EXPERIMENTO II: DETERMINACIN DE LA VIABILIDAD DE LAS SEMILLAS

I) PLANTEAMIENTO DE UN PROBLEMA CIENTFICO: En todo cultivo es imprescindible tener en cuenta la calidad de la semilla para el xito del mismo. La semilla es el material de partida para la produccin y una condicin indispensable, para alcanzar el mximo rendimiento, es que sta tenga una buena respuesta bajo las condiciones de siembra y que produzca una plntula vigorosa. Desde un punto de vista sustentable, es imposible obtener una buena cosecha si no se parte de una semilla de calidad, ya que un cultivo puede resultar de una calidad inferior a la semilla sembrada, pero nunca mejor que ella. Las propiedades que deben reunir los lotes de semilla de calidad son (*): Autenticidad: El lote de semillas tiene que responder a la especie que queremos cultivar. Pureza: Debe estar libre de semillas extraas, de semillas de malezas u otros cultivos o especies. Limpieza: Las semillas deben estar libres de materias extraas como palillos o tierra. Sanidad: Han de estar libres de plagas y enfermedades. Viabilidad: Deben ser capaces de germinar y desarrollar una plntula normal en condiciones ptimas de siembra. Vigor: Deben germinar y desarrollar una plntula normal en situaciones de siembra desfavorables.

(*)www.semilla.cyta.com.ar/buenasemilla/buenasemilla.htm
El problema que vamos a resolver con esta experiencia es el siguiente: Cmo puede un agricultor determinar previamente la viabilidad de las semillas que siembra?

desfavorables.

II) INFORMACIN SOBRE EL PROBLEMA: FUNDAMENTOS TERICOS. Presentacin 2/Anexo 2 del cuaderno: Dormicin, descanso y viabilidad de las semillas. La viabilidad se define como el perodo de tiempo durante el cual las semillas conservan su capacidad para germinar. Es un perodo variable y depende del tipo de semilla y de las condiciones de almacenamiento (www.euita.upv.es/varios/biologia/Temas/tema_17.htm).

Una semilla slo puede germinar si su embrin est vivo, es decir si la semilla es viable. Pero una semilla viable puede no germinar por varias razones. La primera, por encontrarse en estado de dormicin, en cuyo caso, aunque la semilla se ponga en condiciones favorables de humedad, luz y temperatura, no germinar hasta que pase este periodo de dormicin. En segundo lugar, una semilla viable puede no germinar por falta de alguna de las condiciones externas adecuadas, como la luz, la temperatura o la humedad. La germinacin de las semillas requiere mucha energa para la realizacin de las funciones vitales de la nueva planta. Para conseguir esta energa, las clulas del embrin realizan el proceso de RESPIRACIN CELULAR, a partir de la materia orgnica, gracias a una serie de reacciones qumicas oxidativas, en las que se liberan electrones, que sirven para reducir el oxgeno que absorbe la semilla y transformarlo en agua. MATERIA ORGNICA + O2 CO2 +H20 + ENERGA

Las sales de tetrazolio nos pueden servir para saber si la semilla respira, es decir, si est viva, de una forma muy rpida y sencilla. Estas sales son incoloras cuando estn oxidadas, pero se vuelven rojas si se reducen con los electrones que se liberan durante la respiracin celular. Si al tratar a una semilla con esta sustancia vemos que adquiere un color rojizo, diremos que la semilla respira y que, por tanto, est viva (es viable). Si no cambia su color, podemos decir que la semilla est muerta y, por lo tanto, no ser viable. III) EXPERIMENTACIN III.0. DISEA TU EXPERIMENTO Con la informacin que has recibido, se te ocurre alguna forma de comprobar la viabilidad de las semillas? Disea un procedimiento experimental, indicando los materiales que utilizaras y el procedimiento que seguiras.

III.1. MATERIALES Y REACTIVOS: Semillas de maz vivas embebidas en agua durante 24 h (1). Semillas de maz muertas embebidas en agua durante 24 h (2). Bistur Pinzas Papel de aluminio

Papel de filtro (hay que recortarlo con el tamao y el dimetro de la base de una placa de Petri. Placas de Petri Estufa Disolucin de cloruro de trifenil tetrazolio al 1,1 % (3).

III.2. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL: PONTE GUANTES PARA REALIZAR ESTE EXPERIMENTO. TEN MUCHO CUIDADO CON EL BISTUR! 1. Las semillas de maz deben estar 24 h en imbibicin. 2. Divide las semillas por la lnea media de manera que el embrin quede escindido por la mitad. Para ello sujeta las semillas una a una con las pinzas. 3. Coloca el papel de filtro recortado sobre la mitad inferior de cada una de las 5 placas de Petri, numeradas segn la tabla 1. 4. Pon 10 semillas escindidas en cada una de las placas, tal como se recoge en la Tabla 1. Las cubiertas deben quedar hacia arriba, para que la disolucin penetre en el embrin (en total habr 20 mitades en cada placa). 5. Aade 5 ml de agua destilada a las placas control (1 y 2) y 4 ml a las placas 3, 4 y 5. 6. Aade 1 ml de cloruro de trifenil tetrazolio a las placas 3, 4 y 5. 7. Cubre las placas con papel de aluminio para evitar reacciones fotoqumicas e incuba durante 12 horas en la estufa a unos 32 C. 8. Observa la aparicin de color rojizo, indicativa de la reduccin de sales de tetrazolio y completa la tabla de resultados. TABLA 1 IDENTIFICACIN PLACA 1 PLACA 2 PLACA 3 PLACA 4 PLACA 5 SEMILLA (10 semillas escindidas) MAZ VIVAS MAZ MUERTAS MAZ VIVAS MAZ MUERTAS MAZ MUESTRA PROBLEMA INCUBACIN 1-2 h 1-2 h 1-2 h 1-2 h 1-2 h DISOLUCIN AADIDA 5 ml de agua destilada 5 ml de agua destilada 1 ml de Cloruro de tetrazolio + 4 ml de agua destilada 1 ml de Cloruro de tetrazolio + 4 ml de agua destilada 1 ml de Cloruro de tetrazolio + 4 ml de agua destilada

III.3. RESULTADOS: Anota los resultados en la siguiente tabla. Ten en cuenta que el nmero de embriones es igual al nmero de mitades, dividido entre dos. IDENTIFICACIN PLACA 1 PLACA 2 SEMILLA MAZ VIVAS MAZ TRATAMIENTO 5 ml de agua destilada 5 ml de agua destilada EMBRIONES ROJOS (%) EMBRIONES INCOLOROS (%)

MUERTAS PLACA 3 PLACA 4 MAZ VIVAS MAZ MUERTAS MAZ MUESTRA PROBLEMA 1 ml de Cloruro de tetrazolio + 4 ml de agua destilada 1 ml de Cloruro de tetrazolio + 4 ml de agua destilada 1 ml de Cloruro de tetrazolio + 4 ml de agua destilada

PLACA 5

Pasa estos resultados a una hoja de clculo y represntalos grficamente

III.4. INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS Y CUESTIONES: Responde a las siguientes cuestiones: a) Compara los resultados entre las placas y explica las diferencias observadas.

b) La respiracin celular es un conjunto de procesos bioqumicos regulados por unas protenas denominadas enzimas. Se te ocurre alguna forma de inhibir la respiracin de las semillas? Busca informacin en la red.

III.5. OTRAS CUESTIONES: a) Adems del embrin, qu otras partes de la semilla pueden tener actividad respiratoria?

b) La viabilidad de la semilla asegura su germinacin?

c) Si una semilla no es viable, germinar?

d) Si las cubiertas de las semillas se ponen hacia abajo, en contacto con el tetrazolio, se colorearn las semillas? Por qu?

BIBLIOGRAFA 1) 1) FISIOLOGA VEGETAL J. Barcel Coll, G. Nicols Rodrigo, B. Sabater Garca y R. Snchez Tams. Ediciones Pirmide S.A., Madrid, 2003. 2) 2) FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL. J. Azcn-Bieto y M. Taln. McGraw-Hill/ Interamericana, Madrid, 2000. 3) 3) SEED. C.C. Baskin, J.M. Baskin. Academic Press, London, 2001. 4) 4) PLANT PHYSIOLOGICAL ECOLOGY. H. Lambers, F.S. Chapin III, T.J. Pons. Springer (2 edicin). 2008. 5) Fisiologa vegetal experimental. Gladys Fernndez. Ed. IIACA. 1986 6) www.semilla.cyta.com.ar/buenasemilla/buenasemilla.htm 7) www.euita.upv.es/varios/biologia/Temas/tema_17.htm

NOTAS: (1) La semilla de maz, una planta monocotilednea, es endosprmica y su germinacin es hipogea. Consideramos que estn vivas ya que en diferentes pruebas de viabilidad efectuadas se han obtenido resultados del 100 %. (2) Para conseguir semillas muertas, hervid durante 30 minutos las semillas. De esta forma se desnaturalizarn las enzimas necesarias para la germinacin. Tambin se pueden sumergir las semillas en cloruro de amonio al 4 % durante 1 hora. Con este procedimiento las semillas se mueren por acumulacin de sal en el interior o bien el aumento de la permeabilidad de la testa (Fisiologa vegetal experimental. Gladys Fernndez. Ed. IIACA. 1986) (3) Preparamos la disolucin de cloruro de tetrazolio al 1,1 % con 80 ml de agua destilada y 0,88 g de cloruro de trifenil tetrazolio.