deja de alimentar las lombrices por espacio de cuatro das; ellas se irn al fondo a buscar alimento, pasados los cuatro das, se coloca alimento en la primera base superficial, a los 2 3 das todas ellas estarn en una capa aproximada de 15 a 20 cm y se procede a retirar esta capa. Debe hacerse dos veces ms, para sustraer el 98% de la poblacin. El humus se cosecha cuando a ellas se les ha suspendido el alimento y se van al fondo. Se procede al tamizado de la arena de las cubetas a travs de un tamiz de 1 mm de luz de malla. Para ello, se extrae parte del agua de las cubetas de ensayo, la cual ser dispuesta en otra cubeta vaca. Sobre esta agua, se tamiza todo el sedimento de las cubetas que contienen gusanos y se separan.

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3.4 COPPODOS. Los coppodos (Copepoda) son una subclase de crustceos maxilpodos que oscilan entre 0.2 y 10 mm de largo; muchas veces microscpicos, muy abundantes tanto en agua dulce como salada. Se conocen unas 12.000 especies. En el Atlntico Sur se estima que pueden ser halladas unas 500 especies adaptadas a diferentes masas de agua y profundidades (BradfordGrieve et al., 1999). Su diversidad y distribucin son especificadas en diversos trabajos de investigacin. Los coppodos habitan en lagos, estanques, embalses, charcos, ros, aguas subterrneas y se les encuentra tambin en fitotelmatas y en ambientes semiterrestres como musgos y suelos hmedos forestales (Reid 1986). Su tamao en aguas continentales vara entre 0,3 y 5 mm, siendo la mayora de especies cercanas a 1 mm (Dussart & Defaye 2001). En aguas continentales el grupo est representado por 4 rdenes: Calanoida, Cyclopoida, Harpacticoida y Gelyelloida. El ltimo orden creado recientemente, tiene pocos (2)

representantes y nicamente en el Palertico occidental, en medio subterrneo.

3.4.1 GENERALIDADES. Las cepas ya establecidas en tubos de ensayo y en placas de agar son replicadas a medios de cultivo lquidos con Guillar F/2 para condiciones interiores y medio Guillard modificado con reactivos grado industrial para tanques exteriores. Para cada cepa se establece una rutina de control que permite determinar la pureza y obtener los conteos celulares alcanzados a nivel de 10 ml (Cepa), 100 ml (cepa de trabajo), 150 ml (cepa de escalamiento), 250 ml (primer escalado), 3 litros (segundo escalado), 20 litros (tercer escalado), 1000 litros (cuarto escalado preindustrial).
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Los coppodos son una subclase de crustceos maxilpodos de tamao muy pequeo, muchas veces microscpicos, muy abundantes tanto en agua dulce como salada Son considerados entre las alternativas de alimentacin en acuacultura, han logrado cultivos de Calanoideos (Calanus sp., Acartia sp., etc.) y de Harpacticoideos (Tigriopus japonicus). Tigriopus japonicus es un coppodo Harpacticoideo, cuyo adulto mide alrededor de 230 m. Posee un desarrollo larvario con seis estadios nauplio. Los nauplios recin closionados miden alrededor de 120 m. El estadio de copepodito est dividido en seis subestadios; el sexto estadio de copepodito es el estado adulto. Los coppodos (Copepoda) son una subclase de crustceos maxilpodos de tamao muy pequeo, muchas veces microscpicos, muy abundantes tanto en agua dulce como salada. Se conocen unas 12.000 especies.1 La gran mayora nada libremente; sin embargo algunas especies se han convertido en parsitas. Muchas de estas ltimas conservan un aspecto similar al de las formas libres al tiempo que otros han llegado al extremo de perder sus caractersticas de crustceo e incluso de artrpodo, notndose mayormente esta situacin en el caso de las hembras. Para poder clasificar estas ltimas especies dentro de los coppodos, se parte del estudio de machos jvenes, los cuales no estn muy modificados. Los coppodos carecen de caparazn, y su desarrollo se inicia a partir de una larva nauplio. Dos gneros coppodos de agua dulce muy estudiados, son Cyclops y el Diaptomu, ambos ofrecen un cuadro general del grupo bastante amplio. En el caso de las especies del gnero Cyclops su aspecto es el de un crustceo decpodo, con una porcin anterior con forma de pera que incluye la regin ceflica y los dos primeros segmentos del trax. A continuacin se encuentran tres segmentos del trax, mviles, y por ltimo el abdomen, sin apndices y que termina en una cola ahorquillada con filamentos plumosos. Tienen un solo ojo, que evolucion de dos ojos que se fusionaron, y las antenas principales, muy articuladas son mucho mayores que las secundarias. Poseen 4 pares de apndices torcicos que les sirven para nadar y vestigios de un quinto par que en otras especies de coppodos son ms notorios.

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Adicionalmente a las mandbulas y maxilas, el primer par de apndices torcicos ha evolucionado hasta convertirse en maxilas secundarias. La gran mayora de los coppodos son de cuerpo transparente, an cuando los hay con cierta coloracin como los Anomalocera. Como hecho curioso, se puede notar que algunas especies que son traslcidas llegan a colorear abundantemente el agua debido a la difraccin de la luz al pasar por sus cuerpos. Adicionalmente algunas especies marinas son luminosas por s mismas por poseer en sus cuerpos una sustancia fosforescente.

3.4.2 TAXONOMA DE LAS ESPECIES DE IMPORTANCIA EN ACUICULTURA. Se han logrado cultivos de importancia en la acuicultura de Calanoideos

(Calanus sp., Acartia sp., etc.) y de Harpacticoideos (un Tigriopus japonicus). Reino: Animalia Filo: Artrpoda
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Subfilo: Crustcea Clase: Maxillopoda Subclase: Coppoda (H. Milne-Edwards, 1840) Infraclase: Neocopepoda (Huys & Boxshall, 1991) Superorden: Gymnoplea( Giesbrecht, 1882) , Superorden: Podoplea

(Giesbrecht, 1882) Orden:Calanoida (Sars, 1903); Orden Harpacticoida (Sars, 1903) Especie: Calanus sp., Acartia sp.,; Harpacticoideos: Tigriopus japonicus

3.4.3 IMPORTANCIA Y USOS. Los coppodos son crustceos de pocos milmetros que son considerados entre las alternativas de alimentacin en Acuacultura. Para la nutricin de larvas de peces y camarones. Existe an un largo camino por recorrer en la investigacin encaminada a la produccin en cultivo de diferentes especies de coppodos, tanto bentnicas como fltoplanctnicas, pues la lista de especies alternativas se encuentra en proceso de experimentacin en laboratorio. Es importante recordar que en el ambiente marino los coppodos ocupan un importante papel en las poblaciones que conforman el zooplancton, pues es este grupo uno de los recursos de alimentacin ms importantes para peces y crustceos. Los coppodos de agua dulce son, en fin, un grupo con caractersticas ecolgicas muy interesantes; su importancia es incuestionable y ello contrasta con el escaso conocimiento que an se tiene sobre el grupo principalmente en zonas tropicales. En Mxico, varios estados del pas no cuentan ni siquiera con un solo registro faunstico de coppodos, y de manera similar ocurre en muchos pases. Se han realizado algunos trabajos empleando diferentes especies de coppodos en el control biolgico del mosquito Aedes (Stg) aegypti, empleando incluso tcnicas muy avanzadas (microscopia electrnica de rastreo) en pases de Centroamrica, el rea del Caribe, Amrica del Sur (sobre todo Brasil) as como en Viet Nam y Tailandia, abarcando tambin el empleo de los coppodos en el control de Aedes albopictus

(Diptera:Culicidae)7,8. Estos resultados demuestran que los coppodos podran ser una opcin interesante para el control de zancudos, tomando en cuenta que la reproduccin de estos animales es fcil y barata.
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En condiciones de cultivo se ha alimentado con una gran variedad de microorganismos (bacterias, fitoplancton) detritus o cualquier otro material orgnico de pequeo tamao. Una de las ventajas que presenta sobre Artemia es su menor tamao, ya que un nauplio recin eclosionado mide entre 5565m y uno de Artemia mide entre 422-517m de longitud. La seleccin del alimento determinar el contenido nutricional que pueda aportar esta especie para la alimentacin de larvas de peces y crustceos. Las dificultades para su cultivo masivo no son en razn de un estricto control de parmetros ambientales como la temperatura y salinidad, pues como ya se mencion anteriormente, esta especie es muy resistente a variaciones externas del medio ambiente.

3.4.4. CICLO DE VIDA. Los coppodos son tan abundantes en el agua de mar, que cualquier muestra de plancton tiene siempre ejemplares de este grupo. Estn distribuidos a lo largo de todas las latitudes, incluyendo las antrticas. Muchas de las especies cuentan con apndices plumosos que en muchos casos pueden llegar a superar el tamao del animal hasta por 4 o 6 veces. En agua dulce tambin estn ampliamente distribuidos, en forma tan amplia como los cladceros. Dentro de los coppodos hay una gran cantidad de especies parsitas, ms que en ningn otro grupo de crustceos. Son muy conocidos los llamados piojos de los peces de la familia de los calgidos, que se caracterizan por el cuerpo ancho y deprimido que les facilita adherirse a su husped fcilmente. Una particularidad de los calgidos, es que en sus primeras etapas de desarrollo nadan libremente, y solo inician su etapa parasitaria cuando son adultos jvenes. Permanecen parsitos sin facultades natatorias durante un perodo de tiempo determinado por etapas de crecimiento y apareamiento y por ltimo retornan a la vida libre, recuperando sus capacidades natatorias. Otro parsito de costumbres curiosas es el Lernacea, cuyas larvas que nacen en forma de nauplio e inician su vida parsita sobre un pez de la familia de los pleuronctidos, como el lenguado; sus apndices se reducen hasta quedar

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convertidos en meros muones. Cuando llega la poca de apareamiento, el animal se desprende del husped. Despus de aparearse los machos mueren, y las hembras buscan un nuevo husped, generalmente un bacalao o una merluza, se fijan en las branquias e inician un proceso de degeneracin tal, que llegan a perder totalmente los apndices hasta quedar convertidas en sacos sin ninguna apariencia de crustceos. Tigriopus japonicus es un coppodo Harpacticoideo, cuyo adulto mide alrededor de 230 m. Posee un desarrollo larvario con seis estadios nauplio. Los nauplios recin eclosionados miden alrededor de 120 m. El estadio de copepodito est dividido en seis subestadios; el sexto estadio de copepodito es el estado adulto. En la Figura se muestra el desarrollo de este organismo.

Figura 1: Estadios de crecimiento de Tigriopus japonicus (Koga, 1979) 1 6: Estadios de Nauplio 1 6 7 15: Estadios de copepodito y adulto 7 9: Copepodito 1 3
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10 11: Copepodito 4 5 (hembra) 12: Adulto hembra 13 14: Copepodito macho 4 5 15: Adulto macho

3.4.5 TCNICAS DE CULTIVO. El cultivo de coppodos an no disponde de tcnicas sencillas para considerarlos posibles substitutos de la Artemia. La principal especie que se ha cultivado masivamente es Tigriopus japonicus, que se ha utilizado para la nutricin de larvas de peces y camarones (Kitajima et al., 1980a,b; Koga, 1979 en: Hirata et al., 1985). Otras especies que se han cultivado en forma masiva son Tiste, Amphiascella, Calanus etc., pero la que ha ofrecido las mayores ventajas para su produccin masiva es T. japonicus por su resistencia a cambios ambientales, como son la temperatura (1027C), salinidad (018), concentracin y tipo de alimento, etc. A continuacin se brinda la informacin necesaria sobre el cultivo de esta especi. En condiciones de cultivo se ha alimentado con una gran variedad de microorganismos (becterias, fitoplancton) detritus o cualquier otro material orgnico de pequeo tamao. En la Tabla 32 se muestran las diferentes dietas que se han utilizado en el cultivo de T. japonicus. La seleccin del alimento determinar el contenido nutricional que pueda aportar esta especie para la alimentacin de larvas de peces y crustceos. Las dificultades para su cultivo masivo no son en razn de un estricto control de parmetros ambientales como la temperatura y salinidad, pues como ya se mencion anteriormente, esta especie es may resistente a variaciones externas del medio ambiente. Las dificultades para su cultivo estn en relacin con el sustrato, ya que esta especie es bentnica, por lo que se ha experimentado con diferentes formas y materiales de sustrato artificial. En la Figura 23, se muestran algunos de estos materiales probados. Los mejores resultados de produccin se han encontrado cuando se utiliza como sustrato alguna especie de macroalga (Ulva, Enteromorpha, Porfira, etc.), pues no slo juegan el papel de sustrato sino que aportan material de alimento y constituyen en los sistemas de cultivo un filtro biolgico que purifica el agua del mismo. Investigaciones de Koga (1979) consideran que la temperatura ptima en cultivo es de 20C.
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En el cultivo de T. japonicus y de otros coppodos en general, es importante proporcionar la temperatura ptima, el pH, el tipo de alimento y su concentracin ptima, as como la preparacin de hbitats adecuados (para aquellas especies que as lo requieran). Adulto macho

Figura 2: Esquema de tres diferentes tipos de sustrato para el cultivo masivo de Tigriopus japonicus. A. Estructura tipo panal 1. Base de polivinil transparente 2. Tubos aereadores B. 1. Lmina acanalada de polivinil 2. Lnea de acero cubierta con tubo de silicn 3. Aereador C. 1. Tela de mosquitero de plstico (luz de 1.6 mm) 2. Aereador
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3.4.6 CULTIVOS CONTINUOS. Un sistema de produccin continuo para el tonsa de Acartia del copepodo del calanoid ha sido descrito por Stttrup y otros. Consiste en tres unidades de la cultura: tanques de la base, tanques del crecimiento y tanques de la cosecha. Los tanques de la base (200 l tanques grises del PVC: el 1500 los 50cm) se funciona continuamente, sin importar demandas de la produccin, y los huevos producidos se utilizan para ajustar la accin de la poblacin. Estos tanques se controlan y se guardan muy bien bajo condiciones higinicas ptimas: usar el agua de mar filtrada (de 1 m) (salinidad 35 g.l-1) y a fed con las algas de Rhodomonas (8.108.days-1) produjo bajo condiciones de interior semiestriles. Las temperaturas se guardan en 16-18C y una aireacin apacible del fondo se proporciona. Las concentraciones del adulto con un cociente de los varones de 1:1 a las hembras son mantenidas en menos que 100.l-1 ajustando una vez por semana con los copepodites de la etapa IV-V. Aproximadamente 10 l del agua de la cultura se sacan con sifn diariamente del fondo de los tanques (que contienen los huevos), y son substituidos por el agua de mar nueva, limpia. Los huevos son recogidos de las aguas efluentes por el uso de un tamiz de 40 m; produccin que hace un promedio de 95.000 eggs.day-1, y

correspondiendo a un ndice de la fecundidad de 25 eggs.female-1.day-1. Las culturas de la base son vaciadas y las dos a tres pocas limpiadas por ao, recogiendo a los adultos en un tamiz de 180 m y transfirindolos a los tanques limpiados y desinfectados. Despus de 21 das, recogen usando un tamiz de 180 m y agregaron a los adultos a los tanques de la base o de la cosecha. Cosechando los tanques son solamente funcionando una vez que el criadero de los pescados comience a funcionar. Las culturas se mantienen en 450 l tanques negros bajo mismas condiciones como se describe anteriormente. Cada tanque recibe una cantidad diaria de 16.108 clulas de Rhodomonas, cosechada de culturas de la floracin. Se vacian estos tanques y ms regulary limpiada que los tanques comunes. Para facilitar cosechar solamente del nauplii o copepodites de una etapa especfica (dependiendo de los requisitos), los huevos se cosechan diariamente y se transfieren a los tanques el tramar; la aireacin nivela dentro
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de estos tanques que son aumentados para mantener la saturacin del oxgeno del 80%. Nauplii del tamao apropiado (y del fed en Isochrysis) es cosechado en una pantalla de 45 m y por as que haciendo canibalismo por los adultos del copepod tambin se reduce al mnimo. El escalamiento para arriba de la operacin a una produccin de 250.000 nauplii.day-1 requiere generalmente tres tanques de la cosecha y un perodo de la cultura de cerca de dos meses.

3.4.8 MTODOS DE COSECHA. Debido a su fototactismo negativo, son relativamente fciles de cosechar con el empleo de una fuente de luz en el lado opuesto de los tamices estos de tamao adecuado para la seleccin adecuada de los coppodos. Tigriopus puede ser cosechado durante 89 das en las densidades mximas de 22.000 animals.l-1; recogiendo a los adultos en un tamiz de 180 m y transfirindolos a los tanques limpios y desinfectados.

3.5 CULTIVO DE ARTEMIA. Existen muchas especies de artemias, las ms conocidas son Artemia franciscana y la Artemia salina, siendo el nombre de esta ltima el utilizado errneamente por algunas personas para referirse a las artemias en general y sobre todo a la especie que se comercializa a nivel mundial que es Artemia franciscana. La artemias adultas usualmente miden entre 1 y 1,45 centmetros, sin embargo, algunas especies Artemia parthenogenetica pueden medir unos 3 mm, segn la edad y las condiciones ambientales. En general, Cuanto mayor concentracin salina exista en las aguas donde habita, menor es su tamao. Los machos tienen en la cabeza unas estructuras que sobresalen y que se sirven para sujetar a la hembra durante el apareamiento; su vida suele ser ms corta que la de las hembras. Las hembras tienen unas antenas sencillas.

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3.51 BIOLOGA Y ECOLOGA DE LA ARTEMIA. Su reproduccin es o por partenognesis o sexual dependiendo de la hostilidad del medio y la especie. Su progenie puede darse en forma ovovivpara y ovpara, siendo llamados sus huevos quistes. Cuando aumenta la salinidad del agua o existe escasez de comida suele darse la reproduccin ovpara, pudiendo en este caso resistir la deshidratacin durante aos y temperaturas de entre -273C y 60C debido a que los embriones se encuentran en un estado de diapausa. Los quistes estn rodeados por una sustancia llamada corion que los protege del exterior. Las larvas de artemia se llaman nauplios. Los quistes son transportados por el viento, aves u otros animales y si alcanzan zonas donde se den las condiciones adecuadas, salen de su letargo. Habitualmente se encuentran en ros salinos con hasta 330 gramos de sal por litro o en lagos endorreicos, como Artemia salina en el Mar Caspio. Nunca en mares u ocanos. Al residir en estos lugares, evita a sus depredadores, especialmente peces y sus poblaciones suelen ser muy abundantes. Para tolerar la salinidad, cuentan con sistemas para regular la presin osmtica y aumentan la sntesis de hemoglobina, para soportar bajos niveles de oxgeno. Las artemias tienen fototropismo positivo, como las plantas, sienten atraccin hacia la luz.

3.5.2. CLASIFICACIN Y SISTEMTICA. Phyllum: Artrpoda. Clase: Crustacea. Subclase: Branquiopoda. Orden: Anostraca. Familia: Artemiidae. Gnero: Artemia, Leach 1819. El nombre especfico Artemia Salina (Linnaeus 1758) no es taxonmicamente vlido en la actualidad (Bowen y Sterling, 1978). Experiencias de cruzamiento entre diferentes poblaciones de Artemia han demostrado el aislamiento reproductivo de algunos grupos de poblaciones (Barigozzi, 1974; Clark y Bowen, 1976) y sto ha llevado al reconocimiento de especies hermanas (sibling) a las que se les han dado nombres diferentes (Bowen et al., 1978).
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Entre las cepas bisexuales o zigogenticas de Artemia (poblaciones compuestas por individuos machos y hembras) se han descrito hasta la fecha 6 especies hermanas: Artemia-salina:-Lymington,-Inglaterra-(extinguida). Artemia-tunisiana:-Europa. Artemia-franciscana:-Amrica(Norte,CentroSur). Artemia-persimilis:-Argentina. Artemia-urmiana:-Irn. Artemia-monica:-Mono-Lake,-CA-USA. Algunas cepas partenogenticas (poblaciones compuestas exclusivamente por hembras; no siendo necesaria la fertilizacin de los huevos para la reproduccin) han sido encontradas en Europa y Asia. Existen importantes diferencias genticas (por ejemplo en el nmero de cromosomas y en el tipo de insoenzimas) que hacen muy confusa la clasificacin sistemtica conjunta bajo el nombre de Artemia partenogentica (Abreu-Grobois y Beardmore, 1980). Por esta razn fu sugerido en el Primer Simposio Internacional sobre Artemia (Corpus Christi, TX-USA, Agosto de 1979) que salvo que las especies sibling de cepas partenogenticas puedan ser identificadas (por medio de pruebas de entrecruzamiento con hermanas conocidas), y hasta que la especiacin de estos animales sea comprendida de forma ms clara, solamente se use la denominacin Artemia. Estn catalogadas las siguientes especies de Artemia: Artemia franciscana - Norte Amrica, Caribe, Islas del Pacfico, Australia. Artemia gracilis - Amrica. Artemia monica - California. Artemia parartemia Artemia parthenogenetica - Europa, frica, Asia, Australia. Artemia persimilis - Argentina. Artemia pollicaris Artemia salina - En todos los continentes excepto Antrtida. Artemia sinica - Asia Central, China. Artemia tibetiana - Tbet, China. Artemia tunisiana - Europa, Norte de frica. Artemia urmiana - Irn.
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3.5.3 MORFOLOGA Y CICLO DE VIDA. La Artemia es capaz de sobrevivir condiciones ambientales extremas. Con la interrupcin de la condicin de diapausa y con la transferencia de los quistes a condiciones ptimas de incubacin, la gstrula reanuda su desarrollo hasta que sta emerja. La primera etapa larval de la Artemia (liberada como tal por ovoviviparidad reproduciendo hembras o incubando fuera de los quistes), tambin llamada Instar I, tiene un color castao-anaranjado (reserva acumulada de vitelo) y cuyas medidas promedian 0,5 mm de longitud. Los aspectos tpicos de esta etapa son los 3 pares de extremidades en la regin frontal, cada una de ellas con funciones especficas: las primeras antenas (o antnulas teniendo una funcin sensorial), las segundas antenas (con funcin locomotora y filtradora) y las mandbulas (con funcin de captura de alimento). El lado ventral de la larva est cubierto por un gran labro que tambin est involucrado en el proceso de captacin alimentaria. Un ocelo impar rojo se encuentra ubicado en la regin frontal entre las primeras antenas. La larva Instar I es incapaz de tomar el alimento, ya que su sistema digestivo no es an funcional (la boca y el ano estn todava cerrados). Despus de alrededor de 12 horas el animal muda en la segunda etapa larval (Instar II). A partir de esta etapa el sistema digestivo es funcional y pequeas partculas de tamao que oscilan entre 1-40 micras pueden ser ingeridas (e.g. clulas de algas, bacterias, detrito). La larva de Artemia crece a la etapa adulta mediante una serie de 15 mudas. Durante este desarrollo larval las extremidades en la regin frontal continuamente se diferencian resultando en, la reduccin gradual de las mandbulas larvales, finalmente reemplazadas por las mandbulas del adulto y por un dimorfismo sexual de las segundas antenas. En los machos stas se desarrollan en agarraderas musculares en forma de gancho que desempearn en el futuro un rol pre-copulatorio. Las antenas de las hembras se degeneran en pequeos apndices sensoriales. En la Artemia adulta el aparato filtrador alimentario de la larva es reemplazado por las maxilas, las maxilulas y 11 pares de toracpodos que se desarrollan en la regin del tronco. Las ltimas estructuras son multi-funcionales y juegan un

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rol no solamente en la captacin alimentaria pero tambin en la locomocin y respiracin. Dependiendo de la cepa y de las condiciones ambientales, la etapa de actividad reproductiva se alcanza en un perodo de crecimiento de 2-3 semanas. La Artemia adulta posee entonces una longitud 10-20 mm (los animales ms grandes son encontrados dentro de las poblaciones

partenogenticas). Los machos tienen un par de penes en la parte posterior de la regin del tronco mientras que las hembras pueden ser fcilmente reconocidas por el distintivo saco embrionario o tero que se ubica inmediatamente detrs el undcimo par de toracpodos. El par de ovarios se sitan detrs los toracpodos sobre ambos lados del tracto digestivo lineal. La pre-copulacin en la Artemia bisexual madura es iniciada por el macho con el apego a las hembras con sus agarraderas musculares. En esta "posicin de equitacin" los animales pueden nadar conjuntamente por largos perodos de tiempo mientras ellos mueven sus toracpodos en un golpe sincrnico. La real copulacin con la consecutiva fertilizacin consiste de un rpido reflejo del macho en doblarse hacia adelante e introduciendo un pene en la apertura del tero. En la Artemia partenogentica (poblaciones hembras) la fertilizacin no tiene lugar y el desarrollo embrionario comienza tan pronto como los huevos alcanzan el tero.

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a) Artemia salina (Ivleva et al., 1973): A) Hembra, B) Cabeza de macho, C) Cabeza de hembra, 1. Ojo nauplio, 2. Antenuelas, 3. Antena, 4. Apndice torxico, 5. Saco ovigero, 6. Segmento abdominal, 7. furca, 8. Ojo pedunculado

3.5.4 ECOLOGA Y DISTRIBUCIN NATURAL. Las poblaciones de Artemia se encuentran distribuidas en ms de 300 lagos salinos naturales o salinas de construccin artificial a lo largo de todo el mundo. Diferentes cepas geogrficas se han adaptado a unas condiciones que fluctan dentro de un amplio margen de temperatura (635C) y composicin inica del biotopo (aguas ricas en cloruros, sulfatos y carbonatos). Esta especie se desarrolla perfectamente en agua de mar sin embargo, no posee ningn mecanismo de defensa contra los predadores, lo que la convierte en una presa fcil de otras especies carnvoras (peces, crustceos o insectos). A pesar de ello y por medio de su adaptacin fisiolgica a biotopos con una elevada salinidad, la artemia ha encontrado un eficaz mecanismo ecolgico de defensa contra la predacin, as estos animales poseen el sistema osmorregulatorio ms eficiente conocido en todo el reino animal; adems son capaces de sintetizar eficazmente pigmentos respiratorios (hemoglobina) y poder hacer frente a los bajos niveles de oxgeno disuelto que existen en los ambientes hipersalinos; finalmente, estos animales tienen la capacidad de producir quistes en fase de latencia cuando las condiciones ambientales ponen en peligro la supervivencia de la especie.

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Como consecuencia de todo ello, la artemia no aparece ms que a salinidades donde sus predadores no pueden sobrevivir (por encima de 70). La artemia muere a salinidades prximas a la saturacin en NaCl (por encima de 260), a causa del extremo stress fisiolgico y de la toxicidad del agua en esas condiciones (causada por los drsticos cambios inicos en su composicin). La artemia es un filtrador no selectivo y se alimenta tanto de materia orgnica particulada (ej. detritos biolgicos procedentes de aguas de manglares) como de organismos vivos de tamao apropiado (microalgas y bacterias). De hecho, y debido a la falta de predadores y competidores por el alimento, la Artemia produce, a menudo, grandes monocultivos cuya densidad est

fundamentalmente regulada por la disponibilidad de alimento. La reproduccin ovovivpara (puesta de nauplios) se da principalmente a bajas salinidades, mientras que los quistes (reproduccin ovpara) se producen a salinidades por encima de 150). Los quistes son la causa de la distribucin mundial de artemia. Tanto el viento como las aves acuticas (especialmente los flamencos) estn considerados como los vectores naturales ms importantes de la dispersin. No obstante, el hombre ha sido, en los ltimos tiempos, el responsable de algunos transplantes en Sudamrica y Australia, tanto para producir mejoras en la industria salinera como para su uso en acuicultura. La presencia natural de Artemia est confinada a biotopos donde las salinidades son suficientemente altas como para impedir la presencia de predadores o en lugares donde las bajas temperaturas invernales (cuando las salinidades disminuyen por efecto de las fuertes lluvias) aseguran un estado no metablico de los quistes hidratados (el estado de diapausa del cual no ha sido eventualmente desactivado todava). Los climas con un exceso de agua, ej. Aquellos con una marcada distincin entre la estacin seca y la estacin hmeda, pueden proporcionar condiciones adecuadas para la presencia de artemia durante la estacin seca (como por ej. es el caso de los miles de hectreas de salinas en el Sudeste Asitico), aunque no puede perdurar a causa de la predacin en la poca de lluvias (salinidades bajas y temperaturas elevadas).

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3.5.5 MORFOLOGA Y METABOLISMO DE LOS QUISTES. Los quistes de artemia (brine shrimp o nauplii), en cierta forma, son huevecillos de crustceos. Los huevecillos de camarn se producen en perodos de alta salinidad, almacenamiento de alimento para stos, niveles bajos de oxgeno y altas temperaturas continuas. En condiciones ptimas, las hembras pueden producir camaroncillos vivos. Los huevecillos pueden recolectarse y pueden permanecer latentes por muchos aos siempre y cuando se mantengan secosy sin oxgeno. Cuando estos quistes o huevecillos se ponen en agua salada, stos se rehidratan y eclosionan. El embrin es una fase indiferenciada de gstrula que se encuentra en un estado completamente ametablico con niveles de agua inferiores al 10%; por lo que su metabolismo se halla en una fase de parada reversible. La viabilidad del embrin se ve afectada cuando los niveles de agua exceden del 10% (comenzando la actividad metablica), y cuando los quistes son expuestos al oxgeno (por ej. ponindolos al aire); en presencia de radiaciones csmicas de oxgeno se produce la formacin de radicales libres que destruyen los sistemas enzimticos especficos de los quistes ametablicos de Artemia.

3.5.5.1 MORFOLOGA DE LOS QUISTES. La cscara del quiste est formada de tres estructuras: El corion: Capa dura formada de lipoprotenas impregnadas de quitina y hematina (= producto de descomposicin de la hemoglobina; la concentracin de hematina determina el color de la cscara, variando de un marrn plido a un marrn oscuro). La principal funcin del corion es la de proporcionar una proteccin adecuada al embrin contra rupturas mecnicas y radiaciones (ej. las radiaciones ultravioletas de los rayos solares). Esta capa puede ser completamente eliminada (disuelta) por un tratamiento oxidativo a base de hipoclorito (= decapsulacin del quiste) La membrana cuticular externa: Protege al embrin de la penetracin de molculas mayores que la molcula del CO2 (= membrana compuesta de varias capas y con una funcin de filtro muy especial, actuando como barrera de permeabilidad).

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La cutcula embrionaria: Una capa transparente y altamente elstica que queda separada del embrin por la membrana cuticular interna (que se transforma en membrana de eclosin durante el proceso de incubacin).

3.5.5.2 DESARROLLO DE LOS QUISTES. El primer estado larvario (tambin llamado estado I) mide entre 400 y 500 micras de longitud, tiene un color pardo anaranjado (por acumulacin de reservas vitelinas) y posee tres pares de apndices: el primer par de antenas (tambin llamadas antnulas y que tienen una funcin sensorial) el segundo par de antenas (con funcin locomotora y filtradora) y las mandbulas (con una funcin de toma de alimento). Un nico ocelo de color rojo tambin llamado ojo nauplial se encuentra situado en la cabeza entre el primer par de antenas. La cara ventral del animal se encuentra cubierta por un amplio labro que interviene en la toma de alimento (transfiriendo las partculas desde las setas filtradoras hasta la boca). El estado larvario I no se alimenta ya que su aparato digestivo no es todava funcional (permaneciendo an cerrados la boca y el ano).

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Tras aproximadamente 24 horas, el animal muda al segundo estado larvario (tambin llamado estado II). Pequeas partculas alimenticias (tales como clulas de microalgas, bacterias, detritus) con un tamao que vara entre 1 y 40 micras son filtradas por el segundo par de antenas, siendo entonces ingeridas por un aparato digestivo ya funcional. La larva contina su crecimiento apareciendo diferenciaciones a lo largo de las 15 mudas. As van apareciendo unos apndices lobulares pares en la regin torcica que se diferenciarn posteriormente en toracpodos, se desarrollan ojos complejos laterales a ambos lados del ojo nauplial. Desde el estado X en adelante, se producen importantes cambios tanto morfolgicos como funcionales, por ejemplo: las antenas pierden su funcin locomotriz y se transforman en elementos de diferenciacin sexual. Los futuros machos desarrollan unos apndices curvados y prensiles mientras que las antenas de las hembras degeneran en apndices sensoriales. Los toracpodos estn ya completamente formados y presentan 3 partes funcionales: los telopoditos y endopoditos con acciones locomotrices y filtradoras y los exopoditos que actan como branquias. Los adultos de

artemia miden hasta 10 mm de longitud en las poblaciones bisexuales y hasta 20 mm en las poblaciones partenogenticas. Los adultos se caracterizan por un cuerpo alargado con dos ojos complejos pedunculados, un aparato digestivo lineal, unas antnulas sensoriales y 11 pares de toracpodos funcionales. El macho posee un par de piezas prensiles musculadas muy caractersticas (segundo par de antenas) en la regin ceflica mientras que en la parte posterior del trax se puede observar un par de penes. La hembra de artemia no tiene apndices distintivos en la regin ceflica, pero puede ser fcilmente reconocida por el saco de puesta o tero que est situado inmediatamente detrs del undcimo par de toracpodos. Los huevos se desarrollan en dos ovarios tubulares situados en el abdomen. Una vez maduros, tienen forma esfrica y se desplazan hasta el tero a travs de dos oviductos (tambin llamados sacos laterales). La precpula6 de los

adultos se inicia cuando el macho sujeta a la hembra entre el tero y el ltimo par de toracpodos, con sus antenas curvadas. Las parejas pueden nadar de esta forma durante largo tiempo en lo que se conoce como posicin de monta (riding position), para lo cual mueven sus toracpodos de forma sincrnica.
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La cpula es un rpido acto reflejo: La parte ventral del macho se dobla hacia delante y uno de los penes es introducido en la abertura del tero fertilizando los huevos. En el caso de las hembras partenogenticas la fertilizacin no tiene lugar y el desarrollo embrionario comienza tan pronto como los huevos han llegado al tero.

3.5.5.3 METABOLISMO DEL DESARROLLO. Los quistes secos son altamente higroscpicos, incorporando agua a gran velocidad, por ejemplo en las primeras horas el volumen del embrin hidratado aumenta ms de un 100%. Una vez completamente hidratado (asimilacin del 140% de agua) se puede iniciar el metabolismo activo a condicin de que los quistes estn suficientemente iluminados. El efecto activador de la luz es esencial para que comience el metabolismo de la mayora de los quistes. A intensidades de luz demasiado bajas, la tasa de eclosin se retrasa o simplemente no se produce.
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El metabolismo aerbico en el embrin enquistado asegura la conversin de la trealosa, como carbohidrato de reserva, en glicgeno (como fuente de energa) y glicerol que son acumulados por el embrin en la membrana cuticular externa. El incremento en la concentracin de un producto altamente higroscpico como es el glicerol, ocasiona un mayor aumento en la asimilacin de agua por el embrin a travs de la membrana cuticular externa. Como consecuencia de este fenmeno se produce un aumento de la presin osmtica en el interior de la membrana cuticular externa hasta que se alcanza un punto crtico, momento en el cual se produce la ruptura de esta membrana y de la cscara del quiste (= breaking). La ruptura de la cscara va acompaada de la liberacin de todo el glicerol al medio de cultivo. Dicho de otro modo, el metabolismo de los quistes de Artemia, con anterioridad a la ruptura, es un sistema regulatorio hiperosmtico trealosa-glicerol. Esto significa que la ruptura se puede producir en ausencia de sales y que a medida que aumentan los niveles de salinidad en el medio de eclosin, se necesitan mayores concentraciones de glicerol para alcanzar el punto crtico de presin osmtica necesario para que se produzca la ruptura de la cscara (por diferencia entre la presin osmtica dentro y fuera del quiste). De esta forma cuanto mayor es la salinidad en el medio, mayor cantidad de glicerol tiene que ser producido, alargndose con ello el perodo de eclosin y de ruptura y disponiendo de menos reservas energticas para el nauplio

3.5.5.4 CRITERIOS DE SELECCIN. Es importante mencionar que a salinidades bajas (100 g/l), existe alta reproduccin. Este dato debe considerarse, pues permite un reclutamiento continuo, pudiendo partir de una pequea poblacin, se puede obtener en pocas semanas producciones altas. A salinidades muy altas no hay reclutamiento, se gener la produccin de quistes acompaada de la muerte de los adultos. La produccin de quistes no slo se desencadena por altas salinidades, sino por alta temperatura y desecacin, niveles txicos de iones (K, Ca, etc.). La artemia es un organismo osmoregulador, por lo que dentro de su cuerpo la salinidad es baja y deshecha constantemente sales.

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3.5.6 DESCAPSULACIN Y ECLOSIN DE ARTEMIA. Eclosin de nauplios; no siempre es posible la separacin de los nauplios de los restos de la eclosin, pero es necesario la separacin ya que estos son la causa de perturbaciones digestivas y enfermedades infecciosas en los jvenes alevines y estadios larvarios de crustceos y peces. La produccin de nauplios de Artemia por eclosin de quistes es una rutina ampliamente conocida. El proceso consiste en tres fases: la desinfeccin de los quistes, la incubacin de los quistes y la recoleccin de los nauplios. Desinfeccin de los quistes Debido a las grandes cargas bacterianas reportadas en los quistes de Artemia, deben ser desinfectados en una solucin de cloro por 20 minutos (densidad de quistes: 50 g.l-1, concentracin de cloro: 200 ppm de producto activo). Despus de la desinfeccin, los quistes se enjuagan con agua dulce y son transferidos al medio de incubacin. Incubacin de los quistes Se pone los quistes previamente desinfectados en agua de mar en un tanque transparente de forma cilindro-cnico, con aireacin suficiente para

mantenerlos en suspensin. La densidad de los quistes incubados no debe sobrepasar los 2 g.l-1. La temperatura se mantiene constante de preferencia en el rango de 28-30 C y el pH debe ser superior a 8. La iluminacin es continua, con una intensidad en la superficie del medio de incubacin de no menos de 2,000 lux. Recoleccin de los nauplios eclosionados Despus de 24 horas de incubacin la aireacin y la iluminacin son interrumpidas y se cubre el tanque con una tapa opaca. Despus de 5-10 minutos las cscaras de los quistes vacos flotan en la superficie y la mayora de los nauplios se concentran en el fondo del tanque de donde son cosechados. Una segunda cosecha se efecta despus de otros 5-10 minutos. Con esta rutina se recoge virtualmente todos los nauplios eclosionados y se evita la contaminacin por las cscaras de quistes vacos. Decapsulacin de quistes de artemia Ilustracin: produccin de nauplios de artemia, Descapsulacin La descapsulacin de los quistes de Artemia consiste en la eliminacin completa de la capa exterior (corin), mediante el uso de una solucin concentrada de hipoclorito de cloro.
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Adems de resolver el problema de la separacin de nauplios y cscaras de quistes durante la recoleccin de los nauplios recin eclosionados; la descapsulacin ofrece otras ventajas: desinfeccin de los quistes,

mejoramiento de la eclosin, disponibilidad de partculas alimenticias de menor tamao y ms nutritivo que el nauplio.

3.5.6.1. MTODOS DE DESCAPSULACIN. El mtodo de decapsulacin conlleva los siguientes pasos: hidratacin de los quistes; tratamiento con la solucin decapsulante; lavado y desactivacin de los restos de cloro activo; uso inmediato o deshidratacin para su almacenamiento 1. Hidratar el huevo de artemia una hora con aereacin. 2. Cerrar el aire de la incubadora y dejar reposar unos minutos. Los huevos que sedimenten sacarlos con un tamiz y los que floten desecharlos. 3. Pasar la artemia a la solucin descapsulante de siete a diez minutos como mximo. Evitar que suba la temperatura a ms de 35C (al terminar se ve el quiste de color anaranjado y transparente al microscopio). 4. Regresar los huevos al tamiz y lavarlos con agua de la llave hasta que pierdan el olor a cloro (unos diez minutos). 5. Lavar los quistes con HCl .1 normal (18 ~ 20 segundos). 6. Regresar la artemia al tamiz y lavarla con agua de la llave unos cinco minutos. 7. Pasar los huevos a la incubadora con agua de mar y esperar la eclosin en 24 horas.

3.5.6.2 HIDRATACIN DE LOS QUISTES. Una eliminacin completa del corion se puede lograr nicamente cuando los quistes son esfricos; en la mayora de las cepas la hidratacin completa se logra tras 2 horas de incubacin en agua dulce o salada a 25C (el tiempo de hidratacin se incrementa cuando disminuye la temperatura y aumenta la salinidad). Se recomienda la utilizacin de los mismos recipientes, con fondo en forma de embudo usado para la eclosin con el fin de conseguir un

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hinchamiento homogneo de los quistes por medio de un burbujeo de aire desde el fondo del tanque. Tan pronto como todos los quistes estn hidratados, transferirlos a la solucin de hipoclorito, ej. Recoger los quistes sobre un tamiz de 125 micras, lavar eventualmente para eliminar las impurezas y escurrir el exceso de agua. Una hidratacin excesivamente prolongada antes de someter los quistes al tratamiento de hipoclorito parece afectar drsticamente la tasa y la eficiencia de eclosin de los quistes decapsulados. Los quistes hidratados que no puedan ser tratados inmediatamente podran ser conservados durante algunas horas en el frigorfico (04C).

3.5.6.3 TRATAMIENTO CON LA SOLUCIN DESCAPSULANTE. Dos tipos de hipoclorito pueden ser utilizados, leja (NaClO) o polvo blanqueador (Ca (ClO)2). La actividad de este ltimo producto suele venir indicada en su etiqueta comercial (generalmente, el 70% de actividad en peso). La actividad de las soluciones de NaClO se puede determinar por varios mtodos. El mtodo ms sencillo es la determinacin del ndice de refraccin, a condicin que la solucin sea reciente o que haya sido conservada adecuadamente, por ej. Con un refractmetro. El peso de producto activo en el volumen de la solucin decapsuladora por gramos de quistes secos a tratar es idntico en ambos hipocloritos, (0.5 g de producto activo por gramo de quistes y 14 ml de solucin decapsuladora por gramo de quistes). El producto alcalino usado en ambos tratamientos (para subir el pH de la solucin decapsuladora hasta 10) es diferente: en el caso de NaClO se aaden 0.15 g de NaOH industrial (= 0.33 ml de una solucin al 40%) por gramo de quistes, mientras que en el caso de Ca (ClO)2 se aaden 0.67 g de Na2CO3 0.4 g de CaO. Las soluciones decapsuladoras se debern preparar con agua de mar y tendrn que ser enfriadas (eventualmente con la adicin de hielo) hasta obtener temperaturas de trabajo de 15 a 20C. Ejemplos prcticos para la preparacin de soluciones decapsuladoras usando bien leja, bien polvo blanqueador como fuente de hipoclorito, estn descritos en la Tabla X.
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Para la solucin decapsuladora a base de Ca (ClO)2 es esencial disolver primero el polvo blanqueador antes de aadir el CaO o el Na2CO3. Tras mezclar durante 10 minutos, ej. por medio de una aireacin fuerte, se dejar sedimentar la solucin, utilizando solo el sobrenadante. El filtrado y los quistes hidratados son transferidos a la solucin decapsuladora, y mantenindolos en continua suspensin, ej. Con un agitador manual o por burbujeo de aire desde el fondo cnico del tanque. Comienza una reaccin exotrmica, formndose espuma y observndose cambios de color a medida que el corion se va disolviendo, pasando de marrn oscuro hasta gris cuando se usa el hipoclorito de calcio, o desde gris hasta naranja en el caso del hipoclorito de sodio Se controlar regularmente la temperatura de la suspensin, aadindose eventualmente hielo para prevenir que se alcance la temperatura de 40C letal para los quistes. La decapsulacin terminar en un plazo de tiempo comprendido entre 5 y 15 minutos. Quedando pues la solucin de decapsulacin compuesta por: 1400 ml de agua de mar 71 g de blanqueador en polvo 67 g de Na2CO3 (0.40 g de CaO) Los quistes que no han sido decapsulados adecuadamente y que todava guardan restos del corion, pueden ser retirados de la superficie en la deshidratacin con salmuera (ver ms adelante); y eventualmente ser nuevamente decapsulados.

3.5.6.4 LAVADO Y TRATAMIENTO DE DESACTIVACIN. Tan pronto como el corion haya sido completamente disuelto (lo que se controlar por medio de un microscopio o cuando no se observen ms cambios de color o de temperatura) se filtrarn los quistes decapsulados y se lavarn copiosamente con agua dulce (o salada) hasta que el olor a cloro haya desaparecido. Los residuos de hipoclorito absorbidos sobre los quistes decapsulados sern desactivados en un bao de cido clorhdrico o actico o incluso ms eficientemente con tiosulfato; ej. Los quistes sern sumergidos varias veces en una solucin 0.1 N de HCl HAc; bien en una solucin al 0.1% de Na2S2O3. Esta desactivacin tomar menos de un minuto, tras este tratamiento se lavarn otra vez los quistes con agua dulce o salada.

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Los residuos de hipoclorito pueden ser detectados poniendo algunos quistes .decapsulados en una pequea cantidad del reactivo almidn-yodo diluido (= almidn, yoduro potsico, cido sulfrico y agua). Cuando el reactivo se vuelve azul, el lavado y la desactivacin deben continuar. A causa de la eliminacin del corion, que contena cmaras de aire

Figura 1. Secciones de las membranas externas de la cscara de un quiste de Artemia, sin tratamiento (A) y decapsulado (B) (modificado de Morris y Afzelius 1967, en Lger et al., 1986) Los quistes decapsulados precipitarn una vez transferidos a agua dulce o salada. Ejemplos prcticos de composicin de soluciones de decapsulacin para el tratamiento de 100 gr de quistes secos usando NaClO Ca (ClO)2 como agentes activos.
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EJEMPLO 1: uso de lquido blanqueador concentrado ndice de refraccin de la solucin diluida de NaClO (una parte de NaClO por una parte de agua dulce): 1.3604 Concentracin de producto activo en la solucin de NaClO: (3000 1.3604) 4003 2 = aproximadamente a 156 g/l Cantidad de producto activo necesario para la decapsulacin de 100 g de quistes: 100 0.5 = 50 g Volumen necesario de liquido blnqueador (leja): 50 1000/156 = 320 ml Cantidad necesaria de NaOH: 0.15 100 = 15 g 0.33 100 = 33 ml 40% de solucin Volumen total de solucin de decapsulacin: 4 100 = 1400 ml Volumen necesario de agua de mar: 1400 - 320 - 33 = aproximadamente 1050 ml Quedando la solucin de decapsulacin formada por: 320 ml de liquido blanqueador 33 ml de solucin de NaOH al 40 % 1050 ml de agua de mar EJEMPLO 2: uso de polvo blanqueador Actividad del producto al 70 % (en peso) de los ingredientes activos. Cantidad de producto necesario para la decapsulacin de 100 gr de quistes: (100 0.5) 100/70 = 71 g de blanqueador en polvo Ca (ClO)2 Cantidad necesaria de Na2CO3: 0.67 g (0.04 100 = 40 g de CaO) Volumen de la decapsulacin (= volumen necesario de agua de mar): 14 100 = 1400 ml Quedando pues la solucin de decapsulacin compuesta por: 1400 ml de agua de mar 71 g de blanqueador en polvo 67 g de Na2CO3 (0.40 g de CaO) Los quistes que no han sido decapsulados adecuadamente y que todava guardan restos del corion, pueden ser retirados de la superficie en la deshidratacin con salmuera (ver ms adelante); y eventualmente ser nuevamente decapsulados.

3.5.6.5 DESHIDRATACIN Y CONSERVACIN. Como terminacin de las tcnicas de desactivacin y lavado, los quistes decapsulados, que van a ser conservados durante ms de una semana, deben ser deshidratados, para ello los quistes son recogidos sobre una malla de 120 micras y posteriormente son transferidos a una solucin de salmuera saturada
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a una densidad de 1 g de quistes (secos)/10 ml. Dado que con su puesta en salmuera los quistes hidratados liberan agua, la salmuera deber ser renovada tras una o dos horas, o bien se deber aadir ms sal a la solucin. Durante una noche de deshidratacin (o durante un mnimo de 3 horas a la temperatura ambiente de la sal) los quistes habrn liberado el 80% de su contenido acuoso celular y al suspender la aireacin los quistes decapsulados, con su forma actual de granos de caf, sedimentarn. Los quistes sern recogidos sobre una malla de 120 micras y colocados, en recipientes de plstico, llenos de salmuera reciente para su conservacin en frigorficos o congeladores. Ya que el contenido hdrico de los quistes conservados en salmuera de NaCl saturada (aproximadamente 330 g de NaCl/1) es del 1620%; la eclosin mxima de estos quistes est garantizada nicamente durante un perodo de algunos meses. Para una conservacin de larga duracin, el contenido de agua en los quistes debe ser inferior al 10% lo que se logra con una salmuera de MgCl2 (1670 g MgCl2. 6H2O/1 agua dulce). Antes de usarse, bien como alimento o para su eclosin, los quistes deshidratados y decapsulados sern filtrados sobre una malla de 120 micras y lavados con agua dulce para eliminar la salmuera. Dado que la capacidad de eclosin de los quistes disminuye cuando son expuestos a radiaciones UV, es aconsejable realizar la decapsulacin y conservar los quistes decapsulados, alejados de la luz solar directa.

3.5.6.6 USO DIRECTO DE QUISTES DECAPSULADOS E HIDRATADOS. En caso necesario, pueden ser conservados durante algunos das en el frigorfico a 04 C. Como ya se ha mencionado anteriormente es fundamental asegurar una circulacin suficiente en el tanque de cultivo a fin de mantener esos quistes en suspensin. Dado que los quistes decapsulados son considerablemente ms pequeos que los nauplios recin eclosionados, es por 10 que esos quistes pueden ser empleados en la alimentacin de algunos estados larvales previos de ciertos predadores. Los quistes decapsulados e hidratados pueden ser incubados bajo condiciones ptimas de eclosin para la produccin de nauplios. En este tipo de eclosin, la

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separacin de las cscaras ya no es necesaria; con lo que los nauplios son filtrados, lavados y ofrecidos a las larvas de los predadores. Los quistes deshidratados pueden ser conservados durante aproximadamente, una semana entre 04 C sin disminucin de la eficiencia de eclosin. Con ello es posible decapsular la cantidad de quistes necesaria para una semana y dividirla en porciones que se conservarn en el frigorfico entre 04 C.

3.5.6.7 VENTAJAS DE LA DECAPSULACIN. La utilizacin de quistes decapsulados no solo elimina los problemas de separacin de los nauplios, sino que existe otra serie de ventajas que recomiendan la aplicacin de la tcnica de decapsulacin: Desinfeccin de los quistes con el tratamiento de hipoclorito. Ingestin y digestin de los quistes decapsulados por las larvas de peces y crustceos aunque no hayan eclosionado. Los quistes decapsulados parecen ser una buena fuente alimenticia para algunas especies de peces marinos y de agua dulce as como de crustceos (ver revisin en Lger et al., 1986). Uno de los mayores obstculos para esta ltima aplicacin es que con la eliminacin del corion, que le da flotabilidad, los quistes decapsulados tienen tendencia a sedimentar; ello obliga a necesitar una aireacin suplementaria, por ej. con air-water-lifts, para mantener en suspensin el alimento en la columna de agua.

3.5.6.8 MTODOS DE ECLOSIN. Mtodo A A.1. Incubar, en un tubo cilindro cnico (preferentemente), o en una probeta 250 mg de quistes en unos 100 ml de agua de mar de 35 con iluminacin permanente (1000 lux) y a una temperatura de 25C, instalar la aireacin desde el fondo para mantener los quistes en suspensin (la aireacin no debe ser demasiado fuerte para evitar la formacin de espuma). A.2. Al cabo de una hora se tomarn, por medio de una micropipeta

automtica (preferentemente) o de una pipeta de vidrio de o, 5 ml a la que se le ha cortado la punta (si la abertura as demasiado pequea

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para permitir el paso de quistes/nauplios), 10 submuestras (i=10) de unos 100 quistes cada una. A.3. Pipetear los quistes de cada submuestras sobre papeles de filtro

individuales A.4. Contar los quistes de cada papel de filtro usando una lupa de

diseccin (Ci); calculando el valor medio (C) A.5. Lavar los quistes de los papeles de filtro en capsulas Petri de

vidrio, individuales o en pequeos tubos de plstico (5 ml); aadir agua de mar de 35%. previamente aireada, e incubarlos a 25C bajo iluminacin continua (>1000 lux) A.6. Al cabo de 48 horas, fijar los nauplios aadiendo unas gotas de

una solucin de lugol. A.7. Contar los nauplios usando una lupa de diseccin (ni) y calcular el

valor medio (n) Mtodo prctico para el recuento de nauplios: 1. construir un pequeo filtro con un tubo de PVC (8 cm de dimetro, 12 cm de altura) al que se pega una malla de nylon de 100 m 2. vaciar el contenido de la placa de Petri o del tubo de plstico sobre este filtro; lavar el contenido de las placas o de los tubos y verterlos sobre el filtro 3. Colocar el filtro en una placa de Petri llena de agua, agitar y mover el filtro dentro y fuera del agua, comprobando que se produce una buena distribucin de los nauplios sobre la malla, lo que facilita su recuento. 4. sacar el filtro de la placa Petri, secndolo por su parte inferior con una toalla o papel de filtro 5. colocar el filtro bajo la lupa para el recuento; eventualmente, se puede poner el filtro en una placa de Petri que ha sido previamente marcada para facilitar el recuento

A.8. A.9. Observaciones

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1. este mtodo solo se puede usar cuando los quistes han sido procesados adecuadamente (no conteniendo cscaras de quistes vacios). 2. la correccin en el muestreo y recuento viene indicada cuando la desviacin estndar es inferior al 5% Mtodo B B.1. B.2. Igual que en el mtodo A.1 Tras 48 horas de incubacin tomar por medio de una micropipeta

automtica (preferentemente), o de una pipeta de vidrio de 0,5 ml a la que se le ha cortado la punta (si la abertura es demasiado pequea para permitir el paso de los quistes/nauplios), 10 submuestras (i = 10) que contengan, aproximadamente, unos 100 nauplios y quistes sin eclosionar, cada una. B.3. Pipetear los quistes de cada submuestra en una placa de Petri y

fijar los nauplios con unas gotas de una solucin de lugol. B.4. Contar los nauplios (ni) con una lupa de diseccin. Calcular el

valor medio (n). B.5. Decapsular los quistes no eclosionados y disolver las cscaras de

quistes vacios aadiendo una gota de una solucin de NaOH (40 g/100 ml/de agua destilada) y 5 gotas de una solucin de leja domstica (5,25 % NaOCl). Cuando se aplique el mtodo A.7., dentro del apartado B.4., entonces sumergir el filtro (s) con los nauplios y los quistes en una placa Petri llena con la solucin decapsuladora (leja domstica pura + algunas gotas de NaOH). Tras algunos minutos sacar el filtro, lavar con agua dulce y continuar como en el apartado A.7. B.6. (c). Contar los embriones no eclosionado (ci) y calcular el valor medio

B.7. B.8. Observaciones

1. este mtodo garantiza la mayor precisin en la determinacin del porcentaje de eclosin, ya que evita el tener en cuenta las cscaras

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de quistes vacos y deber emplearse preferentemente en el caso de muestras de quistes mal procesados (conteniendo quistes vacos) 2. La desviacin estndar debe seguir siendo inferior a 5%.

3.5.6.9 PARMETROS PARA LA ECLOSIN. Existe una extensa bibliografia sobre la eclosin de los quistes de Artemia (ver revisin en Sorgeloos, 1980). En estos trabajos, la produccin de nauplios por incubacin de los quistes en agua de mar se presenta como un mtodo muy simple. Sin embargo, cuando se trabaja a gran escala y con altas densidades de quistes, algunos parametros pueden ser criticos para asegurar unas eficiencias tendriamos: Temperatura ptima de eclosin de quistes: 25 a 30C. Salinidad: 5 ppm (lmite variable). A mayor S de 30 ppm, los quistes no alcanzan el perodo crtico de ruptura o eclosin, y en tal caso no se consigue sta. Decapsulacin: En la decapsulacin se controla el proceso de osmoregulacin. Permitindose la decapsulacin es ms fcil conseguir la eclosin (en el anexo se incluye la tcnica de decapsulacin recomendada por P. Sorgeloos). pH: A un pH de 8.0 hay una buena eficiencia de eclosin. Debajo de ste la eclosin disminuye. Se recomienda el uso de 2 g de NaHOO3/1 para asegurar una mayor eclosin. Oxgeno: En el metabolismo de Carbohidratos de Artemia, la presencia de O2 es relevante. Para conseguir una eclosin eficiente se recomiendan altos niveles de O2 (condiciones anaerbicas afectan la eclosin y el metabolismo de Carbohidratos). de eclosin mximas. Expresandolos de forma resumida

3.5.6.9.1 TEMPERATURA. La temperatura deber mantenerse en el intervalo de 2530C. A temperatura por debajo de 25C la eclosin es ms lente y por encima de 30C el metabolismo de los quistes se detiene irreversiblemente. Es mejor mantener una temperatura constante en el medio de eclosin (ej. usando calentadores y termostatos) para obtener una produccin mxima de
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nauplios en estado 1 en el mismo periodo de incubacin; para ello se deben poner a punto mtodos rutinarios de eclosin y recogida de nauplios, asegurando unos resultados de eclosin constantes, independientemente de las fluctuaciones estacionales de la temperatura. Los quistes secos (con un contenido en agua entre el 2 y el 5%) son muy resistentes, por ej., la viabilidad de la eclosin no se ve afectada en un intervalo de temperatura entre -273 y 60C pudiendo tolerar hasta 90C si las exposiciones son de breve duracin (en realidad las exposiciones debern ser ms cortas a medida que la temperatura aumenta). Los quistes hidratados (completamente hidratados en el medio de cultivo) tienen una tolerancia a la temperatura muy especfica Una interrupcin del metabolismo (= muerte del embrin) se produce por debajo de -18C y por encima de 40C. Una interrupcin reversible del metabolismo se produce (= sin que la viabilidad se vea afectada) en un intervalo de temperaturas que vara entre -18C y 4C y entre 32C y 40C (una exposicin de larga duracin a este ltimo intervalo de temperaturas ocasiona un retraso progresivo de la tasa de eclosin. Los lmites superiores e inferiores de temperatura pueden variar ligeramente de cepa a cepa). El metabolismo activo acta en el intervalo de temperatura entre 4 y 32C; aunque si bien el porcentaje de eclosin permanece constante, los nauplios eclosionan antes a medida que la temperatura es ms alta.

Figura 6. Diagrama esquemtico del efecto de las temperaturas del agua sobre el metabolismo del quiste de Artemia para valores comprendidos entre -20C y ms de 40C.
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3.5.6.9.2 SALINIDAD. Se usa mayormente el agua de mar para la eclosin de los quistes. Sin embargo, a una salinidad de 5 aumenta la tasa de eclosin (ya que se tiene que producir menos glicerol.) y se han registrados eficiencias de eclosin ms elevadas para algunas cepas de quistes, teniendo los nauplios un mayor contenido energtico. Utilizar agua de mar natural diluida con agua dulce hasta 5%.,

complementndola con 2 g por litro de NaHCO3 industrial bien preparar una solucin de eclosin a base de sales industriales y agua dulce siguiendo la frmula dada en la Tabla I. La salinidad de los medios de eclosin puede ser fcilmente controlada con la ayuda de un densmetro o de un refractmetro. Tabla I. Agua de mar artificial usada en la eclosin y cultivo de Artemia Medio de eclosin a sal marina de evaporacin (NaCl) MgSO4b MgCl2 CaCl2 KCl b NaHCO3b 5.0 1.3 1.0 0.3 0.2 2.0 Medio de cultivo b 31.08 7.74 6.09 1.53 0.97 2.00

A en gramos de sal (calidad tcnica) por litro de agua dulce B disolverlo separadamente en agua dulce caliente antes de aadir a la solucin otras sales

3.5.6.9.3 OXGENO. A fin de lograr una eclosin mxima (tanto en tasa como en eficiencia), se recomienda mantener unos niveles de oxgeno por encima de 2 mg/l. Las tasas ptimas de aireacin han sido controladas localmente en funcin del tamao del tanque y de la densidad de quistes incubados; por ej. Para lograr una eclosin mxima de 100 g de quistes en un recipiente de 20 l se debe mantener una tasa de aireacin de 7 l de aire/tanque.
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La tasa de aireacin se puede determinar fcilmente midiendo el volumen de agua desplazado por las burbujas de aire en una probeta invertida durante un perodo de tiempo prefijado (ej. 10 segundos; ver esquema en la Figura 1). Cuando no es vital alcanzar los niveles aceptables de O 2, no se recomienda el uso de piedras de aireacin, ya que puede inducir la formacin de espuma que podra atrapar los nauplios. La formacin de espuma no ser un problema si los quistes han sido lavados, despus de tenerlos una hora en remojo, o si han sido previamente desinfectados.

Diseo esquemtico del dispositivo usado para medir las tasas de flujo de aire (en litros/min).

3.5.6.9.4 pH. El pH adecuado para la eclosin seria en los rangos de 8.0 ya que estos niveles hay una buena eficiencia de eclosin. Y debajo de este la eclosin disminuye.
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3.5.6.9.5 ILUMINACIN. La iluminacin de los quistes, al menos durante las primeras horas tras su hidratacin, es esencial para lograr una eclosin mxima. Teniendo en cuenta las diferencias que se observan entre las cepas de Artemia (ver Figura), es aconsejable para obtener unos resultados ptimos, mantener una iluminacin de aproximadamente unos 2000 lux en la superficie del agua. Este nivel de iluminacin se logra, principalmente, durante el da en tanques transparentes puestos a la sombra en el exterior. Sin embargo y con el fn de independizarse de las fluctuaciones estacionales, es mejor situar los tanques de eclosin en el interior (siendo an mejor con control de temperatura, ver anteriormente) y proporcionandoles iluminacin artificial, por ej. Con tubos fluorescentes instalados cerca de la superficie del agua.

Efecto de la intensidad luminosa sobre la tasa de eclosin de quistes de Artemia de varios orgenes (el clculo de las curvas de eclosin se realiza como en la Figura 2) (segn Vanhaecke et al., 1981)

3.5.6.9.6 DENSIDAD DE QUISTES. En vista de los problemas tcnicos encontrados en el mantenimiento de altos niveles de oxgeno sin formacin de espuma o sin daos mecnicos a los
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nauplios eclosionados, se recomienda no sobrepasar densidades de 5 gramos de quistes por litro, especialmente cuando se trabaja con grandes cantidades. La presencia de una espuma persistente se puede reducir aadiendo unas gotas de algn agente antiespumante no txico (ej. silicona antiespumante del tipo usado en las cerveceras).

3.5.6.9.7 DESINFECCIN DE QUISTES. La superficie externa de la cscara de los quistes puede estar cubierta con esporas de bacterias y hongos o estar contaminada con impurezas orgnicas. Es evidente que a una densidad elevada de quistes en el medio de eclosin a una temperatura alta, el desarrollo bacteriano puede ser considerable, lo que ocasiona que el medio de eclosin se ponga turbio dando como resultado, eventualmente, una mala eclosin. Por otro lado existen bacterias, que pueden ser per judiciales para las larvas del predador y que pueden ser introducidas en el medio de cultivo de esas larvas junto con los nauplios de Artemia recin eclosionados. Con esta finalidad es muy recomendable aplicar unos mtodos rutinarios de desinfeccin: Introducir los quistes durante 1 2 horas en una solucin de 20 ppm de hipoclorito en agua dulce, ej. 285 mg de polvo blanqueador industrial (Ca (OC1)2) en 10 1 de agua dulce para 0.5 kg de quistes; o 4 ml de leja (con un 5% de producto activo para uso domstico) en 10 1 de agua dulce para 0.5 kg de quistes; mantener una aireacin o agitacin fuerte para exponer todos los quistes a la solucin desinfectante; el tiempo de desinfeccin se puede reducir a unos 20 minutos usando mayores concentraciones de desinfectante (ej. 200 ppm). Tras este tratamiento, los quistes sern lavados con agua dulce sobre un tamiz y posteriormente puestos a eclosionar. Completar la eliminacin del corion de los quistes por decapsulacin con hipoclorito.

3.5.7. CALIDAD DE ECLOSIN DE LOS QUISTES. La calidad de eclosin de los quistes de Artemia se determina por varias caractersticas.
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Porcentaje de eclosin: Este es el nmero de nauplios producidos por 100 quistes. Este criterio implica ciertas restricciones, ya que no tiene en cuenta las impurezas del material original, tales como quistes vacos, arena, plumas, cristales de sal, insectos, etc. Eficiencia de eclosin: Este es el nmero de nauplios producidos por gramo de quistes (los mejores productos dan 300000 nauplios/g quistes). Este criterio cubre la pureza de la muestra de quistes y la viabilidad de los mismos, sin embargo no tiene en cuenta la talla (peso) de los nauplios. Biomasa de eclosin: Esta es la biomasa naupliar (mg de peso seco) producida por gramo de quistes (los mejores productos alcanzan valores de 600 mg de nauplios/gramo quistes). La biomasa de eclosin es el mejor criterio para la estimacin del valor cuantitativo (desde el punto de vista energtico de una muestra de quistes). Tasa de eclosin: Esta es la tasa y sincrona con la que los nauplios eclosionan (los mejores productos comienzan a eclosionar a partir de las 15 horas de incubacin en agua de mar a 25C, alcanzando el 90% de su eclosin mxima en el plazo de las 5 horas siguientes). Los datos sobre la tasa de eclosin, permiten calcular el perodo de incubacin ptimo para cosechar los nauplios con su mximo contenido energtico

3.5.7.1 CONTEO DE NAUPLIOS. Se hace una descripcin breve de los mtodos que se utilizan para determinar el nmero de clulas presentes en una muestra. 1) Hematoctometro o Cmara de Neubaver Mediante una pipeta Pasteur se toma una muestra de artemia y se desliza en la cmara que previamente tiene adherido el cubreobjetos, se deja pasar 5~10 minutos para que la muestra se estabilice; se procede a contar mediante un contador de mano, en algunos casos es necesario diluir la muestra cuando la densidad es alta y tambin fijada cuando el plancton es mvil, siguiendo los siguientes pasos:
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Se toma un milmetro de la muestra. Se aade un mililitro de agua de mar filtrada ya preparada con formaldehido todo al 4%. Se deja reposar por tres minutos. La muestra se homogeniza con una Pipeta Pasteur. Se cuentan las clulas de cada una de las cmaras.

Figura 3: Conteo celular en hematoctometro.

Figura 4: Cuadrantes de la cmara de conteo. Una vez que se tiene el promedio de clulas de las cmaras, el clculo total de clulas por mililitro se lleva a cabo de la siguiente manera: 2) Densidad ptica Mediante un espectrofotmetro se determina la concentracin celular de la muestra por densidad ptica (calibrando con anterioridad el aparato, siguiendo las instrucciones del manual correspondiente), se determina la transmitancia (Nm), que se extrapola con la recta patrn antes determinada que corresponda a la especie problema (se construye graficando transmitancia vs. nm. de clulas/ml). As en la interseccin de la recta conociendo la concentracin (Nm) se puede calcular la cantidad de artemia de la muestra problema. Por otro lado,
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conociendo la ecuacin de la recta de cada grfica, segn la especie, se determina directamente la concentracin de clulas de la muestra sustituyendo el valor d la transmitancia en esta ecuacin. 3) Volumen Celular Por centrifugacin, se obtiene "un paquete o pastilla celular" que desechando el sobrenadante, puede ser pesado y determinado en unidades de peso W/v, la cantidad de clulas o biomasa de la muestra problema en peso hmedo o peso seco.

3.5.7.2 PORCENTAJE DE ECLOSIN. El potencial de eclosin de los quistes de Artemia es cuantificado por el porcentaje de eclosin (E%) y la eficiencia de eclosin (EE). El E% es de valor biolgico ya que indica la viabilidad de los quistes como tal. La EE toma en consideracin no solamente los quistes pero tambin las posibles impurezas. La EE es de importancia econmica para el acuicultor ya que representa el nmero de nauplios que eclosionan de 1g de producto tomando en consideracin el producto entero (quistes e impurezas posibles). Nmero de nauplios que pueden ser producidos a partir de 100 quistes hidratados y conteniendo un embrin; en este criterio no se incluyen impurezas o quistes defectuosos, ej. Cscaras rotas, arena, sal, etc. Se calcula porcentaje de eclosin (E%) Numero de nauplios: N Nmero de embriones: E Porcentaje de Eclosin: E%=N/N+E=%

3.5.7.3 EFICIENCIA DE ECLOSIN. Eficiencia de eclosin = Nmero de nauplios que se producen a partir de 1 gramo de quistes secos cuando se les incuba bajo condiciones estndar de eclosin (48 horas de incubacin, agua de mar de 35 saturada de oxgeno a 25C, mnimo de 1000 lux de iluminacin y pH entre 8.0 y 8.5). Determinacin de la eficiencia de eclosin (ee) Procedimiento: 1. fijar la muestra con unas gotas de LUGOL

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2. observacin microscpica y conteo del nmero de nauplios: N (= 42 en el ejemplo ilustrado) 3. clculo de la EFICIENCIA DE ECLOSIN (EE)

3.5.7.4 TASA DE ECLOSIN. Esta es la tasa y sincrona con la que los nauplios eclosionan (los mejores productos comienzan a eclosionar a partir de las 15 horas de incubacin en agua de mar a 25C, alcanzando el 90% de su eclosin mxima en el plazo de las 5 horas siguientes). Los datos sobre la tasa de eclosin, permiten calcular el perodo de incubacin ptimo para cosechar los nauplios con su mximo contenido energtico. Este criterio se refiere al tiempo transcurrido desde que comienza la incubacin (hidratacin de los quistes) hasta la liberacin del nauplio (eclosin). Considerndose los siguientes intervalos de tiempo: T0 Tiempo de incubacin hasta que aparecen los primeros nauplios nadadores. T10 Tiempo de incubacin hasta que aparece el 10% del total de los nauplios eclosionables. T90 Tiempo de incubacin hasta que aparece el 90% del total de los nauplios eclosionables. T5 T90 - T10; este valor da una idea de la sincrona de la eclosin

3.5.7.5 BIOMETRA DE LOS QUISTES. Las dimensiones de los quistes varan considerablemente de una cepa a otra. Sin embargo, el dimetro de los quistes no est afectado por el lugar y las condiciones bajo las que estos se produjeron. De esta forma es posible reconocer quistes de diferentes cepas en base a su dimetro. El espesor del corion no est en relacin directa con el dimetro de los quistes. As, un quiste pequeo puede tener un corion relativamente espeso (ej. quistes de Great Salt Lake). El espesor del corion y la cantidad de hematina presente en l, influencian la cantidad de luz necesaria para la eclosin. El dimetro de los quistes puede medirse con un microscopio o con un equipo contador de partculas (Coulter Counter).

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Figura 6. Esquema del volumen del quiste (crculo externo) y del volumen del corion (anillo negro) de diferentes cepas y lotes de Artemia, segn Vanhaecke y Sorgeloos, 1980a)

3.5.8 MTODOS DE COSECHA. La recogida de los nauplios de Artemia, ms o menos libres de cscaras vacas y de quistes sin eclosionar, se hace tras detener la aireacin durante 5 a 10 minutos: las cscaras vacas flotan en la superficie mientras que los nauplios se concentran en la parte inferior del embudo.

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Esquemas y dimensiones de los recipientes de eclosin usados en el Centro de Referencia de Artemia

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Montaje para la incubacin automtica de quistes de Artemia (segn Lger y Sorgeloos, 1982). El sifonamiento se iniciar desde la parte ms inferior del embudo, con el fn de eliminar primero los desechos y quistes llenos no eclosionados que se habrn acumulado justo por debajo de los nauplios. Dado que la mayora de los nauplios tienen fototactismo positivo, pueden ser concentrados ms

rpidamente oscureciendo la parte superior del recipiente de eclosin por ej. Con un plstico negro que permite que la luz llegue nicamente a la parte ms baja del embudo. Una segunda cosecha de nauplios se puede hacer dejando transcurrir 5 a 10 minutos, tras la primera recogida. La flotacin de las cscaras de los quistes se puede favorecer aumentando la salinidad, poco antes de la cosecha, con la adicin de salmuera saturada o sal bruta. El brusco cambio de salinidad no es per judicial para los nauplios de Artemia, mientras permanezcan en el primer estado de nauplio (estado I). Las cajas de separacin circular para nauplios de Artemia descritas por Persoone y, Sorgeloos (1972, 1975) son muy tiles en el laboratorio (especialmente el tipo representado en la Figura 19) pero demasiado complejas para su aplicacin a escala comercial en centros de acuicultura (hatcheries). Con aquellas cepas que tienen una pobre sincrona de eclosin (ej. con valores de Ts de ms de 10 horas, ver Tabla II) se puede hacer una primera recogida
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algunas horas antes de que se alcance la mxima eficiencia de eclosin, con el fn de asegurar un uso ptimo de los nauplios producidos (en su estado I). Algunas cepas de Artemia (ej. Chaplin Lake-Canada, Great Salt Lake, UtahU.S.A., etc.) Pueden ser dificilmente separadas siguiendo las tcnicas descritas anteriormente. Con estas cepas y dado que cualquier contaminacin con cscaras vacas debe ser evitada, se deben utilizar quistes decapsulados.

Funcionamiento: El cilindro interno (2) est enroscado sobre el cilindro base central (que posee unas ranuras) hasta fijarlo bien sobre el anillo de caucho (4). La suspensin de eclosin filtrada (conteniendo quistes vacios, rotos y enteros y nauplios eclosionados) es transferida al cilindro interior. El compartimento externo del recipiente se llena con agua de mar hasta el mismo nivel. El cilindro interno se cubre con su tapadera (3) y el separador se ilumina con una luz fuerte. Aproximadamente a los 5 mn, se desenrosca el cilindro central hasta que las aberturas queden al descubierto: dado el fototactismo positivo de los nauplios estos nadan el compartimento iluminado donde se pueden cosechar una vez cerrado de nuevo el dilindro interno enroscandolo fuertemente sobre el anillo de caucho (4). Figura 19. Esquemas de la caja cilndrica para separacin de nauplios de Artemia de Persoone y Sorgeloos (1972)
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3.5.9 ENRIQUECIMIENTO DE LOS NAUPLIOS DE ARTEMIA POR BIOENCAPSULACIN. Recientemente, se han desarrollado varias tcnicas para el mejoramiento del valor nutritivo de Artemia por medio de la bioencapsulacin de componentes esenciales, en los meta nauplios ej. cidos grasos altamente insaturados. Para ello, investigadores britnicos, franceses, japoneses y belgas han utilizado microalgas marinas, componentes y dietas microencapsuladas, levaduras omega y emulsiones (ver revisin sobre este tema en Lger et al., 1986a). La prctica ms generalizada consiste en la eclosin de los quistes, separacin de los nauplios de los restos de eclosin e incubacin de los mismos hasta 72 horas en una suspensin o emulsin de enriquecimiento (Watanabe et al., 1978, 1982, 1983; Robin et al., 1984, 1986; Gatesoupe, 1982; Lger et al., 1986c). Hasta la actualidad, no se haba prestado mucha atencin a la definicin de las condiciones ptimas de enriquecimiento. Sin embargo, algunos parmetros han demostrado tener un papel importante en los procesos de bioencapsulacin ej. Temperatura, aireacin, concentracin de alimento, edad naupliar, estabilidad de la dieta de enriquecimiento, etc. La finalidad es lograr el mximo nivel de enriquecimiento de los nauplios, en el menor tiempo posible, de hecho cuanto mayor sea el perodo de enriquecimiento, mayor ser la Artemia y ms tardo el estadio larval al que se le podr ofrecer esta Artemia enriquecida. Bajo este punto de vista, es de considerable importancia la optimizacin de los mtodos de eclosin para lograr la transferencia al medio de enriquecimiento con anterioridad, o al comienzo, del segundo estado de metanauplio. En esta fase, los animales son capaces de ingerir partculas capturadas en funcin de la actividad de filtracin no selectiva del segundo par de antenas, producindose as el enriquecimiento por bioencapsulacin. La ventaja del enriquecimiento de los nauplios es, en primer lugar, la mejora en la composicin nutritiva. Tras el enriquecimiento con dietas basadas en aceites de pescado, la Artemia no solo contiene niveles altos del cido graso esencial 20:5w3(a), sino tambin niveles considerables de otro cido graso esencial como es el 22:6w3; el cual se encuentra generalmente ausente en los nauplios Por medio de las tcnicas-de bioencapsulacin se pueden incorporar otros componentes pasndolos de esta forma al predador, ej. Vitaminas, pigmentos,
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aminocidos, profilcticos, teraputicos (ver Fig. 30). La mejora en la composicin nutritiva de las Artemias enriquecidas no se refleja nicamente en el xito en los cultivos larvarios sino que como resultado de un mejor estado fisiolgico de la larva (larvas mayores y ms activas) se incrementa la supervivencia y crecimiento en las fases siguientes de preengorde y engorde. a. Corresponde a un cido graso con 20 tomos de carbono y 5 dobles enlaces comenzando en la posicin omega-3 (w3) (tercer carbono comenzando desde el grupo metilo terminal).

Representacin

esquemtica

de

la

administracin

de

determinados

componentes a las larvas del predador a travs de la bioencapsulacin en Artemia (segn Lger et al., 1986b)

3.6.0 DOSIFICACIN DE LOS DIFERENTES ESTADIOS DE ARTEMIA PARA ALIMENTAR. En contraste con el amplio uso de los nauplios como alimento, la utilizacin de Artemia pre-engordada y adulta es muy limitada. Razones evidentes para esto son la disponibilidad en todo el mundo de quistes almacenables, mientras que la disponibilidad comercial de adultos est muy restringida y su costo muy elevado (Lai y Lavens, 1986). Adems, unicamente durante los ltimos aos se han desarrollado tcnicas para la produccin en masa de preadultos y adultos. No obstante, existen diversos argumentos que apoyan el uso de animales preadultos o adultos como alimento. Si comparamos el valor nutritivo de los nauplios recin eclosionados al de la Artemia adulta, esta es superior, ej. su contenido protico aumenta desde una media del 47% en los nauplios hasta el 60% en peso en los adultos, adems la
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calidad protica mejora en los adultos ya que son ricos en todos los aminoacidos esenciales. A diferencia de otros organismos usados como alimento, el exoesqueleto de la Artemia adulta es extremadamente delgado, lo que facilita la digestin del animal completo por los predadores. El tamao de la presa ha sido al primer criterio para cambiar del nauplio a la Artemia juvenil y/o adulta. En realidad, segn el predador va creciendo, va siendo capaz de capturar presas mayores y consecuentemente resulta en una mayor produccin en trminos de tasas relativas de incorporacin energticas. Se han determinado mejoras en el crecimiento, tasa de desarrollo y supervivencia en numerosas especies de crustceos y peces aplicando la estrategia de suministrar Artemia progresivamente mayor como alimento de transicin (dieta de destete o de pre-engorde) desde los nauplios hasta los alimentos secos (ver revisin en Lger et al., 1986a). En el cultivo de bogavante y esturin se utiliza la biomasa adulta como alimento inicial en los cultivos larvarios. Aunque se pueda usar la Artemia cngelada, los mejores resultados se obtienen con adultos vivos, lo que asegura una mejor disponibilidad en toda la columna de agua, sin provocar un deterioro en la calidad del medio.

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Fcil comprobacin de la calidad de la Artemia congelada. La superioridad d los adultos vivos sobre los adultos congelados, liofilizados y las dietas artificiales ha sido demostrada repetidamente. Segn Conklin et al., (1978) una sustancia esencial, soluble en agua, presente en los adultos vivos de Artemia se libera en los individuos congelados o secados. Sin embargo, la descongelacin de la biomasa adulta no ocasionar
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la liberacin de esta sustancia, si la congelacin se ha realizado adecuadamente. Debido a su fino exoesqueleto (menos de l micra) es esencial para asegurar una congelacin rpida, la preparacin de lminas delgadas (no superiores a 1 cm de espesor) de animales vivos. Se pueden obtener excelentes resultados congelando la Artemia en bandejas domsticas de hielo, produciendo cubitos de 1 cm. la calidad de la biomasa congelada puede ser fcilmente verificada descongelando un cubito en un vaso de agua: los adultos aparecern intactos (no fragmentados) y el agua sin polucionar. Para la alimentacin directa de adultos vivos a animales marinos o de agua dulce, es suficiente lavar concienzudamente la Artemia hasta eliminar toda la salmuera o agua de mar acumulada entre los toracpodos; de hecho, dado que esta especie posee un sistema hipoosmoregulador, sus fluidos corporales estn siempre a 9 % incluso cuando son recolectados, por ejemplo de un estanque de evaporacin a 180 . De salinidad. El uso de juveniles y adultos ha sido restringido mayormente a ensayos de cultivo a una escala relativamente pequea. En los ltimos aos, sin embargo, el uso a escala comercial de biomasa de Artemia recogida en salinas locales (ej. Brasil, Tailandia, Filipinas, Hawaii-USA), est ganando ms y ms inters especialmente en el destete y preengorde de Lates, Chanos, Macrobrachium y Penaeus; ej. la alimentacin de adultos de Artemia durante una o dos semanas a las postlarvas de langostino o los juveniles de peces (incluido el sabalote, considerado herbvoro!) en estanques de pre-engorde o en raceways intensivos produce un incremento significativo en la supervivencia y crecimiento. Una dieta a base de biomasa adulta, no solo es ptima para los alevines criados en hatchery, durante su transicin desde un medio controlado a las condiciones fluctuantes del medio natural, sino que tambin ha demostrado ser muy til para la aclimatacin de alevines naturales debilitados a causa del transporte o de una manipulacin excesiva (De los santos et al., 1980). El reciente descubrimiento de que una dieta de Artemia adulta puede inducir la maduracin de los langostinos (Penaeus vannamei, P. stylirostris, P. schmitti, p. semisul- catus, P. japonicus y P. monodon, segn diversas comunicaciones personales), puede ser de la mayor importancia en el cultivo de estas especies.

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La composicin bioqumica de la Artemia adulta puede variar ampliamente, especialmente en relacin con su perfil de cidos grasos Las deficiencias en cidos grasos esenciales pueden ser remediadas con la aplicacin de mtodos de enriquecimiento similares a los descritos anteriormente para los nauplios. En realidad, esta tcnica de encapsulacin proporciona interesantes oportunidades de uso para la biomasa de Artemia, no solo como un alimento atractivo, sino al mismo tiempo como un vehculo para la administracion de diversos productos a las larvas de los predadors ej. Nutrientes esenciales, pigmentos, profilcticos, teraputicos, hormonas etc. (Lger et al., 1986a, b, c). La biomasa puede tambin ser usada como un componente en la dieta o como un atrayente gustativo en las dietas artificiales para larvas de peces y crustceos (ver revisin en Lger et al., 1986).

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