UNIVERSIDADE METODISTA DE SO PAULO FACULDADE DA SADE CURSO DE MEDICINA VETERINRIA

ISABELLA BORTOLETO

DESENVOLVIMENTO E CLASSIFICAO DE CULTURA DE FUNGOS

SO BERNARDO DO CAMPO 2012

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ISABELA BORTOLLETO

DESENVOLVIMENTO E CLASSIFICAO DE CULTURA DE FUNGOS

Trabalho apresentado para obteno de nota no mdulo de Estudo do MIP, do curso de Medicina Veterinria, turno matutino, da Universidade Metodista de So Paulo. Orientao: Prof Ms. Leandro Ribeiro

SO BERNARDO DO CAMPO 2012

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RESUMO

Para o procedimento foi entregue a cada aluno uma placa de petris prpria para crescimento de fungos, as quais deveriam ser levadas para casa e trazer aps 7 dias. Ao retornar as placas continham uma serie de cultura de fungos, dos quais foram analisados macroscopicamente, depois feitos laminas para sua visualizao tambm microscopicamente. Com as laminas prontas avaliamos em microscpio e classificamos miclio areo e miclio vegetativo tambm conforme seu crescimento, aspecto e cor.

Palavra chave: Fungo; Classificao; Cultura; Colorao.

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Sumrio
1 INTRODUO .........................................................................................................................................5 1.1 MEIO DE CULTURA .............................................................................. Error! Bookmark not defined. 1.1 COLORAAO DE GRAM ................................................................. Error! Bookmark not defined.

2 OBJETIVO ................................................................................................. Error! Bookmark not defined. 3 MATERIAIS ..............................................................................................................................................9 4 MTODOS ..............................................................................................................................................10 7 CONCLUSO ......................................................................................................................................12

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1 INTRODUO 1.1 FUNGOS

Os fungos so membros de um grande grupo de organismos eucariotas que diferentemente das plantas e animais obtm os nutrientes de uma fonte externa. A maior parte dos fungos cresce sobre um substrato que pode ser solo, madeira, matria orgnica em decomposio, do qual absorve os nutrientes como heterotrficos, enquanto que outros so parasitas obrigatrios obtendo nutrientes provenientes dos tecidos animais e plantas. Os fungos so multinucleados, isto uma clula pode conter dois ou mais ncleos. Obtm a sua energia atravs da respirao da mesma forma que as plantas e animais superiores. A camada exterior da clula fngica uma parede composta por quitina, seguido por uma membrana celular, por baixo da qual est o citoplasma que contm todos os organelos que so encontrados numa clula animal. Os fungos unicelulares multiplicam-se por fisso binrio enquanto que os multicelulares multiplicam-se pela extenso da hifa apical. O conjunto de hifas chama-se miclio. Os Miclios libertam os seus metablitos secundrios para o ambiente atravs da membrana da celular. Os fungos apresentam uma diversidade na forma de reproduo, uns reproduzem-se exclusivamente pela forma assexual quando outros combinam a forma de reproduo assexual e sexual. No entanto outros usam hormonas na forma de reproduo sexual. Os fungos so tanto benficos como prejudiciais. Do ponto de vista ecolgico, so importantes como decompositores e recicladores de nutrientes num ecossistema. Economicamente, os fungos so fonte de alimento, como o caso dos cogumelos. So tambm usados para dar diferentes sabores ao queijo. Os fungos so tambm importantes para a indstria no fabrico de po, bolos, cerveja e na medicina como fonte de antibiticos. Nos ltimos anos, os fungos tornaram-se um objecto de estudo intenso por causa da sua aplicao biotecnolgica nos processos relacionado indstria, agricultura e ecologia. Os fungos tambm so uma preocupao, porque promovem a perda de muitos dlares atravs das perdas de culturas e animais como consequncia das doenas por eles causadas. No homem, a infeco fngica faz parte de muitas doenas crnicas.

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1.2 CLASSIFICAO

O termo micologia provm da palavra grega myke que significa cogumelo e logos que significa estudo. Consequentemente, micologia significa literalmente o estudo de cogumelos. Entretanto, o termo geralmente usado para referir-se ao estudo de um grupo de organismos chamado fungos, cujo singular fungo. Acredita-se que os fungos sejam monofilticos e que tenham derivado de uma alga que perdeu a sua habilidade fotossinttica. Entretanto, com a descoberta de tcnicas moleculares para determinar relaes entre os organismos, descobriu-se que os fungos so compostos por grupo de organismos polifilticos e que nalguns casos no existe uma relao distante entre eles. Como consequncia, os fungos no so agrupados por possurem uma relao prxima, mas sim, por possurem caractersticas comuns como se mostra abaixo. Whittaker (1969) props um sistema de cinco reinos que o actual sistema da classificao dos organismos aceite. Este, pe os fungos no seu prprio reino separado. O reino Myceteae (fungos) divide-se em Myxomycota, os fungos falsos e Eumycota, os fungos verdadeiros.

1.3 ESTRUTURA

Existem duas formas estruturais de fungos. Uma forma unicelular e a outra composta por estruturas tubulares. As estruturas tubulares so conhecidas como hifas e o conjunto delas forma o miclio. O miclio a fase vegetativa do fungo que origina as estruturas reprodutivas. Quer seja levedura ou um fungo filamentoso, os tipicamente constitudos por uma parede celular externa porosa composta por quitina, ao contrrio da parede da clula das plantas que composta por celulose. No interior da parede celular existe uma membrana celular apresentando algumas pregas para aumentar a rea para as trocas de materiais. Estas estruturas so chamadas de lomassomas. A membrana da clula envolve o citoplasma, que compe os organelos celulares tpicos de uma clula eucariota. Os organelos so: um ncleo delimitado por uma membrana, aparelho de golgi, retculo endoplasmtico e vesculas. Existem dois tipos de hifas que se podem encontrar nos diferentes grupos de fungos. As hifas dos fungos inferiores no possuem septos e nestas o ncleo encontra-se num citoplasma contnuo. As hifas dos fungos superiores possuem septo, que dividem o filamento tubular em compartimentos. Os septos possuem um poro no centro atravs do qual o protoplasma flui livremente. Cada compartimento da hifa contm um ou dois ncleos. Nos segmentos mais antigos caracterizam-se por possurem vacolos.

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1.4 NUTRIO
Os fungos so aclorofilados, o que significa que no possuem clorofila que lhes permita sintectizar o seu prprio alimento como as plantas. Os fungos dependem de outros organismos para obter o carbono, logo so heterotrficos. Heterotrficos podem ser saprbios, simbiticos ou parasitas. Como saprfitos eles obtm o carbono dos subprodutos de organismos ou de tecido de organismos em decomposio na forma de orgnico- matria. Quando forem simbiticos os fungos vivem geralmente em associao com um outro organismo numa relao benfica mtua. Este tipo de relacionamento chama-se simbiose mutualstica. Outros fungos so parasitas, estes obtm o seu alimento do protoplasma de um outro organismo chamado hospedeiro. Os fungos tm uma forma comum de nutrio, que envolve a liberao de enzimas ao substrato no ambiente. O substrato digerido pela aco da enzima e a absoro feita atravs dos poros da parede celular e pela selectividade da membrana permevel. Vrios tipos de enzimas so produzidos dependendo do tipo de fungo e da complexidade do substrato. Para a digesto de dissacardeos, por exemplo, necessrio um tipo especfico de enzima, enquanto que para a degradao do amido nos seus monmeros constituintes so necessrias duas enzimas e trs diferentes enzimas so necessrias para degradar a celulose cristalina. Este tipo de degradao que acontece fora da clula chamado de digesto extracelular. Para alm de carbono, os fungos tambm precisam obter nutrientes minerais para suplementar o seu metabolismo, assim como os organismos superiores que necessitam de nitrognio, potssio, fsforo, etc.

1.5 CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO

Os fungos unicelulares multiplicam-se por fisso binrio. Os fungos miceliares crescem por extenso apical. O compartimento apical tem uma parede celular muito fina na ponta, que permite a extenso do mesmo atravs da presso de turgor no interior do citoplasma. Aps ter alcanado o volume mximo, o compartimento apical sofre divises nucleares e citoplasmticas resultando em dois compartimentos.

1.6 REPRODUO

Nos fungos, tanto a reproduo sexual como a assexual resulta na formao de esporos, geralmente em estruturas especficas chamadas conidisporos que por sua vez possuem condios ou esporngios, que contm esporangisporos, ou vrias formas de corpos frutferos tais como asco, que carregam os ascosporos, ou um outro tipo de condeos. As formas de reproduo variam de acordo com tipo de fungo. Entretanto, a forma de reproduo assexual a mais comum nos fungos quer seja por fragmentao celular, fisso binria ou gemulao. O outro mtodo da reproduo nos fungos parassexual.

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Consulte os ciclos de vida dos fungos dos diferentes grupos taxonmicos no Web site recomendado nas leituras obrigatrias para ver os diferentes mtodos reprodutivos existentes nos fungos.

1.1.1 AZUL DE ALGODO

Azul de metila, tambm conhecido como azul algodo,

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Desenvolver culturas de bactrias em placa de petri para observao e classificao em microscpio.

3 MATERIAIS

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Placas de Petri; Suabes; Estufa 37C; BHI; Bico de bunsen/Gs; Lmina; Meio de cultivo; Microscpio; leo de imerso; Cristal de Violeta; Luzol; lcool/acetona; Fucsina.

4 MTODOS

4.1 MTODOS DE MEIOS DE CULTURA

Com alguns suabes foram coletados amostras de bactrias; Utilizando a tcnica do esfregasso foi semeado a amostra de bactrias nos gares Sange e MacConkey. Incubou-se os meios de cultivo slidos. Posteriormente observou-se as caractersticas das colnias que cresceram nos dois gares.

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4.2 MTODOS DE COLORAAO DE GRAN

Cubra o esfregao com violeta-de-metila e deixe por aproximadamente 60 segundos; Escorra o corante e lave em um filete de gua corrente; Cubra a lmina com lugol diludo (1/20) e deixe agir por aproximadamente 60 segundos; Escorra o lugol e lave em um filete de gua corrente; Adicione lcool etlico (99,5 GL) sobre a lmina; deixe agir por aproximadamente 15 segundos; Lave em um filete de gua corrente; Cubra a lmina com fucsina e deixe agir por aproximadamente 30 segundos; Lave em um filete de gua corrente; Deixe secar ao ar livre; Coloque uma gota de leo de imerso sobre o esfregao; e Leia em objetiva de imerso (100 X).

5 RESULTADOS
1 Agar: Conduto auditivo: Uma colnia de aspecto gelatinoso, transparente.

Obs.: mudou o tom da Agar sangue. Banheiro masculino: Varias Colnias no Agar sangue de aspetos

cremosos brancos e duas colnias amarelas. 2 Agar: Mesa de Raios-X: Uma colnia no Agar sangue de aspecto redondo

branco e cremoso, varias colnias agrupadas.

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3 Agar: 4 Agar: agrupadas. 5 Agar: Corrimo do HOVET: Negativo Boto do elevador: Duas colnias Sendo 1 de cor branca redonda, Ferida da cabra: Duas colnias 1 com aspecto branco transparente Mesa de preparo cirrgico: Negativo

cremoso alta. 2 com aspecto circular achatada amarelado. Bebedouro do HOVET: Varias colnias de aspecto pequeno esferas

2 de cor vermelha redonda.

7 CONCLUSO

Aps a realizao desta actividade pratica, conclumos que os objectos normais, de uso corrente possuem variados tipos de bactrias que em condies propcias se podem desenvolver e at provocar doenas. Recorre-se assim cultura, em meios apropriados, para se conseguir um elevado nmero de microorganismos, de modo que seja possvel estudar as suas caractersticas. Somente pela visualizao macroscpica no foi possvel a identificao

dosmicrorganismos encontrados, sendo necessrio fazer uma colorao especial para possvel

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identificao. Apesar dos ambientes parecerem incuos, observou-se uma grande quantidade de microrganismos

BIBLIOGRAFIA
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