Bases moleculares del cncer

Realizado por: Julio Torres Gonzlez Manuel Pedro Jimnez Garca

ndice del seminario

1) Introduccin conceptual
2) Oncogenes y genes supresores de tumores 3) Ciclo celular. Factores de crecimiento y sus receptores 4) Rutas de transduccin de seales implicadas

5) Microambiente tumoral, angiognesis y metstasis

6) Tipologa de cncer: 6.1) Cncer de pulmn 6.2) Cncer colorrectal 6.3) Cncer de mama 6.4) Cncer de hgado

1) Introduccin conceptual

Clula normal y sana: Regulacin ciclo celular Seales estimuladoras/inhibidoras . Seales estimuladoras proto-oncogenes Seales inhibidoras genes supresores de tumores Seales transmitidas por protenas codificadas por esos genes que permiten cascada de transduccin de seales. Resultado Proliferacin celular controlada.

Proceso de neoplasia: clula sana tumorognica: Mutaciones en proto-oncogenes oncogenes protenas (+) anmalas o no. Mutaciones en GST protenas (-) anmalas o no codificadas. Se altera la cascada de transduccin de seales Accin oncognica estimulando la proliferacin celular Accin de GST inhibiendo los mecanismos que detienen la divisin celular. Intervienen alteraciones en genes de reparacin del DNA y genes de apoptosis. Resultado Proliferacin celular incontrolada.

1) Introduccin conceptual

Factores que inducen la neoplasia: Desequilibrio entre: Protooncogenes Genes supresores de tumores Genes reparadores del DNA Genes de apoptosis Inmortalidad celular. Modificacin epigentica anmala. Factores inductores de angiognesis. Factores inductores de metstasis. Evasin de los mecanismos inmunolgicos Causas: Herencia Sustancias qumicas (tabaco) Radiacin ionizante y UV. Virus

Definicin de Cncer: Grupo de enfermedades caracterizadas por la proliferacin autnoma de clulas neoplsicas originadas por la suma de mutaciones, inestabilidad gentica y modificacin epigentica.

1) Introduccin conceptual: Tipos de mutaciones.

Mutaciones de ganancia de funcin en OG (dominantes)

Mutaciones puntuales: sustitucin de una base cambio de codn.

Translocacin cromosmica: Fusin de dos genes gen hbrido protena quimrica constitutiva. POG bajo un promotor diferente expresin diferente. Hipermetilacin de zonas intrnicas: facilitando el ayuste del mRNA proto-oncognico. Hipometilacin del promotor: sobre-expresando el proto-oncogen

Insercin de un promotor viral: secuencia promotora LTR de retrovirus.

Deleccin: de una regin que acerca un promotor constitutivo a un proto-oncogn.

Mutaciones de prdida de funcin de GST (recesivas). Mutaciones puntuales: cambio de aa o codones de parada. Protena afuncional No se expresa la protena Hipermetilacin del promotor: o en elementos de control de expresin. Deleccin del GST: y tambin de genes anexos.

1) Introduccin conceptual
Apoptosis
Proceso celular activo, genticamente controlado. Autoeliminacin celular. Permite mantener la homeostasis celular. Factores que inducen apoptosis: Dao en el DNA. Errores durante la mitosis Hipoxia y falta de nutrientes. Factores de crecimiento Hormonas Biomolculas reguladoras de la apoptosis: 1) Inhibidoras: Bcl2, NIAP, XIAP, Survivina. 2) Activadoras: TNF, Fas, Caspasas, Apaf-1. 3) Accin de p53: regula a nivel de Bcl2, de TNF, de Fas, y afectando al potencial de membrana mitocondrial.

Senescencia celular Proceso de estacionamiento celular (no divisin celular) iniciado como respuesta al estrs, dao en el DNA o acortamiento de los telmeros. Ruta alternativa a la apoptosis Suprime la formacin de clulas cancergenas.

2) Oncogenes (OG)

Definicin:
Proto-oncogenes: genes responsables de la codificacin de protenas nucleares, citoplasmticas y de membrana implicados en la regulacin de la proliferacin y/o diferenciacin celular (homeostasis celular). Oncogenes: son proto-oncogenes mutados que participan en cascadas de sealizacin inducen constitutivamente divisin celular, induciendo cncer.

Funcin oncognica:

Los oncogenes afectan la regulacin del ciclo celular, en las vas implicadas en diferenciacin, apoptosis o estimulacin del ciclo celular.

Clasificacin:
Factores de crecimiento (PDGF, int-2) Receptores de factores de crecimiento (activacin constitutiva). Proten-quinasas citoplasmticas (abl, fes, fgr, raf-1, src). Protenas oncognicas unidas a GTP (Ras, gsp) Reguladores transcripcionales (erbA-1, fos, jun, c-myc) Protenas oncognicas virales.

2.2) Genes supresores de tumores (GST)

Definicin:
Genes que reducen la probabilidad de que una clula se transforme en una clula cancergena, inhibiendo la proliferacin celular Una mutacin o una delecin de GST confiere prdida de funcin.

Mecanismos de accin de GST:

Inhibiendo la progresin de las clulas a travs del ciclo celular. Haciendo que las clulas entren en apoptosis. Manteniendo la estabilidad del genoma (replicacin, reparacin y segregacin).

GST conocidos: p53: gen guardin del genoma Rb: gen del retinoblastoma p21, p16, p27, p57, etc.

2.2) Genes supresores de tumores (GST)

p53

20 Kb (Crom. 7).11 exones. Fosfoprotena p53 (393 aa): Ubicua de todos los tejidos 3 dominios funcionales Est regulada por la protena Mdm2 Funcin de p53 normal Parada del ciclo celular Senescencia y apoptosis Reparacin del DNA Diferenciacin celular Vida media de la protena 20 minutos.
Mutaciones de p53: 87% de las mutaciones mutaciones sin sentido, no hay niveles de p53. 50-60% de los cnceres humanos p53 mutada. Funcin de p53 mutado: Prdida de supresin de crecimiento celular. Promocin del crecimiento tumoral. Inmortalizacin celular. Vida media de la protena anmala horas.

Rb

200 Kb. (Crom 13). 27 exones. Protena Rb (110 KDa) localizada en el ncleo celular. Funcin Rb-E2F: Mantiene fase G0 o G1 Acomplejado con el factor de transcripcin E2F. Funcin Rb sin E2F: Regula enzimas que sintetizan nucletidos y polimerizan DNA. Regula la activacin transcripcional de varios genes virales y celulares.

Mutaciones en el sitio de unin:

Liberan el factor de transcripcin

Impiden regular el ciclo celular entrada en fase S divisin celular.

2.3) Comparativa de las propiedades de OG vs GST

3.1) Ciclo celular

Fases: G1:
Crecimiento celular. Sntesis de protenas y RNA.

S:
Replicacin de DNA.

G2:
Cambios en la estructura celular. Comienzo de la divisin.

M:
Divisin celular
Reguladores del ciclo celular: Gen crtico cdc2. o Quinasas dependientes de ciclinas (cdks). o Ciclinas. Se pueden dividir en: Ciclinas fase G2/M (ciclinas B1 y B2). Se asocia cdk1. Ciclinas fase G1/S (ciclinas C, D y E). Se asocia con cdk2, 4 y 5; con Rb y con PCNA. Ciclina A.

3.2) Factores de crecimiento y receptores

Conjunto de procesos que ocurren de forma concatenada en la clula. Convierten una seal o estmulo exterior en otra seal o respuesta especfica. Las seales pueden ser: Extracelulares. Intracelulares. Intercelulares. Los receptores pueden ser: Transmembrana. Nucleares.

Receptores de los factores de crecimiento:

Vas positivas (estimuladoras) y negativas (inhibidoras). Se pueden activar por dos mecanismos:
1.

2.

Por cambios conformacionales en el dominio externo. Por dimerizacin u oligomerizacin por el ligando de unin.

Tipos:
EGF FGF HGF IGF Neurotrofinas. PDGF VEGF F. Hematopoyticos.

4) Rutas de transduccin de seales.

4.1) Receptores tirosin-quinasas.

Subunidades: o IRS-1 Receptor de insulina. o CSF-1Mnima afinidad por PLC- y GAP. o EGF y erbB2ineficientes para fosforilacin de GAP. o FGF Fosforilan p90. o PDGF Interacta con PLC-, PI3K y GAP.

Protenas de sealizacin de PDGF: Tipo 1: con funcin enzimtica.

Incluye PLC-, GAP, PRP1C y oncogn vav.

Tipo II: con funcin adaptadora o reguladora.

Incluyen PI3K, c-crk, nck, shc y sem/GRB5/ASH.

PLC-: Generacin IP3 (liberacin de Ca2+) y DAG (activa PKC) como segundos mensajeros. PI3K: Fosforilacin anillo inositol. GAP: Inhibidor de ras, y estimula GTAasa en p21-ras.

4.2) MAP quinasas

MAP quinasas: Quinasas de protenas de activacin de la mitosis. Tres tipos (de acuerdo con su sustrato):

Quinasas de ERT. Quinasas de MAP-2. Quinasas de RSK.

-

ERKs (quinasas reguladoras de

seales extracelulares)

Se inicia la cascada se seales activando ras p21 activa quinasa serina/treonina de Raf. La quinasa de Raf es el activador directo de MAP quinasas. Sustrato principal de MAP quinasa: protena S6 ribosomal. Puede actuar tambin sobre proto-oncogen jun, p62, myc. Esta protena gnica myc aumenta: Ciclinas de la fase G1, que se unen a cdk2, fosforilan Rb, y permiten la duplicacin del DNA. Protena SCF, que degrada p27 para que no se inhiba el complejo ciclina G1/cdk2. Otros factores transcripcionales son: fos, myb, rel, ets (ligados a las vas de sealizacin mitognica)

5.1) Microambiente tumoral

Los tumores son reconocidos como rganos, cuya complejidad se aproxima, o incluso puede llegar a ser superior a la normal de los tejidos sanos. Contrasta con la visin reduccionista de un tumor Coleccin de clulas tumorales relativamente homogneas.

Tipos celulares:
Clulas cancerosas y Clulas madre cancerosas (Cancer Stem Cell CSC). Clulas endoteliales. Pericitos. Clulas inmunes inflamatorias. Fibroblastos asociados al cncer. Clula del cncer invasivo (metastsica). Matriz extracelular (MEC): engloba, protege y nutre el microambiente tumoral.

La induccin de cambios en la MEC es suficiente para inducir fenotipo tumoral.

La capacidad oncognica del estroma procede de:

Fibroblastos asociados al tumor. Clulas linfoides que constituyen la respuesta inmune. Alteracin de la tensegridad por la MEC.

Se produce una comunicacin entre las clulas del estroma y las clulas parenquimticas Dirige la expresin gnica.
La interaccin estroma-parnquima, influenciada por seales reguladoras extracelulares que proceden del microambiente tumoral, conforman el marco epigentico y la consideracin de las clulas tumorales como atractores que constituyen las bases no genticas de la progresin tumoral.

5.2) Angiognesis
Proceso de formacin de vasos sanguneos a partir de un lecho vascular preexistente, que induce un tumor primario.

Proceso regulado por: Factores de crecimiento y sus receptores Factores fsicos:

Acmulo de desechos Requerimientos de oxgeno Hipoxia

Proceso angiognico
a) b)

c) d)

Activacin angiognica Degradacin proteoltica de la matriz extracelular Migracin de clulas endoteliales Morfognesis y estabilizacin de los nuevos vasos.

a) Activacin angiognica Existen dos tipos de seales principales: Hipoxia

Protena HIF-1 (heterodimrica). En condiciones de hipoxia HIF-1 se activa Funciones de HIF-1:
Transcripcin de VEGF Alteracin de los niveles de p21, Bcl-2 y p53.

b) Degradacin de la matriz extracelular:

Degradacin proteoltica de la lmina basal y del estroma que rodea los capilares. Se produce por un equilibrio entre: Enzimas proteolticas:
Metaloproteinasas de matriz (MMP) Plasmingeno tipo uroquinasa (u-PA)

Seales activadoras:
Factores de crecimiento de endotelio vascular (VEGFs). Receptor VEFR2 Angiopoyetinas

Factores de crecimiento de fibroblastos

Citoquinas y quimiocinas, etc.

Inhibidores de las enzimas proteolticas:

Inhibidor del u-PA (u-PAI)

Va de transduccin de seales: VEGF/VEFR2

c) Migracin de clulas endoteliales

d) Morfognesis y estabilizacin de los nuevos vasos.

El nuevo vaso va creciendo por incorporacin de nuevas clulas endoteliales. Para migrar al estmulo (tumor), las nuevas clulas endoteliales cambian:

Su citoesqueleto accin de GTPasas (Ras) El patrn de molculas de superficie (integrinas, molculas de adhesin).

Se pasa a una rediferenciacin celular de las nuevas clulas endoteliales capilares:

Algunas clulas pasan a quiescencia Incrementan la adhesibilidad. Comienzan a producir lmina basal y matriz extracelular. Se reclutan clulas perivasculares para estabilizar el capilar.

5.3) Metstasis

Proceso de diseminacin de las clulas cancerosas del tumor primario a travs del torrente sanguneo hasta otro tejido formando un tumor secundario.

Requisitos previos: 1) Proceso angiognico completo 2) Adquisicin del fenotipo invasivo

Fases de la metstasis: 1) Intravasacin (capilares torrente sanguneo). 2) Trnsito va linftica o sangunea 3) Interaccin de las molculas de superficie de la clula tumoral con las del endotelio. 4) Extravasacin 5) Formacin de micrometstasis 6) Formacin del microambiente tumoral 7) Colonizacin completa.

6) Tipologas de cncer

Teora de la clulas madre cancerosas (cancer stem cells): Clulas que poseen la capacidad de autorrenovacin, que originan todos los linajes celulares del tumor a partir de divisiones asimtricas.

6.1) Cncer de pulmn

Tumor con ms importancia en cuanto a mortalidad en el mundo. Han aumentado los casos exponencialmente en los ltimos 7080 aos. El principal causante es el tabaco (90% en hombres y 60-80% en mujeres).

Tambin estn implicados factores ambientales, y la exposicin a otras sustancias (asbesto, radn, arsnico, berilio, cromo, etc.).
Es el resultado de alteraciones (mutaciones) irreversibles del epitelio bronquial. Existen dos tipos: CPCP (microctico) y CPCNP.

Cncer de pulmn: Tipos de alteraciones genticas

Alteraciones genticas en componentes del ciclo celular.

Genes alterados: Rb (en CPCP) y p16 (en CPCNP). Ciclinas (A, B, D y E) y quinasas dep. de ciclinas (CDK1, 2, 4 y 6).

Alteraciones gnicas en vas transductoras de seales bioqumicas.

Genes mutados: PTEN (en CPCP) y LKB1 (en adenocarcinomas). Oncogn K-ras.

Alteraciones gnicas en la va de la apoptosis.

Mutacin en p53 y p14. Alteraciones epigenticas en fas, survivina, NFKB, etc.

Alteraciones gnicas en reguladores de la transcripcin gnica.

Genes mutados: myc (en CPCP). Prdidas de BRG1/SMARCA4 y de la actividad ATPasa de SWI/SNF.

6.2) Cncer colorrectal

Segundo caso de cncer ms comn en la poblacin. Tiene una mortalidad de aproximadamente el 50% de los casos. Se producen alteraciones en clulas del epitelio del colon y el recto. Existen dos rutas moleculares para el origen del cncer. La 1 patologa encontrada fue el sndrome de Lynch.
Va supresora:
Mutaciones en el gen del la APC de la poliposis mltiple familiar. Mutaciones en el oncogn K-ras (crea distintos grados de agresividad del tumor): Una mutacin en K-ras agiliza la progresin del tumor.

Va mutadora:
Alteracin en genes como hMSH2 hMLH1. Se traduce en errores en la replicacin de DNA. Crea microsatlites. Se crea un fenotipo llamada RER.

6.3) Cncer de mama

Es el cncer ms comn en las mujeres, y el que causa ms muertes entre ellas. A su vez es el 3 tipo de cncer total en el mundo.

Factores de riesgo: radica en la mutacin de los genes BCRA1 y BCRA2. Tambin estn implicados genes como FGFR2, TNRCP9 o TRAK 2.

Mutaciones en los lbulos mamarios.

Segn el lugar puede ser: ductal o lobular. Segn el grado de invasividad puede ser: in situ, infiltrante o inflamatorio.

Tumores de receptores estrognicos positivos (lumiales).

Receptores de estrgenos (RE) y progesterona (RP) positivos, y genes implicados en su regulacin como LIV1 y CCND1. Prdida de p16. Expresan citoqueratinas lumiales. 20% de mutacin en p53.

Tumores de receptores estrognicos negativos.

Dos subtipos: 1. Subtipo HER2: - Receptores hormonales positivos. - Sobreexpresin del gen HER2. - Baja expresin de RE y genes implicados en su replicacin. - Sobreexpresan ERBB2 y GRB7. - 40-80% de mutacin en p53.
2. Subtipo basal: - Baja expresin de HER2. - Intensa expresin de citoqueratinas 5, 6 y 17. - Baja expresin de RE y genes relacionados. - Mutacin en BCRA1, que expresa p63. - Alto % de mutacin en p53

Dos subtipos:
- Lumial A: Alta expresin de genes RE y baja expresin de genes de proliferacin celular.

- Lumial B: Baja expresin de genes RE y alta expresin de genes de proliferacin celular.

6.4) Cncer hepatocelular (CHC)

Generalidades: 5 tumor con mayor incidencia. 3 causa de muerte atribuda al cncer del mundo. 80% de CHC asientan sobre hgados cirrticos.
Genes frecuentemente mutados: Vas de sealizacin CHC

Wnt-beta-catenina. Regulacin de: Proliferacin, organognesis. Autorrenovacin de clulas madre

80%: p53 y beta-catenina. Porcentaje variable: c-myc, ciclina A2, ciclina D1, Rb1, p16, etc.

Epigentica

Vas dependientes de receptores tirosn-quinasa: Factor de crecimiento en hepatocitos (HGF): Regeneracin heptica. Receptor de alta afinidad: c-MET. Funciones en angiognesis, proliferacin, migracin.

Hipermetilacin de:
Regiones promotoras de GST Regiones intrnicas de POG Regiones promotoras de POG

Hipometilacin de:

Inestabilidad genmica.

95% de CHC reactivacin de la telomerasa

Origen celular CHC: 1) Clulas madre que mantienen una capacidad de autorrenovacin. 2) Cambio de fenotipo cancer stem cell. 3) CSC origina tipos celulares implicados en el tumor. Para erradicar el tumor: Marcadores especficos Agentes que eliminen slo a las cancer stem cells.

Bibliografa

Judith Meza-Junco, Aldo Montao-Loza y lvaro Aguayo-Gonzlez. Bases moleculares del cncer. Revista de investigacin clnica. 58 (1): 56-70.2006. Douglas Hanahan and Robert A. Weinberg. Hallmarks of Cancer:The Next Generation. Review. DOI 10.1016/j.cell.2011.02.013. Patologa Humana Robbins S., Kumar V.Y Cotran R. S. Editorial Ediciones Harcourt S.A. 7 ed. 2007. Montserrat Snchez-Cspedes. Alteraciones gentico-moleculares en el cncer de pulmn. Grupo de cncer de pulmn. Centro Nacional de Investigaciones Oncolgicas (CNIO). Madrid.
Ernesto Jos Zepeda Castilla, Edgar Recinos Money, Mario Cullar Hubbe, Carlos Daniel Robles Vidal y Eduardo Maafs Molina. Clasificacin molecular del cncer de mama. Ciruga y Cirujanos, enero-febrero, ao/vol. 76, nmero 001. pp-87-93. Victoria Tovar, Augusto Villanueva y Josep M. Llovet. Biologa celular y gentica en el cncer de hgado. Progresos en hepatologa. Artculo 179.672.

 Gracias por vuestra atencin !