RADIOBIOLOGIA

Thiago de Salazar e Fernandes, D. Sc.

(I) INTRODUO RADIOBIOLOGIA

Radiaes ionizantes

Espectro eletromagntico

Raios-X

CONTEXTO HISTRICO

USOS E ABUSOS

Shoe-fitting fluoroscope Dial painters - 1920

Creme facial

INCIDENTES RADIOLGICOS
Acidente de Hanford (1962) Acidente de Goinia (1987)

Bender e Cooch, 1966

Ramalho e Nascimento, 1991

Exposies atuais

IRRADIAO vs CONTAMINAO

Grandezas Fsicas
Exposio: Quantidade de carga eltrica produzida por ionizao no ar, por unidade de massa do ar.
Unidade: C/kg

Dose Absorvida : D = dE / dm
Unidade: J / kg , que recebe o nome de gray (Gy)

LET
A resposta das clulas de um tecido ou rgo vai depender do tipo e da mdia de energia da radiao (dE) que depositada na matria por unidade de comprimento (dl), definida como Transferncia Linear de Energia (LET).
LET = dE / dl Unidade: keV / m

TRANSFERNCIA LINEAR DE ENERGIA (LET)

(A)

xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

(B)

(A) Alto LET = partcula alfa, ons pesados (B) Baixo LET = raios X, gama, beta

TIPOS DE RADIAO

Alfa Radiao Corpuscular, baixo poder de penetrao Beta Radiao Corpuscular, alcance 10 x maior que alfa Gama Radiao Eletromagntica, alto poder de penetrao

Eficincia Biolgica Relativa (RBE)

Se a dose teste (Dt), dada como um tipo escolhido de radiao, produz um efeito biolgico particular, e o mesmo efeito biolgico produzido pela dose de referncia (Dref), o RBE da radiao de escolha dada pela relao
RBE = Dref / Dt

Conceito de Dose em Proteo Radiolgica

Fator de Ponderao da Radiao (wR)
Dose Equivalente: HT = S wR . DT,R Dose Efetiva: E = S wT . HT Unidade: sievert (Sv)

Fator de Ponderao do Tecido (wT)

WR

FASES DOS EFEITOS BIOLGICOS

Efeitos Fsicos Efeitos Qumicos Efeitos Biolgicos Efeitos Orgnicos

Ionizao

CIDO DESOXIRIBONUCLICO
Alvo da Proteo Radiolgica. Estrutura de dupla-hlice de DNA carrega o cdigo gentico da clula. A alterao da molcula de DNA pela radiao ionizante pode levar : Morte celular Reparo do dano Cncer

MECANISMOS DE DANO GENTICO

Efeito Direto Efeito Indireto

RI

Crommero Solenide Espirais

Nucleossomo

Cromossomos DNA

EFEITO DIRETO

RI

Dupla-hlice de DNA Watson e Crick (1953)

Quebra do DNA
DNA

SSB (Quebra da Fita Simples)

DSB (Quebra da Fita Dupla)

DANO AO DNA
DMERO DE PIRIMIDINA

QUEBRA DA FITA SIMPLES

ACCAR

ACAR

PERDA DA BASE

QUEBRA DE PONTES DE HIDROGNIO

QUEBRA DA FITA DUPLA

EFEITO INDIRETO
RI H2O H2O+ + eH+ + OH. H2O H2OH. + OHH2O2

EFEITO INDIRETO
Presena de O2
e- + O2 O2- + H2O2 H + O2 HO2 + H OH + H2O2 R + O2 O2OH- + HO2 (radical peroxila) HO2 H2O2 H2O+ + HO2 RO2 (perxido orgnico)

Potencializa o Efeito

Efeito Oxignio

REPARO

INTERAO DA RADIAO

LESES NO DNA vs DOSE

Tipo de leso Quebra fita dupla (dsb) Quebra simples fita (ssb) Dano na base Dano no accar ligaes cruzadas (crosslinks) DNA DNA ligaes cruzadas DNA protenas Stos lcali lbeis Leses por Gy 40 500 1000 1000 2000 800 1600 30 150 200 - 300

Deinococcus radiodurans

FATORES QUE INFLUENCIAM NO EFEITO BIOLGICO

Tipo de radiao (LET) Dose Taxa de dose Fracionamento da dose Exposio aguda ou crnica

FATORES FSICOS

FATORES QUMICOS agentes modificadores

Teor hdrico Presena de O2 (Efeito O2)

FATORES BIOLGICOS

Estado proliferativo (Lei de Bergonie e Tribondeau) Fase do ciclo celular Estado fisiolgico ou metablico Constituio gentica da clula

LEI DE BERGONI E TRIBONDEAU

Quanto mais diferenciada for a clula, maior a sua resistncia radiao; Quanto mais jovem for o tecido ou rgo, mais radiosensvel ele ser; Quanto maior a atividade metablica, maior a radiosensibilidade; Quanto maior a taxa de proliferao celular, maior a radiosensibilidade.

TECIDOS MAIS SENSVEIS

Entre os tecidos mais sensveis no homem esto:

ovrios testculos cristalino dos olhos medula ssea tecido sanguneo (linfcitos) tecido gastrointestinal

EFEITOS DA IRRADIAO AGUDA

NOS TESTCULOS 10 cGy - diminuio na contagem espermatognica (12 meses) 250 cGy - esterilidade temporria (2 - 3 anos ou mais) 400-600 cGy ou 1500 cGy fracionada (10 dias)- esterilidade permanente

0 Gy

9 Gy

NOS OVRIOS
150 a 200 cGy - (dose nica) - ambos ovrios esterilidade temporria supresso da menstruao (12 a 36 meses)

300-800 cGy ou 1000/2000 cGy fracionada ( poucos dias) esterilidade permanente com alterao hormonal

EFEITOS DA IRRADIAO AGUDA NA PELE

l danos nos tecidos da epiderme, derme e subcutneo l local de maior danos: camada germinativa da epiderme l local de resposta rpida: rede capilar da derme
epiderme derme subcutneo

Estudo de caso recente (trabalhador)

Exposio (paciente)

SNDROME DA RADIAO AGUDA

Estgio 1 Perodo Prodrmico Estgio 2 Latncia Estgio 3 Manifestao da Doena -Sndrome Hematolgica -Sndrome Gastrintestinal -Sndromed o SNC Estgio 4 Recuperao ou morte

Fase

Dose (Gy)

Tempo de sobrevida (dias) ----------------------------10 60

Sinais Clnicos e Sintomas

Prodrmica Latente Hematolgica

>1 1 - 100 2 - 10

Nusea, vmito e diarria Nenhum Nusea, vmito, diarria, anemia, leucopenia, hemorragia, febre, infeco

Gastrintestinal

10 - 50

10

O mesmo da hematolgica, mais desequilbrio eletroltico, letargia, fadiga e choque

Sistema Nervoso Central

> 50

O mesmo da gastrointestinal, mais ataxia, edema, vasculite, meningite

CONTAGEM SANGNEA

CONTAGEM DE GRANULCITOS

Radioproteo
O uso da Energia Nuclear uma tecnologia segura, se houver observncia quanto s normas de Radioproteo
Tempo Distncia Blindagem

CLASSIFICAO DOS EFEITOS BIOLGICOS

Dose e forma de resposta Tempo de manifestao Nvel de dano

DOSE E RESPOSTA
Estocsticos Determinsticos

DOSE E RESPOSTA
Estocsticos
Resposta estatstica
(loteria)

Determinsticos
Ocorrer sempre, proporcional a dose
(poupana)

HORMESIS vs LNT e LT

TEMPO DE MANIFESTAO
Efeitos Imediatos Sndrome da Irradiao Aguda Efeitos Tardios (ou retardados) Cncer

NVEL DO DANO
Somticos No indivduo irradiado Genticos (hereditrios) No descendente

(II) INTRODUO BIODOSIMETRIA

DANOS GENTICOS DAS RADIAES

RI
Hermann Joseph Muller (1927)

Barbara MacClintock (1931) RI

DANOS CITOGENTICOS
RI
Tradescantia microspores

Sax (1938)

CITOGENTICA

Hoe-Hin Tjio

Albert Levan (1956)

46 cromossomos

CARITIPO

AGENTES MITGENOS
Linfcitos T (CD4 e CD8) Linfcitos B Linfcito T (G0)

PHA
Mitose

Nowell et al. (1960)

LINFCITO

Excesso Regra!

Clula danificada Macrfago apresentador de antgeno Linfcitos T citotxico

Complexo antgeno MHC

Maturao Timo Linfcitos T de medula ssea linfocinas

Linf. T memria

Expanso clonal
Linfcito T (ativados)

Linf. T supressor

Linfcito T helper

FASES DO CICLO CELULAR

M
RI
Mais sensveis!

G2 Ciclo Celular
checkpoints

G1

G0 S

DIVISO CELULAR
Interfase

Prfase

Prometfase

Metfase

Anfase

Telfase

Citocinese

Colchicina Aberraes Cromossmicas Citocalasina B Microncleos

REARRANJOS INTRACROMOSSMICOS
INTERFASE METFASE

NORMAL

DELEO TERMINAL

INVERSO PERICNTRICA

DELEO INTERSTICIAL

ANEL ACNTRICO

ANEL CNTRICO

Lloyd e Dolphin, 1977

REARRANJOS INTERCROMOSSMICOS

METFASE

INTERFASE

NORMAL

DICNTRICO + FRAGMENTO

TRANSLOCAO

Lloyd e Dolphin, 1977

Formao de dicntricos

Formao de anis

Dicntrico Anel

Fragmento Fragmento acnctrico acntrico

Fragmento acntrico

ABERRAES CROMOSSMICAS INSTVEIS

ABERRAES CROMOSSMICAS
Colorao Giemsa

Dicntricos

??? Anel

ABERRAES CROMOSSMICAS ESTVEIS

FISH

TRANSLOCAO RECPROCA

INSERO

Insero

MICRONCLEOS

FORMAO DE MICRONCLEOS NUMA CLULA EM DIVISO

MICRONCLEOS

Microncleo

Fragmento acntrico

Perda cromossmica

Centrmero Negativo

Centrmero Positivo

BIODOSIMETRIA
Y = A+aD + bD2

1,5

alta LET DICNTRICOS/CLULAS

baixa LET

1,0

0,5

1,0

3,0

4,0

5,0

DOSE (Gy)
95

Dicentric yield

a particles Fast neutrons (High LET)

Effect

Y = c + aD

Gamma rays, X-rays acute exposure (Low LET)

Y = c + aD + bD2 Y = c + aD
Gamma rays X-rays chronic exposure (Low LET)

Dose

BIODOSIMETRIA

DOSIMETRIA BIOLGICA
REPARO Radiao Ionizante DANO DNA DANO NO REPARADO Morte celular Mutao Cncer

TCNICAS (EM NVEL CELULAR)

Citogenticas

Aberraes cromossmicas Microncleos Troca entre cromtides irms Cometa Hibridizao in situ

Dosimetria biolgica Gentica toxicolgica Biomonitoramento Instabilidade genmica

Bioqumicas Moleculares

IDENTIFICAO DE ALTERAES CELULARES OU MUTAES

BIODOSIMETRIA
Acidente Nuclear:
- Informao sobre o dano biolgico .

Efeitos Determinsticos (> 1 Gy aguda):

- Alerta os mdicos quanto ao prognstico. - Auxilia os mdicos no planejamento da terapia.

Efeitos Estocsticos (< 1Gy):

- Avaliar o provvel risco de cncer .

BIOINDICADORES