TECNICAS CONFIRMATORIAS CRISTALES DE TEICHMANN O DE HEMATINA.

Las protenas se separan inmediatamente de la hemoglobina y del grupo prottico cuando se trata con cido actico, con el cual, se crea un medio cido en donde el grupo hem se oxida ms rpidamente que en un medio alcalino; si hay algn halgeno inorgnico, como el Cloro, se formaran cristales insolubles de cloruro de ferriprotoporfirina o hematina. PRUEBA DE TAKAMAYA HEMOCROMGENO . La ferroprotoporfirina o ferriprotoporfirina se combinan con compuestos nitrogenados que incluyen a otras protenas, hidrxido de amonio, piridina y nictina llamados hemocromgenos mediante la hemoglobina creando cristales tanto en medio cido o alcalino. Reaccin. La hidrlisis alcalina del hidrxido de sodio libera el grupo prosttico de la hemoglobina, mientras que el fierro del grupo hem se encuentra como in frrico (+3) debido a la formacin de metahemoglobina en el proceso de desecacin de la sangre, la carga del hierro se neutraliza por el in OH. Calentando la glucosa se reduce el in frrico a in ferroso (+2) y la piridina se le combina para dar el hemocromgeno o piridinferroprotoporfirina en forma de cristal soluble. La prueba es ms sensible y sencilla que la de la hemina y no se han reportado falsos positivos. REACCIN DE UHLENHUTH O PRECIPITINAS. Fue desarrollada En 1901 por Paul Uhlenhuth, un inmunologo alemn. La determinacin de sangre humana se sustenta en que la inmunoglobulina reacciona con la protena soluble del antgeno para formar un precipitado visible, que est influenciada por las fuerzas de Van Der Walls, puentes de hidrogeno, interaccin de dipolos, atraccin entre antgenos no polares y la superficie del anticuerpo y la atraccin electrosttica en varias etapas. Inicialmente se forma el complejo antgeno-anticuerpo (en igualdad de concentracin) soluble que empieza a unirse como tupida red de molculas de anticuerpo bivalente y molculas de anticuerpo polivalente que crece para formar partculas insolubles de gran tamao que permiten un precipitado visible. La reaccin puede observarse en la interfase entre dos lquidos en un tubo de ensayo, en un capilar o sobre gel por la difusin entre las partes reaccionantes, o por medio de electroforesis, pero debern tener en cuenta la edad y el grado de putrefaccin en la degradacin de protenas. El lavado de manchas de sangre con agua y jabn o detergente, interfiere en las reacciones positivas con la presencia de sales de sodio o sulfonatos; el cido tnico y las protenas sricas tambin pueden producir falsos positivos. PRECIPITINAS POR ELECTROFORESIS El antgeno emigra andicamente y el anticuerpo catdicamente durante la aplicacin de una corriente elctrica sobre una placa de agarosa en donde se hacen perforaciones pares, colocando el antgeno (seroalbumina y globulinas) y el anticuerpo ( globulinas); terminada la electroforesis se observan bandas visibles de precipitacin entre las perforaciones pares de los materiales proteicos especficos.

Dr. CASTELLANOS Sainz Jorge, Jus Mdica: Medicina Legal y Forense, Colegio Mexicano de Ciencias Forenses A. C. p 509 y 510.
http://www.mexicoforense.org/biblioteca/criminalistica/hematologia_forense.pdf