CLASE 3

Potencial de membrana
Las protenas de membrana forman poros de una alta selectividad, estos canales, se les denomina canales inicos porque la selectividad esta restringida a iones, particularmente de Cl, K y Ca. Los canales inicos hacen un transporte pasivo (a favor de gradiente electroqumico), por lo tanto no requieren una fuente adicional de energa. El flujo de los iones anteriormente dichos es rpido y masivo. Los canales inicos pueden encontrarse abiertos o cerrados. Los canales inicos pueden ser regulados por distintas seales. Las seales o estmulos que regulan apertura o cierre de canales inicos son de diversidad naturaleza: por ej hay algunos que se abren o cierran por deformacin de Membrana citoplasmatica (M.C), no siempre el estimulo abre el canal, tambin puede lo puede cerrar. Otro tipo de estmulos son los ligandos, que son molculas que se ligan a una protena (unin no covalente). En este caso el ligando es una molcula citoplasmtica que abre el canal, o un mensajero q esta en Liquido extra celular (LEC). (por ejemplo en caso de neurotransmisores) Otro estmulos son los q provocan cambios de potencial elctrico de membrana esto quiere decir q lo q pasa es que cambian las cargas elctricas en el entorno inmediato de membrana. Las cargas negativas predominan dentro de clula y positivo fuera, cuando hay un cambio en polaridad de carga (se invierte o disminuye diferencia de cargas) , el canal en virtud de secuencia de aminocidos cargados q se pueden orientar en campo elctrico provocan un cambio conformacinal de protena y se producen cambios en canal ( ya se hablara mas adelante de esto). Entonces seales de origen mecnico, qumico y elctrico permiten la apertura o cierre de canales inicos. Potencial de membrana (Vm) Partiremos dando un ejemplo de un modelo celular ideal, muy simple, en el cual aparte de la membrana de bicapa fosfolipdica hay canales que supondremos que estn cerrados En el lec predomina el catin Na y el anin Cl dentro, el catin ms abundante es K y los aniones son heterogneos, orgnicos pero en esta situacin ambos compartimientos estn electroneutros, es decir hay igual carga positiva y negativa en ambos casos. Como esta neutro, no hay potencial de membrana ( el Potencial elctrico es una separacin de cargas en el espacio, se le llama asi por que tiene la potencialidad de generar trabajo.) Si se abre el canal, en este caso de potasio, el K de adentro saldra hacia fuera por difusin,,, (canales inicos son una especie de difusin facilitada), entonces sale potasio, pero no sale hasta que se igualen concentraciones de K entre la clula y el medio, aunque sea una difusin, ya que ese principio se ocupa solo para sustancias sin carga. Si el K que tiene carga elctrica positiva, sale y deja afuera de la clula, una carga positiva y a dentro queda negativo, este desequilibrio de cargas elctricas es el potencial de membrana, y a medida que salgan cargas positivas (K) , tambin se va a impedir que siga saliendo iones

positivos. (Nunca se equilibrara las concentracin de potasio interna con la externa, Solo salen pocos millones de iones de K, que no alteran la concentracin de medio extra o intra celular ya q dentro de la clula Existen billones de iones). Lo que se requiere para establecer potencial de membrana (Vm) es Permeabilidad de la membrana a 1 o mas iones, y diferencia de concentraciones del ion en medio intra y extracelular, teniendo ambas cosas, se produce la difusin de un ion, y la difusin del ion permite la creacin del potencial de membrana. Una cosa relevante, pero sin mucho detalle el potencial de membrana se puede medir con voltmetros (2 electrodos, uno se inserta dentro de clula (lic) y otro en lec, entonces se mide la diferencia de potencial) En todas las clulas eucariticas, el potencial de membrana se debe principalmente a difusin de K. si sale potasio la cel. se hace mas negativa, entonces el potencial de membrana es negativo, esto quiere decir que el medio extracelular tiene 0 Milivolt por definicin (potencial) y el medio intracelular tiene un valor negativo de milivolt. Los potenciales de membrana son ms o menos entre -60 Mv y -90 Mv. Hasta cuanto difunde un Ion? Ej: el potasio difunde por gradiente qumico, pero a medida que difunde potasio afuera de cel. Queda afuera mas positivo, de tal manera que ocurre una fuerza opuesta de naturaleza elctrica que se opone a la salida de K. Deja de difundir un ion cuando la fuerza de repulsin elctrica que se produce por el potencial elctrico ( E ) generado por la difusin del Ion (en este caso K), contrarresta, sea, iguala a la fuerza qumica producida por diferencia de concentraciones (que provoca difusin). Cuando esto ocurre, el potencial de membrana que se estableci corresponde al potencial de equilibrio del ion (Ex) y no hay movimiento neto de Ion X (en este caso K). entonces uno puede ,en virtud de la termodinmica (gracias a Nernst), se puede determinar el Potencial de equlibrio de un ion (Ex) y por ende el potencial de membrana (Vm) La fuerza elctrica que se esta oponiendo a la qumica va a ser proporcional a la carga del Ion (Z) , a una constante (Faraday: F) y el potencial elctrico q se establece y la fuerza qumica que provoca la salida del ion va a ser proporciona al a temperatura (T en kelvin) multiplicado por constante de gases ( R ) y la multiplicacin del Logaritmo natural por la concentracin del ion en el medio extracelular divido la concentracin de medio intracelular.

Como ya se dijo anteriormente, el potencial de membrana, que se estableci al equilibrarse la fuerza elctrica que se opone a la qumica, corresponde al potencial de equilibrio del Ion.

Se puede simplificar la ecuacin de nerst cuando la temeperatura es 20C (293 K) y con logaritmo en base decimal (en mV)

Entonces el Ex depende de la carga del ion y la razn entre las concentracin del Ion en compartimiento extracelular e intracelular. Si la membrana solo tuviera permeabilidad a el ion X entonces Vm = Ex (seria fcil calcular el Ex, si la membrana solo tuviera permeabilidad a un ion, pero la realidad es otra.) Bsicamente hay 3 iones que difunden en membranas biolgicas con cierta facilidad: K, Cl y Na. Siendo mas alta la permeabilidad de K el Cl no es tanto porque el potencial de membrana es muy parecido a Ex de Cl por lo tanto no hay movimiento neto de este Ion, y el Na obviamente se mueve hacia adentro, ya que adentro de clula predominan las cargas negativas. La pregunta del milln es como podemos calcular el potencial de membrana si tenemos mas de un Ion en nuestro sistema? Esto se logra con la ecuacin de Goldman-hodgkin- katz, que es una derivacin de la ecuacin de Nernst. Esta permite calcular el potencial de membrana Vm.

La diferencia con nernst es que aparece la P (permeabilidad, es una medida que mide la facilidad con q los iones atraviesan membrana), ac la P multiplica la concentracin intra celular y extracelular de cada ion. Z no esta, ya q todos los iones tienen carga +1 , entonce se dividio por 1 y se eliminan, en el caso del Cl, como su carga es -1, entonces se invierte. Podemos concluir de la formula entonces, que El Vm depender como era habitual de la razn entre las concentracin extra e intracelular, y la permeabilidad de cada uno de los iones. Nos podemos dar cuenta q el Vm siempre ser cercano al Ex del Ion que tiene mayor permeabilidad. Entonces si por ejemplo la permeabilidad de 2 de los iones es muy baja en comparacin a un tercero, entonces sus permeabilidades sern algo parecido a 0, por lo tanto solo queda calcular la ecuacin solo con la P y concentracin en extra e intracelular del Ion q tenga mayor P, que luego se simplicara (la P), entonces queda la ecuacin de Nernst.

El potencial de equilibrio de K es -90mV, el de Na +55mV y el de Cl -70mV. Entonces si por ejemplo la permeabilidad del K es muy alta, entonces el Vm sera cercano a -90mV. En el sistema nervioso, la base del manejo de seales elctricas se debe a q se producen en las distintas clulas, cambios en el Vm, producidos gracias a los cambios de permeabilidad de un ion. (ya que si cambia la P a un ion, necesariamente cambia el Vm.). Esto es ocupado como seales elctricas que permiten comunicar y conducir la informacin a lo largo de distintas vas neuronales. Diapo 11 Si uno pone un electrodo en un hepatocito y registra el Vm (todas lo tienen) y en todas las clulas es cerca de los -60mV. Pero si uno lo registra, no cambia mucho el Vm, ya que el hepatocito no ocupa seales elctricas como mecanismo de comunicacin. Sin embargo si se registra una neurona, se ve que hay cambios regulares del Vm , y muy significativos, particularmente los cambios mas grandes y notorios son los llamados los POTENCIALES DE ACCION (PA). Entonces los PA son la forma de conducir info. De las clulas nerviosas. Y los PA son propios de las clulas excitable, las clulas excitables son dos: cel neuronales y musculares (estriado, liso, etc) hay clulas endocrinas tambin, pero las neuronales y musculares generan PA que lucen una gran despolarizacin, seguida por una repolarizacin y una hiperpolarizacin, y esto se repite con una frecuencia propia de la circunstancia y la clula que estemos viendo. Estos PA es la forma con la q se conduce las seales elctrica en neuronas y son propias de los axones, ya que los cambios de permeabilidad que provocan cambio en Vm, ocurren en canales que se concentran en axones. (el PA en neurona no es algo que por lo general involucre a toda la clula, sino que especficamente al axon). Potencial de Accin (PA) Debido a que se genera un potencial de accin? Todo lo q hablemos de neurona, es con respecto al axn. (DIAPO 12) Usted puede poner en un voltmetro a una neurona y unos electrodos para inyectar corriente a la neurona. Si uno inyecta un poco de corriente a la neurona va a generar un cambio en el potencial, en este caso se esta poniendo un poco de carga positiva a la neurona y esto provoca una pequea despolarizacin, si se hace lo mismo con un poco mas de corriente, entonces la despolarizacin es un poco mayor, esto quiere decir q la respuesta es proporcional a la inyeccin de carga que yo estoy haciendo. Sin embargo si aumento un poco mas, digamos el doble de corriente, esperaramos que se despolarice el doble la clula , sin embargo cuando se hace esta inyeccin de corriente, se origina en la clula una gran despolarizacin rpida (que ya no es proporcional a la carga inyectada), seguida por una repolarizacin y que incluso se pasa a ser mas negativo, que se le llama hiperpolarizacin. (Esto es el famoso potencial de accin) Como dice la frase:

Uno experimentalmente puede generar PA en una clula excitable produciendo una despolarizacin, cuando se le agrega corriente de una cierta magnitud si es menor a la magnitud requerida, se obtiene una respuesta pasiva, pero si es igual o superior a la condicin que genera el PA, tenemos esta respuesta que es de tipo activa, el famoso PA. En vivo esta despolarizacin se logra por el conjunto de acciones que estn ocurriendo en sinapsis, por accin de neurotransmisores. Para ver esto de una manera mejor, hay q recordar la famosa ley de Ohm, la q dice: Q La corriente (I) que circula en un circuito va a ser proporcional a la diferencia de potencial (V) que hay en el circuito, dividido por la resistencia (R) I = V/R. Para efecto de circuitos biolgicos, uno mas que resistencia utiliza conductancia (G), y la conductancia no es otra cosa q : G= 1/R ; entonces queda I = V x G. Si la conductancia es constante, el potencial (V) y la corriente (I) son proporcionales entre si. Y para llevar esto a terreno biolgico, uno podra decir que la conductancia es algo as como la medida elctrica de permeabilidad. De la misma manera la corriente seria el flujo de iones. Entonces como vemos ac, si uno aplica corriente, se van a registrar segn la ley de Ohm, cambios en el potencial Por ejemplo si uno inyecta una seal hiperpolarizante (se hace ms negativa la celula), uno registra una hiperpolarizacion pequea, si se inyecta una corriente negativa mas grande, se hiperpolariza mas siempre hay una proporcionalidad entre la corriente y el potencial. Ahora por ejemplo inyecto poca corriente positiva, ocurrir una despolarizacin pequea, si inyecto mas corriente +, ocurrir una mayor despolarizacin, pero si inyecto suficiente corriente, se puede lograr una despolarizacin que no es proporcional a la anterior. Se genera el famoso PA. Ahora, podr una clula escaparse a la ley de Ohm? Resp: nadie esta sobre la ley jeje La clula igual respeta la Ley de Ohm, y porque entonces no se ve la proporcionalidad en el caso anterior? Porque el ejemplo que estbamos viendo, no estbamos en esta condicin (circuito), al agregar la inyeccin de corriente positiva vamos a alterar la conductancia de la membrana. Si la corriente es mayor , el cambio de potencial ser mucho mayor. Los estimulos que permiten generar el PA, se llama estmulos umbrales o supraumbrales. Para generar un PA se necesita llegar a un Vm mas positivo que el que tena originalmente la clula (neurona), el potencial original se llama potencial de reposo. Si se alcanza un potencial umbral, se genera PA y si se sobrepasa el potencial umbral con estimulo aun mas grandes, el PA es exactamente igual, entonces es TODO O NADA. El PA tiene bsicamente 3 etapas, una gran despolarizacin, una gran repolarizacin y una pequea hiperpolarizacin, pero la hiperpolarizacin no es otra cosa que la continuidad de la repolarizacin. Si miramos la ecuacin de Goldman, y sabiendo de que las concentraciones inicas del medio extra e intra no varan, debido a que cambia el Vm? Cambia debido a la permeabilidad. Recordando los Ex de K, Cl y Na (K es -90mV, el de Na +55mV y el de Cl -70mV) y que el Vm siempre ser mas cercano al Ex del Ion q tenga mayor permeabilidad.

Entonces cuando se inicia el PA, en la fase de despolarizacin, el Vm llega a +30 o + 40, dependiendo de la clula. Esto quiere decir que aumento bruscamente la permeabilidad del Na (ya q es el nico con Ex positivo, y el Vm siempre es cercano al Ex del ion de mayor permeabilidad). Luego en la fase de repolarizacin nos acercamos a -70, q es parecido al Ex de Cl, pero en realidad aumenta la permeabilidad del K. (potasio sale entonces) Esto ocurre bsicamente porque las neuronas o msculos, tienen dos tipos de molculas que no existen en la mayora de las otras clulas, canales de Na y K dependientes de potencial. Entonces las neuronas en sus axones tienen canales inicos que se abren con la despolarizacin, y hay unos canales especficos para Na y otros a K. Al despolarizarse la clula (por neurotransmisores o por los electrodos en forma experimental) , el canal de K por ejemplo, se abre, porque el censor de voltaje del canal detecta el cambio de potencial y permite el flujo de potasio. Con el sodio pasa lo mismo, solo que el sodio entra, y algo muy importante, el canal de sodio tiene 1 estado mas, aparte de cerrado o abierto. Este estado es el de inactividad, que ocurre siempre despus que el canal se haya abierto. (Canal inactivo = es un canal cerrado que esta inhabilitado para abrirse). Cuando la membrana esta polarizada (-70 mV) el canal esta cerrado, luego se despolariza (potencial umbral) y pasa a estar abierto el canal, ocurriendo una migracin masiva de Na hacia la clula y el voltaje de membrana llega a (+40mV) e inmediatamente ocurre la inactivacion del canal deteniendo el flujo de Na. Para que se cierre el canal de Na tiene que volver a polarizarse la clula. El canal de potasio es muy masivo, cuando esta despolarizada la clula, se abre el canal (saliendo K y dejando la clula negativa por lo tanto repolarizandola), cuando se repolariza se cierra el canal de K, quedando la membrana con Mv parecido al Ex del K. (Otra diferencia entre los canales es q el cambio conformacional del canal de Na es mucho mas rpido que el de K y tambin se cierra mas rpido, por eso que se abre primero el de Na al despolarizarse la celula). Entonces el PA se generara por cambios asincrnicos en la permeabilidad de membrana al Na y al K, cuya explicacin ultima se encuentra en las caractersticas moleculares propias de los canales (porque el de Na se abre mas rpido que el de K) Los canales se encuentran en el segmento inicial del axon hasta terminales axonales (donde se libera neurotransmisor). La onda despolarizante provocada por los neurotransmisores provocan el PA de un solo tramo del axon, luego el PA se propaga por el axon hasta los terminales axonicos soltando neurotransmisores.

PARTE CULMINE DE CLASE: Supongamos q una neurona esta en reposo, si esto sigue as los canales de K y Na dependiendo de voltaje siguen cerrados. Supongamos que llega una onda despolarizante superior al umbral y se alcanza un potencial de membrana positivo. Los canales entonces se abren, primero se abren los canales de Na, entrando Na a la celula y dejndola mas

positiva dentro a la clula y cambiando el Mv a positivo (35mV), luego los canales de Na se inactivan. En la segunda fase de PA, se terminan de abrir los canales de K y empieza a salir el K con carga positiva dejando negativa a la clula y as comienza la repolarizacin. Cae el potencial hasta acercarse a Ex de K (- 60 mV) y luego se hiperpolariza y luego vuelve a lo normal del principio y el canal de K se cierra y el de Na pasa de inactivo a cerrado. Aunque se vuelva al potencial de reposo, la clula a perdido K y a entrado Na como vimos al principio, en trminos de cantidad de concentracin eso es irrelevante, pero en toda la vida de la neurona claro q es relevante.se llenara de Na y perderia K y la neurona morira. Entonces No hay q olvidar q en todo momento esta manteniendo el gradiente de concentracin, sacando Na y entrando K, la bomba Na/K. Para q se genere el primer PA, se necesita un evento gatillante q provoca la despolarizacin (seales de neurotransmisor). si se llega a umbral ocurre todo lo q ya hablamos. Pero para que el PA se propague por axon, ya no necesitamos mas eventos gatillantes, pq el propio flujo de Na va a fluir por axon y despolarizara con su carga +, las regiones adyacentes de donde se genero el primer PA. En esas regiones adyadcentes se alcanza el potencial umbral y luego se alcanzara el PA, y as se propaga por axon. (El PA siempre se aleja de la zona donde ocurrio el evento gatillante y no se devuelve pq en el segmento q se acaba de producir PA, los canales de Na estan inactivos y ademas estan cerrados los canales de K. No se puede volver a despolarizar la zona pq no se puede abrir los canales de Na aunq llegara otra seal despolarizante, este periodo de inactividad se llama: Periodo refractario). El periodo refractario se divide en 2: uno absoluto (es absolutamente imposible generar otro PA) y otro relativo (Se puede generar un PA pero se necesita un estimulo Supraumbral). Los PA no son sumables. Con respecto a la propagacin de corriente por dentro del axon, se tiene 2 probabilidades, salir por la membrana o seguir por el axon, La corriente pasara por donde haya menor Resistencia. La resistencia axial (Ra) es menor q la de membrana (Rm) por lo tanto la mayor parte de corriente pasa por dentro del axon, por el citoplasma. Si uno quiere facilitar mas el flujo de corriente por el axon, hay q tener en cuenta q Ra dismunye a un mayor diametro del axon y Rm aumenta con un aislante como la vaina de mielina. Gracias a estos 2 elementos se aumenta la velocidad de conduccin del PA en el axon. Si bien el potencial de accin es muy rpido, hay veces q se necesita que sea mas rpido, por eso las moto neuronas tienen axones de alto dimetro y los axones envueltos en vaina de mielina sintetizados por clulas de Shawn (cel. Gliales). (En una neurona normal el PA se propaga a 100 Km/hr en una moto neurona, el PA viaja a 500 km/hr). Y de hecho es mas rpido el paso de corriente, ya q los canales de Na y K estan en zonas de axon sin Mielina, q son los nodos de Ranvier. Por lo tanto el flujo va saltando trozos de axon mielenizada. (Conduccin de PA en axon es saltatoria). FIN (jue horrible jue horrible. )

Burro de Shreck I